RU2425690C1 - Способ получения полифенольного средства из травы манжетки, снижающего токсичность циклофосфамида и обладающего цитотоксической активностью - Google Patents
Способ получения полифенольного средства из травы манжетки, снижающего токсичность циклофосфамида и обладающего цитотоксической активностью Download PDFInfo
- Publication number
- RU2425690C1 RU2425690C1 RU2010114834/15A RU2010114834A RU2425690C1 RU 2425690 C1 RU2425690 C1 RU 2425690C1 RU 2010114834/15 A RU2010114834/15 A RU 2010114834/15A RU 2010114834 A RU2010114834 A RU 2010114834A RU 2425690 C1 RU2425690 C1 RU 2425690C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cyclophosphamide
- cytotoxic activity
- lady
- mantle
- agent
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности, к способу получения полифенольного средства, снижающего токсичность циклофосфамида. Способ получения полифенольного средства из травы манжетки, снижающего токсичность циклофосфамида, в котором измельченные листья и верхушки цветоносов с бутонами и цветками манжетки обыкновенной экстрагируют 40% спиртом этиловым при определенных условиях, упаривают и остаток лиофильно высушивают. Средство, полученное вышеописанным способом, эффективно снижает токсичность циклофосфамида и обладает цитотоксической активностью. 2 табл.
Description
За последние годы значительно вырос уровень смертности населения от онкологических заболеваний, уступающий лишь летальности от заболеваний, связанных с сердечно-сосудистой патологией. С каждым годом арсенал средств терапии злокачественных опухолей стремительно пополняется. Новые препараты характеризуются высокой эффективностью и лучшей переносимостью относительно препаратов, разработанных ранее, которые в свою очередь не потеряли актуальности и продолжают широко использоваться для терапии опухолевых процессов. Данные препараты даже в современных условиях не находят адекватной замены и характеризуются высокой эффективностью, но в то же время высокой токсичностью, обуславливающей плохую переносимость для пациента. К таким средствам относится алкилирующий цитостатический препарат - циклофосфамид - производное бис-(β-хлорэтил)-амина, характеризующийся высокой токсичностью даже в дозах, близких к лечебным, что вызывает значительные трудности при его применении.
В то же время с каждым годом растет интерес к препаратам, полученным из растительного сырья. Это обусловлено комплексным действием биологически активных веществ, содержащихся в них, высокой безопасностью, низкой токсичностью и аллергенностью. При этом особое внимание заслуживают лекарственные растения, традиционно применяемые в народной медицине. К таким растениям относится манжетка обыкновенная - Alchemilla vulgaris L.
Трава манжетки с успехом используется как официнальное сырье в Западно-европейских странах и входит в фармакопеи Великобритании, Франции, Германии, Югославии (используется в виде порошка из сухой травы для внутреннего применения). Для нее установлен широкий спектр фармакологического действия: противовоспалительное, кровоостанавливающее, лимфотропное, гипотензивное, гипогликемическое и др. [Hager H. Pharmacopoe ia Anglica, Gall ica, Germanae, Hevetica, Russae inter se collatae. Vratistaiae. Impesis Emesti Gunteri. - MDCCCLXIX. - S.10].
Это обусловлено богатством химического состава, обнаружены:
флавоноиды, фенолкарбоновые кислоты и их эфиры, танины, аминокислоты, а также эссенциальные макро- и микроэлементы, такие как кальций, калий, магний, фосфор, хром, медь, кобальт и др.
Общеизвестен радикалсвязывающий механизм действия полифенолов на супероксидный анион-радикал, а также их ингибирующая активность по отношению к моноаминоксидазе, играющей роль в окислительном стрессе нервной системы, липогеназы, обуславливающей перекисное окисление линолевой кислоты, т.е. антиоксидантная активность полифенолов. Следовательно, целевой продукт обладает не только P-витаминной активностью, адаптогенными, антиоксидантными свойствами, но и токсикомодулирующей и цитотоксической активностью.
Задачей изобретения является способ получения средства, снижающего токсичность циклофосфамида и обладающего цитотоксической активностью.
Поставленная задача решается способом получения полифенольного средства из травы манжетки, характеризующегося тем, что измельченные до 2 мм листья и верхушки цветоносов с бутонами и цветками манжетки обыкновенной экстрагируют 40% спиртом этиловым в соотношении 1:8-12 при нагревании до 35-45°С в течение 55-65 мин, операцию повторяют 2-3 раза, спирт этиловый отгоняют, 2/3 объема водного экстракта упаривают, остаток лиофильно высушивают. Выход целевого продукта 7-8%.
Таблица 1 показывает, что 40% спирт этиловый является оптимальным экстрагентом для решения поставленной задачи.
Таблица 1 | |
Влияние условий экстракции на содержание полифенольных соединений в надземной части манжетки обыкновенной | |
Условия экстракции | Содержание суммы полифенольных соединений, % |
Экстрагент: | |
Вода очищенная | 1,79±0,04 |
Спирт этиловый 40% | 3,85±0,03 |
Спирт этиловый 70% | 3,75±0,01 |
Спирт этиловый 95% | 0,69±0,01 |
Ацетон 25% | 1,08±0,04 |
Соотношение сырье-экстрагент: | |
1:5 | 1,46±0,02 |
1:10 | 3,97±0,02 |
1:50 | 2,87±0,06 |
1:100 | 2,54±0,05 |
Время экстракции, мин: | |
30 | 1,76±0,02 |
45 | 2,47±0,05 |
60 | 3,87±0,06 |
90 | 3,84±0,06 |
Фиг.1 показывает хроматограмму, на которой отражена многокомпонентность полифенольного комплекса травы манжетки, состоящего из галловой кислоты (1), хлорогеновой кислоты (2), кофейной кислоты (3), рутина (4), коричной кислоты (5), кемпферола (6), кверцетина (7) и агримониина (8).
Попытка получить полифенольный препарат из надземной части манжетки обыкновенной по известной методике (А.С. №2128516, МКИ A61K 35/78) не дала ожидаемого выхода полифенольного средства, которое не обладало цитотоксической активностью и способностью снижать токсичность циклофосфамида. Эту способность проявило лишь средство, полученное по предлагаемому способу.
Пример 1. Получение полифенольного средства из травы манжетки
100 г измельченных до 2 мм листьев и верхушек цветоносов с бутонами и цветками манжетки обыкновенной экстрагируют 40% спиртом этиловым в соотношении 1:8 при нагревании до 35°С в течение 55 мин, операцию повторяют 2 раза до полноты извлечения, спирт этиловый отгоняют, 2/3 объема водного экстракта упаривают, остаток лиофильно высушивают.
Выход целевого продукта 7%.
Пример 2. Получение полифенольного средства из травы манжетки
100 г измельченных до 2 мм листьев и верхушек цветоносов с бутонами и цветками манжетки обыкновенной экстрагируют 40% спиртом этиловым в соотношении 1:12 при нагревании до 45°С в течение 65 мин, операцию повторяют 3 раза до полноты извлечения, спирт этиловый отгоняют, 2/3 объема водного экстракта упаривают, остаток лиофильно высушивают.
Выход целевого продукта 8%.
Пример 3. Влияние на токсичность циклофосфамида.
Исследование проводили на мышах-самцах линии BDF1 массой 19-23 г. В качестве модели использовали карциному легкого Льюис (LLC). Опухоль солидная, неиммуногенная, метастазирует в легкие. Прививается подкожно взвесью опухолевых клеток по 60 мг в 0,5 мл питательной среды на мышь.
Животных разделили на 2 группы по 10 особей: 1-й группе вводили однократно циклофосфамид в дозе 450 мг/кг внутрибрюшинно, 2-й группе - однократно циклофосфамид в дозе 450 мг/кг внутрибрюшинно и 10-кратно водный раствор суммы полифенолов перорально по 0,3 мл/мышь (10 мг/кг) с интервалом 24 часа.
За критерии оценки общетоксического действия взяли среднюю продолжительность жизни (СПЖ). За животными наблюдали, оценивая их среднюю продолжительность жизни (СПЖ). В ходе проведения эксперимента в 1-й группе животных, получавших только циклофосфамид, на 11-й день эксперимента пали 83% мышей, во 2-й группе, при сочетанном применении циклофосфамида с водным раствором суммы полифенолов - 0%. Установили, что от токсичности мыши в 1-й группе пали в среднем на 5-й день, а во 2-й группе на 11-й день эксперимента все мыши живы. Животные 2-й группы пали от опухоли на 50-й день. Гибель от токсичности не зафиксирована.
Данные таблицы 2 свидетельствуют о высокой способности суммы полифенолов из травы манжетки снижать общетоксическое действие циклофосфамида.
Таблица 2 | ||
Влияние суммы полифенолов из травы манжетки на среднюю продолжительность жизни (СПЖ) мышей с карциномой легкого Льюис (LLC) | ||
Группа мышей № п/п | Схема лечения | СПЖ, дни |
1 | 450 мг/кг Х 1 циклофосфамид внутрибрюшинно | 5,1±0,3 |
2 | 450 мг/кг Х 1 циклофосфамид внутрибрюшинно + 0,3 мл/мышь (10 мг/кг) Х 10 водный раствор суммы полифенолов per os | 50,2±0,6 |
Пример 4. Цитотоксическая активность средства.
Изучили цитотоксическую активность суммы полифенолов, выделенных из травы манжетки in vitro в МТТ-тесте. В качестве модели использовали клетки экспериментальной меланомы В-16 (линия F-10).
Выживаемость клеток, подвергшихся воздействию изучаемых соединений, оценивали в процентах, принимая за 100% выживаемость контрольной группы:
К=(В/А)×100%,
А - выживаемость клеток контрольной группы,
В - выживаемость клеток в присутствии тестируемых соединений.
Кривая, отображающая выживаемость (в %) опухолевых клеток меланомы В-16 при добавлении в культуральную среду полифенольного средства в концентрации от 1×10-4 до 1×10-10 моль, свидетельствует о значительной цитотоксической активности препарата (фиг.2).
Индекс IC50 (показатель концентрации, при которой выживаемость опухолевых клеток ингибируется на 50%) находился на уровне 5×10-6 моль.
1. Характеристика средства. Предлагаемое средство представляет собой природную смесь высокоактивных полифенолов (агримониина, флавоноидов и фенолкарбоновых кислот), выделенных из травы манжетки - herba Alchemillae, производящими растениями являются виды рода манжетка - Alchemilla sp.семейства розоцветных - Rosaceae, в виде зеленоватого порошка горьковато-вяжущего вкуса, хорошо растворимого в воде и спирте.
2. Проверка на токсичность. Средство в дозе 10 г/кг не обнаруживало токсического действия.
3. Сумма полифенолов травы манжетки снижает общетоксическое действие циклофосфамида. Выживаемость и общее состояние животных в группе, получавшей сочетанное лечение водным раствором суммы полифенолов, выше, чем в группе, получавшей монотерапию циклофосфамидом, в 10 раз; препарат обладает значительной цитотоксической активностью in vitro (IC50=5×10-6 моль).
Полученные данные позволяют сделать вывод, что полифенольное средство из травы манжетки, полученное по предложенному способу, может быть использовано как средство, снижающее общетоксическое действие противоопухолевых препаратов в терапии злокачественных новообразований, и в качестве потенциального противоопухолевого средства.
Claims (1)
- Способ получения полифенольного средства из травы манжетки, снижающего токсичность циклофосфамида и обладающего цитотоксической активностью, характеризующийся тем, что измельченные до 2 мм листья и верхушки цветоносов с бутонами и цветками манжетки обыкновенной экстрагируют 40%-ным спиртом этиловым в соотношении 1:8-12 при нагревании до 35-45°С в течение 55-65 мин, операцию повторяют 2-3 раза, спирт этиловый отгоняют, 2/3 объема водного экстракта упаривают, остаток лиофильно высушивают.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2010114834/15A RU2425690C1 (ru) | 2010-04-14 | 2010-04-14 | Способ получения полифенольного средства из травы манжетки, снижающего токсичность циклофосфамида и обладающего цитотоксической активностью |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2010114834/15A RU2425690C1 (ru) | 2010-04-14 | 2010-04-14 | Способ получения полифенольного средства из травы манжетки, снижающего токсичность циклофосфамида и обладающего цитотоксической активностью |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2425690C1 true RU2425690C1 (ru) | 2011-08-10 |
Family
ID=44754457
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2010114834/15A RU2425690C1 (ru) | 2010-04-14 | 2010-04-14 | Способ получения полифенольного средства из травы манжетки, снижающего токсичность циклофосфамида и обладающего цитотоксической активностью |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2425690C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2680528C1 (ru) * | 2018-07-09 | 2019-02-22 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук" (Томский НИМЦ) | Фитосредство, обладающее мембраностабилизирующим действием при гипоксии головного мозга |
-
2010
- 2010-04-14 RU RU2010114834/15A patent/RU2425690C1/ru not_active IP Right Cessation
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2680528C1 (ru) * | 2018-07-09 | 2019-02-22 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Томский национальный исследовательский медицинский центр Российской академии наук" (Томский НИМЦ) | Фитосредство, обладающее мембраностабилизирующим действием при гипоксии головного мозга |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
KR20170024267A (ko) | 무궁화의 꽃으로부터 추출된 정유를 포함하는 피부 재생용 외용제 및 화장료 조성물 | |
KR20100051032A (ko) | 산삼 또는 인삼을 포함한 인삼류의 형성층 유래 식물줄기세포주를 유효성분으로 함유하는 암의 예방 또는 치료용 조성물 | |
KR20160064966A (ko) | 화학요법제 보조에 사용하는 의약 조성물 및 그 용도 | |
US20100009017A1 (en) | Anticancer Methods Using Extracts of Anemarrhena asphodeloides Bunge | |
EP3156058B1 (en) | Anti-tumor pharmaceutical application of pentacyclic triterpene saponin compounds of szechuan melandium root | |
WO2016043517A1 (ko) | 목단피,백지 및 시호의 혼합 추출물 또는 이의 분획물을 유효성분으로 함유하는,신경 퇴행성 질환의 치료 및 예방용 약학적 조성물 | |
RU2425690C1 (ru) | Способ получения полифенольного средства из травы манжетки, снижающего токсичность циклофосфамида и обладающего цитотоксической активностью | |
KR101816821B1 (ko) | 항암활성을 갖는 기능성 차 및 그 제조방법 | |
CN111606917A (zh) | 一种具c环骈合内酯环新颖骨架的松香烷类化合物及其制备方法与应用 | |
CN102488779A (zh) | 鹿茸草提取物的应用 | |
US7229652B2 (en) | Extract from the leaves of Toona sinensis Roem., and the preparation process and uses thereof | |
KR20200081553A (ko) | 진해거담 예방 및 개선용 조성물 | |
CN105796764B (zh) | 黄荆子总木脂素制备方法及其用途 | |
KR101243115B1 (ko) | 멀꿀 잎 추출물을 포함하는 해열제 | |
CN101444490A (zh) | 一种含脱水卫矛醇经注射给药的制剂及其制备方法 | |
TWI811478B (zh) | 牛樟芝萃取物、牛樟芝組合物的製備方法及醫藥組合物 | |
RU2429852C1 (ru) | Средство, снижающее токсичность циклофосфамида | |
Rahamouz-Haghighi et al. | In vitro organogenesis from transformed root cultures of Plantago lanceolata and phytochemical analysis by HPLC and GC-MS | |
AU2009258014A1 (en) | Anticancer methods using extracts of Anemarrhena asphodeloides Bunge | |
CN104220063B (zh) | 利用细福寿草提取物或其有效物质的抗癌剂组合物 | |
RU2403055C1 (ru) | Способ получения средства из травы манжетки, снижающего токсичность циклофосфамида | |
KR100485936B1 (ko) | 진세노사이드 Rh2 및 Rg3 항암 조성물 | |
KR102607247B1 (ko) | 도깨비고비 추출물을 유효성분으로 포함하는 항암 조성물 | |
CN1287814C (zh) | 源自于香椿叶的萃取物及其制备方法与用途 | |
CN105477068B (zh) | 一种桑枝叶活性部位的制备方法及其应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20120415 |