RU2490019C2 - Применение отобранных молочнокислых бактерий для уменьшения атеросклероза - Google Patents
Применение отобранных молочнокислых бактерий для уменьшения атеросклероза Download PDFInfo
- Publication number
- RU2490019C2 RU2490019C2 RU2009141617/15A RU2009141617A RU2490019C2 RU 2490019 C2 RU2490019 C2 RU 2490019C2 RU 2009141617/15 A RU2009141617/15 A RU 2009141617/15A RU 2009141617 A RU2009141617 A RU 2009141617A RU 2490019 C2 RU2490019 C2 RU 2490019C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- lactobacillus
- reuteri
- atherosclerosis
- strains
- cells
- Prior art date
Links
- 201000001320 Atherosclerosis Diseases 0.000 title claims abstract description 38
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 title abstract description 30
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 title abstract description 15
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 title abstract description 15
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 title description 2
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims abstract description 52
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 claims abstract description 35
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 claims abstract description 33
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 claims abstract description 32
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 claims abstract description 19
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 claims abstract description 12
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 11
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 9
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims abstract 2
- MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N (3s)-4-[[(2s)-1-[[(2s)-1-[[(1s)-1-carboxy-2-hydroxyethyl]amino]-4-methyl-1-oxopentan-2-yl]amino]-5-(diaminomethylideneamino)-1-oxopentan-2-yl]amino]-3-[[2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]acetyl]amino]-4-oxobutanoic acid Chemical compound OC[C@@H](C(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCCN=C(N)N)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@@H](N)CCCCN MZOFCQQQCNRIBI-VMXHOPILSA-N 0.000 claims description 18
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 16
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 9
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 claims description 9
- 238000008214 LDL Cholesterol Methods 0.000 claims description 6
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 6
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 abstract description 10
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 8
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 abstract description 3
- 241000304886 Bacilli Species 0.000 abstract 1
- 241000186604 Lactobacillus reuteri Species 0.000 description 70
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 47
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 29
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 29
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 27
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 26
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 26
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 25
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 24
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 24
- 239000003613 bile acid Substances 0.000 description 21
- 229940001882 lactobacillus reuteri Drugs 0.000 description 16
- 108090000174 Interleukin-10 Proteins 0.000 description 15
- 239000003833 bile salt Substances 0.000 description 15
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 15
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 15
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 description 15
- 102000003814 Interleukin-10 Human genes 0.000 description 13
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 13
- 229920006008 lipopolysaccharide Polymers 0.000 description 13
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 13
- 210000003289 regulatory T cell Anatomy 0.000 description 13
- 235000013618 yogurt Nutrition 0.000 description 12
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 11
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 11
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 11
- 239000003636 conditioned culture medium Substances 0.000 description 10
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 10
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 10
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 9
- 108020000411 Toll-like receptor Proteins 0.000 description 9
- 102000002689 Toll-like receptor Human genes 0.000 description 9
- 229940093761 bile salts Drugs 0.000 description 9
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 9
- 108010065805 Interleukin-12 Proteins 0.000 description 8
- 102000013462 Interleukin-12 Human genes 0.000 description 8
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 8
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 description 8
- 230000004044 response Effects 0.000 description 8
- XOAAWQZATWQOTB-UHFFFAOYSA-N taurine Chemical compound NCCS(O)(=O)=O XOAAWQZATWQOTB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 238000011161 development Methods 0.000 description 7
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 7
- 229940117681 interleukin-12 Drugs 0.000 description 7
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 7
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- HSINOMROUCMIEA-FGVHQWLLSA-N (2s,4r)-4-[(3r,5s,6r,7r,8s,9s,10s,13r,14s,17r)-6-ethyl-3,7-dihydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1h-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]-2-methylpentanoic acid Chemical compound C([C@@]12C)C[C@@H](O)C[C@H]1[C@@H](CC)[C@@H](O)[C@@H]1[C@@H]2CC[C@]2(C)[C@@H]([C@H](C)C[C@H](C)C(O)=O)CC[C@H]21 HSINOMROUCMIEA-FGVHQWLLSA-N 0.000 description 6
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 6
- 240000006024 Lactobacillus plantarum Species 0.000 description 6
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 6
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 6
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 6
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 6
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 6
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 6
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 6
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 5
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 5
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 5
- 108010007622 LDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 5
- 102000007330 LDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 5
- 241000917009 Lactobacillus rhamnosus GG Species 0.000 description 5
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 5
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 5
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 5
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 5
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 5
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 5
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 5
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 5
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 5
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 5
- 229940059406 lactobacillus rhamnosus gg Drugs 0.000 description 5
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 5
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 5
- 108010000231 Choloylglycine hydrolase Proteins 0.000 description 4
- 108090000604 Hydrolases Proteins 0.000 description 4
- 102000004157 Hydrolases Human genes 0.000 description 4
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 4
- 206010020961 Hypocholesterolaemia Diseases 0.000 description 4
- 241000186606 Lactobacillus gasseri Species 0.000 description 4
- 241000218588 Lactobacillus rhamnosus Species 0.000 description 4
- 102000003945 NF-kappa B Human genes 0.000 description 4
- 108010057466 NF-kappa B Proteins 0.000 description 4
- 108010025020 Nerve Growth Factor Proteins 0.000 description 4
- 102000015336 Nerve Growth Factor Human genes 0.000 description 4
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 239000003858 bile acid conjugate Substances 0.000 description 4
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 4
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 4
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 4
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 4
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 4
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 4
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 4
- 208000027866 inflammatory disease Diseases 0.000 description 4
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 4
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 4
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 4
- 229940053128 nerve growth factor Drugs 0.000 description 4
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 4
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 4
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 4
- 229960003080 taurine Drugs 0.000 description 4
- 230000006433 tumor necrosis factor production Effects 0.000 description 4
- 108010074051 C-Reactive Protein Proteins 0.000 description 3
- 241001647372 Chlamydia pneumoniae Species 0.000 description 3
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 3
- 108010049003 Fibrinogen Proteins 0.000 description 3
- 102000008946 Fibrinogen Human genes 0.000 description 3
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 3
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 3
- 102000015779 HDL Lipoproteins Human genes 0.000 description 3
- 108010010234 HDL Lipoproteins Proteins 0.000 description 3
- 208000035150 Hypercholesterolemia Diseases 0.000 description 3
- 240000001046 Lactobacillus acidophilus Species 0.000 description 3
- 235000013956 Lactobacillus acidophilus Nutrition 0.000 description 3
- 244000199866 Lactobacillus casei Species 0.000 description 3
- 235000013965 Lactobacillus plantarum Nutrition 0.000 description 3
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 3
- 101710140204 Signal transducer and transcription activator Proteins 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 3
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 3
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 3
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 3
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 3
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 206010009887 colitis Diseases 0.000 description 3
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 3
- 239000000430 cytokine receptor antagonist Substances 0.000 description 3
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 3
- 210000003038 endothelium Anatomy 0.000 description 3
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 3
- 229940012952 fibrinogen Drugs 0.000 description 3
- 230000006870 function Effects 0.000 description 3
- 230000036541 health Effects 0.000 description 3
- 230000000871 hypocholesterolemic effect Effects 0.000 description 3
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 3
- 230000036039 immunity Effects 0.000 description 3
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 229940076144 interleukin-10 Drugs 0.000 description 3
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 3
- 229940039695 lactobacillus acidophilus Drugs 0.000 description 3
- 229940072205 lactobacillus plantarum Drugs 0.000 description 3
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 3
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 3
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 3
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 3
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 3
- 208000010125 myocardial infarction Diseases 0.000 description 3
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 3
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 3
- 230000019491 signal transduction Effects 0.000 description 3
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 3
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 3
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 3
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 3
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 3
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 3
- AKXKFZDCRYJKTF-UHFFFAOYSA-N 3-Hydroxypropionaldehyde Chemical compound OCCC=O AKXKFZDCRYJKTF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 2
- 208000037260 Atherosclerotic Plaque Diseases 0.000 description 2
- 206010003645 Atopy Diseases 0.000 description 2
- 102100032752 C-reactive protein Human genes 0.000 description 2
- 102000016289 Cell Adhesion Molecules Human genes 0.000 description 2
- 108010067225 Cell Adhesion Molecules Proteins 0.000 description 2
- 229920001268 Cholestyramine Polymers 0.000 description 2
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 2
- 206010012735 Diarrhoea Diseases 0.000 description 2
- 241000194033 Enterococcus Species 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 241000590002 Helicobacter pylori Species 0.000 description 2
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 2
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 2
- 108090001007 Interleukin-8 Proteins 0.000 description 2
- 102000004890 Interleukin-8 Human genes 0.000 description 2
- FFFHZYDWPBMWHY-VKHMYHEASA-N L-homocysteine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCS FFFHZYDWPBMWHY-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- 241000186842 Lactobacillus coryniformis Species 0.000 description 2
- 241000186840 Lactobacillus fermentum Species 0.000 description 2
- 241000186605 Lactobacillus paracasei Species 0.000 description 2
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 2
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 2
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 2
- BHTRKEVKTKCXOH-UHFFFAOYSA-N Taurochenodesoxycholsaeure Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(=O)NCCS(O)(=O)=O)C)C1(C)CC2 BHTRKEVKTKCXOH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100040247 Tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000003143 atherosclerotic effect Effects 0.000 description 2
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 2
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 2
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 2
- 208000006170 carotid stenosis Diseases 0.000 description 2
- 230000003915 cell function Effects 0.000 description 2
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 2
- 235000015140 cultured milk Nutrition 0.000 description 2
- 238000010227 cup method (microbiological evaluation) Methods 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 2
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 2
- 210000001842 enterocyte Anatomy 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 2
- 235000021001 fermented dairy product Nutrition 0.000 description 2
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 2
- 229940037467 helicobacter pylori Drugs 0.000 description 2
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 description 2
- 230000004957 immunoregulator effect Effects 0.000 description 2
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 230000004609 intestinal homeostasis Effects 0.000 description 2
- 229940012969 lactobacillus fermentum Drugs 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 2
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 2
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 2
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 2
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 2
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 2
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 2
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- AWDRATDZQPNJFN-VAYUFCLWSA-N taurodeoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCCS(O)(=O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 AWDRATDZQPNJFN-VAYUFCLWSA-N 0.000 description 2
- 229950005578 tidiacic Drugs 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 230000005945 translocation Effects 0.000 description 2
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 2
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 2
- 208000031104 Arterial Occlusive disease Diseases 0.000 description 1
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 1
- 206010004016 Bacterial diarrhoea Diseases 0.000 description 1
- 241000186000 Bifidobacterium Species 0.000 description 1
- 241000901050 Bifidobacterium animalis subsp. lactis Species 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000037838 Chronic pouchitis Diseases 0.000 description 1
- 241000193163 Clostridioides difficile Species 0.000 description 1
- 102000003712 Complement factor B Human genes 0.000 description 1
- 108090000056 Complement factor B Proteins 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- 241000701022 Cytomegalovirus Species 0.000 description 1
- 206010014476 Elevated cholesterol Diseases 0.000 description 1
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 description 1
- 208000018522 Gastrointestinal disease Diseases 0.000 description 1
- 102100039215 Guanine nucleotide-binding protein G(t) subunit alpha-3 Human genes 0.000 description 1
- 206010019375 Helicobacter infections Diseases 0.000 description 1
- 208000028861 Helicobacter pylori infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 101000888145 Homo sapiens Guanine nucleotide-binding protein G(t) subunit alpha-3 Proteins 0.000 description 1
- 101001033233 Homo sapiens Interleukin-10 Proteins 0.000 description 1
- 206010020608 Hypercoagulation Diseases 0.000 description 1
- 206010020772 Hypertension Diseases 0.000 description 1
- HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N Ibuprofen Chemical compound CC(C)CC1=CC=C(C(C)C(O)=O)C=C1 HEFNNWSXXWATRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 1
- 229940124137 Interferon gamma antagonist Drugs 0.000 description 1
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 1
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 1
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 1
- 108010002616 Interleukin-5 Proteins 0.000 description 1
- 108010002335 Interleukin-9 Proteins 0.000 description 1
- 108010068964 Intracellular Signaling Peptides and Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000001702 Intracellular Signaling Peptides and Proteins Human genes 0.000 description 1
- 241000588748 Klebsiella Species 0.000 description 1
- 108010028554 LDL Cholesterol Proteins 0.000 description 1
- 241001584954 Lactobacillus brevis ATCC 14869 = DSM 20054 Species 0.000 description 1
- 235000013958 Lactobacillus casei Nutrition 0.000 description 1
- 241000186673 Lactobacillus delbrueckii Species 0.000 description 1
- 241001468157 Lactobacillus johnsonii Species 0.000 description 1
- 241000535428 Lactobacillus reuteri DSM 20016 Species 0.000 description 1
- 241000088279 Lactobacillus reuteri MM2-2 Species 0.000 description 1
- 102000043131 MHC class II family Human genes 0.000 description 1
- 108091054438 MHC class II family Proteins 0.000 description 1
- 102000005741 Metalloproteases Human genes 0.000 description 1
- 108010006035 Metalloproteases Proteins 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- 208000018262 Peripheral vascular disease Diseases 0.000 description 1
- 206010035664 Pneumonia Diseases 0.000 description 1
- 241000186429 Propionibacterium Species 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 101100298050 Rattus norvegicus Pmp22 gene Proteins 0.000 description 1
- 208000035415 Reinfection Diseases 0.000 description 1
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 1
- RYMZZMVNJRMUDD-UHFFFAOYSA-N SJ000286063 Natural products C12C(OC(=O)C(C)(C)CC)CC(C)C=C2C=CC(C)C1CCC1CC(O)CC(=O)O1 RYMZZMVNJRMUDD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000700584 Simplexvirus Species 0.000 description 1
- 241000194024 Streptococcus salivarius Species 0.000 description 1
- 241000194020 Streptococcus thermophilus Species 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 description 1
- 210000004241 Th2 cell Anatomy 0.000 description 1
- 208000007536 Thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102000004887 Transforming Growth Factor beta Human genes 0.000 description 1
- 108090001012 Transforming Growth Factor beta Proteins 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000012190 activator Substances 0.000 description 1
- 230000008649 adaptation response Effects 0.000 description 1
- 230000033289 adaptive immune response Effects 0.000 description 1
- 210000000577 adipose tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000004378 air conditioning Methods 0.000 description 1
- QYIXCDOBOSTCEI-UHFFFAOYSA-N alpha-cholestanol Natural products C1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(C)CCCC(C)C)C1(C)CC2 QYIXCDOBOSTCEI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003698 anagen phase Effects 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 239000003529 anticholesteremic agent Substances 0.000 description 1
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 1
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000011888 autopsy Methods 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 1
- 229940009289 bifidobacterium lactis Drugs 0.000 description 1
- 229940071604 biogaia Drugs 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000001715 carotid artery Anatomy 0.000 description 1
- 210000001168 carotid artery common Anatomy 0.000 description 1
- 210000004004 carotid artery internal Anatomy 0.000 description 1
- 230000011712 cell development Effects 0.000 description 1
- 230000006037 cell lysis Effects 0.000 description 1
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 150000001801 chenodeoxycholic acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000001842 cholic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000019504 cigarettes Nutrition 0.000 description 1
- 210000003109 clavicle Anatomy 0.000 description 1
- QYIXCDOBOSTCEI-NWKZBHTNSA-N coprostanol Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]2(C)CC1 QYIXCDOBOSTCEI-NWKZBHTNSA-N 0.000 description 1
- 238000002586 coronary angiography Methods 0.000 description 1
- 230000016396 cytokine production Effects 0.000 description 1
- 239000000409 cytokine receptor agonist Substances 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000002950 deficient Effects 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 1
- 239000006160 differential media Substances 0.000 description 1
- 238000005906 dihydroxylation reaction Methods 0.000 description 1
- 210000001198 duodenum Anatomy 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 230000004890 epithelial barrier function Effects 0.000 description 1
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 235000021107 fermented food Nutrition 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 210000000232 gallbladder Anatomy 0.000 description 1
- 244000000036 gastrointestinal pathogen Species 0.000 description 1
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- WVULKSPCQVQLCU-BUXLTGKBSA-N glycodeoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 WVULKSPCQVQLCU-BUXLTGKBSA-N 0.000 description 1
- 108010008385 glycolipid receptor Proteins 0.000 description 1
- 235000011868 grain product Nutrition 0.000 description 1
- 239000003102 growth factor Substances 0.000 description 1
- 230000008821 health effect Effects 0.000 description 1
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 description 1
- 210000003494 hepatocyte Anatomy 0.000 description 1
- 102000052620 human IL10 Human genes 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000002471 hydroxymethylglutaryl coenzyme A reductase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000000260 hypercholesteremic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003027 hypercoagulation Effects 0.000 description 1
- 229960001680 ibuprofen Drugs 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000008073 immune recognition Effects 0.000 description 1
- 230000007188 immune regulating pathway Effects 0.000 description 1
- 208000026278 immune system disease Diseases 0.000 description 1
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 1
- 230000019734 interleukin-12 production Effects 0.000 description 1
- 229940096397 interleukin-8 Drugs 0.000 description 1
- XKTZWUACRZHVAN-VADRZIEHSA-N interleukin-8 Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@@H](NC(C)=O)CCSC)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@H](CO)C(=O)N1[C@H](CCC1)C(N)=O)C1=CC=CC=C1 XKTZWUACRZHVAN-VADRZIEHSA-N 0.000 description 1
- 210000005204 intestinal dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000005026 intestinal epithelial barrier Anatomy 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 229940017800 lactobacillus casei Drugs 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 230000037356 lipid metabolism Effects 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000000527 lymphocytic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011418 maintenance treatment Methods 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 1
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 1
- 244000000010 microbial pathogen Species 0.000 description 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 1
- 239000006872 mrs medium Substances 0.000 description 1
- 231100000219 mutagenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003505 mutagenic effect Effects 0.000 description 1
- 210000000581 natural killer T-cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 230000010807 negative regulation of binding Effects 0.000 description 1
- 230000005709 nerve cell growth Effects 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 230000000444 normolipidemic effect Effects 0.000 description 1
- 235000006286 nutrient intake Nutrition 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002824 peroxisome Anatomy 0.000 description 1
- 239000000902 placebo Substances 0.000 description 1
- 229940068196 placebo Drugs 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 235000021395 porridge Nutrition 0.000 description 1
- 230000008092 positive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000009862 primary prevention Effects 0.000 description 1
- 230000007112 pro inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000008741 proinflammatory signaling process Effects 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000009103 reabsorption Effects 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 238000012502 risk assessment Methods 0.000 description 1
- 230000000405 serological effect Effects 0.000 description 1
- RYMZZMVNJRMUDD-HGQWONQESA-N simvastatin Chemical compound C([C@H]1[C@@H](C)C=CC2=C[C@H](C)C[C@@H]([C@H]12)OC(=O)C(C)(C)CC)C[C@@H]1C[C@@H](O)CC(=O)O1 RYMZZMVNJRMUDD-HGQWONQESA-N 0.000 description 1
- 229960002855 simvastatin Drugs 0.000 description 1
- 230000000391 smoking effect Effects 0.000 description 1
- 210000000329 smooth muscle myocyte Anatomy 0.000 description 1
- JAJWGJBVLPIOOH-IZYKLYLVSA-M sodium taurocholate Chemical compound [Na+].C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCCS([O-])(=O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 JAJWGJBVLPIOOH-IZYKLYLVSA-M 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 235000021262 sour milk Nutrition 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N tgfbeta Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](C(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](N)CCSC)C(C)C)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](C(C)C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=C(O)C=C1 ZRKFYGHZFMAOKI-QMGMOQQFSA-N 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000001732 thrombotic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- URAYPUMNDPQOKB-UHFFFAOYSA-N triacetin Chemical compound CC(=O)OCC(OC(C)=O)COC(C)=O URAYPUMNDPQOKB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000012285 ultrasound imaging Methods 0.000 description 1
- 241001148471 unidentified anaerobic bacterium Species 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
- A61K35/741—Probiotics
- A61K35/744—Lactic acid bacteria, e.g. enterococci, pediococci, lactococci, streptococci or leuconostocs
- A61K35/747—Lactobacilli, e.g. L. acidophilus or L. brevis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
- A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
- A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
- A23L33/135—Bacteria or derivatives thereof, e.g. probiotics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/06—Antihyperlipidemics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2400/00—Lactic or propionic acid bacteria
- A23V2400/11—Lactobacillus
- A23V2400/173—Reuteri
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A90/00—Technologies having an indirect contribution to adaptation to climate change
- Y02A90/10—Information and communication technologies [ICT] supporting adaptation to climate change, e.g. for weather forecasting or climate simulation
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Mycology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Zoology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Vascular Medicine (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Virology (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Obesity (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Группа изобретений относится к медицине и касается способа отбора штамма Lactobacillus для профилактики или лечения атеросклероза и других сердечно-сосудистых заболеваний, предусматривающего отбор штаммов молочнокислых бактерий по их способности повышать активность BSH и вследствие этого снижать холестерин-ЛПНП сыворотки и одновременно уменьшать уровень провоспалительного цитокина TNF-α; и фармацевтической композиции, содержащей такие штаммы, для профилактики или лечения атеросклероза и других сердечно-сосудистых заболеваний. Группа изобретений обеспечивает снижение общей площади бляшек у пациентов. 3 н. и 1 з.п. ф-лы, 6 пр., 1 ил., 3 табл.
Description
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ, К КОТОРОЙ ОТНОСИТСЯ ИЗОБРЕТЕНИЕ
Настоящее изобретение относится к определенным штаммам молочнокислых бактерий, отобранных по способности повышать активность гидролазы желчных кислот (BSH) и вследствие этого снижать уровень холестерина-ЛПНП сыворотки и одновременно уменьшать уровень провоспалительного цитокина фактора некроза опухоли-α (TNF-α) для профилактики и/или лечения атеросклероза и других сердечно-сосудистых заболеваний, к способу отбора таких штаммов и к продуктам, содержащим такие штаммы.
УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ
Пробиотики
Было показано, что пробиотики оказывают благоприятное воздействие на здоровье (Gorbach, S.L. 2000. Probiotics and gastrointestinal health. Am. J. Gastroenterol. 95:S2-S4). Пробиотикам приписывается множество различных функций; однако механизмы, посредством которых достигаются эти эффекты, являются не до конца понятными. Эффекты включают повышение врожденного и приобретенного иммунитета (Gill, H.S., K.J. Rutherfurd, J. Prasad, and P.K Gopal. 2000. Enhancement of natural and acquired immunity by Lactobacillus rhamnosus (HN001), Lactobacillus acidophilus (HN017) and Bifidobacterium lactis (HN019). Br. J. Nutr. 83:167-176), повышенную продукцию противовоспалительного цитокина (IL-10) (Pessi, T., Y. Sutas, M. Hurme, and E. Isolauri. 2000. Interleukin-10 generation in atopic children following oral Lactobacillus rhamnosus GG. Clin. Exp. Allergy 30:1804-1808) и пониженную кишечную проницаемость (Madsen, K., A. Cornish, P. Soper, C. McKaigney, H. Jijon, C. Yachimec, J. Doyle, L. Jewell, and C. De Simone. 2001. Probiotic bacteria enhance marine and human intestinal epithelial barrier function. Gastroenterology 121:580-591). Различные штаммы Lactobacillus были в частности хорошо изучены как у животных, так и у человека. Они могут быть эффективны для профилактики и лечения диареи путешественников (Marteau, P.R., M. de Vrese, C.J. Cellier, and J. Schrezenmeir. 2001. Protection from gastrointestinal diseases with the use of probiotics. Am. J. Clin. Nutr. 73:430S-436S), реккурентной инфекции Clostridium difficile (Gorbach, S.L. 1987. Bacterial diarrhoea and its treatment. Lancet ii: 1378-1382), ротавируса (Szajewska, H., M. Kotowska, J.Z. Mrukowicz, M. Armanska, and W. Mikolajczyk. 2001. Efficacy of Lactobacillus GG (L. GG) in prevention of nosocomial diarrhea in infants. J. Pediatr. 138:361-365), и инфекции Helicobacter (Mukai, T., T. Asasaka, E. Sato, K. Mori, M. Matsumoto, and H Ohori. 2002. Inhibition of binding of Helicobacter pylori to the glycolipid receptors by probiotic Lactobacillus reuteri. FEMS Immunol. Med. Microbiol. 32:105-110). L. Reuteri, выделенная из тонкого кишечника мышей, ингибировала появление колита у мыши с трансгенно выключенным геном IL-10 (Madsen, K. L., J.S. Doyle, L.D. Jewell, M.M. Tavernini, and R.N. Fedorak. 1999. Lactobacillus species prevents colitis in interleukin 10 gene-deficient mice. Gastroenterology 116:1107-1114). Клиническое испытание со смесью пробиотиков показало значительное облегчение хронического резервуарного илеита (Gionchetti, P., F. Rizzello, A. Venturi, P. Brigidi, D. Matteuzzi, G. Bazzocchi, G. Poggioli, M. Miglioli, and M. Campieri. 2000. Oral bacteriotherapy as maintenance treatment in patients with chronic pouchitis: a double-blind, placebo-controlled trial. Gastroenterology 119:305-309).
Иммунные ответы (Th-1/Th2/TR)
Воспаление опосредовано внутриклеточными сигнальными белками, известными как цитокины, которые продуцируют макрофаги и дендритные клетки эпителия в ответ на антигенный стимул. При контакте между эпителием и антигеном антиген-презентируюшие клетки эпителия (включая дендритные клетки) передают сигнал наивным макрофагам, которые затем отвечают так называемым ответом типа Th-1, при котором макрофаги продуцируют провоспалительные цитокины, включая TNFα, IL-1, IL-6, IL-12. Эти цитокины, в свою очередь, стимулируют продукцию интерферона γ (IFNγ), который является ключевым медиатором воспаления, естественными клетками-киллерами, Т-клетками и другими клетками. Наивные макрофаги также могут отвечать на антигены ответом типа Th-2. Этот ответ суппрессируется посредством IFNγ. Эти клетки типа Th-2 продуцируют противовоспалительные цитокины, такие как IL-4, IL-5, IL-9 и IL-10.
Известно, что IL-10 ингибирует продукцию IFNγ и, таким образом, ослабляет иммунный ответ. Равновесие между клетками типов Th-1 и Th-2 и продукция ими соответствующих цитокинов определяет степень воспалительного ответа на конкретный антиген. Клетки типа Th-2 могут также стимулировать продукцию иммуноглобулинов посредством иммунной системы. Противовоспалительная активность в желудочно-кишечном тракте, где уровень TNFα понижен, коррелирует с активированными эпителиальными клетками (целостность выстилки стенки кишечника) и, таким образом, со снижением негативных эффектов, вызванных желудочно-кишечными патогенами и токсинами.
T-регуляторные клетки (TR) рассматриваются как неотъемлемый компонент иммунного ответа. Эти клетки в первую очередь возникают в точно регулируемом противомикробном иммунитете для максимального изменения опасной иммунной патологии (Powrie F, Maloy KJ. 2003. Regulating the regulators, Science 299 1030-1031). Было показано, что клетки TR продуцируют повышенные уровни противовоспалительного цитокина IL-10 (Smits, H.H., A. Engering, D. van der Kleij, E.C. de Jong, K. Schipper, T.M. van Capel, B.A.J. Zaat, M. Yazdanbakhsh, E.A. Wierenga, Y. van Kooyk, and L. Kapsenberg. 2005. Selective probiotic bacteria induce IL-10-producing regulatory T cells in vitro by modulating dendritic cell function through dendritic cell-specific intercellular adhesion molecule 3-grabbing nonintegrin. J Allergy Clin Immunol. 115:1260-1267). Факторы, контролирующие развитие и активацию клеток TR, должны обеспечить смещение равновесия либо в сторону активности клеток TR (для лечения аутоиммунных заболеваний и повышения выживаемости трансплантированных органов), либо от активности клеток TR (для усиления эффективности вакцинации и отторжения опухоли) (Walter J. Dobrogosz. Enhancement of human health with L. reuteri, A Probiotic, Immunobiotic and Immunoprobiotic. NUTRAfoods. 2005: 4(2/3) 15-28).
Иммуномодулирующие эффекты пробиотиков
Штамм GG (LGG) Lactobacillus rhamnosus является перспективным пробиотическим средством, демонстрирующим во множестве исследований способность заселять кишечник и модулировать ответ эпителия слизистой и иммунный ответ. LGG усиливает пролиферацию энтероцитов и размер ворсинок у моноассоциированных гнотобиотических крыс (Banasaz, M., E. Norm, R. Holma, and T. Midtvedt. 2002. Increased enterocyte production in gnotobiotic rats mono-associated with Lactobacillus rhamnosus GG. Appl Environ Microbiol. 68: 3031-3034). LGG также модулирует пролиферацию лимфоцитарных ответов ex vivo у мыши, следующих за пероральным введением (Kirjavainen, P.V., H.S. ElNezami, S.J. Salminen, J.T. Ahokas, and P.F. Wright. 1999. Effects of orally administered viable Lactobacillus rhamnosus GG and Propionibacterium freudenreichii subsp. shermanii JS on mouse lymphocyte proliferation. Clin Diagn Lab Immunol 6: 799-802) и L. paracasei изменяет модуляторные профили цитокинов CD4+ T-лимфоцитов (Von der Weid T., C. Bulliard, and E.J. Schiffrin.2001. Induction by a lactic acid bacterium of a population of CD4(+) T cells with low proliferative capacity that produce transforming growth factor beta and interleukin-10. Clin Diagn Lab Immunol 8: 695-701). Кроме адаптивных иммунных ответов LGG оказывает воздействия на врожденные иммунные ответы. LGG активирует ядерный фактор каппа B (NF-κB) и сигнальный трансдуктор и активатор транскрипции (STAT) путей прохождения сигналов в макрофагах человека (Miettinen, M., A. Lehtonen, I. Julkunen, and S. Matikainen. 2000. Lactobacilli and Streptococci activate NF-kappa B and STAT signaling pathways in human macrophages. J Immunol 164: 3733-3740), и L. rhamnosus стимулирует продукцию макрофагами интерлейкина-12 (IL-12) (Hessle, C, L.A. Hanson, and A.E. Wold. 1999. Lactobacilli from human gastrointestinal mucosa are strong stimulators of IL- 12 production. Clin Exp Immunol 116: 276-282). LGG также стимулирует продукцию иммуномодулирующих цитокинов, таких как IL-10, у детей (Pessi, T., Y. Sutas, M. Hurme, and E. Isolauri. 2000. Interleukin-10 generation in atopic children following oral Lactobacillus rhamnosus GG. Clin Exp Allergy 30: 1804-1808) и может регулировать провоспалительные ответы in vivo. Клетки-эффекторы врожденного иммунитета, такие как макрофаги, дендритные клетки и нейтрофилы, представляют собой первичные звенья большинства воспалительных ответов (Janeway, C.A., Jr. and R. Medzhitov. 2002. Innate immune recognition. Annu Rev Immunol 20: 197-216). Предположение, что врожденный иммунитет определяет направление как врожденного, так и адаптивных ответов на антигены как собственные, так и не собственные, подчеркивает роль врожденного иммунитета в регулировании воспаления.
Патентная заявка США № 20020019043 относится к лечению воспалительного заболевания пищеварительного тракта путем введения цитокин-продуцирующих грамположительных бактерий или штамма грамположительных бактерий, продуцирующих антагонист цитокина. В конкретных вариантах осуществления цитокин или антагонист цитокина выбирают из IL-10, растворимого рецептора TNF-α или другого антагониста TNF-α, антагониста IL-12, антагониста интерферона-гамма, антагониста IL-1 и других. В конкретных вариантах осуществления грамположительные бактерии создают способами генной инженерии для продукции цитокина, антагониста цитокина и так далее.
Иммуномодулирующие эффекты L. reuteri
Иммуномодулирующие эффекты L. reuteri были описаны, например, Christensen, который показал, что пробиотические лактобациллы оказывали свои иммуномодулирующие эффекты посредством модулирования Th1/Th2/Th3/Tr1/TR-активирующей способности дендритных клеток (DC) (Christensen H.R., H. Frokiaer, and J.J. Pestka. 2002. Lactobacilli differentially modulate expression of cytokines and maturation surface markers in murine dendritic cells. J. Immunol. 168: 171-178). Авторы показали, что, если DC мышей подвергнуть совместному культивированию с различными штаммами Lactobacillus, включая штаммы L. reuteri, то они избирательно модулируют продукцию цитокинов IL-6, IL-10, IL-12 и TNF-a и повышают регуляцию MHC класса II и поверхностных маркеров CD86 зависимым от концентрации способом. Все лактобациллы активировали поверхностные MHC класса II и CD86 маркеры, являющиеся индикаторными для созревания DC. Особенно значительным в данных исследованиях было то, что L. reuteri (штамм 12246) являлся слабым индуктором IL-12, но при совместном культивировании с L. johnsonii или L. casei он избирательно ингибировал продукцию провоспалительных сигнальных цитокинов IL-12, IL-6 и TNF-α, стимулированных последним из двух видов. В этих условиях продукция IL-10 сохранялась неизменной. Эти данные привели к выводам, что L. reuteri могут способствовать вызванной окружающей средой модуляции генерации кишечных дендритных клеток, что способствует усилению резистентности против антигенов, не несущих 'сигнала опасности' при одновременном сохранении способности отвечать на патогенные микроорганизмы, распознаваемые через сигнал опасности, подобный LPS.' Авторы также заключили, что несколько штаммов L. reuteri могут являться перспективным для точно нацеленного лечения, эффективным в отношении подавления продукции IL-12 и TNF-α (и IL-6), включая при этом противовоспалительный IL-10, представляя, таким образом, альтернативный терапевтический способ нейтрализовать провоспалительную кишечную цитокиновую среду.
Smits расширил указанные наблюдения и показал, что L. reuteri способны направлять DC, на стимуляцию продукции T регуляторных клеток (TR). Они использовали три различных вида Lactobacillus, культивированных совместно in vitro с DC человека, производными моноцитов. Две лактобациллы, штамм L. reuteri человека (ATCC 53609) и L. casei, но не штамм L. plantarum, направляли DC, на стимуляцию развития TR клеток. Было показано, что указанные TR клетки продуцируют повышенные уровни IL-10 и могут ингибировать пролиферацию «фоновых» T-клеток в зависимости от IL-10 (Smits, H.H., A. Engering, D. van der Kleij, E.C. de Jong, K. Schipper, T.M.M. van Capel B.A.J. Zaat, M. Yazdanbakhsh, E. A. Wierenga, Y. van Kooyk, and L. Kapsenberg. 2005. Selective probiotic bacteria induce IL-10-producing regulatory T cells in vitro by modulating dendritic cell function through dendritic cell-specific intercellular adhesion molecule 3-grabbing nonintegrin. J Allergy Clin Immunol. 115:1260-1267). Данные исследования взаимодействий L. reuteri-DC рассматриваются в связи с новаторскими исследованиями Hori (Hori S, T. Nomura, and S. Sakaguchi. 2003. Control of regulatory T cell development by the transcription factor Foxp3. Science. 299:1057-1061), а Pasare и Medzhitov (Pasare C. and R. Medzhitov. 2003. Toll pathway-dependent blockade of CD4+Cd25+ T cell-mediated suppression by dendritic cells. Science 299:1033- 1036) предоставили ценные достоверные данные в один из иммунобиотических способов воздействия L. reuteri.
Фактор роста нервов (NGF), кроме своего воздействия на рост нервных клеток, имеет значительные противовоспалительные эффекты в ряде экспериментальных систем in vitro и in vivo, включая модель колита. Ma с соавторами (2004) исследовали механизм действия L. reuteri в эпителиальных клеточных линиях человека на синтез цитокина и NGF и ответ IL-8 на TNF-α. Они заключили, что L. reuteri оказывает мощное прямое противовоспалительное воздействие на эпителиальные клетки человека, которое, похоже, должно относиться к действию принятых внутрь пробиотиков. Они также заключили, что L. reuteri активирует особую противовоспалительную молекулу, NGF, и ингибирует транслокацию NF-κB в ядро (Ma, D., P. Forsythe, and J. Bienenstock. 2004. Live L. reuteri is essential for the inhibitory effect on tumor necrosis factor alpha-induced interleukin-8 expression. Infect. Immun. 72:5308-5314).
Штаммы широкого спектра видов Lactobacillus, включая L. reuteri, использовали в пробиотических композициях. Lactobacillus reuteri представляет собой один из природных организмов желудочно-кишечного тракта животных, и он обнаруживается в кишечнике здоровых животных, включая человека. Известно, что этот организм имеет противомикробное действие. См., например, патенты США № 5439678, 5458875, 5534253, 5837238 и 5849289. Если клетки L. reuteri растут в анаэробных условиях в присутствии глицерина, то они продуцируют противомикробное вещество, известное, как β-гидроксипропиональдегид (3-HPA).
Атеросклероз
Атеросклероз и его сердечно-сосудистые последствия являются ведущей причиной смертности и заболеваемости в Соединенных Штатах и в других странах. Название атеросклероз происходит от греческих слов "жидкая каша" или "вязкое" и "затвердение", и это заболевание определяют как наличие атером или участков повреждений, на внутренних стенках артерий. Участки повреждения, также известные как бляшки, состоят из жировых отложений и других веществ.
Что делает атеросклероз особенно опасным, так это то, что он, вероятно, имеет тенденцию поражать крупные важные артерии. Когда частицы участка повреждения, заполненного бляшками, отрываются от внутренней стенки артерий, то жировой материал устремляется в низлежащие артерии меньшего калибра, которые непосредственно кровоснабжают сердце и головной мозг, где они застревают, мешая крови, богатой питательными веществами и кислородом, достигнуть эти жизненно важные органы. Если возникает полная блокада, результатом может быть инфаркт миокарда или инсульт (Little, W. C, M. Constantinescu, R.J. Applegate, M.A. Kutcher, M.T. Burrows, F.R. Kahl, and W.P. Santamore. Can coronary angiography predict the site of a subsequent myocardial infarction in patients with mild-to-moderate coronary artery disease? Circulation.1988. 78:1157-66). Обычно атеросклероз считали нарушением метаболизма липидов. Факторы риска, связанные с атеросклерозом, включают высокие уровни ЛПНП, гомоцистеина в крови, гипертензию, курение сигарет, ожирение и диабет. Лечение было направлено на модулирование уровней холестерина, например, путем повышения метаболизма желчных солей с помощью определенных кисломолочных бактерий.
При оценке возможности использования молочнокислых бактерий (LAB) в качестве эффективных пробиотиков, многие считают необходимым оценить их способность LAB противостоять действию желчных кислот. Желчные кислоты синтезируются в печени из холестерина и выделяются из желчного пузыря в двенадцатиперстную кишку, конъюгированными с глицином или таурином. Их функцией является эмульгирование поступающих с пищей липидов. Наиболее распространенными первичными жирными кислотами у человека являются холевая и хенодезоксихолевая кислоты, которые представляют собой главные конечные продукты метаболизма холестерина в печени. В результате микробной активности в кишечнике данные кислоты затем подвергаются модификациям химической структуры, таким как деконъюгация и дегидроксилирование, где аминокислоты гидролизуются из конъюгированной формы (Cardona, M.E., V. de Vanay, T. Midtvedt, and K.E. Norin. Probiotics in gnotobiotic mice. Conversion of cholesterol to coprostanol in vitro and in vivo and bile acid deconjugation in vitro. Microb Ecol Health Dis. 2000. 12:219-224; Dunne, C., L. O'Mahony, L. Murphy, G. Thornton, D. Morrissey, S. O'Halloran, M. Feeney, S. Flynn, G. Fitzgerald, D. Daly, B. Kiely, G.C. O' Sullivan, F. Shanahan, and J.K. Collins. In vitro selection criteria for probiotic bacteria of human origin: correlation with in vivo findings. Am J Clin Nutr. 2001. 73 (suppl): 386S-392S). Некоторые желудочно-кишечные (GI) бактерии, например, Enterococcus, Bifidobacterium и Lactobacillus экспрессируют фермент гидролазу желчных кислот (BSH), который катализирует гидролиз конъюгированных желчных кислот, что приводит к образованию молекул свободного глицина или таурина и неконъюгированных желчных кислот (Tanaka, H., K. Doesburg, T. Iwasaki, and I. Mierau. Screening of lactic acid bacteria for bile salt hydrolase activity. J Dairy Sci. 1999. 82: 2530-2535; Bateup, J.M., M.A. McConnell, H. F. Jenkinson, and G.W. Tannock. Comparison of Lactobacillus strains with respect to bile salt hydrolase activity, colonization of the gastrointestinal tract, and growth rate of the murine host. Appl Environ Microbiol. 1995. 61(3): 1147-1149; Tannock, G.W., J.M. Bateup, and H.F. Jenkinson. Effect of sodium taurocholate on the in vitro growth of lactobacilli. Microb Ecol. 1997. 33: 163-167).
Имеются две главные гипотезы, касающиеся воздействия экспрессии BSH на функцию бактерий в желудочно-кишечном тракте. Одна гипотеза заключается в том, что некоторые бактерии деконъюгируют желчные кислоты для того, чтобы использовать аминокислоту таурин в качестве акцептора электронов, тогда как другая утверждает, что фермент понижает токсичность желчных кислот посредством деконъюгации, поскольку деконъюгированные формы являются менее растворимыми с пониженной детергентной активностью, тем самым защищая бактерии. Было обнаружено, что как конъюгированные, так и неконъюгированные желчные кислоты демонстрируют антибактериальную активность в отношении Escherichia coli, видов Klebsiella и видов Enterococcus in vitro, где деконъюгированные формы более выраженно ингибировали рост (Dunne, C., L. O'Mahony, L. Murphy, G. Thornton, D. Morrissey, S. O'Halloran, M. Feeney, S. Flynn, G. Fitzgerald, C. Daly, B. Kiely, G.C. O'Sullivan, F. Shanahan, and J.K. Collins. In vitro selection criteria for probiotic bacteria of human origin: correlation with in vivo findings. Am J Clin Nutr. 2001. 73 (suppl): 386S-392S; Moser, S.A. and D.C. Savage. Bile salt hydrolase activity and resistance to toxicity of conjugated bile salts are unrelated properties in lactobacilli. Appl Environ Microbiol. 2001. 67 (8): 3476-3480).
Выраженные холестерин понижающие действия ферментированных молочных продуктов можно объяснить связыванием холестерина с желчными кислотами и ингибированием мицеллообразования. Механизм, через который пробиотические бактерии в этих продуктах могут оказывать гипохолестеринемическое действие, представляет собой действие посредством желчных кислот, холевой и дезоксихолевой кислот, продуцируемых из холестерина посредством гепатоцитов. Они конъюгированы с глицином и таурином и поступают в тонкую кишку, где абсорбируются и направляются в печень. При реабсорбции конъюгированные желчные кислоты подвергаются воздействию микрофлоры тонкой кишки. Бактерии в ферментированных пищевых продуктах, например лактобациллы и стрептококки, гидролизируют конъюгированные желчные кислоты. Возможно, штамм Lactobacillus с высокой активностью гидролазы желчной соли кишечника повышает желчный гидролиз. Это может привести к более быстрой скорости преобразования холестерина и большей продукции желчных кислот. In vivo, уменьшение холестерина происходит благодаря экскреции желчной кислоты с калом, поскольку деконъюгированные желчные кислоты не реабсорбируются в толстой кишке. Это приводит к увеличению желчи de novo, чтобы сохранить пул желчи в организме постоянным (St-Onge M-P., E.R. Farnworth, and P.J.H. Jones. 2000. Consumption of fermented and nonfermented dairy products: effects on cholesterol concentrations and metabolism. Am J Clin Nutr. 71: 674-681).
Деконъюгация желчных кислот будет ниже уровней холестерина плазмы. Однако эти соединения могут быть затем преобразованы во вторичные желчные кислоты в толстой кишке посредством анаэробных бактерий, а вторичные желчные кислоты, как полагают, являются возможными индукторами рака толстой кишки. Вторичные желчные кислоты являются токсичными для клеточных линий и есть основания полагать, что они оказывают цитотоксическое действие на слизистую толстой кишки, что ведет к повышенной пролиферации клеток. Эти гиперпролиферирующие клетки имеют повышенную чувствительность к мутагенным веществам и тем самым повышают риск возникновения рака толстой кишки (Hepner, G., R. Fried, S. St. Jeor, L. Fusetti, and R. Morin. 1979. Hypercholesterolemic effect of yoghurt and milk. Am. J. Clin. Nutr. 32:19-24). К счастью, молочнокислые бактерии, по-видимому, понижают растворимость деконъюгированных желчных солей и вторичных желчных солей, тем самым понижая их биодоступность. Исследования De Boever с соавторами (2000) показали, что L.reuteri понижали токсичность желчной соли в бактериальных культурах. Более важно, добавление L. reuteri приводило к практически абсолютной устойчивости к лизису красных кровяных клеток и уменьшает токсическое действие желчных солей на клетки HeLa (De Boever, P., R. Wouters, L. Verschaeve, P. Berckmans, G. Schoeters, and W. Verstraete. Protective effect of the bile salt hydrolase-active Lactobacillus reuteri against bile salt cytotoxicity. Appl Microbiol Biotechnol. 2000. 53(6):709-14).
Атеорсклероз как иммунологическое заболевание.
Ученые описывают новую схему развития атеросклероза, полагая, что данная патология может быть следствием дисбаланса между провоспалительными Т-клетками и TR, уравновешивающими их. Это один из интересных научных результатов, который выяснился на конференции Second European Vascular Genomics Network Conference (EVGN Conference - Гамбург, 27-30 сентября 2005). Эти результаты дали новое понимание роли воспаления при развитии сердечных заболеваний и привели к созданию новых информационных моделей формирования тромба и процессов, ведущих к инфаркту миокарда.
Атеросклероз начинается с образования жировых прожилок в эндотелии, поскольку жиры в частицах ЛПНП раздражают эндотелиальные клетки, и включают клеточную инфильтрацию нескольких клеточных типов, включая моноциты и Т-лимфоциты. Моноциты взаимодействуют с эндотелиальным слоем, прочно прикрепляются к эндотелию и мигрируют в субэндотелиальное пространство, где они дифференцируют в макрофаги. Макрофаги высвобождают ряд химических веществ, включая цитокины. Стимулируется продукция факторов роста, что ведет к клеточной пролиферации и продукции матрикса, а также металлопротеиназ, что приводит к дегенерации матрикса. Таким образом, макрофаги усиливают повреждения и могут способствовать нестабильности и тромботическим осложнениям (Ross R. Atherosclerosis - An inflammatory disease. N Engl J Med. 1999. 340: 115-26). Было показано, что T-лимфоциты присутствуют на всех стадиях атеросклероза. Их присутствие обеспечивает дополнительное доказательство связи с иммунным ответом (KoI, A. and P. Libby. 1998. The mechanisms by which infectious agents may contribute to atherosclerosis and its clinical manifestations. Trends Cardiovasc Med. 8: 191-99; Andreotti, F., F. Burzotta, A. Mazza, A. Manzoli, K. Robinson, and A. Maseri. 1999. Homocysteine and arterial occlusive disease: a concise review. Cardiologia. 44:341-5).
Сигнал к началу продукции воспалительных веществ зависит от вовлечения рецепторов, называемых toll-подобными рецепторами, которые распознают некоторые эндогенные молекулы, активирующие воспалительные сигнальные пути (K. Edfeldt, J. Swedenborg, G.K. Hansson, and Z. Yan. 2002. Expression of Toll-Like Receptors in Human Atherosclerotic Lesions: A Possible Pathway for Plaque Activation Circulation. 105: 1158-1161).
Toll-подобные рецепторы (TLR) распознают микробные мотивы и активируют набор генов, что ведет к продукции цитокинов. Традиционно TLR рассматривались как сенсоры микробных инфекций, и их роль состоит в индукции воспалительного ответа. Однако повторы, распознаваемые TLR, не являются специфическими для патогенных микроорганизмов, а представляют собой основные повторы, имеющиеся у всех классов микроорганизмов, и не совсем понятно, как иммунная система устанавливает различие между коменсальными и патогенными бактериями посредством TLR. Данные, полученные в последнее время, показали, что TLR, несмотря на их роль в индукции воспалительного ответа, также играют роль в поддержании кишечного гомеостаза путем распознавания коменсальной микрофлоры (Rakoff-Nahoum, S., J. Paglino, F. Eslami- Varzaneh, S. Edberg and R. Medzhitov. 2004. Recognition of commensal microflora by toll-like receptors is required for intestinal homeostasis. Cell. 23; 118(2):229-41).
Установлено, что маркеры сыворотки воспаления представляют собой независимые факторы риска для сердечно-сосудистой заболеваемости и смертности. Маркеры воспаления, которые связывают с сердечно-сосудистыми эффектами, включают провоспалительные цитокины, такие как IL-6 и TNF-a, фибриноген и С-реактивный белок (CRP) (Libby, P., P.M. Ridker, and A. Maseri. 2001. Inflammation and atherosclerosis. Circulation. 2002.105:1135-1143; Ridker, P.M. High sensitivity C-reactive protein: potential adjunct for global risk assessment in the primary prevention of cardiovascular disease. Circulation. 103: 1813-1818).
Роль C. pneumonie и H. pylori в атеросклерозе
По накапливающимся материалам можно предположить, что атеросклероз является воспалительным заболеванием. Вследствие этого большое внимание в последнее время было сфокусировано на возможности того, что инфекционные агенты могут играть роль в этиологии сердечно-сосудистых заболеваний. Предположение касается определенных инфекционных агентов, основываясь на выделении их из атероматозных бляшек или на присутствии положительных серологических данных для организмов, таких как Chlamydia pneumoniae, Helicobacter pylori, вирус простого герпеса и цитомегаловирус.
Даже хотя перспективным исследованиям не хватает объективных данных, C. pneumoniae, по-видимому, проявляют сильнейшую связь с атеросклерозом. C. pneumoniae была выделена из аутопсий и образцов иссеченных атеросклеротических поражений как из ранних, так и хорошо развитыми поражений. При исследовании посредством иммунологической цитохимии и окрашивания тканей, взаимосвязь была обнаружена в 70-100% случаев. Возможные механизмы, посредством которых инфекционные агенты оказывают свое действие, могут включать (i) местные воздействия на эндотелий, гладкомышечные клетки или макрофаги или (ii) системные действия путем выработки цитокинов, стимуляции моноцитов и активации гиперкоагуляции.
Общепринятое лечение для снижения уровней холестерина
За многие годы было выявлено, что повышенная концентрация холестерина в сыворотке является фактором риска, связанным с атеросклерозом и ишемической болезнью сердца, позднее являющимся основной причиной смерти в Западных странах (Barr, D.P., A.M. Russ, and H. A. Eder. 1951. Protein-lipid relationship in human plasma. II. In atherosclerosis and related conditions. Am. J. Med. 11:480-493). Многочисленные лекарственные препараты, снижающие холестерин, включая ингибиторы 3-гидрокси-метилглютарил-коэнзим А-редуктазы, и лекарственные препараты, повышающие суммарную экскрецию желчных кислот, используются для лечения больных с гипохолестеринемией (HC) (Suckling, K.E., G.M. Benson, B. Bond, A. Gee, A. Glen, C. Haynes, and B. Jackson. 1991. Cholesterol lowering and bile acid excretion in the hamster with cholestyramine treatment. Atherosclerosis 89: 183-190).
Однако нежелательные побочные эффекты этих соединений вызывают вопросы об их терапевтическом применении (Erkelens, D.W., M.G.A. Baggen, J.J. Van Doormeal, M. Kettner, J.C. Koningsberger, and M.J.T.M. Mol. 1988. Clinical experience with simvastatin compared with cholestyramine. Drugs 39(Suppl.):87-90).
Молочнокислые бактерии в качестве лечения для снижения уровней холестерина
Кроме указанных терапевтических средств прием внутрь пробиотических молочнокислых бактерий, возможно, является более естественным способом уменьшить концентрации холестерина в сыворотке человека. Некоторые исследования сообщают об уменьшении холестерина в сыворотке при потреблении больших доз (от 680 до 5000 мл/Д) ферментированных молочных продуктов, но данные результаты не могут быть экстраполированы на более реальные условия потребления (Mann, G.V. 1977. A factor in yogurt which lowers cholesterolemia in man. Atherosclerosis 26:335-340; McNamara, D.J., A. M. Lowell, and J.E. Sabb. 1989. Effect of yogurt intake on plasma lipid and lipoprotein levels in normolipidemic males. Atherosclerosis 79:167-171).
Massey показал, что первоначально потребление йогурта значительно понижает холестерин на 10-12% у взрослых мужчин, но 2 недели спустя концентрации возвращаются к контрольным значениям даже при продолжении потреблении йогурта (Massey, L. 1984. Effect of changing milk and yoghurt consumption on human nutrient intake and serum lipoprotein. J. Dairy Sci. 67:255-262). Подобные противоречивые результаты были получены у экспериментальных животных, которых кормили молоком и его ферментированными продуктами (Hepner, G., R.S.T. Fried, S. Jeor, L. Fusetti, and R. Morin. 1979. Hypocholesterolemic effect of yogurt and milk. Am. J. Clin. Nutr. 32:19-24); Rao, D.R., C.B. Chawan, and S.R. Pulusani. 1981. Influence of milk and thermophilus milk on plasma cholesterol levels and hepatic cholesterogenesis in rats. J. Food Sci.46:1339-1341). Rao сообщал о действии HC у крыс, которых кормили молоком, ферментированным Streptococcus thermophilus (Rao, D.R., C.B. Chawan, and S.R. Pulusani. 1981. Influence of milk and thermophilus milk on plasma cholesterol levels and hepatic cholesterogenesis in rats. J. Food Sci. 46:1339-1341). Rodas обнаружил подобное действие у HC свиней, которых кормили Lactobacillus acidophilus (Rodas, B.Z., S.E. Gilliland, and C.V. Maxwell. 1996. Hypocholesterolemic action of Lactobacillus acidophilus ATCC 43121 and calcium in swine with hypercholesterolemia induced by diet. J. Dairy Sci. 79:2121-2128).
В исследовании, изучающем действие L. reuteri CRL 1098 на общий холестерин, триглицериды и соотношение липопротеинов высокой плотности (ПЛВП) к липопротеинам низкой плотности (ЛПНП) в сыворотке мышей, которых предварительно кормили пищей, обогащенной жиром, L. reuteri вызывала 40%-ное снижение триглицеридов и 20%-ное увеличение соотношения липопротеинов высокой плотности к липопротеинам низкой плотности без транслокации бактерий естественной микрофлоры в селезенку и печень (Taranto, M.P., F. Sesma, A.P. Ruiz Holgado, and G.F. Valdez. 1997. Bile salts hydrolase plays a key role on cholesterol removal by Lactobacillus reuteri. Biotechnol. Lett. 9:245-247). Эти данные предполагают, что L. reuteri CRL 1098 является эффективным гипохолестеринемическим препаратом при низкой концентрации клеток для мышей. Но в отличие от раскрытия изобретения в данной заявке, снижение холестерина происходило только благодаря активности BSH, а не благодаря комбинации активности BSH и иммунорегулирующих воздействий.
Молочнокислые бактерии в качестве лечения для понижения уровней холестерина, иммунорегуляторный путь
Патентная заявка США № 20050169901 относится к способам регуляции уровней и активности цитокинов, для диагностики, профилактики и лечения сердечно-сосудистых нарушений. Регуляция цитокина представляет собой изменение профиля цитокинов с Th2 на Th1 в противоположность изобретению данной заявки, где изменение происходит, предпочтительно, от профиля цитокинов Th1 в сторону снижения продукции TNF-α. В качестве пробиотика заявители упоминают некоторые различные виды и штаммы бактерий, в противоположность изобретению настоящей заявки, где пробиотиком является особый штамм молочнокислых бактерий, отобранный по эффективности понижения уровней TNF-α и одновременно повышения активности BSH.
Bukowska показала, что у пациентов с гиперхолестеринемией, обогащение рациона пробиотическими бактериями Lactobacillus plantarum 299v значительно понижает концентрации холестерина ЛПНП и фибриногена (Bukowska H., J. Pieczul-Mrόz, M. Jastrzebska, K. Chelstowski, and M. Naruszewicz. 1997. Decrease in fibrinogen and LDL-cholesterol levels upon supplementation of diet with Lactobacillus plantarum in subjects with moderately elevated cholesterol. Atherosclerosis. 137:437-8). Это также описано в патенте США № 6214336. Та же группа показала, что обогащение рациона L. plantarum может способствовать профилактике и лечению метаболических нарушений у курящих. Полагают, что данное положительное действие напрямую связано с продукцией пропионовой кислоты посредством бактериальной ферментации волокон. Авторы предполагают, что пропионовая кислота оказывает специфическое противовоспалительное действие через неизвестный до настоящего времени механизм, возможно, относящийся к активации ибупрофеном рецептора активатора пролиферации пероксисом, который модулирует ядерную транскрипцию фактора B и снижает продуцирование воспалительных цитокинов моноцитами-макрофагами (M. Naruszewicz, M-L Johansson, D. Zapolska-Downar, and H. Bukowska, Effect of Lactobacillus plantarum 299v on cardiovascular disease risk factors in smokers. Am. J. Clinical Nutrition. 2002. 76:1249-1255).
В противоположность изобретению настоящей заявки вышеупомянутые ссылки не описывают штаммы, способные как повышать активность BSH, и в то же время понижать уровни TNF-α.
Как упомянуто выше, в течение многих лет было хорошо известно, что повышенная активность BSH снижает уровни холестерина сыворотки и, как следствие, понижает риск атеросклероза. Предварительно также было продемонстрировано, что атеросклероз представляет собой воспалительное заболевание, и была предложена регуляция различных цитокинов, чтобы остановить развитие данного заболевания. Учитывая данные результаты, были отобраны непатогенные штаммы бактерий как для снижения BSH, так и для иммунорегуляторных целей. Неожиданно было обнаружено, что некоторые из штаммов, которые вызывают повышение активности BSH, одновременно понижают уровни провоспалительного цитокина TNF-α, фиг.1. Вследствие этого изобретение относится к применению, например, L. reuteri ATCC-PTA4659, L. reuteri ATCC-6475 или L. coryniformis ATCC-PTA4660 и других штаммов, отобранных таким же путем, и их смесей для получения продукта для профилактики и/или лечения атеросклероза и других сердечно-сосудистых заболеваний.
Вследствие этого целью данного изобретения является получение штаммов молочнокислых бактерий, отобранные по их способности понижать холестерин-ЛПНП сыворотки и понижать уровни провоспалительного цитокина TNF-α. Другие цели и преимущества станут более понятны из нижеприведенного описания и приложенной формулы изобретения.
КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ЧЕРТЕЖЕЙ
Фиг.1 представляет собой столбчатую диаграмму, показывающую действие кондиционированной среды Lactobacillus на продукцию TNF-α LPS-активированными моноцитами. Штаммы и контрольные группы инкубировали 24 часа.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение относится к определенным штаммам молочнокислых бактерий, отобранных по их способности повышать активность BSH и, как следствие, понижать холестерин-ЛПНП сыворотки и одновременно понижать уровни провоспалительного цитокина TNF-α, для профилактики и/или лечения атеросклероза и других сердечно-сосудистых заболеваний, к способу отбора таких штаммов и к продуктам, содержащим такие штаммы.
Другие цели и признаки изобретений станут более понятны из нижеприведенного подробного описания и приложенной формулы изобретения.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ И
ПРЕДПОЧТИТЕЛЬНЫЕ ВАРИАНТЫ ЕГО ОСУЩЕСТВЛЕНИЯ
Настоящее изобретение относится к штаммам молочнокислых бактерий, которые были отобраны по их способности уменьшать воспаление и повышать активность BSH, например, при атеросклерозе. Такие штаммы включают Lactobacillus reuteri ATCC- PTA4659, которые были депонированы в Американской Коллекции Типовых Культур, 10801 University Blvd, Manassas, VA, 11 сентября 2002 года на основании Будапештского Соглашения. Lactobacillus reuteri ATCC-PTA6475 был депонирован в ATCC 21 декабря 2004 года. Все ограничения по возможности свободного использования данных штаммов будут безоговорочно устранены после выдачи патента. Продукты, такие как продукты питания, пищевые добавки и готовые формы, фармацевтические или медицинские устройства, содержащие целые клетки или компоненты, полученные из этих штаммов, такие как компоненты, имеющие такую же способность, которая присутствует в бесклеточной культуре этих штаммов, могут быть составлены как известно в данной области, например капсула твердого желатина с замороженной высушенной культурой штамма Lactobacillus или их производных компонентов. Также смеси штаммов, упомянутых в данной заявке, и целых клеток или их компонентов находятся в пределах объема правовых притязаний данного изобретения.
Штаммы, отобранные в примере 3, например L. reuteri ATCC PTA-6475, был добавлен в обычный йогурт. Штамм L. reuteri ATCC PTA-6475 выращивали и лиофилизировали с использованием стандартных способов выращивания Lactobacillus в молочной промышленности. Эту культуру затем добавляли в предварительно ферментированное молоко с использованием стандартных йогуртовых культур, на уровне 10E+6 КОЕ/грамм йогурта, и йогурт использовали для профилактики атеросклероза у людей. Другие принимаемые внутрь вспомогательные материалы, за исключением йогурта, могут представлять собой, например, молоко, творог, кисломолочные продукты, основанные на молоке ферментированные продукты, ферментированные зерновые продукты, порошки, основанные на молоке.
Для определения факторов, которые снижают или уменьшают воспаление, используют модельные системы с соответствующими цитокинами. В изобретении, раскрытом в настоящей заявке, использовано испытание, основанное на клетках человека.
Клетки THP-1 представляют собой моноцитарную клеточную линию человека, полученную у больных с лейкозом, и которые хранятся в Американской Коллекции Типовых Культур (ATCC No TIB202). Источник этих клеток от хозяина человека делает их особенно подходящими для изучаемых взаимодействий кишечной иммунной системы человека с коменсальными бактериями человека.
Данные в изобретении показывают мощное ингибирование продукции TNF-α конкретными штаммами L. reuteri ATCC PTA-4659 и L. reuteri ATCC PTA-6475 и что данная регуляция опосредована веществом, высвобождаемым в среду для выращивания данными двумя конкретными штаммами во время поздней логарифмической/стационарной фазы роста. И наоборот, два других штамма L. reuteri, были не только не способны ингибировать воспалительный ответ клеток на токсин E. coli, но также индуцировали их воспалительный ответ.
Прямой чашечный метод с плотной средой, выбранной de Man, Rogosa и Sharpe (MRS), содержащей желчные соли, применяли для скриннинга штаммов, выделяющих гидролазу желчных солей и определяющих специфическую активность ферментов для их субстрата. Рост бактерий, продуцирующих BSH, дает рост гидролиза и окисление среды. Гидролиз появляется в виде образования кольца осажденных свободных желчных солей вокруг колоний (Dashkevicz, M.P. and S.D. Feighner. 1989. Development of a differential medium for bile salt hydrolase-active Lactobacillus spp. Appl Environ Microbiol. 55 (1): 11-16).
Признаки настоящего изобретения будут более понятны посредством ссылки на следующие примеры, которые не должны быть истолкованы как ограничивающие изобретение.
Пример 1
Оценка штаммов, имеющих способность понижения уровней TNF-α
Клетки THP-1 инкубировали вместе либо с контрольной средой или кондиционированной средой (L-CM) для выращивания отобранных штаммов L. reuteri, L. reuteri ATCC PTA-4659, L. reuteri ATCC PTA-4975, L. reuteri ATCC 55730 и штамма L. reuteri PTA-4965. Кондиционированная среда (L-CM) представляет собой бесклеточные супернатанты из 9-часовой или 24-часовой культур каждой из культур L. reuteri. Клетки THP-1 стимулировали либо контрольной средой, либо LPS, выработанной E. coli (которая ведет к выработке TNFα в нормальном воспалительном ответе) в процессе 3,5-часовой инкубации, после которой клетки извлекли, а супернатанты исследовали на уровни TNFα с применением методики ELISA.
Материалы:
Лейкемическая моноцитарная клеточная линия THP-1 (ATCC, каталоговый номер TIB202)
Среда RPMI 1640 (Gibco-Invitrogen)
Фетальная бычья сыворотка (Gibco-Invitrogen)
Пенициллин-стрептомициновый раствор (Sigma)
Липополисахарид E. coli серотипа О127:B8 (Sigma, каталоговый номер L3137)
TNF-alph/TNF-SFII человека DuoSet ELISA средство разработки (R&D Systems, каталоговый номер DY210)
IL-10 человека DuoSet, 2-е средство формирования (R&D Systems, каталоговый номер DY217)
Метод:
Использовали моноцитарную клеточную линию THP-1. 5% (об/об) среды MRS и 5% (об/об) кондиционированной среды Lactobacillus добавили в соответствующие лунки. Кондиционированная среда Lactobacillus представляла собой супернатант из 24-часовой культуры видов Lactobacillus в среде MRS. Затем кондиционированную среду регулировали по pH посредством скоростной вакуумной сушки и пеллет ресуспендировали в равном объеме культуральной среды. Хотя увлажнительная камера сконструирована так, чтобы минимизировать испарение жидкости, после 48 часов инкубирования, объем клеточной суспензии в 24-луночных планшетах уменьшился до, приблизительно, 475 мкл.
100 нг/мл липополисахарида E. coli серотипа O127:B8 добавили в соответствующие лунки, которые инкубировали в 37°C, увлажненной, 5% CO2 камере.
После 3,5 часов инкубирования, культуры собирали в 1,5 мл центрифужные пробирки и центрифугировали при 1500 RCF в течение 5 минут при 4°C. Супернатант собирали.
Экспрессию цитокина тестировали посредством ELISA (Quantikine TNF-alph/TNF-SFII human DuoSet).
Используемая культуральная среда составляла 10% FBS, 2% пенициллин-стрептомицин в RPMI-растворе 1640.
Результаты - пример 1
Добавление LPS к клеткам THP-1 в отсутствие L-CM привело к выработке 130 пг/мл TNFα в процессе 3,5-часового инкубационного периода. Это является ожидаемым воспалительным ответом клеток THP-1 на токсин. Добавление среды для роста (MRS), которая выступает как контроль для добавлений L-CM, привело к выработке 132 пг/мл TNFα, и, таким образом, MRS не препятствовало ответу на LPS. Добавление 24-часовой L-CM из L. reuteri ATCC PTA 4659 или L. reuteri ATCC PTA 6475 существенно уменьшало уровни LPS стимулированной TNFα, лишь до 13 и 11 пг/мл соответственно. Это отображает ингибирование LPS-стимулированного продуцирования TNFα, равное 90 и 93% соответственно.
И наоборот, в присутствии 24-часовой L-CM из L. reuteri ATCC 55730 и штамма L. reuteri PTA-4965, LPS оставалась все еще способной вызывать значительное повышение TNF-α по сравнению с уровнями в отсутствии LPS. LPS-стимулированное продуцирование TNF-α увеличивалось на 54% и 42% несмотря на присутствие L-CM из L. reuteri ATCC 55730 и штамма L. reuteri ATCC PTA-4965, соответственно (фиг.1).
Подобные эксперименты, проведенные с 9-часовой L-CM из L. reuteri ATCC PTA 4659 или L. reuteri ATCC PTA 6475, продемонстрировали, что ингибирующее воздействие на LPS-стимулированное продуцирование TNFα было значительно меньше, но все еще присутствовало. Таким образом, более длительные периоды инкубирования штаммов L. reuteri с изъятием L-CM в конце логарифмической/стационарной фазы роста, приводят к повышению эффективности в ингибировании продуцирования TNF-α.
Пример 2
Прямой чашечный метод - оценка штаммов с внеклеточной активностью BSH
Штаммы молочнокислых бактерий человека выращивали в условиях с ограничением кислорода при 37°C в бульоне MRS (Acumedia Manufacturers, Inc. Baltimore, Maryland) в течение ночи, и инокулировали в несущую лактобациллы среду (LCM) с 10% глицерином (BDH Laboratory Supplies, England).
| Штамм | GDCA | TDCA | ||
| Актив-ность | Рост | Актив-ность | Рост | |
| Lactobacillus reuteri MV10-1a | - | + | - | + |
| Lactobacillus reuteri ATCC 55730 | + | + | - | + |
| Lactobacillus reuteri MM2-2 | + | + | + | + |
| Lactobacillus reuteri MF52-1F | + | + | + | + |
| Lactobacillus reuteri DSM20016 | + | + | + | + |
| Lactobacillus rhamnosus MV45-2a | + | + | + | + |
| Lactobacillus gasseri MV7-2a | + | + | + | + |
| Lactobacillus gasseri MV1-21g | - | + | - | + |
| Lactobacillus reuteri ATCC PTA-4965 | - | - | + | + |
| Lactobacillus paracasei MV49-2b | + | + | + | + |
| Lactobacillus reuteri ATCC PTA-4659 | + | + | + | + |
| Lactobacillus reuteri ATCC PTA-6475 | + | + | + | + |
| Lactobacillus reuteri FJ3 | + | + | + | + |
| Lactobacillus reuteri MM4-2a | + | + | + | + |
| Lactobacillus reuteri FJ1 | + | + | + | + |
| Lactobacillus rhamnosus GG | - | + | - | + |
| Lactobacillus coryniformis MM7 | + | + | - | + |
| Streptococcus salivarius subsp thermophilus | + | + | - | + |
| Lactobacillus delbrueckii subsp bulgaricus | - | - | - | + |
| Lactobacillus casei shirota | + | + | - | + |
| Lactobacillus fermentum Kx356C2 | + | + | + | + |
| Lactobacillus brevis ATCC 14869 | + | + | - | + |
| Lactobacillus fermentum Kx338A2 | - | - | - | + |
| Lactobacillus plantarum 299v | + | + | - | + |
| Lactobacillus gasseri Kx338A3 | - | - | - | + |
| Lactobacillus gasseri Kx315A1 | + | + | + | + |
Исходные культуры хранили при -80°C для дальнейшего применения. Штаммы были получены из BioGaia AB laboratories и коллекций штаммов в Lund (Sweden), Raleigh (NC, United States of America) и Lantbruksuniversitetet (University of Agriculture), Uppsala (Sweden).
Для скрининга внеклеточной BSH активности штаммы выращенных за ночь культур засеяли штрихом на планшеты с MRS-цистеиновым (MRS-c) агаром (Acumedia), содержащие 3 мМ желчных солей, GDCA (Sigma, Steinheim, Germany), TDCA (Sigma), GCA (Sigma), и TCA (Fluka, Sigma-Aldrich, Germany), соответственно. Планшеты анаэробно инкубировали (AnaeroGen, Oxoid, UK) в течение 48 часов при 37°C. Преципитация, которая является результатом деконъюгации желчной кислоты, была оценена визуально, и, таким образом, субъективно, отсюда активность значится как отсутствие активности (-) или активность (+). Планшеты с агаром MRS-ц без добавления желчной соли использовали в качестве контроля роста и негативного контроля.
Пример 3
Отбор штаммов с активностью BSH и способностью одновременно понижать уровни TNF-α
| Штамм | Снижение TNF-α | Активность BSH | Отбор |
| L. reuteri ATCC PTA-4659 | + + | + + | S |
| L. reuteri ATCC PTA-6475 | + + | + + | S |
| L. reuteri ATCC 55730 | - - | + - | - |
| L. reuteri ATCC PTA-4965 | - - | - + | - |
Данные таблицы выше подтверждают неожиданные данные, что различные штаммы L. reuteri имеют различные воздействия на продуцирование TNF-α и BSH, и что штаммы L. reuteri ATCC PTA-4659 и L. reuteri ATCC PTA-6475 являются особенно подходящими для применения при атеросклерозе.
Пример 4
Применение кондиционированной среды
Применяя способ примера 1, была отобрана кондиционированная среда от одного эффективно понижающего TNF-α штамма, в данном примере среда от L. reuteri ATCC PTA-4659. Данную среду получали в больших объемах посредством выращивания штамма в среде de Man, Rogosa, Sharpe (MRS) (Difco, Sparks, MD). Выращенные за ночь культуры лактобацилл разводили до OD600, равного 1,0 (соответствующий приблизительно 109 клеток/мл), и дополнительно разводили 1:10 и выращивали в течение дополнительных 24 ч. Бактериальную бесклеточную кондиционированную среду собирали посредством центрифугирования при 8500 об/мин в течение 10 мин при 4°C. Кондиционированную среду отделяли от клеточного осадка, а затем фильтровали через фильтровальную установку с порами 0,22 мкм (Millipore, Bedford, Mass.). Затем кондиционированную среду лиофилизировали и обрабатывали, с использованием стандартных способов, чтобы получить таблетку. Данную таблетку применяли в качестве лекарственного препарата у людей для эффективного лечения атеросклероза.
Пример 5
Применение отобранных противовоспалительных штаммов Lactobacillus reuteri
Применяя способы из примера 1 и 2, был отобран один штамм, эффективно снижающий TNF-α и в то же время повышающий активность BSH, в данном эксперименте L. reuteri ATCC PTA-4659. Штамм L. reuteri затем лиофилизировали и обрабатывали, с использованием стандартных способов, чтобы получить капсулу, в диапазоне равном 105-109 КОЕ. Данную капсулу применяли в качестве лекарственного препарата у людей для эффективного уменьшения выраженности атеросклероза.
Пример 6
Lactobacillus reuteri, уменьшающие бляшки сонной артерии при атеросклерозе
Всего 1059 пациентов было подвергнуто достоверным ультразвуковым исследованиям на исходном исследовании с повторением через один год. На исходном исследовании и в последующем применялись одна и та же ультразвуковая система визуализации изображений и датчик (Acuson Xp10 128, ART, прошедший апгрейд, с 7,5-МГц ультразвуковым датчиком для линейного сканирования, размер апертуры 38 мм, SIEMENS). Параметры регулировки изображения в режиме В предварительно устанавливают для фиксированных значений и не изменяют в ходе проведения каждого обследования. У обследуемого в положении лежа на спине, с головой, повернутой немного влево, сканировали правую сонную артерию под несколькими разными углами облучения как вдоль, так и поперек, от непосредственно над ключицей до как можно дистальнее до бифуркации. Бляшку определяли как локальное выпячивание стенки сосуда в полость, равное, по меньшей мере, 50%, по сравнению с толщиной прилежащих интимы-медии (IMT). У каждого обследуемого индивида регистрировали максимальную из 6 бляшек в ближней и дальней стенках общей сонной артерии, бифуркации и внутренней сонной артерии, соответственно. Для каждой бляшки датчиком записывали неподвижное изображение параллельно стенке сосуда и наиболее перпендикулярно к точке максимальной толщины бляшки с выбранной установкой области расширения до 38 мм × 20 мм. Все регистрационные записи сделаны на видеоплэйере Panasonic 7650 высококачественной видеозаписью системы VHS.
На исходном исследовании 1059 человек имеют наличие бляшек (таблица 1). Площадь бляшек сонной артерии снижалась в любом возрасте. Средняя общая площадь бляшек (SE) на исходном исследовании составляет 24,1 мм2. В последующем периоде после потребления ежедневной дозы L. Reuteri ATCC PTA-4659 (108 КОЕ) все пациенты имеют снижение общей площади бляшек. Среднее снижение составляет 9,0 мм2.
| Возраст | N | Площадь бляшек при исходном исследовании мм2 | Изменение площади бляшек мм2 |
| <60 | 352 | 18,9 | 6,4 |
| 60-64 | 291 | 24,2 | 9,4 |
| 65-70 | 289 | 27,2 | 9,7 |
| >70 | 127 | 27,2 | 11,5 |
| SE | 24,1 | 9,0 |
Несмотря на то, что изобретение было описано со ссылкой на конкретные варианты осуществления, должны быть понятно, возможны многие варианты, модификации и варианты осуществления, и, соответственно, все такие варианты, модификации и варианты осуществления должны рассматриваться в пределах сущности и объема правовых притязаний изобретения.
Claims (4)
1. Способ отбора штамма Lactobacillus для профилактики и/или лечения атеросклероза и других сердечно-сосудистых заболеваний, предусматривающий:
a) отбор и культивирование клеток штамма лактобактерии;
b) оценку способности снижать уровень TNF-α указанного штамма;
c) измерение экстрацеллюлярной активности BSH указанного штамма;
d) отбор штамма лактобактерии, который одновременно обладает:
i) способностью повышать активность BSH и, следовательно, понижать холестерин-ЛПНП сыворотки и
ii) одновременно снижать уровни провоспалительного цитокина TNF-α.
a) отбор и культивирование клеток штамма лактобактерии;
b) оценку способности снижать уровень TNF-α указанного штамма;
c) измерение экстрацеллюлярной активности BSH указанного штамма;
d) отбор штамма лактобактерии, который одновременно обладает:
i) способностью повышать активность BSH и, следовательно, понижать холестерин-ЛПНП сыворотки и
ii) одновременно снижать уровни провоспалительного цитокина TNF-α.
2. Пищевая композиция, содержащая штамм, отобранный по п.1, для профилактики атеросклероза и других сердечно-сосудистых заболеваний.
3. Пищевая композиция п.2, дополнительно содержащая усваиваемую основу.
4. Фармацевтическая композиция, содержащая штамм, отобранный по п.1, и фармацевтически приемлемый носитель, для профилактики и/или лечения атеросклероза и других сердечно-сосудистых заболеваний.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US11/786,356 US20080254011A1 (en) | 2007-04-11 | 2007-04-11 | Use of selected lactic acid bacteria for reducing atherosclerosis |
| US11/786,356 | 2007-04-11 | ||
| PCT/SE2008/050248 WO2008127180A1 (en) | 2007-04-11 | 2008-03-05 | Use of selected lactic acid bacteria for reducing atherosclerosis |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2009141617A RU2009141617A (ru) | 2011-05-20 |
| RU2490019C2 true RU2490019C2 (ru) | 2013-08-20 |
Family
ID=39853915
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2009141617/15A RU2490019C2 (ru) | 2007-04-11 | 2008-03-05 | Применение отобранных молочнокислых бактерий для уменьшения атеросклероза |
Country Status (11)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US20080254011A1 (ru) |
| EP (1) | EP2136824A4 (ru) |
| JP (1) | JP2010523144A (ru) |
| KR (1) | KR20100015371A (ru) |
| CN (1) | CN101702881A (ru) |
| AU (1) | AU2008239833A1 (ru) |
| BR (1) | BRPI0810881A2 (ru) |
| CA (1) | CA2683912A1 (ru) |
| RU (1) | RU2490019C2 (ru) |
| UA (1) | UA101316C2 (ru) |
| WO (1) | WO2008127180A1 (ru) |
Families Citing this family (24)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP6100526B2 (ja) | 2009-05-01 | 2017-03-22 | ユーエーエス・ラボラトリーズ・エルエルシー | 変性疾患の予防および治療のための細菌組成物 |
| US20110293710A1 (en) * | 2010-02-02 | 2011-12-01 | Delphine Saulnier | Immunomodulatory properties of lactobacillus strains |
| RU2460776C9 (ru) * | 2011-04-21 | 2012-11-10 | Общество с ограниченной ответственностью "Бифилюкс" | Штамм lactobacillus acidophilus, используемый для получения продукции, содержащей лактобактерии |
| US20130022586A1 (en) | 2011-07-21 | 2013-01-24 | James Versalovic | Production and use of bacterial histamine |
| EP2785878B1 (en) * | 2011-11-30 | 2016-08-31 | Compagnie Gervais Danone | Reuterin-producing lactobacillus brevis |
| US20130251829A1 (en) * | 2012-03-23 | 2013-09-26 | Mead Johnson Nutrition Company | Probiotic derived non-viable material for infection prevention and treatment |
| LT2854826T (lt) | 2012-06-04 | 2019-02-11 | Biogaia Ab | Lactobacillus reuteri atcc pta 6475, skirtas panaudoti kaulų masės praradimo prevencijai arba gydymui žinduoliuose |
| EP3401396A1 (en) * | 2012-10-03 | 2018-11-14 | Metabogen AB | Treating or preventing atherosclerosis or associated diseases by beta-carotene |
| EP3009149B1 (en) * | 2013-06-11 | 2021-10-20 | House Wellness Foods Corporation | Carrier for transporting substance to macrophages |
| GB201319539D0 (en) * | 2013-11-05 | 2013-12-18 | Optibiotix Health Ltd | Composition & methods of screening |
| CA2966074A1 (en) | 2013-11-05 | 2016-05-12 | Optibiotix Limited | Prebiotic composition and its method of production |
| GB201319531D0 (en) | 2013-11-05 | 2013-12-18 | Optibiotix Health Ltd | Composition & methods of screening |
| GB201319538D0 (en) * | 2013-11-05 | 2013-12-18 | Optibiotix Health Ltd | Composition |
| GB201319540D0 (en) | 2013-11-05 | 2013-12-18 | Optibiotix Health Ltd | Composition |
| CN105062933A (zh) * | 2015-09-11 | 2015-11-18 | 北京博锦元生物科技有限公司 | 一种罗伊氏乳杆菌及其应用 |
| JP6986856B2 (ja) * | 2016-05-10 | 2021-12-22 | 協同乳業株式会社 | トリメチルアミンを産生し難い腸内菌叢を形成するためのプロバイオティクス組成物および方法 |
| CN106434427A (zh) * | 2016-08-29 | 2017-02-22 | 中国疾病预防控制中心传染病预防控制所 | 乳酸杆菌益生菌cgmcc no.12421及在制备降脂药物中的应用 |
| CN112236155A (zh) * | 2018-05-31 | 2021-01-15 | 深圳华大生命科学研究院 | 一种组合物及其应用 |
| CN109453152B (zh) * | 2018-11-23 | 2020-10-27 | 西安交通大学 | 一种改善主动脉内皮细胞功能的药物及其应用 |
| AU2020352646A1 (en) * | 2019-09-26 | 2022-03-24 | Precisionbiotics Group Limited | Lactobacillus reuteri |
| CN111560330B (zh) * | 2020-05-12 | 2022-04-26 | 天津科技大学 | 一种具有免疫调节、抗炎和抗宫颈癌作用的干酪乳杆菌及应用 |
| CN111588021A (zh) * | 2020-05-25 | 2020-08-28 | 北京科拓恒通生物技术股份有限公司 | 一株可缓解和治疗冠心病的乳双歧杆菌Probio-M8及其应用 |
| CN113249249A (zh) * | 2021-04-29 | 2021-08-13 | 南昌大学 | 一种具有缓解动脉粥样硬化功效的植物乳杆菌zdy04 |
| CN114410533A (zh) * | 2022-01-27 | 2022-04-29 | 江南大学 | 罗伊氏乳杆菌ccfm1040在缓解、预防动脉粥样硬化中的应用 |
Family Cites Families (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5413960A (en) * | 1987-05-01 | 1995-05-09 | Biogaia Ab | Antibiotic reuterin |
| US5458875A (en) * | 1990-06-15 | 1995-10-17 | Biogaia Ab | In ovo method for delivering Lactobacillus reuteri to the gastrointestinal tract of poultry |
| US5534253A (en) * | 1995-06-07 | 1996-07-09 | Biogaia Ab | Method of treating enteropathogenic bacterial infections in poultry |
| US5837238A (en) * | 1996-06-05 | 1998-11-17 | Biogaia Biologics Ab | Treatment of diarrhea |
| JP3400282B2 (ja) * | 1997-02-21 | 2003-04-28 | 株式会社ヤクルト本社 | 脂質代謝改善剤およびそれを含有する食品 |
| SE510753C2 (sv) * | 1997-08-05 | 1999-06-21 | Probi Ab | Användning av en stam av Lactobacillus för tillverkning av ett läkemedel för reduktion av fibrinogenhalten i blod |
| WO2000023471A2 (en) * | 1998-10-20 | 2000-04-27 | Vlaams Interuniversitair Instituut Voor Biotechnologie Vzw | Use of a cytokine-producing lactococcus strain to treat colitis |
| AUPR101600A0 (en) * | 2000-10-25 | 2000-11-16 | Atheromastat Pty Ltd | Compositions and methods for diagnosis and treatment of cardiovascular disorders |
| AUPS194902A0 (en) * | 2002-04-24 | 2002-06-06 | Atheromastat Pty Ltd | Compositions and methods for diagnosis and treatment of cardiovascular disorders |
| TWI430810B (zh) * | 2002-07-19 | 2014-03-21 | Abbott Lab S A | ＴＮＦα相關病症之治療 |
| US7105336B2 (en) * | 2002-10-07 | 2006-09-12 | Biogaia Ab | Selection and use of lactic acid bacteria for reducing inflammation caused by Helicobacter |
| TWI241912B (en) * | 2002-10-30 | 2005-10-21 | Food Industry Res & Dev Inst | Novel Acid-and bile salt-resistant Lactobacillus isolates having the ability to lower and assimilate cholesterol |
| US6872565B2 (en) * | 2003-01-29 | 2005-03-29 | Biogaia Ab | Product containing Lactobacillus reuteri strain ATTC PTA-4965 or PTA-4964 for inhibiting bacteria causing dental caries |
| JP2005336159A (ja) * | 2004-04-28 | 2005-12-08 | Univ Kurume | Ｎａｄｐｈオキシダーゼ活性を抑制する色素上皮由来因子の新規治療用途 |
| GB0424552D0 (en) * | 2004-11-05 | 2004-12-08 | Cambridge Theranostics Ltd | Methods and means |
| US7344867B2 (en) * | 2005-04-15 | 2008-03-18 | Eamonn Connolly | Selection and use of lactic acid bacteria for reducing inflammation in mammals |
| WO2008028300A1 (en) * | 2006-09-07 | 2008-03-13 | Mcgill University | Oral polymeric membrane feruloyl esterase producing bacteria formulation |
-
2007
- 2007-04-11 US US11/786,356 patent/US20080254011A1/en not_active Abandoned
-
2008
- 2008-03-05 CA CA002683912A patent/CA2683912A1/en not_active Abandoned
- 2008-03-05 CN CN200880011696A patent/CN101702881A/zh active Pending
- 2008-03-05 RU RU2009141617/15A patent/RU2490019C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2008-03-05 EP EP08724195A patent/EP2136824A4/en not_active Withdrawn
- 2008-03-05 WO PCT/SE2008/050248 patent/WO2008127180A1/en active Application Filing
- 2008-03-05 JP JP2010502970A patent/JP2010523144A/ja active Pending
- 2008-03-05 BR BRPI0810881-1A2A patent/BRPI0810881A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2008-03-05 AU AU2008239833A patent/AU2008239833A1/en not_active Abandoned
- 2008-03-05 KR KR1020097020740A patent/KR20100015371A/ko not_active Application Discontinuation
- 2008-03-05 UA UAA200911456A patent/UA101316C2/ru unknown
-
2010
- 2010-11-18 US US12/927,539 patent/US20110081328A1/en not_active Abandoned
Non-Patent Citations (2)
| Title |
|---|
| I. De Smet et al. "Cholesterol lowering in pigs through enhanced bacterial bile salt hydrolase activity" Br J Nutr. 1998 Feb; 79(2): 185-94. * |
| Zoccali С. et al. "Inflammation and atherosclerosis in end-stage renal disease" Blood Purif. 2003; 21(1):29-36. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| EP2136824A1 (en) | 2009-12-30 |
| KR20100015371A (ko) | 2010-02-12 |
| BRPI0810881A2 (pt) | 2014-10-21 |
| AU2008239833A2 (en) | 2009-11-26 |
| US20110081328A1 (en) | 2011-04-07 |
| RU2009141617A (ru) | 2011-05-20 |
| US20080254011A1 (en) | 2008-10-16 |
| CA2683912A1 (en) | 2008-10-23 |
| AU2008239833A1 (en) | 2008-10-23 |
| CN101702881A (zh) | 2010-05-05 |
| UA101316C2 (ru) | 2013-03-25 |
| EP2136824A4 (en) | 2010-12-08 |
| JP2010523144A (ja) | 2010-07-15 |
| WO2008127180A1 (en) | 2008-10-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2490019C2 (ru) | Применение отобранных молочнокислых бактерий для уменьшения атеросклероза | |
| Ouwehand et al. | Probiotics: mechanisms and established effects | |
| JP4706016B2 (ja) | 炎症性疾患治療におけるビフィドバクテリウム（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ） | |
| Dicks et al. | Probiotic lactic acid bacteria in the gastro-intestinal tract: health benefits, safety and mode of action | |
| KR20120099663A (ko) | 저콜레스테롤혈증제로서 락토바실러스 플란타룸 균주 | |
| CZ301673B6 (cs) | Kombinace probiotik a její použití | |
| JP5527690B2 (ja) | 免疫調節性機能誘導剤及び食品組成物 | |
| WO2013015331A1 (ja) | Ｎａｓｈモデル動物 | |
| KR100449597B1 (ko) | 헬리코박터 필로리의 활성을 억제하는 유산균 | |
| Garssen et al. | Immunomodulation by probiotics: a literature survey | |
| Botes | Survival of probiotic lactic acid bacteria in the intestinal tract, their adhesion to epithelial cells and their ability to compete with pathogenic microorganisms | |
| KR100424790B1 (ko) | 헬리코박터 필로리의 활성을 억제하는 유산균 | |
| RU2708146C2 (ru) | Средство для улучшения состояния пищеварения | |
| KR100424791B1 (ko) | 헬리코박터 필로리의 활성을 억제하는 유산균 | |
| KR100449598B1 (ko) | 헬리코박터 필로리의 활성을 억제하는 유산균 | |
| IE990033A1 (en) | Bifidobacterium longum infantis in the treatment of inflammatory bowel disease | |
| KR20020046168A (ko) | 헬리코박터 필로리의 활성을 억제하는 유산균 | |
| Lin | Studies on the protective role of probiotics and milk calcium on Salmonella Typhimurium infection in mice: a thesis presented in partial fulfillment of the requirements for the degree of Master of Science in Nutritional Science at Massey University, Palmerston North, New Zealand | |
| Moussavi | Comparative analysis of the viability and functional performance of mono-and multi-species probiotic cultures in a non-dairy food matrix | |
| Devi et al. | Functional Properties of Probiotics and their Beneficial Effects on Human Health | |
| IE20000034A1 (en) | Bifidobacterium in the treatment of Inflammatory Disease |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20140306 |