RU2414711C2 - Способ подготовки пробы для газохроматографического определения хлорорганических пестицидов в крови - Google Patents
Способ подготовки пробы для газохроматографического определения хлорорганических пестицидов в крови Download PDFInfo
- Publication number
- RU2414711C2 RU2414711C2 RU2008152049/15A RU2008152049A RU2414711C2 RU 2414711 C2 RU2414711 C2 RU 2414711C2 RU 2008152049/15 A RU2008152049/15 A RU 2008152049/15A RU 2008152049 A RU2008152049 A RU 2008152049A RU 2414711 C2 RU2414711 C2 RU 2414711C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- blood
- pesticides
- hexane
- sulfuric acid
- extraction
- Prior art date
Links
Abstract
Изобретение относится к медицине. Для исследования берут 5-7 см3 крови и предварительно перед экстракцией пробу обрабатывают 2 см3 60% серной кислоты, экстракцию проводят 30 см3 n-гексана однократно и перед газохроматографическим исследованием n-гексановый экстракт однократно обрабатывают 10 см3 концентрированной серной кислоты. Изобретение позволяет повысить достоверность результатов выявления содержания α-ГХЦГ в 1,75раза, γ-ГХЦГ в 1,55 раза и сократить время подготовки пробы в 2 раза. 1 табл.
Description
Предлагаемое изобретение относится к медицине, а именно к экологии человека, и может быть использовано для ранней диагностики токсических воздействий хлорорганическими пестицидами малой интенсивности и контроля при детоксикационном лечении больных с патологией пищеварительной системы, осложненной воздействием этих веществ.
Хлорорганические пестициды (α-, β-, γ-ГХЦГ) являются наиболее опасными для здоровья человека химическими факторами антропогенного происхождения, представляя несомненную медико-экологическую проблему с высоким риском поступления этих веществ в организм человека, биокумуляции, развития обусловленной патологии и влияния на общую заболеваемость населения сельскохозяйственных регионов. При отсутствии специфического механизма воздействия хлорорганических пестицидов на развитие и течение заболеваний особую диагностическую ценность приобретают экспозиционные тесты в биологических средах. Вместе с тем большая потенциальная возможность использования крови как биообъекта для оценки уровня биологического носительства пестицидов не нашла достаточного обеспечения в методическом плане.
Известен газохроматографический способ определения микроколичеств пестицидов различного химического строения (хлорорганических, фосфорорганических пестицидов, карбаматов и др.) в биологических жидкостях человека [1].
Недостатком данного способа является многоэтапность, затрата значительного количества времени для подготовки пробы к газохроматографическому определению пестицидов, а также недостаточная селективность.
Описанный способ количественного определения хлорорганических пестицидов в сыворотке крови [2] включает экстракцию смесью n-гексана и ацетона (9:1), очистку экстракта на колонке с оксидом алюминия и анализ на газожидкостном хроматографе. Метод трудоемок, возможны потери на этапе очистки экстракта на колонке.
Основным недостатком способа является тот факт, что используют сыворотку крови, а не цельную кровь, т.к. значительное количество пестицидов сорбируется на эритроцитах.
За ближайший аналог принят способ, в основу которого положены принципы определения галогенопроизводных алициклических углеводородов в биологических средах [3], а именно газохроматографическое определение хлорорганических пестицидов в крови путем трехкратной экстракции порциями по 5 см3 n-гексаном в течение 30 минут, двукратной обработки экстракта концентрированной серной кислотой по 5 см3 в течение 10 мин и последующим аналитическим определением на газожидкостном хроматографе.
Недостатком данного способа является малый объем биоматериала для определения микроколичеств исследуемых пестицидов, неполная экстракция n-гексаном связанных с липидами и белками пестицидов, а также длительность анализа из-за многократности этапов экстракции и очистки экстракта серной кислотой.
Технической задачей, на решение которой направлено предполагаемое изобретение, является разработка более достоверного и ускоренного способа подготовки пробы для газохроматографического определения хлорорганических пестицидов в крови.
Существенная новизна изобретения состоит в том, что для исследования берут 5-7 см крови и предварительно перед экстракцией пробу обрабатывают 2 см3 60% серной кислоты, экстракцию проводят 30 см3 n-гексана однократно и перед газохроматографическим исследованием n-гексановый экстракт однократно обрабатывают 10 см3 концентрированной серной кислоты.
Техническим результатом использования способа является повышение достоверности результатов выявления содержания хлорорганических пестицидов в крови и сокращение продолжительности анализа за счет того, что для исследования берут 5-7 см3 крови и предварительно перед экстракцией пробу обрабатывают 2 см3 60% серной кислоты, экстракцию проводят 30 см3 n-гексана однократно и перед газохроматографическим исследованием n-гексановый экстракт однократно обрабатывают 10 см концентрированной серной кислоты.
Способ осуществляется следующим образом: 5-7 см3 крови помещают во флаконы с широким горлом и притертой пробкой, туда же добавляют по 2 см3 60% серной кислоты, растирают в течение 10 мин. После чего осуществляют экстракцию пестицидов путем обработки 30 см3 n-гексана однократно в закрытом флаконе при постоянном встряхивании на аппарате в течение 30 мин затем n-гексановый экстракт отделяют и проводят однократно очистку от соэкстрактивных веществ 10 см3 концентрированной серной кислоты в течение 30 мин при встряхивании. Очищенный n-гексановый слой отделяют от кислоты и проводят концентрирование в испарителе до 1,5 см3. В хроматограф вводят по 5 мкл. Режим хроматографирования соответствует описанному в ближайшем аналоге.
Апробацию способа осуществляли у 14 больных хроническими заболеваниями желудка и двенадцатиперстной кишки (гастритом, гастродуоденитом), имеющих в процессе профессиональной деятельности контакт с хлорорганическими пестицидами (6 мужчин, 8 женщин в возрасте от 35 до 47 лет).
Параллельно в одном и том образце крови проводили определение α- и γ-ГХЦГ предлагаемым способом и способом, описанным в аналоге. Результаты исследований представлены в таблице.
Таблица | |||
Показатели содержания пестицидов в крови при определении предлагаемым способом (I) и способом, описанным в ближайшем аналоге (II) | |||
Наименование пестицида | Концентрация в крови, мг/дм3 | ||
I | II | ||
α-ГХЦГ | 0,0098±0,0011 | 0,0052±0,0013 | р≤0,05 |
γ-ГХЦГ | 0,0199±0,0015 | 0,0128±0,0014 | р≤0,05 |
Установлено, что при использовании предлагаемого способа подготовки пробы крови для газохроматографического определения выявляемость содержания α-ГХЦГ в 1,75 раза, а γ-ГХЦГ в 1,55 раза выше по сравнению с аналогом. Время подготовки пробы до этапа концентрирования n-гексанового экстракта в испарителе при использовании предлагаемого способа составило 70 мин., а способа в аналоге - 140 мин, т.е. сократилось в 2 раза.
Пример. Больной Н., возраст 42 года, работник склада агрохимикатов. Поступил на стационарное лечение в РЦФХГ с диагнозом хронический гастродуоденит, хронический гепатит. В анамнезе контакт с хлорорганическими пестицидами на протяжении 8 лет. Назначено определение содержания α- и γ-ГХЦГ в крови. Для чего произвели забор венозной крови в объеме 5 см3, поместили образец во флакон с широким горлом и притертой пробкой, туда же добавили 2 см3 60% серной кислоты, растирали стеклянной палочкой в течение 10 мин. После чего провели экстракцию пестицидов из образца путем обработки 30 см 3 n-гексана в закрытом флаконе при постоянном встряхивании на аппарате в течение 30 мин, затем n-гексановый экстракт отделили и провели однократно очистку от соэкстрактивных веществ 10 см3 концентрированной серной кислоты в течение 30 минут при встряхивании. Очищенный n-гексановый слой отделили от кислоты и провели концентрирование экстракта в ротационном испарителе до 1,5 см3. В хроматограф ввели с помощью микрошприца 5 мкл. Режим хроматографирования соответствовал описанному в аналоге. Рассчитанная концентрация исследуемых пестицидов в крови у обследованного пациента составила для α-ГХЦГ 0,0089 мг/дм3, для γ-ГХЦГ 0,0135 мг/дм3. Время подготовки пробы крови до этапа концентрирования n-гексанового экстракта составило 70 мин.
На основании полученных результатов содержания хлорорганических пестицидов в крови больному Н. назначили детоксикационное лечение на основе пектина (пектин цитрусовый и пектин яблочный - «Медетопект»).
Использование предлагаемого способа представляется перспективным в плане своевременной диагностики хронической интоксикации хлорорганическими пестицидами, патогенетического обоснования, лечения и реабилитационных мероприятий при заболеваниях пищеварительной системы, осложненных воздействием этих факторов.
Источники информации
1. Александрова Л.Г. Определение микроколичеств пестицидов различного химического строения в биологических жидкостях человека. / Гигиена труда. - Киев, 1989. - вып.25. - С.127-131.
2. Minelli E.V. Quantitive method for the determination of organochlorine pesticides in serum / Anal. Toxicol. - 1996. - №1. - P.23-26.
3. Клисенко М.А. Методы определения микроколичеств пестицидов. - М.: Колос. - 1977. - С.15, 19.
Claims (1)
- Способ подготовки пробы для газохроматографического определения хлорорганических пестицидов в крови, включающий экстракцию пестицидов из крови n-гексаном, очистку от соэкстративных веществ концентрированной серной кислотой, концентрирование n-гексанового экстракта, отличающийся тем, что для исследования берут 5-7 см3 крови и предварительно перед экстракцией пробу обрабатывают 2 см3 60% серной кислоты, экстракцию проводят 30 см3 n-гексана однократно и перед газохроматографическим исследованием n-гексановый экстракт однократно обрабатывают 10 см3 концентрированной серной кислоты.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2008152049/15A RU2414711C2 (ru) | 2008-12-26 | 2008-12-26 | Способ подготовки пробы для газохроматографического определения хлорорганических пестицидов в крови |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2008152049/15A RU2414711C2 (ru) | 2008-12-26 | 2008-12-26 | Способ подготовки пробы для газохроматографического определения хлорорганических пестицидов в крови |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2008152049A RU2008152049A (ru) | 2010-07-10 |
RU2414711C2 true RU2414711C2 (ru) | 2011-03-20 |
Family
ID=42684180
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2008152049/15A RU2414711C2 (ru) | 2008-12-26 | 2008-12-26 | Способ подготовки пробы для газохроматографического определения хлорорганических пестицидов в крови |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2414711C2 (ru) |
Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2543360C1 (ru) * | 2013-10-01 | 2015-02-27 | Федеральное Государственное Автономное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования "Дальневосточный Федеральный Университет" (Двфу) | Способ подготовки пробы для газохроматографического определения пестицидов в биоматериале |
CN104569254A (zh) * | 2014-12-16 | 2015-04-29 | 国家烟草质量监督检验中心 | 一种烟草及烟草制品中有机氯农药残留量的测定方法 |
RU2713661C1 (ru) * | 2019-11-06 | 2020-02-06 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Дальневосточный федеральный университет» (ДВФУ) | Способ подготовки пробы для газохроматографического определения хлорорганических соединений в биоматериале |
RU2727589C1 (ru) * | 2019-11-06 | 2020-07-22 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Дальневосточный федеральный университет» (ДВФУ) | Способ подготовки пробы для газохроматографического определения хлорорганических соединений в биоматериале |
RU2741367C1 (ru) * | 2020-09-14 | 2021-01-25 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Дальневосточный федеральный университет" (ДВФУ) | Способ подготовки пробы для газохроматографического определения хлорорганических соединений в биоматериале |
RU2741368C1 (ru) * | 2020-09-14 | 2021-01-25 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Дальневосточный федеральный университет" (ДВФУ) | Способ подготовки пробы для газохроматографического определения хлорорганических соединений в биоматериале |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN103592399A (zh) * | 2013-12-04 | 2014-02-19 | 上海大学 | 同时测定人体血清中有机氯农药和合成麝香浓度的方法 |
-
2008
- 2008-12-26 RU RU2008152049/15A patent/RU2414711C2/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
КЛИСЕНКО М.А. Методы определения микроколичеств пестицидов. - М.: Колос, 1977, с.15, 19. * |
Cited By (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2543360C1 (ru) * | 2013-10-01 | 2015-02-27 | Федеральное Государственное Автономное Образовательное Учреждение Высшего Профессионального Образования "Дальневосточный Федеральный Университет" (Двфу) | Способ подготовки пробы для газохроматографического определения пестицидов в биоматериале |
CN104569254A (zh) * | 2014-12-16 | 2015-04-29 | 国家烟草质量监督检验中心 | 一种烟草及烟草制品中有机氯农药残留量的测定方法 |
RU2713661C1 (ru) * | 2019-11-06 | 2020-02-06 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Дальневосточный федеральный университет» (ДВФУ) | Способ подготовки пробы для газохроматографического определения хлорорганических соединений в биоматериале |
RU2727589C1 (ru) * | 2019-11-06 | 2020-07-22 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования «Дальневосточный федеральный университет» (ДВФУ) | Способ подготовки пробы для газохроматографического определения хлорорганических соединений в биоматериале |
RU2741367C1 (ru) * | 2020-09-14 | 2021-01-25 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Дальневосточный федеральный университет" (ДВФУ) | Способ подготовки пробы для газохроматографического определения хлорорганических соединений в биоматериале |
RU2741368C1 (ru) * | 2020-09-14 | 2021-01-25 | Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Дальневосточный федеральный университет" (ДВФУ) | Способ подготовки пробы для газохроматографического определения хлорорганических соединений в биоматериале |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2008152049A (ru) | 2010-07-10 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2414711C2 (ru) | Способ подготовки пробы для газохроматографического определения хлорорганических пестицидов в крови | |
Skopp | Preanalytic aspects in postmortem toxicology | |
Ueta et al. | Breath acetone analysis with miniaturized sample preparation device: In-needle preconcentration and subsequent determination by gas chromatography–mass spectroscopy | |
Buszewski et al. | Analytical and unconventional methods of cancer detection using odor | |
Yamaguchi et al. | Headspace sorptive extraction-gas chromatography–mass spectrometry method to measure volatile emissions from human airway cell cultures | |
Mazarr-Proo et al. | Distribution of GHB in tissues and fluids following a fatal overdose | |
CN103822814A (zh) | 一种用于有毒物质提取的QuEChERS提取方法及其应用 | |
JP4694474B2 (ja) | 唾液分析による脂溶性ビタミン及び/又は脂溶性フードファクターの検査方法 | |
Hoagland et al. | CONSTITUENTS OF ELEMENTARY BODIES OF VACCINIA: IV. Demonstration of Copper in the Purified Virus | |
CN113433252A (zh) | 一种同步测定血液中多种多环芳烃的方法及应用 | |
CN104411833A (zh) | 应用maldi-toff质谱分析法的侵染性真菌感染的体外诊断方法 | |
RU2763107C1 (ru) | Способ получения и анализа сухих образцов крови человека | |
US20070196927A1 (en) | Method For Qualitative And/Or Quantitative Detection Of Polyethylene Glycols In Biological Fluids | |
CN110308121A (zh) | 抗癫痫药物---盐酸噻加宾(tgb)的荧光检测方法 | |
CN1275038C (zh) | 药品、保健品和食品中枸橼酸西地那非掺杂的测定方法 | |
US20150072966A1 (en) | Method of promoting wound healing | |
CN103512789B (zh) | 一种提取样本中被分析物质的试剂以及提取的方法 | |
Mitsui et al. | Is acetone a normal breath constituent in Japanese? | |
Starchikova et al. | Determination of phenol in human blood by high-performance liquid chromatography | |
CN115219623B (zh) | 一种银杏叶颗粒中总黄酮醇苷和萜类内酯含量的测定方法 | |
Pinho Marques | Acute intoxication by azinphos-ethyl | |
Ciolacu et al. | A SIMPLE AND SENSITIVE PROCEDURE FOR ASSESSMENT OF PLASMA PHENYLALANINE AND TYROSINE BY HPLC | |
CN110208411B (zh) | 用于药物代谢检测的羧酸酯酶抑制剂制剂 | |
Gomez | Detection of metformin in dried blood on cotton cloth using QuEChERS procedure and liquid chromatography-mass spectrometry (LC-MS) | |
RU2533258C1 (ru) | Способ получения проб для спектрального биохимического анализа крови |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20101227 |