RU2366437C2 - Композиция на основе бактериофага (варианты) - Google Patents

Композиция на основе бактериофага (варианты) Download PDF

Info

Publication number
RU2366437C2
RU2366437C2 RU2007139680/15A RU2007139680A RU2366437C2 RU 2366437 C2 RU2366437 C2 RU 2366437C2 RU 2007139680/15 A RU2007139680/15 A RU 2007139680/15A RU 2007139680 A RU2007139680 A RU 2007139680A RU 2366437 C2 RU2366437 C2 RU 2366437C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
bacteriophage
bacteriophages
bacteria
composition
extract
Prior art date
Application number
RU2007139680/15A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2007139680A (ru
Inventor
Владимир Андрианович Алёшкин (RU)
Владимир Андрианович Алёшкин
Олег Васильевич Рубальский (RU)
Олег Васильевич Рубальский
Станислав Степанович Афанасьев (RU)
Станислав Степанович Афанасьев
Андрей Владимирович Алёшкин (RU)
Андрей Владимирович Алёшкин
Андрей Геннадьевич Гаврин (RU)
Андрей Геннадьевич Гаврин
Аделаида Михайловна Амерханова (RU)
Аделаида Михайловна Амерханова
Олег Владимирович Логунов (RU)
Олег Владимирович Логунов
Ирина Анатольевна Киселёва (RU)
Ирина Анатольевна Киселёва
Татьяна Георгиевна Пугачёва (RU)
Татьяна Георгиевна Пугачёва
Денис Станиславович Афанасьев (RU)
Денис Станиславович Афанасьев
Евгений Олегович Рубальский (RU)
Евгений Олегович Рубальский
Валентина Михайловна Голикова (RU)
Валентина Михайловна Голикова
Валерий Юрьевич Давыдкин (RU)
Валерий Юрьевич Давыдкин
Игорь Юрьевич Давыдкин (RU)
Игорь Юрьевич Давыдкин
Original Assignee
Общество с ограниченной ответственностью "Амфита" (ООО "Амфита")
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Общество с ограниченной ответственностью "Амфита" (ООО "Амфита") filed Critical Общество с ограниченной ответственностью "Амфита" (ООО "Амфита")
Priority to RU2007139680/15A priority Critical patent/RU2366437C2/ru
Publication of RU2007139680A publication Critical patent/RU2007139680A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2366437C2 publication Critical patent/RU2366437C2/ru

Links

Abstract

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, пишевой промышленности, биотехнологии и может быть использовано в производстве медицинских иммунобиологических препаратов, биологически активных добавок и добавок к пище. Изобретение представляет собой варианты композиции на основе бактериофага, которые содержат видоспецифические вирулентные бактериофаги и бактериофаги с индуцированной вирулентностью с литической активностью 10-4 по Аппельману в отношении тест-штаммов и выделенных из организма человека изолятов бактерий в фильтрате фаголизата нелизогенных бактерий или фильтрате концентрата фаголизата нелизогенных бактерий и целевые добавки. Изобретение обеспечивает получение стабильной вирулентности бактериофагов, их адаптацию к циркулирующим возбудителям бактериальных инфекций. 2 н. и 4 з.п. ф-лы, 2 табл.

Description

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, пищевой промышленности, биотехнологии и может быть использовано в производстве медицинских иммунобиологических препаратов, биологически активных добавок и добавок к пище.
Известны способы изоляции лизогенных бактериофагов и изоляции бактериофагов от лизогенных бактерий с однократным использованием одного индуцирующего агента, например митомицина С, перекиси водорода, ультрафиолетового излучения (Siddiqui A., Hart Е., Mandagere U., Goldberg I.D. Rapid plate method for the isolation of lysogenic bacteriophages // Applied Microbiology - 1974. Vol.27, N 1. - P. 278-280, Parisi Joseph Т., Talbot Henry W., JR. Improved rapid plate method for the isolation of bacteriophages from lysogenic bacteria // Applied Microbiology - 1974. Vol.28, N 3. - P. 503-504).
Недостатком известных способов индукции профагов является отсутствие стабильной индуцированной вирулентности бактериофагов.
Известны бактериофаги, представляющие собой стерильные фильтраты фаголизата штаммов бактерий, которые предназначены для лечения и профилактики инфекционных заболеваний (Бактерийные, вирусные и сывороточные лечебно-профилактические препараты. Аллергены. Дезинфекционно-стерилизационные режимы поликлиник. - СПб.: Фолиант, 1998. - С.102-250).
Известен бактериофаг стафилококковый в виде мази, представляющий собой лиофилизированный концентрат фильтрата фаголизата стафилококков и мазевую основу. Активность бактериофага стафилококкового в мази по методу Аппельмана не должна быть ниже
10-4. В качестве целевых добавок известный бактериофаг стафилококковый может содержать консервант (хинозол), стабилизаторы (кальция глюконат, молоко нежирное сгущенное стерилизованное, глюкозу), мазевую основу (вазелин, ланолин) (ФС42-239 ВС-89).
Известны суппозитории, содержащие в качестве биологически активного средства лиофилизированный концентрат фильтрата фаголизита стафилококковых бактерий с литической активностью по Аппельману не ниже 10-4. в суппозитории или жидкий очищенный концентрированный стафилококковый бактериофаг с литической активностью по Аппельману не ниже 10-7 в суппозитории. В качестве целевых добавок известные суппозитории могут содержать консервант (хинозол), стабилизаторы (кальция глюконат, молоко нежирное сгущенное стерилизованное, глюкозу), а также гидрофильную основу (полиэтиленоксид 400, полиэтиленоксид 1500) (ФС 42 - 241 ВС - 89, RU патент 2185817, А61К 9/02, 35/76).
Недостатком вышеперечисленных аналогов является то, что при регламентируемых пассажах и обновлениях штаммов бактериофагов в препаратах могут появиться бактериофаги, не проявляющие литические свойства, препараты не обладают адаптацией к циркулирующим возбудителям бактериальных инфекций и не имеют оптимальных размеров частиц суспензии фаголизата, фармацевтически приемлемых целевых добавок, а также их оптимального перечня и комбинации, что в совокупности снижает терапевтические свойства известных препаратов бактериофагов.
Известен препарат Секстафаг суппозитории ректальные, содержащий стафилококковый бактериофаг, стрептококковый бактериофаг, протейный бактериофаг, клебсиеллезный бактериофаг, синегнойный бактериофаг, коли бактериофаг со специфической активностью каждого концентрированного монофага не ниже 10-7. В состав суппозитория (масса 1,2 г) входит: концентрированный стерильный Секстафаг (20 мас.%), эмульгатор Т-2 (5 мас.%), витепсолы марок Н-15 и W-35 в соотношении 1:1 (75 мас.%). Бактериофаги культивируются на коллекционных штаммах чувствительных микроорганизмов, лизируемых маточными бактериофагами в титре 10-6 и выше. Коллекция штаммов чувствительных микроорганизмов пополняется и постоянно обновляется циркулирующими возбудителями. (Функнер Е.В. Микробиологические и технологические аспекты разработки комплексного препарата бактериофагов. Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук. - Пермь, 2007. - 24 с.).
Основным недостатком известного препарата является то, что при пассажах и обновлениях штаммов бактериофагов и при обновлениях штаммов чувствительных микроорганизмов в препаратах могут появиться бактериофаги, не проявляющие литические свойства, а в коллекцию могут быть включены потенциально лизогенные бактерии. Кроме того, в прототипе не указаны оптимальные размеры частиц суспензии фаголизата, целевых добавок, а также их оптимального перечня и комбинации. Все вышеизложенное в совокупности снижает терапевтические свойства известных препаратов бактериофагов.
В основу изобретения положена задача обеспечения стабильной вирулентности бактериофагов, их адаптации к циркулирующим возбудителям бактериальных инфекций.
Задача решена тем, что варианты композиции на основе бактериофага содержат видоспецифические вирулентные бактериофаги и бактериофаги с индуцированной вирулентностью с литической активностью не ниже 10-4 по Аппельману в отношении тест-штаммов и выделенных из организма человека изолятов бактерий в фильтрате фаголизата нелизогенных бактерий и целевые добавки. Композиция на основе бактериофага может содержать видоспецифические вирулентные бактериофаги и бактериофаги с индуцированной вирулентностью с литической активностью не ниже
10-4 по Аппельману в отношении тест-штаммов и выделенных из организма человека изолятов бактерий в фильтрате концентрата фаголизата нелизогенных бактерий и целевые добавки. Композиция может содержать бактериофаги, выбранные из ряда: стафилококковый бактериофаг, стрептококковый бактериофаг, коли бактериофаг, протейный бактериофаг, синегнойный бактериофаг, сальмонеллезный бактериофаг, шигеллезный бактериофаг, энтерококковый бактериофаг и клебсиеллезный бактериофаг. Композиция может быть представлена в виде суспензии и содержать добавки в количестве 1,0-95,0 мас.% от массы композиции, выбранные из ряда: глицин, цистеин, гистидин, хинозол, хитозан, экстракт корня солодки, экстракт шиповника, экстракт душицы, экстракт клюквы и вкусоароматическая добавка.
В результате проведенных нами исследований впервые установлено появление бактериофагов, не проявляющих литические свойства, в препаратах бактериофагов при регламентируемых пассажах и обновлениях штаммов бактериофагов. Нами впервые предложены заявляемые варианты композиции на основе бактериофага, содержащие стабильно вирулентные бактриофаги и бактериофаги со стабильно индуцированной вирулентностью, полученные посредством впервые предложенного сочетания последовательных пассажей фагов заявляемых препаратов бактериофагов через тест-штаммы и выделенные из организма человека свежевыделенные изоляты нелизогенных бактерий с использованием при многократных пассажах эффективного индуцирующего агента (например, митомицина С, ципрофлоксацина, данофлоксацина, повышенной температуры при культивировании) и эффективной комбинации индуцирующих агентов. Также впервые подобраны размеры, оптимальный перечень целевых добавок и их комбинация. Все вышеизложенное в сочетании обеспечивает вирулентность бактериофагов в композиции, их адаптацию к циркулирующим возбудителям бактериальных инфекций.
Заявляемая композиция на основе бактериофага, содержащая видоспецифические вирулентные бактериофаги и бактериофаги с индуцированной вирулентностью в отношении тест-штаммов и выделенных из организма человека изолятов бактерий в виде фильтрата фаголизата нелизогенных бактерий, является новой и в литературе не описана.
Техническим результатом заявляемого изобретения является обеспечение стабильной вирулентности бактериофагов в композиции, их адаптация к циркулирующим возбудителям бактериальных инфекций за счет получения бактериофагов посредством последовательных многократных пассажей фагов препаратов бактериофагов через тест-штаммы и выделенные из организма человека свежевыделенные изоляты нелизогенных бактерий с добавлением в питательную среду индуцирующего агента, например митомицина С, а также за счет выбора оптимального перечня целевых добавок и их комбинации.
Сущность изобретения поясняется на следующих примерах.
Пример 1. Получена композиция (иммунобиологический бактерицидный препарат) на основе бактериофага, содержащая в фильтрате фаголизата нелизогенных бактерий видоспецифические бактериофаги (табл.1), выбранные из ряда: стафилококковый бактериофаг, стрептококковый бактериофаг, коли бактериофаг, протейный бактериофаг, синегнойный бактериофаг, сальмонеллезный бактериофаг, шигеллезный бактериофаг, энтерококковый бактериофаг и клебсиеллезный бактериофаг, в виде вирулентных бактериофагов и бактериофагов с индуцированной вирулентностью с литической активностью не ниже 10-4 по Аппельману в отношении тест-штаммов и выделенных из организма человека циркулирующих изолятов бактерий и целевые добавки. Проведен тест на лизогению. При титровании начальных разведений образцов бактериофага, полученных при хранении и последовательных пассажах в течение года, выявлялись фагорезистентные формы бактерий. Произвольно отбирали 30 колоний фагоустойчивых штаммов бактерий из разных чашек. Штаммы трехкратно пассировали на чашках с питательной средой. Потом суспензии клеток первоначально инкубировали в жидкой питательной среде при 37°С в течение 3 часов. Затем в системы вносили митомицин С и продолжали инкубировать культуры еще 2,5-3 часа. На следующем этапе клетки отделяли центрифугированием, а фракции надосадочной жидкости анализировали на наличие фагов титрованием на тест-штаммах бактерий. Тест на лизогению был отрицательный. Для испытания биодоступности полученной композиции ее образец массой 0,6 г вносился в среду 199. Отмечалось равномерное диспергирование композиции в водной среде и сохранение в растворе не менее 99% литической активности композиции.
Пример 2. Получена композиция (иммунобиологический бактерицидный препарат) на основе бактериофага, содержащая в фильтрате концентрата фаголизата нелизогенных бактерий видоспецифические бактериофаги (табл.1), выбранные из ряда: стафилококковый бактериофаг, стрептококковый бактериофаг, коли бактериофаг, протейный бактериофаг, синегнойный бактериофаг, сальмонеллезный бактериофаг, шигеллезный бактериофаг, энтерококковый бактериофаг и клебсиеллезный бактериофаг, в виде вирулентных бактериофагов и бактериофагов с индуцированной вирулентностью в среде культивирования лизированных нелизогенных бактерий с литической активностью не ниже 10-4 по Аппельману в отношении тест-штаммов и выделенных из организма человека циркулирующих изолятов бактерий и целевые добавки. Проведен тест на лизогению. При титровании начальных разведений образцов бактериофага, полученных при хранении и последовательных пассажах в течение года, выявлялись фагорезистентные формы бактерий. Произвольно отбирали 30 колоний фагоустойчивых штаммов бактерий из разных чашек. Штаммы трехкратно пассировали на чашках с питательной средой. Потом суспензии клеток первоначально инкубировали в жидкой питательной среде при 37°С в течение 3 часов. Затем в системы вносили митомицин С и продолжали инкубировать культуры еще 2,5-3 часа. На следующем этапе клетки отделяли центрифугированием, а фракции надосадочной жидкости анализировали на наличие фагов титрованием на тест-штаммах бактерий. Тест на лизогению был отрицательный. Для испытания биодоступности полученного иммунобиологического бактерицидного препарата его образец массой 0,6 г вносился в среду 199. Отмечалось равномерное диспергирование препарата в водной среде и сохранение в растворе не менее 99% литической активности композиции.
Пример 3. Получена композиция (иммунобиологический бактерицидный препарат) на основе бактериофага в виде суспензии, содержащая в фильтрате фаголизата нелизогенных бактерий видоспецифические бактериофаги (табл.1), выбранные из ряда: стафилококковый бактериофаг, стрептококковый бактериофаг, коли бактериофаг, протейный бактериофаг, синегнойный бактериофаг, сальмонеллезный бактериофаг, шигеллезный бактериофаг, энтерококковый бактериофаг и клебсиеллезный бактериофаг, в виде вирулентных бактериофагов и бактериофагов с индуцированной вирулентностью с литической активностью не ниже 10-4 по Аппельману в отношении тест-штаммов и выделенных из организма человека циркулирующих изолятов бактерий и содержащая целевые добавки (табл.2) в количестве 1,0 мас.% от массы композиции, выбранные из ряда: глицин, цистеин, гистидин, хинозол, хитозан, экстракт корня солодки, экстракт шиповника, экстракт душицы, экстракт клюквы и вкусоароматическая добавка. Проведен тест на лизогению. При титровании начальных разведений образцов бактериофага, полученных при хранении и последовательных пассажах в течение года, выявлялись фагорезистентные формы бактерий. Произвольно отбирали 30 колоний фагоустойчивых штаммов бактерий из разных чашек. Штаммы трехкратно пассировали на чашках с питательной средой. Потом суспензии клеток первоначально инкубировали в жидкой питательной среде при 37°С в течение 3 часов. Затем в системы вносили митомицин С и продолжали инкубировать культуры еще 2,5-3 часа. На следующем этапе клетки отделяли центрифугированием, а фракции надосадочной жидкости анализировали на наличие фагов титрованием на тест-штаммах бактерий. Тест на лизогению был отрицательный. Для испытания биодоступности полученного иммунобиологического бактерицидного препарата его образец массой 0,6 г вносился в среду 199. Отмечалось равномерное диспергирование препарата в водной среде и сохранение в растворе не менее 99% литической активности композиции.
Пример 4. Получена композиция (иммунобиологический бактерицидный препарат) на основе бактериофага в виде суспензии, содержащая в фильтрате фаголизата нелизогенных бактерий видоспецифические бактериофаги (табл.1), выбранные из ряда: стафилококковый бактериофаг, стрептококковый бактериофаг, коли бактериофаг, протейный бактериофаг, синегнойный бактериофаг, сальмонеллезный бактериофаг, шигеллезный бактериофаг, энтерококковый бактериофаг и клебсиеллезный бактериофаг, в виде вирулентных бактериофагов и бактериофагов с индуцированной вирулентностью с литической активностью не ниже 10-4 по Аппельману в отношении тест-штаммов и выделенных из организма человека циркулирующих изолятов бактерий и содержащая целевые добавки (табл.2) в количестве 20,0 мас.% от массы композиции, выбранные из ряда: глицин, цистеин, гистидин, хинозол, хитозан, экстракт корня солодки, экстракт шиповника, экстракт душицы, экстракт клюквы и вкусоароматическая добавка. Проведен тест на лизогению. При титровании начальных разведений образцов бактериофага, полученных при хранении и последовательных пассажах в течение года, выявлялись фагорезистентные формы бактерий. Произвольно отбирали 30 колоний фагоустойчивых штаммов бактерий из разных чашек. Штаммы трехкратно пассировали на чашках с питательной средой. Потом суспензии клеток первоначально инкубировали в жидкой питательной среде при 37°С в течение 3 часов. Затем в системы вносили митомицин С и продолжали инкубировать культуры еще 2,5-3 часа. На следующем этапе клетки отделяли центрифугированием, а фракции надосадочной жидкости анализировали на наличие фагов титрованием на тест-штаммах бактерий. Тест на лизогению был отрицательный. Для испытания биодоступности полученного иммунобиологического бактерицидного препарата его образец массой 0,6 г вносился в среду 199. Отмечалось равномерное диспергирование препарата в водной среде и сохранение в растворе не менее 99% литической активности композиции.
Пример 5. Получена композиция (иммунобиологический бактерицидный препарат) на основе бактериофага в виде суспензии, содержащая в фильтрате фаголизата нелизогенных бактерий видоспецифические бактериофаги (табл.1), выбранные из ряда: стафилококковый бактериофаг, стрептококковый бактериофаг, коли бактериофаг, протейный бактериофаг, синегнойный бактериофаг, сальмонеллезный бактериофаг, шигеллезный бактериофаг, энтерококковый бактериофаг и клебсиеллезный бактериофаг, в виде вирулентных бактериофагов и бактериофагов с индуцированной вирулентностью с литической активностью не ниже 10-4 по Аппельману в отношении тест-штаммов и выделенных из организма человека циркулирующих изолятов бактерий и содержащая целевые добавки (табл.2) в количестве 95,0 мас.% от массы композиции, выбранные из ряда: глицин, цистеин, гистидин, хинозол, хитозан, экстракт корня солодки, экстракт шиповника, экстракт душицы, экстракт клюквы и вкусоароматическая добавка. Проведен тест на лизогению. При титровании начальных разведений образцов бактериофага, полученных при хранении и последовательных пассажах в течение года, выявлялись фагорезистентные формы бактерий. Произвольно отбирали 30 колоний фагоустойчивых штаммов бактерий из разных чашек. Штаммы трехкратно пассировали на чашках с питательной средой. Потом суспензии клеток первоначально инкубировали в жидкой питательной среде при 37°С в течение 3 часов. Затем в системы вносили митомицин С и продолжали инкубировать культуры еще 2,5-3 часа. На следующем этапе клетки отделяли центрифугированием, а фракции надосадочной жидкости анализировали на наличие фагов титрованием на тест-штаммах бактерий. Тест на лизогению был отрицательный. Для испытания биодоступности полученного иммунобиологического бактерицидного препарата его образец массой 0,6 г вносился в среду 199. Отмечалось равномерное диспергирование препарата в водной среде и сохранение в растворе не менее 99% литической активности композиции.
Пример 6. Получена композиция (иммунобиологический бактерицидный препарат) на основе бактериофага в виде суспензии, содержащая в фильтрате концентрата фаголизата нелизогенных бактерий видоспецифические бактериофаги (табл.1), выбранные из ряда: стафилококковый бактериофаг, стрептококковый бактериофаг, коли бактериофаг, протейный бактериофаг, синегнойный бактериофаг, сальмонеллезный бактериофаг, шигеллезный бактериофаг, энтерококковый бактериофаг и клебсиеллезный бактериофаг, в виде вирулентных бактериофагов и бактериофагов с индуцированной вирулентностью в среде культивирования лизированных нелизогенных бактерий с литической активностью не ниже 10-4 по Аппельману в отношении тест-штаммов и выделенных из организма человека циркулирующих изолятов бактерий и содержащая целевые добавки (табл.2) в количестве 1,0 мас.% от массы композиции, выбранные из ряда: глицин, цистеин, гистидин, хинозол, хитозан, экстракт корня солодки, экстракт шиповника, экстракт душицы, экстракт клюквы и вкусоароматическая добавка. Проведен тест на лизогению. При титровании начальных разведений образцов бактериофага, полученных при хранении и последовательных пассажах в течение года, выявлялись фагорезистентные формы бактерий. Произвольно отбирали 30 колоний фагоустойчивых штаммов бактерий из разных чашек. Штаммы трехкратно пассировали на чашках с питательной средой. Потом суспензии клеток первоначально инкубировали в жидкой питательной среде при 37°С в течение 3 часов. Затем в системы вносили митомицин С и продолжали инкубировать культуры еще 2,5-3 часа. На следующем этапе клетки отделяли центрифугированием, а фракции надосадочной жидкости анализировали на наличие фагов титрованием на тест-штаммах бактерий. Тест на лизогению был отрицательный. Для испытания биодоступности полученного иммунобиологического бактерицидного препарата его образец массой 0,6 г вносился в среду 199. Отмечалось равномерное диспергирование препарата в водной среде и сохранение в растворе не менее 99% литической активности композиции.
Пример 7. Получена композиция (иммунобиологический бактерицидный препарат) на основе бактериофага в виде суспензии, содержащая в фильтрате концентрата фаголизата нелизогенных бактерий видоспецифические бактериофаги (табл.1), выбранные из ряда: стафилококковый бактериофаг, стрептококковый бактериофаг, коли бактериофаг, протейный бактериофаг, синегнойный бактериофаг, сальмонеллезный бактериофаг, шигеллезный бактериофаг, энтерококковый бактериофаг и клебсиеллезный бактериофаг, в виде вирулентных бактериофагов и бактериофагов с индуцированной вирулентностью в среде культивирования лизированных нелизогенных бактерий с литической активностью не ниже 10-4 по Аппельману в отношении тест-штаммов и выделенных из организма человека циркулирующих изолятов бактерий и содержащая целевые добавки (табл.2) в количестве 20,0 мас.% от массы композиции, выбранные из ряда: глицин, цистеин, гистидин, хинозол, хитозан, экстракт корня солодки, экстракт шиповника, экстракт душицы, экстракт клюквы и вкусоароматическая добавка. Проведен тест на лизогению. При титровании начальных разведений образцов бактериофага, полученных при хранении и последовательных пассажах в течение года, выявлялись фагорезистентные формы бактерий. Произвольно отбирали 30 колоний фагоустойчивых штаммов бактерий из разных чашек. Штаммы трехкратно пассировали на чашках с питательной средой. Потом суспензии клеток первоначально инкубировали в жидкой питательной среде при 37°С в течение 3 часов. Затем в системы вносили митомицин С и продолжали инкубировать культуры еще 2,5-3 часа. На следующем этапе клетки отделяли центрифугированием, а фракции надосадочной жидкости анализировали на наличие фагов титрованием на тест-штаммах бактерий. Тест на лизогению был отрицательный. Для испытания биодоступности полученного иммунобиологического бактерицидного препарата его образец массой 0,6 г вносился в среду 199. Отмечалось равномерное диспергирование препарата в водной среде и сохранение в растворе не менее 99% литической активности композиции.
Пример 8. Получена композиция (иммунобиологический бактерицидный препарат) на основе бактериофага в виде суспензии, содержащая в фильтрате концентрата фаголизата нелизогенных бактерий видоспецифические бактериофаги (табл.1), выбранные из ряда: стафилококковый бактериофаг, стрептококковый бактериофаг, коли бактериофаг, протейный бактериофаг, синегнойный бактериофаг, сальмонеллезный бактериофаг, шигеллезный бактериофаг, энтерококковый бактериофаг и клебсиеллезный бактериофаг, в виде вирулентных бактериофагов и бактериофагов с индуцированной вирулентностью в среде культивирования лизированных нелизогенных бактерий с литической активностью не ниже 10-4 по Аппельману в отношении тест-штаммов и выделенных из организма человека циркулирующих изолятов бактерий и содержащая целевые добавки (табл.2) в количестве 95,0 мас.% от массы композиции, выбранные из ряда: глицин, цистеин, гистидин, хинозол, хитозан, экстракт корня солодки, экстракт шиповника, экстракт душицы, экстракт клюквы и вкусоароматическая добавка. Проведен тест на лизогению. При титровании начальных разведений образцов бактериофага, полученных при хранении и последовательных пассажах в течение года, выявлялись фагорезистентные формы бактерий. Произвольно отбирали 30 колоний фагоустойчивых штаммов бактерий из разных чашек. Штаммы трехкратно пассировали на чашках с питательной средой. Потом суспензии клеток первоначально инкубировали в жидкой питательной среде при 37°С в течение 3 часов. Затем в системы вносили митомицин С и продолжали инкубировать культуры еще 2,5-3 часа. На следующем этапе клетки отделяли центрифугированием, а фракции надосадочной жидкости анализировали на наличие фагов титрованием на тест-штаммах бактерий. Тест на лизогению был отрицательный. Для испытания биодоступности полученного иммунобиологического бактерицидного препарата его образец массой 0,6 г вносился в среду 199. Отмечалось равномерное диспергирование препарата в водной среде и сохранение в растворе не менее 99% литической активности композиции.
Таким образом, выполненные в виде суспензии заявляемые варианты композиции на основе бактериофага проявляли стабильную вирулентность бактериофагов, их адаптацию к циркулирующим возбудителям бактериальных инфекций.
Таблица 1
Варианты состава бактериофагов композиции
Бактериофаги Вариант состава бактериофагов
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11
стафилококковый бактериофаг + - - - - - - - - + +
стрептококковый бактериофаг - + - - - - - - - - +
коли бактериофаг - - + - - - - - - + +
протейный бактериофаг - - - + - - - - - + +
синегнойный бактериофаг - - - - + - - - + +
сальмонеллезный бактериофаг - - - - - + - - - + -
шигеллезный бактериофаг - - - - - - + - - + -
энтерококковый бактериофаг - - - - - - - + - + +
клебсиеллезный бактериофаг - - - - - - - - + - +
Таблица 2
Варианты состава целевых добавок композиции в виде суспензии, содержащей бактериофаги
Целевые добавки Вариант состава целевых добавок
1 2 3 4 5 6 7 8 9
глицин + + - + + - + - -
цистеин + - + - - + + + +
гистидин + + + + + - - - +
хинозол + + + - - - + + -
хитозан + + + - - - - + +
экстракт корня солодки + - + + - + - + +
экстракт шиповника + + + + - - - + +
экстракт душицы + + - - - + - + +
экстракт клюквы + + + - + - - + +
вкусоароматическая добавка + + + - - - - + +

Claims (6)

1. Композиция на основе бактериофага, отличающаяся тем, что она содержит видоспецифические вирулентные бактериофаги и бактериофаги с индуцированной вирулентностью с литической активностью не ниже 10-4 по Аппельману в отношении тест-штаммов и выделенных из организма человека изолятов бактерий в фильтрате фаголизата нелизогенных бактерий, и целевые добавки.
2. Композиция на основе бактериофага, отличающаяся тем, что она содержит видоспецифические вирулентные бактериофаги и бактериофаги с индуцированной вирулентностью с литической активностью не ниже 10-4 по Аппельману в отношении тест-штаммов и выделенных из организма человека изолятов бактерий в фильтрате концентрата фаголизата нелизогенных бактерий, и целевые добавки.
3. Композиция по п.1, отличающаяся тем, что она содержит бактериофаги, выбранные из ряда: стафилококковый бактериофаг, стрептококковый бактериофаг, коли бактериофаг, протейный бактериофаг, синегнойный бактериофаг, сальмонеллезный бактериофаг, шигеллезный бактериофаг, энтерококковый бактериофаг и клебсиеллезный бактериофаг.
4. Композиция по п.2, отличающаяся тем, что она содержит бактериофаги, выбранные из ряда: стафилококковый бактериофаг, стрептококковый бактериофаг, коли бактериофаг, протейный бактериофаг, синегнойный бактериофаг, сальмонеллезный бактериофаг, шигеллезный бактериофаг, энтерококковый бактериофаг и клебсиеллезный бактериофаг.
5. Композиция по п.1, или 2, или 3, или 4, отличающаяся тем, что она содержит целевые добавки в количестве 1,0-95,0 мас.% от массы композиции, выбранные из ряда: глицин, цистеин, гистидин, хинозол, хитозан, экстракт корня солодки, экстракт шиповника, экстракт душицы, экстракт клюквы и вкусоароматическая добавка, и представлена в виде суспензии.
6. Композиция по п.1, или 2, или 3, или 4, отличающаяся тем, что она может быть использована при профилактике и лечении инфекционного заболевания и для обработки пищевого продукта.
RU2007139680/15A 2007-10-29 2007-10-29 Композиция на основе бактериофага (варианты) RU2366437C2 (ru)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2007139680/15A RU2366437C2 (ru) 2007-10-29 2007-10-29 Композиция на основе бактериофага (варианты)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2007139680/15A RU2366437C2 (ru) 2007-10-29 2007-10-29 Композиция на основе бактериофага (варианты)

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2007139680A RU2007139680A (ru) 2009-05-10
RU2366437C2 true RU2366437C2 (ru) 2009-09-10

Family

ID=41019425

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2007139680/15A RU2366437C2 (ru) 2007-10-29 2007-10-29 Композиция на основе бактериофага (варианты)

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2366437C2 (ru)

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2518303C2 (ru) * 2012-06-29 2014-06-10 Федеральное бюджетное учреждение науки "Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени Г.Н. Габричевского" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского Роспотребнадзора) КОМПОЗИЦИЯ АНТИБАКТЕРИАЛЬНАЯ, ШТАММ БАКТЕРИОФАГА Escherichia coli, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ТАКОЙ КОМПОЗИЦИИ.
RU2574004C2 (ru) * 2013-12-03 2016-01-27 Алексей Геннадьевич Шушарин Способ лечения синовитов и/или синовиальных кист
RU2628312C2 (ru) * 2015-03-16 2017-08-15 Общество с ограниченной ответственностью "БиФаг" Композиция антибактериальная для профилактики или лечения госпитальных инфекций (варианты), штаммы бактериофагов, используемые для получения такой композиции
RU2644667C1 (ru) * 2016-12-23 2018-02-13 Андрей Владимирович Алешкин Композиция антибактериальная для продления срока годности охлажденной рыбы и снижения риска возникновения инфекций, передаваемых пищевым путем, штаммы бактериофагов, используемые для ее получения
RU2735828C1 (ru) * 2019-12-24 2020-11-09 Общество с ограниченной ответственностью "БИОТЕХНОЛОГИЯ" (ООО "БИОТЕХНОЛОГИЯ") Ректальные суппозитории на основе модифицированного бактериофага MS2 для таргетной терапии злокачественных солидных опухолей
RU2738743C1 (ru) * 2020-10-20 2020-12-16 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Астраханский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО Астраханский ГМУ Минздрава России) Способ выделения вирулентных бактериофагов staphylococcus aureus

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
ФУНКЕР Е.В. Микробиологические и технологические аспекты разработки комплексного препарата бактериофагов. Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата медицинских наук. - Пермь, 2007, 24 стр. *

Cited By (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2518303C2 (ru) * 2012-06-29 2014-06-10 Федеральное бюджетное учреждение науки "Московский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени Г.Н. Габричевского" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (ФБУН МНИИЭМ им. Г.Н. Габричевского Роспотребнадзора) КОМПОЗИЦИЯ АНТИБАКТЕРИАЛЬНАЯ, ШТАММ БАКТЕРИОФАГА Escherichia coli, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ТАКОЙ КОМПОЗИЦИИ.
RU2574004C2 (ru) * 2013-12-03 2016-01-27 Алексей Геннадьевич Шушарин Способ лечения синовитов и/или синовиальных кист
RU2628312C2 (ru) * 2015-03-16 2017-08-15 Общество с ограниченной ответственностью "БиФаг" Композиция антибактериальная для профилактики или лечения госпитальных инфекций (варианты), штаммы бактериофагов, используемые для получения такой композиции
RU2644667C1 (ru) * 2016-12-23 2018-02-13 Андрей Владимирович Алешкин Композиция антибактериальная для продления срока годности охлажденной рыбы и снижения риска возникновения инфекций, передаваемых пищевым путем, штаммы бактериофагов, используемые для ее получения
RU2735828C1 (ru) * 2019-12-24 2020-11-09 Общество с ограниченной ответственностью "БИОТЕХНОЛОГИЯ" (ООО "БИОТЕХНОЛОГИЯ") Ректальные суппозитории на основе модифицированного бактериофага MS2 для таргетной терапии злокачественных солидных опухолей
RU2738743C1 (ru) * 2020-10-20 2020-12-16 Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Астраханский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО Астраханский ГМУ Минздрава России) Способ выделения вирулентных бактериофагов staphylococcus aureus

Also Published As

Publication number Publication date
RU2007139680A (ru) 2009-05-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2366437C2 (ru) Композиция на основе бактериофага (варианты)
Svetlakova et al. Rehydration mechanism of prokaryotic cells of the genus salmonella by physiologically optimal diluent
CN111705042B (zh) 一株巴氏杆菌噬菌体vB_PmuP_PS02、其噬菌体组合物及其应用
JP2011517557A (ja) バクテリオファージ混合物の製造方法および抗生物質耐性ブドウ球菌の治療におけるその使用
KR20040106298A (ko) 불안정한 생활성 물질 및 포유동물 초유를 포함한 조성물,제조 및 치료 방법
RU2455355C1 (ru) ШТАММ БАКТЕРИОФАГА Pseudomonas aeruginosa, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ В КАЧЕСТВЕ ОСНОВЫ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ АСЕПТИЧЕСКОГО СРЕДСТВА ПРОТИВ СИНЕГНОЙНОЙ ПАЛОЧКИ
WO2016003307A1 (en) Bacteriophage strains, compositions and related methods
US20100291041A1 (en) Bacteriophage preparation and use
Binte Atique et al. The bacterial contamination of allogeneic bone and emergence of multidrug-resistant bacteria in tissue bank
RU2628312C2 (ru) Композиция антибактериальная для профилактики или лечения госпитальных инфекций (варианты), штаммы бактериофагов, используемые для получения такой композиции
RU2366708C2 (ru) Иммунобиологический бактерицидный препарат (варианты)
CN109394796A (zh) 卷曲乳杆菌制剂及其应用
RU2396968C2 (ru) Средство для лечения заболеваний желудочно-кишечного тракта и способ его получения
Muthukumar et al. Exploring the bioactive potential of Serriatia marcescens VITAPI (Acc: 1933637) isolated from soil
Mpinda et al. In vitro antimicrobial activity of extracts of some plant species used in the management of HIV/AIDS in Tanzania
Sheriff Maqbul et al. The efficacy of Cinnamomum tamala as a potential antimicrobial substance against the multi-drug resistant Enterococcus faecalis from clinical isolates
JP6912051B2 (ja) 組成物
RU2672869C1 (ru) Антибактериальное средство на основе бактериофага
Effah-Yeboah et al. In-vitro antimicrobial activity of the combined effect of Kalanchoe crenata and Vernonia amygdalina on Salmonella Species
WO2005034971A2 (en) Antiviral agent
CN111246871A (zh) 对病毒和细菌有抑制作用的组合物
RU2717451C1 (ru) Штамм бактериофага Pseudomonas aeruginosa N 323 (500317), предназначенный для приготовления моно- и поливалентных лечебно-профилактических препаратов бактериофагов
RU2444366C1 (ru) Лечебно-профилактический биопрепарат против бактериальных и грибковых инфекций, обладающий антибиотикоустойчивостью
Jeyaraman et al. Bacteriophage Therapy in Implant-Related Orthopedic Infections
RU2717420C1 (ru) Штамм бактериофага Pseudomonas aeruginosa N 327 (500321), предназначенный для приготовления моно- и поливалентных лечебно-профилактических препаратов бактериофагов

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20121030