RU2219238C1 - Штаммы бактерий bacillus subtilis и bacillus licheniformis, используемые для профилактики и лечения инфекционных болезней и дисбиозов и биопрепарат биспорин для профилактики и лечения инфекционных болезней и дисбиозов - Google Patents
Штаммы бактерий bacillus subtilis и bacillus licheniformis, используемые для профилактики и лечения инфекционных болезней и дисбиозов и биопрепарат биспорин для профилактики и лечения инфекционных болезней и дисбиозов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2219238C1 RU2219238C1 RU2002111885/13A RU2002111885A RU2219238C1 RU 2219238 C1 RU2219238 C1 RU 2219238C1 RU 2002111885/13 A RU2002111885/13 A RU 2002111885/13A RU 2002111885 A RU2002111885 A RU 2002111885A RU 2219238 C1 RU2219238 C1 RU 2219238C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- gkpm
- strains
- licheniformis
- subtilis
- bacillus
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в ветеринарии и медицине для получения биопрепаратов, нормализующих микрофлору и ингибирующих развитие патогенных микроорганизмов. Новые штаммы бактерий Bacillus subtilis3/Re и Bacillus licheniformis31/Re получены путем многократного пересева штаммов B.subtilis 3 и В.licheniformis 31 через питательный агар с возрастающей концентрацией антибиотиков. Штаммы бактерий Bacillus subtilis3/Re и Bacillus licheniformis31/Re депонированы в коллекции Государственного научно-исследовательского института стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им. Л.И.Тарасевича под номерами ГКПМ 263 и ГКПМ 264 соответственно. Биопрепарат Биспорин содержит живые штаммы бактерий Bacillus subtilis ГКПМ 263, Bacillus licheniformis ГКПМ 264, взятые в эффективном количестве, и защитную среду. Оптимальным соотношением бактериальных культур В. subtilis ГКПМ 263 и В. licheniformis ГКПМ 264 (в об.%) - 50: 50 при количестве живых микробных клеток 4•107 - 1,6•1010 кл/мл (для В. subtilis ГКПМ 263) и 2•106 - 3•109 кл/мл (для В. licheniformis ГКПМ 264). Препарат Биспорин характеризуется высокой антагонистической активностью в отношении широкого спектра патогенных и условно-патогенных микроорганизмов и может применяться совместно с антибиотиками. 3 с. и 2 з.п.ф-лы, 6 табл.
Description
Изобретение относится к биотехнологии, и может быть использовано в ветеринарии и медицине для получения биопрепаратов, нормализующих микрофлору и ингибирующих развитие патогенных микроорганизмов.
В настоящее время имеются биопрепараты - пробиотики, нормализующие микрофлору: лактобактерин, ацилакт, бифидумбактерин, колибактерин, бификол, биоспорин, споробактерин (Воробьв А. А. и др. Дисбактериозы - актуальная проблема медицины/ Вестник РАМН - 1997. - 3. - С.3-5).
Однако известные биопрепараты имеют ограниченный спектр действия в следствие слабой антагонистической активности ко многим патогенным бактериям.
Наиболее близким аналогом является препарат биоспорин, содержащий в основе живые клетки штаммов Bacillus subtilis 3 (ВКПМ В-2335) и В. licheniformis 31(ВКПМ В-2336) (Патент РФ 1722502, А 61 К 35/74, опубл. 30.03.92).
Биоспорин характеризуется высокой антагонистической активностью к широкому спектру патогенных и условно патогенных микроорганизмов (Сорокулова И.Б. Сравнительное изучение биологических свойств биспорина и других коммерческих препаратов на основе бацилл /Микробиол. журнал - 1997.- т.59, 6. - С.43-49). Препарат применяют для профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний человека (Приказ Министра здравоохранения РФ 353 от 29.12.1992 г.).
Однако в инструкции по применению биоспорина, утвержденной Минздравом РФ от 14.08.98 г, имеется упоминание о том, что поскольку бактерии штаммов Bacillus высокочувствительны к антибиотикам, то "одновременное применение антибиотиков и химиопрепаратов нецелесообразно". Эти свойства штаммов ограничивают сферу применения препарата при тяжелых формах гнойно-воспалительных заболеваний, лечение которых требует совместного введения пробиотика и антибиотика.
Задачей изобретения является создание новых антибиотикоустойчивых штаммов Bacillus subtilis и Bacillus licheniformis с высокой антагонистической активностью в отношении широкого спектра патогенных и условно патогенных микроорганизмов и получение на их основе высокоэффективного препарата, обладающего более широким спектром антибактериальной активности и который можно будет применять совместно с антибиотиками.
Технический результат, полученный от использования новых штаммов, выражается в повышении эффективности лечения за счет расширения спектра антагонистической активности штаммов и возможности сочетанного применения пробиотика с антибиотиками.
Сущность изобретения заключается в следующем:
Новые штаммы бактерий Bacillus subtilis3/Re и Bacillus licheniformis31/Re получены путем многократного пересева штаммов В.subtilis 3 и B.licheniformis 31 через питательный агар с возрастающей концентрацией антибиотиков. Штаммы бактерий Bacillus subtilis3/Re и Bacillus licheniformis31/Re депонированы в коллекции Государственного научно-исследовательского института стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им. Л.И. Тарасевича под номерами ГКПМ 263 и ГКПМ 264 соответственно.
Новые штаммы бактерий Bacillus subtilis3/Re и Bacillus licheniformis31/Re получены путем многократного пересева штаммов В.subtilis 3 и B.licheniformis 31 через питательный агар с возрастающей концентрацией антибиотиков. Штаммы бактерий Bacillus subtilis3/Re и Bacillus licheniformis31/Re депонированы в коллекции Государственного научно-исследовательского института стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им. Л.И. Тарасевича под номерами ГКПМ 263 и ГКПМ 264 соответственно.
Штаммы обладают устойчивостью к ампицилину, метициллину, оксациллину, бензилпенициллину, моксалактаму, цефоперазону, цефотаксиму, моксалактаму, цефтазидиму, цефтизоксиму, цефуроксиму, цефтриаксону, ваккомицину, клиндамицину, пиперациллину, моксалактаму, полимиксину Е, хлорамфеникону и азтреонаму.
Культурально-морфологические и биохимические свойства штаммов B.subtilis ГКПМ 263 и B. licheniformis ГКПМ 264 в сравнении с исходными представлены в табл. 1.
Сравнительные данные по антибиотикочувствительности и антагонистической активности штаммов B. subtilis ГКПМ 263 и B.licheniformis ГКПМ 264 представлены в табл. 2 и 3 соответственно, и свидетельствуют, что новые штаммы обладают высокой антибиотикоустойчивостью и антагонистической активностью.
Биопрепарат Биспорин для профилактики и лечения инфекционных болезней и дисбиозов содержит живые штаммы бактерий Bacillus subtilis ГКПМ 263, Bacillus licheniformis ГКПМ 264, взятые в эффективном количестве, и защитную среду.
В качестве защитной среды препарат может содержать сыворотку крови, молоко, сахарозо-желатиновую смесь и т.д.
Оптимальным соотношением бактериальных культур В.subtilis ГКПМ 263 и В. licheniformis ГКПМ 264 для получения препарата Биоспорин является (в об.%) - 50: 50 при количестве живых микробных клеток 4•107 - 1,6•1010 кл/мл (для В. subtilis ГКПМ 263) и 2•106 - 3•109 кл/мл (для В. licheniformis ГКПМ 264).
Препарат Биспорин характеризуется высокой антагонистической активностью в отношении широкого спектра патогенных и условно-патогенных микроорганизмов и может применяться совместно с антибиотиками.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами.
Пример 1. Готовят серии препарата Биспорин с различным количеством бактерий. Для этого штаммы бактерий В. subtilis ГКПМ 263 и В. licheniformis ГКПМ 264 выращивают раздельно на сусло агаре в течение 36 часов при температуре 37oС. Смывают выросшие бактериальные культуры физиологическим раствором, рассчитывают по оптическому стандарту мутности (ОЕ - оптических единиц) количество микробных клеток в 1 мл суспензии.
Затем готовят ассоциации этих двух микробных культур в защитной среде, например, в сахарозо-желатиновой смеси, с вариированием количественного состава микробных клеток каждого штамма.
Проверяют антагонистическую активность полученных препаратов методом отсроченного антагонизма. В табл. 4 представлены данные о составе некоторых вариантов изготовленного препарата (бактериальные суспензии В. subtilis ГКПМ 263 и В. licheniformis ГКПМ 264 смешивают в равных объемных пропорциях - 50: 50).
Антагонистическую активность полученных серий биопрепарата Биспорин изучают методом отсроченного антагонизма и методом совместного культивирования с тест-культурами. В качестве тест-культур используют S. sonnei 32, S. typhimurium 11, S. aureus 209 и С. albicans 690.
В табл. 5 представлены данные об антагонистической активности полученных серий препарата Биспорин.
Как видно из полученных данных, оптимальные количества живых микробных клеток в 1 мл составляют для В.subtilis ГКПМ 263 - 4•107 - 1,6•1010 кл/мл и для В. licheniformis ГКПМ 264 - 2•106 - 3•109 кл/мл живых микробных клеток. Дальнейшее увеличение количества живых микробных клеток не изменяет существенным образом специфическую активность препарата в отношении тест-культур микроорганизмов.
Представленные закономерности отмечают при соотношении бактериальных культур 50:50. Были испытаны также и другие соотношения В. subtilis ГКПМ 263 и В. licheniformis ГКПМ 264 при количестве живых микробных клеток в 1 мл исходной суспензии соответственно 4•107 -1,6•1010 кл/мл и 2•106 - 3•109 кл/мл. Изготовляют различные варианты препарата и их активность исследуют при совместном культивировании с тест-культурами. Данные, полученные в этой серии опытов со штаммом S. aureus 209, представлены в табл. 6.
Как видно из табл. 6, наиболее оптимальным сочетанием культур В. subtilis ГКПМ 263 и В. licheniformis ГКПМ 264 является их соотношение 50:50 (в об. %). При такой пропорции культур регистрируется наиболее быстрая элиминация стафилококков. Сходные закономерности отмечают при испытании этих вариантов препарата на других тест - культурах.
Таким образом, установлено, что оптимальным соотношением бактериальных культур В. subtilis ГКПМ 263 и В. licheniformis ГКПМ 264 для получения препарата Биоспорин является (в об.%) - 50:50 при количестве живых микробных клеток 4•107 - 1,6•1010 кл/мл (для В. subtilis ГКПМ 263) и 2•106 - 3•109 кл/мл (для В. licheniformis ГКПМ 264).
Claims (5)
1. Штамм бактерий Bacillus subtilis ГКПМ №263, используемый для профилактики и лечения инфекционных болезней и дисбиозов.
2. Штамм бактерий Bacillus licheniformis ГКПМ №264, используемый для профилактики и лечения инфекционных болезней и дисбиозов.
3. Биопрепарат для профилактики и лечения инфекционных болезней и дисбиозов, содержащий живые штаммы бактерий Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis и защитную среду, отличающийся тем, что из штаммов Bacillus subtilis он содержит штамм Bacillus subtilis ГКПМ №263, а из штаммов Bacillus licheniformis - штамм Bacillus licheniformis ГКПМ №264, взятые в эффективном количестве.
4. Биопрепарат по п.3, отличающийся тем, что содержит штамм Bacillus subtilis ГКПМ №263 и штамм Bacillus licheniformis ГКПМ №264 в титрах 4·107-1,6·1010 кл/мл и 2·106-3·109 кл/мл соответственно.
5. Биопрепарат по п.3, отличающийся тем, что содержит штаммы, взятые в равных объемных соотношениях.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2002111885/13A RU2219238C1 (ru) | 2002-05-08 | 2002-05-08 | Штаммы бактерий bacillus subtilis и bacillus licheniformis, используемые для профилактики и лечения инфекционных болезней и дисбиозов и биопрепарат биспорин для профилактики и лечения инфекционных болезней и дисбиозов |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2002111885/13A RU2219238C1 (ru) | 2002-05-08 | 2002-05-08 | Штаммы бактерий bacillus subtilis и bacillus licheniformis, используемые для профилактики и лечения инфекционных болезней и дисбиозов и биопрепарат биспорин для профилактики и лечения инфекционных болезней и дисбиозов |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2219238C1 true RU2219238C1 (ru) | 2003-12-20 |
Family
ID=32066420
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2002111885/13A RU2219238C1 (ru) | 2002-05-08 | 2002-05-08 | Штаммы бактерий bacillus subtilis и bacillus licheniformis, используемые для профилактики и лечения инфекционных болезней и дисбиозов и биопрепарат биспорин для профилактики и лечения инфекционных болезней и дисбиозов |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2219238C1 (ru) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2006115430A1 (fr) * | 2005-04-28 | 2006-11-02 | Irina Grigorievna Osipova | Preparation biologique irilis a base de bacteries du genre bacillus contenant bacillus subtilis et bacillus licheniformis |
| WO2008077521A1 (en) * | 2006-12-22 | 2008-07-03 | Novozymes A/S | Use of polypetides against diseases caused by protozoans |
| WO2008077522A2 (en) * | 2006-12-22 | 2008-07-03 | Dsm Ip Assets B.V. | Use of polypeptides as coccidiostat and /or histomonastat |
| CN100540656C (zh) * | 2007-09-03 | 2009-09-16 | 河北省农林科学院植物保护研究所 | 一种枯草芽孢杆菌及其菌剂和应用 |
| RU2471864C1 (ru) * | 2011-12-13 | 2013-01-10 | ОБЩЕСТВО С ОГРАНИЧЕННОЙ ОТВЕТСТВЕННОСТЬЮ "БИО Агат Групп" | Пробиотический препарат против вирусных и бактериальных инфекций "токсиспорин", способ его получения, штамм бактерий bacillus licheniformis, используемый в качестве компонента пробиотического препарата |
| RU2614858C1 (ru) * | 2015-11-17 | 2017-03-29 | Общество с Ограниченной Ответственностью "Пробиотик плюс" | Штамм bacillus amyloliquefaciens, используемый для повышения продуктивности сельскохозяйственных животных, птицы и рыб |
-
2002
- 2002-05-08 RU RU2002111885/13A patent/RU2219238C1/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Бакулина Л.Ф. и др. Пробиотики на основе спорообразующих микроорганизмов рода Bacillus и их использование в ветеринарии./Биотехнологии, 2001, №2, с.48-56. * |
Cited By (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2006115430A1 (fr) * | 2005-04-28 | 2006-11-02 | Irina Grigorievna Osipova | Preparation biologique irilis a base de bacteries du genre bacillus contenant bacillus subtilis et bacillus licheniformis |
| US8414878B2 (en) | 2005-04-28 | 2013-04-09 | Irina Grigorievna Osipova | Irilis biopreparation based on bacillus-strain bacteria, bacillus subtilis and bacillus licheniformis contained therein |
| WO2008077521A1 (en) * | 2006-12-22 | 2008-07-03 | Novozymes A/S | Use of polypetides against diseases caused by protozoans |
| WO2008077522A2 (en) * | 2006-12-22 | 2008-07-03 | Dsm Ip Assets B.V. | Use of polypeptides as coccidiostat and /or histomonastat |
| WO2008077522A3 (en) * | 2006-12-22 | 2009-09-03 | Dsm Ip Assets B.V. | Use of polypeptides as coccidiostat and /or histomonastat |
| EP2418214A1 (en) * | 2006-12-22 | 2012-02-15 | Novozymes A/S | Use of polypeptides against diseases caused by protozoans |
| US8221743B2 (en) | 2006-12-22 | 2012-07-17 | Novozymes A/S | Use of polypeptides against diseases caused by protozoans |
| CN100540656C (zh) * | 2007-09-03 | 2009-09-16 | 河北省农林科学院植物保护研究所 | 一种枯草芽孢杆菌及其菌剂和应用 |
| RU2471864C1 (ru) * | 2011-12-13 | 2013-01-10 | ОБЩЕСТВО С ОГРАНИЧЕННОЙ ОТВЕТСТВЕННОСТЬЮ "БИО Агат Групп" | Пробиотический препарат против вирусных и бактериальных инфекций "токсиспорин", способ его получения, штамм бактерий bacillus licheniformis, используемый в качестве компонента пробиотического препарата |
| RU2614858C1 (ru) * | 2015-11-17 | 2017-03-29 | Общество с Ограниченной Ответственностью "Пробиотик плюс" | Штамм bacillus amyloliquefaciens, используемый для повышения продуктивности сельскохозяйственных животных, птицы и рыб |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Todorov et al. | Safety of Lactobacillus plantarum ST8Sh and its bacteriocin | |
| RU2455355C1 (ru) | ШТАММ БАКТЕРИОФАГА Pseudomonas aeruginosa, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ В КАЧЕСТВЕ ОСНОВЫ ДЛЯ ПРИГОТОВЛЕНИЯ АСЕПТИЧЕСКОГО СРЕДСТВА ПРОТИВ СИНЕГНОЙНОЙ ПАЛОЧКИ | |
| Merghni et al. | Adhesive properties and extracellular enzymatic activity of Staphylococcus aureus strains isolated from oral cavity | |
| RU2219238C1 (ru) | Штаммы бактерий bacillus subtilis и bacillus licheniformis, используемые для профилактики и лечения инфекционных болезней и дисбиозов и биопрепарат биспорин для профилактики и лечения инфекционных болезней и дисбиозов | |
| Tula et al. | Screening for some virulent factors among bacterial isolates from surfaces of hospital fomites and hands of healthcare workers | |
| Al-Dahmoshi | Genotypic and phenotypic investigation of alginate biofilm formation among Pseudomonas aeruginosa isolated from burn victims in Babylon, Iraq | |
| EP2317998B1 (en) | Fulvic acid and antibiotic combination | |
| Gopinath et al. | Antibacterial activity of three medicinal plants against clinically isolated multidrug resistant Enterococcus faecalis (MDRE) | |
| CN110305193A (zh) | 一种抗牙龈卟啉单胞菌多肽及应用 | |
| Luzhnova et al. | Investigation of the activity of new derivatives of 1, 3-diazinone-4 and their acyclic precursors with respect to bacteria of the genus proteus | |
| Murad et al. | Antimicrobial effect of Tetraspanin CD9 Peptides on Pseudomonas aeruginosa. | |
| Musa | Study Inhibitory Effects of Lactobacillus plantarum Against Staphylococcus aureus Methicillin Resistance | |
| Aljarah | Molecular Detection of Pseudomonas aeurogenosa secreting exotoxin type A in Post-surgical operation wound inflammations | |
| Hammad et al. | Correlation Study of Alcoholic Clove extract against Streptococcus agalactiae virulence factors isolated from Neonatal patients | |
| Ali et al. | Therapeutic activity of Bacillus subtilis against some multidrug resistance bacterial pathogens isolated from burn infections | |
| RU2444366C1 (ru) | Лечебно-профилактический биопрепарат против бактериальных и грибковых инфекций, обладающий антибиотикоустойчивостью | |
| Jawad et al. | TLC Identification of Bacteriocin from Different LAB Clinical Isolates of Najaf Hospitals and in Vitro Evaluation of Its Effectiveness Against three Pathogenic Bacterial Isolates. | |
| RU2816763C1 (ru) | Способ определения чувствительности кампилобактерий к пробиотикам и аутопробиотикам | |
| RU2454238C1 (ru) | Биопрепарат балис для профилактики и лечения инфекционных болезней | |
| Jassim et al. | Antibacterial and Antibiofilm Activity of the Mixed Lactobacilli Against the Most Bacterial Etiology of Otitis Media | |
| RU2213780C2 (ru) | Способ определения бактериостатического и бактерицидного действия антибиотика | |
| Salih et al. | Anti–biotypes of Different Bacteria Isolated from Different Clinical Sources | |
| Kadhim et al. | Demonstration of the effects of virulence factor and antibiotic resistance on the plasmids of Proteus mirabilis and Proteus vulgaris | |
| Sheeh et al. | Re evaluation Of The Activity Of Some Antibacterial Drugs Against Clinical Isolates Of Staphylococcus Aureus In Al_Najaf Al_Ashref Governorate. | |
| Ghareeb et al. | Detection of FsrB Quorum-Sensing Gene and Biofilm Production in Enterococcus faecalis Isolated from UTI Women |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PC4A | Invention patent assignment |
Effective date: 20061030 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20110509 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20130827 |
|
| PC41 | Official registration of the transfer of exclusive right |
Effective date: 20131118 |
|
| RH4A | Copy of patent granted that was duplicated for the russian federation |
Effective date: 20141021 |
|
| PC43 | Official registration of the transfer of the exclusive right without contract for inventions |
Effective date: 20151116 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20170509 |