RU2500686C2 - АПОПТОТИЧЕСКИЕ АНТИТЕЛА ПРОТИВ IgE - Google Patents
АПОПТОТИЧЕСКИЕ АНТИТЕЛА ПРОТИВ IgE Download PDFInfo
- Publication number
- RU2500686C2 RU2500686C2 RU2009138932/10A RU2009138932A RU2500686C2 RU 2500686 C2 RU2500686 C2 RU 2500686C2 RU 2009138932/10 A RU2009138932/10 A RU 2009138932/10A RU 2009138932 A RU2009138932 A RU 2009138932A RU 2500686 C2 RU2500686 C2 RU 2500686C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- antibody
- ige
- seq
- residues
- hvr
- Prior art date
Links
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 title claims description 15
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 200
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 150
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 148
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 148
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims abstract description 145
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 111
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 102
- 239000012634 fragment Substances 0.000 claims abstract description 75
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 59
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims abstract description 51
- 239000013566 allergen Substances 0.000 claims abstract description 50
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 42
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 claims abstract description 34
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims abstract description 29
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims abstract description 27
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims abstract description 27
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 claims abstract description 24
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims abstract description 21
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims abstract description 10
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims description 123
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 50
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 claims description 48
- -1 bronchodilator Substances 0.000 claims description 46
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 42
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 39
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 33
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 32
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims description 30
- 230000010056 antibody-dependent cellular cytotoxicity Effects 0.000 claims description 26
- 239000013598 vector Substances 0.000 claims description 22
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 claims description 20
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 19
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 claims description 16
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 claims description 15
- 102000003816 Interleukin-13 Human genes 0.000 claims description 14
- 108090000176 Interleukin-13 Proteins 0.000 claims description 14
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 claims description 12
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 claims description 12
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims description 11
- 239000003862 glucocorticoid Substances 0.000 claims description 11
- 238000002347 injection Methods 0.000 claims description 11
- 239000007924 injection Substances 0.000 claims description 11
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 claims description 11
- 241000282560 Macaca mulatta Species 0.000 claims description 10
- 208000010668 atopic eczema Diseases 0.000 claims description 10
- 230000000172 allergic effect Effects 0.000 claims description 9
- 239000000739 antihistaminic agent Substances 0.000 claims description 9
- GUGOEEXESWIERI-UHFFFAOYSA-N Terfenadine Chemical compound C1=CC(C(C)(C)C)=CC=C1C(O)CCCN1CCC(C(O)(C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC=CC=2)CC1 GUGOEEXESWIERI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 208000006673 asthma Diseases 0.000 claims description 8
- 229940124630 bronchodilator Drugs 0.000 claims description 8
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 claims description 8
- 239000000041 non-steroidal anti-inflammatory agent Substances 0.000 claims description 8
- 230000001387 anti-histamine Effects 0.000 claims description 7
- 239000002458 cell surface marker Substances 0.000 claims description 7
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 claims description 7
- 208000024780 Urticaria Diseases 0.000 claims description 6
- 229940125721 immunosuppressive agent Drugs 0.000 claims description 6
- 206010002198 Anaphylactic reaction Diseases 0.000 claims description 5
- 230000036783 anaphylactic response Effects 0.000 claims description 5
- 208000003455 anaphylaxis Diseases 0.000 claims description 5
- 208000010643 digestive system disease Diseases 0.000 claims description 5
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 5
- 208000018685 gastrointestinal system disease Diseases 0.000 claims description 5
- 206010012438 Dermatitis atopic Diseases 0.000 claims description 4
- 208000004262 Food Hypersensitivity Diseases 0.000 claims description 4
- 229940123038 Integrin antagonist Drugs 0.000 claims description 4
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 claims description 4
- 206010039085 Rhinitis allergic Diseases 0.000 claims description 4
- 201000009961 allergic asthma Diseases 0.000 claims description 4
- 201000010105 allergic rhinitis Diseases 0.000 claims description 4
- 201000008937 atopic dermatitis Diseases 0.000 claims description 4
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 4
- 239000000850 decongestant Substances 0.000 claims description 4
- 235000020932 food allergy Nutrition 0.000 claims description 4
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 claims description 4
- 206010003594 Ataxia telangiectasia Diseases 0.000 claims description 3
- 206010006474 Bronchopulmonary aspergillosis allergic Diseases 0.000 claims description 3
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 claims description 3
- 206010016946 Food allergy Diseases 0.000 claims description 3
- 201000004331 Henoch-Schoenlein purpura Diseases 0.000 claims description 3
- 206010019617 Henoch-Schonlein purpura Diseases 0.000 claims description 3
- 208000031814 IgA Vasculitis Diseases 0.000 claims description 3
- 208000006110 Wiskott-Aldrich syndrome Diseases 0.000 claims description 3
- 208000006778 allergic bronchopulmonary aspergillosis Diseases 0.000 claims description 3
- 230000000202 analgesic effect Effects 0.000 claims description 3
- 210000004978 chinese hamster ovary cell Anatomy 0.000 claims description 3
- 208000015446 immunoglobulin a vasculitis Diseases 0.000 claims description 3
- 229940071643 prefilled syringe Drugs 0.000 claims description 3
- 208000009329 Graft vs Host Disease Diseases 0.000 claims description 2
- 208000009388 Job Syndrome Diseases 0.000 claims description 2
- 206010051929 Lymphoplasia Diseases 0.000 claims description 2
- 208000024908 graft versus host disease Diseases 0.000 claims description 2
- 206010051040 hyper-IgE syndrome Diseases 0.000 claims description 2
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 claims description 2
- 230000001861 immunosuppressant effect Effects 0.000 claims description 2
- 201000010659 intrinsic asthma Diseases 0.000 claims description 2
- 201000003146 cystitis Diseases 0.000 claims 1
- 238000000586 desensitisation Methods 0.000 claims 1
- 230000003071 parasitic effect Effects 0.000 claims 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 26
- 230000008030 elimination Effects 0.000 abstract description 2
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 abstract description 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 abstract description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 abstract description 2
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 abstract description 2
- 238000001723 curing Methods 0.000 abstract 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 98
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 96
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 78
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 67
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 67
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 62
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 60
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 60
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 41
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 38
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 36
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 36
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 31
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 28
- 102000008394 Immunoglobulin Fragments Human genes 0.000 description 27
- 108010021625 Immunoglobulin Fragments Proteins 0.000 description 27
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 26
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 25
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 25
- 102000009109 Fc receptors Human genes 0.000 description 24
- 108010087819 Fc receptors Proteins 0.000 description 24
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 24
- 108091007491 NSP3 Papain-like protease domains Proteins 0.000 description 24
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 24
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 23
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 23
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 22
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 21
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 21
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 21
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 21
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 20
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 20
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 20
- 230000006870 function Effects 0.000 description 20
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 20
- 102000000588 Interleukin-2 Human genes 0.000 description 19
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 19
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 18
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 17
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 17
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 17
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 17
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 17
- 210000004180 plasmocyte Anatomy 0.000 description 17
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 17
- 210000000612 antigen-presenting cell Anatomy 0.000 description 16
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 16
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 15
- 230000004044 response Effects 0.000 description 15
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 15
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 15
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 15
- 102100022005 B-lymphocyte antigen CD20 Human genes 0.000 description 14
- 101000897405 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD20 Proteins 0.000 description 14
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 14
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 14
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 14
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 14
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 14
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 13
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 13
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 13
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 13
- 102100029193 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Human genes 0.000 description 13
- 101710181056 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 13B Proteins 0.000 description 13
- 102100036922 Tumor necrosis factor ligand superfamily member 13B Human genes 0.000 description 13
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 13
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 13
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 13
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 13
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 13
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 description 13
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 description 13
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 13
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 13
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 13
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 13
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 12
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 12
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 12
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 12
- NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N Histamine Chemical compound NCCC1=CN=CN1 NTYJJOPFIAHURM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 12
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 description 12
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 12
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 12
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 12
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 12
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 12
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 12
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 12
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 12
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 11
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 11
- 230000001363 autoimmune Effects 0.000 description 11
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 11
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 11
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 11
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 11
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 11
- NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 1-methylethyl 11-methoxy-3,7,11-trimethyl-2,4-dodecadienoate Chemical compound COC(C)(C)CCCC(C)CC=CC(C)=CC(=O)OC(C)C NFGXHKASABOEEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 10
- NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N Piperidine Chemical compound C1CCNCC1 NQRYJNQNLNOLGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 10
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 10
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 10
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 10
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 10
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 10
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 10
- 102100038080 B-cell receptor CD22 Human genes 0.000 description 9
- 101100004180 Chironomus tentans BR3 gene Proteins 0.000 description 9
- 101100425948 Homo sapiens TNFRSF13C gene Proteins 0.000 description 9
- 101000611183 Homo sapiens Tumor necrosis factor Proteins 0.000 description 9
- 108700018351 Major Histocompatibility Complex Proteins 0.000 description 9
- 102100029690 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13C Human genes 0.000 description 9
- HXCHCVDVKSCDHU-LULTVBGHSA-N calicheamicin Chemical compound C1[C@H](OC)[C@@H](NCC)CO[C@H]1O[C@H]1[C@H](O[C@@H]2C\3=C(NC(=O)OC)C(=O)C[C@](C/3=C/CSSSC)(O)C#C\C=C/C#C2)O[C@H](C)[C@@H](NO[C@@H]2O[C@H](C)[C@@H](SC(=O)C=3C(=C(OC)C(O[C@H]4[C@@H]([C@H](OC)[C@@H](O)[C@H](C)O4)O)=C(I)C=3C)OC)[C@@H](O)C2)[C@@H]1O HXCHCVDVKSCDHU-LULTVBGHSA-N 0.000 description 9
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 description 9
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 9
- 210000002443 helper t lymphocyte Anatomy 0.000 description 9
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 9
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 9
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 9
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 9
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 9
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 9
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 9
- 230000000284 resting effect Effects 0.000 description 9
- 241000829100 Macaca mulatta polyomavirus 1 Species 0.000 description 8
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 8
- 150000001299 aldehydes Chemical class 0.000 description 8
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 8
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 8
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 8
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 8
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 8
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 8
- 229930195731 calicheamicin Natural products 0.000 description 8
- 230000004540 complement-dependent cytotoxicity Effects 0.000 description 8
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 8
- 230000000269 nucleophilic effect Effects 0.000 description 8
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 8
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 8
- 230000020382 suppression by virus of host antigen processing and presentation of peptide antigen via MHC class I Effects 0.000 description 8
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 8
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 7
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 7
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 7
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 7
- 108010073807 IgG Receptors Proteins 0.000 description 7
- NKANXQFJJICGDU-QPLCGJKRSA-N Tamoxifen Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(/CC)=C(C=1C=CC(OCCN(C)C)=CC=1)/C1=CC=CC=C1 NKANXQFJJICGDU-QPLCGJKRSA-N 0.000 description 7
- 108010022394 Threonine synthase Proteins 0.000 description 7
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 7
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 7
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 7
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 7
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 7
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 7
- 102000004419 dihydrofolate reductase Human genes 0.000 description 7
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 7
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 7
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 7
- 210000003630 histaminocyte Anatomy 0.000 description 7
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 7
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 7
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 7
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 7
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 7
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 7
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 7
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 7
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 7
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 7
- VZQHRKZCAZCACO-PYJNHQTQSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-amino-5-(diaminomethylideneamino)pentanoyl]amino]propanoyl]amino]prop-2-enoylamino]-3-methylbutanoyl]amino]propanoic acid Chemical compound OC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)C(=C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N VZQHRKZCAZCACO-PYJNHQTQSA-N 0.000 description 6
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N Fluorouracil Chemical compound FC1=CNC(=O)NC1=O GHASVSINZRGABV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 6
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 6
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 6
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 6
- 101000884305 Homo sapiens B-cell receptor CD22 Proteins 0.000 description 6
- 102220475559 Radial spoke head 1 homolog_D56A_mutation Human genes 0.000 description 6
- 206010070834 Sensitisation Diseases 0.000 description 6
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 6
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 6
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 6
- 210000003651 basophil Anatomy 0.000 description 6
- 125000000151 cysteine group Chemical class N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 6
- 210000001151 cytotoxic T lymphocyte Anatomy 0.000 description 6
- 229960002949 fluorouracil Drugs 0.000 description 6
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 6
- 229960001340 histamine Drugs 0.000 description 6
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 6
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 108010044426 integrins Proteins 0.000 description 6
- 102000006495 integrins Human genes 0.000 description 6
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 6
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 6
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 6
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 6
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 6
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 6
- 238000002823 phage display Methods 0.000 description 6
- YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N phenylmethanesulfonyl fluoride Chemical compound FS(=O)(=O)CC1=CC=CC=C1 YBYRMVIVWMBXKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000008569 process Effects 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 6
- 230000008313 sensitization Effects 0.000 description 6
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 6
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 6
- 102220517543 Calcium uniporter protein, mitochondrial_S92A_mutation Human genes 0.000 description 5
- 102000007644 Colony-Stimulating Factors Human genes 0.000 description 5
- 108010071942 Colony-Stimulating Factors Proteins 0.000 description 5
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 5
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen disulfide Chemical compound SS BWGNESOTFCXPMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108010008165 Etanercept Proteins 0.000 description 5
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 5
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 5
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 5
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 5
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 5
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 5
- 101710099301 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Proteins 0.000 description 5
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 5
- 241000282553 Macaca Species 0.000 description 5
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 5
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 5
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 5
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 5
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 5
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 5
- 108010039491 Ricin Proteins 0.000 description 5
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 5
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 5
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 5
- 229940041181 antineoplastic drug Drugs 0.000 description 5
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 5
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 5
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 5
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 5
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 5
- 229940047120 colony stimulating factors Drugs 0.000 description 5
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 5
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 5
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 5
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 5
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 5
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 5
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 5
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 5
- 239000002596 immunotoxin Substances 0.000 description 5
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 5
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 5
- 229960003646 lysine Drugs 0.000 description 5
- 230000015654 memory Effects 0.000 description 5
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 5
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 5
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 5
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 5
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 5
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 5
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 5
- 238000003127 radioimmunoassay Methods 0.000 description 5
- 238000010188 recombinant method Methods 0.000 description 5
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 5
- 229960004641 rituximab Drugs 0.000 description 5
- 102220241870 rs761659830 Human genes 0.000 description 5
- 229940083542 sodium Drugs 0.000 description 5
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 5
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 5
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 5
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 5
- RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N taxol Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(C[C@@H](C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3([C@H]21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-MZXODVADSA-N 0.000 description 5
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 5
- 229910052720 vanadium Inorganic materials 0.000 description 5
- OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N vincristine Chemical compound C([N@]1C[C@@H](C[C@]2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C([C@]56[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]7(CC)C=CCN([C@H]67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)C[C@@](C1)(O)CC)CC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-XQKSVPLYSA-N 0.000 description 5
- 229960004528 vincristine Drugs 0.000 description 5
- OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N vincristine Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(OC(C)=O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C=O)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 OGWKCGZFUXNPDA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 description 4
- 102000000412 Annexin Human genes 0.000 description 4
- 108050008874 Annexin Proteins 0.000 description 4
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000012657 Atopic disease Diseases 0.000 description 4
- 206010003645 Atopy Diseases 0.000 description 4
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 4
- 108010029697 CD40 Ligand Proteins 0.000 description 4
- 102100032937 CD40 ligand Human genes 0.000 description 4
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 4
- PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N Cyclosporin A Chemical compound CC[C@@H]1NC(=O)[C@H]([C@H](O)[C@H](C)C\C=C\C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)[C@H](CC(C)C)N(C)C(=O)CN(C)C1=O PMATZTZNYRCHOR-CGLBZJNRSA-N 0.000 description 4
- 229930105110 Cyclosporin A Natural products 0.000 description 4
- 108010036949 Cyclosporine Proteins 0.000 description 4
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 4
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 4
- 108700028146 Genetic Enhancer Elements Proteins 0.000 description 4
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 4
- 108010091358 Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase Proteins 0.000 description 4
- 108010073816 IgE Receptors Proteins 0.000 description 4
- 102000009438 IgE Receptors Human genes 0.000 description 4
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 description 4
- 108010019476 Immunoglobulin Heavy Chains Proteins 0.000 description 4
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 4
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 4
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000235649 Kluyveromyces Species 0.000 description 4
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 4
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 4
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 4
- 102000008072 Lymphokines Human genes 0.000 description 4
- 108010074338 Lymphokines Proteins 0.000 description 4
- 229930126263 Maytansine Natural products 0.000 description 4
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 4
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 4
- 108090000157 Metallothionein Proteins 0.000 description 4
- ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N N-debenzoyl-N-(tert-butoxycarbonyl)-10-deacetyltaxol Chemical compound O([C@H]1[C@H]2[C@@](C([C@H](O)C3=C(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)OC(C)(C)C)C=4C=CC=CC=4)C[C@]1(O)C3(C)C)=O)(C)[C@@H](O)C[C@H]1OC[C@]12OC(=O)C)C(=O)C1=CC=CC=C1 ZDZOTLJHXYCWBA-VCVYQWHSSA-N 0.000 description 4
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 4
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 4
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 4
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 4
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 206010047115 Vasculitis Diseases 0.000 description 4
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 4
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 4
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 4
- RYYVLZVUVIJVGH-UHFFFAOYSA-N caffeine Chemical compound CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1N=CN2C RYYVLZVUVIJVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 4
- 229960004630 chlorambucil Drugs 0.000 description 4
- JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N chlorambucil Chemical compound OC(=O)CCCC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 JCKYGMPEJWAADB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229960001265 ciclosporin Drugs 0.000 description 4
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 4
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 4
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 4
- 238000010494 dissociation reaction Methods 0.000 description 4
- 230000005593 dissociations Effects 0.000 description 4
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 description 4
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 4
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 4
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 4
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 description 4
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 4
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 4
- 230000002637 immunotoxin Effects 0.000 description 4
- 229940051026 immunotoxin Drugs 0.000 description 4
- 231100000608 immunotoxin Toxicity 0.000 description 4
- 229960000598 infliximab Drugs 0.000 description 4
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 4
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 4
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 4
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 4
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 description 4
- 229960000681 leflunomide Drugs 0.000 description 4
- VHOGYURTWQBHIL-UHFFFAOYSA-N leflunomide Chemical compound O1N=CC(C(=O)NC=2C=CC(=CC=2)C(F)(F)F)=C1C VHOGYURTWQBHIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 4
- WKPWGQKGSOKKOO-RSFHAFMBSA-N maytansine Chemical compound CO[C@@H]([C@@]1(O)C[C@](OC(=O)N1)([C@H]([C@@H]1O[C@@]1(C)[C@@H](OC(=O)[C@H](C)N(C)C(C)=O)CC(=O)N1C)C)[H])\C=C\C=C(C)\CC2=CC(OC)=C(Cl)C1=C2 WKPWGQKGSOKKOO-RSFHAFMBSA-N 0.000 description 4
- 210000001806 memory b lymphocyte Anatomy 0.000 description 4
- 229960004866 mycophenolate mofetil Drugs 0.000 description 4
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 4
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 4
- XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N prednisone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 XOFYZVNMUHMLCC-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 4
- 229960004618 prednisone Drugs 0.000 description 4
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 4
- XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M propidium iodide Chemical compound [I-].[I-].C12=CC(N)=CC=C2C2=CC=C(N)C=C2[N+](CCC[N+](C)(CC)CC)=C1C1=CC=CC=C1 XJMOSONTPMZWPB-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 4
- 230000003248 secreting effect Effects 0.000 description 4
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 4
- JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M sodium periodate Chemical compound [Na+].[O-]I(=O)(=O)=O JQWHASGSAFIOCM-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 241000894007 species Species 0.000 description 4
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 4
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 4
- 150000003573 thiols Chemical class 0.000 description 4
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 4
- WYWHKKSPHMUBEB-UHFFFAOYSA-N tioguanine Chemical compound N1C(N)=NC(=S)C2=C1N=CN2 WYWHKKSPHMUBEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 4
- JXLYSJRDGCGARV-CFWMRBGOSA-N vinblastine Chemical compound C([C@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(=O)OC)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1NC1=CC=CC=C21 JXLYSJRDGCGARV-CFWMRBGOSA-N 0.000 description 4
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 7-Cyan-hept-2t-en-4,6-diinsaeure Natural products C1=2C(O)=C3C(=O)C=4C(OC)=CC=CC=4C(=O)C3=C(O)C=2CC(O)(C(C)=O)CC1OC1CC(N)C(O)C(C)O1 STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920000936 Agarose Polymers 0.000 description 3
- 102000002260 Alkaline Phosphatase Human genes 0.000 description 3
- 108020004774 Alkaline Phosphatase Proteins 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 3
- WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N Benzyl alcohol Chemical compound OCC1=CC=CC=C1 WVDDGKGOMKODPV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000017420 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Human genes 0.000 description 3
- 108050005493 CD3 protein, epsilon/gamma/delta subunit Proteins 0.000 description 3
- 101150013553 CD40 gene Proteins 0.000 description 3
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KLWPJMFMVPTNCC-UHFFFAOYSA-N Camptothecin Natural products CCC1(O)C(=O)OCC2=C1C=C3C4Nc5ccccc5C=C4CN3C2=O KLWPJMFMVPTNCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000000844 Cell Surface Receptors Human genes 0.000 description 3
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 3
- 206010009900 Colitis ulcerative Diseases 0.000 description 3
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 3
- 241000699802 Cricetulus griseus Species 0.000 description 3
- UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N Cytarabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-CCXZUQQUSA-N 0.000 description 3
- PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N Ethylenediamine Chemical compound NCCN PIICEJLVQHRZGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010018364 Glomerulonephritis Diseases 0.000 description 3
- 108010027412 Histocompatibility Antigens Class II Proteins 0.000 description 3
- 102000018713 Histocompatibility Antigens Class II Human genes 0.000 description 3
- 101000878605 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin epsilon Fc receptor Proteins 0.000 description 3
- 101000914514 Homo sapiens T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Proteins 0.000 description 3
- 101000851434 Homo sapiens Tumor necrosis factor ligand superfamily member 13B Proteins 0.000 description 3
- 102100029098 Hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransferase Human genes 0.000 description 3
- 102100026120 IgG receptor FcRn large subunit p51 Human genes 0.000 description 3
- 101710177940 IgG receptor FcRn large subunit p51 Proteins 0.000 description 3
- 108010009817 Immunoglobulin Constant Regions Proteins 0.000 description 3
- 102000009786 Immunoglobulin Constant Regions Human genes 0.000 description 3
- 102000013463 Immunoglobulin Light Chains Human genes 0.000 description 3
- 108010065825 Immunoglobulin Light Chains Proteins 0.000 description 3
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 3
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 3
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 3
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 3
- 241001138401 Kluyveromyces lactis Species 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 3
- 102100038007 Low affinity immunoglobulin epsilon Fc receptor Human genes 0.000 description 3
- 102100029204 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-a Human genes 0.000 description 3
- 102000009151 Luteinizing Hormone Human genes 0.000 description 3
- 108010073521 Luteinizing Hormone Proteins 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 3
- FQISKWAFAHGMGT-SGJOWKDISA-M Methylprednisolone sodium succinate Chemical compound [Na+].C([C@@]12C)=CC(=O)C=C1[C@@H](C)C[C@@H]1[C@@H]2[C@@H](O)C[C@]2(C)[C@@](O)(C(=O)COC(=O)CCC([O-])=O)CC[C@H]21 FQISKWAFAHGMGT-SGJOWKDISA-M 0.000 description 3
- NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N N-Hydroxysuccinimide Chemical compound ON1C(=O)CCC1=O NQTADLQHYWFPDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 3
- 241001126259 Nippostrongylus brasiliensis Species 0.000 description 3
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 3
- 229930012538 Paclitaxel Natural products 0.000 description 3
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 3
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IIDJRNMFWXDHID-UHFFFAOYSA-N Risedronic acid Chemical compound OP(=O)(O)C(P(O)(O)=O)(O)CC1=CC=CN=C1 IIDJRNMFWXDHID-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000018199 S phase Effects 0.000 description 3
- 241000607720 Serratia Species 0.000 description 3
- 208000021386 Sjogren Syndrome Diseases 0.000 description 3
- 102100027213 T-cell-specific surface glycoprotein CD28 Human genes 0.000 description 3
- 101150006914 TRP1 gene Proteins 0.000 description 3
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 3
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 3
- 102100040245 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 5 Human genes 0.000 description 3
- 206010067584 Type 1 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 3
- 201000006704 Ulcerative Colitis Diseases 0.000 description 3
- 241000251539 Vertebrata <Metazoa> Species 0.000 description 3
- JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N Vinblastine Natural products O=C(O[C@H]1[C@](O)(C(=O)OC)[C@@H]2N(C)c3c(cc(c(OC)c3)[C@]3(C(=O)OC)c4[nH]c5c(c4CCN4C[C@](O)(CC)C[C@H](C3)C4)cccc5)[C@@]32[C@H]2[C@@]1(CC)C=CCN2CC3)C JXLYSJRDGCGARV-WWYNWVTFSA-N 0.000 description 3
- VWQVUPCCIRVNHF-OUBTZVSYSA-N Yttrium-90 Chemical compound [90Y] VWQVUPCCIRVNHF-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 3
- 229940049595 antibody-drug conjugate Drugs 0.000 description 3
- 229960002170 azathioprine Drugs 0.000 description 3
- LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N azathioprine Chemical compound CN1C=NC([N+]([O-])=O)=C1SC1=NC=NC2=C1NC=N2 LMEKQMALGUDUQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 3
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid group Chemical group C(C1=CC=CC=C1)(=O)O WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 3
- 238000009395 breeding Methods 0.000 description 3
- 230000001488 breeding effect Effects 0.000 description 3
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 3
- 229960005069 calcium Drugs 0.000 description 3
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 3
- 229940127093 camptothecin Drugs 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical group 0.000 description 3
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 3
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 3
- RZEKVGVHFLEQIL-UHFFFAOYSA-N celecoxib Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1C1=CC(C(F)(F)F)=NN1C1=CC=C(S(N)(=O)=O)C=C1 RZEKVGVHFLEQIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 3
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 3
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 3
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 3
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 3
- STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N daunorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(C)=O)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N 0.000 description 3
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 3
- CYQFCXCEBYINGO-IAGOWNOFSA-N delta1-THC Chemical compound C1=C(C)CC[C@H]2C(C)(C)OC3=CC(CCCCC)=CC(O)=C3[C@@H]21 CYQFCXCEBYINGO-IAGOWNOFSA-N 0.000 description 3
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 229960003957 dexamethasone Drugs 0.000 description 3
- UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N dexamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-CXSFZGCWSA-N 0.000 description 3
- HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N diethylamine Chemical compound CCNCC HPNMFZURTQLUMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 3
- VSJKWCGYPAHWDS-UHFFFAOYSA-N dl-camptothecin Natural products C1=CC=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)C5(O)CC)C4=NC2=C1 VSJKWCGYPAHWDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000003162 effector t lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 3
- 229960000403 etanercept Drugs 0.000 description 3
- 238000013401 experimental design Methods 0.000 description 3
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 3
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 3
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 3
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 3
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 3
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 3
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 3
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 3
- 229940093915 gynecological organic acid Drugs 0.000 description 3
- 102000050326 human TNFSF13B Human genes 0.000 description 3
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 3
- 230000009610 hypersensitivity Effects 0.000 description 3
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 3
- 230000016784 immunoglobulin production Effects 0.000 description 3
- 230000008676 import Effects 0.000 description 3
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 3
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 3
- GURKHSYORGJETM-WAQYZQTGSA-N irinotecan hydrochloride (anhydrous) Chemical compound Cl.C1=C2C(CC)=C3CN(C(C4=C([C@@](C(=O)OC4)(O)CC)C=4)=O)C=4C3=NC2=CC=C1OC(=O)N(CC1)CCC1N1CCCCC1 GURKHSYORGJETM-WAQYZQTGSA-N 0.000 description 3
- 238000006317 isomerization reaction Methods 0.000 description 3
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 3
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 3
- RGLRXNKKBLIBQS-XNHQSDQCSA-N leuprolide acetate Chemical compound CC(O)=O.CCNC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 RGLRXNKKBLIBQS-XNHQSDQCSA-N 0.000 description 3
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 3
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 description 3
- 229940040129 luteinizing hormone Drugs 0.000 description 3
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 3
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 3
- 210000003519 mature b lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N mercaptopurine Chemical compound S=C1NC=NC2=C1NC=N2 GLVAUDGFNGKCSF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 3
- 239000003226 mitogen Substances 0.000 description 3
- KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N mitoxantrone Chemical compound O=C1C2=C(O)C=CC(O)=C2C(=O)C2=C1C(NCCNCCO)=CC=C2NCCNCCO KKZJGLLVHKMTCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 3
- 201000006417 multiple sclerosis Diseases 0.000 description 3
- RTGDFNSFWBGLEC-SYZQJQIISA-N mycophenolate mofetil Chemical compound COC1=C(C)C=2COC(=O)C=2C(O)=C1C\C=C(/C)CCC(=O)OCCN1CCOCC1 RTGDFNSFWBGLEC-SYZQJQIISA-N 0.000 description 3
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 3
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 3
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 3
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 3
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 3
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 3
- 229940043515 other immunoglobulins in atc Drugs 0.000 description 3
- 229960001592 paclitaxel Drugs 0.000 description 3
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 3
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 3
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 3
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 3
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 3
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 3
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 3
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 3
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 3
- 238000003259 recombinant expression Methods 0.000 description 3
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 3
- 239000000779 smoke Substances 0.000 description 3
- 229940037128 systemic glucocorticoids Drugs 0.000 description 3
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 description 3
- 229960001603 tamoxifen Drugs 0.000 description 3
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 3
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 3
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 3
- CNHYKKNIIGEXAY-UHFFFAOYSA-N thiolan-2-imine Chemical compound N=C1CCCS1 CNHYKKNIIGEXAY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 208000035408 type 1 diabetes mellitus 1 Diseases 0.000 description 3
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 3
- 229960003048 vinblastine Drugs 0.000 description 3
- 229960004355 vindesine Drugs 0.000 description 3
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XRASPMIURGNCCH-UHFFFAOYSA-N zoledronic acid Chemical compound OP(=O)(O)C(P(O)(O)=O)(O)CN1C=CN=C1 XRASPMIURGNCCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 2
- GFUITADOEPNRML-SJORKVTESA-N (2r,3r)-3-(cyclopentylmethyl)-n-hydroxy-4-oxo-4-piperidin-1-yl-2-[(3,4,4-trimethyl-2,5-dioxoimidazolidin-1-yl)methyl]butanamide Chemical compound O=C1C(C)(C)N(C)C(=O)N1C[C@H](C(=O)NO)[C@H](C(=O)N1CCCCC1)CC1CCCC1 GFUITADOEPNRML-SJORKVTESA-N 0.000 description 2
- FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N (E)-dacarbazine Chemical compound CN(C)\N=N\c1[nH]cnc1C(N)=O FDKXTQMXEQVLRF-ZHACJKMWSA-N 0.000 description 2
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 2
- VILFTWLXLYIEMV-UHFFFAOYSA-N 1,5-difluoro-2,4-dinitrobenzene Chemical compound [O-][N+](=O)C1=CC([N+]([O-])=O)=C(F)C=C1F VILFTWLXLYIEMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UUUHXMGGBIUAPW-UHFFFAOYSA-N 1-[1-[2-[[5-amino-2-[[1-[5-(diaminomethylideneamino)-2-[[1-[3-(1h-indol-3-yl)-2-[(5-oxopyrrolidine-2-carbonyl)amino]propanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]pentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]pyrrolidine-2-carbon Chemical compound C1CCC(C(=O)N2C(CCC2)C(O)=O)N1C(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C1CCCN1C(=O)C(CCCN=C(N)N)NC(=O)C1CCCN1C(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)C1CCC(=O)N1 UUUHXMGGBIUAPW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GZCWLCBFPRFLKL-UHFFFAOYSA-N 1-prop-2-ynoxypropan-2-ol Chemical compound CC(O)COCC#C GZCWLCBFPRFLKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DGHHQBMTXTWTJV-BQAIUKQQSA-N 119413-54-6 Chemical class Cl.C1=C(O)C(CN(C)C)=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)[C@]5(O)CC)C4=NC2=C1 DGHHQBMTXTWTJV-BQAIUKQQSA-N 0.000 description 2
- YBBNVCVOACOHIG-UHFFFAOYSA-N 2,2-diamino-1,4-bis(4-azidophenyl)-3-butylbutane-1,4-dione Chemical compound C=1C=C(N=[N+]=[N-])C=CC=1C(=O)C(N)(N)C(CCCC)C(=O)C1=CC=C(N=[N+]=[N-])C=C1 YBBNVCVOACOHIG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HVAUUPRFYPCOCA-AREMUKBSSA-N 2-O-acetyl-1-O-hexadecyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCOC[C@@H](OC(C)=O)COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C HVAUUPRFYPCOCA-AREMUKBSSA-N 0.000 description 2
- FZDFGHZZPBUTGP-UHFFFAOYSA-N 2-[[2-[bis(carboxymethyl)amino]-3-(4-isothiocyanatophenyl)propyl]-[2-[bis(carboxymethyl)amino]propyl]amino]acetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)C(C)CN(CC(O)=O)CC(N(CC(O)=O)CC(O)=O)CC1=CC=C(N=C=S)C=C1 FZDFGHZZPBUTGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BGFTWECWAICPDG-UHFFFAOYSA-N 2-[bis(4-chlorophenyl)methyl]-4-n-[3-[bis(4-chlorophenyl)methyl]-4-(dimethylamino)phenyl]-1-n,1-n-dimethylbenzene-1,4-diamine Chemical compound C1=C(C(C=2C=CC(Cl)=CC=2)C=2C=CC(Cl)=CC=2)C(N(C)C)=CC=C1NC(C=1)=CC=C(N(C)C)C=1C(C=1C=CC(Cl)=CC=1)C1=CC=C(Cl)C=C1 BGFTWECWAICPDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NDMPLJNOPCLANR-UHFFFAOYSA-N 3,4-dihydroxy-15-(4-hydroxy-18-methoxycarbonyl-5,18-seco-ibogamin-18-yl)-16-methoxy-1-methyl-6,7-didehydro-aspidospermidine-3-carboxylic acid methyl ester Natural products C1C(CC)(O)CC(CC2(C(=O)OC)C=3C(=CC4=C(C56C(C(C(O)C7(CC)C=CCN(C67)CC5)(O)C(=O)OC)N4C)C=3)OC)CN1CCC1=C2NC2=CC=CC=C12 NDMPLJNOPCLANR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VPFUWHKTPYPNGT-UHFFFAOYSA-N 3-(3,4-dihydroxyphenyl)-1-(5-hydroxy-2,2-dimethylchromen-6-yl)propan-1-one Chemical compound OC1=C2C=CC(C)(C)OC2=CC=C1C(=O)CCC1=CC=C(O)C(O)=C1 VPFUWHKTPYPNGT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 3-(dimethylamino)propyliminomethylidene-ethylazanium;chloride Chemical compound Cl.CCN=C=NCCCN(C)C FPQQSJJWHUJYPU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AOJJSUZBOXZQNB-VTZDEGQISA-N 4'-epidoxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-VTZDEGQISA-N 0.000 description 2
- TVZGACDUOSZQKY-LBPRGKRZSA-N 4-aminofolic acid Chemical compound C1=NC2=NC(N)=NC(N)=C2N=C1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 TVZGACDUOSZQKY-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 2
- GANZODCWZFAEGN-UHFFFAOYSA-N 5-mercapto-2-nitro-benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC(S)=CC=C1[N+]([O-])=O GANZODCWZFAEGN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PVXPPJIGRGXGCY-TZLCEDOOSA-N 6-O-alpha-D-glucopyranosyl-D-fructofuranose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)C(O)(CO)O1 PVXPPJIGRGXGCY-TZLCEDOOSA-N 0.000 description 2
- VVIAGPKUTFNRDU-UHFFFAOYSA-N 6S-folinic acid Natural products C1NC=2NC(N)=NC(=O)C=2N(C=O)C1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 VVIAGPKUTFNRDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N Acetaminophen Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(O)C=C1 RZVAJINKPMORJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000013563 Acid Phosphatase Human genes 0.000 description 2
- 108010051457 Acid Phosphatase Proteins 0.000 description 2
- 208000026872 Addison Disease Diseases 0.000 description 2
- OGSPWJRAVKPPFI-UHFFFAOYSA-N Alendronic Acid Chemical compound NCCCC(O)(P(O)(O)=O)P(O)(O)=O OGSPWJRAVKPPFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 2
- 101710154825 Aminoglycoside 3'-phosphotransferase Proteins 0.000 description 2
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 2
- 208000028185 Angioedema Diseases 0.000 description 2
- 108090000672 Annexin A5 Proteins 0.000 description 2
- 102000004121 Annexin A5 Human genes 0.000 description 2
- 208000002267 Anti-neutrophil cytoplasmic antibody-associated vasculitis Diseases 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- BFYIZQONLCFLEV-DAELLWKTSA-N Aromasine Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CC(=C)C2=C1 BFYIZQONLCFLEV-DAELLWKTSA-N 0.000 description 2
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 2
- 102000019260 B-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010012919 B-Cell Antigen Receptors Proteins 0.000 description 2
- 108010008014 B-Cell Maturation Antigen Proteins 0.000 description 2
- 102000006942 B-Cell Maturation Antigen Human genes 0.000 description 2
- 230000003844 B-cell-activation Effects 0.000 description 2
- 102100024222 B-lymphocyte antigen CD19 Human genes 0.000 description 2
- 241000194108 Bacillus licheniformis Species 0.000 description 2
- 208000009137 Behcet syndrome Diseases 0.000 description 2
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N Betaine Natural products C[N+](C)(C)CC([O-])=O KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010006654 Bleomycin Proteins 0.000 description 2
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 2
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 2
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 2
- COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N Busulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCCCOS(C)(=O)=O COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000001433 C-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 2
- 241000222122 Candida albicans Species 0.000 description 2
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 2
- GAGWJHPBXLXJQN-UORFTKCHSA-N Capecitabine Chemical compound C1=C(F)C(NC(=O)OCCCCC)=NC(=O)N1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O1 GAGWJHPBXLXJQN-UORFTKCHSA-N 0.000 description 2
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N Carmustine Chemical compound ClCCNC(=O)N(N=O)CCCl DLGOEMSEDOSKAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000005600 Cathepsins Human genes 0.000 description 2
- 108010084457 Cathepsins Proteins 0.000 description 2
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 102100032768 Complement receptor type 2 Human genes 0.000 description 2
- 208000011231 Crohn disease Diseases 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 2
- WEAHRLBPCANXCN-UHFFFAOYSA-N Daunomycin Natural products CCC1(O)CC(OC2CC(N)C(O)C(C)O2)c3cc4C(=O)c5c(OC)cccc5C(=O)c4c(O)c3C1 WEAHRLBPCANXCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000007260 Deoxyribonuclease I Human genes 0.000 description 2
- 108010008532 Deoxyribonuclease I Proteins 0.000 description 2
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 2
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 2
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 2
- 206010012442 Dermatitis contact Diseases 0.000 description 2
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 2
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 2
- XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N Dicyclohexylamine Chemical compound C1CCCCC1NC1CCCCC1 XBPCUCUWBYBCDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108090000204 Dipeptidase 1 Proteins 0.000 description 2
- 108010053187 Diphtheria Toxin Proteins 0.000 description 2
- 102000016607 Diphtheria Toxin Human genes 0.000 description 2
- 241000255925 Diptera Species 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000001301 EGF receptor Human genes 0.000 description 2
- 108060006698 EGF receptor Proteins 0.000 description 2
- HTIJFSOGRVMCQR-UHFFFAOYSA-N Epirubicin Natural products COc1cccc2C(=O)c3c(O)c4CC(O)(CC(OC5CC(N)C(=O)C(C)O5)c4c(O)c3C(=O)c12)C(=O)CO HTIJFSOGRVMCQR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000003951 Erythropoietin Human genes 0.000 description 2
- 108090000394 Erythropoietin Proteins 0.000 description 2
- 241000206602 Eukaryota Species 0.000 description 2
- 108010021468 Fc gamma receptor IIA Proteins 0.000 description 2
- 108010021472 Fc gamma receptor IIB Proteins 0.000 description 2
- PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N Fluorine Chemical compound FF PXGOKWXKJXAPGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000012673 Follicle Stimulating Hormone Human genes 0.000 description 2
- 108010079345 Follicle Stimulating Hormone Proteins 0.000 description 2
- VWUXBMIQPBEWFH-WCCTWKNTSA-N Fulvestrant Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3[C@H](CCCCCCCCCS(=O)CCCC(F)(F)C(F)(F)F)CC2=C1 VWUXBMIQPBEWFH-WCCTWKNTSA-N 0.000 description 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 2
- 206010072579 Granulomatosis with polyangiitis Diseases 0.000 description 2
- 208000003807 Graves Disease Diseases 0.000 description 2
- 208000015023 Graves' disease Diseases 0.000 description 2
- 102100026122 High affinity immunoglobulin gamma Fc receptor I Human genes 0.000 description 2
- 101000980825 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD19 Proteins 0.000 description 2
- 101000913074 Homo sapiens High affinity immunoglobulin gamma Fc receptor I Proteins 0.000 description 2
- 101000840258 Homo sapiens Immunoglobulin J chain Proteins 0.000 description 2
- 101000917826 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-a Proteins 0.000 description 2
- 101000917824 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-b Proteins 0.000 description 2
- 101000795167 Homo sapiens Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13B Proteins 0.000 description 2
- 108010000521 Human Growth Hormone Proteins 0.000 description 2
- 102000002265 Human Growth Hormone Human genes 0.000 description 2
- 239000000854 Human Growth Hormone Substances 0.000 description 2
- OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N Hydrazine Chemical compound NN OAKJQQAXSVQMHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N Ibuprofen Chemical compound CC(C)CC1=CC=C(C(C)C(O)=O)C=C1 HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 2
- 102100029571 Immunoglobulin J chain Human genes 0.000 description 2
- 102000012745 Immunoglobulin Subunits Human genes 0.000 description 2
- 108010079585 Immunoglobulin Subunits Proteins 0.000 description 2
- 208000022559 Inflammatory bowel disease Diseases 0.000 description 2
- 102000006992 Interferon-alpha Human genes 0.000 description 2
- 108010047761 Interferon-alpha Proteins 0.000 description 2
- 102000003996 Interferon-beta Human genes 0.000 description 2
- 108090000467 Interferon-beta Proteins 0.000 description 2
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 2
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 2
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 2
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 2
- 102000015696 Interleukins Human genes 0.000 description 2
- 108010063738 Interleukins Proteins 0.000 description 2
- LPHGQDQBBGAPDZ-UHFFFAOYSA-N Isocaffeine Natural products CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1N(C)C=N2 LPHGQDQBBGAPDZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UETNIIAIRMUTSM-UHFFFAOYSA-N Jacareubin Natural products CC1(C)OC2=CC3Oc4c(O)c(O)ccc4C(=O)C3C(=C2C=C1)O UETNIIAIRMUTSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100020880 Kit ligand Human genes 0.000 description 2
- 244000285963 Kluyveromyces fragilis Species 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 2
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 2
- 239000005517 L01XE01 - Imatinib Substances 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010000817 Leuprolide Proteins 0.000 description 2
- 102100029205 Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor II-b Human genes 0.000 description 2
- 102000004083 Lymphotoxin-alpha Human genes 0.000 description 2
- 108090000542 Lymphotoxin-alpha Proteins 0.000 description 2
- 230000027311 M phase Effects 0.000 description 2
- FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N Magnesium Chemical compound [Mg] FYYHWMGAXLPEAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- NBGXQZRRLOGAJF-UHFFFAOYSA-N Maltulose Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)(CO)OCC1O NBGXQZRRLOGAJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 2
- ZRVUJXDFFKFLMG-UHFFFAOYSA-N Meloxicam Chemical compound OC=1C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)N(C)C=1C(=O)NC1=NC=C(C)S1 ZRVUJXDFFKFLMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000003792 Metallothionein Human genes 0.000 description 2
- BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N Methylamine Chemical compound NC BAVYZALUXZFZLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010027910 Mononeuritis Diseases 0.000 description 2
- YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N Morpholine Chemical compound C1COCCN1 YNAVUWVOSKDBBP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010028116 Mucosal inflammation Diseases 0.000 description 2
- 201000010927 Mucositis Diseases 0.000 description 2
- KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-O N,N,N-trimethylglycinium Chemical compound C[N+](C)(C)CC(O)=O KWIUHFFTVRNATP-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 2
- MBBZMMPHUWSWHV-BDVNFPICSA-N N-methylglucamine Chemical compound CNC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBBZMMPHUWSWHV-BDVNFPICSA-N 0.000 description 2
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 2
- 108020005187 Oligonucleotide Probes Proteins 0.000 description 2
- 241001631646 Papillomaviridae Species 0.000 description 2
- 208000030852 Parasitic disease Diseases 0.000 description 2
- 206010034277 Pemphigoid Diseases 0.000 description 2
- 241000721454 Pemphigus Species 0.000 description 2
- 102000004270 Peptidyl-Dipeptidase A Human genes 0.000 description 2
- 108090000882 Peptidyl-Dipeptidase A Proteins 0.000 description 2
- 208000031845 Pernicious anaemia Diseases 0.000 description 2
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Natural products OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010003541 Platelet Activating Factor Proteins 0.000 description 2
- 241001505332 Polyomavirus sp. Species 0.000 description 2
- 229920001213 Polysorbate 20 Polymers 0.000 description 2
- ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N Propane Chemical compound CCC ATUOYWHBWRKTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004005 Prostaglandin-endoperoxide synthases Human genes 0.000 description 2
- 108090000459 Prostaglandin-endoperoxide synthases Proteins 0.000 description 2
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 2
- 201000001263 Psoriatic Arthritis Diseases 0.000 description 2
- 208000036824 Psoriatic arthropathy Diseases 0.000 description 2
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 2
- 108020005091 Replication Origin Proteins 0.000 description 2
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 2
- 108010029157 Sialic Acid Binding Ig-like Lectin 2 Proteins 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000256251 Spodoptera frugiperda Species 0.000 description 2
- 108010039445 Stem Cell Factor Proteins 0.000 description 2
- RAHZWNYVWXNFOC-UHFFFAOYSA-N Sulphur dioxide Chemical compound O=S=O RAHZWNYVWXNFOC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000024932 T cell mediated immunity Effects 0.000 description 2
- CYQFCXCEBYINGO-UHFFFAOYSA-N THC Natural products C1=C(C)CCC2C(C)(C)OC3=CC(CCCCC)=CC(O)=C3C21 CYQFCXCEBYINGO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QJJXYPPXXYFBGM-LFZNUXCKSA-N Tacrolimus Chemical compound C1C[C@@H](O)[C@H](OC)C[C@@H]1\C=C(/C)[C@@H]1[C@H](C)[C@@H](O)CC(=O)[C@H](CC=C)/C=C(C)/C[C@H](C)C[C@H](OC)[C@H]([C@H](C[C@H]2C)OC)O[C@@]2(O)C(=O)C(=O)N2CCCC[C@H]2C(=O)O1 QJJXYPPXXYFBGM-LFZNUXCKSA-N 0.000 description 2
- 229940123237 Taxane Drugs 0.000 description 2
- 241001116498 Taxus baccata Species 0.000 description 2
- FOCVUCIESVLUNU-UHFFFAOYSA-N Thiotepa Chemical compound C1CN1P(N1CC1)(=S)N1CC1 FOCVUCIESVLUNU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 2
- 108010000499 Thromboplastin Proteins 0.000 description 2
- 102000006601 Thymidine Kinase Human genes 0.000 description 2
- 108020004440 Thymidine kinase Proteins 0.000 description 2
- 102000011923 Thyrotropin Human genes 0.000 description 2
- 108010061174 Thyrotropin Proteins 0.000 description 2
- DKJJVAGXPKPDRL-UHFFFAOYSA-N Tiludronic acid Chemical compound OP(O)(=O)C(P(O)(O)=O)SC1=CC=C(Cl)C=C1 DKJJVAGXPKPDRL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100030859 Tissue factor Human genes 0.000 description 2
- 101710183280 Topoisomerase Proteins 0.000 description 2
- 108010009583 Transforming Growth Factors Proteins 0.000 description 2
- 102000009618 Transforming Growth Factors Human genes 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 2
- 102100029675 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 13B Human genes 0.000 description 2
- ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N Uracil Chemical compound O=C1C=CNC(=O)N1 ISAKRJDGNUQOIC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010046851 Uveitis Diseases 0.000 description 2
- 229940122803 Vinca alkaloid Drugs 0.000 description 2
- IXKSXJFAGXLQOQ-XISFHERQSA-N WHWLQLKPGQPMY Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N1CCC[C@H]1C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(O)=O)NC(=O)[C@@H](N)CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C1=CNC=N1 IXKSXJFAGXLQOQ-XISFHERQSA-N 0.000 description 2
- 229960002964 adalimumab Drugs 0.000 description 2
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 2
- UCTWMZQNUQWSLP-UHFFFAOYSA-N adrenaline Chemical compound CNCC(O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 UCTWMZQNUQWSLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000000464 adrenergic agent Substances 0.000 description 2
- 229940009456 adriamycin Drugs 0.000 description 2
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 2
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 2
- 229940100198 alkylating agent Drugs 0.000 description 2
- 239000002168 alkylating agent Substances 0.000 description 2
- 208000030961 allergic reaction Diseases 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 2
- 230000009435 amidation Effects 0.000 description 2
- 238000007112 amidation reaction Methods 0.000 description 2
- ROBVIMPUHSLWNV-UHFFFAOYSA-N aminoglutethimide Chemical compound C=1C=C(N)C=CC=1C1(CC)CCC(=O)NC1=O ROBVIMPUHSLWNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003437 aminoglutethimide Drugs 0.000 description 2
- 229960003896 aminopterin Drugs 0.000 description 2
- YBBLVLTVTVSKRW-UHFFFAOYSA-N anastrozole Chemical compound N#CC(C)(C)C1=CC(C(C)(C#N)C)=CC(CN2N=CN=C2)=C1 YBBLVLTVTVSKRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940046836 anti-estrogen Drugs 0.000 description 2
- 230000001833 anti-estrogenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000030741 antigen processing and presentation Effects 0.000 description 2
- 229940125715 antihistaminic agent Drugs 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003121 arginine Drugs 0.000 description 2
- 235000009697 arginine Nutrition 0.000 description 2
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 2
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 2
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 2
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 2
- 239000008228 bacteriostatic water for injection Substances 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000006635 beta-lactamase Human genes 0.000 description 2
- QZPQTZZNNJUOLS-UHFFFAOYSA-N beta-lapachone Chemical compound C12=CC=CC=C2C(=O)C(=O)C2=C1OC(C)(C)CC2 QZPQTZZNNJUOLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003237 betaine Drugs 0.000 description 2
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 2
- 229960001561 bleomycin Drugs 0.000 description 2
- OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O bleomycin A2 Chemical compound N([C@H](C(=O)N[C@H](C)[C@@H](O)[C@H](C)C(=O)N[C@@H]([C@H](O)C)C(=O)NCCC=1SC=C(N=1)C=1SC=C(N=1)C(=O)NCCC[S+](C)C)[C@@H](O[C@H]1[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O1)O[C@@H]1[C@H]([C@@H](OC(N)=O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)O)C=1N=CNC=1)C(=O)C1=NC([C@H](CC(N)=O)NC[C@H](N)C(N)=O)=NC(N)=C1C OYVAGSVQBOHSSS-UAPAGMARSA-O 0.000 description 2
- 108010006025 bovine growth hormone Proteins 0.000 description 2
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 description 2
- 229960001948 caffeine Drugs 0.000 description 2
- VJEONQKOZGKCAK-UHFFFAOYSA-N caffeine Natural products CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1C=CN2C VJEONQKOZGKCAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VSJKWCGYPAHWDS-FQEVSTJZSA-N camptothecin Chemical compound C1=CC=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)[C@]5(O)CC)C4=NC2=C1 VSJKWCGYPAHWDS-FQEVSTJZSA-N 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- YCIMNLLNPGFGHC-UHFFFAOYSA-N catechol Chemical compound OC1=CC=CC=C1O YCIMNLLNPGFGHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000001311 chemical methods and process Methods 0.000 description 2
- 239000005482 chemotactic factor Substances 0.000 description 2
- WHTVZRBIWZFKQO-UHFFFAOYSA-N chloroquine Chemical compound ClC1=CC=C2C(NC(C)CCCN(CC)CC)=CC=NC2=C1 WHTVZRBIWZFKQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical compound C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001231 choline Drugs 0.000 description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 2
- 208000025302 chronic primary adrenal insufficiency Diseases 0.000 description 2
- 235000019504 cigarettes Nutrition 0.000 description 2
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 2
- ACSIXWWBWUQEHA-UHFFFAOYSA-N clodronic acid Chemical compound OP(O)(=O)C(Cl)(Cl)P(O)(O)=O ACSIXWWBWUQEHA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010009887 colitis Diseases 0.000 description 2
- 238000002648 combination therapy Methods 0.000 description 2
- 230000024203 complement activation Effects 0.000 description 2
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 2
- 238000004590 computer program Methods 0.000 description 2
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 2
- 208000010247 contact dermatitis Diseases 0.000 description 2
- 239000003246 corticosteroid Substances 0.000 description 2
- 230000004940 costimulation Effects 0.000 description 2
- COFJBSXICYYSKG-OAUVCNBTSA-N cph2u7dndy Chemical compound OS(O)(=O)=O.C([C@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(N)=O)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1NC1=CC=CC=C21 COFJBSXICYYSKG-OAUVCNBTSA-N 0.000 description 2
- PSNOPSMXOBPNNV-VVCTWANISA-N cryptophycin 1 Chemical compound C1=C(Cl)C(OC)=CC=C1C[C@@H]1C(=O)NC[C@@H](C)C(=O)O[C@@H](CC(C)C)C(=O)O[C@H]([C@H](C)[C@@H]2[C@H](O2)C=2C=CC=CC=2)C/C=C/C(=O)N1 PSNOPSMXOBPNNV-VVCTWANISA-N 0.000 description 2
- PSNOPSMXOBPNNV-UHFFFAOYSA-N cryptophycin-327 Natural products C1=C(Cl)C(OC)=CC=C1CC1C(=O)NCC(C)C(=O)OC(CC(C)C)C(=O)OC(C(C)C2C(O2)C=2C=CC=CC=2)CC=CC(=O)N1 PSNOPSMXOBPNNV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- PLBFUQVAZLRSRG-UHFFFAOYSA-N cyanic acid;toluene Chemical compound OC#N.CC1=CC=CC=C1 PLBFUQVAZLRSRG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 2
- 229930182912 cyclosporin Natural products 0.000 description 2
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 2
- OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N cytosine Chemical compound NC=1C=CNC(=O)N=1 OPTASPLRGRRNAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002619 cytotoxin Substances 0.000 description 2
- 229960003901 dacarbazine Drugs 0.000 description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 2
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 2
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 2
- 229960001259 diclofenac Drugs 0.000 description 2
- DCOPUUMXTXDBNB-UHFFFAOYSA-N diclofenac Chemical compound OC(=O)CC1=CC=CC=C1NC1=C(Cl)C=CC=C1Cl DCOPUUMXTXDBNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000005442 diisocyanate group Chemical group 0.000 description 2
- 238000006471 dimerization reaction Methods 0.000 description 2
- 150000002016 disaccharides Chemical class 0.000 description 2
- ZWIBGKZDAWNIFC-UHFFFAOYSA-N disuccinimidyl suberate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCCCCC(=O)ON1C(=O)CCC1=O ZWIBGKZDAWNIFC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000002228 disulfide group Chemical group 0.000 description 2
- 150000002019 disulfides Chemical class 0.000 description 2
- 150000004662 dithiols Chemical class 0.000 description 2
- VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N dithiothreitol Chemical compound SC[C@@H](O)[C@H](O)CS VHJLVAABSRFDPM-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 2
- 229960003668 docetaxel Drugs 0.000 description 2
- 238000012377 drug delivery Methods 0.000 description 2
- VLCYCQAOQCDTCN-UHFFFAOYSA-N eflornithine Chemical compound NCCCC(N)(C(F)F)C(O)=O VLCYCQAOQCDTCN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940073621 enbrel Drugs 0.000 description 2
- 210000003979 eosinophil Anatomy 0.000 description 2
- 229960001904 epirubicin Drugs 0.000 description 2
- 229940105423 erythropoietin Drugs 0.000 description 2
- 239000000328 estrogen antagonist Substances 0.000 description 2
- VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N etoposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@H](C)OC[C@H]4O3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 VJJPUSNTGOMMGY-MRVIYFEKSA-N 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 2
- 229960000676 flunisolide Drugs 0.000 description 2
- 150000002222 fluorine compounds Chemical class 0.000 description 2
- OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N folic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 2
- VVIAGPKUTFNRDU-ABLWVSNPSA-N folinic acid Chemical compound C1NC=2NC(N)=NC(=O)C=2N(C=O)C1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 VVIAGPKUTFNRDU-ABLWVSNPSA-N 0.000 description 2
- 235000008191 folinic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000011672 folinic acid Substances 0.000 description 2
- 229940028334 follicle stimulating hormone Drugs 0.000 description 2
- CHPZKNULDCNCBW-UHFFFAOYSA-N gallium nitrate Chemical compound [Ga+3].[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O CHPZKNULDCNCBW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 2
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 2
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 2
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 2
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 2
- QTQAWLPCGQOSGP-GBTDJJJQSA-N geldanamycin Chemical class N1C(=O)\C(C)=C/C=C\[C@@H](OC)[C@H](OC(N)=O)\C(C)=C/[C@@H](C)[C@@H](O)[C@H](OC)C[C@@H](C)CC2=C(OC)C(=O)C=C1C2=O QTQAWLPCGQOSGP-GBTDJJJQSA-N 0.000 description 2
- 229960005150 glycerol Drugs 0.000 description 2
- 229960002449 glycine Drugs 0.000 description 2
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 description 2
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 2
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 2
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 108010037896 heparin-binding hemagglutinin Proteins 0.000 description 2
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 2
- 229940048921 humira Drugs 0.000 description 2
- JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N hydrocortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 2
- NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N hydroxybenzotriazole Substances O=C1C=CC=C2NNN=C12 NPZTUJOABDZTLV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N hypoxanthine Chemical compound O=C1NC=NC2=C1NC=N2 FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001680 ibuprofen Drugs 0.000 description 2
- HOMGKSMUEGBAAB-UHFFFAOYSA-N ifosfamide Chemical compound ClCCNP1(=O)OCCCN1CCCl HOMGKSMUEGBAAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001101 ifosfamide Drugs 0.000 description 2
- KTUFNOKKBVMGRW-UHFFFAOYSA-N imatinib Chemical compound C1CN(C)CCN1CC1=CC=C(C(=O)NC=2C=C(NC=3N=C(C=CN=3)C=3C=NC=CC=3)C(C)=CC=2)C=C1 KTUFNOKKBVMGRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960002411 imatinib Drugs 0.000 description 2
- 150000002463 imidates Chemical class 0.000 description 2
- 230000036737 immune function Effects 0.000 description 2
- 230000006054 immunological memory Effects 0.000 description 2
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 description 2
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 2
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 2
- CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N indomethacin Chemical compound CC1=C(CC(O)=O)C2=CC(OC)=CC=C2N1C(=O)C1=CC=C(Cl)C=C1 CGIGDMFJXJATDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 2
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 2
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 2
- 210000004969 inflammatory cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 108091008042 inhibitory receptors Proteins 0.000 description 2
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 description 2
- 229940047122 interleukins Drugs 0.000 description 2
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 2
- FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N isomaltotriose Chemical class O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O)O1 FZWBNHMXJMCXLU-BLAUPYHCSA-N 0.000 description 2
- JJWLVOIRVHMVIS-UHFFFAOYSA-N isopropylamine Chemical compound CC(C)N JJWLVOIRVHMVIS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 2
- JCQLYHFGKNRPGE-FCVZTGTOSA-N lactulose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 JCQLYHFGKNRPGE-FCVZTGTOSA-N 0.000 description 2
- 229960000511 lactulose Drugs 0.000 description 2
- PFCRQPBOOFTZGQ-UHFFFAOYSA-N lactulose keto form Natural products OCC(=O)C(O)C(C(O)CO)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O PFCRQPBOOFTZGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BCFGMOOMADDAQU-UHFFFAOYSA-N lapatinib Chemical compound O1C(CNCCS(=O)(=O)C)=CC=C1C1=CC=C(N=CN=C2NC=3C=C(Cl)C(OCC=4C=C(F)C=CC=4)=CC=3)C2=C1 BCFGMOOMADDAQU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000010410 layer Substances 0.000 description 2
- HPJKCIUCZWXJDR-UHFFFAOYSA-N letrozole Chemical compound C1=CC(C#N)=CC=C1C(N1N=CN=C1)C1=CC=C(C#N)C=C1 HPJKCIUCZWXJDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001691 leucovorin Drugs 0.000 description 2
- 150000002617 leukotrienes Chemical class 0.000 description 2
- 229960004338 leuprorelin Drugs 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000005210 lymphoid organ Anatomy 0.000 description 2
- RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N m-cresol Chemical compound CC1=CC=CC(O)=C1 RLSSMJSEOOYNOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000011777 magnesium Substances 0.000 description 2
- 229910052749 magnesium Inorganic materials 0.000 description 2
- 229940091250 magnesium supplement Drugs 0.000 description 2
- 125000005439 maleimidyl group Chemical group C1(C=CC(N1*)=O)=O 0.000 description 2
- JCQLYHFGKNRPGE-HFZVAGMNSA-N maltulose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 JCQLYHFGKNRPGE-HFZVAGMNSA-N 0.000 description 2
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 2
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 2
- 229960004961 mechlorethamine Drugs 0.000 description 2
- HAWPXGHAZFHHAD-UHFFFAOYSA-N mechlorethamine Chemical compound ClCCN(C)CCCl HAWPXGHAZFHHAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960001428 mercaptopurine Drugs 0.000 description 2
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 2
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 2
- TWXDDNPPQUTEOV-FVGYRXGTSA-N methamphetamine hydrochloride Chemical compound Cl.CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 TWXDDNPPQUTEOV-FVGYRXGTSA-N 0.000 description 2
- DFTAZNAEBRBBKP-UHFFFAOYSA-N methyl 4-sulfanylbutanimidate Chemical compound COC(=N)CCCS DFTAZNAEBRBBKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960004584 methylprednisolone Drugs 0.000 description 2
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 2
- 229960001156 mitoxantrone Drugs 0.000 description 2
- 239000003607 modifier Substances 0.000 description 2
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 2
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 2
- 208000013734 mononeuritis simplex Diseases 0.000 description 2
- 201000005518 mononeuropathy Diseases 0.000 description 2
- 210000003097 mucus Anatomy 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 206010028417 myasthenia gravis Diseases 0.000 description 2
- HPNSFSBZBAHARI-RUDMXATFSA-N mycophenolic acid Chemical compound OC1=C(C\C=C(/C)CCC(O)=O)C(OC)=C(C)C2=C1C(=O)OC2 HPNSFSBZBAHARI-RUDMXATFSA-N 0.000 description 2
- QZGIWPZCWHMVQL-UIYAJPBUSA-N neocarzinostatin chromophore Chemical compound O1[C@H](C)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](NC)[C@H]1O[C@@H]1C/2=C/C#C[C@H]3O[C@@]3([C@@H]3OC(=O)OC3)C#CC\2=C[C@H]1OC(=O)C1=C(O)C=CC2=C(C)C=C(OC)C=C12 QZGIWPZCWHMVQL-UIYAJPBUSA-N 0.000 description 2
- 108010068617 neonatal Fc receptor Proteins 0.000 description 2
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000012038 nucleophile Substances 0.000 description 2
- 239000002751 oligonucleotide probe Substances 0.000 description 2
- 210000004789 organ system Anatomy 0.000 description 2
- 229960001756 oxaliplatin Drugs 0.000 description 2
- DWAFYCQODLXJNR-BNTLRKBRSA-L oxaliplatin Chemical compound O1C(=O)C(=O)O[Pt]11N[C@@H]2CCCC[C@H]2N1 DWAFYCQODLXJNR-BNTLRKBRSA-L 0.000 description 2
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 2
- WRUUGTRCQOWXEG-UHFFFAOYSA-N pamidronate Chemical compound NCCC(O)(P(O)(O)=O)P(O)(O)=O WRUUGTRCQOWXEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003076 paracrine Effects 0.000 description 2
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 2
- AQIXEPGDORPWBJ-UHFFFAOYSA-N pentan-3-ol Chemical compound CCC(O)CC AQIXEPGDORPWBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000737 periodic effect Effects 0.000 description 2
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 2
- 210000001322 periplasm Anatomy 0.000 description 2
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 2
- 150000002994 phenylalanines Chemical class 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 2
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 2
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 2
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 2
- 239000002574 poison Substances 0.000 description 2
- 229920001983 poloxamer Polymers 0.000 description 2
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 2
- 239000000256 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Substances 0.000 description 2
- 235000010486 polyoxyethylene sorbitan monolaurate Nutrition 0.000 description 2
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 2
- 230000004481 post-translational protein modification Effects 0.000 description 2
- OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N potassium;[2-butyl-5-chloro-3-[[4-[2-(1,2,4-triaza-3-azanidacyclopenta-1,4-dien-5-yl)phenyl]phenyl]methyl]imidazol-4-yl]methanol Chemical compound [K+].CCCCC1=NC(Cl)=C(CO)N1CC1=CC=C(C=2C(=CC=CC=2)C2=N[N-]N=N2)C=C1 OXCMYAYHXIHQOA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000750 progressive effect Effects 0.000 description 2
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000006337 proteolytic cleavage Effects 0.000 description 2
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 2
- 208000005069 pulmonary fibrosis Diseases 0.000 description 2
- 150000003212 purines Chemical class 0.000 description 2
- RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N puromycin Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C[C@H](N)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)[C@H](N2C3=NC=NC(=C3N=C2)N(C)C)O[C@@H]1CO RXWNCPJZOCPEPQ-NVWDDTSBSA-N 0.000 description 2
- 150000003230 pyrimidines Chemical class 0.000 description 2
- MIXMJCQRHVAJIO-TZHJZOAOSA-N qk4dys664x Chemical compound O.C1([C@@H](F)C2)=CC(=O)C=C[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2C[C@H]3OC(C)(C)O[C@@]3(C(=O)CO)[C@@]2(C)C[C@@H]1O.C1([C@@H](F)C2)=CC(=O)C=C[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2C[C@H]3OC(C)(C)O[C@@]3(C(=O)CO)[C@@]2(C)C[C@@H]1O MIXMJCQRHVAJIO-TZHJZOAOSA-N 0.000 description 2
- GZUITABIAKMVPG-UHFFFAOYSA-N raloxifene Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1=C(C(=O)C=2C=CC(OCCN3CCCCC3)=CC=2)C2=CC=C(O)C=C2S1 GZUITABIAKMVPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 2
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 2
- 229940116176 remicade Drugs 0.000 description 2
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 2
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 2
- GHMLBKRAJCXXBS-UHFFFAOYSA-N resorcinol Chemical compound OC1=CC=CC(O)=C1 GHMLBKRAJCXXBS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- HHJUWIANJFBDHT-ZVTSDNJWSA-N rsa8ko39wh Chemical compound C([C@H](C[C@]1(C(=O)OC)C=2C(=CC3=C([C@]45[C@H]([C@@]([C@H](O)[C@]6(CC)C=CCN([C@H]56)CC4)(O)C(N)=O)N3C)C=2)OC)C[C@@](C2)(O)CC)N2CCC2=C1NC1=CC=CC=C21 HHJUWIANJFBDHT-ZVTSDNJWSA-N 0.000 description 2
- 238000013391 scatchard analysis Methods 0.000 description 2
- 230000001932 seasonal effect Effects 0.000 description 2
- 229940095743 selective estrogen receptor modulator Drugs 0.000 description 2
- 239000000333 selective estrogen receptor modulator Substances 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 2
- 201000009890 sinusitis Diseases 0.000 description 2
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 2
- 230000016160 smooth muscle contraction Effects 0.000 description 2
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 2
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 2
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 235000010356 sorbitol Nutrition 0.000 description 2
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 2
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 2
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000003637 steroidlike Effects 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- PVYJZLYGTZKPJE-UHFFFAOYSA-N streptonigrin Chemical compound C=1C=C2C(=O)C(OC)=C(N)C(=O)C2=NC=1C(C=1N)=NC(C(O)=O)=C(C)C=1C1=CC=C(OC)C(OC)=C1O PVYJZLYGTZKPJE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- NCEXYHBECQHGNR-QZQOTICOSA-N sulfasalazine Chemical compound C1=C(O)C(C(=O)O)=CC(\N=N\C=2C=CC(=CC=2)S(=O)(=O)NC=2N=CC=CC=2)=C1 NCEXYHBECQHGNR-QZQOTICOSA-N 0.000 description 2
- 229960001940 sulfasalazine Drugs 0.000 description 2
- NCEXYHBECQHGNR-UHFFFAOYSA-N sulfasalazine Natural products C1=C(O)C(C(=O)O)=CC(N=NC=2C=CC(=CC=2)S(=O)(=O)NC=2N=CC=CC=2)=C1 NCEXYHBECQHGNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002198 surface plasmon resonance spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- QJJXYPPXXYFBGM-SHYZHZOCSA-N tacrolimus Natural products CO[C@H]1C[C@H](CC[C@@H]1O)C=C(C)[C@H]2OC(=O)[C@H]3CCCCN3C(=O)C(=O)[C@@]4(O)O[C@@H]([C@H](C[C@H]4C)OC)[C@@H](C[C@H](C)CC(=C[C@@H](CC=C)C(=O)C[C@H](O)[C@H]2C)C)OC QJJXYPPXXYFBGM-SHYZHZOCSA-N 0.000 description 2
- RCINICONZNJXQF-XAZOAEDWSA-N taxol® Chemical compound O([C@@H]1[C@@]2(CC(C(C)=C(C2(C)C)[C@H](C([C@]2(C)[C@@H](O)C[C@H]3OC[C@]3(C21)OC(C)=O)=O)OC(=O)C)OC(=O)[C@H](O)[C@@H](NC(=O)C=1C=CC=CC=1)C=1C=CC=CC=1)O)C(=O)C1=CC=CC=C1 RCINICONZNJXQF-XAZOAEDWSA-N 0.000 description 2
- 229940063683 taxotere Drugs 0.000 description 2
- YAPQBXQYLJRXSA-UHFFFAOYSA-N theobromine Chemical compound CN1C(=O)NC(=O)C2=C1N=CN2C YAPQBXQYLJRXSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZFXYFBGIUFBOJW-UHFFFAOYSA-N theophylline Chemical compound O=C1N(C)C(=O)N(C)C2=C1NC=N2 ZFXYFBGIUFBOJW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 2
- 206010043778 thyroiditis Diseases 0.000 description 2
- 229960003087 tioguanine Drugs 0.000 description 2
- 229960005267 tositumomab Drugs 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 230000005030 transcription termination Effects 0.000 description 2
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 230000014616 translation Effects 0.000 description 2
- GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N trimethylamine Chemical compound CN(C)C GETQZCLCWQTVFV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940046728 tumor necrosis factor alpha inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 239000002452 tumor necrosis factor alpha inhibitor Substances 0.000 description 2
- 229940121358 tyrosine kinase inhibitor Drugs 0.000 description 2
- 239000005483 tyrosine kinase inhibitor Substances 0.000 description 2
- 150000004917 tyrosine kinase inhibitor derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 2
- LNPDTQAFDNKSHK-UHFFFAOYSA-N valdecoxib Chemical compound CC=1ON=C(C=2C=CC=CC=2)C=1C1=CC=C(S(N)(=O)=O)C=C1 LNPDTQAFDNKSHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008728 vascular permeability Effects 0.000 description 2
- 230000024883 vasodilation Effects 0.000 description 2
- 229940099073 xolair Drugs 0.000 description 2
- 229950009268 zinostatin Drugs 0.000 description 2
- 229960004276 zoledronic acid Drugs 0.000 description 2
- NNJPGOLRFBJNIW-HNNXBMFYSA-N (-)-demecolcine Chemical compound C1=C(OC)C(=O)C=C2[C@@H](NC)CCC3=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C3C2=C1 NNJPGOLRFBJNIW-HNNXBMFYSA-N 0.000 description 1
- JKHVDAUOODACDU-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 3-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)propanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCN1C(=O)C=CC1=O JKHVDAUOODACDU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PVGATNRYUYNBHO-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 4-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)butanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCN1C(=O)C=CC1=O PVGATNRYUYNBHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BQWBEDSJTMWJAE-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 4-[(2-iodoacetyl)amino]benzoate Chemical compound C1=CC(NC(=O)CI)=CC=C1C(=O)ON1C(=O)CCC1=O BQWBEDSJTMWJAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PMJWDPGOWBRILU-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 4-[4-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)phenyl]butanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCC(C=C1)=CC=C1N1C(=O)C=CC1=O PMJWDPGOWBRILU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VLARLSIGSPVYHX-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 6-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)hexanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCCCN1C(=O)C=CC1=O VLARLSIGSPVYHX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WCMOHMXWOOBVMZ-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 6-[3-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)propanoylamino]hexanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCCCNC(=O)CCN1C(=O)C=CC1=O WCMOHMXWOOBVMZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IHVODYOQUSEYJJ-UHFFFAOYSA-N (2,5-dioxopyrrolidin-1-yl) 6-[[4-[(2,5-dioxopyrrol-1-yl)methyl]cyclohexanecarbonyl]amino]hexanoate Chemical compound O=C1CCC(=O)N1OC(=O)CCCCCNC(=O)C(CC1)CCC1CN1C(=O)C=CC1=O IHVODYOQUSEYJJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DIGQNXIGRZPYDK-WKSCXVIASA-N (2R)-6-amino-2-[[2-[[(2S)-2-[[2-[[(2R)-2-[[(2S)-2-[[(2R,3S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2R)-2-[[(2S,3S)-2-[[(2R)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[(2S)-2-[[2-[[(2S)-2-[[(2R)-2-[[2-[[2-[[2-[(2-amino-1-hydroxyethylidene)amino]-3-carboxy-1-hydroxypropylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]-1-hydroxypropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1,3-dihydroxybutylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1-hydroxypropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]-1,5-dihydroxy-5-iminopentylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1,3-dihydroxybutylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1,3-dihydroxypropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]-1-hydroxy-3-sulfanylpropylidene]amino]-1-hydroxyethylidene]amino]hexanoic acid Chemical compound C[C@@H]([C@@H](C(=N[C@@H](CS)C(=N[C@@H](C)C(=N[C@@H](CO)C(=NCC(=N[C@@H](CCC(=N)O)C(=NC(CS)C(=N[C@H]([C@H](C)O)C(=N[C@H](CS)C(=N[C@H](CO)C(=NCC(=N[C@H](CS)C(=NCC(=N[C@H](CCCCN)C(=O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)N=C([C@H](CS)N=C([C@H](CO)N=C([C@H](CO)N=C([C@H](C)N=C(CN=C([C@H](CO)N=C([C@H](CS)N=C(CN=C(C(CS)N=C(C(CC(=O)O)N=C(CN)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O)O DIGQNXIGRZPYDK-WKSCXVIASA-N 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- GUHPRPJDBZHYCJ-SECBINFHSA-N (2s)-2-(5-benzoylthiophen-2-yl)propanoic acid Chemical compound S1C([C@H](C(O)=O)C)=CC=C1C(=O)C1=CC=CC=C1 GUHPRPJDBZHYCJ-SECBINFHSA-N 0.000 description 1
- YXTKHLHCVFUPPT-YYFJYKOTSA-N (2s)-2-[[4-[(2-amino-5-formyl-4-oxo-1,6,7,8-tetrahydropteridin-6-yl)methylamino]benzoyl]amino]pentanedioic acid;(1r,2r)-1,2-dimethanidylcyclohexane;5-fluoro-1h-pyrimidine-2,4-dione;oxalic acid;platinum(2+) Chemical compound [Pt+2].OC(=O)C(O)=O.[CH2-][C@@H]1CCCC[C@H]1[CH2-].FC1=CNC(=O)NC1=O.C1NC=2NC(N)=NC(=O)C=2N(C=O)C1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 YXTKHLHCVFUPPT-YYFJYKOTSA-N 0.000 description 1
- FLWWDYNPWOSLEO-HQVZTVAUSA-N (2s)-2-[[4-[1-(2-amino-4-oxo-1h-pteridin-6-yl)ethyl-methylamino]benzoyl]amino]pentanedioic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1C(C)N(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FLWWDYNPWOSLEO-HQVZTVAUSA-N 0.000 description 1
- VESKBLGTHHPZJF-QNWVGRARSA-N (2s)-2-amino-5-[[(2r)-2-amino-3-[2-[bis[bis(2-chloroethyl)amino]phosphoryloxy]ethylsulfonyl]propanoyl]-[(r)-carboxy(phenyl)methyl]amino]-5-oxopentanoic acid Chemical compound ClCCN(CCCl)P(=O)(N(CCCl)CCCl)OCCS(=O)(=O)C[C@H](N)C(=O)N(C(=O)CC[C@H](N)C(O)=O)[C@@H](C(O)=O)C1=CC=CC=C1 VESKBLGTHHPZJF-QNWVGRARSA-N 0.000 description 1
- CGMTUJFWROPELF-YPAAEMCBSA-N (3E,5S)-5-[(2S)-butan-2-yl]-3-(1-hydroxyethylidene)pyrrolidine-2,4-dione Chemical compound CC[C@H](C)[C@@H]1NC(=O)\C(=C(/C)O)C1=O CGMTUJFWROPELF-YPAAEMCBSA-N 0.000 description 1
- TVIRNGFXQVMMGB-OFWIHYRESA-N (3s,6r,10r,13e,16s)-16-[(2r,3r,4s)-4-chloro-3-hydroxy-4-phenylbutan-2-yl]-10-[(3-chloro-4-methoxyphenyl)methyl]-6-methyl-3-(2-methylpropyl)-1,4-dioxa-8,11-diazacyclohexadec-13-ene-2,5,9,12-tetrone Chemical compound C1=C(Cl)C(OC)=CC=C1C[C@@H]1C(=O)NC[C@@H](C)C(=O)O[C@@H](CC(C)C)C(=O)O[C@H]([C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](Cl)C=2C=CC=CC=2)C/C=C/C(=O)N1 TVIRNGFXQVMMGB-OFWIHYRESA-N 0.000 description 1
- SJHPCNCNNSSLPL-CSKARUKUSA-N (4e)-4-(ethoxymethylidene)-2-phenyl-1,3-oxazol-5-one Chemical compound O1C(=O)C(=C/OCC)\N=C1C1=CC=CC=C1 SJHPCNCNNSSLPL-CSKARUKUSA-N 0.000 description 1
- FFTVPQUHLQBXQZ-KVUCHLLUSA-N (4s,4as,5ar,12ar)-4,7-bis(dimethylamino)-1,10,11,12a-tetrahydroxy-3,12-dioxo-4a,5,5a,6-tetrahydro-4h-tetracene-2-carboxamide Chemical compound C1C2=C(N(C)C)C=CC(O)=C2C(O)=C2[C@@H]1C[C@H]1[C@H](N(C)C)C(=O)C(C(N)=O)=C(O)[C@@]1(O)C2=O FFTVPQUHLQBXQZ-KVUCHLLUSA-N 0.000 description 1
- XRBSKUSTLXISAB-XVVDYKMHSA-N (5r,6r,7r,8r)-8-hydroxy-7-(hydroxymethyl)-5-(3,4,5-trimethoxyphenyl)-5,6,7,8-tetrahydrobenzo[f][1,3]benzodioxole-6-carboxylic acid Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@H](O)[C@@H](CO)[C@@H]2C(O)=O)=C1 XRBSKUSTLXISAB-XVVDYKMHSA-N 0.000 description 1
- AESVUZLWRXEGEX-DKCAWCKPSA-N (7S,9R)-7-[(2S,4R,5R,6R)-4-amino-5-hydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-6,9,11-trihydroxy-9-(2-hydroxyacetyl)-4-methoxy-8,10-dihydro-7H-tetracene-5,12-dione iron(3+) Chemical compound [Fe+3].COc1cccc2C(=O)c3c(O)c4C[C@@](O)(C[C@H](O[C@@H]5C[C@@H](N)[C@@H](O)[C@@H](C)O5)c4c(O)c3C(=O)c12)C(=O)CO AESVUZLWRXEGEX-DKCAWCKPSA-N 0.000 description 1
- INAUWOVKEZHHDM-PEDBPRJASA-N (7s,9s)-6,9,11-trihydroxy-9-(2-hydroxyacetyl)-7-[(2r,4s,5s,6s)-5-hydroxy-6-methyl-4-morpholin-4-yloxan-2-yl]oxy-4-methoxy-8,10-dihydro-7h-tetracene-5,12-dione;hydrochloride Chemical compound Cl.N1([C@H]2C[C@@H](O[C@@H](C)[C@H]2O)O[C@H]2C[C@@](O)(CC=3C(O)=C4C(=O)C=5C=CC=C(C=5C(=O)C4=C(O)C=32)OC)C(=O)CO)CCOCC1 INAUWOVKEZHHDM-PEDBPRJASA-N 0.000 description 1
- RCFNNLSZHVHCEK-IMHLAKCZSA-N (7s,9s)-7-(4-amino-6-methyloxan-2-yl)oxy-6,9,11-trihydroxy-9-(2-hydroxyacetyl)-4-methoxy-8,10-dihydro-7h-tetracene-5,12-dione;hydrochloride Chemical compound [Cl-].O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)C1CC([NH3+])CC(C)O1 RCFNNLSZHVHCEK-IMHLAKCZSA-N 0.000 description 1
- NOPNWHSMQOXAEI-PUCKCBAPSA-N (7s,9s)-7-[(2r,4s,5s,6s)-4-(2,3-dihydropyrrol-1-yl)-5-hydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-6,9,11-trihydroxy-9-(2-hydroxyacetyl)-4-methoxy-8,10-dihydro-7h-tetracene-5,12-dione Chemical compound N1([C@H]2C[C@@H](O[C@@H](C)[C@H]2O)O[C@H]2C[C@@](O)(CC=3C(O)=C4C(=O)C=5C=CC=C(C=5C(=O)C4=C(O)C=32)OC)C(=O)CO)CCC=C1 NOPNWHSMQOXAEI-PUCKCBAPSA-N 0.000 description 1
- FPVKHBSQESCIEP-UHFFFAOYSA-N (8S)-3-(2-deoxy-beta-D-erythro-pentofuranosyl)-3,6,7,8-tetrahydroimidazo[4,5-d][1,3]diazepin-8-ol Natural products C1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NCC2O)=C2N=C1 FPVKHBSQESCIEP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LXJXRIRHZLFYRP-VKHMYHEASA-L (R)-2-Hydroxy-3-(phosphonooxy)-propanal Natural products O=C[C@H](O)COP([O-])([O-])=O LXJXRIRHZLFYRP-VKHMYHEASA-L 0.000 description 1
- LKJPYSCBVHEWIU-KRWDZBQOSA-N (R)-bicalutamide Chemical compound C([C@@](O)(C)C(=O)NC=1C=C(C(C#N)=CC=1)C(F)(F)F)S(=O)(=O)C1=CC=C(F)C=C1 LKJPYSCBVHEWIU-KRWDZBQOSA-N 0.000 description 1
- WHTVZRBIWZFKQO-AWEZNQCLSA-N (S)-chloroquine Chemical compound ClC1=CC=C2C(N[C@@H](C)CCCN(CC)CC)=CC=NC2=C1 WHTVZRBIWZFKQO-AWEZNQCLSA-N 0.000 description 1
- AGNGYMCLFWQVGX-AGFFZDDWSA-N (e)-1-[(2s)-2-amino-2-carboxyethoxy]-2-diazonioethenolate Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CO\C([O-])=C\[N+]#N AGNGYMCLFWQVGX-AGFFZDDWSA-N 0.000 description 1
- PMGQWSIVQFOFOQ-BDUVBVHRSA-N (e)-but-2-enedioic acid;(2r)-2-[2-[1-(4-chlorophenyl)-1-phenylethoxy]ethyl]-1-methylpyrrolidine Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O.CN1CCC[C@@H]1CCOC(C)(C=1C=CC(Cl)=CC=1)C1=CC=CC=C1 PMGQWSIVQFOFOQ-BDUVBVHRSA-N 0.000 description 1
- CHRJZRDFSQHIFI-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.C=CC1=CC=CC=C1C=C CHRJZRDFSQHIFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WNXJIVFYUVYPPR-UHFFFAOYSA-N 1,3-dioxolane Chemical compound C1COCO1 WNXJIVFYUVYPPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MYBLAOJMRYYKMS-RTRLPJTCSA-N 1-(2-chloroethyl)-1-nitroso-3-[(3r,4r,5s,6r)-2,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]urea Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](NC(=O)N(CCCl)N=O)[C@@H](O)[C@@H]1O MYBLAOJMRYYKMS-RTRLPJTCSA-N 0.000 description 1
- DIYPCWKHSODVAP-UHFFFAOYSA-N 1-[3-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)benzoyl]oxy-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonic acid Chemical compound O=C1C(S(=O)(=O)O)CC(=O)N1OC(=O)C1=CC=CC(N2C(C=CC2=O)=O)=C1 DIYPCWKHSODVAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CULQNACJHGHAER-UHFFFAOYSA-N 1-[4-[(2-iodoacetyl)amino]benzoyl]oxy-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonic acid Chemical compound O=C1C(S(=O)(=O)O)CC(=O)N1OC(=O)C1=CC=C(NC(=O)CI)C=C1 CULQNACJHGHAER-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AMMPLVWPWSYRDR-UHFFFAOYSA-N 1-methylbicyclo[2.2.2]oct-2-ene-4-carboxylic acid Chemical compound C1CC2(C(O)=O)CCC1(C)C=C2 AMMPLVWPWSYRDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MQLACMBJVPINKE-UHFFFAOYSA-N 10-[(3-hydroxy-4-methoxyphenyl)methylidene]anthracen-9-one Chemical compound C1=C(O)C(OC)=CC=C1C=C1C2=CC=CC=C2C(=O)C2=CC=CC=C21 MQLACMBJVPINKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PNDPGZBMCMUPRI-HVTJNCQCSA-N 10043-66-0 Chemical compound [131I][131I] PNDPGZBMCMUPRI-HVTJNCQCSA-N 0.000 description 1
- FUFLCEKSBBHCMO-UHFFFAOYSA-N 11-dehydrocorticosterone Natural products O=C1CCC2(C)C3C(=O)CC(C)(C(CC4)C(=O)CO)C4C3CCC2=C1 FUFLCEKSBBHCMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 17β-estradiol Chemical compound OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 VOXZDWNPVJITMN-ZBRFXRBCSA-N 0.000 description 1
- VILCJCGEZXAXTO-UHFFFAOYSA-N 2,2,2-tetramine Chemical compound NCCNCCNCCN VILCJCGEZXAXTO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BTOTXLJHDSNXMW-POYBYMJQSA-N 2,3-dideoxyuridine Chemical compound O1[C@H](CO)CC[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 BTOTXLJHDSNXMW-POYBYMJQSA-N 0.000 description 1
- CIVCELMLGDGMKZ-UHFFFAOYSA-N 2,4-dichloro-6-methylpyridine-3-carboxylic acid Chemical compound CC1=CC(Cl)=C(C(O)=O)C(Cl)=N1 CIVCELMLGDGMKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BOMZMNZEXMAQQW-UHFFFAOYSA-N 2,5,11-trimethyl-6h-pyrido[4,3-b]carbazol-2-ium-9-ol;acetate Chemical compound CC([O-])=O.C[N+]1=CC=C2C(C)=C(NC=3C4=CC(O)=CC=3)C4=C(C)C2=C1 BOMZMNZEXMAQQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UEJJHQNACJXSKW-UHFFFAOYSA-N 2-(2,6-dioxopiperidin-3-yl)-1H-isoindole-1,3(2H)-dione Chemical compound O=C1C2=CC=CC=C2C(=O)N1C1CCC(=O)NC1=O UEJJHQNACJXSKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FALRKNHUBBKYCC-UHFFFAOYSA-N 2-(chloromethyl)pyridine-3-carbonitrile Chemical compound ClCC1=NC=CC=C1C#N FALRKNHUBBKYCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RTQWWZBSTRGEAV-PKHIMPSTSA-N 2-[[(2s)-2-[bis(carboxymethyl)amino]-3-[4-(methylcarbamoylamino)phenyl]propyl]-[2-[bis(carboxymethyl)amino]propyl]amino]acetic acid Chemical compound CNC(=O)NC1=CC=C(C[C@@H](CN(CC(C)N(CC(O)=O)CC(O)=O)CC(O)=O)N(CC(O)=O)CC(O)=O)C=C1 RTQWWZBSTRGEAV-PKHIMPSTSA-N 0.000 description 1
- WYMDDFRYORANCC-UHFFFAOYSA-N 2-[[3-[bis(carboxymethyl)amino]-2-hydroxypropyl]-(carboxymethyl)amino]acetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CC(O)CN(CC(O)=O)CC(O)=O WYMDDFRYORANCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000005273 2-acetoxybenzoic acid group Chemical group 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 2-amino-2-deoxy-D-glucopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 0.000 description 1
- SPCKHVPPRJWQRZ-UHFFFAOYSA-N 2-benzhydryloxy-n,n-dimethylethanamine;2-hydroxypropane-1,2,3-tricarboxylic acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O.C=1C=CC=CC=1C(OCCN(C)C)C1=CC=CC=C1 SPCKHVPPRJWQRZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FDAYLTPAFBGXAB-UHFFFAOYSA-N 2-chloro-n,n-bis(2-chloroethyl)ethanamine Chemical compound ClCCN(CCCl)CCCl FDAYLTPAFBGXAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 2-diethylaminoethanol Chemical compound CCN(CC)CCO BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940013085 2-diethylaminoethanol Drugs 0.000 description 1
- UPHOPMSGKZNELG-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxynaphthalene-1-carboxylic acid Chemical compound C1=CC=C2C(C(=O)O)=C(O)C=CC2=C1 UPHOPMSGKZNELG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YZEUHQHUFTYLPH-UHFFFAOYSA-N 2-nitroimidazole Chemical compound [O-][N+](=O)C1=NC=CN1 YZEUHQHUFTYLPH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YIMDLWDNDGKDTJ-QLKYHASDSA-N 3'-deamino-3'-(3-cyanomorpholin-4-yl)doxorubicin Chemical compound N1([C@H]2C[C@@H](O[C@@H](C)[C@H]2O)O[C@H]2C[C@@](O)(CC=3C(O)=C4C(=O)C=5C=CC=C(C=5C(=O)C4=C(O)C=32)OC)C(=O)CO)CCOCC1C#N YIMDLWDNDGKDTJ-QLKYHASDSA-N 0.000 description 1
- PYSICVOJSJMFKP-UHFFFAOYSA-N 3,5-dibromo-2-chloropyridine Chemical compound ClC1=NC=C(Br)C=C1Br PYSICVOJSJMFKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XMTQQYYKAHVGBJ-UHFFFAOYSA-N 3-(3,4-DICHLOROPHENYL)-1,1-DIMETHYLUREA Chemical compound CN(C)C(=O)NC1=CC=C(Cl)C(Cl)=C1 XMTQQYYKAHVGBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PWMYMKOUNYTVQN-UHFFFAOYSA-N 3-(8,8-diethyl-2-aza-8-germaspiro[4.5]decan-2-yl)-n,n-dimethylpropan-1-amine Chemical compound C1C[Ge](CC)(CC)CCC11CN(CCCN(C)C)CC1 PWMYMKOUNYTVQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGJZLNKBHJESQX-UHFFFAOYSA-N 3-Epi-Betulin-Saeure Natural products C1CC(O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C)CCC5(C(O)=O)CCC(C(=C)C)C5C4CCC3C21C QGJZLNKBHJESQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OSJPPGNTCRNQQC-UWTATZPHSA-N 3-phospho-D-glyceric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)COP(O)(O)=O OSJPPGNTCRNQQC-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- CLOUCVRNYSHRCF-UHFFFAOYSA-N 3beta-Hydroxy-20(29)-Lupen-3,27-oic acid Natural products C1CC(O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C(O)=O)CCC5(C)CCC(C(=C)C)C5C4CCC3C21C CLOUCVRNYSHRCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CLPFFLWZZBQMAO-UHFFFAOYSA-N 4-(5,6,7,8-tetrahydroimidazo[1,5-a]pyridin-5-yl)benzonitrile Chemical compound C1=CC(C#N)=CC=C1C1N2C=NC=C2CCC1 CLPFFLWZZBQMAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QFVHZQCOUORWEI-UHFFFAOYSA-N 4-[(4-anilino-5-sulfonaphthalen-1-yl)diazenyl]-5-hydroxynaphthalene-2,7-disulfonic acid Chemical compound C=12C(O)=CC(S(O)(=O)=O)=CC2=CC(S(O)(=O)=O)=CC=1N=NC(C1=CC=CC(=C11)S(O)(=O)=O)=CC=C1NC1=CC=CC=C1 QFVHZQCOUORWEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DODQJNMQWMSYGS-QPLCGJKRSA-N 4-[(z)-1-[4-[2-(dimethylamino)ethoxy]phenyl]-1-phenylbut-1-en-2-yl]phenol Chemical compound C=1C=C(O)C=CC=1C(/CC)=C(C=1C=CC(OCCN(C)C)=CC=1)/C1=CC=CC=C1 DODQJNMQWMSYGS-QPLCGJKRSA-N 0.000 description 1
- ZMRMMAOBSFSXLN-UHFFFAOYSA-N 4-[4-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)phenyl]butanehydrazide Chemical compound C1=CC(CCCC(=O)NN)=CC=C1N1C(=O)C=CC1=O ZMRMMAOBSFSXLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PQYGLZAKNWQTCV-HNNXBMFYSA-N 4-[N'-(2-hydroxyethyl)thioureido]-L-benzyl EDTA Chemical compound OCCNC(=S)NC1=CC=C(C[C@@H](CN(CC(O)=O)CC(O)=O)N(CC(O)=O)CC(O)=O)C=C1 PQYGLZAKNWQTCV-HNNXBMFYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- 229940124125 5 Lipoxygenase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 101710169336 5'-deoxyadenosine deaminase Proteins 0.000 description 1
- 102100022464 5'-nucleotidase Human genes 0.000 description 1
- NMUSYJAQQFHJEW-KVTDHHQDSA-N 5-azacytidine Chemical compound O=C1N=C(N)N=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 NMUSYJAQQFHJEW-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- RKETZVBQTUSNLM-UHFFFAOYSA-N 6-(3-bromophenyl)-2,3,5,6-tetrahydroimidazo[2,1-b][1,3]thiazole Chemical compound BrC1=CC=CC(C2N=C3SCCN3C2)=C1 RKETZVBQTUSNLM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WYXSYVWAUAUWLD-SHUUEZRQSA-N 6-azauridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=N1 WYXSYVWAUAUWLD-SHUUEZRQSA-N 0.000 description 1
- ZGXJTSGNIOSYLO-UHFFFAOYSA-N 88755TAZ87 Chemical compound NCC(=O)CCC(O)=O ZGXJTSGNIOSYLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FUXVKZWTXQUGMW-FQEVSTJZSA-N 9-Aminocamptothecin Chemical compound C1=CC(N)=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)[C@]5(O)CC)C4=NC2=C1 FUXVKZWTXQUGMW-FQEVSTJZSA-N 0.000 description 1
- LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 9H-xanthine Chemical class O=C1NC(=O)NC2=C1NC=N2 LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HDZZVAMISRMYHH-UHFFFAOYSA-N 9beta-Ribofuranosyl-7-deazaadenin Natural products C1=CC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(CO)C(O)C1O HDZZVAMISRMYHH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZOZKYEHVNDEUCO-DKXJUACHSA-N Aceglatone Chemical compound O1C(=O)[C@H](OC(C)=O)[C@H]2OC(=O)[C@@H](OC(=O)C)[C@H]21 ZOZKYEHVNDEUCO-DKXJUACHSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 108010059616 Activins Proteins 0.000 description 1
- 102000005606 Activins Human genes 0.000 description 1
- ORILYTVJVMAKLC-UHFFFAOYSA-N Adamantane Natural products C1C(C2)CC3CC1CC2C3 ORILYTVJVMAKLC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000007470 Adenosine A2B Receptor Human genes 0.000 description 1
- 108010085273 Adenosine A2B receptor Proteins 0.000 description 1
- 102000055025 Adenosine deaminases Human genes 0.000 description 1
- 206010001367 Adrenal insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 241000256118 Aedes aegypti Species 0.000 description 1
- 241000256173 Aedes albopictus Species 0.000 description 1
- 201000010000 Agranulocytosis Diseases 0.000 description 1
- 108010012934 Albumin-Bound Paclitaxel Proteins 0.000 description 1
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 1
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 1
- 101710187573 Alcohol dehydrogenase 2 Proteins 0.000 description 1
- 101710133776 Alcohol dehydrogenase class-3 Proteins 0.000 description 1
- PQSUYGKTWSAVDQ-ZVIOFETBSA-N Aldosterone Chemical compound C([C@@]1([C@@H](C(=O)CO)CC[C@H]1[C@@H]1CC2)C=O)[C@H](O)[C@@H]1[C@]1(C)C2=CC(=O)CC1 PQSUYGKTWSAVDQ-ZVIOFETBSA-N 0.000 description 1
- PQSUYGKTWSAVDQ-UHFFFAOYSA-N Aldosterone Natural products C1CC2C3CCC(C(=O)CO)C3(C=O)CC(O)C2C2(C)C1=CC(=O)CC2 PQSUYGKTWSAVDQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000004384 Alopecia Diseases 0.000 description 1
- CEIZFXOZIQNICU-UHFFFAOYSA-N Alternaria alternata Crofton-weed toxin Natural products CCC(C)C1NC(=O)C(C(C)=O)=C1O CEIZFXOZIQNICU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010001889 Alveolitis Diseases 0.000 description 1
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- 244000036975 Ambrosia artemisiifolia Species 0.000 description 1
- 235000003129 Ambrosia artemisiifolia var elatior Nutrition 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-OUBTZVSYSA-N Ammonia-15N Chemical compound [15NH3] QGZKDVFQNNGYKY-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- 244000144725 Amygdalus communis Species 0.000 description 1
- 235000011437 Amygdalus communis Nutrition 0.000 description 1
- 206010002556 Ankylosing Spondylitis Diseases 0.000 description 1
- 108090000669 Annexin A4 Proteins 0.000 description 1
- 102100034612 Annexin A4 Human genes 0.000 description 1
- 206010059199 Anterior chamber cleavage syndrome Diseases 0.000 description 1
- 108010032595 Antibody Binding Sites Proteins 0.000 description 1
- 102000006306 Antigen Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010083359 Antigen Receptors Proteins 0.000 description 1
- 208000003343 Antiphospholipid Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 108020000948 Antisense Oligonucleotides Proteins 0.000 description 1
- 208000032467 Aplastic anaemia Diseases 0.000 description 1
- 208000002109 Argyria Diseases 0.000 description 1
- CEUORZQYGODEFX-UHFFFAOYSA-N Aripirazole Chemical compound ClC1=CC=CC(N2CCN(CCCCOC=3C=C4NC(=O)CCC4=CC=3)CC2)=C1Cl CEUORZQYGODEFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000014654 Aromatase Human genes 0.000 description 1
- 108010078554 Aromatase Proteins 0.000 description 1
- 102000009133 Arylsulfatases Human genes 0.000 description 1
- 241000244186 Ascaris Species 0.000 description 1
- 206010003445 Ascites Diseases 0.000 description 1
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Natural products OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 1
- 241000228212 Aspergillus Species 0.000 description 1
- 241000351920 Aspergillus nidulans Species 0.000 description 1
- 241000228245 Aspergillus niger Species 0.000 description 1
- BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N Aspirin Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 241001203868 Autographa californica Species 0.000 description 1
- 206010003827 Autoimmune hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 1
- 241000713842 Avian sarcoma virus Species 0.000 description 1
- 108091008875 B cell receptors Proteins 0.000 description 1
- 108010028006 B-Cell Activating Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000016605 B-Cell Activating Factor Human genes 0.000 description 1
- 102100025218 B-cell differentiation antigen CD72 Human genes 0.000 description 1
- 101710187595 B-cell receptor CD22 Proteins 0.000 description 1
- 108010003455 BLyS receptor Proteins 0.000 description 1
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 1
- 231100000699 Bacterial toxin Toxicity 0.000 description 1
- KUVIULQEHSCUHY-XYWKZLDCSA-N Beclometasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(Cl)[C@@H]1[C@@H]1C[C@H](C)[C@@](C(=O)COC(=O)CC)(OC(=O)CC)[C@@]1(C)C[C@@H]2O KUVIULQEHSCUHY-XYWKZLDCSA-N 0.000 description 1
- VGGGPCQERPFHOB-MCIONIFRSA-N Bestatin Chemical compound CC(C)C[C@H](C(O)=O)NC(=O)[C@@H](O)[C@H](N)CC1=CC=CC=C1 VGGGPCQERPFHOB-MCIONIFRSA-N 0.000 description 1
- 102100026189 Beta-galactosidase Human genes 0.000 description 1
- 102100029945 Beta-galactoside alpha-2,6-sialyltransferase 1 Human genes 0.000 description 1
- DIZWSDNSTNAYHK-XGWVBXMLSA-N Betulinic acid Natural products CC(=C)[C@@H]1C[C@H]([C@H]2CC[C@]3(C)[C@H](CC[C@@H]4[C@@]5(C)CC[C@H](O)C(C)(C)[C@@H]5CC[C@@]34C)[C@@H]12)C(=O)O DIZWSDNSTNAYHK-XGWVBXMLSA-N 0.000 description 1
- 229940122361 Bisphosphonate Drugs 0.000 description 1
- 208000019838 Blood disease Diseases 0.000 description 1
- 241000255789 Bombyx mori Species 0.000 description 1
- 241000409811 Bombyx mori nucleopolyhedrovirus Species 0.000 description 1
- 241000701922 Bovine parvovirus Species 0.000 description 1
- 244000056139 Brassica cretica Species 0.000 description 1
- 235000003351 Brassica cretica Nutrition 0.000 description 1
- 235000003343 Brassica rupestris Nutrition 0.000 description 1
- 206010058354 Bronchioloalveolar carcinoma Diseases 0.000 description 1
- VOVIALXJUBGFJZ-KWVAZRHASA-N Budesonide Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1C[C@H]3OC(CCC)O[C@@]3(C(=O)CO)[C@@]1(C)C[C@@H]2O VOVIALXJUBGFJZ-KWVAZRHASA-N 0.000 description 1
- MBABCNBNDNGODA-LTGLSHGVSA-N Bullatacin Natural products O=C1C(C[C@H](O)CCCCCCCCCC[C@@H](O)[C@@H]2O[C@@H]([C@@H]3O[C@H]([C@@H](O)CCCCCCCCCC)CC3)CC2)=C[C@H](C)O1 MBABCNBNDNGODA-LTGLSHGVSA-N 0.000 description 1
- KGGVWMAPBXIMEM-ZRTAFWODSA-N Bullatacinone Chemical compound O1[C@@H]([C@@H](O)CCCCCCCCCC)CC[C@@H]1[C@@H]1O[C@@H]([C@H](O)CCCCCCCCCC[C@H]2OC(=O)[C@H](CC(C)=O)C2)CC1 KGGVWMAPBXIMEM-ZRTAFWODSA-N 0.000 description 1
- KGGVWMAPBXIMEM-JQFCFGFHSA-N Bullatacinone Natural products O=C(C[C@H]1C(=O)O[C@H](CCCCCCCCCC[C@H](O)[C@@H]2O[C@@H]([C@@H]3O[C@@H]([C@@H](O)CCCCCCCCCC)CC3)CC2)C1)C KGGVWMAPBXIMEM-JQFCFGFHSA-N 0.000 description 1
- 108010037003 Buserelin Proteins 0.000 description 1
- PYMDEDHDQYLBRT-DRIHCAFSSA-N Buserelin acetate Chemical compound CC(O)=O.CCNC(=O)[C@@H]1CCCN1C(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](COC(C)(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 PYMDEDHDQYLBRT-DRIHCAFSSA-N 0.000 description 1
- 102100025074 C-C chemokine receptor-like 2 Human genes 0.000 description 1
- 102100031658 C-X-C chemokine receptor type 5 Human genes 0.000 description 1
- 239000002126 C01EB10 - Adenosine Substances 0.000 description 1
- 108010084313 CD58 Antigens Proteins 0.000 description 1
- 102100027221 CD81 antigen Human genes 0.000 description 1
- 102100027217 CD82 antigen Human genes 0.000 description 1
- 102100035793 CD83 antigen Human genes 0.000 description 1
- 201000002829 CREST Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 102100033620 Calponin-1 Human genes 0.000 description 1
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 description 1
- 206010007134 Candida infections Diseases 0.000 description 1
- 101710158575 Cap-specific mRNA (nucleoside-2'-O-)-methyltransferase Proteins 0.000 description 1
- GAGWJHPBXLXJQN-UHFFFAOYSA-N Capecitabine Natural products C1=C(F)C(NC(=O)OCCCCC)=NC(=O)N1C1C(O)C(O)C(C)O1 GAGWJHPBXLXJQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-OUBTZVSYSA-N Carbon-13 Chemical compound [13C] OKTJSMMVPCPJKN-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- 108010006303 Carboxypeptidases Proteins 0.000 description 1
- 102000005367 Carboxypeptidases Human genes 0.000 description 1
- 108010080937 Carboxypeptidases A Proteins 0.000 description 1
- 102000000496 Carboxypeptidases A Human genes 0.000 description 1
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 description 1
- 231100000023 Cell-mediated cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 206010057250 Cell-mediated cytotoxicity Diseases 0.000 description 1
- 102000019034 Chemokines Human genes 0.000 description 1
- 108010012236 Chemokines Proteins 0.000 description 1
- JWBOIMRXGHLCPP-UHFFFAOYSA-N Chloditan Chemical compound C=1C=CC=C(Cl)C=1C(C(Cl)Cl)C1=CC=C(Cl)C=C1 JWBOIMRXGHLCPP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282552 Chlorocebus aethiops Species 0.000 description 1
- 206010008609 Cholangitis sclerosing Diseases 0.000 description 1
- 102100021809 Chorionic somatomammotropin hormone 1 Human genes 0.000 description 1
- 208000006545 Chronic Obstructive Pulmonary Disease Diseases 0.000 description 1
- 108090000746 Chymosin Proteins 0.000 description 1
- 244000223760 Cinnamomum zeylanicum Species 0.000 description 1
- BYMMIQCVDHHYGG-UHFFFAOYSA-N Cl.OP(O)(O)=O Chemical compound Cl.OP(O)(O)=O BYMMIQCVDHHYGG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000002831 Cogan-Reese syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010010144 Completed suicide Diseases 0.000 description 1
- 206010010741 Conjunctivitis Diseases 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000759568 Corixa Species 0.000 description 1
- 239000000055 Corticotropin-Releasing Hormone Substances 0.000 description 1
- 102000012289 Corticotropin-Releasing Hormone Human genes 0.000 description 1
- 108010022152 Corticotropin-Releasing Hormone Proteins 0.000 description 1
- MFYSYFVPBJMHGN-ZPOLXVRWSA-N Cortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3C(=O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MFYSYFVPBJMHGN-ZPOLXVRWSA-N 0.000 description 1
- MFYSYFVPBJMHGN-UHFFFAOYSA-N Cortisone Natural products O=C1CCC2(C)C3C(=O)CC(C)(C(CC4)(O)C(=O)CO)C4C3CCC2=C1 MFYSYFVPBJMHGN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 108700032819 Croton tiglium crotin II Proteins 0.000 description 1
- 229930188224 Cryptophycin Natural products 0.000 description 1
- 229940122204 Cyclooxygenase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 102000000311 Cytosine Deaminase Human genes 0.000 description 1
- 108010080611 Cytosine Deaminase Proteins 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N D-alanine Chemical compound C[C@@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-UWTATZPHSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N D-alpha-Ala Natural products CC([NH3+])C([O-])=O QNAYBMKLOCPYGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000008574 D-amino acids Chemical group 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-QWWZWVQMSA-N D-arabinitol Chemical compound OC[C@@H](O)C(O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- LXJXRIRHZLFYRP-VKHMYHEASA-N D-glyceraldehyde 3-phosphate Chemical compound O=C[C@H](O)COP(O)(O)=O LXJXRIRHZLFYRP-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- XUIIKFGFIJCVMT-GFCCVEGCSA-N D-thyroxine Chemical compound IC1=CC(C[C@@H](N)C(O)=O)=CC(I)=C1OC1=CC(I)=C(O)C(I)=C1 XUIIKFGFIJCVMT-GFCCVEGCSA-N 0.000 description 1
- 239000012624 DNA alkylating agent Substances 0.000 description 1
- 230000004544 DNA amplification Effects 0.000 description 1
- 229940124087 DNA topoisomerase II inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 230000004568 DNA-binding Effects 0.000 description 1
- 108010092160 Dactinomycin Proteins 0.000 description 1
- 206010011878 Deafness Diseases 0.000 description 1
- XXGMIHXASFDFSM-UHFFFAOYSA-N Delta9-tetrahydrocannabinol Natural products CCCCCc1cc2OC(C)(C)C3CCC(=CC3c2c(O)c1O)C XXGMIHXASFDFSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 101800000585 Diphtheria toxin fragment A Proteins 0.000 description 1
- 101800001224 Disintegrin Proteins 0.000 description 1
- KBAUFVUYFNWQFM-UHFFFAOYSA-N Doxylamine succinate Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O.C=1C=CC=NC=1C(C)(OCCN(C)C)C1=CC=CC=C1 KBAUFVUYFNWQFM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZQZFYGIXNQKOAV-OCEACIFDSA-N Droloxifene Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(/CC)=C(C=1C=C(O)C=CC=1)\C1=CC=C(OCCN(C)C)C=C1 ZQZFYGIXNQKOAV-OCEACIFDSA-N 0.000 description 1
- CYQFCXCEBYINGO-DLBZAZTESA-N Dronabinol Natural products C1=C(C)CC[C@H]2C(C)(C)OC3=CC(CCCCC)=CC(O)=C3[C@H]21 CYQFCXCEBYINGO-DLBZAZTESA-N 0.000 description 1
- 241000255601 Drosophila melanogaster Species 0.000 description 1
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 102000043859 Dynamin Human genes 0.000 description 1
- 108700021058 Dynamin Proteins 0.000 description 1
- 208000000059 Dyspnea Diseases 0.000 description 1
- 206010013975 Dyspnoeas Diseases 0.000 description 1
- 101150029707 ERBB2 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000017701 Endocrine disease Diseases 0.000 description 1
- 208000004232 Enteritis Diseases 0.000 description 1
- 241000588914 Enterobacter Species 0.000 description 1
- 241000588921 Enterobacteriaceae Species 0.000 description 1
- 101710146739 Enterotoxin Proteins 0.000 description 1
- 101800003838 Epidermal growth factor Proteins 0.000 description 1
- 102400001368 Epidermal growth factor Human genes 0.000 description 1
- YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N Epihygromycin Natural products OC1C(O)C(C(=O)C)OC1OC(C(=C1)O)=CC=C1C=C(C)C(=O)NC1C(O)C(O)C2OCOC2C1O YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OBMLHUPNRURLOK-XGRAFVIBSA-N Epitiostanol Chemical compound C1[C@@H]2S[C@@H]2C[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CC[C@H]21 OBMLHUPNRURLOK-XGRAFVIBSA-N 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 241000588698 Erwinia Species 0.000 description 1
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 description 1
- 239000004386 Erythritol Substances 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N Erythritol Natural products OCC(O)C(O)CO UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000588722 Escherichia Species 0.000 description 1
- 241001522878 Escherichia coli B Species 0.000 description 1
- 241001302584 Escherichia coli str. K-12 substr. W3110 Species 0.000 description 1
- 229940102550 Estrogen receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N Ethyl urethane Chemical compound CCOC(N)=O JOYRKODLDBILNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DBVJJBKOTRCVKF-UHFFFAOYSA-N Etidronic acid Chemical compound OP(=O)(O)C(O)(C)P(O)(O)=O DBVJJBKOTRCVKF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700024394 Exon Proteins 0.000 description 1
- 101710082714 Exotoxin A Proteins 0.000 description 1
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 1
- 206010016207 Familial Mediterranean fever Diseases 0.000 description 1
- 206010016228 Fasciitis Diseases 0.000 description 1
- 102100031517 Fc receptor-like protein 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710120224 Fc receptor-like protein 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100031511 Fc receptor-like protein 2 Human genes 0.000 description 1
- 102100031512 Fc receptor-like protein 3 Human genes 0.000 description 1
- 102100031513 Fc receptor-like protein 4 Human genes 0.000 description 1
- 102100031507 Fc receptor-like protein 5 Human genes 0.000 description 1
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 description 1
- 208000028387 Felty syndrome Diseases 0.000 description 1
- 102000018233 Fibroblast Growth Factor Human genes 0.000 description 1
- 108050007372 Fibroblast Growth Factor Proteins 0.000 description 1
- 241000724791 Filamentous phage Species 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N Fucose Natural products C[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 1
- 206010017533 Fungal infection Diseases 0.000 description 1
- 230000010190 G1 phase Effects 0.000 description 1
- 230000037057 G1 phase arrest Effects 0.000 description 1
- 229910052688 Gadolinium Inorganic materials 0.000 description 1
- 108010015133 Galactose oxidase Proteins 0.000 description 1
- 206010064147 Gastrointestinal inflammation Diseases 0.000 description 1
- JRZJKWGQFNTSRN-UHFFFAOYSA-N Geldanamycin Natural products C1C(C)CC(OC)C(O)C(C)C=C(C)C(OC(N)=O)C(OC)CCC=C(C)C(=O)NC2=CC(=O)C(OC)=C1C2=O JRZJKWGQFNTSRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700004714 Gelonium multiflorum GEL Proteins 0.000 description 1
- 208000034826 Genetic Predisposition to Disease Diseases 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- 241000699694 Gerbillinae Species 0.000 description 1
- 102000006395 Globulins Human genes 0.000 description 1
- 108010044091 Globulins Proteins 0.000 description 1
- 108010073178 Glucan 1,4-alpha-Glucosidase Proteins 0.000 description 1
- 102100022624 Glucoamylase Human genes 0.000 description 1
- 102000030595 Glucokinase Human genes 0.000 description 1
- 108010021582 Glucokinase Proteins 0.000 description 1
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 description 1
- 239000004366 Glucose oxidase Substances 0.000 description 1
- 108010060309 Glucuronidase Proteins 0.000 description 1
- 102000053187 Glucuronidase Human genes 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 108010031186 Glycoside Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 102000005744 Glycoside Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 102000006771 Gonadotropins Human genes 0.000 description 1
- 108010086677 Gonadotropins Proteins 0.000 description 1
- 208000024869 Goodpasture syndrome Diseases 0.000 description 1
- 108010069236 Goserelin Proteins 0.000 description 1
- 244000299507 Gossypium hirsutum Species 0.000 description 1
- 206010018687 Granulocytopenia Diseases 0.000 description 1
- 206010018691 Granuloma Diseases 0.000 description 1
- 108010051696 Growth Hormone Proteins 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 208000031886 HIV Infections Diseases 0.000 description 1
- 208000037357 HIV infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 102100030595 HLA class II histocompatibility antigen gamma chain Human genes 0.000 description 1
- 102100031546 HLA class II histocompatibility antigen, DO beta chain Human genes 0.000 description 1
- 101100082540 Haemophilus influenzae (strain ATCC 51907 / DSM 11121 / KW20 / Rd) pcp gene Proteins 0.000 description 1
- 208000030836 Hashimoto thyroiditis Diseases 0.000 description 1
- 208000016621 Hearing disease Diseases 0.000 description 1
- 108010004889 Heat-Shock Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000002812 Heat-Shock Proteins Human genes 0.000 description 1
- 208000018565 Hemochromatosis Diseases 0.000 description 1
- 208000035186 Hemolytic Autoimmune Anemia Diseases 0.000 description 1
- HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N Heparin Chemical compound OC1C(NC(=O)C)C(O)OC(COS(O)(=O)=O)C1OC1C(OS(O)(=O)=O)C(O)C(OC2C(C(OS(O)(=O)=O)C(OC3C(C(O)C(O)C(O3)C(O)=O)OS(O)(=O)=O)C(CO)O2)NS(O)(=O)=O)C(C(O)=O)O1 HTTJABKRGRZYRN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 1
- 206010019860 Hereditary angioedema Diseases 0.000 description 1
- 208000009889 Herpes Simplex Diseases 0.000 description 1
- 102000005548 Hexokinase Human genes 0.000 description 1
- 108700040460 Hexokinases Proteins 0.000 description 1
- 102000003834 Histamine H1 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108090000110 Histamine H1 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 108010088652 Histocompatibility Antigens Class I Proteins 0.000 description 1
- 102000008949 Histocompatibility Antigens Class I Human genes 0.000 description 1
- 101000678236 Homo sapiens 5'-nucleotidase Proteins 0.000 description 1
- 101000934359 Homo sapiens B-cell differentiation antigen CD72 Proteins 0.000 description 1
- 101000863864 Homo sapiens Beta-galactoside alpha-2,6-sialyltransferase 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000716068 Homo sapiens C-C chemokine receptor type 6 Proteins 0.000 description 1
- 101000922405 Homo sapiens C-X-C chemokine receptor type 5 Proteins 0.000 description 1
- 101000914479 Homo sapiens CD81 antigen Proteins 0.000 description 1
- 101000914469 Homo sapiens CD82 antigen Proteins 0.000 description 1
- 101000946856 Homo sapiens CD83 antigen Proteins 0.000 description 1
- 101100275686 Homo sapiens CR2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101000945318 Homo sapiens Calponin-1 Proteins 0.000 description 1
- 101000941929 Homo sapiens Complement receptor type 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000846911 Homo sapiens Fc receptor-like protein 2 Proteins 0.000 description 1
- 101000846910 Homo sapiens Fc receptor-like protein 3 Proteins 0.000 description 1
- 101000846909 Homo sapiens Fc receptor-like protein 4 Proteins 0.000 description 1
- 101000846908 Homo sapiens Fc receptor-like protein 5 Proteins 0.000 description 1
- 101001082627 Homo sapiens HLA class II histocompatibility antigen gamma chain Proteins 0.000 description 1
- 101000866281 Homo sapiens HLA class II histocompatibility antigen, DO beta chain Proteins 0.000 description 1
- 101000935043 Homo sapiens Integrin beta-1 Proteins 0.000 description 1
- 101001057504 Homo sapiens Interferon-stimulated gene 20 kDa protein Proteins 0.000 description 1
- 101001033249 Homo sapiens Interleukin-1 beta Proteins 0.000 description 1
- 101001055144 Homo sapiens Interleukin-2 receptor subunit alpha Proteins 0.000 description 1
- 101001017833 Homo sapiens Leucine-rich repeat-containing protein 4 Proteins 0.000 description 1
- 101000777628 Homo sapiens Leukocyte antigen CD37 Proteins 0.000 description 1
- 101000984196 Homo sapiens Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily A member 5 Proteins 0.000 description 1
- 101000984190 Homo sapiens Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily B member 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000980823 Homo sapiens Leukocyte surface antigen CD53 Proteins 0.000 description 1
- 101000917858 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-A Proteins 0.000 description 1
- 101000917839 Homo sapiens Low affinity immunoglobulin gamma Fc region receptor III-B Proteins 0.000 description 1
- 101001018100 Homo sapiens Lysozyme C Proteins 0.000 description 1
- 101000904173 Homo sapiens Progonadoliberin-1 Proteins 0.000 description 1
- 101000884271 Homo sapiens Signal transducer CD24 Proteins 0.000 description 1
- 101000934346 Homo sapiens T-cell surface antigen CD2 Proteins 0.000 description 1
- 101000914484 Homo sapiens T-lymphocyte activation antigen CD80 Proteins 0.000 description 1
- 101000652736 Homo sapiens Transgelin Proteins 0.000 description 1
- 108091006905 Human Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000008100 Human Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 241000701109 Human adenovirus 2 Species 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VSNHCAURESNICA-UHFFFAOYSA-N Hydroxyurea Chemical compound NC(=O)NO VSNHCAURESNICA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010048643 Hypereosinophilic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000019758 Hypergammaglobulinemia Diseases 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N Hypoxanthine nucleoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MPBVHIBUJCELCL-UHFFFAOYSA-N Ibandronate Chemical compound CCCCCN(C)CCC(O)(P(O)(O)=O)P(O)(O)=O MPBVHIBUJCELCL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000009794 Idiopathic Pulmonary Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- 108010091135 Immunoglobulin Fc Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000018071 Immunoglobulin Fc Fragments Human genes 0.000 description 1
- 208000027601 Inner ear disease Diseases 0.000 description 1
- 108090000723 Insulin-Like Growth Factor I Proteins 0.000 description 1
- 108090001117 Insulin-Like Growth Factor II Proteins 0.000 description 1
- 102100037852 Insulin-like growth factor I Human genes 0.000 description 1
- 102100025947 Insulin-like growth factor II Human genes 0.000 description 1
- 108010041012 Integrin alpha4 Proteins 0.000 description 1
- 108010047852 Integrin alphaVbeta3 Proteins 0.000 description 1
- 102100025304 Integrin beta-1 Human genes 0.000 description 1
- 102100025390 Integrin beta-2 Human genes 0.000 description 1
- 102100027268 Interferon-stimulated gene 20 kDa protein Human genes 0.000 description 1
- 102100039065 Interleukin-1 beta Human genes 0.000 description 1
- 102000003814 Interleukin-10 Human genes 0.000 description 1
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 1
- 108090000177 Interleukin-11 Proteins 0.000 description 1
- 102000003815 Interleukin-11 Human genes 0.000 description 1
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 description 1
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 1
- 102000003812 Interleukin-15 Human genes 0.000 description 1
- 108090000172 Interleukin-15 Proteins 0.000 description 1
- 108010038453 Interleukin-2 Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000010789 Interleukin-2 Receptors Human genes 0.000 description 1
- 102100026878 Interleukin-2 receptor subunit alpha Human genes 0.000 description 1
- 108010002386 Interleukin-3 Proteins 0.000 description 1
- 102000000646 Interleukin-3 Human genes 0.000 description 1
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 1
- 102100039897 Interleukin-5 Human genes 0.000 description 1
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 description 1
- 102100021592 Interleukin-7 Human genes 0.000 description 1
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 1
- 102000004890 Interleukin-8 Human genes 0.000 description 1
- 108010002335 Interleukin-9 Proteins 0.000 description 1
- 102000000585 Interleukin-9 Human genes 0.000 description 1
- 208000005615 Interstitial Cystitis Diseases 0.000 description 1
- ZCYVEMRRCGMTRW-AHCXROLUSA-N Iodine-123 Chemical compound [123I] ZCYVEMRRCGMTRW-AHCXROLUSA-N 0.000 description 1
- HUYWAWARQUIQLE-UHFFFAOYSA-N Isoetharine Chemical compound CC(C)NC(CC)C(O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 HUYWAWARQUIQLE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PWWVAXIEGOYWEE-UHFFFAOYSA-N Isophenergan Chemical compound C1=CC=C2N(CC(C)N(C)C)C3=CC=CC=C3SC2=C1 PWWVAXIEGOYWEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000003456 Juvenile Arthritis Diseases 0.000 description 1
- 206010059176 Juvenile idiopathic arthritis Diseases 0.000 description 1
- 208000011200 Kawasaki disease Diseases 0.000 description 1
- 241000588748 Klebsiella Species 0.000 description 1
- 241000235058 Komagataella pastoris Species 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N L-fucopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- 239000005551 L01XE03 - Erlotinib Substances 0.000 description 1
- 239000002136 L01XE07 - Lapatinib Substances 0.000 description 1
- JLERVPBPJHKRBJ-UHFFFAOYSA-N LY 117018 Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1=C(C(=O)C=2C=CC(OCCN3CCCC3)=CC=2)C2=CC=C(O)C=C2S1 JLERVPBPJHKRBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000017119 Labyrinth disease Diseases 0.000 description 1
- 241000481961 Lachancea thermotolerans Species 0.000 description 1
- 241000235651 Lachancea waltii Species 0.000 description 1
- 244000207740 Lemna minor Species 0.000 description 1
- 235000006439 Lemna minor Nutrition 0.000 description 1
- 229920001491 Lentinan Polymers 0.000 description 1
- 206010024229 Leprosy Diseases 0.000 description 1
- 102100033304 Leucine-rich repeat-containing protein 4 Human genes 0.000 description 1
- 102100031586 Leukocyte antigen CD37 Human genes 0.000 description 1
- 102100025574 Leukocyte immunoglobulin-like receptor subfamily A member 5 Human genes 0.000 description 1
- 102100024221 Leukocyte surface antigen CD53 Human genes 0.000 description 1
- 208000034624 Leukocytoclastic Cutaneous Vasculitis Diseases 0.000 description 1
- 208000032514 Leukocytoclastic vasculitis Diseases 0.000 description 1
- 239000000867 Lipoxygenase Inhibitor Substances 0.000 description 1
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MEPSBMMZQBMKHM-UHFFFAOYSA-N Lomatiol Natural products CC(=C/CC1=C(O)C(=O)c2ccccc2C1=O)CO MEPSBMMZQBMKHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GQYIWUVLTXOXAJ-UHFFFAOYSA-N Lomustine Chemical compound ClCCN(N=O)C(=O)NC1CCCCC1 GQYIWUVLTXOXAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000005777 Lupus Nephritis Diseases 0.000 description 1
- 235000007688 Lycopersicon esculentum Nutrition 0.000 description 1
- 108010064548 Lymphocyte Function-Associated Antigen-1 Proteins 0.000 description 1
- 101001133631 Lysinibacillus sphaericus Penicillin acylase Proteins 0.000 description 1
- 102000043129 MHC class I family Human genes 0.000 description 1
- 108091054437 MHC class I family Proteins 0.000 description 1
- PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N Manganese Chemical compound [Mn] PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OCJYIGYOJCODJL-UHFFFAOYSA-N Meclizine Chemical compound CC1=CC=CC(CN2CCN(CC2)C(C=2C=CC=CC=2)C=2C=CC(Cl)=CC=2)=C1 OCJYIGYOJCODJL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000004658 Medicago sativa Species 0.000 description 1
- 206010027336 Menstruation delayed Diseases 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- VFKZTMPDYBFSTM-KVTDHHQDSA-N Mitobronitol Chemical compound BrC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CBr VFKZTMPDYBFSTM-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 208000003250 Mixed connective tissue disease Diseases 0.000 description 1
- 235000009811 Momordica charantia Nutrition 0.000 description 1
- 244000302512 Momordica charantia Species 0.000 description 1
- 102000013967 Monokines Human genes 0.000 description 1
- 108010050619 Monokines Proteins 0.000 description 1
- 201000002795 Muckle-Wells syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010028164 Multiple allergies Diseases 0.000 description 1
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- 101100327295 Mus musculus Cd22 gene Proteins 0.000 description 1
- 101100275687 Mus musculus Cr2 gene Proteins 0.000 description 1
- 101000846907 Mus musculus Fc receptor-like protein 5 Proteins 0.000 description 1
- 241000282339 Mustela Species 0.000 description 1
- 208000002033 Myoclonus Diseases 0.000 description 1
- 201000002481 Myositis Diseases 0.000 description 1
- OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N N-Pteroyl-L-glutaminsaeure Natural products C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 OVBPIULPVIDEAO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004988 N-glycosylation Effects 0.000 description 1
- 125000000729 N-terminal amino-acid group Chemical group 0.000 description 1
- BLXXJMDCKKHMKV-UHFFFAOYSA-N Nabumetone Chemical compound C1=C(CCC(C)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 BLXXJMDCKKHMKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CMWTZPSULFXXJA-UHFFFAOYSA-N Naproxen Natural products C1=C(C(C)C(O)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CMWTZPSULFXXJA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010051606 Necrotising colitis Diseases 0.000 description 1
- 206010055668 Necrotising oesophagitis Diseases 0.000 description 1
- 108090000028 Neprilysin Proteins 0.000 description 1
- 102000003729 Neprilysin Human genes 0.000 description 1
- 108010025020 Nerve Growth Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000007072 Nerve Growth Factors Human genes 0.000 description 1
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 108010006232 Neuraminidase Proteins 0.000 description 1
- 102000005348 Neuraminidase Human genes 0.000 description 1
- 208000025966 Neurological disease Diseases 0.000 description 1
- 241000221960 Neurospora Species 0.000 description 1
- 241000221961 Neurospora crassa Species 0.000 description 1
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 description 1
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 description 1
- SYNHCENRCUAUNM-UHFFFAOYSA-N Nitrogen mustard N-oxide hydrochloride Chemical compound Cl.ClCC[N+]([O-])(C)CCCl SYNHCENRCUAUNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700020796 Oncogene Proteins 0.000 description 1
- 102000043276 Oncogene Human genes 0.000 description 1
- 101100081884 Oryza sativa subsp. japonica OSA15 gene Proteins 0.000 description 1
- 102100037603 P2X purinoceptor 5 Human genes 0.000 description 1
- 101710189969 P2X purinoceptor 5 Proteins 0.000 description 1
- 101150082245 PSAG gene Proteins 0.000 description 1
- 241000609499 Palicourea Species 0.000 description 1
- 102000016387 Pancreatic elastase Human genes 0.000 description 1
- 108010067372 Pancreatic elastase Proteins 0.000 description 1
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 description 1
- 102000003982 Parathyroid hormone Human genes 0.000 description 1
- 108090000445 Parathyroid hormone Proteins 0.000 description 1
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 description 1
- 201000011152 Pemphigus Diseases 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- 108010073038 Penicillin Amidase Proteins 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 101710123388 Penicillin G acylase Proteins 0.000 description 1
- 108010087702 Penicillinase Proteins 0.000 description 1
- 241000228143 Penicillium Species 0.000 description 1
- BYPFEZZEUUWMEJ-UHFFFAOYSA-N Pentoxifylline Chemical compound O=C1N(CCCCC(=O)C)C(=O)N(C)C2=C1N(C)C=N2 BYPFEZZEUUWMEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090000284 Pepsin A Proteins 0.000 description 1
- 102000057297 Pepsin A Human genes 0.000 description 1
- 102000015731 Peptide Hormones Human genes 0.000 description 1
- 108010038988 Peptide Hormones Proteins 0.000 description 1
- 240000007377 Petunia x hybrida Species 0.000 description 1
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 1
- 108010089430 Phosphoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000007982 Phosphoproteins Human genes 0.000 description 1
- 102000012288 Phosphopyruvate Hydratase Human genes 0.000 description 1
- 108010022181 Phosphopyruvate Hydratase Proteins 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- 101100413173 Phytolacca americana PAP2 gene Proteins 0.000 description 1
- VQDBNKDJNJQRDG-UHFFFAOYSA-N Pirbuterol Chemical compound CC(C)(C)NCC(O)C1=CC=C(O)C(CO)=N1 VQDBNKDJNJQRDG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010003044 Placental Lactogen Proteins 0.000 description 1
- 239000000381 Placental Lactogen Substances 0.000 description 1
- 231100000742 Plant toxin Toxicity 0.000 description 1
- 241000276498 Pollachius virens Species 0.000 description 1
- 229920000805 Polyaspartic acid Polymers 0.000 description 1
- 206010065159 Polychondritis Diseases 0.000 description 1
- 206010036105 Polyneuropathy Diseases 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 1
- 235000001855 Portulaca oleracea Nutrition 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HFVNWDWLWUCIHC-GUPDPFMOSA-N Prednimustine Chemical compound O=C([C@@]1(O)CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)[C@@H](O)C[C@@]21C)COC(=O)CCCC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 HFVNWDWLWUCIHC-GUPDPFMOSA-N 0.000 description 1
- 206010036774 Proctitis Diseases 0.000 description 1
- 102100024028 Progonadoliberin-1 Human genes 0.000 description 1
- 108010076181 Proinsulin Proteins 0.000 description 1
- 102000003946 Prolactin Human genes 0.000 description 1
- 108010057464 Prolactin Proteins 0.000 description 1
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N Propionic acid Chemical class CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 102100024924 Protein kinase C alpha type Human genes 0.000 description 1
- 101710109947 Protein kinase C alpha type Proteins 0.000 description 1
- 241000588769 Proteus <enterobacteria> Species 0.000 description 1
- 102000016971 Proto-Oncogene Proteins c-kit Human genes 0.000 description 1
- 108010014608 Proto-Oncogene Proteins c-kit Proteins 0.000 description 1
- 208000003251 Pruritus Diseases 0.000 description 1
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 1
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 1
- 101100084022 Pseudomonas aeruginosa (strain ATCC 15692 / DSM 22644 / CIP 104116 / JCM 14847 / LMG 12228 / 1C / PRS 101 / PAO1) lapA gene Proteins 0.000 description 1
- 208000001671 Pulmonary Adenomatosis Diseases 0.000 description 1
- 108010011939 Pyruvate Decarboxylase Proteins 0.000 description 1
- 102000004879 Racemases and epimerases Human genes 0.000 description 1
- 108090001066 Racemases and epimerases Proteins 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 1
- AHHFEZNOXOZZQA-ZEBDFXRSSA-N Ranimustine Chemical compound CO[C@H]1O[C@H](CNC(=O)N(CCCl)N=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AHHFEZNOXOZZQA-ZEBDFXRSSA-N 0.000 description 1
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 1
- 208000003782 Raynaud disease Diseases 0.000 description 1
- 208000012322 Raynaud phenomenon Diseases 0.000 description 1
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 description 1
- 101710100968 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 description 1
- 108090000103 Relaxin Proteins 0.000 description 1
- 102000003743 Relaxin Human genes 0.000 description 1
- OWPCHSCAPHNHAV-UHFFFAOYSA-N Rhizoxin Natural products C1C(O)C2(C)OC2C=CC(C)C(OC(=O)C2)CC2CC2OC2C(=O)OC1C(C)C(OC)C(C)=CC=CC(C)=CC1=COC(C)=N1 OWPCHSCAPHNHAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 description 1
- NSFWWJIQIKBZMJ-YKNYLIOZSA-N Roridin A Chemical compound C([C@]12[C@]3(C)[C@H]4C[C@H]1O[C@@H]1C=C(C)CC[C@@]13COC(=O)[C@@H](O)[C@H](C)CCO[C@H](\C=C\C=C/C(=O)O4)[C@H](O)C)O2 NSFWWJIQIKBZMJ-YKNYLIOZSA-N 0.000 description 1
- CIEYTVIYYGTCCI-UHFFFAOYSA-N SJ000286565 Natural products C1=CC=C2C(=O)C(CC=C(C)C)=C(O)C(=O)C2=C1 CIEYTVIYYGTCCI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000235070 Saccharomyces Species 0.000 description 1
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 description 1
- 241000293869 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium Species 0.000 description 1
- 108010084592 Saporins Proteins 0.000 description 1
- 206010039491 Sarcoma Diseases 0.000 description 1
- 241000242678 Schistosoma Species 0.000 description 1
- 241000235347 Schizosaccharomyces pombe Species 0.000 description 1
- 241000311088 Schwanniomyces Species 0.000 description 1
- 241001123650 Schwanniomyces occidentalis Species 0.000 description 1
- 206010039705 Scleritis Diseases 0.000 description 1
- 206010039710 Scleroderma Diseases 0.000 description 1
- GIIZNNXWQWCKIB-UHFFFAOYSA-N Serevent Chemical compound C1=C(O)C(CO)=CC(C(O)CNCCCCCCOCCCCC=2C=CC=CC=2)=C1 GIIZNNXWQWCKIB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000270295 Serpentes Species 0.000 description 1
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 1
- 208000009359 Sezary Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 208000021388 Sezary disease Diseases 0.000 description 1
- 229940122490 Sigma receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- 102100038081 Signal transducer CD24 Human genes 0.000 description 1
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 240000003768 Solanum lycopersicum Species 0.000 description 1
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 1
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 1
- 102100038803 Somatotropin Human genes 0.000 description 1
- 238000002105 Southern blotting Methods 0.000 description 1
- 108010088160 Staphylococcal Protein A Proteins 0.000 description 1
- 241000191940 Staphylococcus Species 0.000 description 1
- 206010042033 Stevens-Johnson syndrome Diseases 0.000 description 1
- 231100000168 Stevens-Johnson syndrome Toxicity 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- 108010023197 Streptokinase Proteins 0.000 description 1
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 description 1
- 108090000787 Subtilisin Proteins 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101000996723 Sus scrofa Gonadotropin-releasing hormone receptor Proteins 0.000 description 1
- 206010042674 Swelling Diseases 0.000 description 1
- 201000008736 Systemic mastocytosis Diseases 0.000 description 1
- 230000006044 T cell activation Effects 0.000 description 1
- BXFOFFBJRFZBQZ-QYWOHJEZSA-N T-2 toxin Chemical compound C([C@@]12[C@]3(C)[C@H](OC(C)=O)[C@@H](O)[C@H]1O[C@H]1[C@]3(COC(C)=O)C[C@@H](C(=C1)C)OC(=O)CC(C)C)O2 BXFOFFBJRFZBQZ-QYWOHJEZSA-N 0.000 description 1
- 102100025237 T-cell surface antigen CD2 Human genes 0.000 description 1
- 102100027222 T-lymphocyte activation antigen CD80 Human genes 0.000 description 1
- 108700011582 TER 286 Proteins 0.000 description 1
- WFWLQNSHRPWKFK-UHFFFAOYSA-N Tegafur Chemical compound O=C1NC(=O)C(F)=CN1C1OCCC1 WFWLQNSHRPWKFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CGMTUJFWROPELF-UHFFFAOYSA-N Tenuazonic acid Natural products CCC(C)C1NC(=O)C(=C(C)/O)C1=O CGMTUJFWROPELF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000255588 Tephritidae Species 0.000 description 1
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 1
- WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N Tetraxetan Chemical compound OC(=O)CN1CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC1 WDLRUFUQRNWCPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090001109 Thermolysin Proteins 0.000 description 1
- 108091036066 Three prime untranslated region Proteins 0.000 description 1
- 206010043561 Thrombocytopenic purpura Diseases 0.000 description 1
- 102000036693 Thrombopoietin Human genes 0.000 description 1
- 108010041111 Thrombopoietin Proteins 0.000 description 1
- 201000007023 Thrombotic Thrombocytopenic Purpura Diseases 0.000 description 1
- 108010034949 Thyroglobulin Proteins 0.000 description 1
- 102000009843 Thyroglobulin Human genes 0.000 description 1
- 241001149964 Tolypocladium Species 0.000 description 1
- 239000000317 Topoisomerase II Inhibitor Substances 0.000 description 1
- 206010044223 Toxic epidermal necrolysis Diseases 0.000 description 1
- 101710120037 Toxin CcdB Proteins 0.000 description 1
- 108700009124 Transcription Initiation Site Proteins 0.000 description 1
- 102000004338 Transferrin Human genes 0.000 description 1
- 108090000901 Transferrin Proteins 0.000 description 1
- 102000007238 Transferrin Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010033576 Transferrin Receptors Proteins 0.000 description 1
- 101800004564 Transforming growth factor alpha Proteins 0.000 description 1
- 102400001320 Transforming growth factor alpha Human genes 0.000 description 1
- 102100023935 Transmembrane glycoprotein NMB Human genes 0.000 description 1
- 206010052779 Transplant rejections Diseases 0.000 description 1
- SHGAZHPCJJPHSC-NWVFGJFESA-N Tretinoin Chemical compound OC(=O)/C=C(\C)/C=C/C=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C SHGAZHPCJJPHSC-NWVFGJFESA-N 0.000 description 1
- 241000223259 Trichoderma Species 0.000 description 1
- UMILHIMHKXVDGH-UHFFFAOYSA-N Triethylene glycol diglycidyl ether Chemical compound C1OC1COCCOCCOCCOCC1CO1 UMILHIMHKXVDGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UFLGIAIHIAPJJC-UHFFFAOYSA-N Tripelennamine Chemical compound C=1C=CC=NC=1N(CCN(C)C)CC1=CC=CC=C1 UFLGIAIHIAPJJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 1
- FYAMXEPQQLNQDM-UHFFFAOYSA-N Tris(1-aziridinyl)phosphine oxide Chemical compound C1CN1P(N1CC1)(=O)N1CC1 FYAMXEPQQLNQDM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940122618 Trypsin inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 101710162629 Trypsin inhibitor Proteins 0.000 description 1
- 108090000704 Tubulin Proteins 0.000 description 1
- 102000004243 Tubulin Human genes 0.000 description 1
- 108060008683 Tumor Necrosis Factor Receptor Proteins 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000000188 Vaccinium ovalifolium Species 0.000 description 1
- 108010073929 Vascular Endothelial Growth Factor A Proteins 0.000 description 1
- 102000005789 Vascular Endothelial Growth Factors Human genes 0.000 description 1
- 108010019530 Vascular Endothelial Growth Factors Proteins 0.000 description 1
- 240000001866 Vernicia fordii Species 0.000 description 1
- 241000711975 Vesicular stomatitis virus Species 0.000 description 1
- 108020005202 Viral DNA Proteins 0.000 description 1
- 108010067390 Viral Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010047642 Vitiligo Diseases 0.000 description 1
- 238000012452 Xenomouse strains Methods 0.000 description 1
- TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N Xylitol Natural products OCCC(O)C(O)C(O)CCO TVXBFESIOXBWNM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000235013 Yarrowia Species 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical compound [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IRRNLILPWYYQNT-YFKPBYRVSA-N [(1s)-1-carboxy-4-oxopentyl]-diazonioazanide Chemical compound CC(=O)CC[C@@H](C(O)=O)N=[N+]=[N-] IRRNLILPWYYQNT-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- IFJUINDAXYAPTO-UUBSBJJBSA-N [(8r,9s,13s,14s,17s)-17-[2-[4-[4-[bis(2-chloroethyl)amino]phenyl]butanoyloxy]acetyl]oxy-13-methyl-6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-decahydrocyclopenta[a]phenanthren-3-yl] benzoate Chemical compound C([C@@H]1[C@@H](C2=CC=3)CC[C@]4([C@H]1CC[C@@H]4OC(=O)COC(=O)CCCC=1C=CC(=CC=1)N(CCCl)CCCl)C)CC2=CC=3OC(=O)C1=CC=CC=C1 IFJUINDAXYAPTO-UUBSBJJBSA-N 0.000 description 1
- IHGLINDYFMDHJG-UHFFFAOYSA-N [2-(4-methoxyphenyl)-3,4-dihydronaphthalen-1-yl]-[4-(2-pyrrolidin-1-ylethoxy)phenyl]methanone Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1C(CCC1=CC=CC=C11)=C1C(=O)C(C=C1)=CC=C1OCCN1CCCC1 IHGLINDYFMDHJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AIWRTTMUVOZGPW-HSPKUQOVSA-N abarelix Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCNC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@H](C)C(N)=O)N(C)C(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](CC=1C=NC=CC=1)NC(=O)[C@@H](CC=1C=CC(Cl)=CC=1)NC(=O)[C@@H](CC=1C=C2C=CC=CC2=CC=1)NC(C)=O)C1=CC=C(O)C=C1 AIWRTTMUVOZGPW-HSPKUQOVSA-N 0.000 description 1
- 108010023617 abarelix Proteins 0.000 description 1
- 229960002184 abarelix Drugs 0.000 description 1
- 229960003697 abatacept Drugs 0.000 description 1
- 229940028652 abraxane Drugs 0.000 description 1
- 230000035508 accumulation Effects 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 229960001138 acetylsalicylic acid Drugs 0.000 description 1
- 229930183665 actinomycin Natural products 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000000488 activin Substances 0.000 description 1
- 229940037127 actonel Drugs 0.000 description 1
- 229960005305 adenosine Drugs 0.000 description 1
- 239000002597 adenosine A2 receptor agonist Substances 0.000 description 1
- 102000019997 adhesion receptor Human genes 0.000 description 1
- 108010013985 adhesion receptor Proteins 0.000 description 1
- 210000004100 adrenal gland Anatomy 0.000 description 1
- 208000017515 adrenocortical insufficiency Diseases 0.000 description 1
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 description 1
- 229960003227 afelimomab Drugs 0.000 description 1
- 230000009824 affinity maturation Effects 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 229960003767 alanine Drugs 0.000 description 1
- NDAUXUAQIAJITI-UHFFFAOYSA-N albuterol Chemical compound CC(C)(C)NCC(O)C1=CC=C(O)C(CO)=C1 NDAUXUAQIAJITI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108700025316 aldesleukin Proteins 0.000 description 1
- 229960002478 aldosterone Drugs 0.000 description 1
- 229940062527 alendronate Drugs 0.000 description 1
- OFHCOWSQAMBJIW-AVJTYSNKSA-N alfacalcidol Chemical group C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)CCCC(C)C)=C\C=C1\C[C@@H](O)C[C@H](O)C1=C OFHCOWSQAMBJIW-AVJTYSNKSA-N 0.000 description 1
- 229940045714 alkyl sulfonate alkylating agent Drugs 0.000 description 1
- 150000008052 alkyl sulfonates Chemical class 0.000 description 1
- JAZBEHYOTPTENJ-JLNKQSITSA-N all-cis-5,8,11,14,17-icosapentaenoic acid Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCC(O)=O JAZBEHYOTPTENJ-JLNKQSITSA-N 0.000 description 1
- 230000002009 allergenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000037446 allergic sensitization Effects 0.000 description 1
- 235000020224 almond Nutrition 0.000 description 1
- 231100000360 alopecia Toxicity 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 108010026331 alpha-Fetoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000013529 alpha-Fetoproteins Human genes 0.000 description 1
- 229960000473 altretamine Drugs 0.000 description 1
- 229940037003 alum Drugs 0.000 description 1
- 229910052782 aluminium Inorganic materials 0.000 description 1
- XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N aluminium Chemical compound [Al] XAGFODPZIPBFFR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940126574 aminoglycoside antibiotic Drugs 0.000 description 1
- 239000002647 aminoglycoside antibiotic agent Substances 0.000 description 1
- 229960002749 aminolevulinic acid Drugs 0.000 description 1
- FQPFAHBPWDRTLU-UHFFFAOYSA-N aminophylline Chemical compound NCCN.O=C1N(C)C(=O)N(C)C2=C1NC=N2.O=C1N(C)C(=O)N(C)C2=C1NC=N2 FQPFAHBPWDRTLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003556 aminophylline Drugs 0.000 description 1
- 238000012870 ammonium sulfate precipitation Methods 0.000 description 1
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 1
- 229960001220 amsacrine Drugs 0.000 description 1
- XCPGHVQEEXUHNC-UHFFFAOYSA-N amsacrine Chemical compound COC1=CC(NS(C)(=O)=O)=CC=C1NC1=C(C=CC=C2)C2=NC2=CC=CC=C12 XCPGHVQEEXUHNC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010002022 amyloidosis Diseases 0.000 description 1
- 229940035676 analgesics Drugs 0.000 description 1
- 230000002052 anaphylactic effect Effects 0.000 description 1
- 229960002932 anastrozole Drugs 0.000 description 1
- BBDAGFIXKZCXAH-CCXZUQQUSA-N ancitabine Chemical compound N=C1C=CN2[C@@H]3O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]3OC2=N1 BBDAGFIXKZCXAH-CCXZUQQUSA-N 0.000 description 1
- 229950000242 ancitabine Drugs 0.000 description 1
- 239000003098 androgen Substances 0.000 description 1
- 229940030486 androgens Drugs 0.000 description 1
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- 235000003484 annual ragweed Nutrition 0.000 description 1
- 239000000730 antalgic agent Substances 0.000 description 1
- 230000002280 anti-androgenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 230000003432 anti-folate effect Effects 0.000 description 1
- 230000003388 anti-hormonal effect Effects 0.000 description 1
- 229940124599 anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 1
- 230000000781 anti-lymphocytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000340 anti-metabolite Effects 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000000051 antiandrogen Substances 0.000 description 1
- 229940030495 antiandrogen sex hormone and modulator of the genital system Drugs 0.000 description 1
- 229940125644 antibody drug Drugs 0.000 description 1
- 238000011091 antibody purification Methods 0.000 description 1
- 238000009175 antibody therapy Methods 0.000 description 1
- 210000000628 antibody-producing cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940127074 antifolate Drugs 0.000 description 1
- 230000007503 antigenic stimulation Effects 0.000 description 1
- 239000003430 antimalarial agent Substances 0.000 description 1
- 229940100197 antimetabolite Drugs 0.000 description 1
- 239000002256 antimetabolite Substances 0.000 description 1
- 229940045686 antimetabolites antineoplastic purine analogs Drugs 0.000 description 1
- 229940045687 antimetabolites folic acid analogs Drugs 0.000 description 1
- 229940045719 antineoplastic alkylating agent nitrosoureas Drugs 0.000 description 1
- 229940045713 antineoplastic alkylating drug ethylene imines Drugs 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 239000003435 antirheumatic agent Substances 0.000 description 1
- 239000000074 antisense oligonucleotide Substances 0.000 description 1
- 238000012230 antisense oligonucleotides Methods 0.000 description 1
- 239000003434 antitussive agent Substances 0.000 description 1
- 229940124584 antitussives Drugs 0.000 description 1
- 238000003782 apoptosis assay Methods 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 150000008209 arabinosides Chemical class 0.000 description 1
- 229940078010 arimidex Drugs 0.000 description 1
- 229960004372 aripiprazole Drugs 0.000 description 1
- 229940087620 aromasin Drugs 0.000 description 1
- 239000003886 aromatase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229940046844 aromatase inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 150000004982 aromatic amines Chemical class 0.000 description 1
- 206010003230 arteritis Diseases 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 description 1
- GXDALQBWZGODGZ-UHFFFAOYSA-N astemizole Chemical compound C1=CC(OC)=CC=C1CCN1CCC(NC=2N(C3=CC=CC=C3N=2)CC=2C=CC(F)=CC=2)CC1 GXDALQBWZGODGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AUJRCFUBUPVWSZ-XTZHGVARSA-M auranofin Chemical compound CCP(CC)(CC)=[Au]S[C@@H]1O[C@H](COC(C)=O)[C@@H](OC(C)=O)[C@H](OC(C)=O)[C@H]1OC(C)=O AUJRCFUBUPVWSZ-XTZHGVARSA-M 0.000 description 1
- 229960005207 auranofin Drugs 0.000 description 1
- 230000003305 autocrine Effects 0.000 description 1
- 230000008003 autocrine effect Effects 0.000 description 1
- 201000005000 autoimmune gastritis Diseases 0.000 description 1
- 201000004995 autoimmune glomerulonephritis Diseases 0.000 description 1
- 201000000448 autoimmune hemolytic anemia Diseases 0.000 description 1
- 208000006424 autoimmune oophoritis Diseases 0.000 description 1
- 208000010928 autoimmune thyroid disease Diseases 0.000 description 1
- 229960002756 azacitidine Drugs 0.000 description 1
- VSRXQHXAPYXROS-UHFFFAOYSA-N azanide;cyclobutane-1,1-dicarboxylic acid;platinum(2+) Chemical compound [NH2-].[NH2-].[Pt+2].OC(=O)C1(C(O)=O)CCC1 VSRXQHXAPYXROS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001671 azapropazone Drugs 0.000 description 1
- WOIIIUDZSOLAIW-NSHDSACASA-N azapropazone Chemical compound C1=C(C)C=C2N3C(=O)[C@H](CC=C)C(=O)N3C(N(C)C)=NC2=C1 WOIIIUDZSOLAIW-NSHDSACASA-N 0.000 description 1
- 150000001541 aziridines Chemical class 0.000 description 1
- 210000002769 b effector cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000000688 bacterial toxin Substances 0.000 description 1
- 239000010953 base metal Substances 0.000 description 1
- 229950000210 beclometasone dipropionate Drugs 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- FEJKLNWAOXSSNR-UHFFFAOYSA-N benorilate Chemical compound C1=CC(NC(=O)C)=CC=C1OC(=O)C1=CC=CC=C1OC(C)=O FEJKLNWAOXSSNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004277 benorilate Drugs 0.000 description 1
- 229960000686 benzalkonium chloride Drugs 0.000 description 1
- UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M benzethonium chloride Chemical compound [Cl-].C1=CC(C(C)(C)CC(C)(C)C)=CC=C1OCCOCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 UREZNYTWGJKWBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960001950 benzethonium chloride Drugs 0.000 description 1
- 235000019445 benzyl alcohol Nutrition 0.000 description 1
- CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N benzyl(dimethyl)azanium;chloride Chemical compound [Cl-].C[NH+](C)CC1=CC=CC=C1 CADWTSSKOVRVJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010051210 beta-Fructofuranosidase Proteins 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002537 betamethasone Drugs 0.000 description 1
- UREBDLICKHMUKA-DVTGEIKXSA-N betamethasone Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@H](C)[C@@](C(=O)CO)(O)[C@@]1(C)C[C@@H]2O UREBDLICKHMUKA-DVTGEIKXSA-N 0.000 description 1
- QGJZLNKBHJESQX-FZFNOLFKSA-N betulinic acid Chemical compound C1C[C@H](O)C(C)(C)[C@@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@@]5(C(O)=O)CC[C@@H](C(=C)C)[C@@H]5[C@H]4CC[C@@H]3[C@]21C QGJZLNKBHJESQX-FZFNOLFKSA-N 0.000 description 1
- 229960000397 bevacizumab Drugs 0.000 description 1
- 229940110331 bextra Drugs 0.000 description 1
- 229960000997 bicalutamide Drugs 0.000 description 1
- 125000002619 bicyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000002306 biochemical method Methods 0.000 description 1
- 239000003124 biologic agent Substances 0.000 description 1
- 230000008827 biological function Effects 0.000 description 1
- 230000031018 biological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 238000005460 biophysical method Methods 0.000 description 1
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 1
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 1
- QKSKPIVNLNLAAV-UHFFFAOYSA-N bis(2-chloroethyl) sulfide Chemical compound ClCCSCCCl QKSKPIVNLNLAAV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HUTDDBSSHVOYJR-UHFFFAOYSA-H bis[(2-oxo-1,3,2$l^{5},4$l^{2}-dioxaphosphaplumbetan-2-yl)oxy]lead Chemical compound [Pb+2].[Pb+2].[Pb+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O HUTDDBSSHVOYJR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 150000004663 bisphosphonates Chemical class 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- OZVBMTJYIDMWIL-AYFBDAFISA-N bromocriptine Chemical compound C1=CC(C=2[C@H](N(C)C[C@@H](C=2)C(=O)N[C@]2(C(=O)N3[C@H](C(N4CCC[C@H]4[C@]3(O)O2)=O)CC(C)C)C(C)C)C2)=C3C2=C(Br)NC3=C1 OZVBMTJYIDMWIL-AYFBDAFISA-N 0.000 description 1
- 229960002802 bromocriptine Drugs 0.000 description 1
- 210000000621 bronchi Anatomy 0.000 description 1
- 206010006451 bronchitis Diseases 0.000 description 1
- 230000007883 bronchodilation Effects 0.000 description 1
- 239000000168 bronchodilator agent Substances 0.000 description 1
- 229960005520 bryostatin Drugs 0.000 description 1
- MJQUEDHRCUIRLF-TVIXENOKSA-N bryostatin 1 Chemical compound C([C@@H]1CC(/[C@@H]([C@@](C(C)(C)/C=C/2)(O)O1)OC(=O)/C=C/C=C/CCC)=C\C(=O)OC)[C@H]([C@@H](C)O)OC(=O)C[C@H](O)C[C@@H](O1)C[C@H](OC(C)=O)C(C)(C)[C@]1(O)C[C@@H]1C\C(=C\C(=O)OC)C[C@H]\2O1 MJQUEDHRCUIRLF-TVIXENOKSA-N 0.000 description 1
- MUIWQCKLQMOUAT-AKUNNTHJSA-N bryostatin 20 Natural products COC(=O)C=C1C[C@@]2(C)C[C@]3(O)O[C@](C)(C[C@@H](O)CC(=O)O[C@](C)(C[C@@]4(C)O[C@](O)(CC5=CC(=O)O[C@]45C)C(C)(C)C=C[C@@](C)(C1)O2)[C@@H](C)O)C[C@H](OC(=O)C(C)(C)C)C3(C)C MUIWQCKLQMOUAT-AKUNNTHJSA-N 0.000 description 1
- 229960004436 budesonide Drugs 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- MBABCNBNDNGODA-LUVUIASKSA-N bullatacin Chemical compound O1[C@@H]([C@@H](O)CCCCCCCCCC)CC[C@@H]1[C@@H]1O[C@@H]([C@H](O)CCCCCCCCCC[C@@H](O)CC=2C(O[C@@H](C)C=2)=O)CC1 MBABCNBNDNGODA-LUVUIASKSA-N 0.000 description 1
- 208000000594 bullous pemphigoid Diseases 0.000 description 1
- 235000006263 bur ragweed Nutrition 0.000 description 1
- 229960005064 buserelin acetate Drugs 0.000 description 1
- 229960002092 busulfan Drugs 0.000 description 1
- 239000001273 butane Substances 0.000 description 1
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N butyl alcohol Substances CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000484 butyl group Chemical group [H]C([*])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 244000309466 calf Species 0.000 description 1
- IVFYLRMMHVYGJH-PVPPCFLZSA-N calusterone Chemical compound C1C[C@]2(C)[C@](O)(C)CC[C@H]2[C@@H]2[C@@H](C)CC3=CC(=O)CC[C@]3(C)[C@H]21 IVFYLRMMHVYGJH-PVPPCFLZSA-N 0.000 description 1
- 229950009823 calusterone Drugs 0.000 description 1
- 229940088954 camptosar Drugs 0.000 description 1
- 201000003984 candidiasis Diseases 0.000 description 1
- 229960004117 capecitabine Drugs 0.000 description 1
- FAKRSMQSSFJEIM-RQJHMYQMSA-N captopril Chemical compound SC[C@@H](C)C(=O)N1CCC[C@H]1C(O)=O FAKRSMQSSFJEIM-RQJHMYQMSA-N 0.000 description 1
- 229960000830 captopril Drugs 0.000 description 1
- GVNWHCVWDRNXAZ-BTJKTKAUSA-N carbinoxamine maleate Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O.C=1C=CC=NC=1C(OCCN(C)C)C1=CC=C(Cl)C=C1 GVNWHCVWDRNXAZ-BTJKTKAUSA-N 0.000 description 1
- 229960000456 carbinoxamine maleate Drugs 0.000 description 1
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 1
- 229960004562 carboplatin Drugs 0.000 description 1
- 229940082638 cardiac stimulant phosphodiesterase inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 230000002612 cardiopulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 229960005243 carmustine Drugs 0.000 description 1
- BBZDXMBRAFTCAA-AREMUKBSSA-N carzelesin Chemical compound C1=2NC=C(C)C=2C([C@H](CCl)CN2C(=O)C=3NC4=CC=C(C=C4C=3)NC(=O)C3=CC4=CC=C(C=C4O3)N(CC)CC)=C2C=C1OC(=O)NC1=CC=CC=C1 BBZDXMBRAFTCAA-AREMUKBSSA-N 0.000 description 1
- 229950007509 carzelesin Drugs 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 229940047495 celebrex Drugs 0.000 description 1
- 229960000590 celecoxib Drugs 0.000 description 1
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 1
- 230000006369 cell cycle progression Effects 0.000 description 1
- 230000024245 cell differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000032823 cell division Effects 0.000 description 1
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 1
- 230000007910 cell fusion Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000022534 cell killing Effects 0.000 description 1
- 230000005890 cell-mediated cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 230000002032 cellular defenses Effects 0.000 description 1
- 230000004700 cellular uptake Effects 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 229960003115 certolizumab pegol Drugs 0.000 description 1
- 208000019065 cervical carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 229960005395 cetuximab Drugs 0.000 description 1
- 238000012412 chemical coupling Methods 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- 150000001805 chlorine compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229960003677 chloroquine Drugs 0.000 description 1
- SOYKEARSMXGVTM-UHFFFAOYSA-N chlorphenamine Chemical compound C=1C=CC=NC=1C(CCN(C)C)C1=CC=C(Cl)C=C1 SOYKEARSMXGVTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003291 chlorphenamine Drugs 0.000 description 1
- 208000003167 cholangitis Diseases 0.000 description 1
- 238000011098 chromatofocusing Methods 0.000 description 1
- 239000013611 chromosomal DNA Substances 0.000 description 1
- 229940080701 chymosin Drugs 0.000 description 1
- 235000017803 cinnamon Nutrition 0.000 description 1
- 229960002689 clemastine fumarate Drugs 0.000 description 1
- 229960002286 clodronic acid Drugs 0.000 description 1
- HJKBJIYDJLVSAO-UHFFFAOYSA-L clodronic acid disodium salt Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])(=O)C(Cl)(Cl)P(O)([O-])=O HJKBJIYDJLVSAO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000011284 combination treatment Methods 0.000 description 1
- 235000003488 common ragweed Nutrition 0.000 description 1
- 238000012875 competitive assay Methods 0.000 description 1
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 1
- 230000004154 complement system Effects 0.000 description 1
- 239000008139 complexing agent Substances 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 230000001276 controlling effect Effects 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 229960001334 corticosteroids Drugs 0.000 description 1
- 229960004544 cortisone Drugs 0.000 description 1
- 229960000265 cromoglicic acid Drugs 0.000 description 1
- IMZMKUWMOSJXDT-UHFFFAOYSA-N cromoglycic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)=CC(=O)C2=C1C=CC=C2OCC(O)COC1=CC=CC2=C1C(=O)C=C(C(O)=O)O2 IMZMKUWMOSJXDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000003278 cryoglobulinemia Diseases 0.000 description 1
- 208000022993 cryopyrin-associated periodic syndrome Diseases 0.000 description 1
- 108010006226 cryptophycin Proteins 0.000 description 1
- 108010089438 cryptophycin 1 Proteins 0.000 description 1
- 108010090203 cryptophycin 8 Proteins 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 208000004921 cutaneous lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N cyclohexanol Chemical compound OC1CCCCC1 HPXRVTGHNJAIIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003596 cyproheptadine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- ZPMVNZLARAEGHB-UHFFFAOYSA-N cyproheptadine hydrochloride (anhydrous) Chemical compound Cl.C1CN(C)CCC1=C1C2=CC=CC=C2C=CC2=CC=CC=C21 ZPMVNZLARAEGHB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000684 cytarabine Drugs 0.000 description 1
- 102000003675 cytokine receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010057085 cytokine receptors Proteins 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 229940104302 cytosine Drugs 0.000 description 1
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 description 1
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 description 1
- POZRVZJJTULAOH-LHZXLZLDSA-N danazol Chemical compound C1[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@](CC4)(O)C#C)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=CC2=C1C=NO2 POZRVZJJTULAOH-LHZXLZLDSA-N 0.000 description 1
- 229960000975 daunorubicin Drugs 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 230000008260 defense mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- ATWWYGQDYGSWQA-UHFFFAOYSA-N demecolceine Natural products C1=C(O)C(=O)C=C2C(NC)CCC3=CC(OC)=C(OC)C(OC)=C3C2=C1 ATWWYGQDYGSWQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005052 demecolcine Drugs 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 201000001981 dermatomyositis Diseases 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 229960003945 dexbrompheniramine maleate Drugs 0.000 description 1
- 229960005372 dexchlorpheniramine maleate Drugs 0.000 description 1
- 229960002086 dextran Drugs 0.000 description 1
- UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L di(octadecanoyloxy)lead Chemical compound [Pb+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O UQLDLKMNUJERMK-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- WVYXNIXAMZOZFK-UHFFFAOYSA-N diaziquone Chemical compound O=C1C(NC(=O)OCC)=C(N2CC2)C(=O)C(NC(=O)OCC)=C1N1CC1 WVYXNIXAMZOZFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CGMRCMMOCQYHAD-UHFFFAOYSA-J dicalcium hydroxide phosphate Chemical compound [OH-].[Ca++].[Ca++].[O-]P([O-])([O-])=O CGMRCMMOCQYHAD-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 1
- 229960001193 diclofenac sodium Drugs 0.000 description 1
- 235000021245 dietary protein Nutrition 0.000 description 1
- 229960000616 diflunisal Drugs 0.000 description 1
- HUPFGZXOMWLGNK-UHFFFAOYSA-N diflunisal Chemical compound C1=C(O)C(C(=O)O)=CC(C=2C(=CC(F)=CC=2)F)=C1 HUPFGZXOMWLGNK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PZXJOHSZQAEJFE-UHFFFAOYSA-N dihydrobetulinic acid Natural products C1CC(O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C)CCC5(C(O)=O)CCC(C(C)C)C5C4CCC3C21C PZXJOHSZQAEJFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003166 dihydrofolate reductase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 238000003113 dilution method Methods 0.000 description 1
- MZDOIJOUFRQXHC-UHFFFAOYSA-N dimenhydrinate Chemical compound O=C1N(C)C(=O)N(C)C2=NC(Cl)=N[C]21.C=1C=CC=CC=1C(OCCN(C)C)C1=CC=CC=C1 MZDOIJOUFRQXHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004993 dimenhydrinate Drugs 0.000 description 1
- 229960000520 diphenhydramine Drugs 0.000 description 1
- 229960000525 diphenhydramine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 239000002988 disease modifying antirheumatic drug Substances 0.000 description 1
- PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L disodium L-glutamate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)[C@@H](N)CCC([O-])=O PXEDJBXQKAGXNJ-QTNFYWBSSA-L 0.000 description 1
- VXIHRIQNJCRFQX-UHFFFAOYSA-K disodium aurothiomalate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C(=O)CC(S[Au])C([O-])=O VXIHRIQNJCRFQX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 239000003534 dna topoisomerase inhibitor Substances 0.000 description 1
- AMRJKAQTDDKMCE-UHFFFAOYSA-N dolastatin Chemical compound CC(C)C(N(C)C)C(=O)NC(C(C)C)C(=O)N(C)C(C(C)C)C(OC)CC(=O)N1CCCC1C(OC)C(C)C(=O)NC(C=1SC=CN=1)CC1=CC=CC=C1 AMRJKAQTDDKMCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930188854 dolastatin Natural products 0.000 description 1
- 229940115080 doxil Drugs 0.000 description 1
- 229960005008 doxylamine succinate Drugs 0.000 description 1
- 229950004203 droloxifene Drugs 0.000 description 1
- NOTIQUSPUUHHEH-UXOVVSIBSA-N dromostanolone propionate Chemical compound C([C@@H]1CC2)C(=O)[C@H](C)C[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H](OC(=O)CC)[C@@]2(C)CC1 NOTIQUSPUUHHEH-UXOVVSIBSA-N 0.000 description 1
- 229960004242 dronabinol Drugs 0.000 description 1
- 229950004683 drostanolone propionate Drugs 0.000 description 1
- 238000009510 drug design Methods 0.000 description 1
- 238000007876 drug discovery Methods 0.000 description 1
- 230000009977 dual effect Effects 0.000 description 1
- 229960005501 duocarmycin Drugs 0.000 description 1
- VQNATVDKACXKTF-XELLLNAOSA-N duocarmycin Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=C2NC(C(=O)N3C4=CC(=O)C5=C([C@@]64C[C@@H]6C3)C=C(N5)C(=O)OC)=CC2=C1 VQNATVDKACXKTF-XELLLNAOSA-N 0.000 description 1
- 229930184221 duocarmycin Natural products 0.000 description 1
- 239000000428 dust Substances 0.000 description 1
- 210000005069 ears Anatomy 0.000 description 1
- FSIRXIHZBIXHKT-MHTVFEQDSA-N edatrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CC(CC)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FSIRXIHZBIXHKT-MHTVFEQDSA-N 0.000 description 1
- 229950006700 edatrexate Drugs 0.000 description 1
- 229960000284 efalizumab Drugs 0.000 description 1
- 230000001094 effect on targets Effects 0.000 description 1
- 229960002759 eflornithine Drugs 0.000 description 1
- 229940121647 egfr inhibitor Drugs 0.000 description 1
- JAZBEHYOTPTENJ-UHFFFAOYSA-N eicosapentaenoic acid Natural products CCC=CCC=CCC=CCC=CCC=CCCCC(O)=O JAZBEHYOTPTENJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005135 eicosapentaenoic acid Drugs 0.000 description 1
- 235000020673 eicosapentaenoic acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000001678 elastic recoil detection analysis Methods 0.000 description 1
- XOPYFXBZMVTEJF-PDACKIITSA-N eleutherobin Chemical compound C(/[C@H]1[C@H](C(=CC[C@@H]1C(C)C)C)C[C@@H]([C@@]1(C)O[C@@]2(C=C1)OC)OC(=O)\C=C\C=1N=CN(C)C=1)=C2\CO[C@@H]1OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1OC(C)=O XOPYFXBZMVTEJF-PDACKIITSA-N 0.000 description 1
- XOPYFXBZMVTEJF-UHFFFAOYSA-N eleutherobin Natural products C1=CC2(OC)OC1(C)C(OC(=O)C=CC=1N=CN(C)C=1)CC(C(=CCC1C(C)C)C)C1C=C2COC1OCC(O)C(O)C1OC(C)=O XOPYFXBZMVTEJF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950000549 elliptinium acetate Drugs 0.000 description 1
- 239000012149 elution buffer Substances 0.000 description 1
- 230000002996 emotional effect Effects 0.000 description 1
- 150000002081 enamines Chemical class 0.000 description 1
- 210000000750 endocrine system Anatomy 0.000 description 1
- 210000002472 endoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 1
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- JOZGNYDSEBIJDH-UHFFFAOYSA-N eniluracil Chemical compound O=C1NC=C(C#C)C(=O)N1 JOZGNYDSEBIJDH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950010213 eniluracil Drugs 0.000 description 1
- 208000037902 enteropathy Diseases 0.000 description 1
- 239000000147 enterotoxin Substances 0.000 description 1
- 231100000655 enterotoxin Toxicity 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N eosin Chemical compound [Na+].OC(=O)C1=CC=CC=C1C1=C2C=C(Br)C(=O)C(Br)=C2OC2=C(Br)C(O)=C(Br)C=C21 YQGOJNYOYNNSMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002327 eosinophilic effect Effects 0.000 description 1
- 229940116977 epidermal growth factor Drugs 0.000 description 1
- 102000052116 epidermal growth factor receptor activity proteins Human genes 0.000 description 1
- 108700015053 epidermal growth factor receptor activity proteins Proteins 0.000 description 1
- YJGVMLPVUAXIQN-UHFFFAOYSA-N epipodophyllotoxin Natural products COC1=C(OC)C(OC)=CC(C2C3=CC=4OCOC=4C=C3C(O)C3C2C(OC3)=O)=C1 YJGVMLPVUAXIQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950002973 epitiostanol Drugs 0.000 description 1
- 229930013356 epothilone Natural products 0.000 description 1
- 150000003883 epothilone derivatives Chemical class 0.000 description 1
- AAKJLRGGTJKAMG-UHFFFAOYSA-N erlotinib Chemical compound C=12C=C(OCCOC)C(OCCOC)=CC2=NC=NC=1NC1=CC=CC(C#C)=C1 AAKJLRGGTJKAMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001433 erlotinib Drugs 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N erythritol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)CO UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N 0.000 description 1
- 229940009714 erythritol Drugs 0.000 description 1
- 235000019414 erythritol Nutrition 0.000 description 1
- 235000004626 essential fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 235000020774 essential nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 229930182833 estradiol Natural products 0.000 description 1
- 229960005309 estradiol Drugs 0.000 description 1
- FRPJXPJMRWBBIH-RBRWEJTLSA-N estramustine Chemical compound ClCCN(CCCl)C(=O)OC1=CC=C2[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 FRPJXPJMRWBBIH-RBRWEJTLSA-N 0.000 description 1
- 229960001842 estramustine Drugs 0.000 description 1
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 1
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 1
- 102000015694 estrogen receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010038795 estrogen receptors Proteins 0.000 description 1
- 238000012869 ethanol precipitation Methods 0.000 description 1
- QCYAXXZCQKMTMO-QFIPXVFZSA-N ethyl (2s)-2-[(2-bromo-3-oxospiro[3.5]non-1-en-1-yl)amino]-3-[4-(2,7-naphthyridin-1-ylamino)phenyl]propanoate Chemical compound N([C@@H](CC=1C=CC(NC=2C3=CN=CC=C3C=CN=2)=CC=1)C(=O)OCC)C1=C(Br)C(=O)C11CCCCC1 QCYAXXZCQKMTMO-QFIPXVFZSA-N 0.000 description 1
- QSRLNKCNOLVZIR-KRWDZBQOSA-N ethyl (2s)-2-[[2-[4-[bis(2-chloroethyl)amino]phenyl]acetyl]amino]-4-methylsulfanylbutanoate Chemical compound CCOC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)CC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 QSRLNKCNOLVZIR-KRWDZBQOSA-N 0.000 description 1
- 229940012017 ethylenediamine Drugs 0.000 description 1
- 229960004585 etidronic acid Drugs 0.000 description 1
- XFBVBWWRPKNWHW-UHFFFAOYSA-N etodolac Chemical compound C1COC(CC)(CC(O)=O)C2=N[C]3C(CC)=CC=CC3=C21 XFBVBWWRPKNWHW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005293 etodolac Drugs 0.000 description 1
- 229960005237 etoglucid Drugs 0.000 description 1
- 229960005420 etoposide Drugs 0.000 description 1
- 229940085363 evista Drugs 0.000 description 1
- 208000038004 exacerbated respiratory disease Diseases 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 229960000255 exemestane Drugs 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 1
- 201000001155 extrinsic allergic alveolitis Diseases 0.000 description 1
- 229950011548 fadrozole Drugs 0.000 description 1
- 229940087861 faslodex Drugs 0.000 description 1
- 210000003746 feather Anatomy 0.000 description 1
- 229940087476 femara Drugs 0.000 description 1
- 229960001395 fenbufen Drugs 0.000 description 1
- ZPAKPRAICRBAOD-UHFFFAOYSA-N fenbufen Chemical compound C1=CC(C(=O)CCC(=O)O)=CC=C1C1=CC=CC=C1 ZPAKPRAICRBAOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960005341 fenoprofen calcium Drugs 0.000 description 1
- VHUXSAWXWSTUOD-UHFFFAOYSA-L fenoprofen calcium (anhydrous) Chemical compound [Ca+2].[O-]C(=O)C(C)C1=CC=CC(OC=2C=CC=CC=2)=C1.[O-]C(=O)C(C)C1=CC=CC(OC=2C=CC=CC=2)=C1 VHUXSAWXWSTUOD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229940126864 fibroblast growth factor Drugs 0.000 description 1
- XRECTZIEBJDKEO-UHFFFAOYSA-N flucytosine Chemical compound NC1=NC(=O)NC=C1F XRECTZIEBJDKEO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004413 flucytosine Drugs 0.000 description 1
- 229960000390 fludarabine Drugs 0.000 description 1
- GIUYCYHIANZCFB-FJFJXFQQSA-N fludarabine phosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC(F)=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@@H]1O GIUYCYHIANZCFB-FJFJXFQQSA-N 0.000 description 1
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960002390 flurbiprofen Drugs 0.000 description 1
- SYTBZMRGLBWNTM-UHFFFAOYSA-N flurbiprofen Chemical compound FC1=CC(C(C(O)=O)C)=CC=C1C1=CC=CC=C1 SYTBZMRGLBWNTM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002074 flutamide Drugs 0.000 description 1
- MKXKFYHWDHIYRV-UHFFFAOYSA-N flutamide Chemical compound CC(C)C(=O)NC1=CC=C([N+]([O-])=O)C(C(F)(F)F)=C1 MKXKFYHWDHIYRV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002714 fluticasone Drugs 0.000 description 1
- MGNNYOODZCAHBA-GQKYHHCASA-N fluticasone Chemical compound C1([C@@H](F)C2)=CC(=O)C=C[C@]1(C)[C@]1(F)[C@@H]2[C@@H]2C[C@@H](C)[C@@](C(=O)SCF)(O)[C@@]2(C)C[C@@H]1O MGNNYOODZCAHBA-GQKYHHCASA-N 0.000 description 1
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 1
- 229960000304 folic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000004052 folic acid antagonist Substances 0.000 description 1
- 150000002224 folic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 229960004421 formestane Drugs 0.000 description 1
- OSVMTWJCGUFAOD-KZQROQTASA-N formestane Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(C(CC4)=O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1O OSVMTWJCGUFAOD-KZQROQTASA-N 0.000 description 1
- 229940001490 fosamax Drugs 0.000 description 1
- 229960004783 fotemustine Drugs 0.000 description 1
- YAKWPXVTIGTRJH-UHFFFAOYSA-N fotemustine Chemical compound CCOP(=O)(OCC)C(C)NC(=O)N(CCCl)N=O YAKWPXVTIGTRJH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 description 1
- 238000007710 freezing Methods 0.000 description 1
- 230000008014 freezing Effects 0.000 description 1
- 229960002258 fulvestrant Drugs 0.000 description 1
- 208000024386 fungal infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 229940084434 fungoid Drugs 0.000 description 1
- UIWYJDYFSGRHKR-UHFFFAOYSA-N gadolinium atom Chemical compound [Gd] UIWYJDYFSGRHKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005021 gait Effects 0.000 description 1
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 1
- 229960003082 galactose Drugs 0.000 description 1
- 150000008195 galaktosides Chemical class 0.000 description 1
- 229940044658 gallium nitrate Drugs 0.000 description 1
- 108010062699 gamma-Glutamyl Hydrolase Proteins 0.000 description 1
- VZCCETWTMQHEPK-UHFFFAOYSA-N gamma-Linolensaeure Natural products CCCCCC=CCC=CCC=CCCCCC(O)=O VZCCETWTMQHEPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VZCCETWTMQHEPK-QNEBEIHSSA-N gamma-linolenic acid Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC(O)=O VZCCETWTMQHEPK-QNEBEIHSSA-N 0.000 description 1
- 235000020664 gamma-linolenic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960002733 gamolenic acid Drugs 0.000 description 1
- 229960002963 ganciclovir Drugs 0.000 description 1
- IRSCQMHQWWYFCW-UHFFFAOYSA-N ganciclovir Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2COC(CO)CO IRSCQMHQWWYFCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940083124 ganglion-blocking antiadrenergic secondary and tertiary amines Drugs 0.000 description 1
- 208000018925 gastrointestinal mucositis Diseases 0.000 description 1
- SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N gemcitabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1C(F)(F)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 SDUQYLNIPVEERB-QPPQHZFASA-N 0.000 description 1
- 229960005277 gemcitabine Drugs 0.000 description 1
- 229940020967 gemzar Drugs 0.000 description 1
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- BRZYSWJRSDMWLG-CAXSIQPQSA-N geneticin Natural products O1C[C@@](O)(C)[C@H](NC)[C@@H](O)[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C(C)O)O2)N)[C@@H](N)C[C@H]1N BRZYSWJRSDMWLG-CAXSIQPQSA-N 0.000 description 1
- 238000003205 genotyping method Methods 0.000 description 1
- 230000000762 glandular Effects 0.000 description 1
- 102000018146 globin Human genes 0.000 description 1
- 108060003196 globin Proteins 0.000 description 1
- 229960002442 glucosamine Drugs 0.000 description 1
- 229940116332 glucose oxidase Drugs 0.000 description 1
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 description 1
- 229930182478 glucoside Natural products 0.000 description 1
- 150000008131 glucosides Chemical class 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002743 glutamine Drugs 0.000 description 1
- 235000004554 glutamine Nutrition 0.000 description 1
- 102000006602 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 1
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 1
- 230000002414 glycolytic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052737 gold Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010931 gold Substances 0.000 description 1
- XLXSAKCOAKORKW-AQJXLSMYSA-N gonadorelin Chemical compound C([C@@H](C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)NCC(N)=O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H](CC=1N=CNC=1)NC(=O)[C@H]1NC(=O)CC1)C1=CC=C(O)C=C1 XLXSAKCOAKORKW-AQJXLSMYSA-N 0.000 description 1
- XLXSAKCOAKORKW-UHFFFAOYSA-N gonadorelin Chemical compound C1CCC(C(=O)NCC(N)=O)N1C(=O)C(CCCN=C(N)N)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)C(NC(=O)C(CO)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)C(CC=1NC=NC=1)NC(=O)C1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 XLXSAKCOAKORKW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002622 gonadotropin Substances 0.000 description 1
- 229960003690 goserelin acetate Drugs 0.000 description 1
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 201000008326 granulomatous myositis Diseases 0.000 description 1
- 239000000122 growth hormone Substances 0.000 description 1
- 229960002706 gusperimus Drugs 0.000 description 1
- 230000009931 harmful effect Effects 0.000 description 1
- 230000010370 hearing loss Effects 0.000 description 1
- 231100000888 hearing loss Toxicity 0.000 description 1
- 208000016354 hearing loss disease Diseases 0.000 description 1
- 244000000013 helminth Species 0.000 description 1
- 208000014951 hematologic disease Diseases 0.000 description 1
- 210000000777 hematopoietic system Anatomy 0.000 description 1
- 108060003552 hemocyanin Proteins 0.000 description 1
- 229960002897 heparin Drugs 0.000 description 1
- 229920000669 heparin Polymers 0.000 description 1
- 206010073071 hepatocellular carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 125000000623 heterocyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000000833 heterodimer Substances 0.000 description 1
- UUVWYPNAQBNQJQ-UHFFFAOYSA-N hexamethylmelamine Chemical compound CN(C)C1=NC(N(C)C)=NC(N(C)C)=N1 UUVWYPNAQBNQJQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002657 hormone replacement therapy Methods 0.000 description 1
- 102000053391 human F Human genes 0.000 description 1
- 108700031895 human F Proteins 0.000 description 1
- 102000057041 human TNF Human genes 0.000 description 1
- 208000033519 human immunodeficiency virus infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 210000005104 human peripheral blood lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000004727 humoral immunity Effects 0.000 description 1
- 230000008348 humoral response Effects 0.000 description 1
- 229940088013 hycamtin Drugs 0.000 description 1
- XGIHQYAWBCFNPY-AZOCGYLKSA-N hydrabamine Chemical compound C([C@@H]12)CC3=CC(C(C)C)=CC=C3[C@@]2(C)CCC[C@@]1(C)CNCCNC[C@@]1(C)[C@@H]2CCC3=CC(C(C)C)=CC=C3[C@@]2(C)CCC1 XGIHQYAWBCFNPY-AZOCGYLKSA-N 0.000 description 1
- YPGCWEMNNLXISK-UHFFFAOYSA-N hydratropic acid Chemical class OC(=O)C(C)C1=CC=CC=C1 YPGCWEMNNLXISK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000890 hydrocortisone Drugs 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- MSYBLBLAMDYKKZ-UHFFFAOYSA-N hydron;pyridine-3-carbonyl chloride;chloride Chemical compound Cl.ClC(=O)C1=CC=CN=C1 MSYBLBLAMDYKKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001477 hydrophilic polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000004191 hydrophobic interaction chromatography Methods 0.000 description 1
- 229960001330 hydroxycarbamide Drugs 0.000 description 1
- XXSMGPRMXLTPCZ-UHFFFAOYSA-N hydroxychloroquine Chemical compound ClC1=CC=C2C(NC(C)CCCN(CCO)CC)=CC=NC2=C1 XXSMGPRMXLTPCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004171 hydroxychloroquine Drugs 0.000 description 1
- 238000012872 hydroxylapatite chromatography Methods 0.000 description 1
- KNOSIOWNDGUGFJ-UHFFFAOYSA-N hydroxysesamone Natural products C1=CC(O)=C2C(=O)C(CC=C(C)C)=C(O)C(=O)C2=C1O KNOSIOWNDGUGFJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZQDWXGKKHFNSQK-UHFFFAOYSA-N hydroxyzine Chemical compound C1CN(CCOCCO)CCN1C(C=1C=CC(Cl)=CC=1)C1=CC=CC=C1 ZQDWXGKKHFNSQK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003220 hydroxyzine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- 208000022098 hypersensitivity pneumonitis Diseases 0.000 description 1
- 201000006362 hypersensitivity vasculitis Diseases 0.000 description 1
- 229940015872 ibandronate Drugs 0.000 description 1
- 229960001001 ibritumomab tiuxetan Drugs 0.000 description 1
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 1
- 125000001841 imino group Chemical group [H]N=* 0.000 description 1
- 230000014726 immortalization of host cell Effects 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 1
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 1
- 229940124452 immunizing agent Drugs 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 description 1
- DBIGHPPNXATHOF-UHFFFAOYSA-N improsulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCCNCCCOS(C)(=O)=O DBIGHPPNXATHOF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950008097 improsulfan Drugs 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- APFVFJFRJDLVQX-AHCXROLUSA-N indium-111 Chemical compound [111In] APFVFJFRJDLVQX-AHCXROLUSA-N 0.000 description 1
- 229940055742 indium-111 Drugs 0.000 description 1
- 229960000905 indomethacin Drugs 0.000 description 1
- 230000006882 induction of apoptosis Effects 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 1
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 239000000893 inhibin Substances 0.000 description 1
- ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N iniprol Chemical compound C([C@H]1C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@H]2CSSC[C@H]3C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@H](C(N[C@H](C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC=4C=CC(O)=CC=4)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](CC=4C=CC=CC=4)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC2=O)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CSSC[C@H](NC(=O)[C@H](CC=2C=CC=CC=2)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H]2N(CCC2)C(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N2[C@@H](CCC2)C(=O)N3)C(=O)NCC(=O)NCC(=O)N[C@@H](C)C(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@H](C(=O)N1)C(C)C)[C@@H](C)O)[C@@H](C)CC)=O)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 ZPNFWUPYTFPOJU-LPYSRVMUSA-N 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 150000002484 inorganic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 229910010272 inorganic material Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002919 insect venom Substances 0.000 description 1
- 229940125798 integrin inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 230000008611 intercellular interaction Effects 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- 229940047124 interferons Drugs 0.000 description 1
- 229940100601 interleukin-6 Drugs 0.000 description 1
- 208000028774 intestinal disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007154 intracellular accumulation Effects 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 239000001573 invertase Substances 0.000 description 1
- 235000011073 invertase Nutrition 0.000 description 1
- 229940036646 iodine-131-tositumomab Drugs 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 229960004768 irinotecan Drugs 0.000 description 1
- MVZXTUSAYBWAAM-UHFFFAOYSA-N iron;sulfuric acid Chemical compound [Fe].OS(O)(=O)=O MVZXTUSAYBWAAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000002551 irritable bowel syndrome Diseases 0.000 description 1
- 239000002973 irritant agent Substances 0.000 description 1
- 239000012948 isocyanate Substances 0.000 description 1
- 150000002513 isocyanates Chemical class 0.000 description 1
- 229960001268 isoetarine Drugs 0.000 description 1
- YWXYYJSYQOXTPL-SLPGGIOYSA-N isosorbide mononitrate Chemical compound [O-][N+](=O)O[C@@H]1CO[C@@H]2[C@@H](O)CO[C@@H]21 YWXYYJSYQOXTPL-SLPGGIOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007803 itching Effects 0.000 description 1
- SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N kanamycin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N SBUJHOSQTJFQJX-NOAMYHISSA-N 0.000 description 1
- 229960000318 kanamycin Drugs 0.000 description 1
- 229930027917 kanamycin Natural products 0.000 description 1
- 229930182823 kanamycin A Natural products 0.000 description 1
- 206010023332 keratitis Diseases 0.000 description 1
- ZKLLSNQJRLJIGT-UYFOZJQFSA-N keto-D-fructose 1-phosphate Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C(=O)COP(O)(O)=O ZKLLSNQJRLJIGT-UYFOZJQFSA-N 0.000 description 1
- 125000000468 ketone group Chemical group 0.000 description 1
- DKYWVDODHFEZIM-UHFFFAOYSA-N ketoprofen Chemical compound OC(=O)C(C)C1=CC=CC(C(=O)C=2C=CC=CC=2)=C1 DKYWVDODHFEZIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000991 ketoprofen Drugs 0.000 description 1
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 229940043355 kinase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- TYQCGQRIZGCHNB-JLAZNSOCSA-N l-ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(O)=C(O)C1=O TYQCGQRIZGCHNB-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 1
- 239000000832 lactitol Substances 0.000 description 1
- 235000010448 lactitol Nutrition 0.000 description 1
- VQHSOMBJVWLPSR-JVCRWLNRSA-N lactitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]([C@H](O)CO)O[C@@H]1O[C@H](CO)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O VQHSOMBJVWLPSR-JVCRWLNRSA-N 0.000 description 1
- 229960003451 lactitol Drugs 0.000 description 1
- CWPGNVFCJOPXFB-UHFFFAOYSA-N lapachol Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(=O)C(CC=C(C)C)=C(O)C2=C1 CWPGNVFCJOPXFB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SIUGQQMOYSVTAT-UHFFFAOYSA-N lapachol Natural products CC(=CCC1C(O)C(=O)c2ccccc2C1=O)C SIUGQQMOYSVTAT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004891 lapatinib Drugs 0.000 description 1
- 229960001320 lapatinib ditosylate Drugs 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 1
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 1
- 229940091348 latex Drugs 0.000 description 1
- 235000021374 legumes Nutrition 0.000 description 1
- 229940115286 lentinan Drugs 0.000 description 1
- 229960003881 letrozole Drugs 0.000 description 1
- 239000003199 leukotriene receptor blocking agent Substances 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960001078 lithium Drugs 0.000 description 1
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 1
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 1
- 229960002247 lomustine Drugs 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 229960003088 loratadine Drugs 0.000 description 1
- JCCNYMKQOSZNPW-UHFFFAOYSA-N loratadine Chemical compound C1CN(C(=O)OCC)CCC1=C1C2=NC=CC=C2CCC2=CC(Cl)=CC=C21 JCCNYMKQOSZNPW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YROQEQPFUCPDCP-UHFFFAOYSA-N losoxantrone Chemical compound OCCNCCN1N=C2C3=CC=CC(O)=C3C(=O)C3=C2C1=CC=C3NCCNCCO YROQEQPFUCPDCP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950008745 losoxantrone Drugs 0.000 description 1
- 101150074251 lpp gene Proteins 0.000 description 1
- 210000005265 lung cell Anatomy 0.000 description 1
- 108010078259 luprolide acetate gel depot Proteins 0.000 description 1
- 229940087857 lupron Drugs 0.000 description 1
- RVFGKBWWUQOIOU-NDEPHWFRSA-N lurtotecan Chemical compound O=C([C@]1(O)CC)OCC(C(N2CC3=4)=O)=C1C=C2C3=NC1=CC=2OCCOC=2C=C1C=4CN1CCN(C)CC1 RVFGKBWWUQOIOU-NDEPHWFRSA-N 0.000 description 1
- 229950002654 lurtotecan Drugs 0.000 description 1
- 210000002751 lymph Anatomy 0.000 description 1
- 230000001926 lymphatic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002535 lyotropic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002101 lytic effect Effects 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000002595 magnetic resonance imaging Methods 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N maleic acid Chemical compound OC(=O)\C=C/C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UPHRSURJSA-N 0.000 description 1
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 1
- 235000010449 maltitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000845 maltitol Substances 0.000 description 1
- VQHSOMBJVWLPSR-WUJBLJFYSA-N maltitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]([C@H](O)CO)O[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O VQHSOMBJVWLPSR-WUJBLJFYSA-N 0.000 description 1
- 229940035436 maltitol Drugs 0.000 description 1
- 229910052748 manganese Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011572 manganese Substances 0.000 description 1
- WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L manganese(2+);methyl n-[[2-(methoxycarbonylcarbamothioylamino)phenyl]carbamothioyl]carbamate;n-[2-(sulfidocarbothioylamino)ethyl]carbamodithioate Chemical compound [Mn+2].[S-]C(=S)NCCNC([S-])=S.COC(=O)NC(=S)NC1=CC=CC=C1NC(=S)NC(=O)OC WPBNNNQJVZRUHP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- MQXVYODZCMMZEM-ZYUZMQFOSA-N mannomustine Chemical compound ClCCNC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CNCCCl MQXVYODZCMMZEM-ZYUZMQFOSA-N 0.000 description 1
- 229950008612 mannomustine Drugs 0.000 description 1
- 229940099262 marinol Drugs 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000008774 maternal effect Effects 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 229940018415 meclizine hydrochloride Drugs 0.000 description 1
- HYYBABOKPJLUIN-UHFFFAOYSA-N mefenamic acid Chemical compound CC1=CC=CC(NC=2C(=CC=CC=2)C(O)=O)=C1C HYYBABOKPJLUIN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003464 mefenamic acid Drugs 0.000 description 1
- RQZAXGRLVPAYTJ-GQFGMJRRSA-N megestrol acetate Chemical compound C1=C(C)C2=CC(=O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@@](C(C)=O)(OC(=O)C)[C@@]1(C)CC2 RQZAXGRLVPAYTJ-GQFGMJRRSA-N 0.000 description 1
- 229960004296 megestrol acetate Drugs 0.000 description 1
- 229960001929 meloxicam Drugs 0.000 description 1
- SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N melphalan Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(N(CCCl)CCCl)C=C1 SGDBTWWWUNNDEQ-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- 229960001924 melphalan Drugs 0.000 description 1
- 210000003071 memory t lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000003475 metalloproteinase inhibitor Substances 0.000 description 1
- LMOINURANNBYCM-UHFFFAOYSA-N metaproterenol Chemical compound CC(C)NCC(O)C1=CC(O)=CC(O)=C1 LMOINURANNBYCM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QRMNENFZDDYDEF-GOSISDBHSA-N methyl (8s)-8-(bromomethyl)-2-methyl-4-(4-methylpiperazine-1-carbonyl)oxy-6-(5,6,7-trimethoxy-1h-indole-2-carbonyl)-7,8-dihydro-3h-pyrrolo[3,2-e]indole-1-carboxylate Chemical compound C1([C@H](CBr)CN(C1=C1)C(=O)C=2NC3=C(OC)C(OC)=C(OC)C=C3C=2)=C2C(C(=O)OC)=C(C)NC2=C1OC(=O)N1CCN(C)CC1 QRMNENFZDDYDEF-GOSISDBHSA-N 0.000 description 1
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 229960002216 methylparaben Drugs 0.000 description 1
- HPNSFSBZBAHARI-UHFFFAOYSA-N micophenolic acid Natural products OC1=C(CC=C(C)CCC(O)=O)C(OC)=C(C)C2=C1C(=O)OC2 HPNSFSBZBAHARI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010063344 microscopic polyangiitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000324 minimal toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 229960004023 minocycline Drugs 0.000 description 1
- 229960005485 mitobronitol Drugs 0.000 description 1
- 239000002829 mitogen activated protein kinase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 229960003539 mitoguazone Drugs 0.000 description 1
- MXWHMTNPTTVWDM-NXOFHUPFSA-N mitoguazone Chemical compound NC(N)=N\N=C(/C)\C=N\N=C(N)N MXWHMTNPTTVWDM-NXOFHUPFSA-N 0.000 description 1
- VFKZTMPDYBFSTM-GUCUJZIJSA-N mitolactol Chemical compound BrC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CBr VFKZTMPDYBFSTM-GUCUJZIJSA-N 0.000 description 1
- 229950010913 mitolactol Drugs 0.000 description 1
- 230000011278 mitosis Effects 0.000 description 1
- 229960000350 mitotane Drugs 0.000 description 1
- 230000000394 mitotic effect Effects 0.000 description 1
- 229940112801 mobic Drugs 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 229940035032 monophosphoryl lipid a Drugs 0.000 description 1
- 150000002772 monosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 229940126619 mouse monoclonal antibody Drugs 0.000 description 1
- 208000001725 mucocutaneous lymph node syndrome Diseases 0.000 description 1
- 229940035363 muscle relaxants Drugs 0.000 description 1
- 235000010460 mustard Nutrition 0.000 description 1
- 229960000951 mycophenolic acid Drugs 0.000 description 1
- 201000005962 mycosis fungoides Diseases 0.000 description 1
- 239000003158 myorelaxant agent Substances 0.000 description 1
- GNOLWGAJQVLBSM-UHFFFAOYSA-N n,n,5,7-tetramethyl-1,2,3,4-tetrahydronaphthalen-1-amine Chemical compound C1=C(C)C=C2C(N(C)C)CCCC2=C1C GNOLWGAJQVLBSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AZBFJBJXUQUQLF-UHFFFAOYSA-N n-(1,5-dimethylpyrrolidin-3-yl)pyrrolidine-1-carboxamide Chemical compound C1N(C)C(C)CC1NC(=O)N1CCCC1 AZBFJBJXUQUQLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XARUIGXAXZIPQE-UHFFFAOYSA-N n-(2,3-dihydro-1,4-benzodioxin-3-ylmethyl)propan-1-amine;hydrochloride Chemical compound Cl.C1=CC=C2OC(CNCCC)COC2=C1 XARUIGXAXZIPQE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IDINUJSAMVOPCM-INIZCTEOSA-N n-[(1s)-2-[4-(3-aminopropylamino)butylamino]-1-hydroxy-2-oxoethyl]-7-(diaminomethylideneamino)heptanamide Chemical compound NCCCNCCCCNC(=O)[C@H](O)NC(=O)CCCCCCN=C(N)N IDINUJSAMVOPCM-INIZCTEOSA-N 0.000 description 1
- BLCLNMBMMGCOAS-UHFFFAOYSA-N n-[1-[[1-[[1-[[1-[[1-[[1-[[1-[2-[(carbamoylamino)carbamoyl]pyrrolidin-1-yl]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[(2-methylpropan-2-yl)oxy]-1-oxopropan-2-yl]amino]-3-(4-hydroxyphenyl)-1-oxopropan-2-yl]amin Chemical compound C1CCC(C(=O)NNC(N)=O)N1C(=O)C(CCCN=C(N)N)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(COC(C)(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CO)NC(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)C(CC=1NC=NC=1)NC(=O)C1NC(=O)CC1)CC1=CC=C(O)C=C1 BLCLNMBMMGCOAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N n-[3-[[6-[3-(trifluoromethyl)anilino]pyrimidin-4-yl]amino]phenyl]cyclopropanecarboxamide Chemical compound FC(F)(F)C1=CC=CC(NC=2N=CN=C(NC=3C=C(NC(=O)C4CC4)C=CC=3)C=2)=C1 YOHYSYJDKVYCJI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OWIUPIRUAQMTTK-UHFFFAOYSA-M n-aminocarbamate Chemical compound NNC([O-])=O OWIUPIRUAQMTTK-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- IJDNQMDRQITEOD-UHFFFAOYSA-N n-butane Chemical compound CCCC IJDNQMDRQITEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N n-pentane Natural products CCCCC OFBQJSOFQDEBGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XGXNTJHZPBRBHJ-UHFFFAOYSA-N n-phenylpyrimidin-2-amine Chemical class N=1C=CC=NC=1NC1=CC=CC=C1 XGXNTJHZPBRBHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004270 nabumetone Drugs 0.000 description 1
- 229960002009 naproxen Drugs 0.000 description 1
- CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-N naproxen Chemical compound C1=C([C@H](C)C(O)=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CMWTZPSULFXXJA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 229960003940 naproxen sodium Drugs 0.000 description 1
- CDBRNDSHEYLDJV-FVGYRXGTSA-M naproxen sodium Chemical compound [Na+].C1=C([C@H](C)C([O-])=O)C=CC2=CC(OC)=CC=C21 CDBRNDSHEYLDJV-FVGYRXGTSA-M 0.000 description 1
- 229960005027 natalizumab Drugs 0.000 description 1
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 1
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 description 1
- 229940086322 navelbine Drugs 0.000 description 1
- 208000004995 necrotizing enterocolitis Diseases 0.000 description 1
- 230000021766 negative regulation of B cell proliferation Effects 0.000 description 1
- MQYXUWHLBZFQQO-UHFFFAOYSA-N nepehinol Natural products C1CC(O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C)CCC5(C)CCC(C(=C)C)C5C4CCC3C21C MQYXUWHLBZFQQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000008383 nephritis Diseases 0.000 description 1
- 230000002232 neuromuscular Effects 0.000 description 1
- 239000002858 neurotransmitter agent Substances 0.000 description 1
- 230000003472 neutralizing effect Effects 0.000 description 1
- 229960002653 nilutamide Drugs 0.000 description 1
- XWXYUMMDTVBTOU-UHFFFAOYSA-N nilutamide Chemical compound O=C1C(C)(C)NC(=O)N1C1=CC=C([N+]([O-])=O)C(C(F)(F)F)=C1 XWXYUMMDTVBTOU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001420 nimustine Drugs 0.000 description 1
- VFEDRRNHLBGPNN-UHFFFAOYSA-N nimustine Chemical compound CC1=NC=C(CNC(=O)N(CCCl)N=O)C(N)=N1 VFEDRRNHLBGPNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940085033 nolvadex Drugs 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 230000001293 nucleolytic effect Effects 0.000 description 1
- 239000002777 nucleoside Substances 0.000 description 1
- 150000003833 nucleoside derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000014571 nuts Nutrition 0.000 description 1
- 238000002515 oligonucleotide synthesis Methods 0.000 description 1
- 229960000470 omalizumab Drugs 0.000 description 1
- 229940127240 opiate Drugs 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 201000005737 orchitis Diseases 0.000 description 1
- 229960002657 orciprenaline Drugs 0.000 description 1
- 230000004768 organ dysfunction Effects 0.000 description 1
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 1
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 239000011368 organic material Substances 0.000 description 1
- 230000002138 osteoinductive effect Effects 0.000 description 1
- 210000004681 ovum Anatomy 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 150000002923 oximes Chemical class 0.000 description 1
- 229960000649 oxyphenbutazone Drugs 0.000 description 1
- HFHZKZSRXITVMK-UHFFFAOYSA-N oxyphenbutazone Chemical compound O=C1C(CCCC)C(=O)N(C=2C=CC=CC=2)N1C1=CC=C(O)C=C1 HFHZKZSRXITVMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N p-hydroxybenzoic acid methyl ester Natural products COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000006174 pH buffer Substances 0.000 description 1
- 210000002741 palatine tonsil Anatomy 0.000 description 1
- 229940046231 pamidronate Drugs 0.000 description 1
- 206010033675 panniculitis Diseases 0.000 description 1
- 229940055729 papain Drugs 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 229960005489 paracetamol Drugs 0.000 description 1
- 239000000199 parathyroid hormone Substances 0.000 description 1
- 229960001319 parathyroid hormone Drugs 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 231100000255 pathogenic effect Toxicity 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 1
- WBXPDJSOTKVWSJ-ZDUSSCGKSA-N pemetrexed Chemical compound C=1NC=2NC(N)=NC(=O)C=2C=1CCC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 WBXPDJSOTKVWSJ-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- 229960005079 pemetrexed Drugs 0.000 description 1
- 201000001976 pemphigus vulgaris Diseases 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 229950009506 penicillinase Drugs 0.000 description 1
- 229960002340 pentostatin Drugs 0.000 description 1
- FPVKHBSQESCIEP-JQCXWYLXSA-N pentostatin Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(N=CNC[C@H]2O)=C2N=C1 FPVKHBSQESCIEP-JQCXWYLXSA-N 0.000 description 1
- 229960001476 pentoxifylline Drugs 0.000 description 1
- 229940111202 pepsin Drugs 0.000 description 1
- 239000000813 peptide hormone Substances 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 125000001151 peptidyl group Chemical group 0.000 description 1
- 201000006195 perinatal necrotizing enterocolitis Diseases 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 108010076042 phenomycin Proteins 0.000 description 1
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000008729 phenylalanine Nutrition 0.000 description 1
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 1
- 101150009573 phoA gene Proteins 0.000 description 1
- 239000002571 phosphodiesterase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 239000003757 phosphotransferase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000001766 physiological effect Effects 0.000 description 1
- 230000008288 physiological mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- NUKCGLDCWQXYOQ-UHFFFAOYSA-N piposulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCC(=O)N1CCN(C(=O)CCOS(C)(=O)=O)CC1 NUKCGLDCWQXYOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950001100 piposulfan Drugs 0.000 description 1
- 229960005414 pirbuterol Drugs 0.000 description 1
- 229960002702 piroxicam Drugs 0.000 description 1
- QYSPLQLAKJAUJT-UHFFFAOYSA-N piroxicam Chemical compound OC=1C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)N(C)C=1C(=O)NC1=CC=CC=N1 QYSPLQLAKJAUJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003123 plant toxin Substances 0.000 description 1
- 150000003057 platinum Chemical class 0.000 description 1
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 1
- QVLTXCYWHPZMCA-UHFFFAOYSA-N po4-po4 Chemical compound OP(O)(O)=O.OP(O)(O)=O QVLTXCYWHPZMCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960001237 podophyllotoxin Drugs 0.000 description 1
- YJGVMLPVUAXIQN-XVVDYKMHSA-N podophyllotoxin Chemical compound COC1=C(OC)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@H](O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 YJGVMLPVUAXIQN-XVVDYKMHSA-N 0.000 description 1
- YVCVYCSAAZQOJI-UHFFFAOYSA-N podophyllotoxin Natural products COC1=C(O)C(OC)=CC(C2C3=CC=4OCOC=4C=C3C(O)C3C2C(OC3)=O)=C1 YVCVYCSAAZQOJI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002401 polyacrylamide Polymers 0.000 description 1
- 108010064470 polyaspartate Proteins 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 1
- 208000005987 polymyositis Diseases 0.000 description 1
- 230000007824 polyneuropathy Effects 0.000 description 1
- 229920005862 polyol Polymers 0.000 description 1
- 150000003077 polyols Chemical class 0.000 description 1
- 229920001296 polysiloxane Polymers 0.000 description 1
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960003975 potassium Drugs 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 229960004694 prednimustine Drugs 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 150000003141 primary amines Chemical class 0.000 description 1
- 210000005211 primary lymphoid organ Anatomy 0.000 description 1
- 201000000742 primary sclerosing cholangitis Diseases 0.000 description 1
- MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N procaine Chemical compound CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004919 procaine Drugs 0.000 description 1
- CPTBDICYNRMXFX-UHFFFAOYSA-N procarbazine Chemical compound CNNCC1=CC=C(C(=O)NC(C)C)C=C1 CPTBDICYNRMXFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000624 procarbazine Drugs 0.000 description 1
- 230000003623 progesteronic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- 230000005522 programmed cell death Effects 0.000 description 1
- 210000001236 prokaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940097325 prolactin Drugs 0.000 description 1
- 229940087463 proleukin Drugs 0.000 description 1
- 230000009696 proliferative response Effects 0.000 description 1
- 229960003910 promethazine Drugs 0.000 description 1
- 239000001294 propane Substances 0.000 description 1
- 235000010232 propyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004405 propyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 1
- 229960003415 propylparaben Drugs 0.000 description 1
- 108010087851 prorelaxin Proteins 0.000 description 1
- 239000002599 prostaglandin synthase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 235000019833 protease Nutrition 0.000 description 1
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 1
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 1
- 238000001243 protein synthesis Methods 0.000 description 1
- 230000012743 protein tagging Effects 0.000 description 1
- 230000017854 proteolysis Effects 0.000 description 1
- WOLQREOUPKZMEX-UHFFFAOYSA-N pteroyltriglutamic acid Chemical compound C=1N=C2NC(N)=NC(=O)C2=NC=1CNC1=CC=C(C(=O)NC(CCC(=O)NC(CCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(O)=O)C(O)=O)C(O)=O)C=C1 WOLQREOUPKZMEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 1
- 239000000649 purine antagonist Substances 0.000 description 1
- 229950010131 puromycin Drugs 0.000 description 1
- 238000010791 quenching Methods 0.000 description 1
- 230000000171 quenching effect Effects 0.000 description 1
- UOWVMDUEMSNCAV-WYENRQIDSA-N rachelmycin Chemical compound C1([C@]23C[C@@H]2CN1C(=O)C=1NC=2C(OC)=C(O)C4=C(C=2C=1)CCN4C(=O)C1=CC=2C=4CCN(C=4C(O)=C(C=2N1)OC)C(N)=O)=CC(=O)C1=C3C(C)=CN1 UOWVMDUEMSNCAV-WYENRQIDSA-N 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 1
- 235000009736 ragweed Nutrition 0.000 description 1
- 229960004622 raloxifene Drugs 0.000 description 1
- 238000002708 random mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 229960002185 ranimustine Drugs 0.000 description 1
- BMKDZUISNHGIBY-UHFFFAOYSA-N razoxane Chemical compound C1C(=O)NC(=O)CN1C(C)CN1CC(=O)NC(=O)C1 BMKDZUISNHGIBY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000460 razoxane Drugs 0.000 description 1
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 1
- 229940044551 receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- 239000002464 receptor antagonist Substances 0.000 description 1
- 230000000306 recurrent effect Effects 0.000 description 1
- 230000022983 regulation of cell cycle Effects 0.000 description 1
- 210000005227 renal system Anatomy 0.000 description 1
- 230000003362 replicative effect Effects 0.000 description 1
- 229930002330 retinoic acid Natural products 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- 201000003068 rheumatic fever Diseases 0.000 description 1
- OWPCHSCAPHNHAV-LMONGJCWSA-N rhizoxin Chemical compound C/C([C@H](OC)[C@@H](C)[C@@H]1C[C@H](O)[C@]2(C)O[C@@H]2/C=C/[C@@H](C)[C@]2([H])OC(=O)C[C@@](C2)(C[C@@H]2O[C@H]2C(=O)O1)[H])=C\C=C\C(\C)=C\C1=COC(C)=N1 OWPCHSCAPHNHAV-LMONGJCWSA-N 0.000 description 1
- 229940089617 risedronate Drugs 0.000 description 1
- HJORMJIFDVBMOB-UHFFFAOYSA-N rolipram Chemical compound COC1=CC=C(C2CC(=O)NC2)C=C1OC1CCCC1 HJORMJIFDVBMOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950005741 rolipram Drugs 0.000 description 1
- MBABCNBNDNGODA-WPZDJQSSSA-N rolliniastatin 1 Natural products O1[C@@H]([C@@H](O)CCCCCCCCCC)CC[C@H]1[C@H]1O[C@@H]([C@H](O)CCCCCCCCCC[C@@H](O)CC=2C(O[C@@H](C)C=2)=O)CC1 MBABCNBNDNGODA-WPZDJQSSSA-N 0.000 description 1
- IMUQLZLGWJSVMV-UOBFQKKOSA-N roridin A Natural products CC(O)C1OCCC(C)C(O)C(=O)OCC2CC(=CC3OC4CC(OC(=O)C=C/C=C/1)C(C)(C23)C45CO5)C IMUQLZLGWJSVMV-UOBFQKKOSA-N 0.000 description 1
- VHXNKPBCCMUMSW-FQEVSTJZSA-N rubitecan Chemical compound C1=CC([N+]([O-])=O)=C2C=C(CN3C4=CC5=C(C3=O)COC(=O)[C@]5(O)CC)C4=NC2=C1 VHXNKPBCCMUMSW-FQEVSTJZSA-N 0.000 description 1
- 229960002052 salbutamol Drugs 0.000 description 1
- 229960004017 salmeterol Drugs 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 201000000306 sarcoidosis Diseases 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 208000010157 sclerosing cholangitis Diseases 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 210000000717 sertoli cell Anatomy 0.000 description 1
- 206010040400 serum sickness Diseases 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 238000004904 shortening Methods 0.000 description 1
- 208000013220 shortness of breath Diseases 0.000 description 1
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 1
- 239000000377 silicon dioxide Substances 0.000 description 1
- 230000003007 single stranded DNA break Effects 0.000 description 1
- 229940112726 skelid Drugs 0.000 description 1
- PTLRDCMBXHILCL-UHFFFAOYSA-M sodium arsenite Chemical compound [Na+].[O-][As]=O PTLRDCMBXHILCL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- MKNJJMHQBYVHRS-UHFFFAOYSA-M sodium;1-[11-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)undecanoyloxy]-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonate Chemical compound [Na+].O=C1C(S(=O)(=O)[O-])CC(=O)N1OC(=O)CCCCCCCCCCN1C(=O)C=CC1=O MKNJJMHQBYVHRS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- VUFNRPJNRFOTGK-UHFFFAOYSA-M sodium;1-[4-[(2,5-dioxopyrrol-1-yl)methyl]cyclohexanecarbonyl]oxy-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonate Chemical compound [Na+].O=C1C(S(=O)(=O)[O-])CC(=O)N1OC(=O)C1CCC(CN2C(C=CC2=O)=O)CC1 VUFNRPJNRFOTGK-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- MIDXXTLMKGZDPV-UHFFFAOYSA-M sodium;1-[6-(2,5-dioxopyrrol-1-yl)hexanoyloxy]-2,5-dioxopyrrolidine-3-sulfonate Chemical compound [Na+].O=C1C(S(=O)(=O)[O-])CC(=O)N1OC(=O)CCCCCN1C(=O)C=CC1=O MIDXXTLMKGZDPV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- JGMJQSFLQWGYMQ-UHFFFAOYSA-M sodium;2,6-dichloro-n-phenylaniline;acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O.ClC1=CC=CC(Cl)=C1NC1=CC=CC=C1 JGMJQSFLQWGYMQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940087854 solu-medrol Drugs 0.000 description 1
- 210000001082 somatic cell Anatomy 0.000 description 1
- 229950006315 spirogermanium Drugs 0.000 description 1
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 1
- ICXJVZHDZFXYQC-UHFFFAOYSA-N spongistatin 1 Natural products OC1C(O2)(O)CC(O)C(C)C2CCCC=CC(O2)CC(O)CC2(O2)CC(OC)CC2CC(=O)C(C)C(OC(C)=O)C(C)C(=C)CC(O2)CC(C)(O)CC2(O2)CC(OC(C)=O)CC2CC(=O)OC2C(O)C(CC(=C)CC(O)C=CC(Cl)=C)OC1C2C ICXJVZHDZFXYQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 230000000087 stabilizing effect Effects 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- SFVFIFLLYFPGHH-UHFFFAOYSA-M stearalkonium chloride Chemical compound [Cl-].CCCCCCCCCCCCCCCCCC[N+](C)(C)CC1=CC=CC=C1 SFVFIFLLYFPGHH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 208000003265 stomatitis Diseases 0.000 description 1
- 229960004533 streptodornase Drugs 0.000 description 1
- 229960005202 streptokinase Drugs 0.000 description 1
- 229960001052 streptozocin Drugs 0.000 description 1
- ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N streptozocin Chemical compound O=NN(C)C(=O)N[C@H]1[C@@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O ZSJLQEPLLKMAKR-GKHCUFPYSA-N 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 1
- 229940014800 succinic anhydride Drugs 0.000 description 1
- JJAHTWIKCUJRDK-UHFFFAOYSA-N succinimidyl 4-(N-maleimidomethyl)cyclohexane-1-carboxylate Chemical compound C1CC(CN2C(C=CC2=O)=O)CCC1C(=O)ON1C(=O)CCC1=O JJAHTWIKCUJRDK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 108060007951 sulfatase Proteins 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- MLKXDPUZXIRXEP-MFOYZWKCSA-N sulindac Chemical compound CC1=C(CC(O)=O)C2=CC(F)=CC=C2\C1=C/C1=CC=C(S(C)=O)C=C1 MLKXDPUZXIRXEP-MFOYZWKCSA-N 0.000 description 1
- 229960000894 sulindac Drugs 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 238000004114 suspension culture Methods 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 238000007910 systemic administration Methods 0.000 description 1
- 229940065721 systemic for obstructive airway disease xanthines Drugs 0.000 description 1
- 229960001967 tacrolimus Drugs 0.000 description 1
- AYUNIORJHRXIBJ-TXHRRWQRSA-N tanespimycin Chemical compound N1C(=O)\C(C)=C\C=C/[C@H](OC)[C@@H](OC(N)=O)\C(C)=C\[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](OC)C[C@H](C)CC2=C(NCC=C)C(=O)C=C1C2=O AYUNIORJHRXIBJ-TXHRRWQRSA-N 0.000 description 1
- 229950007866 tanespimycin Drugs 0.000 description 1
- 229960001674 tegafur Drugs 0.000 description 1
- WFWLQNSHRPWKFK-ZCFIWIBFSA-N tegafur Chemical compound O=C1NC(=O)C(F)=CN1[C@@H]1OCCC1 WFWLQNSHRPWKFK-ZCFIWIBFSA-N 0.000 description 1
- 229960003676 tenidap Drugs 0.000 description 1
- LXIKEPCNDFVJKC-QXMHVHEDSA-N tenidap Chemical compound C12=CC(Cl)=CC=C2N(C(=O)N)C(=O)\C1=C(/O)C1=CC=CS1 LXIKEPCNDFVJKC-QXMHVHEDSA-N 0.000 description 1
- NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N teniposide Chemical compound COC1=C(O)C(OC)=CC([C@@H]2C3=CC=4OCOC=4C=C3[C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@@H]4O[C@@H](OC[C@H]4O3)C=3SC=CC=3)O)[C@@H]3[C@@H]2C(OC3)=O)=C1 NRUKOCRGYNPUPR-QBPJDGROSA-N 0.000 description 1
- 229960001278 teniposide Drugs 0.000 description 1
- 229960002871 tenoxicam Drugs 0.000 description 1
- WZWYJBNHTWCXIM-UHFFFAOYSA-N tenoxicam Chemical compound O=C1C=2SC=CC=2S(=O)(=O)N(C)C1=C(O)NC1=CC=CC=N1 WZWYJBNHTWCXIM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000351 terfenadine Drugs 0.000 description 1
- 125000000999 tert-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C(*)(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 229960005353 testolactone Drugs 0.000 description 1
- BPEWUONYVDABNZ-DZBHQSCQSA-N testolactone Chemical compound O=C1C=C[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)(OC(=O)CC4)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 BPEWUONYVDABNZ-DZBHQSCQSA-N 0.000 description 1
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 1
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 1
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 1
- 229960003433 thalidomide Drugs 0.000 description 1
- 229960004559 theobromine Drugs 0.000 description 1
- 229960000278 theophylline Drugs 0.000 description 1
- SRVJKTDHMYAMHA-WUXMJOGZSA-N thioacetazone Chemical compound CC(=O)NC1=CC=C(\C=N\NC(N)=S)C=C1 SRVJKTDHMYAMHA-WUXMJOGZSA-N 0.000 description 1
- 229960001196 thiotepa Drugs 0.000 description 1
- 230000003582 thrombocytopenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002992 thymic effect Effects 0.000 description 1
- 229960002175 thyroglobulin Drugs 0.000 description 1
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 1
- 229940034208 thyroxine Drugs 0.000 description 1
- XUIIKFGFIJCVMT-UHFFFAOYSA-N thyroxine-binding globulin Natural products IC1=CC(CC([NH3+])C([O-])=O)=CC(I)=C1OC1=CC(I)=C(O)C(I)=C1 XUIIKFGFIJCVMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YFTWHEBLORWGNI-UHFFFAOYSA-N tiamiprine Chemical compound CN1C=NC([N+]([O-])=O)=C1SC1=NC(N)=NC2=C1NC=N2 YFTWHEBLORWGNI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950011457 tiamiprine Drugs 0.000 description 1
- 229960001312 tiaprofenic acid Drugs 0.000 description 1
- 229940019375 tiludronate Drugs 0.000 description 1
- 229960001017 tolmetin Drugs 0.000 description 1
- UPSPUYADGBWSHF-UHFFFAOYSA-N tolmetin Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1C(=O)C1=CC=C(CC(O)=O)N1C UPSPUYADGBWSHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002044 tolmetin sodium Drugs 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 229940044693 topoisomerase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012581 transferrin Substances 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 1
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 1
- 230000014621 translational initiation Effects 0.000 description 1
- 108091007466 transmembrane glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- IUCJMVBFZDHPDX-UHFFFAOYSA-N tretamine Chemical compound C1CN1C1=NC(N2CC2)=NC(N2CC2)=N1 IUCJMVBFZDHPDX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229950001353 tretamine Drugs 0.000 description 1
- 229960001727 tretinoin Drugs 0.000 description 1
- 229960002117 triamcinolone acetonide Drugs 0.000 description 1
- YNDXUCZADRHECN-JNQJZLCISA-N triamcinolone acetonide Chemical compound C1CC2=CC(=O)C=C[C@]2(C)[C@]2(F)[C@@H]1[C@@H]1C[C@H]3OC(C)(C)O[C@@]3(C(=O)CO)[C@@]1(C)C[C@@H]2O YNDXUCZADRHECN-JNQJZLCISA-N 0.000 description 1
- PXSOHRWMIRDKMP-UHFFFAOYSA-N triaziquone Chemical compound O=C1C(N2CC2)=C(N2CC2)C(=O)C=C1N1CC1 PXSOHRWMIRDKMP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004560 triaziquone Drugs 0.000 description 1
- 150000003628 tricarboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000001960 triggered effect Effects 0.000 description 1
- KVJXBPDAXMEYOA-CXANFOAXSA-N trilostane Chemical compound OC1=C(C#N)C[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CC[C@@]32O[C@@H]31 KVJXBPDAXMEYOA-CXANFOAXSA-N 0.000 description 1
- 229960001670 trilostane Drugs 0.000 description 1
- 229950000212 trioxifene Drugs 0.000 description 1
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 description 1
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 description 1
- UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-I triphosphate(5-) Chemical compound [O-]P([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 1
- CBEQULMOCCWAQT-WOJGMQOQSA-N triprolidine Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1C(\C=1N=CC=CC=1)=C/CN1CCCC1 CBEQULMOCCWAQT-WOJGMQOQSA-N 0.000 description 1
- 229960001128 triprolidine Drugs 0.000 description 1
- YFTHZRPMJXBUME-UHFFFAOYSA-N tripropylamine Chemical compound CCCN(CCC)CCC YFTHZRPMJXBUME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000875 trofosfamide Drugs 0.000 description 1
- UMKFEPPTGMDVMI-UHFFFAOYSA-N trofosfamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)OCCCN1CCCl UMKFEPPTGMDVMI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RXRGZNYSEHTMHC-BQBZGAKWSA-N troxacitabine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1O[C@@H](CO)OC1 RXRGZNYSEHTMHC-BQBZGAKWSA-N 0.000 description 1
- 229950010147 troxacitabine Drugs 0.000 description 1
- 201000002311 trypanosomiasis Diseases 0.000 description 1
- 239000002753 trypsin inhibitor Substances 0.000 description 1
- HDZZVAMISRMYHH-LITAXDCLSA-N tubercidin Chemical compound C1=CC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@@H](CO)[C@H](O)[C@H]1O HDZZVAMISRMYHH-LITAXDCLSA-N 0.000 description 1
- 102000003298 tumor necrosis factor receptor Human genes 0.000 description 1
- 108010087967 type I signal peptidase Proteins 0.000 description 1
- 229950009811 ubenimex Drugs 0.000 description 1
- 241000701447 unidentified baculovirus Species 0.000 description 1
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 1
- 229940035893 uracil Drugs 0.000 description 1
- VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N uroanthelone Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)C(C)C)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N 0.000 description 1
- 229960002004 valdecoxib Drugs 0.000 description 1
- 239000012808 vapor phase Substances 0.000 description 1
- 239000002525 vasculotropin inhibitor Substances 0.000 description 1
- 231100000611 venom Toxicity 0.000 description 1
- GBABOYUKABKIAF-IELIFDKJSA-N vinorelbine Chemical compound C1N(CC=2C3=CC=CC=C3NC=22)CC(CC)=C[C@H]1C[C@]2(C(=O)OC)C1=CC([C@]23[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]4(CC)C=CCN([C@H]34)CC2)(O)C(=O)OC)N2C)=C2C=C1OC GBABOYUKABKIAF-IELIFDKJSA-N 0.000 description 1
- 229960002066 vinorelbine Drugs 0.000 description 1
- CILBMBUYJCWATM-PYGJLNRPSA-N vinorelbine ditartrate Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O.OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O.C1N(CC=2C3=CC=CC=C3NC=22)CC(CC)=C[C@H]1C[C@]2(C(=O)OC)C1=CC([C@]23[C@H]([C@@]([C@H](OC(C)=O)[C@]4(CC)C=CCN([C@H]34)CC2)(O)C(=O)OC)N2C)=C2C=C1OC CILBMBUYJCWATM-PYGJLNRPSA-N 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- XLMPPFTZALNBFS-INIZCTEOSA-N vorozole Chemical compound C1([C@@H](C2=CC=C3N=NN(C3=C2)C)N2N=CN=C2)=CC=C(Cl)C=C1 XLMPPFTZALNBFS-INIZCTEOSA-N 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-OUBTZVSYSA-N water-17o Chemical compound [17OH2] XLYOFNOQVPJJNP-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 230000029663 wound healing Effects 0.000 description 1
- 229940053867 xeloda Drugs 0.000 description 1
- 239000000811 xylitol Substances 0.000 description 1
- 235000010447 xylitol Nutrition 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N xylitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-SCDXWVJYSA-N 0.000 description 1
- 229960002675 xylitol Drugs 0.000 description 1
- 229910052727 yttrium Inorganic materials 0.000 description 1
- VWQVUPCCIRVNHF-UHFFFAOYSA-N yttrium atom Chemical compound [Y] VWQVUPCCIRVNHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Substances 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940002005 zometa Drugs 0.000 description 1
- FBTUMDXHSRTGRV-ALTNURHMSA-N zorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(\C)=N\NC(=O)C=1C=CC=CC=1)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 FBTUMDXHSRTGRV-ALTNURHMSA-N 0.000 description 1
- 229960000641 zorubicin Drugs 0.000 description 1
- 150000003952 β-lactams Chemical class 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/42—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins
- C07K16/4283—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins against an allotypic or isotypic determinant on Ig
- C07K16/4291—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins against an allotypic or isotypic determinant on Ig against IgE
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
- C07K16/42—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New or modified breeds of animals
- A01K67/027—New or modified breeds of vertebrates
- A01K67/0275—Genetically modified vertebrates, e.g. transgenic
- A01K67/0278—Knock-in vertebrates, e.g. humanised vertebrates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
- A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/02—Nasal agents, e.g. decongestants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
- A61P11/06—Antiasthmatics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/10—Drugs for disorders of the urinary system of the bladder
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
- A61P17/04—Antipruritics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/10—Antimycotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P33/00—Antiparasitic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/02—Immunomodulators
- A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
- A61P37/08—Antiallergic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2217/00—Genetically modified animals
- A01K2217/07—Animals genetically altered by homologous recombination
- A01K2217/072—Animals genetically altered by homologous recombination maintaining or altering function, i.e. knock in
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2227/00—Animals characterised by species
- A01K2227/10—Mammal
- A01K2227/105—Murine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2267/00—Animals characterised by purpose
- A01K2267/03—Animal model, e.g. for test or diseases
- A01K2267/035—Animal model for multifactorial diseases
- A01K2267/0387—Animal model for diseases of the immune system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
- C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/40—Immunoglobulins specific features characterized by post-translational modification
- C07K2317/41—Glycosylation, sialylation, or fucosylation
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
- C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
- C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Public Health (AREA)
- Immunology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pulmonology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Physical Education & Sports Medicine (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Otolaryngology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Mycology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Настоящее изобретение относится к области иммунологии. Предложено антитело, специфично связывающее сегмент M1' IgE и которое индуцирует апоптоз в экспрессирующих IgE В-клетках, и его антигенсвязывающий фрагмент. Также рассмотрены композиции и способы лечения опосредуемого IgE нарушения, изделие, способ специфического устранения продуцирующих IgE В-клеток, способы профилактики и снижения индуцируемой аллергеном продукции IgE, а также выделенная нуклеиновая кислота, вектор экспрессии, клетка-хозяин и способ получения антитела по изобретению с их использованием. Настоящее изобретение может найти дальнейшее применение в терапии заболеваний, ассоциированных с IgE. 17 н. и 29 з.п. ф-лы, 19 ил., 5 табл., 13 пр.
Description
Обратное действие
По данному изобретению испрашивается приоритет согласно 35 U.S.C. § 119 (e) по U.S.S.N. 60/896339, поданной 22 марта 2007 года.
Уровень техники, к которому относится изобретение
Область изобретения
Настоящее изобретение относится к апоптотическим антителам против IgE, кодирующим их нуклеиновым кислотам, их терапевтическим композициям и к их применению для лечения опосредуемых IgE нарушений.
Описание связанной области
Аллергия относится к определенным заболеваниям, при которых иммунные ответы на антигены окружающей среды вызывают воспаление ткани и дисфункцию органа. Клинические проявления каждого аллергического заболевания отражают иммунологически индуцированный воспалительный ответ в вовлеченном органе или ткани. Эти проявления, как правило, не зависят от химических или физических свойств антигена. Разнообразие аллергических ответов возникает вследствие вовлечения различных иммунологических эффекторных каскадов, каждый из которых создает уникальную картину воспаления.
Аллергия распространена по всему миру. Однако склонность к конкретным заболеваниям варьирует среди различных возрастных групп, полов и рас. Преобладание восприимчивости к конкретным аллергенам определяется как генетической предрасположенностью, так и географическими и культурными факторами, которые ответственны за воздействие аллергена. Клиническое состояние аллергии поражает только некоторых индивидов, которые встречаются с каждым аллергеном. Возникновение аллергического заболевания при воздействии аллергена требует не только предшествующей "сенсибилизации", но также других факторов, которые определяют локализацию реакции в конкретном органе.
Биологический процесс, который предшествует аллергическому заболеванию при воздействии аллергена, состоит в том, что аллерген индуцирует иммунный ответ, известный как "сенсибилизация" или фаза сенсибилизации. После сенсибилизации у индивида отсутствуют симптомы до тех пор, пока не произойдет последующее воздействие аллергена. Эффект сенсибилизации также известен как иммунная память.
Одним из первичных каскадов, индуцирующих воспаление, является каскад через иммуноглобулин E (IgE). IgE играет центральную роль в аллергии вследствие его роли в качестве рецептора аллергенов на поверхности тучных клеток и базофилов. Антитела IgE Fc-участком молекулы фиксируются к высокоаффинному рецептору клеточной поверхности, называемому FcεRI, на поверхности тучных клеток и базофилов. Аллергическая реакция начинается, когда поливалентная молекула аллергена связывается с антителами, которые оккупируют эти рецепторы. Результатом является связывание FcεRI, который, в свою очередь, дает внутриклеточный сигнал, вызывая высвобождение и активацию медиаторов воспаления: гистамина, лейкотриенов, хемотактических факторов, активирующего тромбоциты фактора и протеаз. Эти активированные медиаторы действуют локально и вызывают повышенную проницаемость сосудов, расширение сосудов, сокращение гладких мышц и секрецию слизистых желез. Такие события клинически называют немедленной или ранней фазой, и они происходят в пределах первых 15-30 минут после воздействия аллергена. В течение последующих 12 часов происходит прогрессирующая инфильтрация в ткани воспалительных клеток, протекающая от нейтрофилов к эозинофилам и к мононуклеарным клеткам в ответ на другие химические медиаторы, до конца не изученные. Этот период времени, составляющий 6-12 часов после воздействия аллергена, называют поздней фазой, и он характеризуется клиническими проявлениями клеточного воспаления. С учетом того, что эти реакции поздней фазы, особенно в легком, возникают в отсутствии реакций ранней фазы, все еще не понятно полностью, является ли реакция поздней фазы обязательно опосредуемой IgE.
IgE существует в мембраносвязанной форме и в секретируемой форме. Эти различные формы, по-видимому, являются вариантами сплайсинга. Предшествующие подходы для достижения терапевтического эффекта посредством подавления IgE направлены, главным образом, на секретируемую форму (например, XOLAIR®, омализумаб), чтобы предотвратить или нейтрализовать дальнейшее "вооружение" иммунной системы. Секретируемая форма IgE представляет собой более короткую форму, главным образом концы Fc-участка на CH4-домене (фиг.1), в то время как более длинная форма включает дополнительные C-концевые остатки, включающие пептиды, кодируемые экзонами, известными как М1/М1' и M2. В то время как было описано две различные формы мембраносвязанных IgE, как с сегментом из 52 аминокислот, известным как М1', так и без него [Batista et al., J. Exp. Med. 184: 2197-2205 (1996)], авторы не смогли подтвердить, что в мембраносвязанной форме отсутствует этот сегмент М1'. Общепринятая терапия антителами против IgE, которые связываются с секретируемой формой IgE, приводит к снижению свободных сывороточных, но не тотальных сывороточных IgE. Casale et al., J. Allergy Clin. Immunol. 100 (1): 110-121 (1997).
Кроме того, было отмечено, что в отсутствие сигнала от антигена B-клетки, рецепторы (т.е. иммуноглобулины) которых являются перекрестно связанными, подвержены апоптозу. Неожиданно авторы выявили, что нацеливание на М1'-сегмент IgE посредством антител против IgE может привести к индукции апоптоза B-клеток. Поскольку потомки активированных B-клеток могут привести к плазматическим клеткам, которые образуют и секретируют секретируемую форму IgE, устранение продуцирующих IgE B-клеток через апоптоз обеспечивает новый терапевтический подход для лечения аллергии.
Сущность изобретения
Настоящее изобретение относится к апоптотическим антителам против IgE, или их функциональным фрагментам, и к их применению для лечения опосредуемых IgE нарушений. Кроме того, изобретение относится к композициям и способам ингибирования продукции IgE и их секреции из B-клеток. Кроме того, изобретение относится к композициям и способам специфичного устранения продуцирующих IgE B-клеток и снижения тотального сывороточного IgE.
В одном варианте осуществления изобретение относится к антителу против IgE/М1', которое специфично связывает М1'-сегмент IgE и которое индуцирует апоптоз в экспрессирующих IgE B-клетках. В конкретном аспекте антитело специфично устраняет продуцирующие IgE B-клетки. В другом конкретном аспекте антитело снижает тотальный сывороточный IgE. В другом конкретном аспекте, антитело снижает как тотальный, так и свободный сывороточный IgE. В следующем конкретном аспекте сывороточный IgE является аллергенспецифичным. В следующем конкретном аспекте антитело связывается с IgE, источником которого является человек, макак-резус и яванский макак. В следующем конкретном аспекте антитело является химерным. В следующем конкретном аспекте антитело является гуманизированным. В следующем аспекте антитело представляет собой антитело человека.
В другом варианте осуществления изобретение относится к антителу против IgE/М1', которое специфично связывается с любым из эпитопов М1', соответствующих пептидам, представленным на фиг.5. В конкретном аспекте антитело специфично связывается с тем же эпитопом, что и эпитоп, связываемый антителом, выбранным из группы, состоящей из 47H4, 7A6, 26A11, 47H4v5, 7A6v1 и 26A11v6. В другом конкретном аспекте антитело связывается с эпитопом, соответствующим пептиду, выбранному из группы, состоящей из пептида 4 (SEQ ID NO:8), пептида 5 (SEQ ID NO:9), пептида 7 (SEQ ID NO:11) или пептида 8 (SEQ ID NO:12). В другом конкретном аспекте антитело связывается с пептидом 4 (SEQ ID NO:8).
В другом варианте осуществления изобретение относится к эпитопу М1' IgE, выбранному из группы, состоящей из пептида 4 (SEQ ID NO:8), пептида 5 (SEQ ID NO:9), пептида 7 (SEQ ID NO:11) или пептида 8 (SEQ ID NO:12). В конкретном аспекте пептид М1' представляет собой пептид 4 (SEQ ID NO:8).
В следующем варианте осуществления изобретение относится к антителу против IgE, которое специфично связывается с М1'-сегментом IgE с аффинностью связывания Скэтчарда в отношении IgE человека, эквивалентной аффинности связывания Скэтчарда для антитела мыши 47H4 против IgE/М1' или его гуманизированного варианта. В конкретном аспекте аффинность эквивалентна аффинности связывания 47H5. В другом конкретном аспекте аффинность составляет от 0,30 до 0,83 нм. В другом конкретном аспекте аффинность эквивалентна аффинности связывания 47H4v5. В следующем конкретном аспекте аффинность составляет приблизительно 1,5 нм.
В следующем варианте осуществления изобретение относится к антителу против IgE/М1', содержащему области HVR тяжелой цепи и легкой цепи антитела, представленного на любой из фиг.6A-F и фиг.20-25. В конкретном аспекте антитело дополнительно содержит вариабельные области тяжелой и легкой цепей последовательностей антител, представленных на любой из фиг.6A-F и фиг.20-25. В другом конкретном аспекте антитело содержит полноразмерные тяжелые и легкие цепи антител, представленных на любой из фиг.6A-F. В другом конкретном аспекте тяжелые и легкие цепи последовательностей антитела представлены на фиг.6A-F. В следующем конкретном аспекте антитело выбрано из группы, состоящей из 26A11, 26A11v1-16, 7A6, 7A6v1, 47H4, 47H4v1-6. В следующем конкретном аспекте антитело представляет собой 47H4v5. В следующем конкретном аспекте антитело является афукозилированным.
В следующем варианте осуществления изобретение относится к композиции, содержащей антитело против IgE/М1', содержащее области HVR тяжелой и легкой цепи антитела, представленного на любой из фиг.6A-F, в сочетании с по меньшей мере одним фармацевтически приемлемым носителем. В конкретном аспекте антитело выбрано из группы, состоящей из 26A11, 26A11v1-16, 7A6, 7A6v1, 47H4, 47H4v1-6. В другом конкретном аспекте антитело представляет собой 47H4v5. В другом конкретном аспекте антитело является афукозилированным.
В следующем варианте осуществления изобретение относится к композиции, содержащей антитело против IgE/М1', содержащее области HVR тяжелой и легкой цепи антитела, представленного на любой из фиг.8-13, в сочетании с одним или несколькими лекарственными средствами, выбранными из группы, состоящей из антитела против IgE, антигистамина, бронходилятатора, глюкокортикоида, NSAID, антагониста TNF, антагониста интегрина, иммунодепрессивного средства, антагониста IL-4, антагониста IL-13, двойного антагониста IL-4/IL-13, DMARD, антитела, которое связывается с B-клеточным поверхностным маркером, и антагониста BAFF. В конкретном аспекте композиция дополнительно содержит по меньшей мере один фармацевтически приемлемый носитель.
В следующем варианте осуществления изобретение относится к выделенной нуклеиновой кислоте, кодирующей области HVR тяжелой цепи антитела против IgE/М1', представленного на любой из фиг.6A-F. В конкретном аспекте выделенная нуклеиновая кислота дополнительно содержит нуклеиновую кислоту, кодирующую области HVR легкой цепи антитела, представленного на любой из фиг.6A-F. В другом конкретном аспекте антитело является химерным. В другом конкретном аспекте антитело является гуманизированным. В следующем аспекте антитело представляет собой антитело человека. В следующем конкретном аспекте антитело выбрано из группы, состоящей из 26A11, 26A11v1-16, 7A6, 7A6v1, 47H4, 47H4v1-6. В следующем конкретном аспекте антитело представляет собой 47H4v5. В следующем конкретном аспекте антитело является афукозилированным. В следующем аспекте нуклеиновая кислота дополнительно содержит вектор, пригодный для экспрессии нуклеиновой кислоты. В следующем конкретном аспекте вектор дополнительно содержит клетку-хозяина, пригодную для экспрессии нуклеиновой кислоты. В следующем конкретном аспекте клетка-хозяин представляет собой эукариотическую клетку или прокариотическую клетку. В следующем конкретном аспекте эукариотическая клетка представляет собой клетку млекопитающих, такую как клетка яичника китайского хомячка (CHO).
В следующем варианте осуществления изобретение относится к способу получения антитела против IgE/М1', которое специфично связывается с М1'-сегментом IgE, или его функционального фрагмента, включающему культивирование клетки-хозяина, содержащего нуклеиновую кислоту, кодирующую такое антитело или фрагмент в форме, пригодной для экспрессии, в условиях, пригодных для продукции такого антитела или фрагмента, и выделение антитела или фрагмента.
В следующем варианте осуществления изобретение относится к изделию, содержащему контейнер, в котором находится композиция, описанная в настоящем документе, и вкладыш в упаковку с указанием на применение для лечения опосредуемого IgE нарушения. В конкретном аспекте изделие представляет собой флакон. В другом конкретном аспекте изделие представляет собой предварительно заполненный шприц. В другом конкретном аспекте предварительно заполненный шприц, кроме того, находится в инъекционном устройстве. В следующем конкретном аспекте инъекционное устройство представляет собой автоматический впрыскиватель.
В следующем варианте осуществления изобретение относится к способу специфичного устранения продуцирующих IgE B-клеток, включающему введение терапевтически эффективного количества антитела против IgE/М1', которое специфично связывается с М1'-сегментом IgE и индуцирует апоптоз в экспрессирующих IgE B-клетках. В конкретном аспекте антитело содержит области HVR тяжелой и легкой цепи антитела, представленного на любой из фиг.6A-F. В другом конкретном аспекте способ снижает тотальный сывороточный IgE. В другом конкретном аспекте способ снижает как свободный сывороточный, так и тотальный сывороточный IgE. В следующем конкретном аспекте сывороточный IgE является аллергенспецифичным. В следующем конкретном аспекте антитело выбирают из группы, состоящей из 26A11, 26A11v1-16, 7A6, 7A6v1, 47H4, 47H4v1-6. В следующем конкретном аспекте антитело представляет собой 47H4v5. В следующем конкретном аспекте антитело обладает активностью ADCC.
В следующем варианте осуществления изобретение относится к способу лечения опосредуемого IgE нарушения, включающему введение терапевтически эффективного количества антитела против IgE/М1', которое специфично связывается с М1'-сегментом IgE и индуцирует апоптоз в экспрессирующих IgE B-клетках. В конкретном аспекте антитело специфично устраняет продуцирующие IgE B-клетки. В другом конкретном аспекте антитело снижает тотальный сывороточный IgE. В другом конкретном аспекте антитело снижает как тотальный, так и сывороточный IgE. В следующем конкретном аспекте сывороточные IgE являются аллергенспецифичными. В следующем конкретном аспекте антитело содержит области HVR тяжелой и легкой цепи антитела, представленного на любой из фиг.6A-F. В следующем конкретном аспекте антитело выбрано из группы, состоящей из 26A11, 26A11v1-16, 7A6, 7A6v1, 47H4, 47H4v1-6. В следующем конкретном аспекте антитело представляет собой 47H4v5. В следующем конкретном аспекте антитело обладает активностью ADCC. В следующем конкретном аспекте опосредуемое IgE нарушение выбрано из группы, состоящей из аллергического ринита, астмы (например, аллергической астмы и неаллергической астмы), атопического дерматита, аллергической гастроэнтеропатии, гиперчувствительности (например, анафилаксии, крапивницы, пищевой аллергии и т.д.), аллергического бронхолегочного аспергиллеза, паразитарных заболеваний, интерстициального цистита, гипер-IgE-синдрома, атаксии-телеангиэктазии, синдрома Вискотта-Олдрича, бестимусной лимфоплазии, IgE-миеломы и реакции "трансплантат против хозяина". В следующем конкретном аспекте опосредуемое IgE нарушение представляет собой пищевую аллергию, анафилаксию, контактный дерматит и аллергическую пурпуру.
В следующем варианте осуществления изобретение относится к способу лечения опосредуемого IgE нарушения, включающему введение композиции, содержащей терапевтически эффективное количество антитела против IgE/М1', которое специфично связывается с М1'-сегментом IgE и индуцирует апоптоз в экспрессирующих IgE B-клетках, в сочетании с терапевтически эффективным количеством по меньшей мере одного лекарственного средства, выбранного из группы, состоящей из антитела против IgE, антигистамина, бронходилятатора, глюкокортикоида, NSAID, противоотечного средства, средства от кашля, аналгетика, антагониста TNF, антагониста интегрина, иммунодепрессивного средства, антагониста IL-4, антагониста IL-13, двойного антагониста IL-4/IL-13, DMARD, антитела, которое связывается с B-клеточным поверхностным маркером, и антагониста BAFF. В конкретном аспекте антитело специфично устраняет продуцирующие IgE B-клетки. В другом конкретном аспекте антитело снижает тотальный сывороточный IgE. В другом конкретном аспекте антитело снижает как тотальный, так и свободный IgE. В следующем конкретном аспекте сывороточный IgE является аллергенспецифичным. В следующем конкретном аспекте антитело содержит области HVR тяжелой и легкой цепи антитела, представленного на любой из фиг.6A-F. В следующем конкретном аспекте антитело выбрано из группы, состоящей из 26A11, 26A11v1-16, 7A6, 7A6v1, 47H4, 47H4v1-6. В следующем конкретном аспекте антитело представляет собой 47H4v5. В следующем конкретном аспекте антитело обладает активностью ADCC.
В следующем варианте осуществления изобретение относится к способу лечения опосредуемого IgE нарушения, включающему комбинированную схему лечения, состоящую из введения терапевтически эффективного количества антитела против IgE/М1', которое специфично связывается с М1'-сегментом IgE и индуцирует апоптоз в экспрессирующих IgE B-клетках, до, одновременно или после проведения известного способа лечения аллергических нарушений. В конкретном аспекте сочетание включает введение антитела против IgE, антигистамина, бронходилятатора, глюкокортикоида, нестероидного противовоспалительного лекарственного средства, иммунодепрессанта, антагониста IL-4, антагониста IL-13, двойного антагониста IL-4/IL-13, противоотечного средства, средства от кашля или аналгетика. В другом конкретном аспекте антитело против IgE/М1' вводят в сочетании со схемой лечения, направленной на снижение чувствительности к аллергену. В конкретном аспекте антитело специфично устраняет продуцирующие IgE B-клетки. В другом конкретном аспекте антитело снижает тотальный сывороточный IgE. В другом конкретном аспекте антитело снижает как тотальный, так и свободный IgE. В следующем конкретном аспекте сывороточный IgE является аллергенспецифичным. В следующем конкретном аспекте антитело содержит области HVR тяжелой и легкой цепи антитела, представленного на любой из фиг.6A-F. В следующем конкретном аспекте антитело выбрано из группы, состоящей из 26A11, 26A11v1-16, 7A6, 7A6v1, 47H4, 47H4v1-6. В следующем конкретном аспекте антитело представляет собой 47H4v5. В следующем конкретном аспекте антитело обладает активностью ADCC.
В следующем варианте осуществления изобретение относится к способу предупреждения индуцированной аллергеном продукции IgE, включающему введение терапевтически эффективного количества антитела против IgE/М1', которое специфично связывается с М1'-сегментом IgE и индуцирует апоптоз в экспрессирующих IgE B-клетках. В конкретном аспекте антитело содержит области HVR тяжелой и легкой цепи антитела, представленного на любой из фиг.6A-F. В другом конкретном аспекте способ специфично устраняет продуцирующие IgE B-клетки. В другом конкретном аспекте способ снижает тотальный сывороточный IgE. В следующем конкретном аспекте способ снижает как свободный сывороточный, так и тотальный сывороточный IgE. В следующем конкретном аспекте сывороточный IgE является аллергенспецифичным. В следующем конкретном аспекте антитело выбрано из группы, состоящей из 26A11, 26A11v1-16, 7A6, 7A6v1, 47H4, 47H4v1-6. В следующем конкретном аспекте антитело представляет собой 47H4v5. В следующем конкретном аспекте антитело обладает активностью ADCC.
В следующем варианте осуществления изобретение относится к способу снижения индуцируемой аллергеном продукции IgE, включающему введение терапевтически эффективного количества антитела против IgE/М1', которое специфично связывается с М1'-сегментом IgE и индуцирует апоптоз в экспрессирующих IgE B-клетках. В конкретном аспекте антитело содержит области HVR тяжелой и легкой цепи антитела, представленного на любой из фиг.6A-F. В другом конкретном аспекте способ специфично устраняет продуцирующие IgE B-клетки. В другом конкретном аспекте способ снижает тотальный сывороточный IgE. В следующем конкретном аспекте способ снижает как свободный сывороточный, так и тотальный сывороточный IgE. В следующем конкретном аспекте сывороточный IgE является аллергенспецифичным. В следующем конкретном аспекте антитело выбрано из группы, состоящей из 26A11, 26A11v1-16, 7A6, 7A6v1, 47H4, 47H4v1-6. В следующем конкретном аспекте антитело представляет собой 47H4v5. В следующем конкретном аспекте антитело обладает активностью ADCC.
В следующем варианте осуществления изобретение относится к композиции, пригодной для любого из ранее описанных способов.
В следующем варианте осуществления изобретение относится к применению композиции для любого из описанных ранее способов.
В следующем варианте осуществления изобретение относится к гибридоме мыши, депонированной в ATCC 21 марта 2007 года, с обозначением, выбранным из группы, состоящей из 7A6.18, 1C11.10.20, 47G4.6.2, 47H4.12.10, 42H4.6.9, 42A5.20.11, 26A11.6.5, 51D2.22.15, 45C1.6.14, 26B11.3.12, 28E9.12.9. В конкретном аспекте изобретение относится к антителу, секретируемому депонированной гибридомой.
В следующем варианте осуществления изобретение относится к трансгенному животному, у которого экспрессируется М1'-сегмент человека в IgE.
Краткое описание рисунков
На фиг.1A-B представлено выравнивание выбранных участков константной цепи IgE человека (SEQ ID NO:1), макака-резус (SEQ ID NO:2) и яванского макака (SEQ ID NO:3). Представлено приблизительное расположение трансмембранных и внутриклеточных доменов CH2, CH3, CH4, М1'.
На фиг.2A-C представлены графики Скэтчарда для FACS, на которых показана специфичность различных антител против M1'. На фиг.2A-1-2A-6 представлено связывание с короткой формой IgE (без М1'), а на фиг.2B-1-2B-6 представлено связывание с длинной формой (с М1'). На фиг.2C-1-2C-6 представлено связывание с IgE, экспрессируемым клеточной линией U266. Затемненными кривыми показана интенсивность флуоресценции относительно контрольного Ab, а незатемненными кривыми показана относительная флуоресценция тестируемого антитела. На фиг.2D-F представлена специфичность связывания антител мыши 47H4, 26A11 и 7A6 против IgE/М1'. На фиг.2D показано, что 47H4 связывается с IgE/М1' человека, макака-резус и яванского макака, но не с IgE, лишенным М1'. На фиг.2E показано, что 47H4 связывается с U266, а 26A11 и 7A6 не связываются с ним. На фиг.2F показано, что 47H4 и 7A6 связываются с М1' как макака-резус, так и яванского макака, в то время как 26A11 связывается только с М1' макака-резус. На фиг.2G-I показана специфичность связывания гуманизированных антител 47H5v.5, 26A11v6 и 7A6v1 против IgE/М1'. На фиг.2G показано, что все три гуманизированных варианта 47H4v5, 26A11v6 и 7A6v1 являются специфичными к IgE-М1', но не к IgE, лишенному М1'. На фиг.2H показано, что варианты 47H4v5 и 26A11v6 (но не 7A6v1) связывают U266. На фиг.2I показано, что 47H4v5 и 7A6v1 связывает М1' макака-резус и яванского макака, а 26A11v6 связывает только М1' макака-резус.
На фиг.3A-L представлены графики FACS, на которых показана относительная аффинность связывания различных антител против M1' с использованием серийных разведений, показанных на фиг.3M. На фиг.3N представлена относительная аффинность для каждого антитела. На фиг.3O обобщенно представлена аффинность антител мыши 47H4, 26A11 и 7A6, при определении анализом Скэтчарда, против М1' человека, макака-резус и яванского макака. Если нет иных указаний, представленные числа представляют собой средние значения. На фиг.3P обобщенно представлена аффинность указанных гуманизированных вариантов антител 47H4 и 26A11, при измерении посредством анализа Скэтчарда, против М1' человека, макака-резус и яванского макака.
На фиг.4A-D представлено исследование относительного связывания/блокирования антител против M1'. На фиг.4A-1-4A-20 представлены графики FACS, на которых показаны антитела, которые блокировали или частично блокировали связывание. На фиг.4B представлен двумерный график, на котором показана относительная способность блокировать связывание других антител (частично или полностью с использованием молярного отношения 1:1). На фиг.4C представлен двумерный график, который в большей степени сфокусирован на конкретно указанных антителах и в котором исследование блокирования повторяли с молярным отношением 10:1. На фиг.4D представлена схема, на которой представлено распределение по группам в результате исследований связывания/блокирования эпитопа.
На фиг.5A-C показаны исследования связывания эпитопов, проводимые с использованием 47H4, 7A6 и 26A11. На фиг.5A показан М1'-сегмент, включающий соседние N- и C-концевые остатки (SEQ ID NO:3) и пептиды 1-5 М1' (SEQ ID NO:5-19), соответственно, используемые для определения связывания эпитопа. На фиг.5B и 5D показано, что исходные антитела мыши 47H4 связывают пептид 4, 7A6 связывает пептиды 4 и 5, и 26A11 связывает пептиды 7 и 8. На фиг.5C и 5E показано, что гуманизированные варианты 47H4v5 связывают пептид 4, а 7A67v1 связывает пептиды 4 и 5, и 26A11v6 связывает пептиды 7 и 8, сохраняя, таким образом, специфичность к эпитопу исходных антител мыши.
На фиг.6A-F показаны последовательности вариабельных областей легкой и тяжелой цепей антител мыши 26A11, 7A6 и 47H4 и их различных гуманизированных вариантов. Положения пронумерованы согласно Kabat, и гипервариабельные области, которые пересажены в вариабельную консенсусную рамку (каппа I для легкой цепи, подгруппы III для тяжелой цепи), заключены в прямоугольник. На фиг.6A показаны, относительно легкой цепи каппа I человека (SEQ ID NO:20), вариабельная область легкой цепи 26A11 (SEQ ID NO:21) и гуманизированные варианты 1, 4 (SEQ ID NO:22), варианты 2, 5 (SEQ ID NO:23), варианты 3, 6 (SEQ ID NO:24), варианты 13, 15 (SEQ ID NO:25) и варианты 14, 16 (SEQ ID NO:26). На фиг.6B показаны, относительно легкой цепи каппа I человека (SEQ ID NO:20), вариабельная область легкой цепи 7A6 (SEQ ID NO:27) и гуманизированный вариант 1 (SEQ ID NO:28). На фиг.6C показаны, относительно легкой цепи каппа I человека (SEQ ID NO:20), вариабельная область легкой цепи 47H4 (SEQ ID NO:29) и гуманизированные варианты 1, 3 (SEQ ID NO:30) и варианты 2, 4-6 (SEQ ID NO:31). На фиг.6D показаны, относительно тяжелой цепи III человека (SEQ ID NO:32), вариабельная область тяжелой цепи 26A11 (SEQ ID NO:33) и гуманизированные варианты 1-3, 13, 14 (SEQ ID NO:34) и варианты 4-6, 15, 16 (SEQ ID NO:35). На фиг.6E показаны, относительно тяжелой цепи человека (SEQ ID NO:34), вариабельная область тяжелой цепи 7A6 (SEQ ID NO:36) и гуманизированный вариант 1 (SEQ ID NO:37). На фиг.6F показаны, относительно тяжелой цепи III человека (SEQ ID NO:32), вариабельная область тяжелой цепи 47H4 (SEQ ID NO:38) и гуманизированные варианты 1, 2 (SEQ ID NO:39), варианты 3-4 (SEQ ID NO:40), вариант 5 (SEQ ID NO:41) и вариант 6 (SEQ ID NO:42).
На фиг.7A-G показана апоптотическая активность исходных антител против M1' в трансфицированных IgE-М1' клетках Daudi. На фиг.7A представлен график FACS, на котором, по существу, показано, что IgM экспрессируется на более высоком уровне, чем IgE. На фиг.7B показан эффект перекрестного связывания антител [F(ab')2] против IgM и применения камптотецина в отношении индукции апоптоза, соответственно. Клетки, положительно окрашенные аннексином, но отрицательно PI, являются погибающими, а клетки, положительно окрашенные как аннексином, так и PI, являются погибшими. На фиг.7C представлено графическое изображение общего наблюдаемого апоптоза, на котором светлым столбцом показаны клетки аннексин-(+) и PI-(-), а темным столбцом показаны аннексин-(+) и PI-(+). На фиг.7D-7G представлено графическое изображение индуцируемого антителами против M1' апоптоза при концентрациях 25, 10, 1, 0,1, 0,01 и 0,001 мкг/мл. На фиг.7D представлены результаты применения антител М1' группы эпитопа A1, включающих 7A6, 47H4, 47G4, 42A5, 42H4 (вместе с контролями MAE-11 и GP120), без перекрестного связывания. На фиг.7E представлены результаты применения антител М1' группы эпитопа A2, включающих 1C11, 26A11, 51D2, 45Cl) и группы эпитопов B/C, включающих 26B11 и 28E9, без перекрестного связывания. На фиг.7F показана группа эпитопа A1 с перекрестным связыванием, а на фиг.7G показаны группы эпитопов A2 и B/C с перекрестным связыванием.
На фиг.8A-B показана апоптотическая активность гуманизированных вариантов против M1' в клетках Daudi, трансфицированных IgE-М1', обработанных различными гуманизированными вариантами антитела против M1' в концентрациях 25, 10, 1, 0,1, 0,01 и 0,001 мкг/мл. На фиг.8A показано, что гуманизированные варианты 47H4v5, 26A11v6 и 7A6v1 индуцируют апоптоз в диапазоне 30-40% при концентрации на более высоких уровнях (т.е. 10-25 мкг/мл вариантов 47H4 и 26A11, 1, 10 и 25 мкг варианта 7A6). На фиг.8B показана апоптотическая активность того же антитела в отношении трансфицированных IgE-М1' клеток Daudi, которые обработаны в присутствии перекрестно связывающегося антитела козы против F(ab')2 IgG человека. Все антитела индуцировали максимальные уровни апоптоза 70-90%, с некоторым снижением апоптотической активности при высоких концентрациях (например, 47H4-v1, -v2, 26A11-v1, -v14). На фиг.8C показано, что 47H4v5 дикого типа и афукозилированное 47H4v5 были способны индуцировать апоптоз на сходных уровнях.
На фиг.9A-B1-2 показана способность антител мыши против M1' индуцировать поток кальция в клетки Daudi-IgE/М1'. Фиг.9A является контролем, демонстрирующим эффект антитела против IgM и MAE11, а на фиг.9B1-B2 показан эффект применения указанных антител мыши против M1'.
На фиг.10 показана способность гуманизированного антитела47H4v5 против IgE/М1' дикого типа (wt) и афукозилированного варианта индуцировать ADCC. В то время как варианты wt и афукозилированные варианты индуцируют сходную максимальную цитотоксичность, афукозилированный вариант ("AF") был более эффективным, чем форма дикого типа (EC50 AF ~0,83 нМ, EC50 wt ~6,6 нМ).
На фиг.11A-F представлены полноразмерные последовательности тяжелых и легких цепей антител мыши против IgE/М1'. Вариабельные области показаны курсивом, а HVR (гипервариабельные области) подчеркнуты. На фиг.11A показаны тяжелая и легкая цепи антитела 7A6 мыши (SEQ ID NO:43 и 44) соответственно. На фиг.11B показаны тяжелая и легкая цепи антитела 47H4 мыши (SEQ ID NO:45 и 46) соответственно. На фиг.11C показаны тяжелая и легкая цепи антитела 26A11 мыши (SEQ ID NO:47 и 48), соответственно. На фиг.11D показаны тяжелая и легкая цепи антитела 45C1 мыши (SEQ ID NO:49 и 50) соответственно. На фиг.11E показаны тяжелая и легкая цепи антитела 28E9 мыши (SEQ ID NO:51 и 52) соответственно. На фиг.11F показаны тяжелая и легкая цепи антитела 1C11 мыши (SEQ ID NOS: 53 и 54) соответственно.
На фиг.12A-I показана способность антител мыши против IgE/М1' ингибировать продукцию сывороточного IgE и продуцирующих IgE плазматических клеток в модели атопии hu-SCID. На фиг.12A представлено графическое изображение схемы эксперимента. На фиг.12B-C показано, что введение антител мыши против IgE/М1' снижало уровни IgE на 65-84%. На фиг.12D-E показано, что снижение продуцирующих IgE клеток in vivo составило 19-69%. На фиг.12F-G показано, что уровни других иммуноглобулинов (например, IgG1-4, IgA, IgM) были относительно неизмененными. На фиг.12H-I показано, что не наблюдалось снижения общего количества плазматических клеток в селезенке.
На фиг.13A-H показан эффект гуманизированного варианта 47H4v5 на уровни иммуноглобулинов в модели атопии hu-SCID. На фиг.13A представлено графическое изображение схемы эксперимента. На фиг.13B-D показано, что сывороточный IgE был снижен на 79% и что продуцирующие IgE плазматические клетки были снижены на 75%. На фиг.13E-F показано отсутствие снижения уровней других сывороточных иммуноглобулинов. На фиг.13G-H показано отсутствие снижения уровней тотальных плазматических клеток, таким образом, демонстрируя, что 47H4 специфично снижает продуцирующие IgE плазматические клетки, которые являются очень небольшой долей тотальных плазматических клеток.
На фиг.14A-D проиллюстрировано получение мышей с включением гена huM1'. На фиг.14A представлено расположение экзона М1' на локусе IgE мыши. На фиг.14B представлена схема рекомбинации в локусе IgE мыши, приводящей к созданию заданного аллеля. На фиг.14C показано генотипирование посредством ПЦР с полосой размером 668 п.н. у мышей wt и с полосой 457 п.н. у мышей с включением М1'. На фиг.14D показан Саузерн-блот, в котором фрагмент HindIII размером 7,4 т.п.н. у мышей wt превращается во фрагмент размером 3 т.п.н. у мышей с включением hu-М1', а фрагмент BamHI размером 14,1 т.п.н. превращается во фрагмент размером 18,1 т.п.н. во включенном аллеле hu-М1'. Показаны мыши как дикого типа, так и гетерозиготные мыши.
На фиг.15A-I показана способность антител против IgE/М1' предотвращать образование IgE при первичном иммунном ответе. На фиг.15A представлена схема, на которой показан временной график схемы эксперимента, включая введение TNP/OVA и антител против IgE/М1'. На фиг.15B представлен график уровней антигенспецифичного IgE с течением времени и показано, что хотя уровни антигенспецифичного IgE у контрольных животных (т.е. gpl20) достигали максимальных уровней от 8 до 14 суток, антитело против IgE/М1' предотвращало какое-либо повышение, и определенные уровни антигенспецифичного IgE не отличались значимо от неиммунизированных мышей. На фиг.15C-D показано, что введение антитела против IgE/М1' предотвращало повышение уровней антигенспецифичного сывороточного IgE на 8 и 14 сутки, соответственно, и они статистически не отличались от уровней у неиммунизированных мышей (фиг.15E). На фиг.15F-I показано, что на уровни антигенспецифичного IgG1 не оказывало значимого воздействия антитело против IgE/М1' на протяжении 28 суток эксперимента (за исключением умеренного различия на 14 сутки).
На фиг.16A-K показана способность антител против IgE/М1' предотвращать образование антигенспецифичного IgE при иммунном ответе памяти или вторичном иммунном ответе. На фиг.16A представлена схема, на которой показан временной график вторичной инъекции TNP-OVA и введения антител против IgE/М1', которое впервые вводили на 28 сутки. На фиг.16B представлен график уровней антигенспецифичного IgE с течением времени и показано, что вторичный IgE-ответ на вспомогательную инъекцию TNP-OVA на 28 сутки является более быстрым, достигая пика через 4 суток, а не через 8-9 суток, как при первичном ответе. На фиг.16C-D показано, что уровни антигенспецифичных IgE у мышей, которым вводили антитело против IgE/М1', были значимо снижены по сравнению с изотипическим контролем на 59-65% к 32 суткам и на 90-93% к 35 суткам. На фиг.16E показано, что к 42 суткам (12 сутки начального введения антитела против IgE), уровни антигенспецифичного IgE снижались до уровня, статистически не отличающегося от контрольных наивных мышей. На фиг.16F-H показано, что от 28 до 49 суток введение антитела против IgE/М1' снижало уровни IgE в сыворотке на 74-84%, и средний суточный уровень антигенспецифичного IgE также снижался на 74-83%. На фиг.16I-K показано, что на уровни антигенспецифичного IgG1 не влияло значимо антитело против IgE/М1'.
На фиг.17A-D проиллюстрирована способность антител против IgE/М1' профилактически снижать продукцию IgE в ответ на инфекцию Nippostrongylus brasiliensis ("NB"). На фиг.17A представлена схема, на которой показана схема эксперимента. Животным проводили введение три раза в неделю, начиная с 0 суток по 21 сутки. На фиг.17B показаны уровни IgE с течением времени в ответ на инфекцию NB с антителом против IgE/М1' и контрольным антителом. На фиг.17C-D показано, что на 15 сутки животные, которым вводили антитело против IgE/М1', имели сниженные уровни IgE в сыворотке, не отличающиеся на статистически значимом уровне от неинфицированных мышей.
На фиг.18A-I проиллюстрирована способность антител против IgE/М1' к терапевтическому лечению максимального ответа IgE на инфекцию Nippostrongylus brasiliensis ("NB"). На фиг.18A представлена схема, на которой показана схема эксперимента. Животным проводили введение три раза в неделю с 11 до 21 сутки. На фиг.18B показаны уровни IgE с течением времени в ответ на инфекцию NB с антителом против IgE/М1' и контрольным антителом. На фиг.18C-D показано, что антитело против IgE/М1' снижало уровни IgE в сыворотке на 82-89% в течение четырех суток введения. На фиг.18E показано, что к 21 суткам уровни IgE у мышей, которым вводили антитело против IgE/М1', снижались у животных на 97-98%, и они достигали уровней, не отличающихся на статистически значимом уровне от неинфицированной контрольной группы. На фиг.18F-G показано, что продуцирующие IgE плазматические клетки (количественно определенные посредством Elispot) в лимфатических узлах и селезенке снижались на 88-94% и 57-66% соответственно. На фиг.18H-I показано, что уровень тотальных плазматических клеток (CD138+) как в лимфатических узлах, так и в селезенке повышался во всех обработанных группах по сравнению с неинфицированными мышами и что введение антитела против IgE/М1' не изменяет значимо общее количество плазматических клеток в каком-либо из органов. Эти результаты демонстрируют способность антител против IgE/М1' снижать уровни IgE в сыворотке посредством устранения продуцирующих IgE клеток in vivo.
На фиг.19A-G проиллюстрирована способность антител против IgE/М1' к терапевтическому лечению ответа IgE, происходящего в поздний период цикла инфекции, на инфекцию Nippostrongylus brasiliensis ("NB"). На фиг.19A представлена схема, на которой показана схема эксперимента, в котором животным проводили введение три раза в неделю, начиная с 40 суток. На фиг.19B показано, что максимальная продукция IgE происходила на 15 сутки, и что все антитела против IgE/М1' снижали сывороточный IgE. На фиг.19C-D показано, что антитело против IgE/М1' демонстрирует значимое снижение как абсолютных, так и нормализованных уровней IgE, соответственно, относительно начала введения. На фиг.19E-G показано, что введение антитела против IgE/М1' значимо снижало уровни IgE в сыворотке по сравнению с изотипическим контролем в виде mIgG1 против gp120 от 48 до 55 суток.
Подробное описание предпочтительного варианта осуществления
Все ссылки, упомянутые в настоящем документе, конкретно включены в настоящий документ в качестве ссылок.
Основные способы
При применении на практике настоящего изобретения будут использоваться, если нет иных указаний, общепринятые способы молекулярной биологии (включая рекомбинантные способы), микробиологии, клеточной биологии, биохимии и иммунологии, которые находятся в пределах квалификации в данной области. Такие способы полностью разъяснены в литературе, такой как Molecular Cloning: A Laboratory Manual, second edition (Sambrook et al., 1989); Oligonucleotide Synthesis (MJ. Gait, ed., 1984); Animal Cell Culture (R.I. Freshney, ed., 1987); Methods in Enzymology (Academic Press, Inc.); Current Protocols in Molecular Biology (F.M. Ausubel et al., eds 1987, и периодические дополнения); PCR: The Polymerase Chain Reaction (Mullis et al., ed., 1994); A Practical Guide to Molecular Cloning (Perbal Bernard V., 1988); Phage Display: A Laboratory Manual (Barbas et al., 2001).
Развитие и активация лимфоцитов
Два основных типа лимфоцитов у человека представляют собой T (образованные в тимусе) и B (образованные в костном мозге). Эти клетки образуются из гемопоэтических стволовых клеток в костном мозге и печени плода, которые коммитированы на лимфоидный путь развития. Потомки этих стволовых клеток идут различными путями, созревая либо в B-, либо в T-лимфоциты. Развитие B-лимфоцитов человека происходит полностью в костном мозге. С другой стороны, T-клетки развиваются из незрелых предшественников, которые покидают костный мозг и достигают через кровоток тимуса, где они пролиферируют и дифференцируются в зрелые T-лимфоциты.
Зрелые лимфоциты, источником которых является тимус или костный мозг, находятся в неактивном, или "покоящемся" состоянии, т.е. они являются митотически неактивными. Когда они рассредоточиваются в кровотоке, эти "наивные" или "некоммитированные" лимфоциты путешествуют в различные вторичные или периферические лимфоидные органы, такие как селезенка, лимфатические узлы или миндалины. Большинство некоммитированных лимфоцитов обладают присущей им короткой продолжительностью жизни и погибают в пределах нескольких суток после того, как они покидают костный мозг или тимус. Однако если такая клетка получает сигналы, которые указывают на присутствие антигена, она может активироваться и претерпевать последовательные раунды клеточного деления. Затем некоторые из полученных клеток-потомков возвращаются в покоящееся состояние и становятся лимфоцитами памяти - B- и T-клетками, которые, по существу, подготовлены к следующей встрече со стимулирующим аллергеном. Другие потомки активированных некоммитированных лимфоцитов представляют собой эффекторные клетки, которые выживают в течение только нескольких суток, однако обладают определенными защитными видами активности.
Активация лимфоцитов относится к упорядоченной серии событий, через которые проходит покоящийся лимфоцит после стимуляции для деления и образования потомков, некоторые из которых становятся эффекторными клетками. Полный ответ включает как индукцию пролиферации клеток (митогенез), так и проявление иммунологических функций. Лимфоциты становятся активированными, когда определенные лиганды связываются с рецепторами на их поверхностях. Лиганды отличаются для T-клеток и B-клеток, однако конечные внутриклеточные физиологические механизмы сходны.
В то же время чужеродные антигены самостоятельно могут индуцировать активацию лимфоцитов, особенно крупные полимерные антигены, которые перекрестно связывают поверхностные иммуноглобулины на B-клетках, или другие гликопротеины на T-клетках. Однако большинство антигенов не являются полимерными, и даже связывание прямо с B-клеткой в больших количествах не приводит к активации. B-клетки активируются этими более распространенными антигенами, когда они стимулируются одновременно с активированными вблизи хелперными T-лимфоцитами. Такая стимуляция может происходить от лимфокинов, секретируемых T-клеткой, однако наиболее эффективно она передается посредством прямого контакта B-клетки с поверхностными белками T-клеток, которые взаимодействуют с определенными поверхностными рецепторами B-клеток, создавая вторичный сигнал.
B-клетки
Отличительным признаком B-клеток является способность синтезировать иммуноглобулины. Иммуноглобулины (Ig) представляют собой крайне разнообразное семейство белков, состоящих из сходных типов полипептидов, называемых тяжелыми цепями и легкими цепями. Каждый Ig специфично связывается с высокой аффинностью со своим собственным специфическим антигеном. Зрелые B-клетки могут экспрессировать иммуноглобулин в двух различных формах, каждая из которых выполняет уникальные функции. В покоящихся B-лимфоцитах (некоммитированных или B-лимфоцитах памяти) иммуноглобулины экспрессируются только на клеточной поверхности, где они действуют в основном в качестве мембраносвязанного рецептора для конкретных антигенов. В противоположность этому, B-клеточные эффекторные клетки (плазматические клетки) секретируют иммуноглобулин в окружающую среду. Такой секретируемый иммуноглобулин сохраняет способность распознавать и связывать ("лицом к лицу") мембраносвязанную форму покоящихся B-клеток), и обычно его называют антителом.
Когда активированный B-лимфоцит делится, некоторые из его потомков становятся B-клетками памяти, а остальные дифференцируются в плазматические клетки. Поскольку плазматические клетки имеют относительно короткий срок жизни, если не образуются новые плазматические клетки, популяция вымирает, и иммуноглобулины более не секретируются. В результате, активация B-клеток, как правило, приводит к временной волне пролиферации, с последующим всплеском секреции антитела, которая возрастает, а затем стихает в течение нескольких дней или нескольких недель. B-клетки являются основным типом клеток, вовлеченных в гуморальный иммунитет или в защитный эффект, опосредуемый тканевыми жидкостями. Поскольку антитела против IgE/М1' по изобретению, по существу, устраняют B-клетки, включая B-клетки памяти, их можно использовать для "сброса" памяти. Таким образом, эффект этого может состоять в том, что B-клеточный компонент, который запускает аллергический ответ у индивидов, может снизиться или даже устраниться.
T-клетки
T-лимфоциты не экспрессируют иммуноглобулины, однако, вместо этого они выявляют наличие чужеродных веществ с помощью поверхностных белков, называемых T-клеточными рецепторами. Эти рецепторы распознают антигены либо посредством прямого контакта, либо через влияние на активность других иммунных клеток. Вместе с макрофагами T-клетки являются основным типом клеток, вовлеченных в клеточно-опосредуемый иммунитет.
В отличие от B-клеток T-клетки могут выявлять чужеродные вещества только в конкретных условиях. В частности, T-лимфоциты будут распознавать чужеродный белок, только если он сначала расщепляется на пептиды небольших размеров, которые затем экспонируются на поверхности второй клетки-хозяина, называемой антигенпрезентирующей клеткой (APC). Множество типов клеток-хозяев могут представлять антигены в некоторых условиях, однако определенные типы более специфично адаптированы для этой цели, и они особенно важны для контроля активности T-клеток, и включают макрофаги и другие B-клетки. Презентирование антигена зависит, частично, от определенных белков, называемых белками основного комплекса гистосовместимости (MHC), на поверхности презентирующих клеток. Таким образом, для стимуляции клеточно-опосредуемого иммунитета чужеродные пептиды должны быть представлены T-клеткам в сочетании с пептидами MHC, и это сочетание должно быть распознано T-клеточным рецептором.
Существует два существенных подтипа T-клеток: цитотоксические T-лимфоциты (Tc-клетки или CTL) и хелперные T-клетки (TH), которые можно ориентировочно идентифицировать, исходя из экспрессии на клеточной поверхности маркера CD8 и CD4. Tc-клетки важны для защиты от вирусов, и они могут уничтожать вирусы прямо посредством распознавания определенных экспрессируемых на клеточной поверхности вирусных пептидов. TH-клетки обеспечивают пролиферацию, созревание и иммунологическую функцию других типов клеток, например секрецию лимфокинов для контроля активности B-клеток, макрофагов и цитотоксических T-клеток. Как некоммитированные T-лимфоциты, так и T-лимфоциты памяти обычно остаются в покоящемся состоянии, и в этом состоянии они не проявляют существенной хелперной или цитотоксической активности. Когда они активированы, эти клетки претерпевают несколько раундов митотического деления с образованием дочерних клеток. Некоторые из этих дочерних клеток возвращаются в покоящееся состояние в качестве клеток памяти, однако другие из них становятся эффекторными клетками, которые активно проявляют хелперную цитотоксическую активность. Эти дочерние клетки сходны с их родительскими клетками: CD4+ клетки могут образовывать только потомство CD4+, а клетки CD8+ образуют только потомство CD8+. Эффекторные T-клетки экспрессируют поверхностные маркеры, которые не экспрессируются на покоящихся T-клетках, таких как CD25, CD28, CD29, CD40L, рецепторы трансферрина и белки MHC II класса. Когда активирующие стимулы устраняются, цитотоксическая или хелперная активность постепенно стихает в течение нескольких суток, поскольку эффекторные клетки либо погибают, либо возвращаются в покоящееся состояние.
Аналогично активации B-клеток T-лимфоцит отвечает на большинство антигенов и также требует двух типов одновременных стимулов. Первым является антиген, который, если он надлежащим образом экспонирован белками MHC на антигенпрезентирующей клетке, может быть распознан и связан T-клеточными рецепторами. Так как этот комплекс антиген-MHC не посылает сигнал внутрь клетки, он обычно является недостаточным для возникновения активации T-клеток. Полная активация, такая как происходит с помощью хелперных T-клеток, требует костимуляции с другими специфичными лигандами, называемыми костимуляторами, которые экспрессируются на поверхности антигенпрезентирующей клетки. Активация цитотоксической T-клетки, с другой стороны, как правило, требует IL-2, цитокина, секретируемого активированными хелперными T-клетками.
Иммунный ответ
Три основных функциональных свойства иммунной системы млекопитающих, отличающей ее от других систем защиты организма, включают: (1) специфичность - способность распознавать и отвечать или не отвечать индивидуально среди широкого множества молекул-мишеней, (2) избирательность - способность отличить "свое" от "не своего", так чтобы спокойно сосуществовать со всеми бесчисленными белками и другим органическим материалом, но, тем не менее, энергично отвечать на чужеродный материал, который проникает в организм, и (3) память - способность формироваться на основании опыта, так что последующая встреча с конкретным чужеродным патогеном спровоцирует более быстрый и энергичный ответ, чем ответ, который происходит при первоначальной встрече. Поскольку антагонисты IgE по изобретению индуцируют апоптоз в обладающих IgE B-клетках, ожидается, что они ослабят или даже устранят иммунную память на конкретные антигены. Ожидается, что это будет обладать особенным преимуществом, когда энергичный иммунный ответ на обычные аллергены является патологическим, как, например, в случае атопических нарушений.
Некоммитированные лимфоциты постоянно высвобождаются из первичных лимфоидных органов на периферию, каждый из которых обладает поверхностными рецепторами, которые обеспечивают связывание антигена. Связывание антигена в B-клетках опосредуется через связанные с поверхностью иммуноглобулины, в то время как в T-клетках оно опосредуется T-клеточными рецепторами. Когда некоммитированные лимфоциты не активируются, они погибают в пределах нескольких суток после выхода на периферию. Лимфоциты, которые активируются, выживают и пролиферируют с образованием дочерних клеток, которые затем могут претерпевать дальнейшие циклы активации и пролиферации. Скорость и интенсивность ответа на данный антиген определяется, главным образом, клональной селекцией: чем больше популяция дочерних клеток или клонов, специфичных к конкретному антигену, тем больше количество клеток, которые могут осуществлять распознавание и участвовать в иммунном ответе. Каждый иммунный ответ представляет собой комплексную и сложно регулируемую последовательность событий, вовлекающую несколько типов клеток. Он запускается, когда иммуноген проникает в организм и встречает специализированный класс клеток, называемый антигенпрезентирующими клетками (APC). Эти APC захватывают малое количество иммуногена и экспонируют его в форме, которую могут распознавать антигенспецифичные хелперные T-лимфоциты. Затем хелперные T-клетки активируются и, в свою очередь, обеспечивают активацию других классов лимфоцитов, таких как B-клетки или цитотоксические T-клетки. Затем активированные лимфоциты пролиферируют и осуществляют специфичные для них эффекторные функции. На каждой стадии этого процесса лимфоциты и APC взаимодействуют друг с другом через прямой контакт или посредством секреции регуляторных цитокинов.
Экзогенные антигены, которые захватываются APC, претерпевают серию изменений, называемых процессингом антигена. Такой процессинг, особенно белковых иммуногенов, вовлекает денатурацию и частичное протеолитическое расщепление, так что иммуноген расщепляется на короткие пептиды. Затем ограниченное количество полученных пептидов нековалентно связывается с белками MHC II класса и транспортируется к поверхности APC, этот процесс известен как презентирование антигена. CD4+ хелперный T-лимфоцит, который прямо контактирует с APC, может активироваться, однако это произойдет, только если он экспрессирует T-клеточный рецепторный белок, который может распознавать и связывать конкретный комплекс пептид-MHC, представленный APC.
Хелперные T-клетки (TH) являются основными организаторами иммунного ответа, поскольку они необходимы для активации двух других лимфатических эффекторных клеток: цитотоксических T-клеток (TС) и секретирующих антитело плазматических клеток. Активация TH происходит на ранней стадии иммунного ответа и требует по меньшей мере двух сигналов. Один сигнал обеспечивается посредством связывания T-клеточного рецептора для антигенов с комплексом антигенный пептид-MHC на поверхности APC, и он передается через белковый комплекс CD3, а второй костимуляторный сигнал через APC, как полагают, является следствием связывания отдельного передающего сигнал белка на поверхности T-клеток со специфичным лигандом на APC. Одно такое взаимодействие происходит между T-клеточным белком CD28 и семейством поверхностных белков APC, известных как B7. Другие пары поверхностных белков также могут опосредовать костимуляцию.
Вместе эти два сигнала индуцируют начало секреции хелперными T-клетками цитокина, известного как интерлейкин-2 (IL-2), а также они начинают экспрессировать специфичные высокоаффинные рецепторы для IL-2 на их поверхности. IL-2 представляет собой высокоэффективный митогенный фактор для T-лимфоцитов, и он необходим для пролиферативного ответа активированных T-клеток. Эффект IL-2 на клетку, из которой он секретируется, представляет собой феномен, известный как аутокринный эффект. Кроме того, было показано, что даже если T-клетка получает оба сигнала, она не пролиферирует, если ее собственные поверхностные рецепторы для IL-2 блокированы. Также IL-2 может действовать на клетки в непосредственной близости, посредством так называемого паракринного эффекта. Этот эффект является особенно важным для активации TC-клеток, которые, как правило, не продуцируют достаточное количество IL-2 для стимуляции их собственной пролиферации. В дополнение к IL-2 активированные TH-клетки секретируют другие цитокины и обеспечивают рост, дифференцировку и функционирование B-клеток, макрофагов и других типов клеток.
Контакт между APC и антигенспецифичной TH-клеткой также оказывает эффекты на APC - один из наиболее важных из которых представляет собой высвобождение IL-1. Полагают, что этот цитокин действует аутокринно, повышая поверхностную экспрессию белков MHC II класса и различных молекул адгезии, таким образом, делая связывание TH-клетки более прочным и усиливая презентирование антигена. В то же время IL-1 функционирует паракринно в отношении TH-клеток, обеспечивая секрецию IL-2 и экспрессию рецептора для IL-2.
В ходе активации TH-клеток ранее описанным образом, некоторые B-клетки также могут связывать иммуноген через их рецепторы для антигенов, которые представляют собой мембраносвязанные формы антител, которые будут позднее секретироваться. В отличие от T-клеток B-клетки распознают иммуноген в его свободной непроцессированной форме. Специфичное связывание антигена обеспечивает один тип сигнала, который может привести к активации B-клеток. Второй тип обеспечивается активированными TH-клетками, которые экспрессируют белки, которые способствуют активации B-клеток посредством связывания с неиммуноглобулиновыми рецепторами на их поверхности. Эти сигналы TH, которые действуют на любую B-клетку независимо от антигенной специфичности, известны как хелперные факторы. Эти хелперные факторы включают IL-2, IL-4 и IL-6. Однако помощь более эффективно достигается через межклеточный контакт, который позволяет белкам на поверхности T-клеток прямо контактировать с белками на B-клетке. Наиболее эффективная форма опосредуемой контактом помощи происходит, когда белок, называемый лигандом CD40 (CD40L), который экспрессируется на клетках TH только после того, как они активируются, связывается с белком, называемым CD40, на B-клетках. В процессе, известном как неспецифическая активация, даже контакт с активированной B-клеткой может быть достаточным для активации покоящихся B-клеток, даже если их поверхностные иммуноглобулины не связали антиген.
TC-лимфоциты функционируют, устраняя клетки, которые экспрессируют чужеродные антигены на их поверхностях, такие как инфицированные вирусом клетки хозяина. Большинство TC-клеток экспрессируют CD8, а не CD4, и, таким образом, они распознают антигены, связанные с белками MHC класса I, а не класса II. Когда соматическая клетка инфицирована вирусом, некоторые иммуногенные вирусные белки могут претерпевать процессинг в клетке, а затем полученные пептиды могут появляться в качестве поверхностных комплексов с молекулами MHC класса I. Затем эти комплексы пептид-MHC могут быть распознаны T-клеточным рецептором антигенспецифичного клона, предоставляя один из двух сигналов, необходимых для активации TС-клеток. Этот первый сигнал индуцирует высокоаффинные рецепторы для IL-2 на TC-клетке. Второй сигнал обеспечивается IL-2, секретируемым ближайшим активированным TH-лимфоцитом. При получении обоих сигналов активированная TC-клетка приобретает цитотоксическую активность, что позволяет ей уничтожать клетку, с которой она связана, а также любые другие клетки, обладающие теми же комплексами пептид-MHC класса I. В некоторых случаях уничтожение происходит, поскольку TC высвобождает определенные токсины на клетку-мишень; в других случаях TC индуцирует совершение клеткой-мишенью самоубийства посредством апоптоза. Активированная TC-клетка также пролиферирует, давая начало дополнительным TC-клеткам с той же антигенной специфичностью.
Каскад IgE/тучная клетка/медиаторы.
Антитела IgE Fc-участком молекулы фиксируются к высокоаффинному рецептору клеточной поверхности, называемому FcεRI на поверхности тучных клеток и базофилов. Аллергическая реакция начинается, когда поливалентная молекула аллергена связывается с антителами, которые оккупируют эти рецепторы. Результатом является связывание FcεRI, который, в свою очередь, дает внутриклеточный сигнал, вызывая высвобождение и активацию медиаторов воспаления: гистамина, лейкотриенов, хемотактических факторов, активирующего тромбоциты фактора и протеаз. Эти активированные медиаторы действуют локально и вызывают повышенную проницаемость сосудов, расширение сосудов, сокращение гладких мышц и секрецию слизистых желез. Такие события клинически называют немедленной или ранней фазой, и они происходят в пределах первых 15-30 минут после воздействия аллергена. В течение последующих 12 часов происходит прогрессирующая инфильтрация в ткани воспалительных клеток, протекающая от нейтрофилов к эозинофилам и к мононуклеарным клеткам в ответ на другие химические медиаторы, до конца не изученные. Это период времени, составляющий 6-12 часов после воздействия аллергена, называют поздней фазой и он характеризуется клиническими проявлениями клеточного воспаления. С учетом того, что эти реакции поздней фазы, особенно в легком, возникают при отсутствии реакций ранней фазы, все еще не понятно полностью, является ли реакция поздней фазы обязательно опосредуемой IgE.
Этот механизм, главным образом, ответственен за анафилаксию, крапивницу и атопические заболевания, такие как аллергический ринит, аллергическая астма, атопический дерматит и аллергическая гастроэнтеропатия.
Каскад эффекторный T-лимфоцит/лимфокин
Определенные аллергические заболевания опосредуются реакцией аллергена с эффекторным T-лимфоцитом, сенсибилизированным к конкретному аллергену при предыдущем воздействии. Когда встречается аллерген, CD4+ T-клетки активируются, образуя лимфокины, что приводит в течение нескольких суток к накоплению инфильтрата мононуклеарных клеток.
I. Определения
"Аллерген" или "иммуноген" представляет собой молекулу, которая запускает иммунный ответ. Как используют в настоящем документе, термин охватывает либо саму антигенную молекулу, либо ее источник, такой как зерно пыльцы, перхоть животных, яд насекомых или продукт питания. Он контрастирует с термином "антиген", который относится к молекуле, которая может специфично распознаваться иммуноглобулином или T-клеточным рецептором. Любое чужеродное вещество, способное индуцировать иммунный ответ, является потенциальным аллергеном. Известно, что аллергенными являются множество различных химических веществ как природного, так и синтетического происхождения. Сложные природные органические химические вещества, особенно белки, обладают возможностью вызвать опосредуемую антителом аллергию, в то время как простые органические соединения, неорганические химические вещества и металлы с большим предпочтением вызывают опосредуемую T-клетками аллергию. В некоторых случаях один аллерген может быть ответственным более чем за один тип аллергии. Воздействие аллергена может происходить посредством ингаляции, инъекции или контакта с кожей.
Термин "антитело" включает моноклональные антитела (в том числе полноразмерные антитела, которые обладают Fc-областью иммуноглобулина), композиции антител с полиэпитопной специфичностью, полиспецифичные антитела (например, биспецифичные антитела, антитела-димеры (diabody) и одноцепочечные молекулы, а также фрагменты антител (например, Fab, F(ab')2 и Fv). Термин "иммуноглобулин" (Ig) используют в настоящем документе взаимозаменяемо с термином "антитело".
Основной элемент антитела из 4 цепей представляет собой гетеротетрамерный гликопротеин, состоящий из двух идентичных легких (L) цепей и двух идентичных тяжелых (H) цепей. Антитело IgM состоит из 5 основных гетеротетрамерных элементов вместе с дополнительным полипептидом, называемым J-цепью, и, таким образом, оно содержит 10 антигенсвязывающих участков, в то время как секретируемые антитела IgA могут полимеризоваться с образованием поливалентных систем, содержащих 2-5 основных элементов из 4 цепей вместе с J-цепью. В случае IgG элемент из 4 цепей, как правило, имеет массу 150000 дальтон. Каждая L-цепь связана с H-цепью одной ковалентной дисульфидной связью, в то время как две H-цепи связаны друг с другом одной или несколькими дисульфидными связями в зависимости от изотипа H-цепи. Каждая H- и L-цепь имеет расположенные с равными интервалами межцепочечные дисульфидные мостики. Каждая H-цепь имеет на N-конце вариабельный домен (VH), за которым следуют три константных домена (CH) для каждой из α- и γ-цепей и четыре CH-домена для изотипов μ и ε. Каждая L-цепь имеет на N-конце вариабельный домен (VL), за которым следует константный домен (CL) на ее другом конце. VL выравнивается с VH, и CL выравнивается с первым константным доменом тяжелой цепи (CH1). Полагают, что конкретные аминокислотные остатки образуют поверхность контакта между вариабельными доменами легкой цепи и тяжелой цепи. Образование пары VH и VL формирует один антигенсвязывающий участок. Для структуры и свойств различных классов антител см., например, Basic and Clinical Immunology, 8th edition, Daniel P. Sties, Abba I. Terr and Tristram G. Parslow (eds.), Appleton & Lange, Norwalk, CT, 1994, страница 71 и глава 6.
L-цепь любых видов позвоночных может быть отнесена к одному из двух четко отличающихся типов, называемых каппа и лямбда, на основе аминокислотных последовательностей их константных доменов. В зависимости от аминокислотной последовательности константного домена их тяжелых цепей (CH), иммуноглобулины можно отнести к различным классам или изотипам. Существует пять классов иммуноглобулинов: IgA, IgD, IgE, IgG и IgM, имеющих тяжелые цепи, обозначаемые как α, δ, ε, γ и μ соответственно. Классы γ и α далее подразделяются на подклассы на основе относительно небольших различий в последовательности CH и функции, например у человека экспрессируются следующие подклассы: IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 и IgA2.
"Выделенное" антитело представляет собой антитело, которое идентифицировано, отделено и/или извлечено из компонента среды, где оно продуцируется (например, природным образом или рекомбинантно). Предпочтительно выделенный полипептид не ассоциирован с любыми другими компонентами среды, в которой он индуцируется. Загрязняющие компоненты среды, где он продуцируется, такие как компоненты, полученные из рекомбинантных трансфицированных клеток, представляют собой вещества, которые препятствуют применению антитела для исследования, диагностики или лечения, и могут включать ферменты, гормоны и другие белковые или небелковые растворенные вещества. В предпочтительных вариантах осуществления антитело очищают (1) до более чем 95% по массе антитела, как определяют способом Лоури, и наиболее предпочтительно до более чем 99% по массе; (2) до степени, достаточной для получения по меньшей мере 15 остатков N-концевой или внутренней аминокислотной последовательности с использованием секвенатора с вращающимся стаканом; или (3) до гомогенности при SDS-PAGE в восстанавливающих или невосстанавливающих условиях с использованием кумасси синего или, предпочтительно, окрашивания серебром. Выделенное антитело включает антитело в рекомбинантных клетках in situ, поскольку в этом случае отсутствует по меньшей мере один компонент условий естественного окружения антитела. Однако, как правило, выделенные пептид или антитело будут получены посредством по меньшей мере одной стадии очистки.
"Вариабельная область" или "вариабельный домен" антитела относится к N-концевым доменам тяжелой или легкой цепи антитела. Вариабельные домены тяжелой цепи и легкой цепи могут быть обозначены как "VH" и "VL" соответственно. Эти домены, как правило, являются наиболее вариабельными частями антитела (относительно других антител того же класса) и содержат антигенсвязывающие участки.
Термин "вариабельный" относится к тому факту, что последовательности определенных сегментов вариабельных доменов значительно отличаются среди антител. V-домен опосредует связывание антигена и определяет специфичность конкретного антитела к его конкретному антигену. Однако вариабельность не является равномерной на протяжении всего участка вариабельных доменов. Вместо этого, она сконцентрирована в трех сегментах, называемых гипервариабельными областями (HVR) в вариабельных доменах как легкой цепи, так и тяжелой цепи. Более высококонсервативные участки вариабельных доменов называют каркасными областями (FR). Вариабельные домены нативных тяжелых и легких цепей содержат четыре FR, главным образом, приминающих конфигурацию бета-слоев, соединенных тремя HVR, которые формируют петли, объединяющие структуру бета-слоев и в некоторых случаях формирующие ее часть. HVR в каждой цепи расположены вместе в непосредственной близости от FR-областей и, совместно с HVR другой цепи, участвуют в формировании антигенсвязывающего сайта антител (см. Kabat et al., Sequences of Protein of Immunological Interest, 5th Ed. National Institutes of Health, Bethesda, MD. (1991)). Константные домены не вовлечены непосредственно в связывание антитела с антигеном, но они проявляют различные эффекторные функции, такие как участие антитела в антителозависимой клеточной цитотоксичности.
Как используют в настоящем документе, термин "моноклональное антитело" относится к антителу из совокупности, по существу, гомогенных антител, т.е. отдельные антитела, составляющие совокупность, являются идентичными, за исключением возможных встречающихся в природе мутаций и/или посттрансляционных модификаций (например, изомеризаций, амидаций), которые могут быть представлены в небольших количествах. Моноклональные антитела являются высокоспецифичными, и они направлены против одного антигенного участка. В противоположность препаратам поликлональных антител, которые, как правило, включают различные антитела, направленные против различных детерминант (эпитопов), каждое моноклональное антитело в препарате моноклонального антитела направлено против одной детерминанты на антигене. В дополнение к их специфичности, моноклональные антитела являются преимущественными в том, что они синтезированы из своей гибридомной культуры, не содержащей других иммуноглобулинов. Определение "моноклональный" указывает на тот признак антитела, что его получают из, по существу, гомогенной совокупности антител, и не подразумевает того, что антитело должно быть получено каким-либо конкретным способом. Например, моноклональные антитела, предназначенные для применения в соответствии с настоящим изобретением, можно получать множеством способов, включая, например, способ гибридом (например, Kohler and Milstein, Nature, 256:495 (1975); Hongo et al., Hybridoma, 14 (3):253-260 (1995), Harlow et al., Antibodies: A Laboratory Manual, (Cold Spring Harbor Laboratory Press, 2nd ed. 1988); Hammerling et al., Monoclonal Antibodies and T-Cell Hybrodimas 563-681 (Elsevier, N.Y., 1981)), способы рекомбинантных ДНК (см., например, патент США № 4816567), технологии фагового дисплея (см., например, Clackson et al., Nature, 352:624-628 (1991); Marks et al., J. Mol. Biol., 222:581-597 (1991); Sidhu et al., J. Mol. Biol. 338(2):299-310 (2004); Lee et al., J. Mol. Biol. 340(5):1073-1093 (2004); Fellouse, Proc. Nat. Acad. Sci. USA 101(34):12467-12472 (2004); и Lee et al. J. Immunol. Methods 284(1-2):119-132 (2004)) и технологии продуцирования антитела человека или антител, подобных антителам человека, у животных, которые имеют части локусов или генов иммуноглобулинов человека, кодирующие последовательности иммуноглобулинов, или все эти локусы или гены (см., например, WO 1998/24893; WO 1996/34096; WO 1996/33735; WO 1991/10741; Jakobovits et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90:2551 (1993); Jakobovits et al., Nature, 362:255-258 (1993); Bruggemann et al., Year in Immunol., 7:33 (1993); патенты США №№ 5545807, 5545806, 5569825, 5625126, 5633425 и 5661016; Marks et al., Bio/Technology, 10:779-783 (1992); Lonberg et al., Nature, 368:856-859 (1994); Morrison, Nature, 368:812-813 (1994); Fishwild et al., Nature Biotechnology, 14:845-851 (1996); Neuberger, Nature Biotechnology, 14:826 (1996); и Lonberg and Huszar, Intern. Rev. Immunol., 13:65-93 (1995)).
Термин "голое антитело" относится к антителу, которое не конъюгировано с цитотоксической группой или радиоактивной меткой.
Термины "полноразмерное антитело", "интактное антитело" или "целое антитело" используют взаимозаменяемо, и они относятся к антителу в его, по существу, интактной форме в противоположность фрагменту антитела. Конкретно, целые антитела включают антитела с тяжелыми и легкими цепями, включающими Fc-область. Константные домены могут представлять собой константные домены с нативной последовательностью (например, константные домены с нативной последовательностью человека) или их варианты по аминокислотной последовательности. В некоторых случаях интактное антитело может иметь одну или несколько эффекторных функций.
"Фрагмент антитела" содержит часть интактного антитела, предпочтительно антигенсвязывающую или вариабельную область интактного антитела. Примеры фрагментов антител включают Fab, Fab', F(ab')2 и Fv-фрагменты, антитела-димеры, линейные антитела (см., например, патент США № 5641870, пример 2, Zapata et al., Protein Eng., 8(10):1057-1062 [1995]), одноцепочечные молекулы антител и полиспецифичные антитела, образованные фрагментами антител.
Расщепление антител папаином приводит к образованию двух идентичных антигенсвязывающих фрагментов, называемых "Fab"-фрагментами, и остаточного "Fc"-фрагмента, название которого отражает его способность легко кристаллизоваться. Fab-фрагмент состоит из целой L-цепи вместе с доменом вариабельной области H-цепи (VH) и первым константным доменом одной тяжелой цепи (CH1). Каждый Fab-фрагмент является одновалентным в отношении связывания антигена, т.е. он обладает одним антигенсвязывающим участком. Обработка антитела пепсином приводит к одному крупному F(ab')2-фрагменту, который приблизительно соответствует двум связанным дисульфидом Fab-фрагментам, имеющим различную антигенсвязывающую активность, и, кроме того, способен к перекрестному связыванию антигена. Fab'-фрагменты отличаются от Fab-фрагментов наличием дополнительных нескольких остатков на C-конце домена CH1, включая один или несколько цистеинов из шарнирной области антитела. Fab'-SH представляет собой обозначение для Fab', в котором остаток(ки) цистеина константных доменов обладает свободной тиольной группой. F(ab')2-фрагменты антитела исходно были получены в качестве пар Fab'-фрагментов, которые обладают шарнирными цистеинами между ними. Также известно другое химическое связывание фрагментов антител.
Fc-фрагмент содержит C-концевые части обеих H-цепей, удерживаемые вместе дисульфидами. Эффекторные функции антител определяются последовательностями Fc-участка, который также является частью, распознаваемой Fc-рецепторами (FcR), встречающимися на определенных типах клеток.
"Fv" представляет собой минимальный фрагмент антитела, который содержит полный антигенраспознающий и антигенсвязывающий сайт. Этот фрагмент состоит из димера доменов, состоящих из одной вариабельной области тяжелой цепи и одной вариабельной области легкой цепи, связанных прочной нековалентной связью. Сворачивание этих двух доменов образует шесть гипервариабельных петель (3 петли в каждой из H- и L-цепи), которые предоставляют аминокислотные остатки для связывания антигена и обеспечивают специфичность связывания антигена антителом. Однако даже один вариабельный домен (или половина Fv, содержащая только три области HVR, специфичных к антигену) обладает способностью распознавать и связывать антиген, хотя и с более низкой аффинностью, чем целый участок связывания.
"Одноцепочечные Fv", также сокращаемые как "sFv" или "scFv", представляют собой фрагменты антител, которые содержат VH и VL-домены антитела, соединенные в единую полипептидную цепь. Предпочтительно полипептид sFv также необязательно содержат полипептидный линкер между VH- и VL-доменами, который обеспечивают возможность формирования в sFv структуры, требуемой для связывания антигена. Для обзора sFv см. Pluckthun in The Pharmacology of Monoclonal Antibodies, vol. 113, Rosenburg and Moore eds. Springer-Verlag, New York, pp. 269-315 (1994).
"Функциональные фрагменты" антител по изобретению содержат часть интактного антитела, как правило, включающую антигенсвязывающую или вариабельную область интактного антитела или F-область антитела, которая сохраняет способность связывания FcR или обладает модифицированной способностью связывания FcR. Примеры фрагментов антитела включают линейное антитело, одноцепочечное антитело молекул и полиспецифичные антитела, образованные из фрагментов антитела.
Термин "антитела-димеры" (diabody) относится к небольшим фрагментам антител, полученных конструированием sFv-фрагментов (см. предыдущий абзац) с короткими линкерами (приблизительно 5-10 остатков) между VH- и VL-доменами, так что достигается образование пар V-доменов между цепями, а не внутри цепей, с образованием, таким образом, двухвалентного фрагмента, т.е. фрагмента, имеющего два антигенсвязывающих сайта. Биспецифичные антитела-димеры представляют собой гетеродимеры двух "пересекающихся" sFv-фрагментов, в которых VH- и VL-домены двух антител присутствуют на различных полипептидных цепях. Антитела-димеры более подробно описаны, например, в EP 404097; WO 93/11161; Hollinger et al., Proc. Natl Acad. Sci. USA 90:6444-6448 (1993).
В настоящем документе моноклональные антитела конкретно включают "химерные" антитела (иммуноглобулины), в которых часть тяжелой и/или легкой цепи является идентичной или гомологичной соответствующим последовательностям в антителах, полученных из конкретного вида или принадлежащих к конкретному классу или подклассу антител, в то время как оставшаяся часть цепи(ей) является идентичной или гомологичной соответствующим последовательностям в антителах, полученных из другого вида или принадлежащих другому классу или подклассу антител, а также фрагменты таких антител, при условии, что они проявляют требуемую биологическую активность (патент США № 4816567; и Morrison et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 81:6851-6855 (1984)). Представляющие интерес в настоящем документе химерные антитела включают антитела PRIMITIZED®, где антигенсвязывающая область антитела образована антителом, полученным, например, иммунизацией макак представляющим интерес антигеном. Как используют в настоящем документе, "гуманизированное антитело" применяют в качестве подтипа "химерных антител".
"Гуманизированные" формы антител, отличных от человеческих (например, мышиных), представляют собой химерные антитела, которые содержат минимальную последовательность, образованную иммуноглобулином не человека. В одном варианте осуществления гуманизированное антитело представляет собой иммуноглобулин человека (реципиентное антитело), в котором остатки из HVR реципиента заменены остатками HVR не относящегося к человеку вида (донорное антитело), такого как мышь, крыса, кролик или не относящийся к человеку примат, имеющими требуемую специфичность, аффинность и емкость. В некоторых случаях остатки каркасной области FR иммуноглобулина человека заменяют соответствующими остатками не человека. Более того, гуманизированные антитела могут содержать остатки, которые не встречаются ни в реципиентном антителе, ни в донорном антителе. Эти модификации могут быть проведены для дополнительного улучшения характеристик антитела, таких как аффинность связывания. Как правило, гуманизированное антитело будет содержать по существу все по меньшей мере из одного и, как правило, двух вариабельных доменов, в которых все или по существу все из гипервариабельных петель соответствуют гипервариабельным петлям последовательности иммуноглобулина не человека, и все или по существу все из областей FR представляют собой области FR консенсусной последовательности иммуноглобулина человека, хотя FR-области могут включать замену одного или нескольких отдельных остатков, которые улучшают характеристики антитела, такие как аффинность связывания, изомеризация, иммуногенность и т.д. Количество этих аминокислотных замен в FR, как правило, составляет не более 6 в H-цепи, и не более 3 в L-цепи. Гуманизированное антитело также необязательно будет содержать по меньшей мере часть константной области (Fc) иммуноглобулина, как правило, константной области иммуноглобулина человека. Для более подробного описания см. Jones et al., Nature 321:522-525 (1986); Riechmann et al., Nature 332:323-329 (1988); и Presta, Curr. Op. Struct. Biol. 2:593-596 (1992). Также см., например, Vaswani and Hamilton, Ann. Allergy, Asthma & Immunol. 1:105-115 (1998); Harris, Biochem. Soc. Transactions 23:1035-1038 (1995); Hurle and Gross, Curr. Op. Biotech. 5:428-433 (1994); и патенты США №№ 6982321 и 7087409.
"Антитело человека" представляет собой антитело, которое обладает аминокислотной последовательностью, соответствующей последовательности антитела, продуцируемого у человека и/или полученного с использованием любого из способов получения антител человека, как описано в настоящем документе. Это определение антитела человека конкретно исключает гуманизированное антитело, содержащее антигенсвязывающие остатки не человека. Антитела человека можно получать с использованием различных способов, известных в данной области, включая библиотеки фагового дисплея. Hoogenboom and Winter, J. Mol. Biol., 227:381 (1991); Marks et al., J. Mol. Biol, 222:581 (1991). Также для получения моноклональных антител человека доступны способы, описанные в Cole et al., Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Liss, p. 77 (1985); Boerner et al., J. Immunol, 147(l):86-95 (1991). Также см. van Dijk and van de Winkel, Curr. Opin. Pharmacol. 5:368-74 (2001). Антитела человека можно получать введением антигена трансгенному животному, которое модифицировано для продукции таких антител в ответ на иммунизацию антигеном, и эндогенные локусы которых заблокированы, например, иммунизированных xenomice (см., например, патенты США №№ 6075181 и 6150584, касающиеся технологии XENOMOUSETM). Также см., например, Li et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 103:3557-3562 (2006) в отношении антител человека, полученных технологией B-клеточных гибридом человека.
Как используют в настоящем документе, термин "гипервариабельная область", "HVR" или "HV" относится к областям вариабельного домена антитела, которые обладают гипервариабельными последовательностями и/или образуют структурно определенные петли. Как правило, антитела содержат шесть областей HVR: три в VH (H1, H2, H3) и три в VL (L1, L2, L3). В нативных антителах H3 и L3 проявляют наибольшее многообразие из шести HVR, и, в частности, полагают, что H3 играет уникальную роль в обеспечении специфичности антител. См., например, Xu et al. Immunity 13:37-45 (2000); Johnson and Wu in Methods in Molecular Biology 248:1-25 (Lo, ed., Human Press, Totowa, NJ, 2003)). Действительно, природные антитела верблюдовых, состоящие только из тяжелой цепи, являются функциональными и стабильными в отсутствии легкой цепи. См., например, Hamers-Casterman et al., Nature 363:446-448 (1993) и Sheriff et al., Nature Struct. Biol. 3:733-736 (1996).
В настоящем документе используется и охватывается ряд определений HVR. Области HVR, которые представляют собой определяющие комплементарность области по Kabat (CDR), основаны на вариабельности последовательности и используются наиболее широко (Kabat et al., выше). Chothia, вместо этого, ссылается на расположение структурных петель (Chothia and Lesk J. Mol. Biol. 196:901-917 (1987)). Области HVR AbM представляет собой компромисс между CDR Kabat и структурными петлями Chothia, и они используются программным обеспечением для модулирования антител Oxford Molecular's AbM. "Контактные" HVR основаны на анализе доступных комплексных кристаллических структур. Остатки из каждой из этих HVR указаны ниже.
Петля | Kabat | AbM | Chothia | Контакт |
L1 | L24-L34 | L24-L34 | L26-L34 | L30-L36 |
L2 | L50-L56 | L50-L56 | L50-L56 | L46-L55 |
L3 | L89-L97 | L89-L97 | L91-L96 | L89-L96 |
H1 | H31-H35B | H26-H35B | H26-H32 | H30-H35B (Нумерация по Kabat) |
H1 | H31-H35 | H26-H35 | H26-H32 | H30-H35 (Нумерация по Chothia) |
H2 | H50-H65 | H50-H58 | H53-H56 | H47-H58 |
H3 | H95-H102 | H95-H102 | H95-H102 | H93-H101 |
Области HVR могут содержать "удлиненные HVR" следующим образом: 24-36 или 24-34 (L1), 46-56 или 50-56 (L2) и 89-97 или 89-96 (L3) в VL, и 26-35 (H1), 50-65 или 47-65 (предпочтительный вариант осуществления) (H2) и 93-102 (H3) в VH. Остатки вариабельных доменов пронумерованы согласно Kabat et al., выше, для каждого из этих определений удлиненных HVR.
Остатки "каркасной области" или "FR" представляют собой остатки вариабельного домена, отличные от остатков HVR, как определено в настоящем документе.
Выражение "нумерация остатков вариабельных доменов по Kabat" или "нумерация аминокислотных положений по Kabat", и их варианты, относится к системе нумерации, используемой для вариабельных доменов тяжелой цепи или вариабельных доменов легкой цепи из собрания антител в Kabat et al., выше. С использованием этой системы нумерации действительная линейная аминокислотная последовательность может содержать меньшее количество аминокислот или дополнительные аминокислоты, соответствующие укорочению FR или HVR вариабельного домена, или вставке в них. Например, вариабельный домен тяжелой цепи может включать вставку одной аминокислоты (остаток 52a согласно Kabat) после остатка 52 H2 и встроенные остатки (например, остатки 82a, 82b и 82c, и т.д. согласно Kabat) после остатка 82 FR тяжелой цепи. Нумерацию остатков по Kabat можно определять для данного антитела посредством выравнивания в областях гомологии последовательности антитела со "стандартной" пронумерованной по Kabat последовательностью.
"Акцепторная каркасная область человека" для целей, представленных в настоящем документе, представляет собой каркасную область, содержащую аминокислотную последовательность каркасной области VL или VH, образованную каркасной областью иммуноглобулина человека или консенсусной каркасной областью человека. Акцепторная каркасная область человека, "образованная" каркасной областью иммуноглобулина человека или консенсусной каркасной областью человека, может содержать такую же его аминокислотную последовательность, или она может содержать ранее существующие изменения аминокислотной последовательности. В некоторых вариантах осуществления количество ранее существующих аминокислотных изменений составляет 10 или менее, 9 или менее, 8 или менее, 7 или менее, 6 или менее, 5 или менее, 4 или менее, 3 или менее или 2 или менее.
"Консенсусная каркасная область человека" представляет собой каркасную область, которая представляет собой наиболее часто встречающиеся аминокислотные остатки при выборе последовательностей каркасной области VL или VH иммуноглобулина человека. Как правило, выбор последовательностей VL или VH иммуноглобулина человека проводят из подгруппы последовательностей вариабельных доменов. Как правило, подгруппа последовательностей представляет собой подгруппу согласно Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5th Ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991). В одном варианте осуществления, для VL, подгруппа представляет собой подгруппу каппа I согласно Kabat et al., выше. В одном варианте осуществления, для VH, подгруппа представляет собой подгруппу III согласно Kabat et al., выше.
"Консенсусная каркасная область подгруппы III VH" содержит консенсусную последовательность, полученную из аминокислотных последовательностей подгруппы III вариабельного домена тяжелой цепи согласно Kabat et al., выше. В одном варианте осуществления аминокислотная последовательность консенсусной каркасной области подгруппы III VH содержит по меньшей мере часть из следующих последовательностей или все из них: EVQLVESGGGLVQPGGSLRLSCAAS (H1) (SEQ ID NO:55), WVRQAPGKGLEWVA (SEQ ID NO:56) (H2), RFTISRDDSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCAR (SEQ ID NO:57) (H3), WGQGTLVTVSS (SEQ ID NO:58) (H4).
"Консенсусная каркасная область подгруппы I VL" содержит консенсусную последовательность, полученную из аминокислотных последовательностей в подгруппе I вариабельного домена легкой цепи каппа Kabat et al., выше. В одном варианте осуществления аминокислотная последовательность консенсусной каркасной области подгруппы I VH содержит по меньшей мере часть из следующих последовательностей, или все из них: DIQMTQSPSSLSASVGDRVTITC (SEQ ID NO:59) (L1), WYQQKPGKAPKLLIY (SEQ ID NO:60) (L2), GVPSRFSGSGSGTDFTLTISSLQPEDFATYYC (SEQ ID NO:61) (L3), FGQGTKVEIKR (SEQ ID NO:62) (L4).
"Модификация аминокислот" в указанном положении, например Fc-области, относится к замене или делеции указанного остатка, или вставке по меньшей мере одного аминокислотного остатка рядом с указанным остатком. Вставка "рядом" с указанным остатком означает вставку в пределах одного или двух остатков от него. Вставка может быть N-концевой или C-концевой относительно указанного остатка. Предпочтительной модификацией аминокислот в настоящем документе является замена.
Антитело "с созреванием аффинности" представляет собой антитело с одним или несколькими изменениями в одной или нескольких его HVR, которые приводят к повышению аффинности антитела к антигену по сравнению с исходным антителом, которое не обладает этим изменением(ями). В одном варианте осуществления антитело с созреванием аффинности обладает наномолярной или даже пикомолярной аффинностью к антигену-мишени. Антитела с созреванием аффинности получают способами, известными в данной области. Например, Marks et al., Bio/Technology 10:779-783 (1992) описывают созревание аффинности "перетасовкой" VH- и VL-доменов. Случайный мутагенез остатков HVR и/или каркасной области описан, например: Barbas et al. Proc Nat. Acad. Sci. USA 91:3809-3813 (1994); Schier et al. Gene 169:147-155 (1995); Yelton et al. J. Immunol. 155:1994-2004 (1995); Jackson et al., J. Immunol. 154(7):3310-9 (1995); и Hawkins et al., J. Mol. Biol. 226:889-896 (1992).
Антитело, которое "специфично связывается с" или является "специфичным к" конкретному полипептиду или эпитопу на конкретном полипептиде, представляет собой антитело, которое связывается с конкретным полипептидом или эпитопом на конкретном полипептиде без существенного связывания с любым другим полипептидом или эпитопом полипептида. Например, специфичные к М1' антитела по настоящему изобретению являются специфичными к внеклеточному сегменту М1' IgE, находящемуся на IgE, связанном на B-клетках, но отсутствующему на секретируемых IgE.
"Блокирующее" антитело или "антитело-антагонист" представляет собой антитело, которое ингибирует или снижает биологическую активность антигена, который оно связывает. В некоторых вариантах осуществления блокирующие антитела или антитела-антагонисты значительно или полностью ингибируют биологическую активность антигена. Апоптотические антитела против IgE по изобретению блокируют активность IgE в отношении опосредования иммунного ответа таким образом, чтобы снизились как свободный сывороточный, так и тотальный сывороточный IgE.
Антитела, которые "индуцируют апоптоз" или являются "апоптотическими", представляют собой антитела, которые индуцируют запрограммированную клеточную гибель, как определяют стандартными способами анализа апоптоза, такими как связывание аннексина V, фрагментация ДНК, сморщивание клеток, набухание эндоплазматической сети, фрагментация клетки и/или образование мембранных везикул (называемых апоптотическими тельцами). Например, апоптотическую активность антител против IgE по настоящему изобретению можно показать окрашиванием клеток со связанным на поверхности IgE аннексином V.
Термин "тотальный сывороточный IgE" относится к тотальному количеству IgE, присутствующему в образце, включая как свободный или несвязанный, так и IgE, который находится в комплексе с партнером по связыванию (например, антителом против IgE, обладающей IgE B-клеткой). "Свободный сывороточный IgE" относится к IgE, который не связан с партнером по связыванию.
Термин "аллергенспецифичный IgE" относится к IgE, который является специфичным к конкретному антигену, вследствие первоначального воздействия антигена в процессе, известном как аллергическая сенсибилизация, который связывает поверхность тучных клеток и базофилов и который может вызывать активацию тучных клеток и базофилов при последующем воздействии того же аллергена. Некоторые митогенные факторы в вирусах (например, цитомегаловирус - CMV), бактериях (например, Staphylococcus), гельминтах (например, Ascaris, Schistosoma) и адъювантные факторы в загрязненном воздухе (например, сигаретный дым и дизельный выхлоп) стимулируют продукцию молекул IgE без инициации какой-либо специфичной к аллергену IgE-сенсибилизации. Таким образом, поскольку уровни IgE могут повышаться таким образом, который не обязательно предрасполагает хозяина к тому, чтобы он стал более чувствительным к опосредуемому IgE нарушению, иногда уровни аллергенспецифичного IgE используют при клинической оценке.
Термин "специфично устраняет продуцирующие IgE B-клетки" означает способность специфично снижать популяцию или эффективность B-клеток, которые специфично секретируют IgE (т.е. плазматических клеток), но не оказывают существенного влияния на популяцию или эффективность B-клеток, которые секретируют другие иммуноглобулины, такие как IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA и IgM.
Термин "твердая фаза" означает неводную матрицу, к которой антитело по настоящему изобретению может прикрепляться. Примеры твердых фаз, охватываемые в настоящем документе, включают твердые фазы, образованные частично или полностью из стекла (например, стекла с контролируемым размером пор), полисахаридов (например, агарозы), полиакриламидов, полистирола, поливинилового спирта и силиконов. В определенных вариантах осуществления, в зависимости от контекста, твердая фаза может включать лунку планшета для анализа; в других вариантах осуществления она представляет собой колонку для очистки (например, колонку для аффинной хроматографии). Также этот термин включает дисперсную твердую фазу из дискретных частиц, такую как твердая фаза, описанная в патенте США № 4275149.
"Эффекторные функции" антитела относятся к видам биологической активности, свойственным Fc-области (Fc-области с нативной последовательностью или Fc-области варианта по аминокислотной последовательности) антитела, и они могут варьировать в зависимости от изотипа антитела. Примеры эффекторных функций антитела включают: связывание C1q и комплементзависимую цитотоксичность; связывание Fc-рецептора; антителозависимую клеточно-опосредуемую цитотоксичность (ADCC); фагоцитоз; подавление рецепторов клеточной поверхности (например, рецепторов B-клеток) и активацию B-клеток.
"Антителозависимая клеточно-опосредуемая цитотоксичность" или ADCC относится к форме цитотоксичности, при которой секретируемый Ig, связанный с Fc-рецепторами (FcR), присутствующими на определенных цитотоксических клетках (например, естественных киллерных (NK) клетках, нейтрофилах и макрофагах), позволяет этим цитотоксическим эффекторным клеткам связываться специфично с обладающей антигеном клеткой-мишенью и впоследствии уничтожать клетку-мишень посредством цитотоксинов. Антитела "вооружают" цитотоксические клетки, и они необходимы для уничтожения клетки-мишени посредством этого механизма. Основные клетки для осуществления ADCC, NK-клетки, экспрессируют только FcγRIII, в то время как моноциты экспрессируют FcγRI, FcγRII и FcγRIII. Экспрессия FcR на кроветворных клетках представлена в таблице 3 на странице 464 Ravetch and Kinet, Annu. Rev. Immunol. 9:457-92 (1991). Для оценки активности представляющей интерес молекулы в отношении ADCC можно проводить анализ ADCC in vitro, такой как анализ, описанный в патенте США №№ 5500362 или 5821337. Пригодные для таких анализов эффекторные клетки включают мононуклеарные клетки периферической крови (PBMC) и естественные киллерные (NK) клетки. Альтернативно, или дополнительно, активность представляющей интерес молекулы в отношении ADCC можно оценивать in vivo, например, в модели на животных, такой как описана в Clynes et al. PNAS (USA) 95:652-656 (1998).
Если в настоящем документе нет иных указаний, нумерация остатков в тяжелой цепи иммуноглобулина представляет собой нумерацию согласно индексу EU по Kabat et al., выше. "Индекс EU по Kabat" относится к нумерации остатков антитела EU IgG1 человека.
Термин "Fc-область" в настоящем документе используют для определения C-концевого участка тяжелой цепи иммуноглобулина, включая Fc-области с нативной последовательностью и варианты Fc-областей. Хотя границы Fc-области тяжелой цепи иммуноглобулина могут варьировать, Fc-область тяжелой цепи IgG человека определяется как участок от аминокислотного остатка в положении Cys226, или от Pro230, до его C-конца. C-концевой лизин (остаток 447 согласно системе нумерации EU) Fc-области можно быть удален, например, в ходе продукции или очистки антитела, или посредством рекомбинантной инженерии нуклеиновой кислоты, кодирующей тяжелую цепь антитела. Таким образом, композиция интактных антител может содержать совокупности антител, где все остатки K447 удалены, совокупности антител, где остатки K447 не удалены, и совокупности антител, имеющие смесь антител с остатком K447 и без него. Пригодные Fc-области с нативной последовательностью для применения в антителах по изобретению включают IgG1, IgG2, IgG3 и IgG4 человека.
"Fc-рецептор" или "FcR" относится к рецептору, который связывается с Fc-областью антитела. Предпочтительным FcR является FcR человека с нативной последовательностью. Более того, предпочтительным FcR является FcR, который связывает антитело IgG (гамма-рецептор) и включает рецепторы подклассов FcγRI, FcγRII и FcγRIII, в том числе аллельные варианты и альтернативно сплайсированные формы этих рецепторов, рецепторы FcγRII включают FcγRIIA ("активирующий рецептор") и FcγRIIB ("ингибирующий рецептор"), которые обладают сходными аминокислотными последовательностями, отличающимися, главным образом, своими цитоплазматическими доменами. Активирующий рецептор FcγRIIA в своем цитоплазматическом домене содержит иммунорецепторный тирозинсвязывающий активирующий мотив (ITAM). Ингибирующий рецептор FcγRIIB в своем цитоплазматическом домене содержит иммунорецепторный тирозинсвязывающий ингибирующий мотив (ITIM) (см. M. Daeron, Annu. Rev. Immunol. 15:203-234 (1997)). FcR рассмотрены в Ravetch and Kinet, Annu. Rev. Immunol. 9:457-92 (1991); Capel et al., Immunomethods 4:25-34 (1994); и de Haas et al., J. Lab. Clin. Med. 126:330-41 (1995). К термину "FcR" в настоящей заявке относятся другие FcR, том числе FcR, которые будут выявлены в будущем.
Термин "Fc-рецептор" или "FcR" также включает неонатальный рецептор, FcRn, который отвечает за перенос материнских IgG плоду. Guyer et al., J. Immunol. 117:587 (1976) и Kim et al., J. Immunol. 24:249 (1994). Способы определения связывания с FcRn известны (см., например, Ghetie and Ward, Immunol. Today 18:(12):592-8 (1997); Ghetie et al., Nature Biotechnology 15(7):637-40 (1997); Hinton et al., J. Biol. Chem. 279(8):6213-6 (2004); WO 2004/92219 (Hinton et al.).
Связывание с FcRn in vivo и время полужизни в сыворотке высокоаффинных связывающих полипептидов FcRn человека можно анализировать, например, у трансгенных мышей или в трансфицированных клеточных линиях человека, экспрессирующих FcRn человека, или у приматов, которым вводят полипептиды, имеющие вариант Fc-области. В WO 2004/42072 (Presta) описаны варианты антитела, которые повышают или снижают связывание с FcR. Также см., например, Shields et al., J. Biol. Chem. 9(2):6591-6604 (2001).
"Эффекторные клетки человека" представляют собой лейкоциты, которые экспрессируют один или несколько FcR и выполняют эффекторные функции. Предпочтительно клетки экспрессируют по меньшей мере FcγRIII и выполняют эффекторную функцию ADCC. Примеры лейкоцитов человека, которые опосредуют ADCC, включают мононуклеарные клетки периферической крови (PBMC), естественные киллерные (NK) клетки, моноциты, цитотоксические T-клетки и нейтрофилы, причем клетки PBMC и MNK являются предпочтительными. Эффекторные клетки можно выделять из природного источника, например крови.
"Комплементзависимая цитотоксичность" или "CDC" относится к лизису клетки-мишени в присутствии комплемента. Активация классического каскада комплемента запускается связыванием первого компонента системы комплемента (C1q) с антителами (соответствующего подкласса), которые связываются с узнаваемым ими антигеном. Для анализа активации комплемента можно проводить анализ CDC, например, как описано в Gazzano-Santoro et al., J. Immunol. Methods 202:163 (1996).
Полипептидные варианты с измененными аминокислотными последовательностями Fc-области и повышенной или сниженной способностью связывать C1q описаны в патенте США № 6194551B1 и WO99/51642. Содержание этих патентных публикаций конкретно включено в настоящий документ в качестве ссылки. Также см., Idusogie et al. J. Immunol. 164:4178-4184 (2000).
Участок N-гликозилирования в IgG находится в области Asn297 CH2-домена. Также настоящее изобретение относится к композициям связывающего CD20 гуманизированного антитела, имеющего Fc-область, где приблизительно 80-100% (и предпочтительно приблизительно 90-99%) антитела в композиции содержит зрелую коровую углеводную структуру, которая лишена фукозы, связанную с Fc-областью гликопротеина. В настоящем документе показано, что такие композиции проявляют неожиданное повышение связывания с FcγRIIIA(F158), которое не настолько эффективно, как связывание с FcγRIIIA (V158), в отношении взаимодействия с IgG человека. Таким образом, ожидается, что композиции, представленные в настоящем документе, превзойдут ранее описанные композиции антител против CD20, особенно для лечения пациентов-людей, у которых экспрессируется FcγRIIIA (F158). FcγRIIIA (F158) является более распространенным, чем FcγRIIIA (V158) у нормальных здоровых афроамериканцев и европейцев. См. Lehrnbecher et al. Blood 94:4220 (1999). Кроме того, в настоящей заявке показано синергичное повышение связывания FcγRIII и/или функции ADCC, которое является следствием комбинирования вариантов по гликозилированию, представленных в настоящем документе, с модификацией(ями) аминокислотной последовательности в Fc-области гликопротеина.
"Аффинность связывания", главным образом, относится к силе всех суммарных нековалентных взаимодействий между одним участком связывания молекулы (например, антитела) и его партнера по связыванию (например, антигена). Если нет иных указаний, как используют в настоящем документе, "аффинность связывания" относится к свойственной аффинности связывания, которая отражает взаимодействие 1:1 между членами связывающейся пары (например, антитела и антигена). Аффинность молекулы X к ее партнеру Y может быть представлена, главным образом, с помощью константы диссоциации (Kd). Аффинность можно определять обычными способами, известными в данной области, включая способы, описанные в настоящем документе. Низкоаффинные антитела, как правило, связывают антиген медленно и имеют тенденцию легко диссоциировать, а высокоаффинные антитела, как правило, связывают антиген быстрее и имеют тенденцию оставаться в связанном состоянии дольше. В данной области известно множество способов определения аффинности связывания, любые из которых можно использовать для целей настоящего изобретения. Конкретные иллюстративные и типовые варианты осуществления для определения аффинности связывания описаны ниже.
В одном варианте осуществления "Kd" или "значение Kd" по этому изобретению определяют с помощью анализа связывания меченного радиоактивной меткой антигена (RIA), проводимого с Fab-вариантом представляющего интерес антитела и его антигеном, как описано для представленного ниже анализа. Связывающую аффинность в растворе Fab к антигену определяют посредством уравновешивания Fab минимальной концентрацией (125I)-меченного антигена в присутствии титрованных серий немеченого антигена, а затем захвата связанного антигена с помощью покрытого антителом против Fab планшета (см., например, Chen et al., J. Mol. Biol. 293:865-881 (1999)). Для определения условий анализа на микропланшеты для титрования (DYNEX Technologies, Inc.) наносят в течение ночи 5 мкг/мл улавливающего антитела против Fab (Cappel Labs) в 50 мМ карбонате натрия (pH 9,6), а затем блокируют 2% (масс./об.) бычьим сывороточным альбумином в PBS в течение от двух до пяти часов при комнатной температуре (приблизительно 23°C). В планшете без адсорбента (Nunc #269620), 100 пМ или 26 пМ [125I]-антигена смешивают с серийными разведениями представляющего интерес Fab (например, в соответствии с оценкой антитела против VEGF, Fab-12, в Presta et al., Cancer Res. 57:4593-4599 (1997)). Затем представляющий интерес Fab инкубируют в течение ночи; однако инкубацию можно продолжать в течение более длительного периода (например, приблизительно 65 часов), чтобы обеспечить достижение равновесия. После этого смеси переносят в улавливающий планшет для инкубации при комнатной температуре (например, в течение одного часа). Затем раствор удаляют, и планшет промывают восемь раз 0,1% раствором поверхностно-активного вещества TWEEN-20TM в PBS. После высыхания планшетов добавляют 150 мкл/лунка сцинтилляционной жидкости (MICROSCINT-20TM; Packard), и планшеты подвергают подсчету на гамма-счетчике TOPCOUNTTM (Packard) в течение десяти минут. Концентрации каждого Fab, которые дают меньше или равно 20% максимального связывания, выбирают для применения в конкурентных анализах связывания.
Согласно другому варианту осуществления Kd определяют с использованием анализов поверхностного плазмонного резонанса с использованием инструмента BIACORE®-2000 или BIACORE®-3000 (BIAcore, Inc., Piscataway, NJ) при 25°C с чипами с иммобилизованным антигеном CM5 при ~10 единиц ответа (RU). В кратком изложении, биосенсорные чипы из карбоксиметилированного декстрана (CM5, BIAcore Inc.) активируют гидрохлоридом N-этил-N'-(3-диметиламинопропил)карбодиимида (EDC) и N-гидроксисукцинимидом (NHS) согласно инструкциям поставщика. Антиген разбавляют 10 мМ ацетатом натрия, pH 4,8, до 5 мкг/мл (~0,2 мкМ) перед инъекцией со скоростью потока 5 мкл/минута для достижения приблизительно 10 единиц ответа (RU) связанного белка. После инъекции антигена инъецируют 1M этаноламин для блокирования не вступивших в реакцию групп. Для определения кинетики двукратные серийные разведения Fab (от 0,78 нМ до 500 нМ) инъецируют в PBS с 0,05% раствором поверхностно-активного вещества TWEEN 20TM (PBST) при 25°C при скорости потока приблизительно 25 мкл/мин. Константы ассоциации (kon) и константы диссоциации (koff) вычисляют с использованием простой модели связывания Ленгмюра "один к одному" (BIAcore® Evaluation Software version 3.2) посредством одновременной подгонки сенсограмм ассоциации и диссоциации. Равновесную константу диссоциации (Kd) вычисляют как отношение koff/kon. См., например, Chen et al., J. Mol. Biol. 293:865-881 (1999). Если константа ассоциации превышает 106 M-1 с-1 посредством анализа поверхностного плазмонного резонанса, выше, то константу ассоциации можно определить с использованием способа флуоресцентного тушения, посредством которого определяют повышение или снижение интенсивности испускания флуоресценции (возбуждение = 295 нм; испускание = 340 нм, полоса пропускания 16 нм) при 25°C для 20 нМ антитела против антигена (форма Fab) в PBS, pH 7,2, в присутствии возрастающих концентраций антигена, как определяют в спектрофотометре, таком как оборудованный останавливаемой струей спектрофотометр (Aviv Instruments) или спектрофотометр серии 8000 SLM-AMINCOTM (ThermoSpectronic) со встряхиваемой кюветой.
"Константа ассоциации", "скорость ассоциации", "коэффициент ассоциации" или "kon" согласно этому изобретению также можно определить, как описано выше, с использованием системы BIACORE®-2000 или BIACORE®-3000 (BIAcore, Inc., Piscataway, NJ).
Выражение "по существу сниженный" или "по существу отличающийся", как используют в настоящем документе, означает достаточно высокую степень отличия между двумя числовыми значениями (как правило, одно из них ассоциировано с молекулой, а другое ассоциировано с эталонной/сравниваемой молекулой), так что специалист в данной области может считать отличие между двумя значениями статистическими значимыми в контексте биологической характеристики, определяемой указными значениями (например, значениями Kd). Отличие между указанными двумя значениями, например, превышает приблизительно 10%, превышает приблизительно 20%, превышает приблизительно 30%, превышает приблизительно 40% и/или превышает приблизительно 50% относительно значения эталонной/сравниваемой молекулы.
Термин "по существу сходный" или "по существу одинаковый", как используют в настоящем документе, обозначает достаточно высокую степень сходства между двумя числовыми значениями (например, одно из них ассоциировано с антителом по изобретению, а другое ассоциировано с эталонным/сравниваемым антителом), так что специалист в данной области может считать отличие между двумя значениями небольшими или не имеющими биологической и/или статистической значимости в контексте биологической характеристики, определяемой указанными значениями (например, значениями Kd). Отличие между указанными двумя значениями составляет, например, менее чем приблизительно 50%, менее чем приблизительно 40%, менее чем приблизительно 30%, менее чем приблизительно 20% и/или менее чем приблизительно 10% относительно эталонного/сравниваемого значения.
"Процентную (%) идентичность аминокислотной последовательности" или "гомологию" в отношении последовательности пептида, полипептида или антитела определяют как процентное количество аминокислотных остатков в последовательности-кандидате, которые идентичны с аминокислотными остатками в конкретной пептидной или полипептидной последовательности после выравнивания последовательностей и внесения пропусков, если необходимо, для достижения максимальной процентной идентичности последовательностей, и не считая какие-либо консервативные замены частью идентичности последовательностей. Выравнивание для целей определения процентной идентичности аминокислотных последовательностей можно проводить различными способами, которые находятся в пределах специальных знаний, например, с использованием общедоступного компьютерного программного обеспечения, такого как программное обеспечение BLAST, BLAST-2, ALIGN или MEGALIGN™ (DNASTAR). Специалисты в данной области могут определить соответствующие параметры для проведения выравнивания, включая любые алгоритмы, требуемые для достижения максимального выравнивания на протяжении всей длины сравниваемых последовательностей. Однако для целей, представленных в настоящем документе, значения % идентичности аминокислотных последовательностей получают с использованием компьютерной программы для сравнения последовательностей ALIGN-2, созданной Genentech, Inc. Исходный текст был представлен с пользовательской документацией в U.S. Copyright Office, Washington D.C., 20559, где он зарегистрирован под U.S. Copyright Registration No. TXU510087. Программа ALIGN-2 является общедоступной через Genentech, Inc., South San Francisco, California. Программа ALIGN-2 должна быть составлена для применения на операционной системе UNIX, предпочтительно цифровой UNIX V4.0D. Все параметры сравнения последовательностей установлены программой ALIGN-2 и не изменяются.
В случаях когда ALIGN-2 используют для сравнений аминокислотных последовательностей, % идентичность аминокислотных последовательностей данной аминокислотной последовательности A к, с или против данной аминокислотной последовательности B (которую альтернативно можно назвать данной аминокислотной последовательностью A, которая содержит определенную % идентичность аминокислотной последовательности к, с или против данной аминокислотной последовательности B) можно вычислять следующим образом:
100 умножить на частное X/Y,
где X представляет собой число аминокислотных остатков, оцененных как идентичные совпадения программой выравнивания или алгоритмом выравнивания последовательностей A и B, и где Y представляет собой общее количество аминокислотных остатков в B. Понятно, что когда длина аминокислотной последовательности A не равна длине аминокислотной последовательности B, % идентичность аминокислотной последовательности A к B не будет равна % идентичности аминокислотной последовательности B к A.
Если конкретно не указано иное, все значения % идентичности аминокислотных последовательностей, используемые в настоящем документе, получают, как описано в предыдущем абзаце с использованием компьютерной программы ALIGN-2.
“Выделенная” молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая антитела, представленные в настоящем документе, представляет собой молекулу нуклеиновой кислоты, которая идентифицирована и отделена по меньшей мере от одной загрязняющей молекулы нуклеиновой кислоты, с которой она обычно ассоциирована в окружении, в котором она продуцирована. Предпочтительно выделенная нуклеиновая кислота не ассоциирована с компонентами, ассоциированными с окружением, где она продуцируется. Выделенные молекулы нуклеиновых кислот, кодирующие полипептиды и антитела, представленные в настоящем документе, находятся в форме, отличной от формы или условий, в которых она встречается в природе. Таким образом, выделенные молекулы нуклеиновых кислот отличаются от молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептиды и антитела, представленные в настоящем документе, которые существуют в клетках в природе.
Термин “последовательности контроля” относится к последовательностям ДНК, необходимым для экспрессии функционально связанной кодирующей последовательности в конкретном организме-хозяине. Контрольные последовательности, которые пригодны для прокариот, включают, например, промотор, необязательно последовательность оператора и участок связывания рибосом. Известно, что эукариотические клетки используют промоторы, сигналы полиаденилирования и энхансеры.
Нуклеиновая кислота является "функционально связанной", если она находится в функциональной связи с другой последовательностью нуклеиновой кислоты. Например, ДНК для препоследовательности или секреторной лидерной последовательности функционально связана с ДНК полипептида, если она экспрессируется в качестве пребелка, который участвует в секреции полипептида; промотор или энхансер является функционально связанным с кодирующей последовательностью, если он влияет на транскрипцию последовательности; или участок связывания рибосом является функционально связанным с кодирующей последовательностью, если он расположен таким образом, чтобы облегчить трансляцию. Как правило, "функционально связанный" означает, что связанные последовательности ДНК являются соседними, и, в случае секреторной лидерной последовательности, являются соседними и находятся в рамке считывания. Однако энхансеры на должны быть смежными. Связывание осуществляют посредством лигирования в соответствующих участках рестрикции. Если таких участков нет, используют синтетические олигонуклеотидные соединительные элементы или линкеры в соответствии с общепринятой практикой.
Термин "меченный эпитопом", при применении в настоящем документе, относится к химерному полипептиду, содержащему полипептид или антитело, описанные в настоящем документе, которые являются слитыми с "полипептидом-меткой". Полипептид-метка имеет достаточное количество остатков для обеспечения эпитопа, против которого можно получать антитело, но в то же время является достаточно коротким, чтобы не препятствовать активности полипептида, с которым он слит. Также полипептид-метка предпочтительно является совершенно уникальным, так что антитело, по существу, не вступает в перекрестные реакции с другими эпитопами. Пригодные полипептиды-метки, как правило, имеют по меньшей мере шесть аминокислотных остатков, как правило, между приблизительно 8 и 50 аминокислотных остатков (предпочтительно между приблизительно 10 и 20 аминокислотных остатков).
Как используют в настоящем документе, термин "иммуноадгезин" означает подобные антителу молекулы, которые сочетают специфичность связывания гетерологичного белка ("адгезин") с эффекторными функциями константных доменов иммуноглобулинов. Структурно иммуноадгезины содержат аминокислотную последовательность с требуемой специфичностью связывания, отличающуюся от участка распознавания антигена и участка связывания антитела (т.е. являющуюся "гетерологичной"), слитую с последовательностью константного домена иммуноглобулина. Часть адгезина в молекуле иммуноадгезина, как правило, представляет собой непрерывную аминокислотную последовательность, содержащую по меньшей мере участок связывания рецептора или лиганда. Последовательность константного домена иммуноглобулина в иммуноадгезине может быть получена из любого иммуноглобулина, такого как изотипы IgG-1, IgG-2, IgG-3 или IgG-4, IgA (включая IgA-1 и IgA-2), IgE, IgD или IgM. Слитые молекулы Ig предпочтительно включают замену доменом полипептида или антитела, описанного в настоящем документе, по меньшей мере одного вариабельного участка в молекуле Ig. В особенно предпочтительном варианте осуществления слитая молекула иммуноглобулина включает шарнирную область, CH2 и CH3, или шарнирную область, CH1-, CH2- и CH3-участки молекулы IgG1. Для получения слитых молекул иммуноглобулинов также см. патент США № 5428130, выданный 27 июня 1995 года. Например, пригодные иммуноадгезины в качестве вторых лекарственных средств, пригодных для комбинированной терапии, представленной в настоящем документе, включают полипептиды, которые содержат связывающие BLyS участки рецептора BLyS без слияния трансмембранного BR3, TACI или BCMA с константным доменом последовательности иммуноглобулина.
"Слитый белок" и "слитый полипептид" относятся к полипептиду, имеющему два участка, ковалентно связанных друг с другом, где каждый из участков представляет собой полипептид, имеющий отличающееся свойство. Свойство может представлять собой биологическое свойство, такое как активность in vitro или in vivo. Также свойство может представлять собой простое химическое или физическое свойство, такое как связывание с молекулой-мишенью, катализ реакции и т.д. Два участка могут быть связаны прямо простой пептидной связью или через пептидный линкер, и они будут находиться в рамке считывания друг с другом.
"Стабильный" состав представляет собой состав, в котором белок, по существу, сохраняет свою физическую и химическую стабильность и целостность при хранении. В данной области доступны различные аналитические способы определения стабильности белка, и они рассмотрены в Peptide and Protein Drug Delivery, 247-301, Vincent Lee Ed., Marcel Dekker, Inc., New York, New York, Pubs. (1991) и Jones, A. Adv. Drug Delivery Rev. 10:29-90 (1993). Стабильность можно определять при выбранной температуре в течение выбранного периода времени. Для быстрого скрининга состав можно держать при 40°C в течение от 2 недель до 1 месяца, в течение которых измеряют стабильность. Когда состав надлежит хранить при 2-8°C, как правило, состав должен быть стабильным при 30°C или 40°C в течение по меньшей мере 1 месяца, и/или он должен быть стабильным при 2-8°C в течение по меньшей мере 2 лет. Когда состав подлежит хранению при 30°C, как правило, состав должен быть стабильным в течение по меньшей мере 2 лет при 30°C и/или стабильным при 40°C в течение по меньшей мере 6 месяцев. Например, в качестве индикатора стабильности белка в ходе хранения можно использовать степень агрегации. Таким образом, "стабильный" состав может представлять собой состав, где менее чем приблизительно 10% и предпочтительно менее чем приблизительно 5% белка присутствует в качестве агрегата в составе. В других вариантах осуществления можно определять любое повышение образования агрегатов в ходе хранения состава.
"Восстановленный" состав представляет собой состав, который получен разбавлением лиофилизированного состава белка или антитела в разбавителе, так что этот белок диспергирован в нем. Разбавленный состав пригоден для введения (например, парентерального введения) пациенту, подлежащему лечению представляющим интерес белком, и в определенных вариантах осуществления изобретения он может представлять собой состав, который пригоден для подкожного введения.
"Изотонический" состав представляет собой состав, который обладает, по существу, таким же осмотическим давлением, что и кровь человека. Изотонические составы, как правило, будут иметь осмотическое давление от приблизительно 250 до 350 мосм. Термином "гипотонический" описывают состав с осмотическим давлением ниже осмотического давления крови человека. Соответственно, термин "гипертонический" используют для описания состава с осмотическим давлением выше осмотического давления крови человека. Изотоничность можно определять с использованием, например, парофазного осмометра или замораживающего осмометра. Составы по настоящему изобретению являются гипертоничными в результате добавления соли и/или буфера.
Как используют в настоящем документе, "носители" включают фармацевтически приемлемые носители, эксципиенты или стабилизаторы, которые являются нетоксичными для клетки или млекопитающего, подвергаемых их воздействию, в используемых дозировках и концентрациях. Часто физиологически приемлемый носитель представляет собой водный pH-буферный раствор. Примеры физиологически приемлемых носителей включают буферы, такие как фосфат, цитрат, и другие органические кислоты; антиоксиданты, включая аскорбиновую кислоту; низкомолекулярные (менее чем приблизительно 10 остатков) полипептиды; белки, такие как сывороточный альбумин, желатин или иммуноглобулины; гидрофильные полимеры, такие как поливинилпирролидон; аминокислоты, такие как глицин, глутамин, аспарагин, аргинин или лизин; моносахариды, дисахариды и другие углеводы, включая глюкозу, маннозу или декстрины; хелатирующие агенты, такие как EDTA; спирты сахаров, такие как маннит или сорбит; солеобразующие противоионы, такие как натрий; и/или неионные поверхностно-активные вещества, такие как TWEEN™, полиэтиленгликоль (PEG) и PLURONICS™.
"Вкладыш в упаковку" относится к инструкциям, обычно включаемым в коммерческие упаковки лекарственных средств, которые содержат информацию о показаниях, обычно включаемую в коммерческие упаковки лекарственных средств, которые содержат информацию о показаниях, применении, дозировке, введении, противопоказаниях, других лекарственных средствах, подлежащих комбинированию с упакованным продуктом, и/или предупреждения, касающиеся применения таких лекарственных средств и т.д.
"Фармацевтически приемлемая кислота" включает неорганические и органические кислоты, которые являются нетоксичными в концентрации и форме, в которых они включены в состав. Например, пригодные неорганические кислоты включают хлороводородную, перхлорную, бромоводородную, йодоводородную, азотную, серную, сульфоновую, сульфиновую, сульфаниловую, фосфорную, угольную и т.д. Пригодные органические кислоты включают прямые и разветвленные алкильные, ароматические, циклические, циклоалифатические, арилалифатические, гетероциклические, насыщенные, ненасыщенные, моно-, ди- и трикарбоновые кислоты, включая, например, муравьиную, уксусную, 2-гидроксиуксусную, трифторуксусную, фенилуксусную, триметилуксусную, трет-бутилуксусную, антраниловую, пропановую, 2-гидроксипропановую, 2-оксопропионовую, пропандиовую, циклопентанпропионовую, циклопентанпропионовую, 3-фенилпропионовую, бутановую, бутандиовую, бензойную, 3-(4-гидроксибензоил)бензойную, 2-ацетоксибензойную, аскорбиновую, коричную, лаурилсерную, стеариновую, муконовую, миндальную, янтарную, эмбоновую, фумаровую, яблочную, малеиновую, гидроксималеиновую, малоновую, молочную, лимонную, виннокаменную, гликолевую, гликоновую, глюконовую, пировиноградную, глиоксаловую, щавелевую, мезиловую, янтарную, салициловую, фталовую, пальмовую, пальмеиновую, тиоциановую, метансульфоновую, этансульфоновую, 1,2-этандисульфоновую, 2-гидроксиэтансульфоновую, бензолсульфоновую, 4-хлорбензолсульфоновую, нафталин-2-сульфоновую, п-толуолсульфоновую, камфорсульфоновую, 4-метилбицикло[2.2.2]-окт-2-ен-1-карбоновую, глюкогептоновую, 4,4'-метиленбис-3-(гидрокси-2-ен-1-карбоновую), гидроксинафтоевую кислоты.
"Фармацевтически приемлемые основания" включают неорганические и органические основания, которые являются нетоксичными в концентрации и форме, в которых они включены в состав. Например, пригодные основания включают основания, образованные образующими неорганическое основание металлами, такими как литий, натрий, калий, магний, кальций, аммоний, железо, цинк, медь, марганец, алюминий, N-метилглюкамин, морфолин, пиперидин, и органические нетоксические основания, включая первичные, вторичные и третичные амины, замещенные амины, циклические амины и основные ионообменные смолы, [например, N(R')4 + (где R' независимо представляет собой H или C1-4алкил, например, аммоний, Tris)], например, изопропиламин, триметиламин, диэтиламин, триэтиламин, трипропиламин, этаноламин, 2-диэтиламиноэтанол, триметамин, дициклогексиламин, лизин, аргинин, гистидин, кофеин, прокаин, гидрабамин, холин, бетаин, этилендиамин, глюкозамин, метилглюкамин, теобромин, пурины, пиперазин, пиперидин, N-этилпиперидин, полиаминовые смолы и т.п. Особенно предпочтительными органическими нетоксическими основаниями являются изопропиламин, диэтиламин, этаноламин, триметамин, дициклогексиламин, холин и кофеин.
Дополнительные фармацевтически приемлемые кислоты и основания, применимые с настоящим изобретением, включают кислоты и основания, которые образованы из аминокислот, например гистидина, глицина, фенилаланина, аспарагиновой кислоты, глутаминовой кислоты, лизина и аспарагина.
"Фармацевтически приемлемые" буферы и соли включают буферы и соли, образованные как из кислотно-аддитивных солей, так и из основно-аддитивных солей указанных выше кислот и оснований. Конкретные буферы и/или соли включают гистидин, сукцинат и ацетат.
"Фармацевтически приемлемый сахар" представляет собой молекулу, которая, при комбинировании с представляющим интерес белком, значительно препятствует или снижает химическую и/или физическую нестабильность белка при хранении. Когда состав предназначен для лиофилизации и последующего восстановления, "фармацевтически приемлемые сахара" также могут быть известны в качестве "лиопротектора". Иллюстративные сахара и их соответствующие спирты сахаров включают: аминокислоту, такую как моноглутамат натрия или гистидин; метиламин, такой как бетаин; лиотропную соль, такую как сульфат магния; полиол, такой как трехатомные спирты сахаров или спирты сахаров с большей молекулярной массой, например глицерин, декстран, эритрит, глицерин, арабит, ксилит, сорбит и маннит; пропиленгликоль; полиэтиленгликоль; PLURONICS®; и их сочетания. Дополнительные иллюстративные лиопротекторы включают глицерин и желатин, и сахара мелибиозу, мелизитозу, рафинозу, маннотриозу и стахиозу. Примеры редуцирующих сахаров включают глюкозу, мальтозу, лактозу, мальтулозу, изомальтулозу и лактулозу. Примеры нередуцирующих сахаров включают нередуцирующие гликозиды полигидроксисоединений, выбранные из спиртов сахаров и других неразветвленных полиспиртов. Предпочтительными спиртами сахаров являются моногликозиды, особенно соединения, полученные восстановлением дисахаридов, таких как лактоза, мальтоза, лактулоза и мальтулоза. Гликозидная боковая группа может быть либо глюкозидной, либо галактозидной. Дополнительными примерами спиртов сахаров являются глюцит, мальтит, лактит и изомальтулоза. Предпочтительными фармацевтически приемлемыми сахарами являются нередуцирующие сахара трегалоза или сахароза. Фармацевтически приемлемые сахара добавляют в состав в "обеспечивающем защиту количестве" (например, перед лиофилизацией), которое означает, что белок, по существу, сохраняет его физическую и химическую стабильность и целостность при хранении (например, после восстановления и хранения).
Представляющий интерес в настоящем документе "разбавитель" представляет собой разбавитель, который является фармацевтически приемлемым (безопасным и нетоксичным для введения человеку), и он пригоден для получения жидкого состава, такого как состав, разбавленный после лиофилизации. Иллюстративные разбавители включают стерильную воду, бактериостатическую воду для инъекций (BWFI), pH-буферный раствор (например, фосфатно-солевой буфер), стерильный физиологический раствор, раствор Рингера или раствор декстрозы. В альтернативном варианте осуществления разбавители могут включать водные растворы солей и/или буферов.
"Консервант" представляет собой соединение, которое можно добавлять в состав, представленный в настоящем документе, для снижения бактериальной активности. Добавление консерванта может, например, облегчать получение состава для многократного применения (с многократной дозой). Примеры потенциальных консервантов включают хлорид октадецилдиметилбензиламмония, хлорид гексаметония, хлорид бензалкония (смесь хлоридов алкилбензилдиметиламмония, в которых алкильные группы представляют собой соединения с длинной цепью) и хлорид бензэтония. Другие типы консервантов включают ароматические спирты, такие как фенол, бутиловый и бензиловый спирт, алкилпарабены, такие как метил- или пропилпарабен, катехол, резорцинол, циклогексанол, 3-пентанол и м-крезол. Наиболее предпочтительным консервантом, представленным в настоящем документе, является бензиловый спирт.
"Лечение" относится к клиническому вмешательству, предназначенному для изменения естественного течения у индивида или в клетке, подвергаемых лечению, и его можно проводить либо для профилактики, либо в процессе клинической патологии. Желательные эффекты лечения включают профилактику возникновения или повторного возникновения заболевания, профилактику метастазов, снижение скорости прогрессирования заболевания, смягчение или облегчение болезненного состояния и ремиссию или улучшенный прогноз. В некоторых вариантах осуществления антитела по изобретению применяют для замедления развития заболевания или нарушения. Субъекта успешно "лечат", например, с использованием апоптотических антител против IgE по изобретению, если смягчается один или несколько симптомов, ассоциированных с опосредуемым IgE нарушением.
"Эффективное количество" относится по меньшей мере к количеству, эффективному в дозировках и в течение периодов времени, необходимых для достижения требуемого или указанного эффекта, включая терапевтический или профилактический результат.
"Терапевтически эффективное количество" представляет собой по меньшей мере минимальную концентрацию, требуемую для достижения поддающегося измерению улучшения или профилактики конкретного нарушения. Терапевтически эффективное количество, представленное в настоящем документе, может варьировать в соответствии с такими факторами, как болезненное состояние, возраст, пол и масса тела пациента, и способность антитела вызывать требуемый ответ у индивида. Терапевтически эффективное количество также представляет собой количество, в котором любые токсические или вредные эффекты антитела перевешиваются терапевтически полезными эффектами. "Профилактически эффективное количество" относится к количеству, эффективному в дозировках в течение периодов времени, необходимых для достижения требуемого профилактического результата. Как правило, но не обязательно, поскольку профилактическую дозу применяют у субъектов перед заболеванием или на ранней стадии заболевания, профилактически эффективное количество может быть меньшим, чем терапевтически эффективное количество.
"Длительное" введение относится к введению лекарственного средства (средств) в постоянном режиме, в противоположность экстренному, так чтобы достигнуть исходного терапевтического эффекта (активности) в течение более длительного периода времени. "Прерывающееся" введение представляет собой лечение, которое не проводят последовательно без прерывания, а вместо этого оно является циклическим.
"Млекопитающее" для целей лечения относится к любому животному, классифицируемому как млекопитающее, включая человека, домашних и сельскохозяйственных животных, и животных зоопарков, спортивных животных, или комнатных животных, таких как собаки, лошади, кролики, крупный рогатый скот, свиньи, хомяки, песчанки, мыши, хорьки, крысы, кошки и т.д. Предпочтительно млекопитающее представляет собой человека.
Термин "фармацевтический состав" относится к препарату, который находится в такой форме, чтобы обеспечить эффективность биологической активности активного ингредиента, и который не содержит дополнительных компонентов, которые являются неприемлемо токсичными для субъекта, которому состав намереваются вводить. Такие составы являются стерильными.
"Стерильный" состав является асептическим или не содержащим каких-либо живых микроорганизмов и их спор.
Термин "приблизительно", как используют в настоящем документе, относится к обычному диапазону ошибок для соответствующего значения, хорошо известному специалисту на этом уровне техники.
Как используют в настоящем документе, "антигистамин" представляет собой средство, которое является антагонистом физиологического эффекта гистамина. Связывание гистамина с его рецепторами, H1 и H2, приводит к характерным симптомам и эффектам аллергии или зуду, красноте, опуханию и т.д. Многие антигистамины действуют, блокируя связывание гистамина с его рецепторами, H1, H2; однако другие, как полагают, действуют, ингибируя высвобождение гистамина. Примерами антигистаминов являются хлорфенирамин, дифенгидрамин, прометазин, кромолин натрия, астемизол, азатидина малеат, брофенирамина малеат, карбиноксамина малеат, цетиразина гидрохлорид, клемастина фумарат, ципрогептадина гидрохлорид, дексбромфенирамина малеат, дексхлорфенирамина малеат, дименгидринат, дифенгидрамина гидрохлорид, доксиламина сукцинат, фексофендадина гидрохлорид, терфенадина гидрохлорид, гидроксизина гидрохлорид, лоратидин, меклизина гидрохлорид, трипеланнамина цитрат, трипеленнамина гидрохлорид, трипролидина гидрохлорид.
Как используют в настоящем документе, "бронходилятатор" относится к средствам, которые являются антагонистами или вызывают реверсию сужения бронхов, физиологического события, которое происходит, как правило, в ранней фазе астматических реакций, приводящего к снижению жизненной емкости легких и нехватке дыхания. Примеры бронходилятаторов включают адреналин, альфа- и бета-адренергетики широкого спектра действия, и бета-адренергетики, альбутерол, пирбутерол, метапротеренол, сальметерол и изоэтарин. Также бронходилятации можно достигать посредством введения ксантинов, включая аминофиллин и теофиллин.
Как используют в настоящем документе, "глюкокортикоид" относится к стероидным средствам, обладающим противовоспалительной активностью. Глюкокортикоиды широко используют для смягчения астматической реакции поздней фазы. Примеры глюкокортикоидов включают преднизон, беклометазон дипропионат, триамцинолон ацетонид, флунизолид, бетаметазон, будезонид, дексаметазон, дексаметазон трамцинолон, флудроацетат кортизона, флунизолид, флутиказон пропионат, гидрокортизон, преднизолон [включая метилпреднизолон {например, SOLU-MEDROL® метилпреднизолона натрия сукцинат)] и триамцинолон.
Как используют в настоящем документе, "нестероидное противовоспалительное средство" или "NSAID" относится к средствам, обладающим противовоспалительной активностью, которые являются нестероидными. Примеры NSAID включают ацематацин, ацетаминофен, аспирин, азапропазон, бенорилат, бромфенак натрия, ингибиторы циклооксигеназы (COX)-2, такие как GR 253035, MK966, целекоксиб (CELEBREX®; 4-(5-(4-метилфенил)-3-(трифторметил)-1H-пиразол-1-ил)бензолсульфонамид) и вальдекоксиб (BEXTRA®), диклофенак, диклофенак ретард, диклофенак натрий, дифлунизал, этодолак, фенбуфен, фенопрофен кальций, флурбипрофен, ибупрофен, ибупрофен ретард, индометацин, кетопрофен, меклофенамат натрий, мефенаминовую кислоту, мелоксикам (MOBIC®), набуметон, напроксен, напроксен натрий, оксифенбутазон, фенилбутазон, пироксикам, сулиндак, теноксикам, тиапрофеновую кислоту, толметин, толметин натрий, включая его соли и производные, и т.д.
Термин "опосредуемые IgE нарушения" включает атопические нарушения, которые характеризуются общей врожденной склонностью иммунологически отвечать на многие распространенные встречающиеся в природе ингалируемые или поступающие с пищей антигены и постоянной продукцией антител IgE. Конкретные атопические нарушения включают аллергическую астму, аллергический ринит (конъюнктивит), атопический дерматит, пищевую аллергию, анафилаксию, контактный дерматит, аллергическую гастроэнтеропатию, аллергический бронхолегочный аспергиллез и аллергическую пурпуру (Геноха-Шенлейна). Пациенты с атопией часто имеют множественную аллергию, что означает, что они имеют антитела IgE ко многим аллергенам окружающей среды, и симптомы от многих аллергенов окружающей среды, включая сезонные, постоянные и профессиональные аллергены. Примеры сезонных аллергенов включают пыльцу (например, трава, дерево, рожь, тимофеевка, амброзия), а примеры постоянных аллергенов включают грибы (например, плесень, споры плесени), перья, животных (например, перхоть домашних или других животных) и дебрис насекомых (например, пылевой клещ). Примеры профессиональных аллергенов также включают животных (например, мышей) и растительные антигены, а также лекарственные средства, детергенты, металлы и иммуноусилители, такие как изоцианаты. Неантигенные специфичные стимулы, которые могут приводить к опосредуемой IgE реакции, включают инфекцию, раздражающие агенты, такие как дым от сигарет, дым от горения, частицы дизельного выхлопа и диоксид серы, физическая нагрузка, простуда и эмоциональный стресс. Специфические реакции гиперчувствительности у индивидов с атопией и без нее с определенным генетическим фоном могут быть следствием воздействия белков пищи (например, бобовых растений, орехов), яда (например, насекомых, змей), вакцин, гормонов, антисыворотки, ферментов, латекса, антибиотиков, мышечных релаксантов, витаминов, цитотоксинов, опиатов и полисахаридов, таких как декстрин, декстран железа и полигелин.
Другие нарушения, ассоциированные с повышенными уровнями IgE, которые, по-видимому, являются опосредуемыми IgE и поддаются лечению составами по настоящему изобретению, включают атаксию-телеангиэктазию, синдром Черджа-Стросс, экзему, энтерит, гастроэнтеропатию, реакцию "трансплантат против хозяина", гипер-IgE (Джоба) синдром, гиперчувствительность (например, анафилактическую гиперчувствительность, кандидоз, васкулит), IgE-миелому, воспалительное заболевание кишечника (например, болезнь Крона, язвенный колит, колит неясного генеза и инфекционный колит), мукозит (например, мукозит полости рта, желудочно-кишечный мукозит, назальный мукозит и проктит), некротизирующий энтероколит и эзофагит, паразитарные заболевания (например, трипаносомиаз), связанный с гиперчувствительностью васкулит, крапивницу и синдром Вискотта-Олдрича.
Кроме того, нарушения, которые могут поддаваться лечению снижением уровней IgE, независимо от того, ассоциированы ли сами нарушения с повышенным IgE, и которые, таким образом, следует рассматривать в пределах объема "опосредуемого IgE нарушения", включают болезнь Аддисона (хроническая недостаточность коры надпочечников), алопецию, наследственный ангионевротический отек, отек Квинке (болезнь Баннистера, ангионевротический отек), анкилозирующий спондилит, апластическую анемию, артериит, амилоидоз, иммунные нарушения, такие как аутоиммунная гемолитическая анемия, аутоиммунный оофорит, аутоиммунный орхит, аутоиммунная полиэндокринная недостаточность, аутоиммунная гемолитическая анемия, аутоиммуноцитопения, аутоиммунный гломерулонефрит, болезнь Бехчета, бронхит, болезнь Бюргера, буллезный пемфигоид, синдром Каплана (ревматоидный пневмокониоз), кардит, брюшные афты, синдром Чедиака-Хигаси, хроническую обструктивную болезнь легких (COPD), синдром Когана-Риза (радужно-роговичный эндотелиальный синдром), CREST-синдром, герпетиформный дерматит (болезнь Дюринга), сахарный диабет, эозинофильный фасциит, эозинофильный нефрит, эписклерит, наружный аллергический альвеолит, семейный пароксизмальный полисерозит, синдром Фелти, фиброзирующий альвеолит, гломерулонефрит, синдром Гудпасчера, гранулоцитопению, гранулему, гранулематоз, гранулематозный миозит, болезнь Грэйвса, синдром Гийена-Барре (полиневрит), тиреоидит Хашимото (хронический лимфоматозный тиреоидит), гемохроматоз, гистоцитоз, гиперэозинофильный синдром, синдром раздраженной кишки, ювенильный артрит, кератит, лепру, красную волчанку, болезнь Лайелла, болезнь Лайма, смешанное заболевание соединительной ткани, мононеврит, множественный мононеврит, синдром Макла-Уэлса, кожно-слизистый лимфоидный синдром (болезнь Кавасаки), многоцентровой ретикулогистиоцитоз, рассеянный склероз, миастению gravis, фунгоидный микоз, панникулит, пемфигоид, пемфигус, перикардит, полиневрит, узловой полиартериит, псориаз, псориатический артрит, легочный артрит, аденоматоз легких, фиброз легких, рецидивирующий полихондрит, ревматическую атаку, ревматоидный артрит, риносинусит (синусит), саркоидоз, склерит, склерозирующий холангит, сывороточную болезнь, синдром Сезари, синдром Шегрена, синдром Стивенса-Джонсона, системный мастоцитоз, отторжение трансплантата, тромбоцитопеническую пурпуру, тимическую алимфоплазию, увеит, витилиго, гранулематоз Вегенера.
"Аутоиммунное нарушение" в настоящем документе представляет собой заболевание или нарушение, возникающее в собственных тканях индивидуума и направленное против них, или отдельный его признак или его проявление, или состояние, возникающее как его вследствие. Для многих из этих аутоиммунных и воспалительных нарушений может существовать множество клинических и лабораторных маркеров, включая, но не ограничиваясь ими, гипергаммаглобулинемию, высокие уровни аутоантител, отложение комплексов антиген-антитело в тканях, польза от кортикостероидного или иммунодепрессивного лечения и агрегаты лимфоидных клеток в пораженных тканях. Без ограничения какой-либо теорией, касающейся опосредуемых B-клетками аутоиммунных нарушений, полагают, что B-клетки демонстрируют патогенный эффект при аутоиммунных заболеваниях человека через множество механических каскадов, включая продукцию аутоантител, образование иммунных комплексов, активацию дендритных клеток и T-клеток, синтез цитокинов, прямое высвобождение хемокинов и предоставление очага для эктопического неолимфогенеза. Каждый из этих каскадов может участвовать в различной степени в патологии аутоиммунных заболеваний.
"Аутоиммунное заболевание" может представлять собой орган-специфическое заболевание (т.е. иммунный ответ направлен специфично против системы органов, такой как эндокринная система, гемопоэтическая система, кожа, сердечно-легочная система, желудочно-кишечная и печеночная системы, почечная система, щитовидная железа, уши, нервно-мышечная система, центральная нервная система, и т.д.) или системное заболевание, которое может поражать множество систем органов (например, системная красная волчанка (SLE), ревматоидный артрит (RA), полимиозит и т.д.). Предпочтительные такие заболевания включают аутоиммунные ревматологические нарушения (например, такие как RA, синдром Шегрена, склеродермия, волчанка, такая как SLE и волчаночный нефрит, полимиозит-дерматомиозит, криоглобулинемия, синдром антифосфолипидных антител и псориатический артрит), аутоиммунные желудочно-кишечные и печеночные нарушения (например, такие как воспалительные заболевания кишечника (например, язвенный колит и болезнь Крона), аутоиммунный гастрит и пернициозная анемия, аутоиммунный гепатит, первичный биллиарный цирроз, первичный склерозирующий холангит и глютеновая энтеропатия), васкулит (например, такой как ANCA-отрицательный васкулит и ANCA-ассоциированный васкулит, включая васкулит Чарга-Стросса, гранулематоз Вегенера и микроскопический полиангиит), аутоиммунные неврологические нарушения (например, такие как рассеянный склероз, опсоклонус-миоклонус-синдром, миастения gravis, оптический нейромиелит, болезнь Паркинсона, болезнь Альцгеймера и аутоиммунные полиневропатии), почечные нарушения (например, такие как гломерулонефрит, синдром Гудпасчера и болезнь Бергера), аутоиммунные дерматологические нарушения (например, такие как псориаз, крапивница, уртикария, пемфигус обыкновенный, буллезный пемфигоид и кожная красная волчанка), гематологические нарушения (например, такие как тромбоцитопеническая пурпура, тромботическая тромбоцитопеническая пурпура, посттрансфузионная пурпура и аутоиммунная гемолитическая анемия), атеросклероз, увеит, аутоиммунные заболевания слуха (например, такие как болезнь внутреннего уха и потеря слуха), болезнь Бехчета, синдром Рейно, трансплантация органа и аутоиммунные эндокринные нарушения (например, такие как связанные с диабетом аутоиммунные заболевания, такие как инсулин-зависимый сахарный диабет (IDDM), болезнь Аддисона и аутоиммунное заболевание щитовидной железы (например, болезнь Грэйвса и тиреоидит). Более предпочтительные такие заболевания включают, например, RA, язвенный колит, ANCA-ассоциированный васкулит, волчанку, рассеянный склероз, синдром Шегрена, болезнь Грэйвса, IDDM, пернициозную анемию, тиреоидит и гломерулонефрит.
Термин "цитотоксическое средство", как используют в настоящем документе, относится к веществу, которое ингибирует функционирование клеток, или препятствует ему, и/или вызывает разрушение клеток. Подразумевают, что термин включает радиоактивные изотопы (например, At211, I131, I125, Y90, Re186, Re188, Sm153, Bi212, P32 и радиоактивные изотопы Lu) и токсины, такие как низкомолекулярные токсины или ферментативно активные токсины из бактерий, грибов, растений или животных, включая их фрагменты.
"Химиотерапевтическое средство" представляет собой химическое соединение, пригодное для лечения злокачественной опухоли. Примеры химиотерапевтических средств включают алкилирующие средства, такие как тиотепа и циклофосфамид (CYTOXAN®); алкилсульфонаты, такие как бусульфан, импросульфан и пипосульфан; азиридины, такие как бензодопа, карбоквон, метуредопа и уредопа; этиленимины и метиламеламины, включая алтретамин, триэтиленмеламин, триэтиленфосфорамид, триэтилентиофосфорамид и триметилоломеламин; ацетогинины (особенно буллатацин и буллатацинон); дельта-9-тетрагидроканнабинол (дронабинол, MARINOL®); бета-лапахон; лапахол; колхицины; бетулиновую кислоту; камптотецин (включая синтетический аналог топотекан (HYCAMTIN®), CPT-11 (иринотекан, CAMPTOSAR®), ацетилкамптотецин, скополектин и 9-аминокамптотецин); бриостатин; пеметрексед; каллистатин; CC-1065 (включая его синтетические аналоги на основе адозелезина, карзелезина и бизелезина); подофиллотоксин; подофиллиновую кислоту; тенипозид; криптофицины (в частности, криптофицин 1 и криптофицин 8); доластатин; дуокармицин (включая синтетические аналоги, KW-2189 и CB1-TM1); элеутеробин; панкратистатин; TLK-286; CDP323, пероральный ингибитор альфа-4-интегрина; саркодиктиин; спонгистатин; азотистые иприты, такие как хлорамбуцил, хлорнафазин, холофосфамид, эстрамустин, ифосфамид, мехлорэтамин, гидрохлорид оксида мехлорэтамина, мелфалан, новэмбихин, фенестерин, преднимустин, трофосфамид, иприт урацила; нитрозомочевинаы, такие как кармустин, хлорзотоцин, фотемустин, ломустин, нимустин и ранимустин; антибиотики, такие как эндииновые антибиотики (например, калихеамицин, особенно калихеамицин гамма1I и калихеамицин омега1I (см., например, Nicolaou et al., Agnew, Chem Intl. Ed. Engl., 33:183-186 (1994)); динемицин, включая динемицин A; эсперамицин; а также хромофор на основе неокарциностатина и сходные хромопротеиновые хромофоры на основе эндииновых антибиотиков), аклациномизины, актиномицин, аутрамицин, азасерин, блеомицины, сактиномицин, карабицин, карминомицин, карцинофилин, хромомицины, дактиномицин, даунорубицин, деторубицин, 6-диазо-5-оксо-L-норлейцин, доксорубицин (включая ADRIAMYCIN®, морфолинодоксорубицин, цианоморфолинодоксорубицин, 2-пирролинодоксорубицин, инъекцию липосом доксорубицин HCl (DOXIL®) и дезоксидоксорубицин), эпирубицин, эзорубицин, идарубицин, марселломицин, митомицины, такие как митомицин C, микофеноловая кислота, ногаламицин, оливомицины, пепломицин, потфиромицин, пуромицин, квеламицин, родорубицин, стрептонигрин, стрептозоцин, туберцидин, убенимекс, зиностатин, зорубицин; антиметаболиты, такие как метотрексат, гемцитабин (GEMZAR®), тегафур (UFTORAL®), капецитабин (XELODA®), эпотилон и 5-фторурацил (5-FU); аналоги фолиевой кислоты, такие как деноптерин, метотрексат, птероптерин, триметрексат; аналоги пуринов, такие как флударабин, 6-меркаптопурин, тиамиприн, тиогуанин; аналоги пиримидинов, такие как анцитабин, азацитидин, 6-азауридин, кармофур, цитарабин, дидезоксиуридин, доксифлуридин, эноцитабин, флоксуридин и иматиниб (производное 2-фениламинопиримидина), а также другие ингибиторы c-Kit; антиадренальные средства, такие как аминоглутетимид, митотан, трилостан; средства для восполнения фолиевой кислоты, такие как фролиновая кислота; ацеглатон; альдофосфамид гликозид; аминолевулиновую кислоту; энилурацил; амсакрин; бестрабуцил; бисантрен; эдатраксат; дефофамин; демекольцин; диазиквон; эльфорнитин; ацетат эллиптиния; этоглуцид; нитрат галлия; гидроксимочевину; лентинан; лонидаинин; майтанзиноиды, такие как майтанзин и ансамитоцины; митогуазон; митоксантрон; мопиданмол; нитраэрин; пентостатин; фенамет; пирарубицин; лозоксантрон; 2-этилгидразид; прокарбазин; полисахаридный комплекс PSK® (JHS Natural Products, Eugene, OR); разоксан; ризоксин; сизофиран; спирогерманий; тенуазоновую кислоту; триазиквон; 2,2',2"-трихлортриэтиламин; трихотецены (особенно токсин T-2, верракурин A, роридин A и ангвидин); уретан; виндезин (ELDISINE®, FILDESIN®); дакарбазин; манномустин; митобронитол; митолактол; пипоброман; гацитозин; арабинозид ("Ara-C"); тиотепу; таксоиды, например, паклитаксел (TAXOL®), сконструированный с альбумином состав паклитаксела в виде частиц (ABRAXANETM) и доксетаксел (TAXOTERE®); хлорамбуцил; 6-тиогуанин; меркаптопурин; метотрексат; аналоги платины, такие как цисплатин и карбоплатин; винбластин (VELBAN®); платина; этопозид (VP-16); ифосфамид; митоксантрон; винкристин (ONCOVIN®); оксалиплатин; лейковорин; винорелбин (NAVELBINE®); новантрон; эдатрексат; дауномицин; аминоптерин; ибандронат; ингибитор топоизомеразы RFS 2000; дифторметилорнитин (DMFO); ретиноиды, такие как ретиноевая кислота; фармацевтически приемлемые соли, кислоты или производные любого из указанных выше; а также сочетания двух или нескольких из указанных выше, такие как CHOP, сокращенное название для комбинированной терапии циклофосфамидом, доксорубицином, винкристином и преднизолоном, и FOLFOX, сокращенное название для схемы лечения оксалиплатином (ELOXATINTM) в сочетании с 5-FU и лейковорином.
Также к этому определению относятся антигормональные средства, которые действуют, регулируя, снижая, блокируя или ингибируя эффекты гормонов, которые могут обеспечивать рост злокачественной опухоли, и их часто предоставляют в форме системного лечения, или лечения всего организма. Они сами могут представлять собой гормоны. Их примеры включают антиэстрогены и селективные модуляторы рецепторов эстрогена (SERM), включая, например, тамоксифен (в том числе тамоксифен NOLVADEX®), ралоксифен (EVISTA®), дролоксифен, 4-гидрокситамоксифен, триоксифен, кеоксифен, LY117018, онапристон и торемифен (FARESTON®); антипрогестероны; средства, подавляющие рецепторы эстрогена (ERD); антагонисты рецептора эстрогена, такие как фулвестран (FASLODEX®); средства, которые функционируют, подавляя или прекращая работу яичников, например, агонисты рилизинг-фактора лютеинизирующего гормона (LHRH), такие как леупролида ацетат (LUPRON® и ELIGARD®), гозерелина ацетат, бузерелина ацетат и триптерелин; антиандрогены, такие как флутамид, нилутамид и бикалутамид; и ингибиторы ароматазы, которые ингибируют фермент ароматазу, которая регулирует продукцию эстрогена в надпочечниках, например, такие как 4(5)-имидазолы, аминоглутетимид, ацетат мегестрола (MEGASE®), экземестан (AROMASIN®), форместан, фадрозол, ворозол (RIVISOR®), летрозол (FEMARA®) и анастрозол (ARIMIDEX®). Кроме того, такое определение химиотерапевтических средств включает бисфосфонаты, такие как клодронат (например, BONEFOS® или OSTAC®), этидронат (DIDROCAL®), NE-58095, золедроновая кислота/золедронат (ZOMETA®), алендронат (FOSAMAX®), памидронат (AREDIA®), тилудронат (SKELID®) или ризедронат (ACTONEL®); а также троксацитабин (нуклеозидный аналог цитозина 1,3-диоксолан); антисмысловые олигонуклеотиды, в частности, олигонуклеотиды, которые ингибируют экспрессию генов в каскадах передачи сигнала, вовлеченных в нарушенную пролиферацию клеток, например, такие как PKC-alpha, Raf, H-Ras и рецептор эпидермального фактора роста (EGF-R); вакцины, такие как вакцина THERATOPE® и вакцины для генной терапии, например, вакцина ALLOVECTIN®, вакцина LEUVECTIN® и вакцина VAXID®; ингибитор топоизомеразы 1 (LURTOTECAN®); антиэстроген, такой как фулвестрант; ингибитор Kit, такой как иматиниб или EXEL-0862 (ингибитор тирозинкиназы); ингибитор EGFR, такой как эрлотиниб или цетуксимаб; ингибитор против VEGF, такой как бевацизумаб; аринотекан; rmRH (например, ABARELIX®); лапатиниб и лапатиниб дитозилат (двойной низкомолекулярный ингибитор тирозинкиназ ErbB-2 и EGFR, также известный как GW572016); 17AAG (производное гелданамицина, которое представляет собой яд на основе белка теплового шока (Hsp) 90), и фармацевтически приемлемые соли, кислоты или производные любого из указанных выше.
"Ингибирующее рост средство" относится к соединению или композиции, которые ингибируют рост клетки, рост которой зависит от активации рецептора либо in vitro, либо in vivo. Таким образом, ингибирующее рост средство включает средство, которое значительно снижает процентное количество клеток в S-фазе. Примеры ингибирующих рост средств включают средства, которые блокируют прогрессирование клеточного цикла (в месте, отличном от S-фазы), такие как средства, которые индуцируют остановку в G1-фазе и остановку M-фазе. Классические блокаторы M-фазы включают алкалоиды барвинка (винкристин и винбластин), таксаны и ингибиторы топоизомеразы II, такие как доксорубицин, эпирубицин, даунорубицин, этопозид и блеомицин. Те средства, которые вызывают остановку в G1-фазе, также вовлекают остановку в S-фазе, например, алкилирующие ДНК средства, такие как тамоксифен, преднизон, дакарбазин, мехлорэтамин, цисплатин, метотрексат, 5-фторурацил и ara-C. Дополнительную информацию можно найти в The Molecular Basis of Cancer, Mendelsohn and Israel, eds., глава 1 под названием "Cell cycle regulation, oncogenes, and antineoplastic drugs" by Murakami et al. (WB Saunders: Philadelphia, 1995), особенно стр. 13. Таксаны (паклитаксел и доцетаксел) представляют собой лекарственные средства против злокачественной опухоли, полученные из тисового дерева. Доцетаксел (TAXOTERE®, Rhone-Poulenc Rorer), полученный из тиса европейского, представляет собой полусинтетический аналог паклитаксела (TAXOL®, Bristol-Myers Squibb).
Термин "цитокин" является общим термином для белков, высвобождаемых одной популяцией клеток, которые воздействуют на другую клетку в качестве межклеточных медиаторов. Примерами таких цитокинов являются лимфокины, монокины, интерлейкины (IL), такие как IL-1, IL-1α, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-11, IL-12, IL-13, IL-15, включая PROLEUKIN® rIL-2; фактор некроза опухоли, такой как TNF-α или TNF-β; и другие полипептидные факторы, включая LIF и kit-лиганд (KL). Как используют в настоящем документе, термин "цитокин" включает белки из природных источников или из рекомбинантных клеточных культур и биологически активные эквиваленты цитокинов с нативной последовательностью, включая полученные синтетическими способами низкомолекулярные соединения и их фармацевтически приемлемые производные и соли.
Термин "гормон" относится к полипептидным гормонам, которые, как правило, секретируются железистыми органами с протоками. К гормонам относятся, например, гормон роста, такой как гормон роста человека, N-метионильный гормон роста человека и бычий гормон роста; паратиреоидный гормон; тироксин; инсулин; проинсулин; релаксин; эстрадиол; гормон-замещающая терапия; андрогены, такие как калустерон, дромостанолона пропионат, эпитиостанол, мепитиостан или тестолактон; прорелаксин; гликопротеиновые гормоны, такие как фолликулостимулирующий гормон (FSH), тиреостимулирующий гормон (TSH) и лютеинизирующий гормон (LH); пролактин, плацентарный лактоген, гонадотропин-ассоциированный пептид мыши, гонадотропин-рилизинг фактор; ингибин; активин; мюллерово ингибирующее вещество и тромбопоэтин. Как используют в настоящем документе, термин "гормон" включает белки из природных источников или из рекомбинантной клеточной культуры и биологически активные эквиваленты гормона с нативной последовательностью, включая синтетически продуцируемые низкомолекулярные соединения и их фармацевтически приемлемые производные и соли.
Термин "фактор роста" относится к белкам, которые обеспечивают рост и включают, например, печеночный фактор роста; фибробластный фактор роста; сосудисто-эндотелиальный фактор роста; факторы роста нервов, такие как NGF-β; тромбоцитарный фактор роста; трансформирующие факторы роста (TGF), такие как TGF-α и TGF-β; инсулиноподобный фактор роста-I и -II; эритропоэтин (EPO); остеоиндуктивные факторы; интерфероны, такие как интерферон-α, -β и -γ; и колониестимулирующие факторы (CSF), такие как макрофагальный CSF (M-CSF); гранулоцитарно-макрофагальный CSF (GM-CSF) и гранулоцитарный CSF (G-CSF). Как используют в настоящем документе, термин "фактор роста" включает белки из природных источников или из культуры рекомбинантных клеток и биологически активные эквиваленты фактора роста с нативной последовательностью, включая синтетически продуцируемые низкомолекулярные соединения и их фармацевтически приемлемые производные и соли.
Термин "интегрин" относится к рецепторному белку, который позволяет клеткам как связываться с внеклеточным матриксом, так и отвечать на него, и который вовлечен в различные клеточные функции, такие как заживление ран, дифференцировка клеток, хоминг опухолевых клеток и апоптоз. Они являются частью крупного семейства рецепторов клеточной адгезии, которые вовлечены во взаимодействия клетка-внеклеточный матрикс и клетка-клетка. Функциональные интегрины состоят из двух трансмембранных гликопротеиновых субъединиц, называемых альфа и бета, которые являются нековалентно связанными. Альфа-субъединицы обладают гомологией между собой, также как и бета-субъединицы. Рецепторы всегда содержат одну альфа-цепь и одну бета-цепь. Примеры включают Альфа-6-бета-1, Альфа-3-бета-1, Альфа-7-бета1, LFA-1 и т.д. Как используют в настоящем документе, термин "интегрин" включает белки из природных источников или из культуры рекомбинантных клеток и биологически активные эквиваленты интегрина с нативной последовательностью, включая синтетически продуцируемые низкомолекулярные соединения и их фармацевтически приемлемые производные и соли.
"Антагонист TNF" определяют в настоящем документе как молекулу, которая снижает, блокирует, ингибирует, устраняет активность TNFα или препятствует ей in vitro, in situ и/или предпочтительно in vivo. Пригодный антагонист TNF также может снижать, блокировать, устранять, препятствовать, предотвращать и/или ингибировать синтез РНК, ДНК или белка TNF, высвобождение TNFα, передачу сигнала рецептора TNFα, расщепление мембранного TNFα, активность TNFα, продукцию и/или синтез TNFα. Такие антагонисты TNF включают, но не ограничиваются ими, антитела против TNFα, их антигенсвязывающие фрагменты, их конкретные мутанты или домены, которые специфично связываются с TNFα, которые при связывании с TNFα разрушают или устраняют клетки, экспрессирующие TNFα у млекопитающего, и/или препятствуют одной или нескольким функциям этих клеток, растворимый рецептор TNF (например, p55, p70 или p85) или его фрагмент, слитые полипептиды, низкомолекулярный антагонист TNF, например связывающий TNF белок I или II (TBP-I или TBP-II), нерелимонмаб, CDP-571, инфликсимаб, энтерацепт (ENBRELTM), адалимулаб (HUMIRATM), CDP-571, CDP-870, афелимомаб, ленерцепт и т.п.), их антигенсвязывающие фрагменты, и рецепторные молекулы, которые специфично связываются с TNFα; соединения, которые препятствуют и/или ингибируют синтез TNFα, высвобождение TNFα или его действие на клетки-мишени, такие как талидомид, тенидап, ингибиторы фосфодиэстеразы (например, пентоксифиллин и ролипрам), агонисты рецептора аденозина A2b и усилители рецептора аденозина A2b; соединения, которые препятствуют и/или ингибируют передачу сигнала TNFα, такие как ингибиторы киназы митоген-активируемого белка (MAP); соединения, которые блокируют и/или ингибируют расщепление мембранного TNFα, такие как ингибиторы металлопротеиназ; соединения, которые блокируют и/или ингибируют активность TNFα, такие как ингибиторы ангиотензинпревращающего фермента (ACE) (например, каптоприл); и соединения, которые блокируют и/или ингибируют продукцию и/или синтез TNFα, такие как ингибиторы MAP-киназы. Предпочтительный антагонист включает антитело.
"Фактор некроза опухоли-альфа", "TNF-альфа" или "TNFα" относится к молекуле TNFα человека, содержащей аминокислотную последовательность по Pennica et al., Nature, 312:721 (1984) или Aggarwal et al., JBC, 260:2345 (1985). "Ингибитор TNFα" в настоящем документе представляет собой средство, которое ингибирует, до некоторой степени, биологическую функцию TNFα, главным образом, через связывание с TNFα и нейтрализацию его активности. Примеры ингибиторов TNFα в настоящем документе включают этанерцепт (ENBREL®), инфликсимаб (REMICADE®) и адалимумаб (HUMIRATM).
Примеры "антагонистов интегринов или антител против интегринов" в настоящем документе включают антитело против LFA-1, такое как эфализумаб (RAPTIVA®), коммерчески доступное от Genentech, или антитело против альфа-4-интегрина, такое как натализумаб (ANTEGREN®), доступное от Biogen, или диазациклические производные фенилаланина (WO 2003/89410), производные фенилаланина (WO 2003/70709, WO 2002/28830, WO 2002/16329 и WO 2003/53926), производные фенилпропионовой кислоты (WO 2003/10135), производные энамина (WO 2001/79173), производные пропановой кислоты (WO 2000/37444), производные алкановой кислоты (WO 2000/32575), замещенные фенильные производные (патенты США №№ 6677339 и 6348463), производные ароматических аминов (патент США № 6369229), полипептиды дизинтегринового домена ADAM (US2002/0042368), антитела к интегрину альфа-v-бета-3 (EP 633945), аза-связанные бициклические производные аминокислот (WO 2002/02556) и т.д.
Термин "иммунодепрессивное средство" относится к веществу, которое действует, подавляя или маскируя иммунную систему субъекта, подвергаемого лечению в рамках настоящего документа. Оно может включать вещества, которые подавляют продукцию цитокинов, снижают или подавляют экспрессию собственных антигенов, или маскируют антигены MHC. Примеры таких средств включают 2-амино-6-арил-5-замещенные пиримидины (см. U.S. 4665077); нестероидные противовоспалительные лекарственные средства (NSAID); ганцикловир, такролимус, глюкокортикоиды, такие как кортизол или альдостерон, противовоспалительные средства, такие как ингибитор циклооксигеназы, ингибитор 5-липоксигеназы, или антагонист рецептора лейкотриена; антагонисты пуринов, такие как азатиоприн или микофенолата мофетил (MMF); трокад (Ro32-355); антагонист периферического сигма-рецептора, такой как ISR-31747; алкилирующие средства, такие как циклофосфамид; бромкриптин; даназол; дапзон; глутаральдегид (который маскирует антигены MHC, как описано в U.S. 4120649); антиидиотипические антитела для антигенов MHC и фрагментов MHC; циклоспорин A; стероиды, такие как кортикостероиды или глюкокортикостероиды или аналоги глюкокортикоидов, например преднизон, метилпреднизолон, включая метилпреднизолона натрия сукцинат SOLU-MEDROL®, римексолон и дексаметазон; ингибиторы дигидрофолатредуктазы, такие как метотрексат (пероральный или подкожный); средства против малярии, такие как хлороквин и гидроксихлороквин; сульфасалазин; лефлуномид; ингибиторы высвобождения цитокинов, такие как моноклональные антитела SB-210396 и SB-217969 и антагонист MHC II, такой как ZD2315; антагонист рецептора PG1, такой как ZD4953; блокатор адгезии VLA4, такой как ZD7349; антитела против цитокинов или против рецепторов цитокинов, включая антитела против интерферона-альфа, -бета или -гамма, антитела против TNF-α (инфликсимаб (REMICADE®) или адалимумаб), иммуноадгезин против TNF-α (этанерцепт), антитела против TNF-бета, блокаторы интерлейкина-1 (IL-1), такие как рекомбинантный ингибитор HuIL-1Ra и IL-1B, антитела против интерлейкина-2 (IL-2) и антитела против рецептора IL-2; слитый токсин IL-2; антитела против L3T4; лефлуномид; гетерологичный антилимфоцитарный глобулин; OPC-14597; NISV (модификатор иммунного ответа); незаменимую жирную кислоту, такую как гаммалиноленовая кислота или эйкозапентаеновая кислота; блокаторы CD-4, общие антитела против T-клеток, предпочтительно антитела против CD3 или против CD4/CD4a; костимуляторный модификатор (например, слитая молекула CTLA4-Fc, также известная как ABATACEPTTM; антитела против рецептора интерлейкина-6 (IL-6) и его антагонисты; антитела против LFA-1, включая антитела против CD11a и против CD18; растворимый пептид, содержащий связывающий домен LFA-3 (WO 1990/08187); стрептокиназу; IL-10; антагонисты IL-4, антагонисты IL-13 и биспецифичные антитела-антагонисты IL-4/IL-13, трансформирующий фактор роста-бета (TGF-бета); стрептодорназу; РНК или ДНК из хозяина; FK506; RS-61443; энлимомаб; CDP-855; ингибитор PNP; CH-3298; GW353430; 4162W94, хлорамбуцил; дезоксиспергуалин; рапамицин; T-клеточный рецептор (US 5114721); фрагменты T-клеточного рецептора (Offner et al., Science, 251:430-2 (1991); WO 1990/11294; Janeway, Nature, 341:482-483 (1989) и WO 1991/01133); антагонисты BAFF, такие как антитела против BAFF и антитела против BR3; антагонисты zTNF4 (Mackay and Mackay, Trends Immunol., 23:113-5 (2002)); биологические агенты, которые препятствуют хелперным сигналам T-клеток, такие как антитело против рецептора CD40 или антитело против лиганда CD40 (CD 154), включая блокирующие антитела против CD40-лиганд CD40 (например, Durie et al., Science, 261:1328-30 (1993); Mohan et al., J. Immunol., 154:1470-80 (1995)) и CTLA4-Ig (Finck et al., Science, 265:1225-7 (1994)); и антитела против рецептора T-клеток (EP 340109), такие как T10B9. Некоторые предпочтительные иммунодепрессивные средства в настоящем документе включают циклофосфамид, хлорамбуцил, азатиоприн, лефлуномид, MMF или метотрексат (MTX).
"Модифицирующие заболевание противоревматические лекарственные средства" или "DMARD" включают, например, хлороквин, гидроксихлороквин, миокризин, ауранофин, сульфасалазин, метотрексат, лефлуномид, этанерцепт, инфликсимаб (и пероральный и подкожный MTX), азатиоприн, D-пенициламин, соли золота (пероральные), соли золота (внутримышечные), миноциклин, циклоспорин, например циклоспорин A и местный циклоспорин, стафилококковый белок A (Goodyear and Silverman, J. Exp. Med., 197:1125-39 (2003)), включая его соли и производные, и т.д.
"B-клетка" представляет собой лимфоцит, который созревает в костном мозге и включает наивную B-клетку, B-клетку памяти или эффекторную B-клетку (плазматические клетки). B-клетка в настоящем документе может быть нормальной или незлокачественной.
"Поверхностный маркер B-клеток" или "поверхностный антиген B-клеток" в настоящем документе представляет собой антиген, экспрессируемый на поверхности B-клетки, на который может быть нацелен антагонист, который с ним связывается. Иллюстративные поверхностные маркеры B-клеток включают поверхностные маркеры лейкоцитов CD10, CD19, CD20, CD21, CD22, CD23, CD24, CD37, CD40, CD53, CD72, CD73, CD74, CDw75, CDw76, CD77, CDw78, CD79a, CD79b, CD80, CD81, CD82, CD83, CDw84, CD85 и CD86 (для описаний, см. The Leukocyte Antigen Facts Book, 2nd Edition. 1997, ed. Barclay et al. Academic Press, Harcourt Brace & Co., New York). Другие поверхностные маркеры B-клеток включают RP105, FcRH2, B-cell CR2, CCR6, P2X5, HLA-DOB, CXCR5, FCER2, BR3, Btig, NAG14, SLGC16270, FcRH1, IRTA2, ATWD578, FcRH3, IRTA1, FcRH6, BCMA и 239287. Предпочтительный поверхностный маркер B-клеток предпочтительно экспрессируется на B-клетках по сравнению с другими не B-клеточными тканями млекопитающего, и он может экспрессироваться как на предшественниках B-клеток, так и на зрелых B-клетках. Наиболее предпочтительными такими маркерами являются CD20 и CD22.
Антиген "CD20", или "CD20", представляет собой негликозилированный фосфопротеин массой около 35 кДа, встречающийся на поверхности более чем 90% B-клеток из периферической крови или лимфоидных органов. CD20 присутствует как на нормальных B-клетках, так и на злокачественных B-клетках, однако он не экспрессируется на стволовых клетках. Другие названия для CD20 в литературе включают "ограниченный B-лимфоцитами антиген" и "Bp35". Антиген CD20 описан в Clark et al., Proc. Natl. Acad. Sci. (USA) 82:1766 (1985), например.
Антиген "CD22", или "CD22", также известный как BL-CAM или Lyb8, представляет собой интегральный мембранный гликопротеин 1 типа с молекулярной массой приблизительно от 130 (сокращенный) до 140 кДа (несокращенный). Он экспрессируется как в цитоплазме, так и на клеточных мембранах B-лимфоцитов. Антиген CD22 появляется рано при дифференцировке B-клеточных лимфоцитов приблизительно на той же стадии, что и антиген CD19. В отличие от других B-клеточных маркеров экспрессия CD22 на мембране ограничена поздними стадиями дифференцировки, находящимися между зрелыми B-клетками (CD22+) и плазматическими клетками (CD22-). Антиген CD22 описан, например, в Wilson et al., J. Exp. Med. 173:137 (1991) и Wilson et al., J. Immunol. 150:5013 (1993).
"Антитело, которое связывается с B-клеточным поверхностным маркером" представляет собой молекулу, которая, при связывании с B-клеточным поверхностным маркером, разрушает или устраняет B-клетки у млекопитающего и/или препятствует одной или нескольким функциям B-клеток, например, посредством снижения или предотвращения гуморального ответа, вызываемого B-клеткой. Антитело предпочтительно способно устранять B-клетки (т.е. снижать уровни циркулирующих B-клеток) у млекопитающего, которого ими лечат. Такое устранение может быть достигнуто посредством различных механизмов, таких как антителозависимая клеточно-опосредуемая цитотоксичность (ADCC) и/или комплементзависимая цитотоксичность (CDC), ингибирование пролиферации B-клеток и/или индукция гибели B-клеток (например, посредством апоптоза).
Примеры антител против CD20 включают: "C2B8", которое в настоящее время называют "ритуксимабом" ("RITUXAN®") (патент США № 5736137); меченное итрием-[90] антитело 2B8 мыши, которое обозначают как "Y2B8" или "ибритутомаб тиуксетан" (ZEVALIN®), коммерчески доступный от IDEC Pharmaceuticals, Inc. (патент США № 5736137; 2B8 депонировано в ATCC с регистрационным номером № HB11388 22 июня 1993 года); IgG2a мыши "B1", также называемое "тозитумомабом", необязательно меченное 131I с образованием антитела "131I-B1" или "йодный I131 тозитумомаб" (BEXXARTM), коммерчески доступный от Corixa (см. также патент США № 5595721); моноклональное антитело мыши "1F5" (Press et al. Blood 69(2):584-591 (1987) и его варианты, включающие 1F5 "с состоящим из фрагментов каркасом" или гуманизированное 1F5 (WO 03/002607, Leung, S.; номер ATCC HB-96450); антитело 2H7 мыши и химерное антитело 2H7 (патент США № 5677180); гуманизированное 2H7 (WO 2004/056312 (Lowman et al.) и как указано ниже); полностью человеческое высокоаффинное антитело HUMAX-CD2TM, нацеленное на молекулу CD20 на клеточной мембране B-клеток (Genmab, Denmark; см., например, Glennie and van de Winkel, Drug Discovery Today 8:503-510 (2003) и Cragg et al., Blood 101:1045-1052 (2003)); моноклональные антитела человека, указанные в WO 2004/035607 (Teeling et al.); антитела AME-133TM (Applied Molecular Evolution); антитело A20 или его варианты, такие как химерное или гуманизированное антитело A20 (cA20, hA20 соответственно (US 2003/0219433, Immunomedics)); и моноклональные антитела L27, G28-2, 93-1B3, B-C1 или NU-B2, доступные от International Leukocyte Typing Workshop (Valentine et al., In: Leukocyte Typing III (McMichael, Ed., p. 440, Oxford University Press (1987)). Предпочтительные в настоящем описании антитела против CD20 представляют собой химерные, гуманизированные антитела против CD20 или антитела против CD20 человека, более предпочтительно ритуксимаб, гуманизированное антитело 2H7, химерное или гуманизированное антитело A20 (Immunomedics) и антитело против CD20 человека HUMAX-CD20TM (Genmab).
Термины "ритуксимаб" или "RITUXAN®" в настоящем документе относятся к полученному способами генетической инженерии химерному моноклональному антителу мыши/человека, направленному против антигена CD20 и обозначаемому "C2B8" в патенте США № 5736137, включая его фрагменты, которые сохраняют способность связывать CD20.
Исключительно для целей настоящего документа и если нет иных указаний, "гуманизированное 2H7" относится к гуманизированному антителу против CD20, или его антигенсвязывающему фрагменту, где антитело является эффективным для устранения B-клеток приматов in vivo. Антитело включает антитела, указанные в US 2006/0062787 и на его фигурах, и включая вариант 114, последовательности которого представлены в US 2006/0188495. Также см. US 2006/0034835 и US 2006/0024300. Обобщая различные предпочтительные варианты осуществления изобретения, V-область вариантов на основе варианта 16 2H7, как описано в US 2006/0062787, будет иметь аминокислотные последовательности v16, за исключением положений аминокислотных замен, которые указаны в таблице ниже. Если нет иных указаний, варианты 2H7 будут иметь ту же L-цепь, что и v16.
Вариант 2H7 | Изменения тяжелой цепи (VH) | Изменения легкой цепи (VH) | Изменения Fc |
16 | - | ||
31 | - | - | S298A, E333A, K334A |
73 | N100A | M32L | |
75 | N100A | M32L | S298A, E333A, K334A |
96 | D56A,N100A | S92A | |
114 | D56A,N100A | M32L, S92A | S298A, E333A, K334A |
115 | D56A,N100A | M32L, S92A | S298A, E333A, K334A, E356D, M358L |
116 | D56A,N100A | M32L, S92A | S298A, K334A, K322A |
138 | D56A,N100A | M32L, S92A | S298A, E333A, K334A, K326A |
477 | D56A,N100A | M32L, S92A | S298A, E333A, K334A, K326A, N434W |
375 | - | - | K334L |
Одним предпочтительным гуманизированным 2H7 является интактное антитело или антитело фрагмент, имеющий последовательность варианта 16. Другое предпочтительное гуманизированное 2H7 обладает последовательностями варианта 114.
"Антагонисты BAFF" представляют собой любые молекулы, которые блокируют активность BAFF или BR3. Они включают иммуноадгезины, содержащие участок BR3, TACI или BCMA, который связывает BAFF, или их варианты, которые связывают BAFF. В других аспектах антагонист BAFF представляет собой антитело BAFF. "Антитело против BAFF" представляет собой антитело, которое связывает BAFF, и предпочтительно связывает BAFF в области BAFF человека, содержащей остатки 162-275 BAFF человека. В другом аспекте антагонист BAFF представляет собой антитело против BR3. "Антитело против BR3" представляет собой антитело, которое связывает BR3, и предпочтительно связывает BR3 в области BR3 человека, содержащей остатки 23-38 BR3 человека. Последовательности BAFF человека и BR3 человека могут быть найдены, например, в US 2006/0062787. Другие примеры связывающих BAFF полипептидов или антител против BAFF могут быть найдены, например, в WO 2002/092620, WO 2003/014294, Gordon et al., Biochemistry 42(20):5977-83 (2003), Kelley et al., J. Biol. Chem. 279:16727-35 (2004), WO 1998/18921, WO 2001/12812, WO 2000/68378 и WO 2000/40716.
"Антитело против IgE" включает любое антитело, которое специфично связывается с IgE таким образом, чтобы не индуцировать перекрестное связывание, когда IgE связан с высокоаффинным рецептором на тучных клетках и базофилах. Иллюстративные антитела включают антитела по изобретению, а также rhuMabE25 (E25, XOLAIR®), E26, E27, а также CGP-5101 (Hu-901) и антитело HA. Аминокислотные последовательности вариабельных доменов тяжелой и легкой цепи гуманизированных антител E25, E26 и E27 против IgE описаны, например, в U.S.P. 6172213 и WO 99/01556. Антитело CGP-5101 (Hu-901) описано в Come et al. (1997), J. Clin. Invest. 99(5):879-887, WO 92/17207 и ATCC депозит № BRL-10706, BRL-11130, BRL-11131, BRL-11132 и BRL-11133. Антитело HA описано в USSN 60/444229, WO 2004/070011 и WO 2004/070010.
II. Способы осуществления изобретения
A. Рекомбинантное получение
Также изобретение относится к выделенной нуклеиновой кислоте, кодирующей апоптотические антитела против IgE, векторам и клеткам-хозяевам, содержащим такую нуклеиновую кислоту, и к рекомбинантным способам получения антитела.
Для рекомбинантной продукции антитела нуклеиновую кислоту, кодирующую его, выделяют и встраивают в реплицируемый вектор для последующего клонирования (амплификации ДНК) или для экспрессии. ДНК, кодирующую моноклональное антитело, легко выделяют и секвенируют с использованием общепринятых способов (например, с использованием олигонуклеотидных зондов, которые способны специфично связываться с генами, кодирующими тяжелую и легкую цепи антитела). Доступно множество векторов. Компоненты векторов, как правило, включают, но не ограничиваются ими, один или несколько из следующих компонентов: сигнальная последовательность, ориджин репликации, один или несколько генов селектируемых маркеров, энхансерный элемент, промотор и последовательность терминации транскрипции.
(1) Компонент - сигнальная последовательность
Антитело против IgE по этому изобретению можно получать рекомбинантными способами не только прямо, но также в качестве полипептида, слитого с гетерологичным полипептидом, который предпочтительно представляет собой сигнальную последовательность или другой полипептид, обладающий участком для специфичного расщепления на N-конце зрелого белка или полипептида. Выбранная гетерологичная сигнальная последовательность предпочтительно представляет собой последовательность, которая распознается и преобразуется (т.е. расщепляется сигнальной пептидазой) в клетке-хозяине. В случае прокариотических клеток-хозяев, которые не распознают и не преобразуют нативную сигнальную последовательность антитела, сигнальную последовательность можно заменять прокариотической сигнальной последовательностью, выбранной, например, из группы из лидерных последовательнотсей щелочной фосфатазы, пенициллиназы, lpp или термостабильного энтеротоксина II. В случае секреции в дрожжах нативную сигнальную последовательность можно заменять, например, лидерной последовательностью инвертазы дрожжей, лидерной последовательностью α-фактора (включая лидерные последовательности α-фактора Saccharomyces и Kluyveromyces) или лидерной последовательностью кислой фосфатазы, лидерной последовательностью глюкоамилазы C. albicans или сигнальной последовательностью, описанной в WO 90/13646. Для экспрессии в клетках млекопитающих доступны сигнальные последовательности млекопитающих, а также вирусные секреторные лидерные последовательности, например сигнальная последовательность gD вируса простого герпеса.
ДНК такого участка-предшественника лигируют в рамке считывания с ДНК, кодирующей связывающее IgE антитело.
(2) Ориджин репликации
Векторы, как для экспрессии, так и для клонирования, содержат последовательность нуклеиновой кислоты, которая обеспечивает репликацию вектора в одной или нескольких выбранных клетках-хозяевах. Как правило, в векторах для клонирования эта последовательность представляет собой последовательность, которая обеспечивает репликацию вируса независимо от хромосомной ДНК хозяина, и включает ориджины репликации или автономно реплицирующиеся последовательности. Такие последовательности хорошо известны для множества бактерий, дрожжей и вирусов. Ориджин репликации из плазмиды pBR322 является пригодным для большинства грамотрицательных бактерий, плазмидный ориджин 2µ пригоден для дрожжей, и различные вирусные ориджины (SV40, вируса полиомы, аденовируса, VSV или BPV) пригодны для клонирования векторов в клетках млекопитающих. Как правило, для экспрессирующих векторов млекопитающих компонент, представляющий собой ориджин репликации, не требуется (ориджин SV40, главным образом, можно использовать только потому, что он содержит ранний промотор).
(3) Компонент селекции гена
Экспрессирующие и клонирующие векторы могут содержать ген для селекции, также называемый селектируемым маркером. Типичные гены для селекции кодируют белки, которые (a) придают устойчивость к антибиотикам или другим токсинам, например ампициллину, неомицину, метотрексату или тетрациклину, (b) комплементируют дефекты ауксотрофов или (c) обеспечивают основные питательные вещества, которые не доступны из комплексных сред, например ген, кодирующий D-аланинрацемазу для Bacilli.
В одном примере схемы селекции используют лекарственное средство для остановки роста клетки-хозяина. Клетки, которые успешно трансформированы гетерологичным геном, продуцируют белок, придающий устойчивость к лекарственному средству, и, таким образом, выживают после режима селекции. Примерами такого доминантного вида селекции является применение лекарственных средств неомицина, микофеноловой кислоты и гигромицина.
Другим примером пригодных селектируемых маркеров для клеток млекопитающих являются маркеры, которые позволяют идентификацию клеток, способных захватывать нуклеиновую кислоту, кодирующую связывающее IgE антитело, такие как гены DHFR, тимидинкинизы, металлотионеина-I и -II, предпочтительно гены металлотионеина приматов, аденозиндезаминазы, орнитиндекарбоксилазы и т.д.
Например, клетки, трансформированные геном для селекции DHFR, сначала идентифицируют культивированием всех трансформантов в культуральной среде, которая содержит метотрексат (Mtx), конкурентный антагонист DHFR. При использовании DHFR дикого типа пригодные клетки-хозяева представляют собой клеточную линию яичника китайского хомячка (CHO), дефицитную по активности DHFR (например, ATCC CRL-9096).
Альтернативно клетки-хозяева (в частности, хозяева дикого типа, которые содержат эндогенный DHFR), трансформированные или совместно трансформированные с последовательностями ДНК, кодирующими связывающее IgE антитело по изобретению, белок DHFR дикого типа и другой селектируемый маркер, такой как аминогликозид-3'-фосфотрансфераза (APH), можно отбирать выращиванием клеток на среде, содержащей вещество для селекции по селектируемому маркеру, такое как аминогликозидный антибиотик, например канамицин, неомицин или G418. См. патент США № 4965199.
Пригодным геном для селекции для применения в дрожжах является ген trp1, находящийся в дрожжевой плазмиде YRp7 (Stinchcomb et al., Nature, 282:39 (1979)). Ген trp1 представляет собой селектируемый маркер для мутантного штамма дрожжей, у которого отсутствует способность расти в отсутствие триптофана, например ATCC № 44076 или PEP4-1. Jones, Genetics, 85:12 (1977). Затем наличие повреждения trp1 в геноме дрожжевой клетки-хозяина обеспечивает эффективные условия для определения трансформации по росту в отсутствие триптофана. Аналогично дефицитные по Leu2 штаммы дрожжей (ATCC 20622 или 38626) комплементируют известными плазмидами, обладающими геном Leu2.
Кроме того, векторы, полученные из кольцевой плазмиды pKD1 1,6 мкм, можно использовать для трансформации дрожжей Kluyveromyces. Альтернативно описаны экспрессирующие системы для крупномасштабной продукции рекомбинантного химозина телят для K. lactis. Van den Berg, Bio/Technology, 8:135 (1990). Также описаны стабильные мультикопийные экспрессирующие векторы для секреции зрелого рекомбинантного сывороточного альбумина человека посредством промышленных штаммов Kluyveromyces. Fleer et al., Bio/Technology, 9:968-975 (1991).
(4) Компонент - промотор
Экспрессирующие и клонирующие векторы, как правило, содержат промотор, который распознается организмом-хозяином и функционально связан с нуклеиновой кислотой, кодирующей связывающее IgG антитело. Промоторы, пригодные для применения в прокариотических хозяевах, включают промотор phoA, промоторные системы β-лактамазы и лактозы, промотор щелочной фосфатазы, промоторную систему триптофана (trp) и гибридные промоторы, такие как промотор tac. Однако пригодными являются другие бактериальные промоторы. Промоторы для применения в бактериальных системах также содержат последовательность Шайна-Дальгарно (S.D.), функционально связанную с ДНК, кодирующей связывающее IgG антитело.
Известны промоторные последовательности для эукариот. Практически все эукариотические гены обладают AT-богатой областью, расположенной приблизительно от 25 до 30 оснований выше участка инициации транскрипции. Другая последовательность, находящаяся от 70 до 80 оснований выше точки начала транскрипции множества генов, представляет собой участок CNCAAT, где N может представлять собой любой нуклеотид. На 3'-конце большинства эукариотических генов находится последовательность AATAAA, которая может представлять собой сигнал для добавления поли-A хвоста к 3'-концу кодирующей последовательности. Все из этих последовательностей можно встраивать в эукариотические экспрессирующие векторы.
Примеры пригодных промоторных последовательностей для применения в дрожжевых хозяевах включают промоторы 3-фосфоглицераткиназы или других гликолитических ферментов, таких как енолаза, глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназа, гексокиназа, пируватдекарбоксилаза, фосфофруктокиназа, глюкоза-6-фосфатизомераза, 3-фосфоглицеромутаза, пируваткиназа, триозофосфатизомераза, фосфоглюкоизомераза и глюкокиназа.
Другие дрожжевые промоторы, которые представляют собой индуцибельные промоторы, обладающие дополнительным преимуществом контролируемой условиями выращивания транскрипции, представляют собой промоторные участки алкогольдегидрогеназы 2, изоцитохрома C, кислой фосфатазы, ферментов деградации, связанных с метаболизмом азота, металлотионеина, глицеральдегид-3-фосфат дегидрогеназы и ферментов, ответственных за употребление мальтозы и галактозы. Кроме того, пригодные векторы и промоторы для применения для экспрессии в дрожжах описаны в EP 73657. Также предпочтительно с дрожжевыми промоторами используют дрожжевые энхансеры.
Транскрипция связывающего IgG антитела с векторов в клетках-хозяевах млекопитающих контролируется, например, промоторами, получаемыми из геномов вирусов, таких как вирус полиомы, вирус оспы птиц, аденовирус (такой как аденовирус 2), вирус папилломы крупного рогатого скота, вирус саркомы птиц, цитомегаловирус, ретровирус, вирус гепатита-B и наиболее предпочтительно вирус обезьяны 40 (SV40), гетерологичными промоторами млекопитающих, например, промотором актина или промотором иммуноглобулина, промоторами теплового шока, при условии, что такие промоторы являются совместимыми с системами клеток-хозяев.
Ранние и поздние промоторы вируса SV40 обычно получают в качестве рестрикционного фрагмента SV40, который также содержит ориджин репликации вируса SV40. Предранний промотор цитомегаловируса человека обычно получают в качестве рестрикционного фрагмента HindIIIE. Система для экспрессии ДНК в хозяевах, относящихся к млекопитающим, с использованием вируса папилломы крупного рогатого скота в качестве вектора описана в патенте США № 4419446. Модификация этой системы описана в патенте США № 4601978. См. также Reyes et al., Nature 297:598-601 (1982) в отношении экспрессии кДНК интерферона человека в клетках мышей под контролем промотора тимидинкиназы из вируса простого герпеса. Альтернативно в качестве промотора можно использовать длинный концевой повтор вируса саркомы Рауса.
(5) Компонент - энхансерный элемент
Транскрипцию ДНК, кодирующей связывающее IgG антитело по данному изобретению, у высших эукариот часто усиливают посредством встраивания в вектор энхансерной последовательности. Известно много энхансерных последовательностей из генов млекопитающих (глобина, эластазы, альбумина, α-фетопротеина и инсулина). Однако, как правило, используют энхансер из вируса эукариотической клетки. Примеры включают энхансер SV40 на поздней стороне ориджина репликации (п.о. 100-270), энхансер раннего промотора цитомегаловируса, энхансер полиомы на поздней стороне ориджина репликации и энхансеры аденовируса. См. также Yaniv, Nature 297:17-18 (1982) в отношении энхансеров для активации эукариотических промоторов. Энхансер может быть присоединен в векторе к кодирующей связывающее IgE антитело последовательности в положении 5' или 3', однако предпочтительно он расположен в участке, расположенном в 5'-направлении от промотора.
(6) Компонент для терминации транскрипции
Экспрессирующие векторы, используемые в эукариотических клетках-хозяевах (в клетках дрожжей, грибов, насекомых, растений, животных, человека или содержащих ядро клетках из других многоклеточных организмов), также содержат последовательности, необходимые для терминации транскрипции и для стабилизации мРНК. Такие последовательности обычно находятся на 5'- и иногда на 3'-нетранслируемых участках эукариотических или вирусных ДНК или кДНК. Эти участки содержат нуклеотидные фрагменты, транскрибируемые в качестве полиадинилированных фрагментов в нетранслируемом участке мРНК, кодирующей связывающее IgG антитело. Одним пригодным компонентом для терминации транскрипции является участок полиаденилирования бычьего гормона роста. См. WO 94/11026 и описанный в ней экспрессирующий вектор.
(7) Выбор и трансформация клеток-хозяев.
Пригодные клетки-хозяева для клонирования или экспрессии ДНК в векторах, представленных в настоящем документе, представляют собой клетки прокариот, дрожжей или высших эукариот, описанных выше. Пригодные для этой цели прокариоты включают эубактерии, такие как грамотрицательные или грамположительные организмы, например Enterobacteriaceae, такие как Escherichia, например E. coli, Enterobacter, Erwinia, Klebsiella, Proteus, Salmonella, например Salmonella typhimurium, Serratia, например Serratia marcescans, и Shigella, а также Bacilli, такие как B. subtilis и B. licheniformis (например, B. licheniformis 41P, описанные в DD 266710, опубликованной 12 апреля 1989 года), Pseudomonas, такие как P. aeruginosa и Streptomyces. Одним предпочтительным хозяином E. coli для клонирования является E. coli 294 (ATCC 31446), хотя также пригодными являются другие штаммы, такие как E. coli B, E. coli X1776 (ATCC 31537) и E. coli W3110 (ATCC 27325). Эти примеры являются иллюстративными, но не ограничивающими.
Полноразмерное антитело, фрагменты антитела и слитые белки антитела можно получать в бактериях, в частности, когда гликозилирование и Fc-эффекторная функция не требуются, например, когда терапевтическое антитело конъюгировано с цитотоксическим средством (например, токсином) и иммуноконъюгат самостоятельно демонстрирует эффективность в отношении разрушения клеток опухоли. Полноразмерные антитела обладают более высоким временем полужизни в кровотоке. Продукция в E. coli является более быстрой и более экономичной. Для экспрессии фрагментов антитела и полипептидов в бактериях см., например, U.S. 5648237 (Carter et al.), U.S. 5789199 (Joly et al.) и U.S. 5840523 (Simmons et al.), в которых описаны участок инициации трансляции (TIR) и сигнальные последовательности для оптимизации экспрессии и секреции. После экспрессии антитело выделяют из клеточной массы E. coli в растворимой фракции, и их можно очищать, например, с помощью колонки с белком A или G, в зависимости от изотипа. Конечную очистку можно проводить аналогично процессу очистки антитела, экспрессируемого, например, в клетках CHO.
В дополнение к прокариотам пригодными хозяевами для клонирования или экспрессии кодирующих связывающего IgG антитела векторов являются эукариотические микроорганизмы, такие как нитевидные грибы или дрожжи. Saccharomyces cerevisiae, или обычные пекарские дрожжи, наиболее распространены среди низших эукариотических микроорганизмов-хозяев. Однако широко доступным и пригодным здесь является ряд других родов, видов и штаммов, таких как Schizosaccharomyces pombe; хозяева Kluyveromyces, такие как, например, K. lactis, K.fragilis (ATCC 12424), K. bulgaricus (ATCC 16045), K. wickeramii (ATCC 24178), K. waltii (ATCC 56500), K. drosophilarum (ATCC 36906), K. thermotolerans и K. marxianus; yarrowia (EP 402226); Pichia pastoris (EP 183070); Candida; Trichoderma reesia (EP 244234); Neurospora crassa; Schwanniomyces, такие как Schwanniomyces occidentalis; и нитевидные грибы, такие как, например, хозяева Neurospora, Penicillium, Tolypocladium и Aspergillus, такие как A. nidulans и A. niger.
Пригодные клетки-хозяева для экспрессии гликозилированного связывающего IgG антитела получают из многоклеточных организмов. Примеры клеток беспозвоночных включают клетки растений и насекомых. Выявлен ряд штаммов и вариантов бакуловирусов и соответствующих пермиссивных клеток-хозяев среди хозяев, таких как Spodoptera frugiperda (гусеница), Aedes aegypti (москит), Aedes albopictus (москит), Drosophila melanogaster (плодовая мушка) и Bombyx mori. Множество штаммов вирусов для трансфекции являются широко доступными, например, вариант L-1 Autographa californica NPV и штамм Bm-5 Bombyx mori NPV, и такие вирусы можно использовать здесь в качестве вирусов в соответствии с настоящим изобретением, в частности, для трансфекции клеток Spodoptera frugiperda.
Также в качестве хозяев можно использовать растительные клеточные культуры хлопка, кукурузы, картофеля, сои, петунии, томата и табака, ряски и другие клетки растений.
Однако наибольший интерес представляют клетки позвоночных, и размножение клеток позвоночных в культуре (культуре тканей) стало общепринятым способом. Примерами пригодных хозяев, представляющих собой клеточные линии млекопитающих, являются линия почки обезьяны CV1, трансформированные SV40 (COS-7, ATCC CRL 1651); эмбриональная линия почки человека (клетки 293 или 293, субклонированные для выращивания в суспензионной культуре, Graham et al., J. Gen Virol. 36:59 (1977)); клетки почки молодого хомячка (BHK, ATCC CCL 10); клетки яичника китайского хомячка/-DHFR (CHO, Urlaub et al., Proc. Natl. Acad. Sci USA 77:4216 (1980)); клетки Сертоли мыши (TM4, Mather, Biol. Reprod. 23:243-251 (1980)); клетки почки обезьяны (CV1 ATCC CCL 70); клетки почки африканской зеленой мартышки (VERO-76, ATCC CRL-1587); клетки цервикальной карциномы человека (HELA, ATCC CCL 2); клетки почки собаки (MDCK, ATCC CCL 34); клетки печени крысы буффало (BRL 3A, ATCC CRL1442); клетки легкого человека (W138, ATCC CCL 75); клетки печени человека (Hep G2, HB 8065); клетки опухоли молочной железы мыши (MMT 060562, ATCC CCL51); клетки TRI (Mather et al., Annals N.Y. Acad. Sci 383:44-68 (1982)); клетки MRC 5; клетки FS4; и линия гепатомы человека (Hep G2).
Для продукции связывающего IgG антитела клетки-хозяева трансформируют описанными выше экспрессирующими и клонирующими векторами и культивируют их в общепринятой среде, модифицированной соответствующим образом, для индукции промоторов, селекции трансформантов или амплификации генов, кодирующих требуемые последовательности.
(8) Культивирование клеток-хозяев
Клетки-хозяева, используемые для продукции связывающего IgG антитела по данному изобретению, можно культивировать в различных средах. Для культивирования клеток-хозяев пригодными являются коммерчески доступные среды, такие как среда Хэма F10 (Sigma), минимальная поддерживающая среда ((MEM), (Sigma)), RPMI-1640 (Sigma) и среда Игла, модифицированная способом Дульбекко, ((DMEM), Sigma). Кроме того, для клеток-хозяев в качестве культуральной среды можно использовать любую из сред, описанных в Ham et al., Meth. Enz. 58:44 (1979), Barnes et al., Anal. Biochem. 102:255 (1980), патентах США №№4767704; 4657866; 4927762, 4560655 или 5122469, WO 90/03430, WO 87/00195 или патенте США Re. 30985. Любые их этих сред можно дополнить при необходимости гормонами и/или другими факторами роста (такими как инсулин, трансферрин или эпидермальный фактор роста), солями (такими как хлорид натрия, кальция, магния и фосфат), буферами (такими как HEPES), нуклеотидами (такими как аденозин и тимидин), антибиотиками (такими как лекарственное средство GENTAMYCINTM), микроэлементами (определяемыми как неорганические соединения, обычно представленные в конечных концентрациях микромолярного диапазона) и глюкозой или эквивалентными источниками энергии. Также можно добавлять любые другие необходимые дополнительные вещества в соответствующих концентрациях, которые известны специалистам в данной области. Условия культивирования, такие как температура, pH и т.п., представляют собой условия, которые ранее использовали для выбранных для экспрессии клеток-хозяев, и они будут понятны специалисту в данной области.
(9) Очистка антитела
При использовании рекомбинантных способов антитело может продуцироваться внутриклеточно, в периплазматическом пространстве, или оно может непосредственно секретироваться в среду. При внутриклеточной продукции антитела, в качестве первого этапа удаляют частицы дебриса, либо клетки-хозяева, либо лизированные фрагменты, например, посредством центрифугирования или ультрафильтрации. В Carter et al., Bio/Technology 10:163-167 (1992) описан способ выделения антител, которые секретируются в периплазматическое пространство E. coli. В кратком изложении, клеточную массу размораживают в присутствии ацетата натрия (pH 3,5), EDTA и фенилметилсульфонилфторида (PMSF) в течение приблизительно 30 мин. Клеточный дебрис можно удалять центрифугированием. Когда антитело секретируется в среду, супернатанты из таких экспрессирующих систем, как правило, сначала концентрируют с использованием коммерчески доступного фильтра для концентрирования белка, например, элемента для ультрафильтрации Amicon или Millipore Pellicon. На любой из предшествующих стадий можно включать ингибитор протеаз, такой как PMSF, для ингибирования протеолиза, и для предотвращения роста ненужных контаминирующих организмов можно добавлять антибиотики.
Композицию антитела, полученную из клеток, можно очищать с использованием, например, хроматографии с гидроксилапатитом, гель-электрофореза, диализа и аффинной хроматографии, причем аффинная хроматография является предпочтительным способом очистки. Пригодность белка A в качестве аффинного лиганда зависит от вида и изотипа любого Fc-домена иммуноглобулина, который находится в антителе. Белок A можно использовать для очистки антител, в основе которых лежат тяжелые цепи 1, 2 или 4 человека (Lindmark et al., J. Immunol. Meth. 62:1-13 (1983)). Белок G рекомендован для всех изотипов мыши и для цепи 3 человека (Guss et al., EMBO J. 5:1567-1575 (1986)). Матрица, к которой присоединен аффинный лиганд, наиболее часто представляет собой агарозу, однако доступными являются и другие матрицы. Механически стабильные матрицы, такие как стекло с контролируемым размером пор или поли(стиролдивинил)бензол, обеспечивают более высокие скорости потока и более короткое время обработки, чем те, которых достигают с помощью агарозы. В случае когда антитело содержит домен CH3, для очистки пригодна смола ABXTM (J. T. Baker, Phillipsburg, NJ). Также в зависимости от антитела, подлежащего выделению, пригодны другие способы очистки белка, такие как фракционирование на ионообменной колонке, осаждение этанолом, обращенно-фазовая ВЭЖХ, хроматография на диоксиде кремния, хроматография на SEPHAROSE™ с гепарином, хроматография на анионной или катионной обменной смоле (такая как колонка с полиаспарагиновой кислотой), хроматофокусирование, SDS-PAGE и осаждение сульфатом аммония.
После предварительной стадии(ий) очистки смесь, содержащую представляющее интерес антитело и примеси, можно подвергать хроматографии гидрофобного взаимодействия с низким значением pH с использованием буфера для элюирования при pH приблизительно 2,5-4,5, предпочтительно проводимой при низких концентрациях соли (например, приблизительно 0-0,25 M соли).
В. Получение антитела
1) Поликлональные антитела
Поликлональные антитела предпочтительно индуцируют у животных многократными подкожными (sc) или внутрибрюшинными (ip) инъекциями соответствующего антигена и адъюванта. Может быть пригодной конъюгация соответствующего антигена (особенно когда используют синтетические пептиды) с белком, который является иммуногенным у видов, подлежащих иммунизации. Например, антиген можно конъюгировать с гемоцианином лимфы улитки (KLH), сывороточным альбумином, бычьим тиреоглобулином, или ингибитором трипсина сои, с использованием бифункционального или образующего производное средства, например сложного эфира малеимидобензоилсульфосукцинимида (конъюгация через остатки цистеина), N-гидроксисукцинимида (через остатки лизина), глутаральдегида, янтарного ангидрида, SOCl2 или R1N=C=NR, где R и R1 являются независимыми низшими алкильными группами. Примеры адъювантов, которые можно использовать, включают полный адъювант Фрейнда и адъювант MPL-TDM (монофосфориллипид A, синтетический дикориномиколат трегалозы). Протокол иммунизации может быть выбран специалистом в данной области без излишнего экспериментирования.
Животных иммунизируют против антигена, иммуногенных конъюгатов или производных комбинированием, например, 100 мкг или 5 мкг белка или конъюгата (для кроликов или мышей, соответственно) с 3 объемами полного адъюванта Фрейнда и инъекцией раствора внутрикожно в несколько участков. Через один месяц животным проводят повторную иммунизацию от 1/5 до 1/10 от исходного количества пептида или конъюгата в полном адъюванте Фрейнда посредством подкожной инъекции в несколько участков. Через семь-четырнадцать суток у животных отбирают кровь, и сыворотку анализируют в отношении титра антител. Животным проводят повторные иммунизации до достижения титрами плато. Конъюгаты также можно получать в рекомбинантной клеточной культуре в качестве белковых слитых молекул. Также для усиления иммунного ответа пригодным образом используют вызывающие агрегацию средства, такие как квасцы.
2) Моноклональные антитела
Моноклональные антитела получают из совокупности, по существу, гомогенных антител, т.е. отдельные антитела, составляющие совокупность, являются идентичными, за исключением возможных встречающихся в природе мутаций и/или посттрансляционных модификаций (например, изомеризаций, амидаций), которые могут быть представлены в небольших количествах. Таким образом, определение "моноклональный" указывает на тот признак антитела, что оно не является смесью отдельных антител.
Например, моноклональные антитела можно получать с использованием способа гибридом, впервые описанного Kohler et al., Nature, 256:495 (1975), или их можно получать способами рекомбинантных ДНК (патент США № 4816567).
В способе гибридом мышь или другого пригодного животного-хозяина, такого как хомяк, иммунизируют, как описано выше, для получения лимфоцитов, которые продуцируют или способны продуцировать антитела, которые специфично связываются с белком, используемым для иммунизации. Альтернативно лимфоциты можно иммунизировать in vitro. После иммунизации лимфоциты выделяют, а затем подвергают слиянию с миеломной клеточной линией с использованием пригодного средства, вызывающего слияние клеток, такого как полиэтиленгликоль, с получением гибридомных клеток (Goding, Monoclonal Antibodies: Principles and Practice, pp.59-103 (Academic Press, 1986)).
Иммунизирующее средство, как правило, включает антигенный белок или его слитый вариант. Как правило, используют либо лимфоциты периферической крови человека ("PBL"), если желательными являются клетки человека, либо клетки селезенки или клетки лимфатических узлов, если желательными являются клетки не человека. Затем лимфоциты подвергают слиянию с иммортализованной клеточной линией с использованием пригодного вещества для слияния, такого как полиэтиленгликоль, с получением гибридомной клетки. Goding, Monoclonal Antibodies: Principles and Practice, Academic Press (1986), pp. 59-103.
Иммортализованные клеточные линии, как правило, представляют собой трансформированные клетки млекопитающих, в частности миеломные клетки грызунов, бычьих и человека. Как правило, используют миеломные клеточные линии крысы или мыши. Полученные таким образом гибридомные клетки высевают и выращивают в пригодной культуральной среде, которая предпочтительно содержит одно или несколько веществ, которые ингибируют рост или выживание неслитых исходных клеток миеломы. Например, если исходные клетки миеломы лишены фермента гипоксантин-гуанин-фосфорибозил-трансферазы (HGPRT или HPRT), селективная культуральная среда для гибридом, как правило, включает вещества гипоксантин, аминоптерин и тимидин (среда HAT), которые препятствуют росту клеток, дефицитных по HGPRT.
Предпочтительные иммортализованные миеломные клетки представляют собой клетки, которые эффективно подвергаются слиянию, которые поддерживают стабильно высокий уровень продукции антител отобранными антителопродуцирующими клетками и являются чувствительными к среде, такой как среда HAT. Среди них, предпочтительными являются линии миеломы мышей, такие как линии, полученные из опухолей мышей MOPC-21 и MPC-11, доступные от Salk Institute Cell Distribution Center, San Diego, California USA, и клетки SP-2 (и их производные, например, X63-Ag8-653), доступные от American Type Culture Collection, Manassas, Virginia USA. Также для продукции моноклональных антител человека описаны миеломные клеточные линии человека и линии гетеромиеломы мыши - человека (Kozbor, J. Immunol, 133:3001 (1984); и Brodeur et al., Monoclonal Antibody Production Techniques and Applications, pp. 51-63 (Marcel Dekker, Inc., New York, 1987)).
Культуральную среду, в которой выращивают гибридомные клетки, оценивают в отношении продукции моноклональных антител, направленных против антигена. Предпочтительно специфичность связывания моноклональных антител, продуцируемых гибридомными клетками, определяют посредством иммунопреципитации или анализа связывания in vitro, такого как радиоиммунный анализ (RIA) или твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA).
Культуральную среду, в которой гибридомные клетки культивируют, можно оценивать в отношении наличия моноклональных антител, направленных против требуемого антигена. Предпочтительно аффинность и специфичность связывания моноклонального антитела можно определять с помощью иммунопреципитации или анализа связывания in vitro, такого как радиоиммунный анализ (RIA) или твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA). Такие способы и анализы известны в данной области. Например, аффинность связывания моноклонального антитела можно определять, например, посредством анализа Скэтчарда, описанного в Munson et al., Anal. Biochem., 107:220 (1980).
После идентификации гибридомных клеток, которые продуцируют антитела с требуемой специфичностью, аффинностью и/или активностью, клоны можно субклонировать способами лимитирующих разведений и выращивать стандартными способами (Goding, выше). Пригодные для этой цели культуральные среды включают, например, среду D-MEM или RPMI-1640. Кроме того, гибридомные клетки можно выращивать in vivo у млекопитающих в качестве опухолей.
Моноклональные антитела, секретируемые субклонами, пригодным способом выделяют из культуральной среды, асцитной жидкости или сыворотки общепринятыми способами очистки антител, например, таких как хроматография с A-Sepharose, хроматография с гидроксилапатитом, гель-электрофорез, диализ или аффинная хроматография.
Моноклональные антитела также можно получать способами рекомбинантных ДНК, такими как способы, описанные в патенте США № 4816567, и как описано выше. ДНК, кодирующую моноклональные антитела, легко выделяют и секвенируют с использованием общепринятых способов (например, с использованием олигонуклеотидных зондов, которые способны специфично связываться с генами, кодирующими тяжелые и легкие цепи антител мыши). Гибридомные клетки служат в качестве предпочтительного источника такой ДНК. Для обеспечения синтеза моноклональных антител в таких рекомбинантных клетках-хозяевах, после выделения ДНК можно встраивать в экспрессирующие векторы, которые затем трансфицируют в клетки-хозяева, такие как клетки E. coli, клетки COS обезьяны, клетки яичника китайского хомячка (CHO) или клетки миеломы, которые в ином случае не продуцируют белок антитела. Обзорные статьи по рекомбинантной экспрессии в бактериях ДНК, кодирующей антитело, включают Skerra et al., Curr. Opinion in Immunol. 5:256-262 (1993) и Pluckthun, Immunol. Revs., 130:151-188 (1992).
В следующем варианте осуществления антитела можно выделять из фаговых библиотек антител, созданных с использованием способов, описанных в McCafferty et al., Nature, 348:552-554 (1990). В Clackson et al., Nature, 352:624-628 (1991) и Marks et al., J. Mol. Biol., 222:581-597 (1991) описано выделение антител мыши и человека, соответственно, с использованием фаговых библиотек. В более поздних публикациях описана продукция высокоаффинных (нМ-порядок) антител человека посредством перестановки цепей (Marks et al., Bio/Technology, 10:779-783 (1992)), а также комбинаторной инфекции и рекомбинации in vivo в качестве стратегии для конструирования очень крупных фаговых библиотек (Waterhouse et al., Nucl. Acids. Res., 21:2265-2266 (1993)). Таким образом, эти способы представляют собой приемлемые альтернативы традиционным способам гибридомных моноклональных антител для выделения моноклональных антител.
Также ДНК можно модифицировать, например, посредством замены последовательностями константного домена тяжелой и легкой цепи человека гомологичных последовательностей мыши (патент США № 4816567; и Morrison, et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 81:6851 (1984)), или ковалентного связывания кодирующей иммуноглобулин последовательности со всей кодирующей последовательностью для полипептида, не являющегося иммуноглобулином, или ее частью. Как правило, такими полипептидами, не являющимися иммуноглобулинами, заменяют константные домены антитела, или ими заменяют вариабельные домены одного антигенсвязывающего сайта антитела с получением химерного двухвалентного антитела, содержащего один антигенсвязывающий сайт со специфичностью к одному антигену и другой антигенсвязывающий сайт со специфичностью к другому антигену.
Моноклональные антитела, описанные в настоящем документе, могут быть одновалентными, и способы их получения хорошо известны в данной области. Например, один способ вовлекает рекомбинантную экспрессию легкой цепи иммуноглобулина и модифицированной тяжелой цепи. Тяжелую цепь укорачивают, как правило, в любой точке Fc-участка, чтобы предотвратить поперечное связывание тяжелой цепи. Альтернативно соответствующие остатки цистеина можно заменять другим аминокислотным остатком или удалять для предотвращения поперечного связывания. Также для получения одновалентных антител пригодны способы in vitro. Расщепление антител с получением их фрагментов, в частности Fab-фрагментов, можно проводить с использованием общепринятых способов, известных в данной области.
Химерные или гибридные антитела также можно получать in vitro с использованием известных способов химии синтетических белков, включая способы, вовлекающие поперечно-сшивающие агенты. Например, иммунотоксины можно конструировать с использованием реакции дисульфидного обмена или посредством образования тиоэфирной связи. Примеры пригодных для этой цели реагентов включают иминотиолат и метил-4-меркаптобутиримидат.
3) Гуманизированные антитела.
Антитела по изобретению, кроме того, могут включать гуманизированные антитела или антитела человека. Гуманизированные формы антител не человека (например, мыши) представляют собой химерные иммуноглобулины, цепи иммуноглобулинов или их фрагменты (такие как Fv, Fab, Fab', F(ab')2 или другие антигенсвязывающие подпоследовательности антител), которые содержат минимальную последовательность, образованную иммуноглобулином не человека. Гуманизированные антитела представляют собой иммуноглобулины человека (реципиентное антитело), в которых остатки из определяющей комплементарность области (CDR) реципиента заменены остатками CDR не относящегося к человеку вида (донорное антитело), такого как мышь, крыса или кролик, имеющими требуемую специфичность, аффинность и емкость. В некоторых случаях остатки каркасной области Fv иммуноглобулина человека заменяют соответствующими остатками не человека. Гуманизированные антитела также могут содержать остатки, которые не встречаются ни в реципиентном антителе, ни в импортных последовательностях CDR или каркасной области. Как правило, гуманизированное антитело будет содержать, по существу, все по меньшей мере из одного и, как правило, двух вариабельных доменов, в которых все или по существу все из областей CDR соответствуют CDR иммуноглобулина не человека, и все или по существу все из областей FR представляют собой области FR консенсусной последовательности иммуноглобулина человека. Гуманизированное антитело также в оптимальном случае будет содержать по меньшей мере часть константного участка (Fc) иммуноглобулина, как правило, константного участка иммуноглобулина человека. Jones et al., Nature 321:522-525 (1986); Riechmann et al., Nature 332:323-329 (1988); и Presta, Curr. Op. Struct. Biol. 2:593-596 (1992).
Способы гуманизации антител, не являющихся человеческими, описаны в данной области. Как правило, гуманизированное антитело обладает одним или несколькими встроенными в него аминокислотными остатками из источника, который не является человеческим. Такие не являющиеся человеческими аминокислотные остатки часто называют "импортными" остатками, которые, как правило, взяты из "импортной" вариабельного домена. Гуманизацию, главным образом, можно проводить в соответствии со способом Winter и коллег, Jones et al., Nature, 321:522-525 (1986); Riechmann et al., Nature, 332:323-327 (1988); Verhoeyen et al., Science, 239:1534-1536 (1988), посредством замены CDR или последовательностями CDR крысы соответствующих последовательностей антитела человека. Таким образом, такие "гуманизированные" антитела представляют собой химерные антитела (патент США № 4816567), где, по существу, менее целого вариабельного домена человека замещено соответствующей последовательностью вида, не относящегося к человеку. На практике, гуманизированные антитела, как правило, представляют собой антитела человека, в которых некоторые остатки CDR и, возможно, некоторые остатки FR заменены остатками из аналогичных сайтов антител грызунов.
Выбор вариабельных доменов человека, как легких, так и тяжелых цепей, для использования при получении гуманизированных антител является очень важным для снижения антигенности. В соответствии с так называемым способом "наилучшего соответствия", последовательность вариабельного домена антитела грызуна анализируют относительно целой библиотеки известных последовательностей вариабельных доменов человека. Последовательность человека, которая является наиболее сходной с последовательностью грызуна, и каркасную область (FR) человека в ней принимают для гуманизированного антитела (Sims et al., J. Immunol, 151:2296 (1993); Chothia et al., J. Mol. Biol, 196:901 (1987)). В другом способе используют конкретную каркасную область, полученную из консенсусной последовательности всех антител человека из конкретной подгруппы легких или тяжелых цепей. Один и тот же каркас можно использовать для нескольких различных гуманизированных антител (Carter et al., Proc. Natl. Acad. Sci USA, 89:4285 (1992); Presta et al., J. Immunol, 151:2623 (1993)).
Кроме того, важно, чтобы антитела были гуманизированы с сохранением высокой аффинности к антигену и других положительных биологических свойств. Для достижения этой цели, в соответствии с предпочтительным способом, гуманизированные антитела получают с помощью процесса анализа исходных последовательностей и различных предполагаемых гуманизированных продуктов с использованием трехмерных моделей исходных и гуманизированных последовательностей. Трехмерные модели иммуноглобулинов являются широко доступными и известны специалистам в данной области. Доступными являются компьютерные программы, которые иллюстрируют и выводят на экран возможные трехмерные конформационные структуры выбранных последовательностей иммуноглобулинов-кандидатов. Исследование этих выведенных на экран данных позволяет проводить анализ возможной роли остатков в функционировании предполагаемых последовательностей иммуноглобулинов, т.е. анализ остатков, которые влияют на способность иммуноглобулина-кандидата связывать свой антиген. Таким образом, можно отобрать остатки FR и комбинировать их из реципиентной и импортной последовательностей таким образом, чтобы были достигнуты требуемые свойства антител, такие как повышенная аффинность к антигену(ам)-мишени. Как правило, непосредственное и наиболее существенное влияние на связывание антигена оказывают остатки CDR.
Предусмотрены различные формы гуманизированного антитела. Например, гуманизированное антитело может представлять собой фрагмент антитела, такой как Fab, который необязательно конъюгирован с одним или несколькими цитотоксическим средством(ами) для получения иммуноконъюгата. Альтернативно гуманизированное антитело может представлять собой интактное антитело, такое как интактное антитело IgG1.
4) Антитела человека
В качестве альтернативы гуманизации можно получать антитела человека. Например, в настоящее время возможным является получение трансгенных животных (например, мышей), которые способны, при иммунизации, продуцировать полный набор антител человека в отсутствии продукции эндогенных иммуноглобулинов. Например, было описано, что гомозиготная делеция гена области соединения тяжелых цепей антител (JH) у химерных мышей и мутантных мышей зародышевой линии приводит к полному ингибированию продукции эндогенных антител. Перенос системы генов иммуноглобулинов зародышевой линии человека в таких мутантных мышей зародышевой линии приводит к продукции антител человека при антигенной стимуляции. См., например, Jakobovits et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90:2551 (1993); Jakobovits et al., Nature, 362:255-258 (1993); Bruggermann et al., Year in Immuno., 7:33 (1993); и патент США № 5591669 и WO 97/17852.
Альтернативно для получения антител человека и фрагментов антител in vitro можно использовать технологию фагового дисплея из наборов генов вариабельных (V) доменов иммуноглобулинов неиммунизированных доноров. McCafferty et al., Nature 348:552-553 (1990); Hoogenboom and Winter, J. Mol. Biol. 227:381 (1991). В соответствии с этим способом гены V домена антител клонируют в рамке считывания либо главного, либо второстепенного гена оболочки нитевидного бактериофага, такого как M13 или fd, и они экспонируются в качестве функциональных фрагментов антител на поверхности частицы фага. Вследствие того, что нитевидная частица содержит одноцепочечную копию ДНК генома фага, селекция на основе функциональных свойств антитела также приведет к селекции гена, кодирующего антитело, проявляющее такие свойства. Таким образом, фаг имитирует некоторые из свойств B-клетки. Фаговый дисплей можно проводить в различных формах, рассмотренных, например, в Johnson, Kevin S. and Chiswell, David J., Current Opinion in Structural Biology 3:564-571 (1993). Для фагового дисплея можно использовать несколько источников сегментов V-генов. Clackson et al., Nature, 352:624-628 (1991), выделили набор разнообразных антител против оксазолона из небольшой случайной комбинаторной библиотеки V-генов, полученной из селезенок иммунизированных мышей. Можно сконструировать набор V-генов из неиммунизированных доноров-людей и можно выделять антитела против широкого набора антигенов (в том числе против собственных антигенов), главным образом, в соответствии со способами, описанными Marks et al., J. Mol Biol. 222:581-597 (1991), или Griffith et al., EMBO J. 12:725-734 (1993). См., также, патенты США №№ 5565332 и 5573905.
Также для получения моноклональных антител человека доступны способы Cole et al., и Boerner et al. (Cole et al., Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Liss, p. 77 (1985) и Boerner et al., J. Immunol. 147(1):86-95 (1991). Аналогично антитела человека можно получать введением локусов иммуноглобулинов человека трансгенным животным, например, мышам, у которых эндогенные гены иммуноглобулинов частично или полностью инактивированы. При иммунизации наблюдают продукцию антитела человека, которое в высокой степени сходно с антителом, наблюдаемым у человека во всех отношениях, включая реаранжировку генов, сборку и набор антител. Этот подход описан, например, в патентах США №№ 5545807, 5545806, 5569825, 5625126, 5633425, 5661016 и в следующих научных публикациях: Marks et al., Bio/Technology 10:779-783 (1992); Lonberg et al., Nature 368: 856-859 (1994); Morrison, Nature 368:812-13 (1994), Fishwild et al., Nature Biotechnology 14:845-51 (1996), Neuberger, Nature Biotechnology 14: 826 (1996) и Lonberg и Huszar, Intern. Rev. Immunol. 13:65-93 (1995).
Как рассмотрено выше, антитела человека также можно получать посредством активированных B-клеток in vitro (см. патенты США 5567610 и 5229275).
5) Фрагменты антител
В некоторых случаях преимущественным является использование фрагментов антител, вместо целых антител. Меньший размер фрагментов позволяет быстрое выведение и может обеспечить улучшенный доступ к солидным опухолям.
Для получения фрагментов антител были разработаны различные способы. Традиционно эти фрагменты получали посредством протеолитического расщепления полноразмерных антител (см., например, Morimoto et al., Journal of Biochemical and Biophysical Methods 24:107-117 (1992); и Brennan et al., Science, 229:81 (1985)). Однако эти фрагменты в настоящее время можно получать непосредственно с помощью рекомбинантных клеток-хозяев. Fab-, Fv- и scFv-фрагменты антител могут быть экспрессированы и секретированы в E. coli, таким образом, позволяя простой способ получения больших количеств этих фрагментов. Фрагменты антител можно выделять из фаговых библиотек антител, описанных выше. Альтернативно фрагменты Fab'-SH можно выделять непосредственно из E. coli и химически связывать с получением фрагментов F(ab')2 (Carter et al., Bio/Technology 10:163-167 (1992)). В соответствии с другим подходом фрагменты F(ab')2 можно выделять непосредственно из рекомбинантной культуры клеток-хозяев. Fab- и F(ab')2-фрагмент с повышенным временем полужизни in vivo описаны в патенте США № 5869046. В других вариантах осуществления предпочтительное для выбора антитело представляет собой одноцепочечный Fv-фрагмент (scFv). См. WO 93/16185, патент США № 5571894 и патент США № 5587458. Фрагмент антитела также может представлять собой "линейное антитело", например, как описано в патенте США 5641870. Такие линейные фрагменты антител могут быть моноспецифичными или биспецифичными.
6) Антителозависимая опосредуемая ферментом пролекарственная терапия (ADEPT)
Антитела по настоящему изобретению также можно использовать в ADEPT посредством конъюгации антитела с активирующим пролекарство ферментом, который превращает пролекарство (например, пептидильное химиотерапевтическое средство, см. WO 81/01145) в активное лекарственное средство против злокачественной опухоли. См., например, WO 88/07378 и патент США № 4975278.
Ферментный компонент иммуноконъюгата, пригодного для ADEPT, включает любой фермент, способный действовать на пролекарство таким образом, чтобы превращать его в более активную цитотоксическую форму.
Ферменты, которые пригодны в способе по этому изобретению, включают, но не ограничиваются ими, гликозидазу, глюкозооксидазу, лизоцим человека, глюкуронидазу человека, щелочную фосфатазу, пригодную для превращения фосфатсодержащих пролекарств в свободные лекарственные средства; арилсульфатазу, пригодную для превращения сульфатсодержащих пролекарств в свободные лекарственные средства; цитозиндезаминазу, пригодную для превращения нетоксичного 5-фторцитозина в лекарственное средство против злокачественной опухоли 5-фторурацил; протеазы, такие как протеаза serratia, термолизин, субтилизин, карбоксипептидазы (например, карбоксипептидазу G2 и карбоксипептидазу A) и катепсины (такие как катепсины B и L), которые пригодны для превращения пептидсодержащих пролекарств в свободные лекарственные средства; D-аланилкарбоксипептидазы, пригодные для превращения пролекарств, которые содержат D-аминокислотные заместители; отщепляющие углевод ферменты, такие как β-галактозидаза и нейраминидаза, пригодные для превращения гликозилированных пролекарств в свободные лекарственные средства; β-лактамазу, пригодную для превращения лекарственных средств, превращенных в производные с β-лактамами, в свободные лекарственные средства; и пенициллинамидазы, такие как амидаза пенициллина V или амидаза пенициллина G, пригодные для превращения лекарственных средств, преобразованных по их азотам аминов посредством феноксиацетильной или фенилацетильной групп, соответственно, в свободные лекарственные средства. Альтернативно антитела с ферментативной активностью, также известные в данной области как "абзимы", можно использовать для превращения пролекарств по изобретению в свободные активные лекарственные средства (см., например, Massey, Nature 328:457-458 (1987)). Конъюгаты антитело-абзим можно получать, как описано в настоящем документе, для доставки абзима в популяцию опухолевых клеток.
Указанные выше ферменты можно ковалентно связывать с полипептидами или антителами, описанными в настоящем документе, способами, хорошо известными в данной области, такими как применение гетеробифункциональных поперечно-сшивающих средств, рассмотренных выше. Альтернативно слитые белки, содержащие по меньшей мере антигенсвязывающую область антитела по изобретению, связанную по меньшей мере с функционально активной частью фермента по изобретению, можно конструировать с использованием способов рекомбинантных ДНК, хорошо известных в данной области (см., например, Neuberger et al., Nature 312:604-608 (1984)).
7) Биспецифичные и полиспецифичные антитела
Биспецифичные антитела (BsAb) представляют собой антитела, которые обладают специфичностью связывания по меньшей мере двух различных эпитопов, включая эпитопы на одном или на разных белках. Альтернативно одно плечо может быть нацелено на связывание с антигеном-мишенью, а другое плечо может быть комбинировано с плечом, которое связывается с триггерной молекулой на лейкоците, такой как молекула T-клеточного рецептора (например, CD3), или Fc-рецепторы для IgG (FcγR), такие как FcγR1 (CD64), FcγRII (CD32) и FcγRIII (CD16), так чтобы сосредоточить и локализовать механизмы клеточной защиты на экспрессирующей антиген-мишень клетке. Такие антитела можно получать из полноразмерных антител или фрагментов антител (например, биспецифичные антитела F(ab')2).
Также биспецифичные антитела можно использовать для локализации цитотоксических средств в клетках, которые экспрессируют антиген-мишень. Такие антитела обладают одним плечом, которое связывается с требуемым антигеном, и другим плечом, которое связывает цитотоксическое средство (например, сапорин, антитело против интерферона-a, алкалоид барвинка, A-цепь рицина, метотрексат или гаптен с радиоактивным изотопом). Примеры известных биспецифичных антител включают антитело против ErbB2/антитело против FcgRIII (WO 96/16673), антитело против ErbB2/антитело против FcgRI (U.S.P. 5837234), антитело против ErbB2/антитело против CD3 (U.S.P. 5821337).
Способы получения биспецифичных антител известны в данной области. Общепринятый способ получения полноразмерных биспецифичных антител основан на совместной экспрессии двух пар тяжелая цепь/легкая цепь иммуноглобулинов, где две цепи обладают различной специфичностью. Millstein et al., Nature, 305:537-539 (1983). Вследствие случайной сборки тяжелых и легких цепей иммуноглобулинов, такие гибридомы (квадромы) потенциально продуцируют смесь из 10 различных молекул антител, из которых только одна обладает правильной биспецифичной структурой. Очистка правильных молекул, которую обычно проводят посредством стадий аффинной хроматографии, является довольно трудоемкой и выход продукта является низким. Аналогичные способы описаны в WO 93/08829 и в Traunecker et al., EMBO J., 10:3655-3659 (1991).
В соответствии с другим подходом проводят слияние вариабельных доменов антитела с требуемой специфичностью связывания (сайтами связывания антитело-антиген) с последовательностями константных доменов иммуноглобулинов. Предпочтительно проводят слияние с константным доменом тяжелой цепи иммуноглобулина, содержащим по меньшей мере часть шарнирной области, CH2 и CH3. Предпочтительно, чтобы по меньшей мере один из компонентов, предназначенных для слияния, обладал первым константным доменом тяжелой цепи (CH1), содержащим участок, необходимый для связывания легкой цепи. ДНК, кодирующую предназначенные для слияния компоненты тяжелых цепей иммуноглобулинов и, если желательно, легкой цепи иммуноглобулина, встраивают в отдельные экспрессирующие векторы и котрансфицируют в пригодный организм-хозяин. Это обеспечивает значительную гибкость при регулировании соотношений трех полипептидных фрагментов друг с другом в вариантах осуществления, где неравные соотношения трех полипептидных цепей в конструкции обеспечивает оптимальный выход требуемого биспецифичного антитела. Однако возможным является встраивание двух или всех трех полипептидных цепей в один экспрессирующий вектор, если экспрессия по меньшей мере двух полипептидных цепей в равных соотношениях приводит к высокому выходу продукта или если соотношения не имеют существенного влияния на требуемое сочетание цепей.
В предпочтительном варианте осуществления этого подхода биспецифичные антитела состоят из тяжелой цепи гибридного иммуноглобулина с одной специфичностью связывания на одном плече, и пары тяжелая цепь-легкая цепь гибридного иммуноглобулина (обладающей другой специфичностью связывания) на другом плече. Было обнаружено, что такая асимметричная структура облегчает разделение требуемого биспецифичного соединения и нежелательных сочетаний цепей иммуноглобулинов, поскольку наличие легкой цепи иммуноглобулина только в одной половине биспецифичной молекулы обеспечивает легкий способ разделения. Этот подход описан в WO 94/04690. Для более подробного описания получения биспецифичных антител см., например, Suresh et al., Methods in Enzymology, 121:210 (1986).
В соответствии с другим подходом, описанным в WO 96/27011 или в патенте США № 5731168, для максимального увеличения процентного количества гетеродимеров, которые выделяют из рекомбинантных клеточных культур можно сконструировать область контакта между парой молекул антител. Предпочтительная область контакта содержит по меньшей мере часть CH3-области константного домена антитела. В этом способе одну или несколько небольших боковых цепей аминокислот из области контакта первой молекулы антитела заменяют на более крупные боковые цепи (например, тирозин или триптофан). В области контакта второй молекулы антитела создают компенсирующие "полости" идентичного или сходного с крупной боковой цепью(ями) размера посредством замены крупных боковых цепей аминокислот на цепи меньших размеров (например, аланин или треонин). Это обеспечивает механизм для повышения выхода гетеродимера по сравнению с другими нежелательными конечными продуктами, такими как гомодимеры.
Способы получения биспецифичных антител из фрагментов антител также описаны в литературе. Например, биспецифичные антитела можно получать с использованием образования химических связей. В Brennan et al., Science, 229:81 (1985) описан способ, где интактные антитела протеолитически расщепляют с получением F(ab')2-фрагментов. Эти фрагменты восстанавливают в присутствии вещества, образующего комплексы с дитиолами, арсенита натрия, для стабилизации соседних дитиолов и предотвращения образования межмолекулярного дисульфида. Затем полученные Fab'-фрагменты превращают в производные с тионитробензоатом (TNB). Одно из производных Fab'-TNB затем повторно превращают в производное Fab'-TNB с получением биспецифичного антитела. Полученные биспецифичные антитела можно использовать в качестве средств для селективной иммобилизации ферментов.
Fab'-фрагменты можно прямо выделять из E. coli и химически связывать с образованием биспецифичных антител. В Shalaby et al., J. Exp. Med., 175:217-225 (1992) описано получение полностью гуманизированных молекул биспецифичного антитела F(ab')2. Осуществляли секрецию из E. coli каждого Fab'-фрагмента по отдельности и их подвергали прямому химическому соединению in vitro с образованием биспецифичного антитела. Биспецифичное антитело, полученное таким образом, обладало способностью связываться с клетками, сверхэкспрессирующими рецептор ErbB2, и нормальными T-клетками человека, а также запускать литическую активность цитотоксических лимфоцитов человека против мишеней, представляющих собой рак молочной железы человека.
Также были описаны различные способы получения и выделения фрагментов двухвалентных антител непосредственно из рекомбинантной клеточной культуры. Например, были получены двухвалентные гетеродимеры с использованием лейциновых молний. Kositelny et al., J. Immunol., 148(5):1547-1553 (1992). Пептиды лейциновой молнии белков Fos и Jun связывали с Fab'-участками двух различных антител посредством слияния генов. Гомодимеры антител восстанавливали в шарнирной области с получением мономеров, а затем повторно окисляли с получением гетеродимеров антител. Способ "димеров антител", описанный Hollinger et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 90:6444-6448 (1993) обеспечивает альтернативный механизм получения биспецифичных/двухвалентных фрагментов антител. Фрагменты содержат вариабельный домен тяжелой цепи VH, связанный с вариабельным доменом легкой цепи (VL) посредством линкера, который является слишком коротким для возможности образования пары между двумя доменами на одной и той же цепи. Таким образом, домены VH и VL одного фрагмента вынуждены образовывать пару с комплементарными доменами VL и VH другого фрагмента, таким образом, формируя два антигенсвязывающих сайта. Также описана другая стратегия для получения фрагментов биспецифичных/двухвалентных антител с использованием димеров одноцепочечных Fv (sFv). См. Gruber et al., J. Immunol, 152:5368 (1994).
Также предусмотрены антитела более чем c двумя валентностями. Например, можно получать триспецифичные антитела. Tutt et al. J. Immunol. 147:60 (1991).
Иллюстративные биспецифичные антитела могут связываться с двумя различными эпитопами на данной молекуле. Альтернативно плечо, направленное против белка, можно комбинировать с плечом, которое связывается с триггерной молекулой на лейкоците, такой как молекула T-клеточного рецептора (например, CD2, CD3, CD28 или B7), или Fc-рецепторы для IgG (FcγR), такие как FcγRI (CD64), FcγRII (CD32) и FcγRIII (CD 16), так чтобы сосредоточить механизмы клеточной защиты на клетках, экспрессирующих конкретный белок. Также биспецифичные антитела можно использовать для локализации цитотоксических средств в клетках, которые экспрессируют конкретный белок. Такие антитела обладают связывающим белок плечом и плечом, которое связывает цитотоксическое средство или хелатор радионуклидов, такой как EOTUBE, DPTA, DOTA или TETA. Другое представляющее интерес биспецифическое антитело связывает представляющий интерес белок и, кроме того, связывает тканевой фактор (TF).
8) Поливалентные антитела
Поливалентное антитело может интернализовываться (и/или катаболизироваться) быстрее, чем двухвалентное антитело, клеткой, экспрессирующей антиген, с которым антитела связываются. Антитела по настоящему изобретению могут представлять собой поливалентные антитела (которые могут относиться к классу, отличному от класса IgM) с тремя или более антигенсвязывающими сайтами (например, четырехвалентные антитела), которые можно легко получать посредством рекомбинантной экспрессии нуклеиновой кислоты, кодирующей полипептидные цепи антитела. Поливалентное антитело может содержать домен димеризации и три или более антигенсвязывающих сайтов. Предпочтительный домен димеризации содержит (или состоит из них) Fc-участок или шарнирную область. В этом случае, антитело будет содержать Fc-область и три или более антигенсвязывающих сайтов со стороны N-конца Fc-участка. Предпочтительное поливалентное антитело, представленное в настоящем документе, содержит (или состоит из них) от трех до приблизительно восьми, однако предпочтительно четыре антигенсвязывающих сайта. Поливалентное антитело содержит по меньшей мере одну полипептидную цепь (и предпочтительно две полипептидные цепи), где полипептидная цепь(и) содержит два или более вариабельных домена. Например, полипептидная цепь(и) может содержать VD1-(X1)n-VD2-(X2)n-Fc, где VD1 представляет собой первый вариабельный домен, VD2 представляет собой второй вариабельный домен, Fc представляет собой одну полипептидуную цепь Fc-участка, X1 и X2 представляют собой аминокислоту или полипептид, и n равно 0 или 1. Например, полипептидная цепь(и) может содержать цепь VH-CH1-подвижный линкер-VH-CH1-Fc-участок; или цепь VH-CH1-VH-CH1-Fc-участок. Поливалентное антитело, представленное в настоящем документе, предпочтительно дополнительно содержит по меньшей мере два (и предпочтительно четыре) полипептида вариабельного домена легкой цепи. Поливалентное антитело, представленное в настоящем документе, например, может содержать от приблизительно двух до приблизительно восьми полипептидов вариабельного домена легкой цепи. Полипептиды вариабельного домена легкой цепи, рассматриваемые в настоящем документе, содержат вариабельный домен легкой цепи и, необязательно, дополнительно содержат CL-домен.
9) Гетероконъюгаты антител
Гетероконъюгаты антител также находятся в объеме настоящего изобретения. Гетероконъюгаты антител состоят из двух ковалентно связанных антител. Например, одно из антител в гетероконъюгате может быть связано с авидином, а другое с биотином. Такие антитела, например, были предложены для нацеливания клеток иммунной системы против нежелательных клеток, U.S.P. № 4676980, и для лечения ВИЧ-инфекции. WO 91/00360, WO 92/200373 и EP 0308936. Предусмотрено, что антитела можно получать in vitro с использованием известных способов химии синтетических белков, включая способы, вовлекающие поперечно-сшивающие средства. Например, иммунотоксины можно конструировать с использованием реакции дисульфидного обмена или посредством образования тиоэфирной связи. Примеры пригодных реагентов для этой цели включают иминотиолат и метил-4-меркаптобутиримидат и реагенты, описанные, например, в патенте США № 4676980. Гетероконъюгаты антител можно получать с использованием любого пригодного способа поперечного сшивания. Пригодные средства для поперечного сшивания хорошо известны в данной области и описаны в патенте США № 4676980, совместно с рядом способов поперечного сшивания.
10) Инженерия эффекторных функций
Может быть желательной модификация антитела по изобретению в отношении эффекторной функции, например, чтобы усилить антигензависимую клеточно-опосредуемую цитотоксичность (ADCC) и/или комплементзависимую цитотоксичность (CDC) антитела. Этого можно достигать внесением одной или нескольких аминокислотных замен в Fc-участок антитела. Альтернативно, или дополнительно, в Fc-участок можно вносить остаток(и) цистеина, обеспечивая, таким образом, формирование дисульфидной связи между цепями в этом участке. Полученное таким образом гомодимерное антитело может обладать улучшенной способностью к интернализации и/или усиленным комплементзависимым уничтожением клеток и повышенной антителозависимой клеточной цитотоксичностью (ADCC). См. Caron et al., J. Exp. Med. 176:1191-1195 (1992) и Shopes, B. J. Immunol. 148:2918-2922 (1992). Гомодимерные антитела с повышенной противоопухолевой активностью также можно получать с использованием гетеробифункциональных поперечных линкеров, как описано в Wolff et al., Cancer Research 53:2560-2565 (1993). Альтернативно можно сконструировать антитело, которое обладает дублированными Fc-участками и, таким образом, может обладать повышенной способностью в отношении лизиса комплементом и ADCC. См. Stevenson et al., Anti-Cancer Drug Design 3:219-230 (1989).
Для увеличения времени полужизни антитела в сыворотке можно встраивать в антитело (особенно во фрагмент антитела) связывающий рецептор спасения эпитоп, как описано, например, в патенте США 5739277. Как используют в рамках настоящей заявки, термин "связывающий рецептор спасения эпитоп" относится к эпитопу Fc-участка молекулы IgG (например, IgG1, IgG2, IgG3 или IgG4), который отвечает за повышение периода полураспада в сыворотке молекулы IgG in vivo.
11) Иммуноконъюгаты
Настоящее изобретение также относится к иммуноконъюгатам или конъюгатам антитело-лекарственное средство (ADC), содержащим антитело, конъюгированное с цитотоксическим средством, таким как химиотерапевтическое средство, токсин (например, ферментативно активный токсин бактерий, грибов, растений или животных, в том числе его фрагменты и/или варианты), или с радиоактивным изотопом (т.е. радиоконъюгатом). Такие ADC должны демонстрировать приемлемый профиль безопасности.
Применение ADC для местной доставки цитотоксических или цитостатических средств, например лекарственных средств для уничтожения или ингибирования опухолевых клеток при лечении злокачественной опухоли [Syrigos and Epenetos, Anticancer Research 19:605-14 (1999); Niculeascu-Duvaz and Springer, Adv. Drug Del. Rev. 26:151-72 (1997); US 4975278], теоретически позволяет направленную доставку группы лекарственного средства в опухоли и внутриклеточное накопление в ней, где системное введение таких неконъюгированных лекарственных средств может привести к неприемлемым уровням токсичности для нормальных клеток, кроме опухолевых клеток, которые стремятся устранить (Baldwin et al., Lancet, 603-05 (1986); Thorpe, (1985) Antibody Carriers Of Cytotoxic Agents In Cancer Therapy: A Review, in Monoclonal Antibody '84: Biological And Clinical Applications, A. Pinchera et al. (eds), pp. 475-506). Таким образом, желательной является максимальная эффективность при минимальной токсичности. Было описано, что для этих стратегий пригодны как поликлональные антитела, так и моноклональные антитела (Rowland et al., Cancer Immunol. Immunother. 21:183-87 (1986)). Лекарственные средства, используемые в этих способах, включают дауномицин, доксорубицин, метотрексат и виндезин. Токсины, используемые в конъюгатах антитело-токсин, включают бактериальные токсины, такие как дифтерийный токсин, токсины растений, такие как рицин, низкомолекулярные токсины, такие как гелданамицин (Mandler et al., J. Nat. Cancer Inst. 92(19):1573-81 (2000); Mandler et al., Bioorganic & Med. Chem. Letters 10:1025-28 (2000); Mandler et al., Bioconjugate Chem. 13:786-91 (2002)), майтанзиноиды (EP 1391213; Liu et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93:8618-23 (1996)) и калихеамицин (Lode et al., Cancer Res. 58:2928 (1998); и Hinman et al., Cancer Res. 51:3336-42 (1993)). Токсины могут оказывать их цитотоксические и цитостатические эффекты посредством механизмов, включающих связывание тубулина, связывание ДНК или ингибирование топоизомеразы. Некоторые цитотоксические лекарственные средства имеют тенденцию к тому, чтобы быть неактивными или менее активными, когда они конъюгированы с крупными антителами или белковыми лигандами рецепторов.
Химиотерапевтические средства, пригодные для получения таких иммуноконъюгатов, описаны выше, и они включают BCNU, стрептозоицин, винкристин, винбластин, адриамицин и 5-фторурацил.
Ферментативно активные токсины и их фрагменты, которые можно использовать, включают A-цепь дифтерийного токсина, несвязывающие активные фрагменты дифтерийного токсина, A-цепь экзотоксина (из Pseudomonas aeruginosa), A-цепь рицина, A-цепь абрина, A-цепь модецина, альфа-сарцин, белки Aleurites fordii, белки-диантаны, белки Phytolaca americana (PAPI, PAPII и PAP-S), ингибитор momordica charantia, курцин, кротин, ингибитор sapaonaria officinalis, гелонин, митогеллин, рестриктоцин, феномицин, эномицин и трихотецены. Для получения радиоконъюгированных антител доступны различные радионуклиды. Их примеры включают 212Bi, 131I, 131In, 90Y и 186Re. Конъюгаты антитела и цитотоксического средства получают с использованием множества бифункциональных связывающих белки веществ, таких как N-сукцинимидил-3-(2-пиридилдитиол)пропионат (SPDP), иминотиолан (IT), бифункциональные производные имидоэфиров (такие как диметиладипимидат HCl), активные сложные эфиры (такие как дисукцинимидилсуберат), альдегиды (такие как глутаральдегид), бис-азидосоединения (такие как бис(п-азидобензоил)гександиамин), производные бис-диазония (такие как бис-(п-диазонийбензоил)этилендиамин), диизоцианаты (такие как 2,6-диизоцианат толуола) и вторичные активные соединения фтора (такие как 1,5-дифтор-2,4-динитробензол). Например, иммунотоксин на основе рицина можно получать, как описано в Vitetta et al., Science 238:1098 (1987). Меченная углеродом 14 1-изотиоцианатобензил-3-метилдиэтилентриаминпентауксусная кислота (MX-DTPA) представляет собой иллюстративный хелатирующий агент для конъюгации радионуклеотида с антителом. См. например, WO 94/11026.
Конъюгаты антитела и цитотоксического средства получают с использованием множества бифункциональных связывающих белки веществ, таких как N-сукцинимидил-3-(2-пиридилдитиол)пропионат (SPDP), иминотиолан (IT), бифункциональные производные имидоэфиров (такие как диметиладипимидат HCl), активные сложные эфиры (такие как дисукцинимидилсуберат), альдегиды (такие как глутаральдегид), бис-азидосоединения (такие как бис(п-азидобензоил)гександиамин), производные бис-диазония (такие как бис-(п-диазонийбензоил)этилендиамин), диизоцианаты (такие как 2,6-диизоцианат толуола) и вторичные активные соединения фтора (такие как 1,5-дифтор-2,4-динитробензол). Например, иммунотоксин на основе рицина можно получать, как описано в Vitetta et al. Science 238:1098 (1987). Меченная углеродом 14 1-изотиоцианатобензил-3-метилдиэтилентриаминпентауксусная кислота (MX-DTPA) представляет собой иллюстративный хелатирующий агент для конъюгации радионуклеотида с антителом. См. WO94/11026. Линкер может представлять собой "расщепляющий линкер", облегчающий высвобождение цитотоксического лекарственного средства в клетке. Например, можно использовать неустойчивый к действию кислот линкер, чувствительный к пептидазе линкер, диметиловый линкер или содержащий дисульфид линкер (Chari et al., Cancer Res. 52:127-131 (1992)).
Кроме того, также в качестве конъюгируемых токсинов для применения в составе по изобретению предусмотрены низкомолекулярные токсины, такие как калихеамицин, майтанзин (U.S.P. 5208020), трихотен и CC1065. В одном варианте осуществления полноразмерное антитело или его антигенсвязывающие фрагменты можно конъюгировать с одной или несколькими молекулами майтанзиноидов (например, от приблизительно 1 до приблизительно 10 молекул майтанзиноидов на молекулу антитела). Майтанзиноиды представляют собой ингибиторы митоза, которые действуют, ингибируя полимеризацию тубулина. Майтанзиноиды, выделенные из природных источников или полученные синтетически, включая майтанзин, майтанзинал и их производные и аналоги, были описаны, см., например, патент США № 5208020 и ссылки, цитированные в нем (см. со столбца 2, строка 53, по столбец 3, строка 10), и патенты США 3896111 и 4151042. Способы получения конъюгатов антитело-майтанзиноид также описаны в патенте США № 5208020. В предпочтительном варианте осуществления майтанзиноид связан с антителом посредством дисульфидной или другой содержащей серу линкерной группы. Майтанзин, например, можно превращать в May-SS-Me, который можно восстанавливать до May-SH3 и подвергать реакции с модифицированным антителом с получением иммуноконъюгата майтанзиноид-антитело. Chari et al., Cancer Res. 52:127-131 (1992). Антитело можно модифицировать известными способами, а затем антитело, содержащее свободные или защищенные тиольные группы, подвергать реакции с содержащим дисульфид майтанзиноидом с получением конъюгата. Можно определять цитотоксичность конъюгата антитело-майтанзиноид in vitro или in vivo известными способами и измерять IC50.
Калихеамицин представляет собой другой представляющий интерес иммуноконъюгат. Антибиотики семейства калихеамицинов способны образовывать двухцепочечные разрывы ДНК в субпикомолярных концентрациях. Структурные аналоги калихеамицина, которые можно использовать, включают, но не ограничиваются ими, γ1 1, α2 1, 3 1, N-ацетил-γ1 1, PSAG и θ1 1 (Hinman et al., Cancer Res. 53:3336-3342 (1993) и Lode et al., Cancer Res. 58:2925-2928 (1998)). Другие противоопухолевые лекарственные средства, с которыми можно конъюгировать антитело, включают QFA, который представляет собой антифолат. Как калихеамицин, так и QFA обладают внутриклеточными областями действия и нелегко пересекают плазматическую мембрану. Таким образом, клеточный захват этих средств посредством опосредуемой антителом интернализации значительно усиливает их цитотоксические эффекты.
Также предусмотрены иммуноконъюгаты, образованные между антителом и соединением с нуклеолитической активностью (например, с рибонуклеазой или ДНК-эндонуклеазой, такой как дезоксирибонуклеаза, ДНКаза).
В ADC по изобретению антитело (Ab) конъюгировано с одной или несколькими группами лекарственных средств (D), например, от приблизительно 1 до приблизительно 20 групп лекарственных средств на антитело, через линкер (L). ADC формулы I можно получать несколькими способами, с использованием реакций, условий и реагентов органической химии, известных специалистам в данной области, включая: (1) реакцию нуклеофильной группы антитела с двухвалентным линкерным реагентом, с образованием Ab-L, через ковалентную связь, с последующей реакцией с группой лекарственного средства D; и (2) реакцию нуклеофильной группы в группе лекарственного средства с двухвалентным линкерным реагентом, с образованием D-L, через ковалентную связь, с последующей реакцией с нуклеофильной группой антитела.
Ab-(L-D)p (Формула I)
Нуклеофильные группы на антителах включают, но не ограничиваются ими: (i) N-концевые аминогруппы, (ii) аминогруппы боковых цепей, например лизина, (iii) тиольные группы боковых цепей, например цистеин, и (iv) гидроксил сахара или аминогруппы, где антитело является гликозилированным. Аминогруппы, тиольные и гидроксильные группы являются нуклеофильными и способны вступать в реакцию с образованием ковалентных связей с электрофильными группами на линкерных группах и линкерных реагентах, включая: (i) активные сложные эфиры, такие как сложные эфиры NHS, сложные эфиры HOBt, галоформиаты и галоидангидриды; (ii) алкил- и бензилгалогениды, такие как галоацетамиды; и (iii) альдегиды, кетоны, карбоксильные и малеинимидные группы. Определенные антитела обладают поддающимися восстановлению межцепочечными дисульфидами, т.е. цистеиновыми мостиками. Антитела могут быть получены реакционноспособными для конъюгации с линкерными реагентами посредством обработки восстановителем, таким как DTT (дитиотреитол). Каждый цистеиновый мостик, таким образом, будет образовывать, теоретически, два реакционноспособных тиольных нуклеофила. Дополнительные нуклеофильные группы можно вносить в антитела посредством реакции лизинов с 2-иминотиоланом (реагентом Трота) с превращением в результате амина в тиол.
ADC по изобретению также можно получать посредством модификации антитела внесением электрофильных групп, которые могут реагировать с нуклеофильными заместителями на линкерном реагенте или лекарственном средстве. Сахара гликозилированных антител могут быть окисленными, например, периодатными окислительными реагентами, с образованием групп альдегида или кетона, которые могут реагировать с аминогруппой линкерных реагентов или групп лекарственного средства. Полученные иминогруппы Шифова основания могут образовывать стабильную связь, или их можно восстанавливать, например, боргидридными реагентами с образованием стабильных связей аминов. В одном варианте осуществления реакция углеводной части гликозилированного антитела либо с галактозооксидазой, либо с периодатом натрия может приводить к карбонильным (альдегидным и кетоновым) группам в белке, которые могут вступать в реакции с соответствующими группами на лекарственном средстве (Domen et al., J. Chromatog., 510:293-302 (1990)). В другом варианте осуществления белки, содержащие N-концевые остатки серина или треонина, могут вступать в реакцию с мета-периодатом натрия, с образованием в результате альдегида вместо первой аминокислоты (Geoghegan and Stroh, Bioconjugate Chem. 3:138-46 (1992); US 5362852). Такой альдегид можно подвергать реакции с группой лекарственного средства или с нуклеофилом линкера.
Аналогично нуклеофильные группы на группе лекарственного средства включают, но не ограничиваются ими, аминогруппы, тиольные, гидроксильные, гидразидные, оксимные, гидразиновые, тиосемикарбазоновые, гидразинкарбоксилатные и арилгидразидные группы, способные вступать в реакции с образованием ковалентных связей с электрофильными группами на линкерных группах и линкерных реагентах, включая: (i) активные сложные эфиры, такие как сложные эфиры NHS, сложные эфиры HOBt, галоформиаты и галогенангидриды; (ii) алкил- и бензилгалогениды, такие как галоацетамиды; и (iii) альдегиды, кетоны, карбоксильные и малеимидные группы.
Альтернативно слитый белок, содержащий антитело и цитотоксическое средство, можно получать, например, рекомбинантными способами или пептидным синтезом. Отрезок ДНК может включать соответствующие участки, кодирующие два участка конъюгата, либо соседних друг с другом, либо разделенных участком, кодирующим линкерный пептид, который не препятствует требуемым свойствам конъюгата.
В другом варианте осуществления антитело можно конъюгировать с "рецептором" (таким как стрептавидин) для применения в предварительном нацеливании на опухоль, где конъюгат антитело-рецептор вводят пациенту, а затем удаляют несвязанный конъюгат из кровотока с использованием средства для выведения, а затем вводят "лиганд" (например, авидин), который конъюгирован с цитотоксическим средством (например, радионуклеотидом).
ADC, представленные в настоящем документе, необязательно получают с помощью поперечно-сшивающих реагентов: BMPS, EMCS, GMBS, HBVS, LC-SMCC, MBS, MPBH, SBAP, SIA, SIAB, SMCC, SMPB, SMPH, сульфо-EMCS, сульфо-GMBS, сульфо-KMUS, сульфо-MBS, сульфо-SIAB, сульфо-SMCC и сульфо-SMPB и SVSB (сукцинимидил-(4-винилсульфон)бензоат), которые являются коммерчески доступными (например, Pierce Biotechnology, Inc., Rockford, IL).
Также антитело можно конъюгировать с высокорадиоактивным атомом. Для получения радиоконъюгированных антител доступно множество радионуклидов. Их примеры включают At211, Bi212, I131, In131, Y90, Re186, Re188, Sm153, P32 и Pb212 и радиоактивные изотопы Lu. Когда конъюгат используют для диагностики, он может содержать радиоактивный атом для сцинтиграфических исследований, например, Tc99 или I123, или спиновую метку для визуализации посредством ядерного магнитного резонанса (ЯМР) (также известной как магнитно-резонансная томография, mri), такую как йод-123, йод-131, индий-111, фтор-19, углерод-13, азот-15, кислород-17, гадолиний, марганец или железо.
Радиоактивные или другие метки можно включать в конъюгат известными способами. Например, пептид может биологически синтезироваться или его можно синтезировать химическим синтезом аминокислот с использованием пригодных предшественников аминокислот, включающих, например, фтор-19 вместо водорода. Метки, такие как Tc99 или I123, Re186, Re188 и In111, можно связывать через остаток цистеина в пептиде. Иттрий-90 можно присоединять через остаток лизина. Способ IODOGEN® можно использовать для включения йода-123, Fraker et al., Biohem. Biophys. Res. Commun. 80:49-57 (1978). Другие способы конъюгации радионуклидов описаны в "Monoclonal Antibodies in Immunoscintigraphy", (Chatal, CRC Press 1989).
Альтернативно слитый белок, содержащий антитело и цитотоксическое средство, можно получать рекомбинантными способами или пептидным синтезом. Отрезок ДНК может содержать соответствующие области, кодирующие две части конъюгата, соседние друг с другом или разделенные областью, кодирующей линкерный пептид, который не препятствует требуемым свойствам конъюгата.
В другом варианте осуществления антитело можно конъюгировать с "рецептором" (таким как стрептавидин) для применения в предварительном нацеливании на опухоль, где конъюгат антитело-рецептор вводят пациенту, а затем удаляют несвязанный конъюгат из кровотока с использованием средства для выведения, а затем вводят "лиганд" (например, авидин), который конъюгирован с цитотоксическим средством (например, радионуклеотидом).
12) Другие модификации аминокислотной последовательности
Предусмотрена модификация(ии) аминокислотной последовательности антител, описанных в настоящем документе. Например, может быть желательным повышение аффинности связывания и/или других биологических свойств антитела. Варианты аминокислотной последовательности антитела получают внесением соответствующих нуклеотидных замен в нуклеиновую кислоту антитела или посредством пептидного синтеза. Такие модификации включают, например, делеции и/или вставки, и/или замены остатков в аминокислотных последовательностях антитела. Для получения конечной конструкции проводят любое сочетание из делеции, вставки и замены, при условии, что конечная конструкция обладает требуемыми характеристиками. Аминокислотные замены также могут изменять посттрансляционные процессы антитела, например они могут изменять количество или положение участков гликозилирования.
Пригодный способ идентификации определенных остатков или участков антитела, которые являются предпочтительными участками для мутагенеза, называют "сканирующим аланином мутагенезом", как описано Cunningham and Wells, Science, 244:1081-1085 (1989). В данном случае выявляют остаток или группу остатков-мишеней (например, заряженные остатки, такие как arg, asp, his, lys и glu) и заменяют на нейтральную или отрицательно заряженную аминокислоту (наиболее предпочтительно аланин или полиаланин) для нарушения взаимодействия аминокислот с антигеном. Те положения аминокислот, которые демонстрируют функциональную чувствительность к замещению, затем подтверждают посредством внесения дополнительных или других вариантов в участки замещения, или вместо них. Таким образом, поскольку участок для внесения изменения в аминокислотную последовательность является предопределенным, нет необходимости в непосредственной предопределенности характера мутации. Например, для анализа действия мутации в данной области, в кодоне-мишени или участке-мишени проводят сканирующий ala или случайный мутагенез и экспрессированные варианты антитела подвергают скринингу в отношении наличия требуемой активности.
Вставки в аминокислотную последовательность включают N- и/или C-концевые слитые последовательности, обладающие длиной в диапазоне от одного остатка до полипептидов, содержащих сто или более остатков, а также вставки одного или нескольких аминокислотных остатков внутрь последовательности. Примеры концевых вставок включают антитело с N-концевым метионильным остатком или антитело, слитое с цитотоксическим полипептидом. Другие варианты вставок в молекулу антитела против сфинголипида включают слияние N- или C-конца антитела с ферментом (например, ADEPT) или полипептидом, который повышает время полужизни антитела в сыворотке.
Другим типом варианта является вариант с аминокислотной заменой. Эти варианты имеют по меньшей мере один остаток аминокислоты в молекуле антитела, замененный другим остатком. Участки, представляющие наибольший интерес для проведения мутагенеза с замещением, включают гипервариабельные области, но также предусматриваются изменения FR. Консервативные замены представлены в таблице A, ниже, под заголовком "Предпочтительные замены". Если результатом таких замен является изменение биологической активности, тогда можно вносить более значительные изменения, обозначенные "Иллюстративные замены" в таблице A, приведенные ниже, или как описано далее в отношении классов аминокислот, и продукты подвергать скринингу.
ТАБЛИЦА A | ||
Аминокислотные замены | ||
Исходный остаток | Иллюстративные замены | Предпочтительные замены |
Ala (A) | val; leu; ile | val |
Arg (R) | lys; gln; asn | lys |
Asn (N) | gln; his; asp, lys; arg | gln |
Asp (D) | glu; asn | glu |
Cys (C) | ser; ala | ser |
Gln (Q) | asn; glu | asn |
Glu (E) | asp; gln | asp |
Gly (G) | ala | ala |
His (H) | asn; gln; lys; arg | arg |
Ile (I) | leu; val; met; ala; phe; норлейцин | leu |
Leu (L) | норлейцин; ile; val; met; ala; phe | ile |
Lys (K) | arg; gln; asn | arg |
Met (M) | leu; phe; ile | leu |
Phe (F) | leu; val; ile; ala; tyr | tyr |
Pro (P) | Ala | ala |
Ser (S) | Thr | thr |
Thr (T) | Ser | ser |
Trp (W) | tyr; phe | tyr |
Tyr (Y) | trp; phe; thr; ser | phe |
Val (V) | ile; leu; met; phe; ala; норлейцин | leu |
Существенные модификации биологических свойств антитела проводят, выбирая замены, которые значительно отличаются по их эффекту на поддержание (a) структуры полипептидного остова в области замены, например, такой как конформация в виде слоя или спирали, (b) заряда или гидрофобности молекулы в участке-мишени, или (c) объема боковой цепи. Встречающиеся в природе остатки можно разделить на основе общих свойств их боковых цепей:
(1) гидрофобные: норлейцин, met, ala, val, leu, ile;
(2) нейтральные гидрофильные: cys, ser, thr;
(3) кислые: asp, glu;
(4) основные: asn, gln, his, lys, arg;
(5) остатки, влияют на ориентацию цепи: gly, pro; и
(6) ароматические: trp, tyr, phe.
Неконсервативные замены вовлекают замену члена одного из этих классов членом другого класса.
Любой остаток цистеина, не вовлеченный в поддержание надлежащей конформации гуманизированного антитела, также можно заменять для повышения устойчивости молекулы к окислению и предотвращения ошибочного поперечного сшивания. Напротив, к антителу можно добавлять цистеиновую связь(и) для повышения его стабильности (в частности, когда антитело представляет собой фрагмент антитела, такой как Fv-фрагмент).
Особенно предпочтительный тип варианта с заменой включает замену одного или нескольких остатков гипервариабельной области исходного антитела (например, гуманизированного антитела или антитела человека). Как правило, полученный вариант(ы), отобранный для дальнейшей разработки, обладает улучшенными свойствами относительно исходного антитела, из которого он получен. Удобным способом получения таких вариантов с заменами является созревание аффинности с использованием фагового дисплея. В кратком изложении, в несколько участков гипервариабельной области (например, в 6-7 участков) вносят мутации для получения всех возможных замен аминокислот в каждом участке. Варианты антитела, полученные таким образом, экспонируют в одновалентной форме в частицах нитевидных фагов в качестве антител, слитых с продуктом гена III M13, упакованных в каждой частице. Затем проводят скрининг вариантов, экспонированных посредством фагов, в отношении их биологической активности (например, аффинности связывания), как описано в настоящем документе. В целях выявления участков гипервариабельной области, являющихся кандидатами для модификации, можно проводить сканирующий аланином мутагенез для выявления остатков гипервариабельной области, в значительной степени участвующих в связывании антигена. Альтернативно, или дополнительно, может быть целесообразным проведение анализа кристаллической структуры комплекса антиген-антитело для определения участков контакта между антителом и IgE. Такие образующие контакт остатки и соседние остатки являются кандидатами для замены в соответствии с представленными в настоящем документе способами. После получения таких вариантов панель вариантов подвергают скринингу, как описано в настоящей заявке, и для дальнейшей разработки могут отбирать антитела с наилучшими свойствами в одном или нескольких подходящих анализах.
В другом типе аминокислотного варианта антитела изменен исходный характер гликозилирования антитела. Под изменением подразумевают удаление одной или нескольких углеводных групп, находящихся на антителе, и/или добавление одного или нескольких участков гликозилирования, которые не присутствуют в антителе.
Гликозилирование антител, как правило, является либо N-связанным или O-связанным. N-связанное относится к присоединению углеводной группы к боковой цепи остатка аспарагина. Трипептидные последовательности аспарагин-X-серин и аспарагин-X-треонин, где X представляет собой любую аминокислоту, за исключением пролина, представляют собой последовательности, распознаваемые для ферментативного присоединения углеводной группы к боковой цепи аспарагина. Таким образом, наличие любой из этих трипептидных последовательностей в полипептиде создает потенциальный участок гликозилирования. O-связанное гликозилирование относится к присоединению одного из сахаров, представляющих собой N-ацетилгалактозамин, галактозу или ксилозу, к гидроксиаминокислоте, обычно к серину или треонину, хотя также могут быть использованы 5-гидроксипролин или 5-гидроксилизин.
Добавление участков гликозилирования в антитело удобно проводить посредством изменения аминокислотной последовательности таким образом, чтобы она содержала одну или несколько из описанных выше трипептидных последовательностей (в случае участков N-связанного гликозилирования). Также изменение можно осуществлять добавлением одного или нескольких остатков серина или треонина в последовательность исходного антитела, или заменой одним или несколькими остатками серина или треонина в последовательности исходного антитела (в случае участков O-связанного гликозилирования).
Молекулы нуклеиновых кислот, кодирующие варианты аминокислотных последовательностей антитела против IgE, получают множеством способов, известных в данной области. Эти способы включают, но не ограничиваются ими, выделение из природного источника (в случае природных вариантов аминокислотных последовательностей) или получение посредством олигонуклеотид-направленного (или сайт-направленного) мутагенеза, мутагенеза посредством ПЦР и кассетного мутагенеза ранее полученного измененного или не измененного варианта антитела против IgE.
13) Другие модификации антител
Антитела по настоящему изобретению можно дополнительно модифицировать, чтобы они содержали дополнительные небелковые группы, которые известны в данной области и легкодоступны. Предпочтительно группы, пригодные для получения производных антитела, представляют собой растворимые в воде полимеры. Неограничивающие примеры растворимых в воде полимеров включают, но не ограничиваются ими, полиэтиленгликоль (PEG), сополимеры этиленгликоль/пропиленгликоль, карбоксиметилцеллюлозу, декстран, поливиниловый спирт, поливинилпирролидон, поли-1,3-диоксолан, поли-1,3,6-триоксан, сополимер этилен/малеиновый ангидрид, полиаминокислоты (либо гомополимеры, либо случайные сополимеры) и декстран или поли(н-винилпирролидон)полиэтиленгликоль, гомополимеры полипропиленгликоля, сополимеры оксид полипропилена/оксид этилена, полиэтоксилированные полиолы (например, глицерин), поливиниловый спирт и их смеси. Пропиональдегид полиэтиленгликоля может иметь преимущества при производстве вследствие его стабильности в воде. Полимер может иметь любую молекулярную массу, и он может быть разветвленным или неразветвленным. Количество полимеров, связанных с антителом, может варьировать, и если присоединено более одного полимера, они могут представлять собой одинаковые или различные молекулы. Как правило, количество и/или тип полимеров, используемых для получения производных, можно определять, исходя из факторов, включающих, но не ограничивающихся ими, конкретные свойства или функции антитела, подлежащего улучшению, того, будет ли использовано производное антитела для терапии в определенных условиях, и т.д. Такие способы и другие пригодные составы описаны в Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th Ed., Alfonso Gennaro, Ed., Philadelphia College of Pharmacy and Science (2000).
C. Фармацевтические составы
Терапевтические составы получают для хранения смешиванием активного ингредиента, имеющего требуемую степень чистоты, с необязательными фармацевтически приемлемыми носителями, эксципиентами или стабилизаторами (Remington: The Science и Practice of Pharmacy, 20th Ed., Lippincott Williams & Wiklins, Pub., Gennaro Ed., Philadelphia, PA 2000). Приемлемые носители, эксципиенты или стабилизаторы являются нетоксичными для реципиентов в используемых дозировках и концентрациях и включают буферы, антиоксиданты, включая аскорбиновую кислоту, метионин, витамин E, метабисульфит натрия; консерванты, обеспечивающие изотоничность средства, стабилизаторы, комплексы металлов (например, комплексы Zn-белок); хелатирующие агенты, такие как EDTA и/или неионные поверхностно-активные вещества.
Когда лекарственное средство представляет собой фрагмент антитела, предпочтительным является наименьший ингибиторный фрагмент, который специфично связывается со связывающим доменом белка-мишени. Например, исходя из последовательностей вариабельной области антитела, можно сконструировать фрагменты антитела или даже пептидные молекулы, которые сохраняют способность связывать последовательность белка-мишени. Такие пептиды можно синтезировать химически и/или получать посредством технологии рекомбинантных ДНК (см., например, Marasco et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:7889-7893 [1993]).
Буферы используют для контроля pH в диапазоне, который оптимизирует терапевтическую эффективность, особенно если стабильность является зависимой от pH. Буферы предпочтительно присутствуют в концентрациях, варьирующих от приблизительно 50 мМ до приблизительно 250 мМ. Пригодные буферные средства для применения с настоящим изобретением включают как органические, так и неорганические кислоты и их соли, например цитрат, фосфат, сукцинат, тартрат, фумарат, глюконат, оксалат, лактат, ацетат. Кроме того, буферы могут содержать соли гистидина и триметиламина, такие как Tris.
Консерванты добавляют для замедления роста микроорганизмов, и они, как правило, присутствуют в диапазоне 0,2%-1,0% (масс./об.). Пригодные консерванты для применения с настоящим изобретением включают хлорид октадецилдиметилбензиламмония; хлорид гексаметэтония; галогениды бензалкония (например, хлорид, бромид, йодид), хлорид бензэтония; тимеросал, фенол, бутил или бензиловый спирт; алкилпарабены, такие как метил- или пропилпарабен; катехол; резорцинол; циклогексанол, 3-пентанол и м-крезол.
Обеспечивающие тоничность средства, иногда известные как "стабилизаторы", присутствуют для коррекции или поддержания тоничности жидкости в композиции. При применении с крупными заряженными биомолекулами, такими как белки и антитела, их часто называют "стабилизаторами", поскольку они могут взаимодействовать с заряженными группами боковых цепей аминокислот, таким образом, снижая потенциал для межмолекулярных и внутримолекулярных взаимодействий. Обеспечивающие тоничность средства могут присутствовать в любом количестве от 0,1% до 25% по массе, предпочтительно от 1 до 5%, учитывая относительные количества других ингредиентов. Предпочтительные обеспечивающие тоничность средства включают многоосновные спирты сахаров, предпочтительно трехосновные спирты сахаров или более, такие как глицерин, эритрит, арабит, ксилит, сорбит и маннит.
Дополнительные эксципиенты включают средства, которые могут служить в качестве одного или нескольких из следующих: (1) наполнители, (2) усилители растворимости, (3) стабилизаторы и (4) и средства, препятствующие денатурации или прикреплению к стенке контейнера. Такие эксципиенты включают многоатомные спирты сахаров (перечисленные выше); аминокислоты, такие как аланин, глицин, глутамин, аспарагин, гистидин, аргинин, лизин, орнитин, лейцин, 2-фенилаланин, глутаминовая кислота, треонин и т.д.; органические сахара или спирты сахаров, такие как сахароза, лактоза, лактит, трегалоза, стахиоза, манноза, сорбоза, ксилоза, рибоза, рибит, миоинозитоза, миоинозит, галактоза, галактит, глицерин, циклитолы (например, инозитол), полиэтиленгликоль; содержащие серу восстановители, такие как мочевина, глутатион, тиоктовая кислота, тиогликолят натрия, тиоглицерин, α-монотиоглицерин и тиосульфат натрия; низкомолекулярные белки, такие как сывороточный альбумин человека, бычий сывороточный альбумин, желатин или другие иммуноглобулины; гидрофильные полимеры, такие как поливинилпирролидон; моносахариды (например, ксилоза, манноза, фруктоза, глюкоза); дисахариды (например, лактоза, мальтоза, сахароза); трисахариды, такие как раффиноза; и полисахариды, такие как декстрин или декстран.
Неионные поверхностно-активные вещества или детергенты (также известные как "смачивающие вещества") присутствуют для облегчения растворения лекарственного средства, а также для защиты терапевтического белка от индуцируемой встряхиванием агрегации, и также они допускают воздействие на состав напряжения сдвига на поверхности без денатурации активного терапевтического белка или антитела. Неионные поверхностно-активные вещества присутствуют в диапазоне от приблизительно 0,05 мг/мл до приблизительно 1,0 мг/мл, предпочтительно от приблизительно 0,07 мг/мл до приблизительно 0,2 мг/мл.
Пригодные неионные поверхностно-активные вещества включают полисорбаты (20, 40, 60, 65, 80 и т.д.), полиоксамеры (184, 188 и т.д.), полиолы PLURONIC®, TRITON®, моноэфиры сорбитана полиоксиэтилена (TWEEN®-20, TWEEN®-80 и т.д.), лауромакрогол 400, стеарат полиоксила 40, полиоксиэтилен гидрогенизированное касторовое масло 10, 50 и 60, моностеарат глицерина, сложный эфир жирной кислоты и сахарозы, метилцеллюлозу и карбоксиметилцеллюлозу. Анионные детергенты, которые можно использовать, включают лаурилсульфат натрия, сульфосукцинат диоктилнатрия и сульфонат диоктилнатрия. Катионные детергенты включают хлорид бензалкония или хлорид бензэтония.
В случае составов, подлежащих введению in vivo, они должны быть стерильными. Стерильность состава можно обеспечить фильтрацией через стерильные фильтрационные мембраны. Терапевтические композиции, представленные в настоящем документе, как правило, помещают в контейнер, имеющий отверстие для стерильного доступа, например, пакет с внутривенным раствором или флакон, имеющий пробку, проницаемую иглой для подкожной инъекции.
Способ введения соответствует известным и общепринятым способам, например, посредством однократного или многократного болюсного введения или инфузии в течение длительного периода времени пригодным образом, например инъекцией или инфузией подкожным, внутривенным, внутрибрюшинным, внутримышечным, внутриартериальным, внутрираневым или внутрисуставным способами, местным введением, ингаляцией или способами замедленного высвобождения или продленного высвобождения.
Состав, представленный в настоящем документе, также может содержать более одного активного соединения при необходимости в случае конкретного показания, подвергаемого лечению, предпочтительно соединения с дополняющими видами активности, которые не оказывают отрицательного эффекта друг на друга. Альтернативно, или дополнительно, композиция может содержать цитотоксическое средство, цитокин или ингибирующее рост средство. Такие молекулы пригодным образом присутствуют в сочетании в количествах, которые эффективны для предполагаемой цели.
Активные ингредиенты также можно заключать в микрокапсулы, полученные, например, способами коацервации или межфазной полимеризации (например, микрокапсулы на основе гидроксиметилцеллюлозы или желатина и микрокапсулы на основе полиметилметакрилата, соответственно), в коллоидные системы для доставки лекарственного средства (например, липосомы, микросферы на основе альбумина, микроэмульсии, наночастицы и нанокапсулы), или в микроэмульсии. Такие способы описаны в Remington's Pharmaceutical Science 18th edition, выше.
Стабильность белков и антител, описанных в настоящем документе, можно повышать с использованием нетоксичных "растворимых в воде солей поливалентных металлов". Их примеры включают Ca2+, Mg2+, Zn2+, Fe2+, Fe3+, Cu2+, Sn2+, Sn4+, Al2+ и Al3+. Примеры анионов, которые могут образовывать растворимые в воде соли с указанными выше катионами поливалентных металлов, включают анионы, образованные из неорганических кислот и/или органических кислот. Такие растворимые в воде соли обладают растворимостью в воде (при 20°C) по меньшей мере приблизительно 20 мг/мл, альтернативно по меньшей мере приблизительно 100 мг/мл, альтернативно по меньшей мере приблизительно 200 мг/мл.
Пригодные неорганические кислоты, которые можно использовать для образования "растворимых в воде солей поливалентных металлов" включают хлороводородную, уксусную, серную, азотную, тиоциановую и фосфорную кислоту. Пригодные органические кислоты, которые можно использовать, включают алифатические карбоновые кислоты и ароматические кислоты. Алифатические кислоты, находящиеся в пределах этого определения, можно определить как насыщенные или ненасыщенные C2-9 карбоновые кислоты (например, алифатические моно-, ди- и трикарбоновые кислоты). Например, иллюстративные монокарбоновые кислоты, находящиеся в пределах этого определения, включают насыщенные C2-9 монокарбоновые кислоты: уксусную, пропионовую, масляную, валериановую, капроновую, энантовую, каприловую, пеларгоновую и каприоновую кислоты, и ненасыщенные C2-9 монокарбоновые кислоты: акриловую, пропиоловую, метакриловую, кротоновую и изокротоновую кислоты. Иллюстративные дикарбоновые кислоты включают насыщенные C2-9 дикарбоновые кислоты: малоновую, янтарную, глутаровую, адипиновую и пимелиновую, а ненасыщенные C2-9 дикарбоновые кислоты включают малеиновую, фумаровую, цитраконовую и мезаконовую кислоты. Иллюстративные трикарбоновые кислоты включают насыщенные C2-9 трикарбоновые кислоты: трикарбаллильную и 1,2,3-бутантрикарбоновую кислоту. Кроме того, карбоновые кислоты по этому определению также могут содержать одну или две гидроксильные группы с образованием гидроксикарбоновых кислот. Иллюстративные гидроксикарбоновые кислоты включают гликолевую, молочную, глицериновую, тартроновую, яблочную, виннокаменную и лимонную кислоту. Ароматические кислоты в пределах этого определения включают бензойную и салициловую кислоту.
Обычно используемые растворимые в воде соли поливалентных металлов, которые можно использовать для облегчения стабилизации инкапсулированных полипептидов по этому изобретению, включают, например: (1) соли металлов и неорганических кислот, представляющие собой галогениды (например, хлорид цинк, хлорид кальция), сульфаты, нитраты, фосфаты и тиоцианаты; (2) соли алифатических карбоновых кислот и металлов (например, ацетат кальция, ацетат цинка, пропионат кальция, гликолят цинка, лактат кальция, лактат цинка и тартрат цинка); и (3) соли ароматических карбоновых кислот и металлов, представляющие собой бензоаты (например, бензоат цинка) и салицилаты.
D. Способы лечения
Для профилактики или лечения заболевания соответствующая дозировка активного вещества будет зависеть от типа заболевания, подлежащего лечению, как определено выше, тяжести и течения заболевания, от профилактических или терапевтических целей введения молекулы, предшествующего лечения, клинического анамнеза пациента и ответа на антитело и от решения лечащего врача. Средство пригодным образом вводят пациенту за один раз или на протяжении серии введений.
Предпочтительным способом лечения является лечение опосредуемых IgE нарушений. Опосредуемые IgE нарушения включают атопические нарушения, которые характеризуются врожденной склонностью иммунологически отвечать на распространенные встречающиеся в природе ингалируемые и проглатываемые антигены и постоянной продукцией антител IgE. Конкретные атопические нарушения включают аллергическую астму, аллергический ринит, атопический дерматит и аллергическую гастроэнтеропатию. Пациенты с атопией часто имеют множественную аллергию, что означает, что они обладают антителами IgE ко множеству аллергенов окружающей среды, и симптомами от множества аллергенов окружающей среды, включая пыльцу, грибы (например, плесень), дебрис животных и насекомых и некоторые продукты питания.
Однако нарушения, связанные с повышенными уровнями IgE, не ограничиваются нарушениями с врожденной (атопической) этиологией. Другие нарушения, связанные с повышенными уровнями IgE, которые, по-видимому, являются опосредуемыми IgE и поддаются лечению составами по настоящему изобретению, включают гиперчувствительность (например, анафилактическую гиперчувствительность), экзему, крапивницу, аллергический бронхолегочный аспергиллез, паразитарные заболевания, гипер-IgE-синдром, атаксию-телеангиэктазию, синдром Вискотта-Олдрича, тимическую алимфоплазию, IgE-миелому и реакцию "трансплантат против хозяина".
Аллергический ринит, также известный как риноконъюнктивит или сенная лихорадка, является наиболее распространенным проявлением атопической реакции на ингалируемые аллергены, тяжесть и длительность которого часто коррелирует с интенсивностью и длительностью воздействия аллергена. Он представляет собой хроническое заболевание, которое впервые может возникнуть в любом возрасте, однако его начало, как правило, происходит в детском или подростковом возрасте. Типичный приступ состоит из обильной водянистой ринореи, пароксизмального чихания, обструкции носовых ходов и зуда носа и неба. Носоглоточный отток слизи также вызывает боль в горле, очистку горла и кашель. Также могут быть симптомы аллергического блефароконъюнктивита, с интенсивным зудом конъюнктивы и век, покраснением, слезоотделением и светобоязнью. Тяжелые приступы часто сопровождаются системным недомоганием, слабостью, усталостью и иногда болезненностью мышц после интенсивных периодов чихания.
Астма, также известная как обратимое обструктивное заболевание воздушных путей, характеризуется повышенной отвечаемостью трахеобронхиального дерева на респираторные раздражители и сужающие просвет бронхов химические вещества, вызывающие приступы свистящего дыхания, диспноэ, ощущения стесненности в груди и кашель, которые обратимы спонтанно или при лечении. Она представляет собой хроническое заболевание, вовлекающее воздушные пути целиком, однако его тяжесть варьирует от случайных мягких переходных эпизодов до тяжелой, хронической, опасной для жизни обструкции бронхов. Астма и атопия могут сосуществовать, однако половина астматиков также обладают атопией, и еще меньшее процентное количество пациентов с атопией также имеют астму. Однако атопия и астма не полностью независимы, поскольку астма более часто происходит у индивидов с атопией, чем у индивидов без атопии, особенно в детском возрасте. Кроме того, астма исторически была разделена на две подгруппы: экзогенная астма и наследственная астма.
Экзогенная астма, также известная как аллергическая, атопическая или иммунологическая астма, характерна для пациентов, у которых астма развивается, главным образом, на раннем периоде жизни, как правило, в младенческом или детском возрасте. Другие проявления атопии, включая экзему или аллергический ринит, часто сосуществуют. Астматические приступы могут происходить в сезоны пыльцы, в присутствии животных или при воздействии домашней пыли, перьевых подушек, или других аллергенов. Кожные тесты показывают положительные реакции в виде волдырей и покраснения на вызывающие заболевание аллергены. Интересно, что тотальные концентрации IgE в сыворотке часто повышены, однако иногда они являются нормальными.
Наследственная астма, также известная как неаллергическая или идиопатическая астма, как правило, впервые возникает во взрослом возрасте, после выраженной респираторной инфекции. Симптомы включают хроническую или рецидивирующую обструкцию бронхов, несвязанную с сезонами пыльцы или воздействием других аллергенов. Кожные тесты являются отрицательными на обычные атопические аллергены, концентрация IgE в сыворотке является нормальной. Дополнительные симптомы включают мокроту с кровью и эозинофилию. Другие схемы классификации астмы на подгруппы, такие как аспирин-чувствительная, индуцируемая физической нагрузкой, инфекционная и психологическая, определяют только внешние пусковые факторы, которые оказывают влияние на некоторых пациентов в большей степени, чем другие.
В заключение, важно отметить, что хотя некоторые классификации исторически ассоциируют аллергическую астму только с зависимостью от IgE, в настоящее время существуют убедительные статистически значимые данные, демонстрирующие корреляцию между IgE и астмой (как аллергической, так и неаллергической). Глава 27, "The Atopic Diseases", A.I. Terr in Medical Immunology, 9th Ed., Simon and Schuster, Stites et al., Ed. (1997). В результате, термин "опосредуемые IgE нарушения" для целей этой патентной заявки включает как аллергическую, так и неаллергическую астму.
Физические признаки астматического приступа включают тахипноэ, слышимое свистящие дыхание и применение вспомогательных мышц при дыхании. Также обычно имеются учащенный пульс и повышенное кровяное давление, а также повышенные уровни эозинофилов в периферической крови и носовых секретах. Легочные функции демонстрируют снижение скоростей потока воздуха и объем форсированного выдоха в течение 1 секунды (FEV1). Общая емкость легких и функциональная остаточная емкость, как правило, являются нормальными или немного повышенными, однако они могут снижаться при чрезмерном бронхоспазме.
Патология астмы может отличаться реакциями ранней фазы и поздней фазы. Ранняя фаза характеризуется сокращением гладких мышц, отеком и гиперсекрецией, а реакции поздней фазы характеризуются клеточным воспалением. Астму могут индуцировать различные неспецифические пусковые механизмы, включая инфекции (например, респираторные вирусные инфекции), физиологические факторы (например, физическая нагрузка, гипервентиляция, глубокое дыхание, психологические факторы), атмосферные факторы (например, диоксид серы, аммиак, холодный воздух, озон, пар дистиллированной воды), пищевые факторы (например, пропранолол, аспирин, нестероидные противовоспалительные лекарственные средства), экспериментальные ингалируемые средства (например, гипертонические растворы, лимонная кислота, гистамин, метахолин, простагландин F2α) и профессиональные ингалируемые вещества (например, изоцианаты). Различные профессиональные аллергены или аллергены окружающей среды, которые вызывают аллергическую астму, могут включать животные продукты, пыль насекомых, морских животных, растительные продукты, плоды, семена, листья и пыльцу, органические красители и чернила, микробные агенты, ферменты, лекарственные средства, стерилизующие агенты и неорганические и органические химические вещества.
Атопический дерматит, также известный как экзема, нейродерматит, атопическая экзема или пруриго Беснера, представляет собой распространенное хроническое кожное нарушение, характерное для подгруппы пациентов с семейными и иммунологическими признаками атопии. Основным признаком является зудящий воспалительный ответ кожи, который вызывает характерную симметрично распределенную кожную сыпь с предпочтением к определенным областям. Также часто имеется сверхпродукция IgE B-лимфоцитами. Хотя атопический дерматит классифицируют как кожную форму атопии, поскольку он ассоциирован с аллергическим ринитом и астмой и высокими уровнями IgE, тяжесть дерматита, однако, не всегда коррелирует с воздействием аллергенов при кожных тестах, и десенсибилизация (в отличие от других аллергических заболеваний) не является эффективным лечением. Хотя высокие сывороточные IgE подтверждают диагноз аллергической астмы, нормальные уровни не исключают его. Возникновение заболевания может происходить в любом возрасте, и очаги возникают остро, начинаясь с эритематозной отечной папулы или бляшки с шелушением. Зуд приводит к вытеканию содержимого и образованию корки, а затем к хронической лихенизации. На клеточном уровне острый очаг является отечным, и кожа инфильтрирована мононуклеарными клетками, CD4-лимфоцитами. Нейтрофилы, эозинофилы, плазматические клетки и базофилы являются редкими, однако имеются дегранулированные тучные клетки. Характерными для хронических очагов являются гиперплазия эпидермиса, гиперкератоз и паракератоз, и кожа инфильтрирована мононуклеарными клетками, клетками Лангерганса и тучными клетками. Также могут присутствовать очаговые области фиброза, включая вовлечение периневрия небольших нервов.
Аллергическая гастроэнтеропатия, также известная как эозинофильная гастроэнтеропатия, представляет собой необычное проявление атопии, при котором множество связанных с IgE видов пищевой чувствительности ассоциировано с локальной реакцией слизистой оболочки желудочно-кишечного тракта. Она является редкой у взрослых, но более частой, однако временной, у младенцев. Состояние возникает, когда употребленные пищевые аллергены реагируют с локальными антителами IgE в слизистой оболочке тощей кишки и происходит высвобождение медиаторов тучных клеток, что приводит к желудочно-кишечным симптомам вскоре после приема пищи. Продолжающееся воздействие приводит к хроническому воспалению, что приводит к потере белка желудочно-кишечным трактом и гипопротеинемическому отеку. Потеря крови через воспаленную слизистую оболочку кишечника может быть достаточно значительной, чтобы вызвать железодефицитную анемию. После воздействия аллергена аллергическая реакция происходит локально в слизистой оболочке верхнего отдела желудочно-кишечного тракта, однако она устраняется при устранении аллергена.
Анафилаксия и крапивница несомненно являются опосредуемыми IgE, однако они лишены генетических детерминант, и у индивидов с атопией отсутствует предрасположенность к ним. Анафилаксия представляет собой острую генерализованную аллергическую реакцию с одновременным вовлечением нескольких систем органов, как правило, сердечно-сосудистой, дыхательной, кожной и желудочно-кишечной. Реакция является иммунологически опосредуемой, и она происходит при воздействии аллергена, к которому субъект ранее был сенсибилизирован. Крапивница и ангионевротический отек относятся к физическому набуханию, эритеме и зуду, вследствие стимуляции гистамином рецепторов в поверхностных кожных кровеносных сосудах, и они являются признаком системной анафилаксии. Системная анафилаксия представляет собой возникновение опосредуемой IgE реакции одновременно во множестве органов, вследствие лекарственного средства, яда насекомых или пищи. Она возникает внезапно посредством индуцированных аллергеном тучных клеток, нагруженных IgE, что приводит к выраженному и опасному для жизни изменению функционирования различных жизненно важных органов. Сосудистый коллапс, острая обструкция дыхательных путей, расширение и отек сосудов кожи, и спазм мышц желудочно-кишечного тракта и мочеполовых путей происходят практически одновременно, хотя и не всегда в одинаковой степени.
Патология анафилаксии включает ангионевротический отек и чрезмерное растяжение легких, с закупоркой слизью дыхательных путей и очаговым ателектазом. На клеточном уровне легкие выглядят сходно с острым астматическим приступом, с гиперсекрецией подслизистых желез бронхов, отеком слизистой и подслизистой оболочек, приливом крови к перибронхиальным сосудам и эозинофилией в стенках бронхов. Могут присутствовать отек легких и кровоизлияние в легкие. Может происходить спазм мышц бронхов, перерастяжение и даже разрыв альвеол. Важные признаки анафилаксии у человека включают отек, переполнение сосудов и эозинофилию в собственной пластинке гортани, трахее, надгортанника и гортанной части глотки.
Воздействие аллергена может происходить через прием с пищей, инъекцию, ингаляцию или контакт с кожей или слизистой оболочкой. Реакция начинается в пределах нескольких секунд или минут после воздействия аллергена. Может присутствовать предварительный испуг или ощущение скорой смерти, с последующими вскоре симптомами в одной или нескольких системах органов-мишеней: сердечно-сосудистой, дыхательной, кожной или желудочно-кишечной.
Аллергены, ответственные за анафилаксию, отличаются от обычно ассоциированных с атопией. Обычными их источниками являются продукты питания, лекарственные средства, яд насекомых или латекс. Пищевые аллергены включают аллергены, имеющиеся у ракообразных, моллюсков (например, омара, креветок, крабов), рыб, в бобовых (например, орехах, горохе, бобах, лакрице), семенах (например, кунжуте, хлопковом семени, тмине, горчице, льняном семени, семени подсолнуха), орехах, ягодах, яичных желтках, гречке и молоке. Лекарственные аллергены включают аллергены, имеющиеся в гетерологичных белках и полипептидах, полисахаридах и гаптенных лекарственных средствах. Аллергены насекомых включают насекомых Hymenoptera, включая пчелу медоносную, складчатокрылую осу, шершня, осу и огненного муравья.
Хотя адреналин является типичным средством лечения анафилаксии, как правило, при менее тяжелой реакции в виде крапивницы или ангиневротического отека назначают антигистамины или другие блокаторы гистамина.
E. Комбинированная терапия
Способ по изобретению можно комбинировать с известными способами лечения опосредуемого IgE нарушения, либо в качестве комбинированных или дополнительных стадий лечения, либо в качестве дополнительных компонентов терапевтического состава.
Например, антигистамины, особенно антигистамины без седативного действия, можно вводить заранее, перед или одновременно с антителами против IgE по изобретению. Пригодные антигистамины включают антигистамины, представляющие собой алкиламин (например, хлорфенирамин), этаноламин (например, дифенгидрамин) и фенотиазин (например, прометазин). Хотя многие антигистамины являются антагонистами фармакологических эффектов гистамина посредством блокирования участков его рецепторов на эффекторных клетках, другие распространенные антигистаминовые лекарственные средства действуют посредством блокирования высвобождения гистамина из тучных клеток, которые сенсибилизированы и "вооружены" аллергенспецифичными IgE (например, кромолин натрий). Примеры антигистаминов включают астемизол, азатидина малеат, брофенирамина малеат, карбиноксамина малеат, цетиразина гидрохлорид, клемастина фумарат, ципрогептадина гидрохлорид, дексбромфенирамина малеат, дексхлорфенирамина малеат, дименгидринат, дифенгидрамина гидрохлорид, доксиламина сукцинат, фексофендадина гидрохлорид, терфенадина гидрохлорид, гидроксизина гидрохлорид, лоратидин, меклизина гидрохлорид, трипеланнамина цитрат, трипеленнамина гидрохлорид, трипролидина гидрохлорид.
Конкретные симптомы опосредуемых IgE нарушений (например, реакции ранней фазы) можно смягчать симпатомиметиками или лекарственными средствами, обладающими бронхорасширяющим эффектом. Адреналин представляет собой альфа и бета-адренергетик широкого спектра действия, часто вводимый подкожно в дозе 0,2-0,5 мл в виде водного раствора 1:100. Когда желательным является более длительный эффект, часто используют форму адреналина более длительного действия (т.е. тербуталин) в суспензии 1:200. Пригодные дополнительные бета-адренэргетики включают альбутерол, пиребутерол, метапротеренол, сальметерол, изоэтарин и форметерол для назального введения (например, посредством карманного устройства для распыления, импульсного устройства для вдыхания при положительном давлении или дозируемых ингаляторов под давлением) или перорально.
Расширения бронхов также достигают посредством введения ксантинов, особенно когда их вводят в сочетании с указанными выше симпатомиметическими лекарственными средствами. Примеры ксантинов включают аминофиллин (внутривенно 250-500 мг) и теофиллин (перорально, концентрация в сыворотке 10-20 мкг/мл).
Другие симптомы различных опосредуемых IgE нарушений (например, реакций поздней фазы) можно смягчать посредством введения глюкокортикоидов или других лекарственных средств, обладающих противовоспалительными эффектами. Преднизон (30-60 мг в сутки) вводят системно в случае тяжелых приступов, а беклометазона дипропионат, триамцинолона ацетонид и флунизолид вводят в форме аэрозоля в качестве длительной поддерживающей терапии. Дополнительные кортикостероиды, которые обладают противовоспалительными эффектами, включают бетаметазон, будезонид, дексаметазон, флудроацетат кортизона, флунизолид, флуказона пропионат, гидрокортизон, метилпреднизолон, преднизолон, преднизон, триамцинолон.
Нестероидные противовоспалительные лекарственные средства, которые также можно применять в сочетании со способами лечения по изобретению, включают ацетаминофен, аспирин, бромфенак натрий, диклофенак натрий, дифлунизал, этодолак, фенопрофен кальций, флурбипрофен, ибупрофен, индометацин, кетопрофен, меклофенамат натрий, мефенаминовая кислота, набуметон, напроксен, напроксен натрий, оксифенбутазон, фенилбутазон, пироксикам, сулиндак, толметин натрий.
Кроме того, максимальный терапевтический эффект также может быть достигнут при введении противоотечных средств (например, фенилэфрина, фенилпропаноламина, псевдоэфедрина), средств от кашля (например, декстрометорфана, кодеина или гидрокодона) или аналгетика (например, ацетаминофена, аспирина).
Десенсибилизация аллергеном представляет собой форму лечения, при которой аллергены инъецируют пациенту для снижения или устранения аллергического ответа. Также в качестве иммунотерапии аллергеном известны гипосенсибилизация или инъекционная терапия аллергии. Ее часто используют в сочетании с другими способами лечения аллергии, но не часто в качестве основного лечения. Ее успешно использовали, когда возможно устранение аллергена. Типичное лечение десенсибилизацией аллергеном включает подкожную инъекцию стерильного аллергена в возрастающих дозах один или два раза в неделю до достижения дозы, которая вызывает временную небольшую локальную область воспаления в области инъекции. Затем дозу вводят по поддерживающей схеме один раз каждые 2-4 недели. Аллергическую десенсибилизацию наиболее часто применяют при лечении аллергической астмы и аллергического ринита, хотя она имела успех и при лечении анафилаксии. Также десенсибилизацию эффективно использовали применением адъювантов, таких как неполный адъювант Фрейнда, который представляет собой эмульсию водного раствора антигена в минеральном масле. Физиологический эффект создает нерастворимое липидное депо, из которого постепенно высвобождаются капли аллергена. Другой формой десенсибилизации аллергеном является полимеризация мономерных аллергенов глутаральдегидом с получением молекулы с относительно низкой аллергенностью (т.е. она вызывает аллергический ответ), при сохранении эффективной степени иммуногенности.
F. Фармацевтические дозировки
Дозировки и требуемая концентрация лекарственного средства в фармацевтических композициях по настоящему изобретению могут варьировать, в зависимости от конкретного предусмотренного применения. Определение соответствующей дозировки или способа введения находятся в пределах квалификации специалиста в данной области. Эксперименты на животных обеспечивают надежное руководство для определения эффективных доз для терапии у человека. Межвидовое масштабирование эффективных доз можно проводить в соответствии с принципами, установленными Mordenti, J. and Chappell, W. "The Use of Interspecies Scaling in Toxicokinetics", In Toxicokinetics and New Drug Development, Yacobi et al., Eds, Pergamon Press, New York 1989, pp.42-46.
Когда используют введение in vivo полипептидов или антител, описанных в настоящем документе, нормальные величины дозировок могут варьировать от приблизительно 10 нг/кг до приблизительно 100 мг/кг массы тела млекопитающего или более в сутки, предпочтительно от приблизительно 1 мг/кг/сутки до 10 мг/кг/сутки, в зависимости от способа введения. Руководство по конкретным дозировкам и способам доставки предоставлено в литературе; см., например, патенты США №№ 4657760, 5206344 или 5225212. К объему изобретения относится, что различные составы будут эффективными для различных способов лечения и при различных нарушениях и что введение, предназначенное для лечения конкретного органа или ткани, может требовать доставки способом, отличным от способа для другого органа или ткани. Более того, дозировки можно вводить посредством одного или нескольких отдельных введений или посредством непрерывной инфузии. Для многократного введения в течение нескольких суток или более, в зависимости от состояния, лечение продолжают до тех пор, пока не произойдет желательное подавление симптомов заболевания. Однако могут быть пригодными другие схемы дозирования. Мониторинг хода этой терапии легко проводить общепринятыми способами и анализами.
G. Введение состава
Составы настоящему изобретению, включая, но не ограничиваясь ими, восстанавливаемые составы, вводят млекопитающему, нуждающемуся в лечении белком, предпочтительно человеку, согласно известным способам, таким как внутривенное введение, например, в качестве болюсной инъекции или посредством непрерывной инфузии в течение периода времени, посредством внутримышечного, внутрибрюшинного, интрацереброспинального, подкожного, внутрисуставного введения, введения внутрь синовиальной оболочки, интратекального, перорального, местного или ингаляционного способов.
В предпочтительных вариантах осуществления составы вводят млекопитающему посредством подкожного (т.е. под кожу) введения. Для таких целей состав можно инъецировать с использованием шприца. Однако доступны другие устройства для введения состава, такие как устройства для инъекции (например, устройства INJECT-EASETM и GENJECT™), шприцы-ручки (такие как GENPENTM), автоматические инъекционные устройства, безыгольные устройства (например, MEDIJECTORTM и BIOJECTORTM) и системы для доставки в виде подкожных пластырей.
В конкретном варианте осуществления настоящее изобретение относится к наборам для введения однократной дозы. Такие наборы содержат контейнер с водным составом терапевтического белка или антитела, включая как однокамерные, так и многокамерные предварительно заполненные шприцы. Иллюстративные предварительно заполненные шприцы доступны от Vetter GmbH, Ravensburg, Germany.
Соответствующая дозировка ("терапевтически эффективное количество") белка будет зависеть, например, от типа состояния, подлежащего лечению, тяжести и течения состояния, от профилактических или терапевтических целей введения белка, предшествующего лечения, клинического анамнеза пациента и ответа на белок, от типа применяемого белка и от решения лечащего врача. Белок пригодным образом вводят пациенту за один раз или на протяжении серии введений, и его можно вводить пациенту в любое время после постановки диагноза. Белок можно вводить в качестве единственной терапии или вместе с другими лекарственными средствами или способами терапии, пригодными для лечения представляющего интерес состояния.
Когда выбранный белок представляет собой антитело, от приблизительно 0,1-20 мг/кг является исходной предполагаемой дозировкой для введения пациенту, например, посредством либо одного, либо большего количества отдельных введений. Однако могут быть пригодны другие схемы дозирования. Мониторинг хода этого лечения легко проводить общепринятыми способами.
Применение состава против IgE (например, rhuMAbE-25, rhMAbE-26, Hu-901) включает лечение или профилактику опосредуемых IgE аллергических заболеваний, паразитарных инфекций, интерстициального цистита и астмы, например. В зависимости от заболевания или нарушения, подлежащего лечению, пациенту вводят терапевтически эффективное количество (например, приблизительно 1-15 мг/кг) антитела против IgE.
H. Изделия
В другом варианте осуществления изобретения предусмотрено изделие, которое содержит состав и в котором предпочтительно предоставлены инструкции по его применению. Изделие содержит контейнер. Пригодные контейнеры включают, например, бутыли, флаконы (например, двухкамерные флаконы), шприцы (такие как однокамерные и двухкамерные шприцы) и пробирки для анализа. Контейнеры могут быть изготовлены из множества материалов, таких как стекло или пластмасса. Контейнер содержит состав. На этикетке на контейнере, или прилагаемой к нему, представлено руководство по восстановлению и/или применению. Кроме того, на ярлыке может быть указано, что состав пригоден или предназначен для подкожного введения. Контейнер, содержащий состав, может представлять собой флакон для многократного применения, который позволяет повторные введения (например, 2-6 введений) восстановленного состава. Кроме того, изделие может содержать второй контейнер, содержащий пригодный разбавитель (например, BWFI). При смешении разбавителя и лиофилизированного состава конечная концентрация белка в восстановленном составе будет, как правило, составлять по меньшей мере 50 мг/мл. Кроме того, изделие может включать другие материалы, желательные с коммерческой и пользовательской точки зрения, включая другие буферы, разбавители, фильтры, иглы, шприцы и вкладыши в упаковку с инструкциями по применению.
Изобретение будет более понятным с помощью представленных ниже примеров. Однако их не следует истолковывать, как ограничивающие объем изобретения. Все цитаты на протяжении описания включены в настоящий документ в качестве ссылок в полном объеме.
В другом варианте осуществления изобретение относится к изделию, содержащему составы, описанные для введения в автоматическом впрыскивателе. Автоматический впрыскиватель можно описать как устройство для инъекции, которое при активации будет доставлять его содержимое без дополнительного необходимого действия пациента или вводящего лица. Они, в частности, пригодны для самостоятельного введения терапевтических составов, когда скорость доставки должна быть постоянной и время доставки превышает несколько моментов времени.
ПРИМЕР 1
Выделение IgE приматов
IgE человека клонировали из миеломной клеточной линии с IgE человека U266 (ATCC, Manassas, VA, TIB #196). Последовательности IgE макака-резус и яванского макака определяли клонированием и секвенированием IgE из кДНК, полученной из мононуклеарных клеток периферической крови макака-резус и яванского макака, которые были стимулированы с получением клеток (PBMC) с переключенными IgE. Прямые и обратные праймеры (представленные ниже) конструировали на основе последовательностей IgE человека. Вышерасположенный прямой праймер конструировали непосредственно выше CH2-домена. Обратный праймер конструировали на конце трансмембранного домена. PBMC макака-резус и яванского макака получали из California National Primate Research Center (Davis, CA). 5×106 PBMC культивировали с IL-4 (100 нг/мл) и CD40L (3 мкг/мл) (R&D Systems, Minneapolis, MN, #204-IL и #617-CL. соответственно) в течение 4 суток. Затем клетки собирали, получали РНК (RNeasy Mini Kit, #74106, Qiagen, Valencia, CA) и получали кДНК с использованием набора BD Sprint Powerscript oligo dT priming kit (BD Biosciences, San Jose, CA, #639558). Затем проводили ОТ-ПЦР [94°C в течение 2 минут; 94°C в течение 15 секунд; 60°C в течение 30 секунд; 68°C в течение 2 минут; 30 циклов; 68°C в течение 10 минут]. После указанных циклов добавляли Taq-полимеразу (10 минут при 72°С) для добавления выступающих концов A для клонирования TA (Invitrogen, Carlsbad, CA, #45-0641). Продукты ПЦР клонировали посредством TOPO-TA cloning, а затем подтверждали последовательности клонов (Genentech, Inc.). Последовательности человека, макака-резус и яванского макака выравнивали с использованием программ для анализа собственной разработки (Genentech, Inc.). Представленные ниже гомологии приведены для последовательностей между CH2-доменами и трансмембранными доменами. Между последовательностями макака-резус (432 аминокислоты) и яванского макака (431 аминокислота) было 6 отличий, и они были приблизительно на 98,6% гомологичными. Между последовательностями человека и макака-резус было 53 отличия, соответствующих 87,7% гомологии. Между последовательностями человека и яванского макака было 56 отличий, соответствующих 87% гомологии (см. фиг.1).
Праймеры, используемые для клонирования:
Прямые праймеры выше последовательности CH2:
5'-ccgcccaccgtgaagatcttacagtc (SEQ ID NO:63)
Обратный праймер на конце трансмембранного домена:
5'-cggctcgagactaggcgtggggctggaggacgttg (SEQ ID NO:64)
ПРИМЕР 2
Выделение Ab против IgE/М1'
Получение слитого белка CH3-CH4-M1/Fc
Слитый белок CH3-CH4-M1' IgE/Fc человека получали амплификацией посредством ПЦР доменов CH3-CH4-M1' IgE человека плюс дополнительные 15 аминокислот непосредственно ниже М1'-домена из кДНК, полученной из клеток U266 (ATTC Manassas, VA, TIB#196). Получали РНК из клеток U266 (RNeasy Mini Kit, #74106, Qiagen, Valencia, CA), и кДНК получали с использованием BD Sprint Powerscript oligo dT priming (BD Biosciences, San Jose, CA, #639558). Проводили ОТ-ПЦР, и продукт ПЦР клонировали посредством TOPO-TA cloning (Invitrogen, Carlsbad, CA, #45-0641). Для экспрессии в клетках млекопитающих добавляли N-концевую сигнальную последовательность с помощью мутагенеза посредством ПЦР, и сигнальную последовательность+CH3+CH4+М1'+15 аминокислот клонировали в экспрессирующий вектор (pRK huIgG1 Fc; Genentech) с получением конструкции, слитой на C-конце с Fc-областью IgG1 человека. Последовательность конечного белка, включая сигнальную последовательность и Fc IgG1 человека, является следующей:
Белок получали временной трансфекцией клеток CHO (Genentech), и белок очищали из клеточного культурального супернатанта с использованием стандартных способов колоночной хроматографии на белке A-сефарозе.
Иммунизация и получение гибридом
Панель панспецифичных антител, которые селективно связывают М1'-часть IgE-М1' человека, получали с использованием белка CH3-CH4-M1'/Fc. В каждую подушечку задней лапы мыши BALB/c инъецировали 1 мкг CH3-CH4-M1'/Fc, ресуспендированного в адъюванте из монофосфорил-липида A и дикориномиколата трегалозы (MPLTM+TDM) (Corixa, Hamilton, MT), с интервалами от 3 до 4 суток. Сыворотку отбирали после 8 вспомогательных инъекций и титровали посредством твердофазного иммуноферментного анализа (ELISA) и активированной флуоресценцией сортировки клеток и проточной цитометрии (скрининг FACS, см. следующий раздел) для того, чтобы убедиться, что мышь имеет высокий иммунный ответ на CH3-CH4-М1'/Fc. Через трое суток после последней вспомогательной инъекции клетки подколенного узла подвергали слиянию с клеточной линией миеломы мыши P3X63Ag.U.1 (см., например, Chuntharapai et al., 1997, Methods Enzymol. 288:15-27). Селекцию слитых гибридомных клеток относительно неслитых клеток подколенного узла или миеломных клеток проводили с использованием селекции посредством гипоксантина-аминоптерина-тимидина (HAT) в Medium D из набора для селекции гибридом ClonaCell® (StemCell Technologies, Inc., Vancouver, BC, Canada), с получением в совокупности 4224 клонов.
Скрининг панспецифичных антител против М1' человека
Клоны гибридомы, полученные, как описано ранее, подвергали скринингу в отношении продукции моноклональных антител, связывающихся с М1'-участком белка CH3-CH4-M1'/Fc, М1'-участком IgE-М1' человека, экспрессированным на поверхности клеточной линии B-клеточной лимфомы мыши A20 (IgE-M1'/A20), и М1'-участком IgE-М1' человека, стабильно экспрессированным на поверхности клеточной линии B-клеточной лимфомы человека BJAB (IgE-M1'/BJAB). Отрицательные контроли включали CD-4/Fc человека, IgE человека, стабильно экспрессированный на поверхности клеточной линии B-клеточной лимфомы мыши A20 (IgE/A20), клеточную линию B-клеточной лимфомы мыши A20 (A20), IgE человека, стабильно экспрессированный на поверхности клеточной линии B-клеточной лимфомы человека BJAB (IgE/BJAB), и клеточную линию B-клеточной лимфомы человека (BJAB).
Скрининг ELISA
Для скрининга 4224 клонов проводили твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA), главным образом, как описано в Baker et al., 2002, Trends Biotechnol, 20:149-156. Анализы проводили как в 384-, так и в 96-луночных планшетах. В кратком изложении, на 384-(или 96-)луночные планшеты наносили 50 мкл антител козы против Fc IgG человека (MP Biomedicals, Irvine, CA) в концентрации 2 мкг/мл в буфере для нанесения (0,05M карбонатный буфер, pH 9,6), накрывали и хранили в течение ночи при 4°C. После удаления раствора для нанесения, в каждую лунку добавляли 80 мкл (или 200 мкл для 96-луночного планшета) раствора для анализа/блокирующего раствора, содержащего 0,5% бычий сывороточный альбумин и 0,05% Tween®-20 в PBS (pH 7,4) (разбавитель ELISA), и планшеты инкубировали при комнатной температуре в течение одного часа при встряхивании. Затем лунки промывали три раза 100 мкл (или 300 мкл для 96-луночного планшета) 0,05% Tween®-20 в PBS (буфер для промывания).
После стадии промывания в каждую лунку добавляли 50 мкл (или 100 мкл для 96-луночного планшета) раствора антигена, содержащего 0,4 мкг/мл CH3-CH4-M1'/Fc или CD-4/Fc человека в разбавителе ELISA, и планшеты инкубировали при комнатной температуре в течение одного часа при встряхивании. Лунки промывали три раза буфером для промывания, как указано выше. Добавляли супернатант от отдельных гибридомных клонов, так чтобы в одной лунке с CH3-CH4-M1'/Fc и одной лунке с CD-4/Fc человека находилось 50 мкл (или 100 мкл для 96-луночного планшета) супернатанта от единичного клона гибридомы. Планшеты инкубировали при комнатной температуре в течение одного часа при встряхивании, и лунки промывали три раза буфером для промывания, как указано выше.
После промывания в каждую лунку добавляли 50 мкл (или 100 мкл для 96-луночного планшета) разведения 1:1000 антител овцы против IgG мыши, связанных с пероксидазой хрена (без перекрестной реактивности с IgG человека (MP Biomedicals)), в разбавителе для ELISA. Планшеты инкубировали при комнатной температуре в течение одного часа при встряхивании, промывали три раза буфером для промывания, как указано выше, и сушили с помощью ударов. Лунки проявляли добавлением 50 мкл (или 100 мкл для 96-луночного планшета) субстрата пероксидазы для микролунок - тетраметилбензидина (TMB) (BioFX Laboratories, Owing Mills, MD, каталожный #TMBW-0100-01) в каждую лунку и инкубацией при комнатной температуре в течение 5-10 минут или до тех пор, пока не наблюдалось существенное изменение цвета. Проявление останавливали добавлением в каждую лунку 50 мкл (или 100 мкл для 96-луночного планшета) TMB Stop Solution (BioFX Laboratories каталожный #BSTP-0100-01). Планшеты анализировали с помощью устройства для считывания планшетов Sunrise (Tecan US, Inc., Research Triangle Park, NC) при 650 нм.
В качестве контролей использовали предварительную сыворотку и полисыворотку. Образцы предварительной крови содержали сыворотку мыши перед иммунизацией, и образцы полисыворотки содержали антисыворотку мыши, полученную после 10 иммунизаций.
Скрининг FACS
Для скрининга 3221 клонов, полученных в примере 1, проводили активированную флуоресценцией сортировку клеток (FACS) с использованием клеточных линий IgE-M1'/A20 и IgE-M1'/BJAB. Клеточные линии IgE/A20, IgE/BJAB, A20 и BJAB служили в качестве отрицательных контролей. Клетки ресуспендировали и центрифугировали при 500g в течение 5 минут при 4°C. Среду аспирировали, и клетки ресуспендировали в буфере FACSFlow (BD Biosciences, San Jose, CA) при 4°C с 1% эмбриональной телячьей сывороткой (буфер для окрашивания клеток). Клетки центрифугировали, как указано выше, среду аспирировали, и клетки ресуспендировали в количестве 2×106 клеток/мл буфера для окрашивания клеток при 4°C. Клетки добавляли в 96-луночные планшеты с круглым дном в количестве 50 мкл/лунка (1x105 клеток/лунка), и в каждую лунку добавляли 100 мкл супернатанта от отдельных гибридомных клонов, так чтобы супернатант каждой гибридомы инкубировали в одной лунке, содержащей каждую клеточную линию. Планшет инкубировали на льду в течение 30 минут. Планшет центрифугировали при 500g в течение 5 минут при 4°C, и супернатанты аспирировали. Каждую лунку ресуспендировали в 200 мкл буфера для окрашивания клеток при 4°C, и планшеты центрифугировали, как указано выше. Буфер для окрашивания клеток аспирировали.
После стадии промывания клетки в каждой лунке ресуспендировали в 100 мкл антител козы против Fc IgG мыши, связанных с R-фикоэритрином (Jackson Immunoresearch, West Grove, PA), в разведении 1:1000 в буфере для окрашивания клеток при 4°C, и планшеты инкубировали в темноте на льду в течение 30 минут. Планшет центрифугировали при 500g в течение 5 минут при 4°C, и супернатанты аспирировали. Каждую лунку ресуспендировали в 200 мкл буфера для окрашивания клеток при 4°C, и планшеты центрифугировали, как указано выше. Буфер для окрашивания клеток аспирировали. Клетки в каждой лунке ресуспендировали в 200 мкл буфера для окрашивания клеток при 4°C и переносили в 1,2-мл микропробирки для титрования (Quality Scientific Plastics, Petaluma, CA). FACS проводили на FACScan или FACSCalibur (BD Biosciences).
N-концевое секвенирование/выделение РНК/секвенирование и клонирование
Антитела очищали от супернатанта гибридом с антителами против IgE/М1' и анализировали N-концевым секвенированием для определения клональности в фосфатно-солевом буфере. Каждое антитело выделяли на Precast 4-20% Tris HCl SDS-PAGE (Invitrogen, Carlsbad, CA) в восстанавливающих условиях. Каждую из разделенных тяжелой цепи (HC) и легкой цепи (LC) подвергали N-концевому секвенированию с использованием N-концевого секвенатора Procise 494 (Applied Biosystems, Foster City, CA) с использованием 20-мин цикла, как описано в Henzel et al. Analytical Biochemistry 267, 148-160 (1999). Первые 25 остатков секвенировали для установления моноклональности. Когда цепи HC или LC Ab блокировали пироглутамильной группой, которая делает N-концевую аминокислоту недоступной для секвенирования способом Эдмана, перед секвенированием проводили удаление блокирующей группы. Пироглутамильную группу удаляли ферментом пироглутаматаминопептидазой (PGAP, Sigma, St Louis, MO) с использованием протокола, описанного Pham et al. Elctrophoresis 2005, 26 4243-4251.
Определили, что последовательности М1' тяжелой цепи (HC) и легкой цепи (LC) антител 7A6, 1C11, 47H4, 26A11, 45Cl и 28E9 являлись следующими:
Для определения полноразмерных последовательностей конструировали 5'-вырожденные праймеры из N-концевых аминокислотных последовательностей и известных сегментов генов Ig, и проводили ПЦР с вырожденными нижележащими консервативными последовательностями тяжелой и легкой цепи.
Прямые праймеры
Обратные праймеры
Праймер для тяжелой цепи (HCR) 5'-ctggacagggatccagagttccaggtcactgtcactggctcaggg (SEQ ID NO:90)
Праймер для легкой цепи (LCR) 5'-ctgtaggtgctgtctttgctgtcctgatcagtccaactg (SEQ ID NO:91)
РНК собирали из гибридом с антителами против IgE/М1' (RNeasy Mini Kit, #74106, Qiagen, Valencia, CA) и получали кДНК с использованием набора BD Sprint Powerscript oligo dT priming kit (BD Biosciences, San Jose, CA, #639558). Проводили ПЦР с использованием указанных выше праймеров, и продукты ПЦР клонировали с использованием набора TOPO-TA (Invitrogen, Carlsbad, CA, #45-0641). ПЦР проводили с использованием Platinum Pfx High Fidelity Polymerase (Invitrogen, Carlsbad, CA, #11708-039) с условиями для ПЦР [94°C в течение 2 минут; 94°C в течение 15 секунд; 60°C в течение 30 секунд; 68°C в течение 2 минут; 30 циклов; 68°С в течение 10 минут]. Клоны подвергали скринингу в отношении вставок, и множество клонов секвенировали (Genentech, Inc.) для подтверждения исходной последовательности гена тяжелой цепи и легкой цепи антитела против IgE/М1'.
Вариабельные домены антитела против M1' субклонировали в экспрессирующие векторы с различными Fc-участками с получением химерных антител с Fc различных видов и/или изотипов. Конструировали праймеры для клонирования вариабельного домена (CDR + каркасная область) в Fc-участки IgG2a мыши, IgG2a-DANA мыши, и IgG1 человека.
Конструировали праймеры для включения участков рестрикции в последовательность тяжелой и легкой цепи. Тяжелые цепи клонировали с использованием BsiWI и ApaI. Легкие цепи клонировали с использованием EcoRV и KpnI. Затем новые продукты ПЦР расщепляли и лигировали в экспрессирующие векторы mIgG2a (LPG10), mIgG2a-DANA (pErk-E27DANA) или huIgG1 для тяжелой цепи, или mKappa (LPG2) или huKappa (Genentech, Inc.). Подтверждали последовательность конечных клонов (Genentech, Inc.).
3'-праймеры и сочетания прямых и обратных праймеров для клонирования вариабельных последовательностей CDR являются следующими:
Обратные праймеры
Сочетания праймеров:
Легкая цепь 47H4 имела внутренний участок KpnI, который исключал прямое клонирование в экспрессирующие векторы mKappa и huKappa. Во внутренний участок KpnI вносили мутацию с использованием набора Quick Change XL Site Directed Mutagenesis Kit (Stratagene, Cedar Creek, Texas, #200517-5) [95°C в течение 1 минуты; 95°C в течение 50 секунд; 60°C в течение 50 секунд; 68°C в течение 4,5 минут; 68°C в течение 7 минут]. Праймеры конструировали в соответствии с требованиями набора для мутации одного нуклеотида в участке KpnI, которая не изменяла аминокислотную последовательность. TAC подвергали мутации в TAT, который сохранял тирозин (Y) в этом положении. Последовательности конечных клонов подтверждали (Genentech, Inc.).
Праймеры, используемые для мутагенеза, представляли собой:
ПРИМЕР 2A
Гуманизация антител против IgE/М1'
В этом примере описана гуманизация мышиных антител 26A11, 7A6 и 47H4 против IgE/М1'.
Материалы и способы
Домен М1' ассоциированного с мембраной IgE человека экспрессировали в качестве слитой с Fc конструкции в клетках CHO и очищали общепринятыми способами. Гибридомы, экспрессирующие антитела 26A11, 7A6 и 47H4, получали посредством иммунизации мышей рекомбинантным слитым белком М1'-Fc и идентифицировали посредством ELISA с использованием планшетов, покрытых М1'-Fc. Функциональные антитела идентифицировали по их способности связываться с экспрессирующими М1' клетками и запускать апоптоз.
Клонирование вариабельных доменов 26A11, 7A6 и 47H4 мыши
Тотальную РНК экстрагировали из гибридомных клеток, продуцирующих 26A11, 7A6 или 47H4, с использованием стандартных способов. Вариабельные домены легкой цепи (VL) и тяжелой цепи (VH) амплифицировали с использованием ОТ-ПЦР с вырожденными праймерами для тяжелой и легкой цепей. Прямые праймеры были специфичны к N-концевой аминокислотной последовательности VL- и VH-участков. Соответственно, обратные праймеры для LC и HC конструировали, чтобы они гибридизовывались с участком в константном домене легкой цепи (CL) и константном домене 1 тяжелой цепи (CH1), которые являются высококонсервативными между видами. Полинуклеотидную последовательность вставок определяли с использованием общепринятых способов секвенирования. Аминокислотные последовательности VL и VH 26A11, 7A6 и 47H4 представлены на фиг.6A и 6D, 6B и 6E, и 6C и 6F, соответственно.
Прямое пересаживание гипервариабельных областей в акцепторную консенсусную каркасную область человека
Фагмида, используемая для этой работы, представляет собой одновалентный вектор Fab-g3 для дисплея и состоит из 2 открытых рамок считывания под контролем одного промотора phoA. Первая открытая рамка считывания состоит из сигнальной последовательности stII, слитой с доменами VL и CH1 акцепторной легкой цепи, а вторая состоит из сигнальной последовательности stII, слитой с доменами VH и CH1 акцепторной тяжелой цепи, с последующим вспомогательным белком оболочки фага P3.
VL- и VH-домены из антител 26A11, 7A6 или 47H4 мыши (mu26A11, mu7A6 или mu47H4) выравнивали с консенсусными последовательностями VL каппа I человека (huKI) и VH подгруппы III человека (huIII). Для получения пересаженных CDR, гипервариабельные области из mu26A11, mu7A6 или mu47H4 пересаживали в консенсусные акцепторные каркасные области huKI и huIII с получением прямого пересаженного CDR (26A11.v1, 7A6.v1 или 47H4.v1) (Фиг.6A-6F). В VL-домене пересадке подвергали следующие участки в консенсусный акцептор человека: положения 24-34 (L1), 50-56 (L2) и 89-97 (L3). В VH-домене пересадке подвергали положения 26-35 (H1), 49-65 (H2) и 94-102 (H3). MacCallum et al. [MacCallum et al. J. Mol. Biol. 262:732-745 (1996)] анализировали кристаллические структуры комплексов антитела и антигена и выявили, что положение 49 и 94 тяжелой цепи является частью области контакта, таким образом, по-видимому, является обоснованным включение этих положений в определение CDR-H2 и CDR-H3 при гуманизации антител.
Гуманизированные антитела 26A11.v1, 7A6.v1 и 47H4.v1 против IgE/М1' получали в качестве антител IgG посредством мутагенеза Kunkel экспрессирующих векторов LC и HC с использованием отдельных олигонуклеотидов для каждой гипервариабельной области. Также с использованием мутагенеза Kunkel проводили аминокислотные замены для повышения стабильности. Kunkel et al., J. Biol. Chem. 263(29):14784-14789 (1988). Правильные клоны идентифицировали секвенированием ДНК.
Продукция IgG
Для целей скрининга исходно получали варианты IgG в клетках 293. Векторы, кодирующие VL и VH (25 мкг), трансфицировали в клетки 293 с использованием системы FuGene. 500 мкл FuGene смешивали с 4,5 мл среды DMEM, не содержащей FBS, и инкубировали при комнатной температуре в течение 5 мин. К этой смеси добавляли каждую цепь (25 мкг) и инкубировали при комнатной температуре в течение 20 мин, а затем переносили в пять флаконов T-150 для трансфекции в течение при 37°C в 5% CO2. На следующие сутки среду, содержащую смесь для трансфекции, удаляли и заменяли 23 мл среды PS04 с 0,1 мл/л микроэлементов (A0934) и 10 мг/л инсулина (A0940). Клетки инкубировали в течение дополнительных 5 суток, после чего среду собирали при 1000 об/мин в течение 5 мин и подвергали стерильной фильтрации с использованием 0,22-мкм фильтра с низким связыванием белка. Образцы можно хранить при 4°C после добавления 2,5 мл 0,1% PMSF на каждые 125 мл среды.
Определение аффинности
Определение аффинности проводили с помощью анализа Скэтчарда, ELISA со связыванием клеток и поверхностного плазмонного резонанса с использованием BIAcoreTM-2000 или A100.
Анализ Скэтчарда - клетки Daudi человека, клетки IgE/М1' макака-резус и яванского макака получали для связывания в холодном буфере для связывания, состоящем из основной среды с 10 мМ HEPES pH 7,4, и 2% FBS, а также 40 мкг/мл IgG человека. Клетки разбавляли до концентрации 1,7×106 клеток/мл и держали на льду до их включения в анализ. Белки/антитела йодировали способом с йодогеном. Получали различные концентрации холодного белка в трех экземплярах с использованием разведения 1:2, начиная с насыщающей концентрации и заканчивая концентрацией, равной нулю, всего с 14 концентрациями. Ко всем разведениям добавляли горячий белок в одной концентрации для конкуренции с холодным белком. В конце к смеси горячего и холодного белков добавляли клетки, использовали 250000 клеток на образец. Анализируемую смесь держали при 4°C в течение 4 часов, при встряхивании. Затем каждый образец собирали и фильтрули на мембране, промывали по меньшей мере 3 раза буфером для связывания, позволяли высохнуть, а затем подсчитывали в течение 1 минуты с использованием автоматического гамма-счетчика Perkin Elmer Wizard 1470 Auto Gamma Counter.
Конкурентный электрохемилюминесцентный анализ связывания клеток
Относительную аффинность связывания гуманизированных вариантов определяли с использованием конкурентного электрохемилюминесцентного анализа связывания клеток. Трансфицированные клетки BJAB, экспрессирующие IgE-М1' (BJAB-IgE/М1')(длинный), или контрольные трансфицированные клетки, не экспрессирующие М1' (BJAB-IgE) (короткий), промывали фосфатно-солевым буфером (PBS) и высевали в количестве 25000 клеток/лунка в 25 мкл PBS на 96-луночные планшеты MULTI-ARRAY High Bind (Meso Scale Discovery). Клетки инкубировали на планшетах в течение одного часа при комнатной температуре для обеспечения прикрепления клеток к лункам. Для блокирования неспецифичного связывания в каждую лунку добавляли 25 мкл 30% FBS в PBS. Затем планшеты инкубировали при комнатной температуре в течение 30 минут при мягком встряхивании. Блокирующий раствор удаляли и добавляли серийные разведения гуманизированных вариантов (0,022-1333 нМ), дополненных фиксированным количеством биотинилированного антитела против М1' IgE (33,3 нМ 26A11 или 47H4) в 25 мкл PBS, содержащего 2% FBS (буфер для анализа). После инкубации в течение одного часа при комнатной температуре при мягком встряхивании планшеты промывали три раза PBS (300 мкл/лунка) с использованием устройства для промывания микропланшетов (ELx405 Select, Bio-Tek Instruments, Inc., Winooski, VT). Также детекцию связанных антител проводили добавлением 25 мкл меченного рутением стрептавидина в буфере для анализа в концентрации 0,25 мкг/мл. После инкубации в течение одного часа при комнатной температуре планшеты промывали и добавляли буфер Tris-based Read Buffer T (1x, без поверхностно-активного вещества) (Meso Scale Discovery) (150 мкл/лунка). Электрохемилюминесцентные сигналы регистрировали с использованием устройства для считывания Sector Imager 6000 (Meso Scale Discovery).
Biacore 2000 - Использовали две ориентации; иммобилизовывали либо М1'-Fc, либо конкретный вариант антитела (приблизительно 100 RU, в 10 мМ ацетате натрия pH 4,8 на сенсорном чипе CM5), и соответствующий лиганд (вариант антитела или M1'Fc, соответственно) служил в качестве анализируемого вещества (инъецируемый со скоростью потока 30 мкл/мин, с использованием 2-кратного серийного разведения от 0,5 до 1000 нМ в PBST). Каждый образец анализировали с ассоциацией в течение 3 минут и диссоциацией в течение 10 минут. После каждой инъекции чип регенерировали с использованием 10 мМ глицина pH 1,7.
Biacore A-100 - М1' иммобилизовывали (приблизительно 100 RU, в 10 мМ ацетате натрия pH 4,8 на сенсорном чипе CM-5), и вариант антитела служил в качестве анализируемого вещества (инъецируемый со скоростью потока 30 мкл/мин, с использованием 2-кратного серийного разведения от 0,5 до 1000 нМ в PBST). Каждый образец анализировали с ассоциацией в течение 5 минут и диссоциацией в течение 5 минут. После каждой инъекции чип регенерировали с использованием 10 мМ глицина pH 1,7.
Связывающий ответ корректировали вычитанием потока ячеек контрольного потока из ячеек потока варианта IgG 18F7. Для анализа кинетики использовали модель Ленгмюра 1:1 для одновременного приведения в соответствие kon и koff.
Результаты и обсуждение
Пересаженные CDR 26A11, 7A6 и 47H4 - Акцепторная каркасная область человека, используемая для гуманизации, основана на консенсусном VL-домене каппа I человека и консенсусном VH-домене подгруппы III человека. VL- и VH-домены mu26A11, mu7A6 и mu47H4 выравнивали с доменами каппа I и подгруппы III человека; каждую определяющую комплементарность область (CDR) идентифицировали и пересаживали в акцепторную каркасную область человека с получением пересаженной CDR, которая не могла экспрессироваться в качестве IgG (фиг.6A-6F).
Оценка аффинности - 26A11.v1, 7A6.v1 и 47H4.v1 оценивали с использованием ELISA со связыванием клеток и посредством поверхностного плазмонного резонанса (таблица 1). Эти анализы показали, что пересаженные CDR обладали аффинностью, в значительной степени сходной с соответствующими им гибридомными антителами.
Устранение потенциальных участков дезамидации и образования изоаспарагиновой кислоты в CDR-L1 26A11 и 47H4 - Для избежания возможных проблем при изготовлении потенциальные участки образования изоаспарагиновой кислоты Asn28-Gly29 в CDR-L1 47H4.v1 и Asn31-Ser32 в CDR-L1 26A11.v1 устраняли посредством исследования остатков, находящихся в этих положениях в других антителах (фиг.6A, 6C, таблица I). Было выявлено, что замены Gly29 на Ala29 в CDR-L1 47H4.v1 (47H4.v2 и 47H4.v5) и Ser32 на Tyr32 в CDR-L1 26A11 (26A11.v3 и 26A11.v6) или Ala32 (26A11.v2 или 26A11.v5) являются пригодными заменами. Кроме того, замена Asn31 либо на Ser31 (26A11.v13 или 26A11.v15) или Gln31 (26A11.v14 или 26A11.v16) также служила для устранения потенциальной дезамидации и образования изоаспарагиновой кислоты и привела к кандидатам с аффинностью, сходной с соответствующими им гибридомными антителами.
Потенциального окисления Met34 в CDR-H1 либо 26A11.v1, либо 47H4.v1 избегали заменой этого остатка на Ile34 в обоих антителах без влияния на связывание М1'.
ПРИМЕР 3
Специфичность Ab против M1'
Специфичность клонов антител против IgE/М1' тестировали на линии B-клеток человека BJAB (ATCC Manassas, VA, #HB-136), трансфицированной IgE с последовательностью М1' ("длинная форма") или IgE, лишенным последовательности М1' ("короткая форма"). Клеточные линии BJAB с IgE получали посредством ретровирусной трансдукции клеток BJAB с использованием экспрессирующего вектора pMSCV (Washington University, St. Louis, MO). кДНК полноразмерных тяжелой и легкой цепей B-клеточного рецептора человека для IgE получали из миеломной клеточной линии с IgE U266 человека (ATCC, Manassas, VA, TIB#196) и субклонировали в ретровирусный вектор в сочетании с IRES (Internal Ribosomal Entry Sequence) для обеспечения бицистронной котрансфекции и коэкспрессии тяжелой и легкой цепей антитела. Дополнительное описание способа ретровирусной трансдукции предоставлено ниже.
Упаковочные клетки PG13 (ATCC CRL-10686) высевали на 10-см планшет для культивирования тканей в количестве 2×106 клеток на планшет (DMEM с высоким содержанием глюкозы, 10% FBS, пенициллин, стрептомицин, 2 мМ L-глутамин) в течение 24 часов. Клетки трансфицировали ДНК-конструкциями pMSCV с использованием FuGENE6 и культивировали в течение 2 суток при 37°C, 5% CO2. Супернатант клеточной культуры, содержащий ретровирусные частицы, собирали и фильтровали через фильтр с размером пор 0,4 микрон. Добавляли стерильный сульфат протамина до конечной концентрации 10 мкг/мл, и 4 мл супернатанта использовали для инфицирования приблизительно 1×106 клеток BJAB посредством проведения инфицирования при вращении при 32°C в течение 90 минут, с последующим продолжающимся культивированием в ретровирусном супернатанте в течение 3-4 часов при 37°C в 5% CO2. Инфицированные клетки BJAB выделяли, переносили в клеточную культуральную среду RPMI (RPMI, 10% FBS (Hyclone, Logun, UT, #SH30071.03), пенициллин, стрептомицин, 2 мМ L-глутамин) и подвергали размножению для сортировки. Положительно трансфицированные клетки идентифицировали проточной цитометрией с использованием антитела против IgE человека MAE11 (Genentech) для детекции поверхностных IgE.
Антитела против IgE/М1' являются специфичными к длинной форме, но не к короткой форме мембранных IgE, как определяют по окрашиванию при проточной цитометрии клеточных линий BJAB с короткой и длинной формами IgE. В качестве положительного контроля использовали антитело против IgE человека (Mae11) (Genentech, Inc.) вследствие его способности связываться как с длинной, так и с короткой формой IgE. В качестве изотипических контролей использовали антитела mIgG1 к gp120 или антитела mIgG2a к белкам пыльцы (Genentech, Inc).
Клетки BJAB выращивали в RPMI 10% FBS (Hyclone, Logun, UT, #SH30071.03), пенициллин/стрептомицин, 2 мМ L-глутамин (Genentech, Inc.). Клетки 0,5×106 BJAB-Long или BJAB-short блокировали сывороткой мыши (10 мкл) (VWR, #RLD 108-0100) и человека (10 мкл) (Sigma, St. Louis, MO, #S-2257) в течение 15 минут на льду в 100 мкл буфера для промывания FACs (2% FBS в 1X PBS (Genentech, Inc.)). Затем клетки окрашивали 1 мкг/мл каждого антитела против M1' в течение дополнительных 20 минут на льду, а затем промывали 1 мл буфера для промывания FACs и центрифугировали при 1200 об/мин в течение 5 минут. Клетки ресуспендировали в 100 мкл буфера для промывания FACs, а затем окрашивали антителами козы против IgG-PE мыши (5 мкл) (Caltag/Invitrogen, Carlsbad, CA, #M30004-4) на льду в течение 20 минут. Клетки промывали, как указано выше, и ресуспендировали в 1 мл буфера для промывания FACs для анализа на устройстве FACs Calibur (BD, Inc, Franklin Lakes, NJ). Все протестированные антитела были специфичны к длинной форме IgE и не связывали клетки BJAB-IgE/короткая форма на уровне, превышающем изотипический контроль. Наблюдали широкий диапазон относительной аффинности на основе интенсивности окрашивания.
Также авторы настоящего изобретения оценивали связывание антитела против M1' с клеточной линией U266 (ATCC, Manassas, VA, #TIB196), которая естественным образом экспрессирует низкий уровень IgE человека, содержащих М1', на клеточной поверхности. Клетки U266 поддерживали при высокой плотности (1-2×106/мл) в среде для гибридомы [RPMI 1640, 15% эмбриональная телячья сыворотка, 2 мм L-глутамин, 10 мМ HEPES, 4,5 г/л глюкоза, 1,5 г/л бикарбонат]. Клетки U266 окрашивали антителами против M1' в концентрации 1 мкг/мл. 47H4, 47G4 и 42A5 окрашивали U266 на уровнях, сходных с Mae11. Антитела 42H4, 45C1 и 28E9 окрашивали U266 на очень низких уровнях. 7A6, 1C11, 26A11, 51D2 и 26B11 не окрашивали U266 (фиг.2C).
ПРИМЕР 3A
Специфичность связывания антител против IgE/М1' мыши
На фиг.2D-F представлено связывание мышиных антител 47H4, 26A11 и 7A6 против IgE/М1' с коллекцией клеточных линий, которые экспрессируют IgE/М1' человека, макака-резус и яванского макака.
Специфичность клонов антител против IgE/М1' тестировали на линии B-клеток человека BJAB (ATCC Manassas, VA, #HB-136) и Daudi (ATCC #CCL-213), инфицированных ретровирусом для экспрессии длинной формы IgE с последовательностью М1' или короткой формы IgE, лишенной последовательности М1'. Клетки BJAB выращивают в RPMI 10% FBS (Hyclone, Logun, UT, #SH30071.03), пенициллин/стрептомицин, 2 мМ L-глутамин (Genentech, Inc.). 0,5×106 клеток BJAB-Long или BJAB-short блокировали сывороткой мыши (10 мкл) (VWR, #RLD 108-0100) и человека (10 мкл) (Sigma, St. Louis, MO, #S-2257) в течение 15 минут на льду в 100 мкл буфера для промывания FACs (2% FBS в IX PBS (Genentech, Inc.)). Затем клетки окрашивали 1 мкг/мл каждого антитела против M1' в течение дополнительных 20 минут на льду, а затем промывали 1 мл буфера для промывания FACs и центрифугировали при 1200 об/мин в течение 5 минут. Клетки ресуспендировали в 100 мкл буфера для промывания FACs, а затем окрашивали антителами козы против IgG-PE мыши (5 мкл) (Caltag/Invitrogen, Carlsbad, CA, #M30004-4) на льду в течение 20 минут. Клетки промывали, как указано выше, и ресуспендировали в 1 мл буфера для промывания FACs для анализа на устройстве FACs Calibur (BD, Inc, Franklin Lakes, NJ). Все протестированные антитела были специфичны к длинной форме IgE и не связывали клетки BJAB-IgE/короткая форма на уровне, превышающем изотипический контроль. Наблюдали широкий диапазон относительной аффинности на основе интенсивности окрашивания.
Специфичность клонов антител против IgE/М1' тестировали на линии B-клеток человека Daudi, инфицированной ретровирусом для экспрессии мембранных IgE с последовательностью М1' (длинная форма) или мембранных IgE, лишенных последовательности М1' (короткая форма). Антитела против IgE/М1' (47H4, 26A11, 7A6) являются специфичными к длинной форме, но не к короткой форме (фиг.2D). Антитело mIgG1 против gp120 использовали в качестве изотипического контроля (Genentech, Inc).
Линию B-клеток человека Daudi трансдуцировали ретровирусом, содержащим кассету IgE человека/М1' приматов IgE/М1' либо макака-резус, либо яванского макака, либо человека. После трансдукции клетки, экспрессирующие IgE/М1' человека, макака-резус и яванского макака, сортировали сортером FACs до >98% чистоты посредством 3-4 сортировок.
На фиг.2F представлена способность антител против IgE/М1' связывать М1' макака-резус и яванского макака. 47H4 и 7A6 связывают М1' как макака-резус, так и яванского макака, а 26A11 связывает только М1' макака-резус.
В дополнение к трансфектантным клеточным линиям Daudi, авторы настоящего изобретения оценивали связывание антитела против IgE/М1' с U266, миеломной клеточной линии с IgE человека (ATCC, Manassas, VA, #TIB196). Клетки U266 поддерживали при высокой плотности (1-2×106/мл) в среде для гибридомы [RPMI 1640, 15% эмбриональная телячья сыворотка, 2 мМ L-глутамин, 10 мМ HEPES, 4,5 г/л глюкоза, 1,5 г/л бикарбонат]. Клетки U266 окрашивали антителами против M1' в концентрации 1 мкг/мл. Антитело против IgE/М1' 47H4 связывало U266, а 26A11 и 7A6 не связывали их (фиг.2E).
ПРИМЕР 3B
Специфичность связывания гуманизированных антител против IgE/М1'
В примере 3B показано связывание гуманизированных антител против IgE/М1' с коллекцией клеточных линий, которые экспрессируют IgE/М1' человека, макака-резус и яванского макака.
С использованием указанных линий B-клеток человека Daudi или BJAB, сверхэкспрссирующих М1' человека, макака-резус и яванского макака, рассмотренных в примере 3A, тестировали специфичность клонов гуманизированных антител против IgE/М1' на линии B-клеток Daudi, инфицированной ретровирусом для экспрессии длинной формы IgE с последовательностью М1' или короткой формы IgE, лишенной последовательности М1'. Гуманизированные антитела против IgE/М1' (47H4v5, 26A11v6, 7A6v1) являются специфичными к длинной форме, но не к короткой форме (без М1') [Фиг.2G]. В качестве изотипического контроля использовали MAb huIgG1 против Her2 HERCEPTIN® (Genentech, Inc.). Кроме того, гуманизированные антитела против IgE/М1' (47H4v5 и 26A11v6) связываются с клеточными линиями U266 (фиг.2H).
На фиг.2I показана способность гуманизированных антител против IgE/М1' связывать М1' как макака-резус, так и яванского макака. Оба антитела 47H4v5 и 7A6v1 связывают М1' как макака-резус, так и яванского макака, а 26A11v6 связывает только М1' макака-резус.
ПРИМЕР 4
Относительная аффинность связывания антител против M1'
Авторы настоящего изобретения наблюдали широкий диапазон интенсивностей связывания антитела против IgE/М1' в концентрации 1 мкг/мл. Для оценки относительной аффинности этих антител к рецептору длинной формы IgE, авторы настоящего изобретения окрашивали клетки BJAB-Long серией разведений антитела против M1' (1, 0,1, 0,01, 0,001 мкг/мл). Клетки BJAB-Long блокировали сывороткой мыши и человека (10 мкл) в течение 20 минут на льду. Клетки окрашивали соответствующим количеством антитела против М1' или изотипическими контролями в виде mIgG1 против gpl20 или mIgG2a против белков пыльцы в течение последующих 20 минут. Затем клетки промывали буфером для промывания FACs (1 мл), центрифугировали (1200 об/мин в течение 5 минут), а затем ресуспендировали в 100 мкл буфера для промывания FACs с антителом козы против IgG-PE мыши (5 мкл) (CALTAG/Invitrogen, Carlsbad, CA #M30004-4) для детекции. Клетки снова промывали, как указано выше, а затем анализировали на устройстве FACs Calibur (BD, Inc, Franklin Lakes, NJ). Установка напряжения была основана на 0,001 мкг/мл изотипического контроля. Из этих результатов антитела-кандидаты против IgE/М1' располагали в соответствии с относительной аффинностью связывания: 42H4>7A6, 47H4, 47G4>42A5, 26A11, 45C1>51D2, 26B11>1C11>28E9.
В дополнение к определению относительной аффинности титрованием антитела и детекцией посредством FACs, авторы настоящего изобретения также определяли аффинность выбранных антител против M1' к клеточным линиям BJAB, экспрессирующим длинную форму IgE с использованием анализа Скэтчарда. Клетки BJAB-Long получали для связывания в холодном буфере для связывания, состоящем из основной среды с 10 мМ HEPES pH 7,4, и 2% FBS, а также с 40 мкг/мл IgG человека. Клетки разбавляли до концентрации 1,7×106 клеток/мл и держали на льду до добавления в анализируемую смесь. Антитела йодировали способом с йодогеном. Получали различные концентрации немеченого антитела в трех экземплярах с использованием разведения 1:2, начиная с насыщающей концентрации и заканчивая концентрацией, равной нулю, всего с 14 концентрациями. Ко всем разведениям конкурентного немеченого антитела добавляли йодированное антитело в одной концентрации. Наконец, к каждой смеси йодированного и немеченого антитела добавляли 250000 клеток BJAB-Long. Образцы инкубировали при 4ºC в течение 4 часов при встряхивании. Затем каждый образец собирали и фильтровали на мембране, промывали по меньшей мере 3 раза буфером для промывания, позволяли высохнуть, а затем подвергали измерению в течение 1 минуты с использованием автоматического гамма-счетчика Perkin Elmer Wizard 1470 Auto Gamma Counter.
ПРИМЕР 4A
Аффинность Скэтчарда антител против IgE/М1' мыши
Получали клетки BJAB или Daudi, экспрессирующие различные формы IgE с М1' (человека, макака-резус, яванского макака) или без него для связывания в холодном буфере для связывания, состоящем из основной среды с 10 мМ HEPES pH 7,4, и 2% FBS, а также 40 мкг/мл IgG человека. Клетки разбавляли до концентрации 1,7×106 клеток/мл и держали на льду до добавления их в анализируемую смесь. Белки/антитела йодировали способом с йодогеном. Получали различные концентрации холодного белка в трех экземплярах с использованием разведения 1:2, начиная с насыщающей концентрации и заканчивая концентрацией, равной нулю, всего с 14 концентрациями. Ко всем разведениям добавляли горячий белок в одной концентрации для конкуренции с холодным белком. В конце к смеси горячего и холодного белков добавляли клетки, использовали 250000 клеток на образец. Анализируемую смесь держали при 4°C в течение 4 часов при встряхивании. Затем каждый образец собирали и фильтровали на мембране, промывали по меньшей мере 3 раза буфером для связывания, позволяли высохнуть, а затем подсчитывали в течение 1 минуты с использованием автоматического гамма-счетчика Perkin Elmer Wizard 1470 Auto Gamma Counter.
На фиг.3O обобщенно представлены аффинности антител против M1' мыши, измеренные анализом Скэтчарда. Антитело мыши mIgG1 47H4 связывало М1' человека, макака-резус, яванского макака с аффинностью 0,79, 0,77 и 0,97 нМ, соответственно. Антитела мыши mIgG1 26A11 и mIgG1 7A6 связывали М1' человека с аффинностью 2,3 и 0,64 нМ соответственно.
На фиг.3P обобщенно представлены аффинности связывания гуманизированных антител против IgE/М1' к М1' человека, макака-резус и яванского макака. Гуманизированное антитело huIgG1 47H4v5 связывало М1' человека, макака-резус и яванского макака с аффинностью 1,5, 1,3 и 2,5 нм соответственно. Гуманизированные антитела 47H4v2, 47H4v1, 26A11v6, 26A11v14 и 26A11v1 связывали М1' человека с аффинностью 0,54, 0,37, 1,85, 1,5 и 1,06 соответственно.
ПРИМЕР 5
Исследования связывания/блокирования эпитопа антителом против IgE/М1'
Исследования блокирования проводили для антител-кандидатов против IgE/М1' в целях определения перекрывающихся или отличающихся эпитопов для связывания. Когда блокирующие и осуществляющие детекцию антитела имели различный изотип (т.е. IgG1 относительно IgG2a), эти отличия в изотипах исследовали для определения степени блокирования посредством детекции с помощью изотип-специфичного вторичного антитела (CALTAG/Invitrogen, Carlsbad, CA, антитело козы против IgG1-PE мыши #32004, или антитело козы против IgG2a мыши #M32204). Когда блокирующие и связывающие антитела имели один изотип, антитела конъюгировали с биотином (Pierce, Rockford, IL, EZ-link-sulfo-NHS-LC-Biotin #CAS 127062-220) и подвергали детекции с помощью стрептавидин-PE (BD #554061), или конъюгировали с Alexa-647 (Molecular Probes/Invitrogen, Carlsbad, CA, #A20173). Исходно блокирующие и осуществляющие детекцию антитела использовали в соотношении 1:1 (10 мкг/мл) (фиг.4A-4B). Сочетания антител, которые исходно не осуществляли блокирование или осуществляли только частичное блокирование, далее тестировали с использованием блокирования 10:1 для детекции соотношения антител. Клетки BJAB-Long блокировали сывороткой мыши и человека (как описано выше), а затем окрашивали блокирующим антителом (10 мкг/мл) в буфере для промывания FACs (2% FBS/1X PBS) в течение 20 минут на льду. Клетки промывали в буфере для промывания FACs, а затем окрашивали антителом для детекции в соотношении 1:1 (10 мкг/мл) или 10:1 (1 мкг/мл) в течение 20 минут на льду. Клетки снова промывали, как указано выше, а затем анализировали на устройстве FACS Calibur (BD, Inc, Franklin Lakes, NJ). Окрашенные клетки сравнивали с изотипическим контрольным антителом, представляющим собой либо mIgG1 против gpl20 (Genentech, Inc.), либо mIgG2a против белков пыльцы (Genentech, Inc.) (фиг.4C). Для сравнения, полное блокирование определяли посредством окрашивания тем же неконъюгированным антителом, когда это было возможно.
Исследования блокирования выявили три основные связывающие группы: A, B и C. Группу A далее подразделяли на две группы: A1 (47H4, 47G4, 42H4, 42A5) и A2 (45C1, 51D2, 26A11), исходя из частично перекрывающихся эпитопов (фиг.4D). Группа C (26B11) имела очень небольшое перекрывание с другими антителами-кандидатами. Три кандидата перекрывались более широко, чем другие. Оказалось, что 1C11 имеет перекрывающееся связывание с группой A1 и A2, и оно только частично блокировалось группой B (28E9). 7A6, главным образом, относится к группе A1, однако, оно частично взаимодействовало с кандидатами из группы A2. 28E9 относится к группе, состоящей только из него. 28E9 только частично взаимодействовало с кандидатами из группы A2.
ПРИМЕР 5A
Картирование эпитопа
На фиг.5A-E показаны исследования связывания эпитопов, проводимые с использованием антител против IgE/М1'. Антитела мыши 47H4, 7A6 и 26A11 представлены на фиг.5B и 5D, а гуманизированные варианты 47H4v5, 7A6v1 и 26A11v6 представлены на фиг.5C и 5E.
Исследования картирования эпитопа: кандидаты мыши
Получали 15 пептидов, охватывающих последовательность, окружающую и включающую М1' человека (Clifford Quan) (фиг.5A). Пептиды ресуспендировали либо в dH20, либо в 50% DMSO. Пептиды наносили на 96-луночные планшеты (планшеты для ELISA с высокой способностью связывать белок NUNC Maxisorp #44-2404) в количестве 1 мкг/мл в буфере для нанесения (0,05 M карбонат/бикарбонат (pH 9,6) (100 мкл на лунку). В качестве положительного контроля связывания использовали слитый белок М1'-Fc. Отрицательные контроли включали лунки, на которые было нанесено IgE человека (U266), и непокрытые лунки. Пептидам давали покрыть лунки в течение ночи при 4°C. На следующее утро планшеты промывали 3 раза буфером для промывания (PBS/0,05% Tween-20 (pH 7,4)). Затем планшеты блокировали в блокирующем буфере (PBS, 0,5% BSA (pH 7,4)) в течение 1 часа при осторожном встряхивании. Получали разведения антител (40 нг/мл и 1 нг/мл), подлежащих тестированию (mIgG1 47H4, huIgG1 47H4v5, mIgG1 26A11, huIgG1 26A11v6, mIgG1 7A6, huIgG1 7A6v1) в буфере Magic Buffer [PBS (pH 7,4), 0,5% BSA, 0,05% Tween-20, 10 м.д. Proclin., 0,2% BgG, 0,25% Chaps, 5 мМ EDTA, 0,35M NaCl]. Антитела mIgG1 против gp120 и HERCEPTIN® huIgG1 использовали в качестве контролей для антител против IgE/М1' мыши и человека соответственно. После достаточного блокирования планшетов (0,5% BSA/1X PBS) планшеты промывали 3 раза, а затем в планшет добавляли антитела в трех экземплярах (100 мкл на лунку). Затем планшеты инкубировали в течение 2 часов при комнатной температуре. Планшеты с антителом мыши промывали 3 раза, а затем добавляли антитело против IgG1 мыши-биотина (BD Biosciences (A85-1) #553441) (1:10000, 100 мкл на лунку) и инкубировали в течение 1 часа при комнатной температуре (RT). После 3 промываний добавляли SA-HRP (BD Biosciences #554066) (1:20000, 100 мкл на лунку) и инкубировали в течение 1 часа. Планшеты с антителом IgG1 человека промывали, как указано выше, и добавляли антитело против huIgG.Fc-HRP (Jackson ImmunoResearch (#109-036-098)) (1:10000, 100 мкл на лунку), и инкубировали в течение 1 часа при RT. После завершения вторичных инкубаций планшеты промывали 6 раз и добавляли субстрат TMB (BD OptEIA #555214) (100 мкл на лунку). Реакцию субстрат-HRP останавливали 1M H3PO4 через ~4 минут. Затем проводили считывание планшетов при 450/650. Данные представляли в качестве относительной OD (OD450/CD650).
На фиг.5B и 5D представлено связывание мышиных антител-кандидатов 26A11, 7A6 и 47H4 против IgE/М1' с пептидами М1'. Связывание этих кандидатов коррелирует с группами эпитопов, определенных в исследованиях блокирования антитела. mIgG1 47H4 связывало пептид 4 (SAQSQRAPDRVLCHS) (SEQ ID NO:8). mIgG1 7A6 связывало пептиды 4 (SAQSQRAPDRVLCHS) (SEQ ID NO:8) и 5 (RAPDRVLCHSGQQQG) (SEQ ID NO:9). mIgG1 26A11 связывало пептиды 7 (GQQQGLPRAAGGSVP) (SEQ ID NO:11) и 8 (PRAAGGSVPHPRCH) (SEQ ID NO:12).
На фиг.5C и 5E представлено связывание гуманизированных антител против IgE/М1' с пептидами М1'. Картирование эпитопа проводили, как описано выше, для соответствующих антител мыши, за исключением того, что использовали отличающееся вторичное антитело. Планшеты с антителом IgG1 человека промывали, как указано ранее, и добавляли вторичное антитело IgG.Fc-HRP (Jackson ImmunoResearch (#109-036-098) (1:10000, 100 мкл на лунку), и инкубировали в течение 1 часа при RT. Связывание эпитопов соответствовало связыванию, наблюдаемому для исходных антител мыши. 47H4v5 связывало пептид 4 (SAQSQRAPDRVLCHS) (SEQ ID NO:8). 7A6v1 связывало пептиды 4 (SAQSQRAPDRVLCHS) (SEQ ID NO:8) и 5 (RAPDRVLCHSGQQQG) (SEQ ID NO:9). mIgG1 26A11 связывало пептиды 7 (GQQQGLPRAAGGSVP) (SEQ ID NO:11) и 8 (PRAAGGSVPHPRCH) (SEQ ID NO:12).
ПРИМЕР 6
Индукция апоптоза антителом против IgE/М1' мыши в клетках Daudi-IgE/Long
Клетки Daudi-Long (IgE/М1') использовали для тестирования эффекта перекрестного сшивания поверхностных IgE на индукцию апоптоза. Клетки Daudi (ATCC, Manassas, VA, #CCL-213) представляют собой клеточную линию лимфомы Беркитта, известную тем, что она чувствительна к апоптозу в ответ на перекрестное сшивание BCR. Клетки Daudi, экспрессирующие длинную форму IgE, получали посредством ретровирусной трансдукции тяжелой и легкой цепей U266 IgE с М1', как описано выше для получения клеток BJAB с длинным IgE. Анализ проточной цитометрией клеток Daudi-IgE/Long с использованием антител против эндогенного IgM и трансфицированного B-клеточного рецептора IgE показал более высокую экспрессию IgM, чем IgE. Апоптоз клеток Daudi-IgE/Long исследовали в клетках, культивированных до плотности 0,2×106/1,5 мл в культуральной среде [RPMI, 10% FBS (Hyclone, Logun, UT, #SH30071.03), пенициллин/стрептомицин (Gibco/Invitrogen, Carlsbad, CA #15140-122), 2 мМ глутамин (Genentech, Inc.), 10 мМ HEPES (7,2) (Genentech, Inc.), 1 мМ пируват Na (Gibco/Invitrogen, Carlsbad, CA #11360), 1,59 г/л раствор бикарбоната натрия (Gibco/Invitrogen, Carlsbad, CA #25080-094)]. Перед началом анализа апоптоза, погибшие клетки удаляли посредством градиента фиколла (GE Healthcare #17-1440-03) для снижения фоновых уровней погибших клеток в анализе. 0,2×106 клеток культивировали в трех экземплярах с антителами против M1' или контрольными антителами в растворе в течение 72 часов. Затем клетки собирали и анализировали в отношении уровней апоптоза с использованием набора Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit I (BD Biosciences, San Jose, CA #556547). Клетки промывали два раза холодным PBS (Genentech, Inc.), а затем ресуспендировали в 100 мкл 1X буфера для связывания (0,1M Hepes/NaOH (pH 7,4), 1,4M NaCl, 25 мМ CaCl2) (BD Biosciences, San Jose, CA, #51-66121E). Затем клетки окрашивали 2,5 мкл антителом к аннексину V-FITC (BD Biosciences, San Jose, CA #51-65874X) и 5 мкл йодида пропидия (PI) (BD Biosciences, San Jose, CA #51-6621 IE) в темноте. Через 15 минут в каждую пробирку добавляли 400 мкл 1X буфера для связывания, и клетки анализировали на устройстве для проточной цитометрии FACs Calibur (BD, Inc. Franklin Lakes, NJ). Для каждого образца получали приблизительно 10-20000 результатов. Погибающие клетки определяли как положительные по аннексину V и отрицательные по PI. Погибшие клетки являются положительными как по аннексину V, так и по PI. Процентное количество каждой популяции (погибших и погибающих) вычисляли с использованием программного обеспечения для анализа FlowJo FACs (Tree Star, Inc., Ashland, Oregon). Данные для трех экземпляров усредняли и вычисляли стандартные отклонения. Процентный апоптоз вычисляли как суммы погибших и погибающих клеток и наносили на график с использованием Excel (Microsoft, Inc.).
В качестве положительных контролей для индукции апоптоза в клеточной линии Daudi-IgE/Long использовали камптотецин (Sigma- Aldrich, St. Louis, MO, #C9911 - 100 мг) и антитело против IgM (JacksonImmuno Research, West Grove, PA, #109-006-120). В качестве отрицательных контролей для этого анализа использовали антитела mIgG1 против gp120 или mIgG1 против белков пыльцы (Genentech, Inc.). Клетки Daudi-IgE/Long культивировали с диапазоном концентраций антител против IgE/М1' или изотипических контрольных антител (25, 10, 1, 0,1, 0,01, 0,001 мкг/мл). Тестируемые антитела против IgE/М1' представляли собой 7A6, 47H4, 47G4, 42A5, 42H4, 1C11, 26A11, 51D2, 45C1, 26B11 и 28E9 (Genentech, Inc.). Также для сравнения использовали антитело против IgE человека (Mae11-mIgG1).
Изотипические контрольные антитела против gp120 и против белков пыльцы не индуцировали апоптоз на уровне, превышающем необработанные клетки. Фоновые уровни апоптоза находились в диапазоне 10-15% для каждого эксперимента. Антитела против IgE/М1' 7A6 (>10 мкг/мл), 47H4 (>10 мкг/мл) и 47G4 (25 мкг/мл) индуцировали апоптоз клеток Daudi с длинным IgE. 26A11 индуцировало апоптоз со сходными показателями (~30-50%), однако при значительно более низких концентрациях (>0,1 мкг/мл). 42A5, 51D2, 45C1, 26B11 и 28E9 не индуцировали апоптоз выше фоновых уровней. Mae11 также не индуцировало апоптоз выше фоновых уровней.
Также авторы настоящего изобретения проводили анализ апоптоза в присутствии вторичного антитела козы против F(ab')2 IgG мыши (Jackson ImmunoResearch, West Grove, PA #115-006-062) для сверхперекрестного связывания B-клеточного рецептора для IgE на клеточной линии Daudi. Эксперименты по перекрестному связыванию проводили в присутствии антитела козы против F(ab')2 IgG мыши (30 мкг) (JacksonImmuno Research, West Grove, PA, #115-006-062). За исключением 26B11 (30%) все антитела индуцировали максимальные уровни апоптоза 70-80%, однако, в различных концентрациях. Эти антитела можно подразделить на две группы. 7A6, 1C11, 26A11, 51D2, 45Cl и 28E9 индуцировали максимальный апоптоз при наиболее высоких концентрациях. Другая группа 47H4, 47G4, 42A5 и 42H4, и MAE11 проявляла сниженный апоптоз при более высоких концентрациях.
ПРИМЕР 6A
Индукция апоптоза гуманизированными антителами против IgE/М1' в клетках Daudi/длинный IgE
Клетки Daudi-Long (IgE/М1') использовали для тестирования эффекта перекрестного связывания поверхностного IgE на индукцию апоптоза в этой клеточной линии. Клетки Daudi (ATCC, Manassas, VA, #CCL-213) представляют собой клеточную линию лимфомы Беркитта человека, известную тем, что она чувствительна к апоптозу в ответ на перекрестное связывание BCR. Клетки Daudi-IgE/Long культивировали с плотностью 0,2x106/1,5 мл в культуральной среде [RPMI, 10% FBS (Hyclone, Logun, UT, #SH30071.03), пенициллин/стрептомицин (Gibco/Invitrogen, Carlsbad, CA #15140-122), 2 мМ глутамин (Genentech, Inc.), 10 мМ HEPES (7,2) (Genentech, Inc.), 1 мМ пируват Na (Gibco/Invitrogen, Carlsbad, CA #11360), 1,59 г/л раствор натрия бикарбонат (Gibco/Invitrogen, Carlsbad, CA #25080-094)] в течение предшествующей ночи, а затем погибшие клетки удаляли с помощью градиента фиколла (GE Healthcare #17-1440-03) на следующие сутки. Это снижало фоновые уровни гибели клеток в анализе. 0,2×l06 клеток культивировали в трех экземплярах с антителами против M1' и без них или с контрольными антителами в растворе в течение 72 часов. Затем клетки собирали и анализировали в отношении уровней апоптоза с использованием Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit I (BD Biosciences, San Jose, CA #556547). Клетки промывали два раза в холодном PBS (Genentech, Inc.), а затем ресуспендировали в 100 мкл 1X буфера для связывания (0,1M Hepes/NaOH (pH 7,4), 1,4M NaCl, 25 мМ CaCl2) (BD Biosciences, San Jose, CA, #51-66121E). Затем клетки окрашивали 2,5 мкл антитела к аннексину V-FITC (BD Biosciences, San Jose, CA #51-65874X) и 5 мкл йодида пропидия (PI) (BD Biosciences, San Jose, CA #51-66211E) в темноте. Через 15 минут в каждую пробирку добавляли 400 мкл 1X буфера для связывания, и клетки анализировали на устройстве для проточной цитометрии FACs Calibur (BD, Inc. Franklin Lakes, NJ). Для каждого образца получали приблизительно 10-20000 результатов. Погибающие клетки определяли как положительные по аннексину V и отрицательные по PI. Погибшие клетки являются положительными как по аннексину-V, так и по PI. Процентное количество каждой популяции (погибших и погибающих) вычисляли с использованием программного обеспечения FlowJo FACs (Tree Star, Inc., Ashland, Oregon). Данные от трех экземпляров усредняли и вычисляли стандартные отклонения. Процентный апоптоз вычисляли как суммы погибших и погибающих клеток и наносили на график с использованием Excel (Microsoft, Inc.).
Антитело против IgM (JacksonImmuno Research, West Grove, PA, #109-006-120) использовали в качестве положительного контроля для индукции апоптоза в клеточной линии Daudi-IgE/Long. В качестве отрицательного контроля для этого анализа использовали huIgG1 HERCEPTIN® (Genentech, Inc.). Клетки Daudi-IgE/Long культивировали с диапазоном концентраций антител против IgE/М1' или изотипических контрольных антител (25, 10, 1, 0,1, 0,01, 0,001 мкг/мл). Эксперименты по вторичному поперечному связыванию проводили в присутствии антитела козы против F(ab')2 IgG человека (50 мкг) (Biosource #AHI1301). Тестируемые антитела против IgE/М1' представляли собой 47H4v5, 26A11v6, huIgG1 7A6v1.
Изотипический контрольный huIgG1 HERCEPTIN® не индуцировал апоптоз на уровне, превышающем уровень необработанных клеток. Фоновые уровни апоптоза находились в диапазоне 10-15% для каждого эксперимента. Антитела против IgE/М1' 47H4v5, 26A11v6 и 7A6v1 индуцировали апоптоз в диапазоне 30-40% (фиг.8A).
Авторы настоящего изобретения повторили указанные анализы в присутствии вторичного антитела козы против F(ab')2 IgG человека (Biosource #AHI1301) для перекрестного связывания рецептора IgE на клеточной линии Daudi. Все антитела индуцировали максимальные уровни апоптоза 70-90%, с некоторым снижением апоптотической активности при высоких концентрациях первичного антитела против IgE/М1' (фиг.8B).
47H4v5 дикого типа против афукозилированного 47H4v5 при индукции апоптоза без вторичного перекрестного связывания.
Афукозилированный вариант (AF) 47H4v5 получали с использованием клеточных линий BIOWA (Genentech, Inc.). Как вариант WT (дикий тип), так и вариант AF 47H4v5 были способны индуцировать апоптоз на сходных уровнях (фиг.8C).
Таблица 1
Аффинности связывания гуманизированного антитела против IgE/М1'
ПРИМЕР 7
Индуцированный поток кальция
Авторы настоящего изобретения исследовали способность антител против M1' индуцировать поток кальция в клетках Daudi-IgE/Long в качестве доказательства того, что эти антитела могут индуцировать клеточную передачу сигнала ниже B-клеточного рецептора для IgE. Клетки Daudi (ATCC, Manassas, VA, #CCL-213), которые сверхэкспрессируют длинную форму IgE/М1', культивировали в течение ночи при небольшой плотности 0,2×106/мл. На следующее утро погибшие клетки удаляли посредством градиента фиколла (GE Healthcare #17-1440-03). Клетки нагружали большой партией Indo-1 для обеспечения равномерной нагрузки для всех стимулов. Клетки ресуспендировали в количестве 5×106/мл в культуральной среде (RPMI-10% FBS (Hyclone), пенициллин/стрептомицин, 2 мМ L-глутамин) и комбинировали с красителем для детекции кальция Indo-1 (5 мкМ) (Molecular probes/Invitrogen, Carlsbad, CA, #11223). Затем клетки промывали в культуральной среде и ресуспендировали в количестве 106/мл. Использовали 106 клеток на стимул. Образцы нагревали на водяной бане при 37°C в течение 5 минут перед анализом на устройстве FACs Vantage machine (BD, Inc, Franklin Lakes, NJ). Образцы исходно анализировали в течение 1 минуты для получения исходного уровня, а затем стимулировали 20 мкг каждого антитела, за исключением антитела против IgM (10 мкг). Данные получали в течение 8-10 минут. Кинетический анализ проводили на программном обеспечении FlowJo FACs (Tree Star, Inc., Ashland, Oregon). Данные представлены в качестве отношения Indo-1 405 связанный/Indo-1 1530 свободный. Все антитела против M1' сравнивали с изотипическим контрольным mIgG1 против gp120 (20 мкг). В качестве положительных контролей использовали антитело против IgM (Jackson Immuno-Research, West Grove, PA, #109-005-129) и антитело против IgE (Mae11, Genentech, Inc.). 7A6, 47H4, 47G4, 26A11 и 1C11 индуцировали поток кальция в клетках Daudi с длинным IgE. 28E9 и 42A5 индуцировали низкие уровни потока кальция. 45C1, 26B11 и 51D2 не индуцировали поток кальция.
ПРИМЕР 8
Индукция ADCC антителом против IgE/М1' 47H4v5 wt и афукозилированным антителом
Антителозависимая клеточноопосредуемая токсичность обеспечивает связывание цитотоксических клеток (через антитело) с антигенсвязывающей клеткой-мишенью, а затем уничтожает клетку-мишень цитотоксинами. Антитела против IgE/М1', обладающие активностью ADCC или усиленной активностью ADCC, могут иметь повышенную терапевтическую ценность в отношении лечения опосредуемых IgE нарушений.
Было открыто, что антитела, продуцируемые в клетках млекопитающих, которые являются афукозилированными, обладают усиленной активностью ADCC. В представленном ниже эксперименте описана продукция афукозилированного антитела против IgE/М1'.
Клетки NK выделяли из 100 мл цельной крови (RosetteSep #15065, Stem Cell Technologies). Чистоту клеток NK определяли окрашиванием антителом против CD56 человека. В каждом анализе использовали на >70% чистые CD56+ NK-клетки. Антитела против IgE/М1' и изотипический контроль в виде huIgG1 MAb против Her2 HERCEPTIN® подвергали серийному титрованию. Эти антитела (50 мкл) инкубировали с клетками BJAB, сверхэкспрессирующими IgE/М1' человека на клеточной поверхности в течение 30 минут при комнатной температуре в RPMI-1640 (без фенолового красного) (BioWhitaker #12-918F) с 1% FBS (клеточную линию получали, как описано выше). Затем к клеточной линии добавляли NK-клетки (50 мкл) в соотношении 15:1 (150000 NK-клеток к 10000 мишеней (BJAB-Long)). Анализы осуществляли в трех повторах. Затем BJAB-huLong, антитела и NK-клетки инкубировали в течение 4 часов при 37°C. После культивирования 96-луночные планшеты с U-образным дном центрифугировали и супернатанты собирали (100 мкл). Затем супернатанты тестировали в отношении высвобождения LDH с использованием LDH reaction Assay (Roche #1644793). Мишень отдельно и лизированную мишень использовали для вычисления процентной цитотоксичности. Супернатанты инкубировали в равном объеме с реакционной смесью LDH, как описано изготовителем, в течение 30-60 минут. Затем проводили считывание планшетов при 490 нм. % Цитотоксичность вычисляли следующим образом: = (экспериментальное значение - мишень отдельно)/лизированная мишень - мишень отдельно). Данные наносили на график с использованием Kaleidagraph, и для получения значений ED50 использовали кривые наилучшего соответствия.
На фиг.10 показано, что изотипическое контрольное антитело huIgG1 HEREPTIN® индуцировало цитотоксичность на низком уровне. Антитела против IgE/М1' индуцировали специфичную цитотоксичность. Форма дикого типа и афукозилированная форма антитела против IgE/М1' 47H4v5 индуцировали сходную максимальную % цитотоксичность (~70-80%). Афукозилированное 47H4v5 было более эффективным, чем форма дикого типа (EC50 афукозилированного 47H4v5 составляла ~0,83 нМ; EC50 47H4v5 дикого типа составляла ~6,6 нМ).
ПРИМЕР 9
Эффект антител против IgE/М1' у мышей hu-SCID с атопией
На фиг.12A и 13A продемонстрирована способность антител против IgE/М1' (как антител мыши, так и гуманизированных, соответственно) ингибировать продукцию IgE в сыворотке и продуцирующих IgE плазматических клеток в модели атопии hu-SCID. В эксперименте 1 (#07-0377) тестировали антитела-кандидаты против IgE/М1', а в эксперименте 2 (#07-1232) тестировали антитело-кандидат против IgE/М1'.
Доноров подвергали скринингу в отношении сывороточных уровней IgE из собственной программы доноров крови авторов изобретения Leukopack. Отбирали двух доноров для предоставления клеток для модели hu-SCID атопии, которые идентифицировали себя как имеющие аллергию и имели уровни IgE в сыворотке 1696 и 1152 нг/мл. Нормальные доноры, как правило, имеют IgE в диапазоне от <100 до 300 нг/мл.
Эксперименты с hu-SCID представлены на фиг.12A и 13A. PBMC выделяли посредством лейкофореза и градиента в плотности фиколла (GE Healthcare #17-1440-03) и количественно определяли. 108 клеток PBMC (108 на 100 мкл) инъецировали внутрибрюшинно облученным мышам SCID-beige на нулевые сутки. Для направления ответа в сторону продукции IgE мышам вводили антитело против IFNγ (BD Biosciences, San Jose, CA, #554698) и антитело против IL12 (100 мкг/доза) (BD Biosciences, San Jose, CA, #554659) на 0 и 3 сутки; и rhIL-4 (100 нг/доза) (R&D Systems, Minneapolis, MN, #204-IL-010) на 2, 3, 4 сутки. Мышам вводили экспериментальные антитела (т.е. антитело против IgE/М1') три раза в неделю (приблизительно каждые трое суток), начиная с 0 суток до конца исследования. Клеткам человека позволяли размножаться между 7 и 14 сутками, после чего мышей подвергали эвтаназии. Образцы крови получали на 7 сутки и в конце исследования. На последние сутки эксперимента мышей подвергали эвтаназии и выделяли клетки селезенки. Для анализа IgE посредством Elispot и FACs использовали суспензии отдельных клеток для определения степени восстановления клеток человека и устранения плазматических клеток с IgE.
Данные представлены в качестве среднего значения ± стандартное отклонение. Значения P вычисляли с использованием статистического программного обеспечения JMP. Тест Даннетта сравнивает средние значения групп, где все тестируемые группы тестируют против группы сравнения. Каждый парный t-критерий Стьюдента сравнивает каждую пару групп с использованием t-критерия Стьюдента. Затем применяют поправку Бонферрони для коррекции значений p для каждого парного t-критерия Стьюдента для ограничения попарных сравнений. Порог для всех значений p составляет 0,05. Процентное изменение данных, представленное на фиг.12 A-I и 13 A-H, вычисляли между группой введения и контрольной группой без нормализации к исходным уровням.
Уровни свободных IgE определяли с использованием способа ELISA для человека, в котором на 384-луночные планшеты для ELISA Maxisorp (Nalge Nunc International, Rochester, NY) наносили 1 мкг/мл моноклонального антитела MAE11 в 50 мМ карбонатном буфере, pH 9,6, при 4°C в течение ночи и блокировали 0,5% бычьим сывороточным альбумином в PBS при комнатной температуре в течение 1 часа. Стандарты (0,098-12,5 нг/мл) и трехкратные серийные разведения образцов (минимальное разведение 1:10 для избежания какого-либо эффекта сыворотки) в PBS, содержащем 0,5% бычий сывороточный альбумин, 0,05% полисорбат 20, 10 миллионных долей Proclin 300 (Supelco, Bellefonte, PA), 0,25% CHAPS (Sigma, St. Louis, MO), 0,2% бычий глобулин g (Biocell, Rancho Dominguez, CA) и 5 мМ EDTA, инкубировали на планшетах при комнатной температуре в течение 1 часа. Детекцию связанных IgE проводили посредством инкубации меченного пероксидазой антитела козы против IgE человека (Kirkegaard & Perry Laboratories, Gaithersburg, MD) в лунках в течение 1 часа. Добавляли субстрат 3,3',5,5'-тетраметилбензидин (Kirkegaard & Perry Laboratories, Gaithersburg, MD) и реакцию останавливали добавлением 1M фосфорной кислоты. Между стадиями планшеты промывали. Поглощение считывали при 450 нм на устройстве для считывания Titertek stacker reader (ICN, Costa Mesa, CA). Стандартную кривую приводили в соответствие с использованием четерехпараметрической нелинейной регрессионной программы для подгонки кривых (разработанной в Genentech). Данные, которые попадали в линейный диапазон стандартной кривой, использовали для вычисления концентрации IgE в образцах.
Панель изотипов иммуноглобулинов человека получали получением моноклонального антитела мыши (mAb) к IgG1 человека (клон 2C11, Abeam Inc., Cambridge, MA), которое разбавляли до 4 мкг/мл в 0,05M натрий-карбонатном буфере, pH 9,6, и наносили на планшеты для ELISA (384-луночные планшеты с высоким связыванием, Greiner Bio One, Monroe, NC), инкубируя в течение ночи при 4°C. После промывания 3 раза буфером для промывания (PBS/0,05% Tween-20) планшеты блокировали смесью PBS/0,5% бычий сывороточный альбумин (BSA) в течение от 1 до 2 часов. Эту и все другие инкубации проводили при комнатной температуре на орбитальном устройстве для встряхивания. Образцы сыворотки мыши разбавляли 1:100 с последующими серийными разведениями 1:3 с использованием буфера для анализа (PBS/0,5% BSA/0,05% Tween 20/0,25% CHAPS/5 мМ EDTA/15PPM Proclin). С использованием того же буфера получали серийные разведения IgG1 для стандартной кривой (12,20-1560 нг/мл). Размораживали предварительно разбавленные замороженные контроли в высокой, средней и нижней областях стандартной кривой. После стадии блокирования планшеты промывали, и образцы, стандарты и контроли добавляли в 384-луночные планшеты и инкубировали в течение 2 часов. Планшеты промывали, и биотинилированное mAb мыши к IgG1 человека (Zymed Laboratories, South San Francisco, CA) разбавляли в буфере для анализа 1:500 и добавляли в промытые планшеты для инкубации в течение 1 ч. После промывания стрептавидин-пероксидазу хрена (SA-HRP) (GE Healthcare, Piscataway, NJ) разбавляли в 1:40000 в буфере для анализа и добавляли в планшеты. После инкубации в течение 30 мин и конечной стадии промывания добавляли тетраметилбензидин (TMB) (Kirkegaard & Perry Laboratories, Gaithersburg, MD), и цвет проявляли в течение от 10 до 15 минут. Реакцию останавливали добавлением 1M фосфорной кислоты. Оптическую плотность получали с использованием устройства для считывания микропланшетов (длина волны для сравнения 450 нм, 650 нм), и концентрации образцов вычисляли, исходя из 4-параметрической подгонки к стандартным кривым. Минимальная поддающаяся количественному определению концентрация IgG1 человека в образцах сыворотки мыши составила 1,22 мкг/мл.
Этот общий способ ELISA, описанный выше, также использовали для анализа других изотипов Ig.
IgG2
MAb мыши против IgG2 человека (специфичные к цепи γ2) (Southern Biotech, Birmingham, AL) наносили на планшеты для ELISA в количестве 4 мкг/мл. Диапазон стандартной кривой для IgG2 человека составил 12,20-1560 нг/мл. Биотинилированное mAb мыши против IgG2 человека (специфичное к цепи γ2) (Southern Biotech) разбавляли до 0,5 мкг/мл и использовали в качестве антитела для детекции. SA-HRP добавляли в 384-луночные планшеты в разведении 1:10000. Минимальная поддающаяся количественному определению концентрация IgG2 человека в образцах сыворотки мыши составила 1,22 мкг/мл.
IgG3
MAb мыши против IgG3 человека (Zymed Laboratories) разбавляли до 1 мкг/мл и наносили на планшеты для ELISA. Диапазон стандартной кривой для IgG3 человека составлял 0,78-100 нг/мл. Биотинилированное mAb мыши против IgG3 человека (специфичное к цепи γ3) (Southern Biotech) разбавляли до 0,1 мкг/мл и использовали в качестве антитела для детекции. SA-HRP добавляли в 384-луночные планшеты в разведении 1:20000. Минимальная поддающаяся количественному определению концентрация IgG3 человека в образцах сыворотки мыши составила 78,1 нг/мл.
IgG4
Очищенное mAb мыши против IgG4 человека (BD Pharmingen, San Jose, CA) разбавляли до 0,25 мкг/мл и наносили на планшеты ELISA. Диапазон стандартной кривой для IgG4 человека составлял 0,20-25 нг/мл. Конъюгированное с биотином mAb мыши против IgG4 человека (BD Pharmingen) разбавляли до 0,25 мкг/мл и использовали в качестве антитела для детекции. SA-HRP добавляли в 384-луночные планшеты в разведении 1:20000. Минимальная поддающаяся количественному определению концентрация IgG4 человека в образцах сыворотки мыши составила 39,1 нг/мл.
IgA
Очищенное mAb мыши против IgA1/A2 человека (BD Pharmingen) разбавляли до 2 мкг/мл и наносили на планшеты для ELISA. Диапазон стандартной кривой для IgA человека составлял 0,20-25 нг/мл. Конъюгированное с биотином mAb мыши против IgA1/A2 человека (BD Pharmingen) разбавляли до 1 мкг/мл и использовали в качестве антитела для детекции. SA-HRP добавляли в 384-луночные планшеты добавляли в разведении 1:80000. Минимальная поддающаяся количественному определению концентрация IgA человека в образцах сыворотки мыши составила 39,1 нг/мл.
IgM
Очищенное mAb мыши против IgM человека (BD Pharmingen) разбавляли до 0,5 мкг/мл и наносили на планшеты для ELISA. Диапазон стандартной кривой для IgM человека составлял 0,78-100 нг/мл. Конъюгированное с биотином mAb против IgM мыши (BD Pharmingen) разбавляли до 0,5 мкг/мл и использовали в качестве антитела для детекции. SA-HRP добавляли в 384-луночные планшеты в разведении 1:40000. Минимальная поддающаяся количественному определению концентрация IgM человека в образцах сыворотки мыши составила 156 нг/мл.
Спленоциты Hu-SCID, спленоциты мыши или клетки лимфатических узлов подсчитывали с использованием микросфер Fluoresbrite YG (Polysciences, Inc. #18862) на проточном цитометре FACs Calibur (BD (San Jose, CA)).
Для определения частоты продуцирующих IgE плазматических клеток у мышей hu-SCID после введения rhuIL-4, антител против IFNγ и против IL-12 в течение 15 суток использовали анализы Elispot. На планшеты для Elispot (Millipore, Billerica, MA, #MSIPS4510, прозрачные) наносили разведение 1:500 первичного неконъюгированного антитела против IgE человека (AXXORA, San Diego, CA, #BET-A80-108A) в буфере для нанесения [Genentech, Inc. (A3323)] в количестве 100 мкл/лунка в течение ночи при 4°C. Затем раствор первичного антитела удаляли, и планшеты промывали два раза буфером для промывания (1X PBS, 0,05% Tween-20). Мембраны блокировали 200 мкл/лунка 0,5% BSA в 1X PBS в течение 0,5-1 часа при 37°C. Блокирующий раствор удаляли, и в планшет добавляли клетки положительного контроля или спленоциты hu-SCID. В качестве положительного контроля для анализа использовали продуцирующую IgE миеломную клеточную линию человека U266 (ATCC, Manassas, VA, #TIB196). Клетки U266 добавляли в планшет, начиная с концентрации 3000 клеток/0,1 мл (=0,032×106/мл) среды для гибридомы [RPMI 1640, 15% эмбриональная телячья сыворотка, 2 мМ L-глутамин, 10 мМ HEPES, 4,5 г/л глюкоза, 1,5 г/л бикарбонат], а затем проводили семь серийных разведений (1:2). Суспензии отдельных клеток целой селезенки ресуспендировали в 1 мл среды. В первую лунку добавляли 100 мкл. Затем проводили семь серийных разведений 1:2. Клетки гибридомы U266 и клетки селезенки инкубировали в течение ночи при 37°C. На следующие сутки планшеты промывали три раза буфером для промывания (1XPBS, 0,05% Tween-20), а затем в каждую лунку добавляли 100 мкл/лунка вторичного антитела, конъюгированного антитела против IgE-щелочная фосфатаза (Sigma, St. Louis, MO, A-3525) в количестве 1:2000 в 0,5% BSA/1X PBS и инкубировали при 37°C в течение 2 часов. Планшеты промывали три раза, а затем ополаскивали один раз ddH2О (Genentech, Inc.). В каждую лунку добавляли 100 мкл/лунка раствора BCIP/NBT (R&D Systems, Minneapolis, MN, Elispot Blue Color Module, #SEL002) и инкубировали в темноте в течение 30 минут. Затем планшеты промывали один раз ddH2О, и планшету позволяли высохнуть при комнатной температуре. Планшеты отправляли в BD Biosciences для подсчета (BD, Inc., Franklin Lakes, NJ). Количество плазматических клеток вычисляли с использованием числа выявленных пятен, кратности разведения (входные данные о клетках) и общего подсчета для клеток селезенки.
Плазматические клетки человека получали извлечением селезенок на 15 сутки из мышей hu-SCID, которым вводили антитело. Получали суспензии отдельных клеток и фильтровали. 5×106 клеток блокировали сывороткой человека (Sigma, St. Louis, MO, #S-2257) и мыши (VWR, #RLD108-0100), а затем окрашивали антителом против CD38 человека-PE (BD Biosciences, San Jose, CA, #555460) и антителом против PC человека-FITC (Dakocytomation, Glostrup, Denmark, #K2311) в буфере для промывания FACs (2% FBS, 1X PBS) на льду в течение 20 минут. Затем клетки промывали и анализировали на устройстве FACs Calibur (BD, Inc., Franklin Lakes, NJ). В качестве положительного контроля успешного переноса PBMC использовали экспрессию CD38 человека. Плазматические клетки определяли как клетки с высоким CD38, PC+.
В эксперименте #07-0377 (фиг.12A) три антитела против IgE/М1' (47H4, 26A11 и 7A6) тестировали против изотипического контрольного muIgG1 против gp120. У мышей, которым вводили изотипический контроль, образовывались IgE человека на высоком уровне к 9 суткам. Введение антител-кандидатов против IgE/М1' снижало уровни IgE на 65-84% (фиг.12B-C). Введение антитела против IgE/М1' также снижало продуцирующие IgE клетки in vivo на 19-69% (фиг.12D-E). На другие сывороточные Ig относительно не влияло введение антитела против IgE/М1' (снижение на ~30% наблюдали в случае некоторых антител против M1' для huIg1, IgG3 и IgG4 (фиг.12F-G). Снижение процентного содержания тотальных плазматических клеток селезенки наблюдали при ведении антитела против IgE/М1' (фиг.12H-I).
В эксперименте #07-1232 (фиг.13A) гуманизированное антитело против IgE/М1' (47H4v5) тестировали против изотипического контрольного антитела HERCEPTIN®-huIgG1. У мышей, которым вводили изотипический контроль, образовывались высокие уровни сывороточного IgE к 8 суткам. Введение huIgG1 против IgE/М1' снижало уровни IgE на 79% (фиг.13B-D) и продуцирующие клетки на 75% (фиг.13C-D). Не наблюдали снижения других сывороточных Ig (IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgM, IgA) (фиг.13E-F) или процентного количества тотальных плазматических клеток в селезенке (фиг.13G-H). Эти исследования демонстрируют, что антитела против IgE/М1' специфично снижают сывороточные IgE и продуцирующие IgE клетки, но не иммуноглобулины других изотипов.
ПРИМЕР 10
Трансгенные мыши с М1' человека
Получение трансгенных мышей со вставкой гена huM1'
Поскольку у мышей в норме не экспрессируется домен М1', сходный с доменом человека, авторы получили мышей с доменом М1' "встроенным в" локус IgE мыши (фиг.14A). В последовательности М1' человека использовали акцепторный участок сплайсинга М1 мыши выше нее, а затем ее подвергали слиянию с последовательностью М1 мыши ниже нее (фиг.14B). Также встраивали кассету IRES-EGFPpA-Neo с 3'-стороны последовательности M2 мыши. Эта вставка позволяет экспрессию IgE мыши с доменом М1' человека на поверхности IgE+ B-клеток. Последовательность М1' не экспрессируется на секретируемых IgE.
Скрининг линий со вставкой М1' (ПЦР)
Мышей со вставкой М1' человека генотипировали посредством ПЦР с использованием праймеров, специфичных к последовательности локуса IgE мыши и М1' человека. Используемые праймеры были следующими:
Очищенную геномную ДНК анализировали с помощью указанных выше праймеров с использованием 32 циклов следующей программы [94°C 4 мин; 94°C 1 мин; 60°C 30 с; 72°C 1 мин (30 циклов); 72°C 10 мин]. Затем продукты ПЦР разделяли на 2% агарозном геле с 0,5X TBE. Генотип дикого типа после ПЦР давал продукт размером 668 п.н., а продукт со вставкой hu-М1' имел размер 457 п.н. (фиг.14C).
Скрининг линий со вставкой М1' (Саузерн)
Клетки ES со вставкой huM1' и конечные линии мыши подвергали скринингу и подтверждали с помощью саузерн-блота. 10 мкг очищенной геномной ДНК клеток ES или Tail расщепляли посредством HindIII для левого плеча или BamHI для правого плеча в течение ночи. Затем расщепленную ДНК разделяли на 0,8% агарозном геле с 1X TAE. Затем ДНК переносили на нейлоновую мембрану (Roche #1417240) с использованием буфера для денатурации (1,5M NaCl; 0,5M NaOH) в течение ночи. Мембрану промывали, подвергали поперечному сшиванию посредством УФ, а затем погружали в раствор DIG Easy Hyb solution (Roche #1585762) на 4 часа при вращении при 46°C. Зонды получали посредством ПЦР с использованием набора PCR DIG probe Synthesis Kit, в соответствии с руководством изготовителя (Roche # 11636090910).
Праймеры для левого плеча представляли собой:
FOR 5'-TGTCTGGTGGTGGACCTGGAAAGCG (SEQ ID NO:109)
Rev 5'-TCCTCGCTCTCCTCCTCTGGTGGTG (SEQ ID NO:110)
Праймеры для правого плеча представляли собой:
FOR 5'-CCATGCAACCTAGTATCCTATTCTC (SEQ ID NO:111)
Rev 5 '-CTTTATACAGGAGAACCTAGCCCAG (SEQ ID NO:112)
Зонды тестировали против немеченого продукта ПЦР для того, чтобы убедиться в увеличенном размере и хорошем мечении DIG. Затем блоты гибридизовали в течение ночи с денатурированным зондом в течение ночи при 46°C при вращении. На следующие сутки блоты промывали и проявляли с помощью антитела против DIG согласно инструкциям изготовителя. Блоты экспонировали на пленку в течение 15-20 минут. На фиг.14D проиллюстрированы результаты саузерн-блоттинга. Мыши дикого типа давали фрагмент HindIII левого плеча размером 7,4 т.п.н., который становился фрагментом размером 3 т.п.н. в аллеле со вставкой hu-М1'. Мыши дикого типа давали фрагмент BamHI правого плеча размером 14,1 т.п.н., который становился фрагментом размером 18,1 т.п.н. у мышей со вставкой аллеля hu-М1'. Мыши дикого типа и гетерозиготные мыши представлены (фиг.14D).
ПРИМЕР 11
Трансгенная модель с Hu-М1': иммунизация TNP-OVA
В этом примере проиллюстрирована способность антител-кандидатов против IgE/М1' препятствовать образованию IgE вследствие стимуляции посредством TNP-OVA как при первичном иммунном ответе (Exp. #07-0234F; фиг.15A-I), так и при связанном с памятью иммунном ответе (Exp. #07-0234B; фиг.16A-K) на TNP-OVA. TNP-OVA или тринитрофенил-овальбумин представляет собой сильнодействующий иммуноген, часто используемый для получения сильных антительных иммунных ответов.
Данные выражают в качестве среднего значения ± стандартное отклонение. Значения P вычисляли с использованием статистического программного обеспечения JMP. Тест Даннетта сравнивает средние значения групп, где все тестируемые группы тестируют против группы сравнения. Каждый парный t-критерий Стьюдента сравнивает каждую пару групп с использованием t-критерия Стьюдента. Затем применяют поправку Бонферрони для коррекции значений p каждого парного t-критерия Стьюдента для ограничения попарных сравнений. Процентное изменение данных, полученных для первичного ответа (фиг.15A-I) и связанного с памятью иммунного ответа (фиг.A-K), вычисляли вычитанием среднего значения для неинфицированной и неиммунизированной групп из каждого значения для мыши, средние значения для групп вычисляли заново, а затем вычисляли процентное изменение против контрольной группы для каждого момента времени.
Иммунизация посредством TNP-OVA у мышей со вставкой IgE/М1' человека (C57BL/6) индуцирует сбалансированный ответ Th1/Th2 in vivo. Уровни антигенспецифичных IgE после первичной иммунизации и нагрузки достигает уровней ~10-200 нг/мл. В эксперименте #07-0234F мышей со вставкой huM1' (C57B1/6) иммунизировали посредством TNP-OVA (Biosearch Technologies, Novato, CA) (100 мкг в 2 мг квасцов на мышь внутрибрюшинно) на 0 сутки (фиг.15A). Затем мышам вводили 0,1 мг/кг антител три раза в неделю между 0 и 28 сутками (фиг.15A). В эксперименте #07-0234B мышей со вставкой huM1' (C57B1/6) иммунизировали посредством TNP-OVA/квасцы на 0 сутки (как указано выше), а затем нагружали TNP-OVA (100 мкг на мышь внутрибрюшинно) на 28 сутки (фиг.16A). Мышам вводили 10 мг/кг антител между 28 и 49 сутками (фиг.16A). У мышей проводили забор крови в ходе иммунного ответа для мониторинга антигенспецифических уровней сывороточных IgE и IgG1.
Специфичные к TNP-OVA IgE и IgG1 измеряли с использованием планшетов для ELISA (384-луночные с поверхностью MaxiSorpTM, Nunc, Neptune, NJ), на которые наносили в течение 12-18 ч при 2-8°C 25 мкл/лунка TNP-OVA (отношение TNP:OVA составляло 13:1) (Biosearch Technologies, Novato, CA), разбавленного до 0,5 мкг/мл в 50 мМ смеси карбонат натрия/бикарбонат, pH 9,6. Затем из планшетов сливали жидкость и подвергали блоттингу в сухом виде. В планшеты добавляли блокирующий буфер (PBS, 0,5% BSA, pH 7,2, 50 мкл/лунка) на 1-2 ч. Эту и все последующие инкубации проводили при комнатной температуре при осторожном встряхивании. Образцы разбавляли 1/50 в разбавителе для анализа (PBS, 0,5% BSA, 0,05% Tween-20, 0,01% Proclin 300) с последующими серийными разведениями 1/3 на одиннадцать точек. Стандарты подвергали двукратному серийному разведению в разбавителе для анализа на семь точек, начиная с 1 нг/мл для IgG1 против TNP-OVA и 3 нг/мл для IgE против TNP-OVA. Планшеты промывали три раза буфером для промывания (PBS, 0,05% Tween-20, pH 7,2) и добавляли стандарты, образцы и контроли (25 мкл/лунка) в дублированные планшеты для отдельной детекции изотипов IgG1 и IgE. После инкубации в течение 1,5-2 ч планшеты промывали шесть раз буфером для промывания. Биотинилированное mAb крысы против IgG1 и IgE мыши (BD Biosciences, San Diego, CA) разбавляли до 0,5 мкг/мл для IgG1 или 1,0 мкг/мл для IgE в разбавителе для анализа и добавляли в соответствующие планшеты (25 мкл/лунка). Планшеты инкубировали в течение 1-1,5 ч и промывали шесть раз буфером для промывания. Конъюгат стрептавидин-пероксидаза хрена (AMDEX, GE Healthcare, Piscataway, NJ) разбавляли 1/80000 для IgG1 или 1/5000 для IgE и добавляли в планшеты (25 мкл/лунка) на 30 мин. После промывания шесть раз буфером для промывания планшеты проявляли добавлением 25 мкл/лунка тетраметилбензидина (Kirkegaard & Perry Laboratories, Gaithersburg, MD) и инкубацией в течение 15 мин для IgG1 или 25 мин для IgE. Реакцию останавливали добавлением 25 мкл/лунка 1M H3PO4, и поглощение считывали при 450 нм со сравнением при 620 нм. Результаты неизвестных образцов интерполировали из 4-параметрической подгонки к стандартным кривым.
Плазматические клетки из селезенки или лимфатических узлов мыши сначала идентифицировали отделением CD138+ клеток. Эти продуцирующие IgE плазматические клетки количественно определяли способом Elispot. Для тотальных продуцирующих IgE клеток антитело против IgE (из набора BD OptEIA mIgE #555248) наносили на планшеты MultiScreen HTS (Millpore #MSIPS4W10) в разведении 1:2 с использованием буфера для нанесения ELISA в количестве 50 мкл на лунку. Нанесение проводили при 4°C в течение ночи. На следующее утро планшеты промывали 5 раз 200 мкл стерильного PBS-tween 20 (0,05%) с использованием многоканальной пипетки в вытяжном шкафу для культивирования тканей. Затем планшеты блокировали в 300 мкл PBS/5% BSA или среде для культивирования клеток (RPMI-1640, 10% FBS) в течение двух часов при комнатной температуре. Получали суспензии отдельных клеток из селезенки или лимфатического узла, и клетки количественно определяли посредством FACS (как указано выше). Клетки получали для высевания, начиная с 107 клеток с последующими 3-4-кратными разведениями для моделей иммунизации посредством TNP-OVA, или с 4×106 клеток с последующими 2-кратными разведениями для моделей инфекции Nippostrongylus. B-клеточную линию мыши A20 использовали в качестве отрицательного контроля, а клеточную линию TIB-141 использовали в качестве положительного контроля. Клеточные разведения проводили в среде для культивирования клеток (RPMI-1640 + 10% FBS). После стадии блокирования планшеты промывали один раз средой для культивирования клеток и аспирировали. Клетки высевали в объеме 100 мкл на лунку. Затем планшеты инкубировали в течение ночи при 37°C, 5% CO2. На следующие сутки планшеты промывали 6 раз с использованием SkanWasher 300 (Molecular Devices (Sunnyvale, CA)) посредством PBS-tween 20 (0,05%). Затем использовали биотинилированное вторичное антитело из набора BD OptEIA mIgE (#555248) в концентрации, указанной изготовителем, как правило, между 1:250 и 1:500 в 100 мкл/лунка. Вторичное антитело получали в PBS/1% BSA. Затем планшеты инкубировали в течение 1 часа при комнатной температуре, а затем промывали 6 раз с использованием SkanWasher300 посредством PBS-tween 20 (0,05%). Затем добавляли стрептавидин AP (R&D #SEL002) в разведении 1:60 в 100 мкл на лунку, снова получали в PBS/1% BSA и инкубировали в течение 1 часа при комнатной температуре. Затем планшеты промывали, как указано выше, 3 раза, а затем два раза ополаскивали DI-водой. Любую оставшуюся жидкость промокали бумажным полотенцем. Затем добавляли реагент для проявления, BCIP/NBT (100 мкл/лунка), и планшеты инкубировали в течение 30 минут при комнатной температуре в темноте. Затем субстрат удаляли, и планшет промывали два раза DI-водой. Планшеты переворачивали для удаления какого-либо избытка воды и позволяли высохнуть. Пятна количественно определяли с использованием препаровальной лупы.
В эксперименте #07-0234F тестировали способность антитела против IgE/М1' предотвращать ответ IgE на первичную иммунизацию посредством TNP-OVA. У мышей, которым вводили изотипическое контрольное антитело против gp120, образовывался сывороточный IgE, достигая максимальных уровней между 8 и 14 сутками (~25 нг/мл) (фиг.15B). Введение антитела против IgE/М1' препятствовало повышению сывороточного IgE к 8 (98%) и 14 (99%) суткам (фиг.15C-D). Это снижение значимо отличалось от животных, которым вводили изотипический контроль, и не значимо отличалось от неиммунизированых мышей (фиг.15C-E). На уровни антигенспецифичного IgG1 антитело против IgE/М1' только умеренно влияло на протяжении 28 суток эксперимента (фиг.15F-I).
В эксперименте #07-0234B тестировали способность антитела против IgE/М1' препятствовать вторичному ответу/связанному с памятью ответу IgE на TNP-OVA. Вторичный ответ IgE на вспомогательную инъекцию TNP-OVA на 28 сутки является более быстрым, достигая пика через 4 суток, а не на 8-9 сутки, как при первичном ответе (фиг.16B). Введение антител-кандидатов против IgE/М1', начиная с вспомогательной инъекции, на 28 сутки снижало возрастание IgE между 28 и 35 сутками (фиг.16B). Уровни IgE при введении антитела против IgE/М1' были значимо снижены по сравнению с изотипическим контролем, на 59-75% к 32 суткам и на 90-93% к 35 суткам (фиг.16C-D). К 35-42 суткам уровни IgE не отличались значимо от неиммунизированных мышей (фиг.16E). Анализ площади под кривой для этих групп по введению между 28 и 49 сутками, кроме того, демонстрирует, что антитело против IgE/М1' снижало уровни сывороточных IgE на 74-84%, и средний суточный уровень антигенспецифичного IgE также снижался на 74-83% (фиг.16F-H). После введения антитела против IgE/М1' не наблюдали значимого снижения антигенспецифичного IgG1 (фиг.16I-K).
ПРИМЕР 12
Трансгенная модель Hu-М1': модель инфекции Nippostronsylus brasiliensis
В этом примере проиллюстрирована способность антител против IgE/М1' препятствовать продукции IgE (фиг.17A-D), а также терапевтически снижать продукцию IgE при ранее индуцированной инфекции Nippostrongylus brasiliensis. Снижение продукции IgE оценивали посредством введения антител против IgE/М1' как на пике уровней IgE иммунного ответа (фиг.18A-I), так и при применении позднее при иммунном ответе (фиг.19A-G).
Nippostrongylus brasiliensis представляет собой желудочно-кишечного круглого червя, который инфицирует крыс и мышей. Его яйца выводятся в экскрементах и созревают до стадии L3 инфекционной личинки. Личинка L3 проникает в хозяина через кожу и мигрирует в кровеносные сосуды, а затем через одни или двое суток она проникает в легкое. После развития в личинку стадии L4 в легком она продвигается вдоль трахеи и пищевода хозяина и достигает тощей кишки на 2-3 сутки. Личинка созревает во взрослого червя и спаривается, и продуцирует яйца приблизительно на 5 сутки. Яйца N. brasiliensis экскретируется из хозяина вместе с экскрементами.
Мыши, инфицированные N. brasiliensis, демонстрируют исходный врожденный иммунный ответ, с последующим сильным иммунитетом 2 типа для выведения инфекции. Отложение комплемента и фибронектина выявляют на более ранней стадии инфекции для облегчения привлечения и прикрепления лейкоцитов. Эффекторные клетки, такие как эозинофилы, базофилы и клетки CD4+ Th2, привлекаются в легкое для борьбы против инфекции. Th2-цитокины, IL-4 и IL-13, играют основную роль в поддержании иммунного ответа в легком, и они требуются для выведения червя из кишечника. Ответы 2 типа характеризуются высокими уровнями продукции антител, включая IgE.
У мышей со вставкой IgE/М1' (C57BL/6) возникает сильный IgE-ответ на инфекцию N. brasiliensis, достигающий пика на 15-20 сутки (фиг.17B, 18B, 19B). Затем уровни сывороточного IgE падают до более низкого, однако, поддерживаемого повышенным, уровня. Мышей инфицировали Nippostrongylus brasiliensis на 0 сутки. Во всех трех экспериментах с инфекцией N. brasiliensis мышам вводили 10 мг/кг антител mIgG1 против IgE/М1' или изотипического контроля mIgG1 против gp120. В исследовании профилактики (фиг.17A), мышам со вставкой huM1' проводили введение три раза в неделю, начиная на 0 суток по 21 сутки. В исследовании максимальной продукции (фиг.18A), мышам со вставкой huM1' проводили введение три раза в неделю на 11 и 21 сутки. На стадии позднего вмешательства (фиг.19A), мышам со вставкой huM1' проводили введение три раза в неделю между 41 и 62 сутками.
Данные представлены в качестве среднего значения ± стандартное отклонение. Значения р вычисляли с использованием статистического программного обеспечения JMP. Тест Даннетта сравнивает средние значения групп, где все тестируемые группы тестируют против группы сравнения. Каждый парный t-критерий Стьюдента сравнивает каждую пару групп с использованием t-критерия Стьюдента. Затем применяют поправку Бонферрони для коррекции значений p каждого парного t-критерия Стьюдента для ограничения попарных сравнений. Процентное изменение данных, представленных для исследования профилактики и максимальной продукции, вычисляли вычитанием среднего значения для неинфицированной и неиммунизированной групп из каждого значения для мыши, средние значения для групп вычисляли заново, а затем вычисляли процентное изменение против контрольной группы для каждого момента времени. На стадии позднего вмешательства процентное изменение вычисляли в каждой группе по введению посредством сравнения суток 48 и 55 с сутками 41. Продуцирующие IgE плазматические клетки определяли и оценивали посредством Elispot, как описано ранее в примере 12.
В исследовании профилактики тестировали способность антитела против IgE/М1' предотвращать повышение IgE в ответ на первичную инфекцию Nippostrongylus. Контрольные мыши (которым вводили изотип) достигали высоких уровней продукции IgE к 15 суткам после инфекции (~3000 нг/мл). Мыши, которым вводили антитело против IgE/М1', обладали сниженной продукцией IgE после инфекции (снижение на 93-94% по сравнению с mIgG1 против gp120), которая не отличалась значимо от неинфицированных мышей (фиг.17B-D).
В исследовании максимальной продукции тестировали способность антитела против IgE/М1' терапевтически снижать уровни IgE на пике ответа IgE на инфекцию N. brasiliensis. Все группы по введению достигали высоких уровней IgE (~2000 нг/мл) к 11 суткам после инфекции Nippostrongylus (фиг.18B). Введение антитела против IgE/М1' начинали на 11 сутки на пике этого ответа. Кандидаты mIgG1 против IgE/М1' снижали уровни сывороточного IgE на 82-89% в пределах четырех суток после введения (фиг.18C-D). К 21 суткам уровни IgE у мышей, которым вводили антитело против IgE/М1', были снижены на 97-98%, достигая уровней, которые статистически не отличались от группы неинфицированных контролей (фиг.18E). Продуцирующие IgE плазматические клетки количественно определяли посредством Elispot против IgE. Инфекция N. brasiliensis индуцировала значительные количества продуцирующих IgE клеток как в брызжеечном лимфатическом узле (~30 клеток на 4×106; фиг.18F), так и в селезенке (~10 клеток на 4×106; фиг.18G). К 21 суткам введение антитела против IgE/М1' снижало продуцирующие IgE клетки в брызжеечном лимфатическом узле на 88-94% и в селезенке на 57-66%. Частота тотальных плазматических клеток (клеток CD138+) в брызжеечном лимфатическом узле и селезенке была повышена во всех группах по введению по сравнению с неинфицированными мышами, и не было значимого изменения частоты тотальных плазматических клеток в любом органе вследствие введения антитела против IgE/М1' (фиг.18H-I). Эти результаты демонстрируют способность антител против IgE/М1' снижать сывороточный IgE до номинальных уровней посредством устранения продуцирующих IgE клеток in vivo, даже при применении на пиковом уровне продукции IgE.
В исследовании позднего вмешательства тестировали способность антитела против IgE/М1' снижать поддерживающийся низкий уровень IgE, который достигается поздно в инфекционном цикле. Все группы по введению достигали пика продукции IgE приблизительно на 15 сутки. При начале введения антитела против IgE/М1' на 41 сутки существовали некоторые отличия в уровнях сывороточного IgE среди групп по введению (фиг.19B-C), которые нормализовали, принимая уровни 41 суток за 100% (фиг.19D). Введение антитела против IgE/М1' значимо снижало уровни сывороточного IgE по сравнению с изотипическим контрольным mIgG1 против gp120 между 48 и 55 сутками (фиг.19E-G). К 48 и 55 суткам уровни IgE были снижены на 64-75% и 75-84% соответственно по сравнению с изотипическим контролем (mIgG1 против gp120), которые снижали на 20% и 37% соответственно (фиг.19F-G). Отличие в средних уровнях IgE между группами по введению не отличалось значимо от группы изотипического контроля (gp120) перед началом лечения антителом против IgE/М1' (фиг.19E). Однако введение антител против IgE/М1' показало более резкое и значительное снижение уровней сывороточного IgE, чем снижение, наблюдаемое в контрольной группе к 48 суткам (фиг.19F) и 55 суткам (фиг.19G). Процентное изменение и значение p (d41) вычисляли посредством сравнения каждой группы по введению на 48 или 55 сутки с исходным значением той же группы на 41 сутки перед введением.
ПРИМЕР 13
Экспрессия антитела против IgE/М1' в клетках млекопитающих
В этом примере проиллюстрировано получение потенциально гликозилированных форм требуемого белка или антитела посредством рекомбинантной экспрессии в клетках млекопитающих.
В качестве экспрессирующего вектора используют вектор, pRK5 (см. EP 307247, опубликованный 15 марта 1989 года). Необязательно, ДНК, кодирующую легкую и/или тяжелую цепь антитела против IgE/М1', лигируют в pRK5 с выбранными ферментами рестрикции для обеспечения встраивания такой ДНК с использованием способов лигирования, таких как описаны в Sambrook et al., выше.
В одном варианте осуществления выбранные клетки-хозяева могут представлять собой клетки 293. Клетки 293 человека (ATCC CCL 1573) выращивают до смыкания монослоя в планшетах для культивирования тканей в среде, такой как DMEM, дополненной эмбриональной телячьей сывороткой и, необязательно, питательными компонентами и/или антибиотиками. Приблизительно 10 мкг, если ДНК, кодирующая антитело против IgE/М1', лигирована в pRK5, смешивают приблизительно с 1 мкг ДНК, кодирующей РНК гена VA [Thimmappaya et al., Cell, 31:543 (1982)], и растворяют в 500 мкл 1 мМ Tris-HCl, 0,1 мМ EDTA, 0,227 M CaCl2. К этой смеси капельно добавляют 500 мкл 50 мМ HEPES (pH 7,35), 280 мМ NaCl, 1,5 мМ NaPO4, и позволяют образовываться осадку в течение 10 минут при 25°C. Осадок суспендируют и добавляют к клеткам 293 и позволяют оседать в течение приблизительно четырех часов при 37°C. Культуральную среду аспирируют и добавляют 2 мл 20% глицерина в PBS в течение 30 секунд. Затем клетки 293 промывают бессывороточной средой, добавляют свежую среду, и клетки инкубируют в течение приблизительно 5 суток.
Приблизительно через 24 часа после трансфекций культуральную среду удаляют и заменяют культуральной средой (отдельно) или культуральной средой, содержащей 200 мкКи/мл 35S-цистеина и 200 мкКи/мл 35S-метионина. После инкубации в течение 12 часов кондиционированную среду собирают, концентрируют на центробежном фильтре и наносят на гель с 15% SDS. Обработанный гель можно высушивать и проявлять на пленку в течение выбранного периода времени для выявления наличия антитела против IgE/М1'. Культуры, содержащие трансфицированные клетки, можно подвергать дальнейшей инкубации (в бессывороточной среде), и среду тестировать в выбранных биологических анализах.
В альтернативном способе антитело против IgE/М1' можно вводить в клетки 293 временно с использованием способа с сульфатом декстрана, описанным Somparyrac et al., Proc. Natl. Acad. Sci., 12:7575 (1981). Клетки 293 выращивают до максимальной плотности во вращающемся флаконе и добавляют 700 мкг ДНК, кодирующей антитело против IgE/М1', лигированной в pRK5. Сначала клетки концентрируют из вращающейся колбы посредством центрифугирования и промывают посредством PBS. Осадок в виде ДНК-декстрана инкубируют на клеточном осадке в течение четырех часов. Клетки обрабатывают 20% глицерином в течение 90 секунд, промывают средой для культивирования тканей и повторно помещают во вращающуюся колбу, содержащую среду, 5 мкг/мл бычьего инсулина и 0,1 мкг/мл бычьего трансферрина. Приблизительно через четверо суток кондиционированную среду центрифугируют и фильтруют для удаления клеток и дебриса. Затем образец, содержащий экспрессированное антитело против IgE/М1', можно концентрировать и очищать выбранным способом, таким как диализ и/или колоночная хроматография.
В другом варианте осуществления антитело против IgE/М1' можно экспрессировать в клетках CHO. ДНК, кодирующую антитело против IgE/М1', лигированную в pRK5, можно трансфицировать в клетки CHO с использованием известных реагентов, таких как CaPO4 или DEAE-декстран. Как описано выше, культуры клеток можно инкубировать, и среду заменять культуральной средой (отдельно) или средой, содержащей радиоактивную метку, такую как 35S-метионин. После определения наличия антитела против IgE/М1' культуральную среду можно заменять бессывороточной средой. Предпочтительно, культуры инкубируют в течение приблизительно 6 суток, а затем собирают кондиционированную среду. Затем среду, содержащую экспрессированное антитело против IgE/М1', можно концентрировать и очищать любым выбранным способом.
Меченные эпитопом варианты антитела против IgE/М1' также можно экспрессировать в клетках-хозяевах CHO. ДНК, кодирующую антитело против IgE/М1', лигированную в pRK5, можно субклонировать из вектора pRK5. Вставку субклона можно подвергать ПЦР для слияния в рамке считывания с выбранной эпитопной меткой, такой как метка поли-his в экспрессирующем векторе Baculovirus. Затем меченную поли-his ДНК, кодирующую вставку антитела против IgE/М1', можно субклонировать в запускаемый SV40 вектор, содержащий селектируемый маркер, такой как DHFR, для селекции стабильных клонов. В конце, клетки CHO можно трансфицировать (как описано выше) запускаемым SV40 вектором. Для подтверждения экспрессии можно проводить мечение, как описано выше. Затем культуральную среду, содержащую экспрессированное меченное поли-His антитело против IgE/М1', можно концентрировать и очищать любым выбранным способом, например Ni2+-хелатной аффинной хроматографией.
Антитело против IgE/М1' также можно экспрессировать в клетках CHO и/или COS способом временной экспрессии или в клетках CHO любым способом стабильной экспрессии.
Стабильную экспрессию в клетках CHO проводят с использованием следующего способа. Белки экспрессируют в качестве конструкции IgG (иммуноадгезин), в которой кодирующие последовательности для растворимых форм (например, внеклеточных доменов) соответствующих белков подвергают слиянию с последовательностью константной области IgG1, содержащей шарнирную область, CH2- и CH2-домены и/или которая представляет собой меченную поли-His форму.
После амплификации посредством ПЦР соответствующие ДНК субклонируют в экспрессирующий вектор CHO с использованием стандартных способов, как описано в Ausubel et al., Current Protocols of Molecular Biology, Unit 3,16, John Wiley and Sons (1997). Векторы, экспрессирующие СНО, конструируют, чтобы они имели совместимые участки рестрикции с 5'- и 3'-стороны от представляющей интерес ДНК для обеспечения удобного переноса кДНК'. Вектор, используемый для экспрессии в клетках CHO, является таким, как описано в Lucas et al., Nucl. Acids Res. 24:9 (1774-1779 (1996), и в нем используется ранний промотор/энхансер SV40 для запуска экспрессии представляющей интерес кДНК и дигидрофолатредуктазы (DHFR). Экспрессия DHFR позволяет селекцию для стабильного поддержания плазмиды после трансфекции.
Двенадцать микрограмм требуемой плазмидной ДНК вводят приблизительно в 10 миллионов клеток CHO с использованием коммерчески доступных реагентов для трансфекции SUPERFECT® (Quiagen), DOSPER® или FUGENE® (Boehringer Mannheim). Клетки выращивают, как описано в Lucas et al. выше. Приблизительно 3×10-7 клеток замораживают в ампуле для последующего выращивания и продукции, как описано ниже.
Ампулы, содержащие плазмидную ДНК, размораживают помещением на водяную баню и смешивают встряхиванием. Содержимое пипетируют в центрифужной пробирке, содержащей 10 мл среды, и центрифугируют при 1000 об/мин в течение 5 минут. Супернатант аспирируют, и клетки ресуспендируют в 10 мл селективной среды (0,2 мкм фильтрованного PS20 с 5% 0,2 мкм диафильтрованной эмбриональной телячьей сывороткой). Затем клетки разделяют на аликвоты в 100 мл во вращающейся колбе, содержащей 90 мл селективной среды. Через 1-2 суток клетки переносят в 250 мл вращающуюся колбу со 150 мл селективной среды для роста и инкубируют при 37°C. Еще через 2-3 суток в 250-мл, 500-мл и 2000-мл вращающиеся колбы высевают 3×105 клеток/мл. Клеточные среды заменяют свежей средой посредством центрифугирования и ресуспендирования в среде для продукции. Хотя можно использовать любую пригодную для CHO среду, в действительности можно использовать среду для продукции, описанную в патенте США № 5122469, выданном 16 июня 1992 года. В 3-литровую вращающуюся колбу для продукции высевают 1,2×106 клеток/мл. На 0 сутки определяют число клеток и pH. На 1 сутки проводят забор образцов из вращающейся колбы и начинают барботирование фильтрованным воздухом. На 2 сутки проводят забор образцов из вращающейся колбы, температуру изменяют до 33°C и добавляют 30 мл 500 г/л глюкозы и 0,6 мл 10% пеногасителя (например, 35% эмульсии полидиметилсилоксана, Dow Corning 365 Medical Grade Emulsion). На протяжении продукции, pH при необходимости корректируют для поддержания его на уровне приблизительно 7,2. Через 10 суток, или когда жизнеспособность падает до уровня менее 70%, клеточную культуру собирают центрифугированием и фильтруют через 0,22-мкм фильтр. Фильтрат либо хранят при 4°C, либо сразу помещают на колонки для очистки.
Для меченных поли-His конструкций белки очищают с использованием колонки Ni-NTA (Qiagen). Перед очисткой в кондиционированную среду добавляют имидазол до концентрации 5 мМ. Кондиционированную среду нагнетают в 6-мл колонку Ni-NTA, уравновешенную при 4°C, в 20 мМ буфере Hepes, pH 7,4, содержащем 0,3M NaCl и 5 мМ имидазол со скоростью потока 4-5 мл/мин. После нагрузки колонку промывают дополнительным буфером для уравновешивания, и белок элюируют буфером для уравновешивания, содержащим 0,25 M имидазол. Затем высокоочищенный белок обессоливают в буфере для хранения, содержащем 10 мМ Hepes, 0,14 M NaCl и 4% маннит, pH 6,8, c помощью 25-мл колонки G25 Superfine (Pharmacia) и хранят при -80°C.
Конструкции иммуноадгезина (Fc-содержащие) очищают из кондиционированной среды следующим образом. Кондиционированную среду нагнетают в 5-мл колонку с белком A (Pharmacia), уравновешенную в 20 мМ Na-фосфатном буфере, pH 6,8. После нагрузки колонку интенсивно промывают буфером для уравновешивания, а затем элюируют 100 мМ лимонной кислотой, pH 3,5. Элюированный белок сразу нейтрализуют сбором 1-мл фракций в пробирки, содержащие 275 мкл 1M буфера Tris, pH 9. Высокоочищенный белок впоследствии обессоливают в буфере для хранения, как описано выше для меченных поли-His белков. Гомогенность оценивают посредством SDS-полиакриламидных гелей и посредством N-концевого секвенирования аминокислот способом деградации Эдмана.
Депонирование материала
Следующие материалы были депонированы в American Type Culture Collection, 10801 University Blvd., Manassas, VA 20110-2209, USA (ATCC):
Материал | ATCC № депозита | Дата депонирования |
7A6.18 | PTA-8268 | 21 марта 2007 года |
1C11.10.20 | PTA-8267 | 21 марта 2007 года |
47G4.6.2 | PTA-8266 | 21 марта 2007 года |
47H4.12.10 | PTA-8270 | 21 марта 2007 года |
42H4.6.9 | PTA-8260 | 21 марта 2007 года |
42A5.20.11 | PTA-8265 | 21 марта 2007 года |
26A11.6.5 | PTA-8262 | 21 марта 2007 года |
51D2.22.15 | PTA-8264 | 21 марта 2007 года |
45C1.6.14 | PTA-8269 | 21 марта 2007 года |
26B11.3.12 | PTA-8261 | 21 марта 2007 года |
28E9.12.9 | PTA-8263 | 21 марта 2007 года |
Депонирование этих материалов было сделано согласно условиям Будапештского договора о международном признании депонирования микроорганизмов для целей патентной процедуры и правил в нем (Будапештский договор). Это гарантирует поддержание жизнеспособной культуры депонированных материалов в течение тридцати (30) лет от даты депонирования, и по меньшей мере в течение пяти (5) лет после самого последнего запроса образца. Депонированные материалы станут доступными в ATCC по условиям Будапештского договора, и они являются объектом соглашения между Genentech, Inc. и ATCC, которая гарантирует постоянную и неограниченную доступность потомства культуры депонированного материала обществу при выдаче соответствующего патента США или при открытии доступа обществу патентной заявки США или другой страны, в зависимости от того, что наступит ранее, и гарантирует доступность потомства лицу, определенному комиссаром по патентам и торговым маркам США, уполномоченному для этого согласно 35 USC В§ 122 и правилам для комиссаров в соответствии с ним (включая 37 CFR В§ 1.14 с конкретной ссылкой на 886 OG 638).
Правопреемник настоящей заявки согласен, что, если депонированная культура материалов погибнет или будет утрачена или разрушена при культивировании в пригодных условиях, материалы будут быстро заменены при уведомлении другими такими же материалами.
Доступность депонированного материала не следует истолковывать как разрешение применять на практике изобретение в нарушение прав, предоставляемых по распоряжению какого-либо правительства согласно его патентным законам.
Представленное выше письменное описание считают достаточным для того, чтобы специалист мог применять изобретение на практике. Настоящее изобретение не ограничено объемом примеров, представленных в настоящем документе. Действительно, различные модификации изобретения в дополнение к модификациям, представленным и описанным в настоящем документе, станут очевидными специалистам в данной области, исходя из представленного выше описания, и они попадают в объем прилагаемой формулы изобретения.
Claims (46)
1. Антитело против IgE/M1′ или его антигенсвязывающий фрагмент, которое специфично связывает эпитоп в сегменте M1' IgE, определяемом остатками от 317 до 351 SEQ ID NO: 1, и которое индуцирует апоптоз в экспрессирующих IgE В-клетках, где указанное антитело содержит вариабельную тяжелую цепь и вариабельную легкую цепь, где вариабельная тяжелая цепь содержит HVR-H1, HVR-H2 и HVR-H3 и вариабельная легкая цепь содержит HVR-L1, HVR-L2 и HVR-L3 и где указанные HVR-H1, HVR-H2, HVR-H3, HVR-L1, HVR-L2 и HVR-L3 выбирают из:
a. HVR-L1 -
i) остатки 24-34 SEQ ID NOS: 21, 22, 23, 24, 25 или 26,
ii) остатки 24-40 SEQ ID NOS: 27 или 28,
iii) остатки 24-39 SEQ ID NOS: 29, 30 или 31;
b. HVR-L2 -
i) остатки 50-56 SEQ ID NOS: 21, 22, 23, 24, 25 или 26,
ii) остатки 56-62 SEQ ID NOS: 27 или 28,
iii) остатки 55-61 SEQ ID NOS: 29, 30 или 31;
c. HVR-L3 -
i) остатки 89-97 SEQ ID NOS: 21, 22, 23, 24, 25 или 26,
ii) остатки 55-61 SEQ ID NOS: 27 или 28,
iii) остатки 94-102 SEQ ID NOS: 29, 30 или 31;
d. HVR-H1 -
i) остатки 26-35 SEQ ID NOS: 33, 34 или 35,
ii) остатки 26-35 SEQ ID NOS: 36 или 37,
iii) остатки 26-35 SEQ ID NOS: 38, 39, 41 или 42;
e. HVR-H2 -
i) остатки 49-66 SEQ ID NOS: 33, 34 или 35,
ii) остатки 49-66 SEQ ID NOS: 36 или 37,
iii) остатки 49-66 SEQ ID NOS: 38, 39, 41 или 42;
f. HVR-H3 -
i) остатки 97-102 SEQ ID NOS: 33, 34 или 35,
ii) остатки 97-111 SEQ ID NOS: 36 или 37,
iii) остатки 97-106 SEQ ID NOS: 38, 39, 41 или 42.
a. HVR-L1 -
i) остатки 24-34 SEQ ID NOS: 21, 22, 23, 24, 25 или 26,
ii) остатки 24-40 SEQ ID NOS: 27 или 28,
iii) остатки 24-39 SEQ ID NOS: 29, 30 или 31;
b. HVR-L2 -
i) остатки 50-56 SEQ ID NOS: 21, 22, 23, 24, 25 или 26,
ii) остатки 56-62 SEQ ID NOS: 27 или 28,
iii) остатки 55-61 SEQ ID NOS: 29, 30 или 31;
c. HVR-L3 -
i) остатки 89-97 SEQ ID NOS: 21, 22, 23, 24, 25 или 26,
ii) остатки 55-61 SEQ ID NOS: 27 или 28,
iii) остатки 94-102 SEQ ID NOS: 29, 30 или 31;
d. HVR-H1 -
i) остатки 26-35 SEQ ID NOS: 33, 34 или 35,
ii) остатки 26-35 SEQ ID NOS: 36 или 37,
iii) остатки 26-35 SEQ ID NOS: 38, 39, 41 или 42;
e. HVR-H2 -
i) остатки 49-66 SEQ ID NOS: 33, 34 или 35,
ii) остатки 49-66 SEQ ID NOS: 36 или 37,
iii) остатки 49-66 SEQ ID NOS: 38, 39, 41 или 42;
f. HVR-H3 -
i) остатки 97-102 SEQ ID NOS: 33, 34 или 35,
ii) остатки 97-111 SEQ ID NOS: 36 или 37,
iii) остатки 97-106 SEQ ID NOS: 38, 39, 41 или 42.
2. Антитело против IgE/M1' или его антигенсвязывающий фрагмент, которое специфично связывает эпитоп в M1'-сегменте IgE, определяемом остатками от 317 до 351 SEQ ID NO: 1, и специфично устраняет продуцирующие IgE В-клетки, когда млекопитающему in vivo вводят терапевтически эффективное количество, где указанное антитело содержит вариабельную тяжелую цепь и вариабельную легкую цепь, где вариабельная тяжелая цепь содержит HVR-H1, HVR-H2 и HVR-H3 и вариабельная легкая цепь содержит HVR-L1, HVR-L2 и HVR-L3 и где указанные HVR-H1, HVR-Н2, HVR-H3, HVR-L1, HVR-L2 и HVR-L3 выбирают из:
a. HVR-L1 -
i) остатки 24-34 SEQ ID NOS: 21, 22, 23, 24, 25 или 26,
ii) остатки 24-40 SEQ ID NOS: 27 или 28,
iii) остатки 24-39 SEQ ID NOS: 29, 30 или 31;
b. HVR-L2 -
i) остатки 50-56 SEQ ID NOS: 21, 22, 23, 24, 25 или 26,
ii) остатки 56-62 SEQ ID NOS: 27 или 28,
iii) остатки 55-61 SEQ ID NOS: 29, 30 или 31;
c. HVR-L3 -
i) остатки 89-97 SEQ ID NOS: 21, 22, 23, 24, 25 или 26,
ii) остатки 55-61 SEQ ID NOS: 27 или 28,
iii) остатки 94-102 SEQ ID NOS: 29, 30 или 31;
d. HVR-H1 -
i) остатки 26-35 SEQ ID NOS: 33, 34 или 35,
ii) остатки 26-35 SEQ ID NOS: 36 или 37,
iii) остатки 26-35 SEQ ID NOS: 38, 39, 41 или 42;
e. HVR-H2 -
i) остатки 49-66 SEQ ID NOS: 33, 34 или 35,
ii) остатки 49-66 SEQ ID NOS: 36 или 37,
iii) остатки 49-66 SEQ ID NOS: 38, 39, 41 или 42;
f. HVR-H3 -
i) остатки 97-102 SEQ ID NOS: 33, 34 или 35,
ii) остатки 97-111 SEQ ID NOS: 36 или 37,
iii) остатки 97-106 SEQ ID NOS: 38, 39, 41 или 42.
a. HVR-L1 -
i) остатки 24-34 SEQ ID NOS: 21, 22, 23, 24, 25 или 26,
ii) остатки 24-40 SEQ ID NOS: 27 или 28,
iii) остатки 24-39 SEQ ID NOS: 29, 30 или 31;
b. HVR-L2 -
i) остатки 50-56 SEQ ID NOS: 21, 22, 23, 24, 25 или 26,
ii) остатки 56-62 SEQ ID NOS: 27 или 28,
iii) остатки 55-61 SEQ ID NOS: 29, 30 или 31;
c. HVR-L3 -
i) остатки 89-97 SEQ ID NOS: 21, 22, 23, 24, 25 или 26,
ii) остатки 55-61 SEQ ID NOS: 27 или 28,
iii) остатки 94-102 SEQ ID NOS: 29, 30 или 31;
d. HVR-H1 -
i) остатки 26-35 SEQ ID NOS: 33, 34 или 35,
ii) остатки 26-35 SEQ ID NOS: 36 или 37,
iii) остатки 26-35 SEQ ID NOS: 38, 39, 41 или 42;
e. HVR-H2 -
i) остатки 49-66 SEQ ID NOS: 33, 34 или 35,
ii) остатки 49-66 SEQ ID NOS: 36 или 37,
iii) остатки 49-66 SEQ ID NOS: 38, 39, 41 или 42;
f. HVR-H3 -
i) остатки 97-102 SEQ ID NOS: 33, 34 или 35,
ii) остатки 97-111 SEQ ID NOS: 36 или 37,
iii) остатки 97-106 SEQ ID NOS: 38, 39, 41 или 42.
3. Антитело по п.1 или 2, где
a. HVR-L1 содержит остатки 24-39 SEQ ID NO: 31;
b. HVR-L2 содержит остатки 55-61 SEQ ID NO: 31;
c. HVR-L3 содержит остатки 94-102 SEQ ID NO: 31;
d. HVR-H1 содержит остатки 26-35 SEQ ID NO: 41;
e. HVR-H2 содержит остатки 49-66 SEQ ID NO: 41;
f. HVR-H3 содержит остатки 97-106 SEQ ID NO: 41.
a. HVR-L1 содержит остатки 24-39 SEQ ID NO: 31;
b. HVR-L2 содержит остатки 55-61 SEQ ID NO: 31;
c. HVR-L3 содержит остатки 94-102 SEQ ID NO: 31;
d. HVR-H1 содержит остатки 26-35 SEQ ID NO: 41;
e. HVR-H2 содержит остатки 49-66 SEQ ID NO: 41;
f. HVR-H3 содержит остатки 97-106 SEQ ID NO: 41.
4. Антитело против IgE/M1' или его антигенсвязывающий фрагмент, которое специфично связывает эпитоп в сегменте M1' IgE, определяемом остатками от 317 до 351 SEQ ID NO: 1, и которое индуцирует апоптоз в экспрессирующих IgE В-клетках, где указанное антитело содержит вариабельную область легкой цепи, выбираемую из SEQ ID NOS: 21-31, и вариабельную область тяжелой цепи, выбираемую из SEQ ID NOS: 33-39, 41 и 42.
5. Антитело по п.4, где вариабельная область легкой цепи представляет собой SEQ ID NO: 31 и вариабельная область тяжелой цепи представляет собой SEQ ID NO: 41.
6. Антитело против IgE/M1' или его антигенсвязывающий фрагмент, которое специфично связывает эпитоп в M1'-сегменте IgE, определяемом остатками от 317 до 351 SEQ ID NO: 1, и специфично устраняет продуцирующие IgE В-клетки, когда млекопитающему in vivo вводят терапевтически эффективное количество, где указанное антитело содержит вариабельную область легкой цепи, выбираемую из SEQ ID NOS: 21-31, и вариабельную область тяжелой цепи, выбираемую из SEQ ID NOS: 33-39, 41 и 42.
7. Антитело по п.6, где вариабельная область легкой цепи представляет собой SEQ ID NO: 31, и вариабельная область тяжелой цепи представляет собой SEQ ID NO: 41.
8. Антитело по любому из пп.1, 2, 4-7, где антитело связывает IgE человека, макака-резуса или яванского макака.
9. Антитело по п.8, которое снижает тотальный сывороточный IgE.
10. Антитело по п.8, которое снижает свободный сывороточный IgE.
11. Антитело по п.9, где IgE является аллергенспецифичным.
12. Антитело по п.8, которое является химерным.
13. Антитело по п.8, которое является гуманизированным.
14. Антитело по п.8, которое является человеческим.
15. Антитело по п.1, которое является афукозилированным.
16. Композиция для лечения опосредуемого IgE нарушения, содержащая терапевтически эффективное количество антитела или его антигенсвязывающего фрагмента по любому из пп.1-15 в сочетании по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым носителем.
17. Композиция для лечения опосредуемого IgE нарушения, содержащая терапевтически эффективное количество антитела или его антигенсвязывающего фрагмента по любому из пп.1-15 в сочетании по меньшей мере с одним фармацевтически приемлемым носителем и одним или несколькими лекарственными средствами, выбранными из группы, состоящей из антитела против IgE, антигистамина, бронходилятатора, глюкокортикоида, NSAID, антагониста TNF, антагониста интегрина, иммунодепрессивного средства, антагониста IL-4, антагониста IL-13, двойного антагониста IL-4/IL-13, DMARD, антитела, которое связывается с В-клеточным поверхностным маркером, и антагониста BAFF.
18. Выделенная нуклеиновая кислота, которая кодирует антитело или его антигенсвязывающий фрагмент по любому из пп.1-15.
19. Нуклеиновая кислота по п.18, где кодируемое антитело является афукозилированным.
20. Вектор экспрессии, в котором нуклеиновая кислота по п.18 является функционально связанной.
21. Клетка-хозяин для получения апоптотического антитела против IgE/M1' или его функционального фрагмента, содержащая вектор по п.20.
22. Клетка-хозяин по п.21, которая представляет собой клетку млекопитающего.
23. Клетка-хозяин по п.22, которая представляет собой клетку яичника китайского хомячка.
24. Способ получения апоптотического антитела против IgE/M1' или функционального фрагмента, включающий культивирование клетки-хозяина по п.21 в условиях, пригодных для экспрессии антитела или фрагмента, и выделение антитела или фрагмента.
25. Изделие, включающее композицию по п.16 и вкладыш в упаковку с указанием применения для лечения опосредуемого IgE нарушения.
26. Изделие по п.25, которое представляет собой флакон.
27. Изделие по п.25, которое представляет собой предварительно заполненный шприц.
28. Изделие по п.27, дополнительно содержащее инъецирующее устройство.
29. Изделие по п.28, которое представляет собой автоматический впрыскиватель.
30. Способ специфичного устранения продуцирующих IgE В-клеток, включающий введение млекопитающему терапевтически эффективного количества антитела по любому из пп.1-15.
31. Способ по п.30, дополнительно включающий снижение тотального сывороточного IgE.
32. Способ по п.31, дополнительно включающий снижение свободного сывороточного IgE.
33. Способ по п.31, где IgE является аллергенспецифичным.
34. Способ по п.30, где антитело обладает активностью ADCC.
35. Способ лечения опосредуемого IgE нарушения, включающий введение терапевтически эффективного количества антитела по любому из пп.1-15.
36. Способ по п.35, где антитело специфично устраняет экспрессирующие IgE В-клетки.
37. Способ по п.35, где антитело снижает тотальный сывороточный IgE.
38. Способ по п.37, где антитело снижает свободный сывороточный IgE.
39. Способ по п.37, где IgE является аллергенспецифичным.
40. Способ по п.35, где опосредуемое IgE нарушение выбрано из группы, состоящей из аллергического ринита, аллергической астмы, неаллергической астмы, атопического дерматита, аллергической гастроэнтеропатии, анафилаксии, крапивницы, пищевой аллергии, аллергического бронхолегочного аспергиллеза, паразитарных заболеваний, интерстициального цистита, гипер-IgE-синдрома, атаксии-телеангиэктазии, синдрома Вискотта-Олдрича, атимической лимфоплазии, IgE-миеломы, реакции "трансплантат против хозяина" и аллергической пурпуры.
41. Способ лечения опосредуемого IgE нарушения, включающий введение терапевтически эффективного количества антитела по любому из пп.1-15 в сочетании с терапевтически эффективным количеством по меньшей мере одного лекарственного средства, выбранного из группы, состоящей из антитела против IgE, антигистамина, бронходилятатора, глюкокортикоида, NSAID, противоотечного средства, средства от кашля, аналгетика, TNF-антагониста, антагониста интегрина, иммунодепрессивного средства, антагониста IL-4, антагониста IL-13, двойного антагониста IL-4/IL-13, DMARD, антитела, которое связывается с В-клеточным поверхностным маркером, и антагониста BAFF.
42. Способ лечения опосредуемого IgE нарушения, включающий комбинированную схему лечения из введения терапевтически эффективного количества антитела по любому из пп.1-15 до, одновременно или после проведения известного способа лечения аллергических нарушений.
43. Способ по п.42, где известный способ лечения аллергического нарушения включает введение антитела против IgE, антигистамина, бронходилятатора, глюкокортикоида, нестероидного противовоспалительного средства, иммунодепрессанта, антагониста IL-4, антагониста IL-13, двойного антагониста IL-4/IL-13, противоотечного средства, средства от кашля или аналгетика.
44. Способ по п.42, где известный способ лечения аллергического нарушения включает схему лечения с десенсибилизацией аллергеном.
45. Способ профилактики индуцируемой аллергеном продукции IgE, включающий введение терапевтически эффективного количества антитела по любому из пп.1-15.
46. Способ снижения индуцируемой аллергеном продукции IgE, включающий введение терапевтически эффективного количества антитела по любому из пп.1-15.
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US89633907P | 2007-03-22 | 2007-03-22 | |
US60/896,339 | 2007-03-22 | ||
PCT/US2008/057819 WO2008116149A2 (en) | 2007-03-22 | 2008-03-21 | Apoptotic anti- ige antibodies binding the membrane-bound ige |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2009138932A RU2009138932A (ru) | 2011-04-27 |
RU2500686C2 true RU2500686C2 (ru) | 2013-12-10 |
Family
ID=39709011
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2009138932/10A RU2500686C2 (ru) | 2007-03-22 | 2008-03-21 | АПОПТОТИЧЕСКИЕ АНТИТЕЛА ПРОТИВ IgE |
Country Status (32)
Country | Link |
---|---|
US (6) | US8071097B2 (ru) |
EP (2) | EP2132230B1 (ru) |
JP (3) | JP5723594B2 (ru) |
KR (1) | KR101555068B1 (ru) |
CN (2) | CN103554263B (ru) |
AR (1) | AR066198A1 (ru) |
AU (1) | AU2008228778B2 (ru) |
BR (1) | BRPI0808291A2 (ru) |
CA (1) | CA2681341A1 (ru) |
CL (1) | CL2008000839A1 (ru) |
CO (1) | CO6241138A2 (ru) |
CR (1) | CR11035A (ru) |
CY (1) | CY1115257T1 (ru) |
DK (1) | DK2132230T3 (ru) |
EC (1) | ECSP099645A (ru) |
ES (1) | ES2478242T3 (ru) |
HK (1) | HK1194743A1 (ru) |
HR (1) | HRP20140661T1 (ru) |
IL (1) | IL200752A0 (ru) |
MA (1) | MA31312B1 (ru) |
MX (1) | MX2009010092A (ru) |
NZ (1) | NZ580553A (ru) |
PE (2) | PE20140771A1 (ru) |
PL (1) | PL2132230T3 (ru) |
PT (1) | PT2132230E (ru) |
RS (1) | RS53402B (ru) |
RU (1) | RU2500686C2 (ru) |
SI (1) | SI2132230T1 (ru) |
TW (1) | TWI464178B (ru) |
UA (1) | UA102994C2 (ru) |
WO (1) | WO2008116149A2 (ru) |
ZA (1) | ZA201205868B (ru) |
Cited By (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2706582C2 (ru) * | 2015-04-13 | 2019-11-19 | Пфайзер Инк. | Химерные антигенные рецепторы, нацеленные на антиген созревания B-клеток |
RU2715606C2 (ru) * | 2015-02-20 | 2020-03-02 | Киссеи Фармасьютикал Ко., Лтд. | СЛИТАЯ С Fc α-ЦЕПЬ ВЫСОКОАФФИННОГО РЕЦЕПТОРА IgE |
RU2736974C1 (ru) * | 2017-04-21 | 2020-11-23 | Ами Фарм Ко., Лтд. | Инъецируемая композиция для уменьшения локализованного жира без болевого синдрома, отёка и побочных эффектов и способ ее получения |
RU2761632C2 (ru) * | 2014-12-05 | 2021-12-13 | Мемориал Слоан-Кеттеринг Кэнсер Сентер | Химерные антигенные рецепторы, нацеленные на антиген созревания в-клеток, и их применение |
RU2796162C2 (ru) * | 2018-01-08 | 2023-05-17 | ДжиАй ИННОВЕЙШН, ИНК. | Внеклеточный домен альфа-субъединицы fc-рецептора ige, фармацевтическая композиция, содержащая его, и способ его получения |
Families Citing this family (61)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2003057881A1 (fr) * | 2001-12-28 | 2003-07-17 | Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha | Procede de stabilisation d'une proteine |
JP4571620B2 (ja) * | 2003-04-01 | 2010-10-27 | インセルム(アンスティチュ・ナショナル・ドゥ・ラ・サンテ・エ・ドゥ・ラ・ルシェルシュ・メディカル) | 肝炎cウイルスe1e2複合体に対する抗体、hcv粒子の組成物及び医薬組成物 |
CA2624081C (en) | 2005-09-29 | 2014-09-16 | Medimmune, Inc. | Method of identifying membrane ig specific antibodies and use thereof for targeting immunoglobulin-producing precursor cells |
UA102994C2 (ru) | 2007-03-22 | 2013-09-10 | Дженентек, Инк. | АНТИТЕЛО, КОТОРОЕ СПЕЦИФИЧНО СВЯЗЫВАЕТСЯ С IgE/M1' И ИНДУЦИРУЕТ АПОПТОЗ В ЭКСПРЕССИРУЮЩИХ IgE В-КЛЕТКАХ |
JP6161233B2 (ja) | 2008-03-31 | 2017-07-12 | ジェネンテック, インコーポレイテッド | 喘息の治療及び診断のための組成物及び方法 |
AU2014203008B2 (en) * | 2009-02-25 | 2016-03-31 | Academia Sinica | Anti-CepsilonmX antibodies capable of binding to human mIgE on B lymphocytes |
CN102482351B (zh) * | 2009-02-25 | 2015-03-18 | 中央研究院 | 能与人B淋巴细胞上的mIgE结合的抗CεmX抗体 |
ES2495367T3 (es) * | 2009-04-29 | 2014-09-17 | The Henry M. Jackson Foundation For The Advancement Of Military Medicine, Inc. | Anticuerpos monoclonales de ERG |
EP2427497B1 (fr) | 2009-05-07 | 2016-12-07 | Stallergenes | Utilisation d'immunoglobulines igg1 et/ou de ligands du récepteur cd32 pour le traitement de maladies et manifestations inflammatoires par voie mucosale |
US8263581B2 (en) | 2009-07-03 | 2012-09-11 | Jdp Therapeutics, Inc. | Non-sedating antihistamine injection formulations and methods of use thereof |
US8513259B2 (en) | 2009-07-03 | 2013-08-20 | Jdp Therapeutics, Inc. | Non-sedating antihistamine injection formulations and methods of use thereof |
US8741591B2 (en) | 2009-10-09 | 2014-06-03 | The Research Foundation For The State University Of New York | pH-insensitive glucose indicator protein |
EP2384766A1 (en) * | 2010-05-03 | 2011-11-09 | Helmholtz Zentrum München Deutsches Forschungszentrum für Gesundheit und Umwelt (GmbH) | Novel antibody to a carbonic anhydrase |
US10017762B2 (en) * | 2010-11-24 | 2018-07-10 | The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health & Human Services | Compositions and methods for treating or preventing lupus |
CN105175542B (zh) | 2010-12-16 | 2018-12-18 | 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 | 与th2抑制相关的诊断和治疗 |
US9795618B2 (en) * | 2014-02-28 | 2017-10-24 | University Of Cincinnati | Methods and compositions for suppressing IgE-mediated anaphylaxis |
US10086005B2 (en) | 2011-04-12 | 2018-10-02 | University Of Cincinnati | Methods for suppressing allergic reactions |
CA2838952C (en) | 2011-06-13 | 2020-11-24 | Stefan Bassarab | Anti-psgl-1 antibodies and uses thereof |
EP3378535B1 (en) | 2011-10-28 | 2023-01-04 | Prothena Biosciences Limited | Humanized antibodies that recognize alpha-synuclein |
AR089434A1 (es) | 2011-12-23 | 2014-08-20 | Genentech Inc | Procedimiento para preparar formulaciones con alta concentracion de proteinas |
CA2863953A1 (en) | 2012-01-27 | 2013-08-01 | Neotope Biosciences Limited | Humanized antibodies that recognize alpha-synuclein |
JP2015506950A (ja) * | 2012-01-31 | 2015-03-05 | ジェネンテック, インコーポレイテッド | 抗ig−em1’抗体およびそれを用いる方法 |
WO2013158274A1 (en) * | 2012-04-20 | 2013-10-24 | Academia Sinica | ANTI-MIGE ANTIBODIES THAT BIND TO THE JUNCTION BETWEEN CH4 AND CεMX DOMAINS |
WO2013173687A1 (en) | 2012-05-18 | 2013-11-21 | Genentech, Inc. | High-concentration monoclonal antibody formulations |
US10543278B2 (en) | 2012-09-12 | 2020-01-28 | Ramot At Tel-Aviv University Ltd. | Immunoparticles and methods of generating and using same |
UA118441C2 (uk) | 2012-10-08 | 2019-01-25 | Протена Біосаєнсиз Лімітед | Антитіло, що розпізнає альфа-синуклеїн |
CN105143260A (zh) * | 2013-03-13 | 2015-12-09 | 中央研究院 | 特异于人类膜结合型IgE的CEMX上的新颖抗原决定部位的抗体及其用于治疗IgE介导的疾病的用途 |
CN105121471A (zh) * | 2013-04-16 | 2015-12-02 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 帕妥珠单抗变体及其评估 |
TWI755763B (zh) | 2013-06-04 | 2022-02-21 | 美商再生元醫藥公司 | 藉由投與il-4r抑制劑以治療過敏及增強過敏原-特異之免疫療法的方法 |
CN105324746B (zh) * | 2013-06-19 | 2019-08-13 | 索尼公司 | 显示控制设备、显示控制方法和程序 |
US10513555B2 (en) | 2013-07-04 | 2019-12-24 | Prothena Biosciences Limited | Antibody formulations and methods |
TWI634900B (zh) | 2013-07-11 | 2018-09-11 | 再生元醫藥公司 | 藉由投與il-4r抑制劑治療嗜酸性食道炎的方法 |
CN105849280B (zh) | 2013-10-23 | 2020-11-06 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 诊断和治疗嗜酸性粒细胞紊乱的方法 |
US20170101460A1 (en) * | 2014-01-10 | 2017-04-13 | Allermabs Co. Ltd. | Transgenic animals capable of producing humanized ige at much higher levels than mouse ige |
RU2704999C2 (ru) | 2014-02-28 | 2019-11-01 | Ридженерон Фармасьютикалз, Инк. | Способ лечения кожной инфекции путем введения антагониста il-4r |
US10562973B2 (en) | 2014-04-08 | 2020-02-18 | Prothena Bioscience Limited | Blood-brain barrier shuttles containing antibodies recognizing alpha-synuclein |
PT3157951T (pt) * | 2014-06-17 | 2020-08-24 | Academia Sinica | Anticorpos anti-ige humanizados que reticulam cd23 em linfócitos b, mas não sensibilizam mastócitos |
CN107074938A (zh) * | 2014-10-16 | 2017-08-18 | 豪夫迈·罗氏有限公司 | 抗‑α‑突触核蛋白抗体和使用方法 |
RS61781B1 (sr) | 2014-12-05 | 2021-06-30 | Memorial Sloan Kettering Cancer Center | Antitela koja ciljaju antigen za sazrevanje b-ćelija i postupci upotrebe |
US20180186896A1 (en) | 2015-07-07 | 2018-07-05 | Affiris Ag | Vaccines for the treatment and prevention of ige mediated diseases |
WO2017011728A1 (en) * | 2015-07-15 | 2017-01-19 | Washington University | ANTIBODIES TO TUMOR ASSOCIATED COMPLEX N-GLYCANS WITH TERMINAL GlcNAcBeta RESIDUES AND METHODS OF USE THEREOF |
JP6068582B2 (ja) * | 2015-08-07 | 2017-01-25 | アカデミア シニカAcademia Sinica | Bリンパ球上のヒトmIgEに結合可能な抗CεmX抗体 |
WO2017132457A1 (en) * | 2016-01-28 | 2017-08-03 | Janssen Biotech, Inc. | BISPECIFIC ANTI-TNF-α/IL-17A ANTIBODIES AND ANTI-TNF-α ANTIBODIES AND METHODS OF THEIR USE |
EP3484517A4 (en) | 2016-07-18 | 2020-04-15 | Ramot at Tel-Aviv University Ltd. | MODULAR PLATFORM FOR TARGETED THERAPEUTICS |
US11384156B2 (en) | 2016-07-25 | 2022-07-12 | The Nemours Foundation | Adoptive T-cell therapy using EMPD-specific chimeric antigen receptors for treating IgE-mediated allergic diseases |
MX2019002344A (es) | 2016-09-01 | 2019-09-06 | Regeneron Pharma | Metodos de prevenir o tratar la alergia administrando un antagonista de il-4r. |
WO2018057776A1 (en) | 2016-09-22 | 2018-03-29 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for treating severe atopic dermatitis by administering an il-4r inhibitor |
WO2018089335A1 (en) * | 2016-11-09 | 2018-05-17 | North Carolina State University | Treatment of allergic diseases with chimeric protein |
EP3558366A1 (en) | 2016-12-22 | 2019-10-30 | H. Hoffnabb-La Roche Ag | Methods and formulations for reducing reconstitution time of lyophilized polypeptides |
EP4269594A3 (en) | 2017-02-17 | 2023-12-20 | Fred Hutchinson Cancer Center | Combination therapies for treatment of bcma-related cancers and autoimmune disorders |
US11053309B2 (en) | 2017-08-04 | 2021-07-06 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for treating active eosinophilic esophagitis |
JP7286665B2 (ja) | 2017-10-31 | 2023-06-05 | ワンネス バイオテック カンパニー リミティド | IgE介在アレルギー性疾患の治療 |
EP3703688A2 (en) | 2017-11-01 | 2020-09-09 | Juno Therapeutics, Inc. | Antibodies and chimeric antigen receptors specific for b-cell maturation antigen |
WO2019090003A1 (en) | 2017-11-01 | 2019-05-09 | Juno Therapeutics, Inc. | Chimeric antigen receptors specific for b-cell maturation antigen (bcma) |
CA3226165A1 (en) | 2018-02-09 | 2019-08-15 | Genentech, Inc. | Therapeutic and diagnostic methods for mast cell-mediated inflammatory diseases |
CA3099066A1 (en) | 2018-05-13 | 2019-11-21 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods for treating atopic dermatitis by administering an il-4r inhibitor |
US20220034880A1 (en) * | 2018-10-01 | 2022-02-03 | The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University | High specificity and sensitivity immunosorbent diagnostic assays with simultaneous resolution of multiple antibody isotypes |
US11964016B2 (en) * | 2019-03-21 | 2024-04-23 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Combination of IL-4/IL-13 pathway inhibitors and plasma cell ablation for treating allergy |
IL289613B2 (en) | 2019-08-05 | 2023-09-01 | Regeneron Pharma | IL-4R antagonist in combination with a scit regimen to increase immunotherapeutic efficacy and tolerability to a grass-specific allergen |
CN111411066B (zh) * | 2020-03-30 | 2022-08-23 | 江南大学 | 一种双途径复合产神经氨酸枯草芽孢杆菌及构建方法 |
CN117467016B (zh) * | 2023-12-27 | 2024-03-12 | 北京索莱宝科技有限公司 | 人IgA的抗体、抗体组合及其应用 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5342924A (en) * | 1987-12-31 | 1994-08-30 | Tanox Biosystems, Inc. | Extracellular segments of human ε immunoglobulin anchoring peptides and antibodies specific therefor |
US6682735B2 (en) * | 1997-07-02 | 2004-01-27 | Genentech, Inc. | Anti-IgE antibodies |
Family Cites Families (30)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4714759A (en) * | 1985-12-02 | 1987-12-22 | Whitaker Jr Robert B | Immunotoxin therapy of allergy |
US5514776A (en) | 1987-12-31 | 1996-05-07 | Tanox Biosystems, Inc. | Peptides representing antigenic epitopes of dog IgE present on B cell but not basophil surface |
US5449760A (en) | 1987-12-31 | 1995-09-12 | Tanox Biosystems, Inc. | Monoclonal antibodies that bind to soluble IGE but do not bind IGE on IGE expressing B lymphocytes or basophils |
US5254671A (en) | 1990-04-27 | 1993-10-19 | Tanox Biosystems, Inc. | Extracellular segments of human e immunoglobulin anchoring peptides and antibodies specific therefor |
US5362643A (en) | 1989-06-21 | 1994-11-08 | Tanox Biosystems | Antibodies to epitopes present on membrane-bound but not secreted IGA |
US5079344A (en) | 1989-06-21 | 1992-01-07 | Tanox Biosystems, Inc. | Antigenic epitopes present on membrane-bound but not secreted IgA |
US5428133A (en) | 1987-12-31 | 1995-06-27 | Tanox Biosystems, Inc. | Chimeric anti-human IgE-monoclonal antibody which binds to secreted IgE and membrane-bound IgE expressed by IgE-expressing B cells but notto IgE bound to FC receptors on basophils |
US5614611A (en) | 1987-12-31 | 1997-03-25 | Tanox Biosystems, Inc. | Humanized monoclonal antibodies binding to IgE-bearing B cells but not basophils |
US5089603A (en) | 1989-06-21 | 1992-02-18 | Tanox Biosystems, Inc. | Antigenic epitopes present on membrane-bound but not secreted iga |
US5091313A (en) | 1988-08-05 | 1992-02-25 | Tanox Biosystems, Inc. | Antigenic epitopes of IgE present on B cell but not basophil surface |
US5274075A (en) * | 1987-12-31 | 1993-12-28 | Tanox Biosystems, Inc. | Newly identified human epsilon immunoglobulin peptides and related products |
US5231026A (en) | 1987-12-31 | 1993-07-27 | Tanox Biosystems, Inc. | DNA encoding murine-human chimeric antibodies specific for antigenic epitopes of IgE present on the extracellular segment of the membrane domain of membrane-bound IgE |
US5484907A (en) | 1989-06-21 | 1996-01-16 | Tanox Biosystems, Inc. | Nucleotides coding for the extracellular membrane-bound segment of IgA |
US5690934A (en) | 1987-12-31 | 1997-11-25 | Tanox Biosystems, Inc. | Peptides relating to the extracellular membrane-bound segment of human alpha chain |
EP0617127A1 (en) | 1987-12-31 | 1994-09-28 | Tanox Biosystems, Inc. | Antigenic epitopes on B cell-bound IgE Immunoglobulins |
US5260416A (en) | 1987-12-31 | 1993-11-09 | Tanox Biosystems, Inc. | Antigenic epitopes present on membrane-bound but not secreted IgE |
US5252467A (en) | 1987-12-31 | 1993-10-12 | Tanox Biosystems, Inc. | Method of making antibodies to antigenic epitopes of IGE present on B cells but not basophil cell surface or secreted, soluble IGE |
US5422258A (en) | 1987-12-31 | 1995-06-06 | Tanox Biosystems, Inc. | Methods for producing high affinity anti-human IgE-monoclonal antibodies which binds to IgE on IgEabearing B cells but not basophils |
US5292867A (en) | 1988-11-16 | 1994-03-08 | Tanox Biosystems, Inc. | Chimeric monoclonal antibodies which bind to the extracellular segment of the membrane-bound domain of a human membrane-bound immunoglobulin |
US5310875A (en) | 1989-06-21 | 1994-05-10 | Tanox Biosystems, Inc. | Peptides corresponding to membrane-bound IgA |
ES2107454T3 (es) | 1990-01-23 | 1997-12-01 | Tanox Biosystems Inc | Segmentos extracelulares de peptidos de anclaje de la inmunoglobulina ige humana, y anticuerpos especificos para los mismos. |
US5625126A (en) * | 1990-08-29 | 1997-04-29 | Genpharm International, Inc. | Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies |
WO1992017207A1 (en) | 1991-03-26 | 1992-10-15 | Tanox Biosystems, Inc. | MONOCLONAL ANTIBODIES WHICH BIND TO SECRETED AND MEMBRANE-BOUND IgE, BUT NOT TO IgE ON BASOPHILS |
EP0787150A1 (en) | 1994-10-25 | 1997-08-06 | United Biomedical, Inc. | SYNTHETIC IgE MEMBRANE ANCHOR PEPTIDE IMMUNOGENS FOR THE TREATMENT OF ALLERGY |
US6172213B1 (en) | 1997-07-02 | 2001-01-09 | Genentech, Inc. | Anti-IgE antibodies and method of improving polypeptides |
WO2004070010A2 (en) | 2003-02-01 | 2004-08-19 | Tanox, Inc. | A method for generating high affinity antibodies |
CN1926149A (zh) * | 2004-02-02 | 2007-03-07 | 泰勒公司 | 新的IgE表位的鉴别 |
ES2337473T3 (es) | 2004-02-19 | 2010-04-26 | Genentech, Inc. | Anticuerpos reparadores con cdr. |
CA2624081C (en) * | 2005-09-29 | 2014-09-16 | Medimmune, Inc. | Method of identifying membrane ig specific antibodies and use thereof for targeting immunoglobulin-producing precursor cells |
UA102994C2 (ru) | 2007-03-22 | 2013-09-10 | Дженентек, Инк. | АНТИТЕЛО, КОТОРОЕ СПЕЦИФИЧНО СВЯЗЫВАЕТСЯ С IgE/M1' И ИНДУЦИРУЕТ АПОПТОЗ В ЭКСПРЕССИРУЮЩИХ IgE В-КЛЕТКАХ |
-
2008
- 2008-03-21 UA UAA200910649A patent/UA102994C2/ru unknown
- 2008-03-21 AU AU2008228778A patent/AU2008228778B2/en not_active Ceased
- 2008-03-21 SI SI200831219T patent/SI2132230T1/sl unknown
- 2008-03-21 CN CN201310472607.5A patent/CN103554263B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2008-03-21 KR KR1020097021946A patent/KR101555068B1/ko active IP Right Grant
- 2008-03-21 WO PCT/US2008/057819 patent/WO2008116149A2/en active Application Filing
- 2008-03-21 PT PT87441796T patent/PT2132230E/pt unknown
- 2008-03-21 US US12/053,063 patent/US8071097B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2008-03-21 MX MX2009010092A patent/MX2009010092A/es active IP Right Grant
- 2008-03-21 RS RS20140360A patent/RS53402B/en unknown
- 2008-03-21 EP EP08744179.6A patent/EP2132230B1/en active Active
- 2008-03-21 ES ES08744179.6T patent/ES2478242T3/es active Active
- 2008-03-21 NZ NZ580553A patent/NZ580553A/en not_active IP Right Cessation
- 2008-03-21 RU RU2009138932/10A patent/RU2500686C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2008-03-21 CA CA002681341A patent/CA2681341A1/en not_active Abandoned
- 2008-03-21 DK DK08744179.6T patent/DK2132230T3/da active
- 2008-03-21 EP EP13165235.6A patent/EP2644621B1/en active Active
- 2008-03-21 CN CN2008800169084A patent/CN101679528B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2008-03-21 BR BRPI0808291A patent/BRPI0808291A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2008-03-21 TW TW097110305A patent/TWI464178B/zh not_active IP Right Cessation
- 2008-03-21 PL PL08744179T patent/PL2132230T3/pl unknown
- 2008-03-21 JP JP2010501123A patent/JP5723594B2/ja active Active
- 2008-03-24 CL CL200800839A patent/CL2008000839A1/es unknown
- 2008-03-24 PE PE2013000851A patent/PE20140771A1/es not_active Application Discontinuation
- 2008-03-24 PE PE2008000526A patent/PE20090726A1/es not_active Application Discontinuation
- 2008-03-25 AR ARP080101217A patent/AR066198A1/es unknown
-
2009
- 2009-09-06 IL IL200752A patent/IL200752A0/en unknown
- 2009-09-18 CR CR11035A patent/CR11035A/es unknown
- 2009-09-22 EC EC2009009645A patent/ECSP099645A/es unknown
- 2009-10-15 MA MA32281A patent/MA31312B1/fr unknown
- 2009-10-22 CO CO09118682A patent/CO6241138A2/es active IP Right Grant
-
2011
- 2011-10-25 US US13/281,224 patent/US8618274B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2011-10-25 US US13/281,126 patent/US8632775B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2011-10-25 US US13/281,209 patent/US8586040B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2011-10-25 US US13/281,158 patent/US20120144512A1/en not_active Abandoned
-
2012
- 2012-08-03 ZA ZA2012/05868A patent/ZA201205868B/en unknown
-
2013
- 2013-12-20 US US14/137,927 patent/US20140115729A1/en not_active Abandoned
-
2014
- 2014-07-08 CY CY20141100511T patent/CY1115257T1/el unknown
- 2014-07-11 HR HRP20140661AT patent/HRP20140661T1/hr unknown
- 2014-08-05 HK HK14107981.0A patent/HK1194743A1/zh not_active IP Right Cessation
- 2014-08-22 JP JP2014169311A patent/JP2015017103A/ja not_active Withdrawn
-
2016
- 2016-09-12 JP JP2016178023A patent/JP2017048190A/ja active Pending
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US5342924A (en) * | 1987-12-31 | 1994-08-30 | Tanox Biosystems, Inc. | Extracellular segments of human ε immunoglobulin anchoring peptides and antibodies specific therefor |
US6682735B2 (en) * | 1997-07-02 | 2004-01-27 | Genentech, Inc. | Anti-IgE antibodies |
RU2242515C2 (ru) * | 1997-07-02 | 2004-12-20 | Джинентех, Инк. | Улучшенное анти-ige антитело (варианты) и способ улучшения полипептидов |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
BENHAMOU LE et al. "Anti-immunoglobulins induce death by apoptosis in WEHI-231 B lymphoma cells", Eur J Immunol. (1990); 20(6):реферат. * |
CHEN H.Y. et al. Monoclonal antibodies against the C(epsilon)mX domain of human membrane-bound IgE and their potential use for targeting IgE-expressing B cells." Int Arch Allergy Immunol. (2002);128(4):315-24. * |
Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2761632C2 (ru) * | 2014-12-05 | 2021-12-13 | Мемориал Слоан-Кеттеринг Кэнсер Сентер | Химерные антигенные рецепторы, нацеленные на антиген созревания в-клеток, и их применение |
RU2715606C2 (ru) * | 2015-02-20 | 2020-03-02 | Киссеи Фармасьютикал Ко., Лтд. | СЛИТАЯ С Fc α-ЦЕПЬ ВЫСОКОАФФИННОГО РЕЦЕПТОРА IgE |
RU2706582C2 (ru) * | 2015-04-13 | 2019-11-19 | Пфайзер Инк. | Химерные антигенные рецепторы, нацеленные на антиген созревания B-клеток |
RU2736974C1 (ru) * | 2017-04-21 | 2020-11-23 | Ами Фарм Ко., Лтд. | Инъецируемая композиция для уменьшения локализованного жира без болевого синдрома, отёка и побочных эффектов и способ ее получения |
US11298314B2 (en) | 2017-04-21 | 2022-04-12 | Ami Pharm Co., Ltd. | Injectable composition for localized fat reduction without pain, edema, and side effects, and method for preparing same |
RU2796162C2 (ru) * | 2018-01-08 | 2023-05-17 | ДжиАй ИННОВЕЙШН, ИНК. | Внеклеточный домен альфа-субъединицы fc-рецептора ige, фармацевтическая композиция, содержащая его, и способ его получения |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2500686C2 (ru) | АПОПТОТИЧЕСКИЕ АНТИТЕЛА ПРОТИВ IgE | |
JP2010521989A5 (ru) | ||
US20130243750A1 (en) | Anti-ige antibodies and methods using same | |
ES2534905T3 (es) | Anticuerpos anti-VEGF | |
US9562097B2 (en) | Use of anti-CD83 agonist antibodies for treating autoimmune diseases | |
US20230024528A1 (en) | Methods of use of anti-trem2 antibodies | |
US20170029520A1 (en) | Compositions and methods for use in organ transplantation | |
AU2014215990A1 (en) | Apoptotic anti-IgE antibodies binding the membrane-bound IgE |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20150322 |