RU2346052C1 - Two-phase nutrient medium for isolating brucellosis microbe - Google Patents

Two-phase nutrient medium for isolating brucellosis microbe Download PDF

Info

Publication number
RU2346052C1
RU2346052C1 RU2007117968/13A RU2007117968A RU2346052C1 RU 2346052 C1 RU2346052 C1 RU 2346052C1 RU 2007117968/13 A RU2007117968/13 A RU 2007117968/13A RU 2007117968 A RU2007117968 A RU 2007117968A RU 2346052 C1 RU2346052 C1 RU 2346052C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
nutrient medium
phase
brucellosis
medium
sodium
Prior art date
Application number
RU2007117968/13A
Other languages
Russian (ru)
Inventor
Людмила Семёновна Катунина (RU)
Людмила Семёновна Катунина
мкин Геннадий Иванович Л (RU)
Геннадий Иванович Лямкин
Виталий Иванович Ефременко (RU)
Виталий Иванович Ефременко
Ольга Леонидовна Старцева (RU)
Ольга Леонидовна Старцева
пустина Лариса Вениаминовна Л (RU)
Лариса Вениаминовна Ляпустина
Тать на Викторовна Таран (RU)
Татьяна Викторовна Таран
Светлана Ивановна Головнёва (RU)
Светлана Ивановна Головнёва
Диана Владимировна Русанова (RU)
Диана Владимировна Русанова
Светлана Валерьевна Вилинска (RU)
Светлана Валерьевна Вилинская
Ольга Викторовна Малецка (RU)
Ольга Викторовна Малецкая
Original Assignee
Федеральное государственное учреждение здравоохранения Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Федеральное государственное учреждение здравоохранения Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека filed Critical Федеральное государственное учреждение здравоохранения Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека
Priority to RU2007117968/13A priority Critical patent/RU2346052C1/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2346052C1 publication Critical patent/RU2346052C1/en

Links

Landscapes

  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

FIELD: chemistry, biochemistry.
SUBSTANCE: invention relates to biotechnology, particularly to medical microbiology and can be used to isolate the brucellosis. Nutrient medium contains a dense phase and a liquid phase. Dense phase contains refined sugar, sodium chloride, sodium phosphate di-substituted, yeast extract microbiological agar and pipe water in the following ratio. Liquid phase contains nutrient bullion for culturing microorganisms dry, sodium citrate, glucose and distilled water in the following ratio.
EFFECT: cutting of the time for isolating the brucellosis microbe.
3 ex

Description

Изобретение относится к биотехнологии, в частности к медицинской микробиологии, и может быть использовано для выделения и культивирования бруцеллезного микроба.The invention relates to biotechnology, in particular to medical microbiology, and can be used to isolate and cultivate a brucellosis microbe.

Известна питательная среда плотная следующего состава: мясная вода, 1% пептона, 0,5% поваренной соли и 2% агар-агара.A dense nutrient medium of the following composition is known: meat water, 1% peptone, 0.5% sodium chloride and 2% agar-agar.

Известна питательная среда жидкая следующего состава: мясная вода, 1% сухого пептона и 0,5% поваренной соли.A known liquid nutrient medium of the following composition: meat water, 1% dry peptone and 0.5% sodium chloride.

В каждый флакон заливают 25-30 мл стерильного мясопептонного бульона, пробкуют и стерилизуют при 120°С в течение 20 мин и выдерживают в термостате 2-3 дня после чего в каждый флакон с плотной средой вливают стерильно мясопептонный бульон и затем используют для культивирования бруцелл. (Ф.К.Черкес, Л.Б.Богоявленская, Н.А.Вельская. Микробиология, 1986. с.105; 346-347).25-30 ml of sterile meat-peptone broth is poured into each vial, poured and sterilized at 120 ° C for 20 minutes and incubated for 2-3 days, after which sterile meat-peptone broth is poured into each vial with dense medium and then used to cultivate brucella. (F.K. Cherkess, L.B. Bogoyavlenskaya, N.A. Velskaya. Microbiology, 1986. p. 105; 346-347).

Недостаток данной питательной среды является то, что результат высева необходимо ждать месяц.The disadvantage of this nutrient medium is that the result of seeding must wait a month.

Наиболее близким к предлагаемому изобретению относится двухфазная среда включающая:Closest to the proposed invention relates to a two-phase medium comprising:

Е-агар, состоящий, г/л: папаиновый гидролизат соевой муки USP 20 г; натрия хлорида 5 г; агар 10, деионизированная вода 1000 мл (плотная фаза).E-agar consisting, g / l: papain hydrolyzate of soy flour USP 20 g; sodium chloride 5 g; agar 10, deionized water 1000 ml (solid phase).

Е-бульон, состоящий, г/л: папаиновый гидролизат соевой муки USP 20 г; натрия хлорида 5 г; глюкоза 5 г; феноловый красный, 2%-ный водный раствор 2 мл: деионизированная вода 1000 мл (жидкая фаза). Для получения данной среды в стерильные пробирки с завинчивающими крышками с соблюдением правил асептики разливают по 3 мл Е-гара, после затвердения на среду наслаивают 3 мл Е-бульона и хранят пробирки при комнатой температуре. (Ф.Герхард. Методы общей бактериологии, том 1. С.-331-332. Москва, МИР, 1983.E-broth, consisting, g / l: papain hydrolyzate of soy flour USP 20 g; sodium chloride 5 g; glucose 5 g; phenol red, 2% aqueous solution of 2 ml: deionized water 1000 ml (liquid phase). To obtain this medium, in sterile tubes with screw caps, observing aseptic rules, pour 3 ml of E-Gar, after hardening, lay 3 ml of E-broth on the medium and store the tubes at room temperature. (F. Gerhard. Methods of General Bacteriology, Volume 1. S.-331-332. Moscow, MIR, 1983.

Недостатком данной питательной среды является наличие в ее составе дорогого и мало распространенного компонента - папаинового гидролизата соевой муки USP, и долгий срок результата высева - месяц.The disadvantage of this nutrient medium is the presence in its composition of an expensive and less common component - papain hydrolyzate of USP soy flour, and a long term result of sowing is a month.

Целью изобретения является получение качественной двухфазной питательной среды растительного происхождения, которая обеспечивает ростовые свойства бруцеллезного микроба на 2-3 сутки.The aim of the invention is to obtain a high-quality two-phase nutrient medium of plant origin, which provides the growth properties of the brucellosis microbe for 2-3 days.

Цель достигается тем, что предлагаемая двухфазная питательная среда содержит плотную фазу, содержащую соответственно, г/л:The goal is achieved in that the proposed two-phase nutrient medium contains a dense phase containing, respectively, g / l:

Патока рафинаднаяMolasses 20.020.0 Натрия хлоридSodium chloride 5.05.0 Натрий фосфорнокислый двузамещенныйDisubstituted sodium phosphate 4.04.0 Дрожжевой экстрактYeast extract 10.010.0 Микробиологический агарMicrobiological agar 18.018.0 Водопроводная водаTap water остальноеrest

Патока рафинадная (ОСТ 18-233-75) в своем составе содержит не менее 45% сахарозы.Refined molasses (OST 18-233-75) in its composition contains at least 45% sucrose.

Биологическая ценность мелассы свекловичной (патоки рафинадной), являющейся отходом свеклосахарного производства, состоит в наличии углеводов, биологически активных веществ, аминокислот, витаминов, микроэлементов. В мелассе обнаружено 17 аминокислот, что составляет 31,0% от количества общего азота (0,5-2,1%). Комплекс термоустойчивых биологически активных веществ, накопленных свеклой в период вегетации и обладающих ростовыми свойствами, полностью переходит в мелассу. К ним относятся витамины В3, В8 и Н. (Петрухин И.В. Корма и кормовые добавки: Справочник. М.: Росагропромиздат, 1989. 526 с.)The biological value of beet molasses (refined molasses), which is a waste of beet sugar production, is the presence of carbohydrates, biologically active substances, amino acids, vitamins, and trace elements. 17 amino acids were found in molasses, which is 31.0% of the total nitrogen (0.5-2.1%). The complex of heat-resistant biologically active substances accumulated by beets during the growing season and having growth properties completely passes into molasses. These include vitamins B 3 , B 8 and N. (Petrukhin I.V. Feed and feed additives: Reference book. M: Rosagropromizdat, 1989. 526 p.)

Использование патоки рафинадной с натрием фосфорнокислым двузамещенным и дрожжевым экстрактом на водопроводной воде в качестве основы является отличительным признаком плотной фазы предлагаемой питательной среды.The use of molasses refined with sodium phosphate disubstituted and yeast extract in tap water as a base is the hallmark of the dense phase of the proposed nutrient medium.

И жидкую фазу, представленную питательным бульоном для культивирования микроорганизмов сухим (СПБ), состоящую из панкреатического гидролизата кильки и натрия хлорид (производство МИКРОГЕН ФГУП НПО «МИКРОГЕН» МЗ РФ Россия, 115088, г.Москва ул. 1-я Дубровская, д.15), в которую добавили лимоннокислый натрий как консервант, и глюкозу как стимулятор роста при следующем соотношении ингредиентов, г/л:And the liquid phase, represented by a nutrient broth for the cultivation of dry microorganisms (SPB), consisting of sprat pancreatic hydrolyzate and sodium chloride (manufactured by MIKROGEN FSUE NPO MIKROGEN of the Ministry of Health of the Russian Federation, Russia, 115088, Moscow, 1-ya Dubrovskaya St., 15 ), in which sodium citrate was added as a preservative, and glucose as a growth stimulator in the following ratio of ingredients, g / l:

Питательный бульон для культивированияCultivation Broth микроорганизмов сухой (СПБ)microorganisms dry (SPB) 15.015.0 Лимоннокислый натрийSodium Citrate 5.05.0 ГлюкозаGlucose 10.010.0 Дистиллированная водаDistilled water остальноеrest

Использование в качестве источника азотистого питания питательного бульона (СПБ), в качестве стимулятора роста - глюкозы, в качестве консерванта - лимоннокислого натрия - отличительные признаки жидкой фазы заявляемой питательной среды.The use of a nutrient broth (SPB) as a nitrogenous nutrition source, glucose as a growth stimulant, and sodium citrate as a preservative are the distinguishing features of the liquid phase of the claimed nutrient medium.

В отличие от прототипа предлагаемая среда экономична, выгодна и обеспечивает оптимальные условия для размножения бруцелл за 2-3 суток.In contrast to the prototype, the proposed environment is economical, profitable and provides optimal conditions for the propagation of brucella in 2-3 days.

Посев изучаемых культур материала осуществляют в двухфазную среду, завальцованную во флаконы (V 100 мл) по 30 мл плотной среды и 10 мл жидкой среды, стерильную.Sowing the studied material cultures is carried out in a two-phase medium, rolled into bottles (V 100 ml) of 30 ml of dense medium and 10 ml of liquid medium, sterile.

Приготовление двухфазной питательной среды для выделения бруцеллезного микроба включает два этапа.The preparation of a two-phase nutrient medium for the isolation of a brucellosis microbe involves two stages.

Плотная фаза питательной среды.The dense phase of the nutrient medium.

Для приготовления основы питательной среды отмеряют 20,0 г патоки рафинадной в мерном стакане, выливают в эмалированную кастрюлю, затем заливают водопроводной водой 980,0 мл, взвешивают на механических весах дрожжевой экстракт 10,0 г. натрия хлорид 5,0 г, натрия фосфорнокислого двузамещенного 4,0 г. ссыпают в эмалированную кастрюлю, тщательно перемешивают до образования однородной массы. Подогревают до 56°С, с добавлением активированного угля марки «ОУ-А» в количестве 1-2% к объему жидкости, добавляют 7 мл 20% раствора натрия гидроокиси, кипятят 5 мин. Фильтруют через полотняный фильтр «Бельтинг» и 8-16 слоев фильтровальной бумаги. Сбор фильтрата помещают в эмалированную кастрюлю. Готовый фильтрат светло-желтого цвета. К нему добавляют 18,0 г/л агара микробиологического. Смесь подогревают в кастрюле до 100±1°С, кипятят до полного расплавления агара в течение 10 мин. Корректируют раствором соляной кислоты (1:1) до рН 7,2±0,1, добавляют дрожжевой экстракт 10,0 г.To prepare the basis of the nutrient medium, 20.0 g of refined molasses are measured in a measuring cup, poured into an enamel pan, then 980.0 ml is poured with tap water, the yeast extract of 10.0 g of sodium chloride, 5.0 g, sodium phosphate, is weighed on a mechanical balance. disubstituted 4.0 g. poured into an enamel pan, mix thoroughly until a homogeneous mass. Heated to 56 ° C, with the addition of activated charcoal brand "OU-A" in an amount of 1-2% to the volume of liquid, add 7 ml of a 20% sodium hydroxide solution, boil for 5 minutes. It is filtered through a Belting filter and 8-16 layers of filter paper. Collect the filtrate is placed in an enamel pan. The finished filtrate is light yellow. To it add 18.0 g / l microbiological agar. The mixture is heated in a pan to 100 ± 1 ° C, boiled until the agar is completely melted for 10 minutes. Correct with a solution of hydrochloric acid (1: 1) to a pH of 7.2 ± 0.1, add yeast extract 10.0 g.

Приготовленную среду разливают во флаконы (V 100) по 30 мл, которые герметично укупоривают ватно-марлевыми пробками и бумагой крафт. Стерилизуют в автоклаве при 114±1°С в течение 20 мин. После стерилизации и остуживания до 56°С укладывают флаконы на бок, чтобы расплавленная агаровая среда образовала твердый слой на ее боковой стенке. Через 2-е суток флаконы ставят вертикально и выдерживают в термостате 3-е суток при 37°С на стерильность.The prepared medium is poured into 30 ml bottles (V 100), which are hermetically sealed with cotton gauze plugs and Kraft paper. Sterilized in an autoclave at 114 ± 1 ° C for 20 minutes After sterilization and cooling to 56 ° C, the bottles are placed on their sides so that the molten agar medium forms a solid layer on its side wall. After 2 days, the bottles are placed vertically and kept in a thermostat for 3 days at 37 ° C for sterility.

Плотная фаза питательной среды содержит следующие ингредиенты, г/л:The dense phase of the nutrient medium contains the following ingredients, g / l:

Патока рафинаднаяMolasses 18,0-20,018.0-20.0 Натрия хлоридSodium chloride 4,0-6,04.0-6.0 Натрия фосфорнокислого двузамещенногоSodium Phosphate Disubstituted 3,0-5,03.0-5.0 Дрожжевой экстрактYeast extract 8,0-12,08.0-12.0 Микробиологический агарMicrobiological agar 16,0-20,016.0-20.0 Водопроводная водаTap water остальноеrest

Жидкая фаза питательной средыThe liquid phase of the nutrient medium

Питательную среду (жидкую) готовили на основе питательного бульона для культивирования микроорганизмов сухого (СПБ) (производства МИКРОГЕН ФГУП «НПО» »Микроген» МЗ РФ Россия, 115088, г.Москва ул. 1-я Дубровская, 15). Среда содержит панкреатический гидролизат кильки и натрия хлорид. В данную среду мы добавили лимоннокислый натрий как консервант, и глюкозу как стимулятор роста в определенных дозах при следующем соотношении ингредиентов, г/л:The nutrient medium (liquid) was prepared on the basis of a nutrient broth for the cultivation of dry microorganisms (SPB) (manufactured by MICROGEN FSUE NPO Microgen, Ministry of Health of the Russian Federation, 15, 1-ya Dubrovskaya St., Moscow, 115088). The medium contains sprat pancreatic hydrolyzate and sodium chloride. In this environment, we added sodium citrate as a preservative, and glucose as a growth stimulator in certain doses in the following ratio of ingredients, g / l:

Питательный бульон для культивированияCultivation Broth микроорганизмов сухой (СПБ)microorganisms dry (SPB) 13,0-17,013.0-17.0 Лимоннокислый натрийSodium Citrate 4,0-6,04.0-6.0 ГлюкозаGlucose 8,0-12,08.0-12.0 Дистиллированная водаDistilled water остальноеrest

Смесь подогревают в эмалированной кастрюле до 100±1°С, кипятят до полного расплавления ингредиентов в течение 3 мин. В готовой жидкой питательной среде устанавливают рН 7,2±0,1 раствором 20% гидроокиси натрия или раствором соляной кислоты в соотношении 1:1The mixture is heated in an enameled pan to 100 ± 1 ° C, boiled until the ingredients are completely melted for 3 minutes. In the finished liquid nutrient medium, a pH of 7.2 ± 0.1 is established with a solution of 20% sodium hydroxide or with a solution of hydrochloric acid in a ratio of 1: 1

Приготовленную среду разливают в стерильные бактериологические пробирки мерно по 10±0,1 мл, которые герметично укупоривают ватно-марлевыми пробками и бумагой крафт. Стерилизуют в автоклаве при 121°С в течение 15 мин. После стерилизации и остуживания пробирки ставят в термостат вертикально и выдерживают 3-е суток при 37°С на стерильность. После поверки стерильности двух фаз питательных сред с соблюдением правил асептики стерильно над факелом жидкую питательную среду вливают во флаконы твердой питательной средой, флаконы закрывают стерильными резиновыми пробами и накрывают алюминиевыми колпачками, затем вальцуют. Завальцованные флаконы выдерживают в условиях термостата при температуре 37°С 3-е суток.The prepared medium is poured into sterile bacteriological tubes approximately 10 ± 0.1 ml, which are hermetically sealed with cotton gauze plugs and Kraft paper. Sterilize in an autoclave at 121 ° C for 15 minutes. After sterilization and cooling, the tubes are placed in a thermostat vertically and incubated for 3 days at 37 ° C for sterility. After checking the sterility of the two phases of the nutrient medium, aseptic rules are followed, sterile liquid is poured over the torch into the vials with solid nutrient medium, the vials are closed with sterile rubber samples and covered with aluminum caps, then rolled. Rolled vials are kept in a thermostat at a temperature of 37 ° C for 3 days.

Готовую двухфазную питательную среду используют для выделения бруцеллезного микроба. Испытуемые тест-штаммы B.melitensis 565 М, В. abortus 544, выращенные на пластинках плотного агара рН 7,2±0,1 при температуре 37°С в течение 24 ч. Из суточных культур готовили взвесь м.к. тест-штаммов в физиологическом растворе с концентрацией, соответствующей, 10 единицам ОСО мутности ГИСК им. Л.А.Тарасевича, эквивалентного 1,0.109 м.к./мл бруцелл. Затем серийными десятикратными разведениями в физиологическом растворе в объеме 4,5 мл доводили до содержания в 1 мл 1000 и 10 м.к. Из данных разведений взвесей культур высевали одноразовым шприцем по 0,1 мл в 3 флакона. Посевы инкубировали в условиях термостата при 37°С Через каждые 24-48-72-120 ч флаконы наклоняют, так чтобы жидкая среда смачивала всю поверхность скошенного агара, а затем из жидкой среды стерильно одноразовым шприцем над факелом через прокол резиновой пробки забирают пробу в количестве 0,1 мл и засевают на пластинки агараThe finished biphasic growth medium is used to isolate the brucellosis microbe. Test strains B.melitensis 565 M, B. abortus 544, grown on solid agar plates, pH 7.2 ± 0.1 at 37 ° C for 24 hours. A suspension of m.k. was prepared from daily cultures. test strains in physiological saline with a concentration corresponding to 10 units of CCA turbidity GISK them. L.A. Tarasevich, equivalent to 1.0.10 9 m.k. / ml of brucella. Then, serial ten-fold dilutions in physiological saline in a volume of 4.5 ml were brought to a content of 1 ml of 1000 and 10 MK From these dilutions of crop suspensions, 0.1 ml disposable syringe was sown in 3 vials. Crops were incubated in a thermostat at 37 ° C. Every 24-48-72-120 hours, the bottles are tilted so that the liquid medium moistens the entire surface of the mowed agar, and then a sample of 0.1 ml and seeded on agar plates

Оценку ростовых свойств двухфазных питательных сред для выделения бруцеллезного микроба проводили путем подсчета количества выросших колоний бруцелл при посеве содержимого флаконов посуточно на пластинках агара с плотной питательной средой.The growth properties of biphasic growth media for isolating a brucellosis microbe were assessed by counting the number of grown brucella colonies by sowing the contents of the vials daily on agar plates with a dense nutrient medium.

Пример 1. Тест-штаммы выращивали на двухфазной питательной среде, содержащей, г/л: (плотная фаза) патока рафинадная 18,0, натрия хлорид 4,0, натрий фосфорнокислый двузамещенный 3,0, дрожжевой экстракт 8,0, микробиологический агар 16,0, водопроводная вода - остальное;Example 1. Test strains were grown on a two-phase nutrient medium containing, g / l: (dense phase) refined molasses 18.0, sodium chloride 4.0, sodium phosphate disubstituted 3.0, yeast extract 8.0, microbiological agar 16 , 0, tap water - the rest;

(жидкая фаза) питательный бульон для культивирования микроорганизмов сухой (СПБ) 13,0, лимоннокислый натрий 4,0, глюкоза 8,0, дистиллированная вода - остальное. При таком соотношении ингредиентов количество колоний, выросших на плотных пластинках агара при пересеве из жидкой среды, для бруцелл обеих видов, высеянных из флаконов при посевной дозе 100 м.к., составило через 48 и 72 ч соответственно 121; 500; 83; 100. То есть накопительный эффект для B.melitensis 565 составил после 72 120 ч подращивания 49/58%, а для B.abortus 58/71%.(liquid phase) nutrient broth for the cultivation of microorganisms dry (SPB) 13.0, sodium citrate 4.0, glucose 8.0, distilled water - the rest. With this ratio of ingredients, the number of colonies grown on solid agar plates when reseeding from a liquid medium for both types of brucella, seeded from vials at a seed dose of 100 mk, was 121 and 48 hours later, respectively 121; 500; 83; 100. That is, the cumulative effect for B. melitensis 565 was after cultivation 49/58% after 72 120 hours, and 58/71% for B. abortus.

Пример 2. Тест-штаммы выращивали на двухфазной питательной среде, содержащей, г/л: (плотная фаза) патока рафинадная 20,0, натрия хлорид 5,0, натрий фосфорнокислый двузамещенный 4,0, дрожжевой экстракт 10,0, микробиологический агар 18,0, водопроводная вода - остальное,Example 2. Test strains were grown on a two-phase nutrient medium containing, g / l: (dense phase) refined molasses 20.0, sodium chloride 5.0, sodium phosphate disubstituted 4.0, yeast extract 10.0, microbiological agar 18 , 0, tap water - the rest,

(жидкая фаза) питательный бульон для культивирования микроорганизмов сухой (СПБ) 15,0: лимоннокислый натрий 5,0, глюкоза 10,0, дистиллированная вода - остальное. При таком соотношении ингредиентов количество колоний, выросших на плотных пластинках агара при пересеве из жидкой среды, для бруцелл обеих видов, высеянных из флаконов при посевной дозе 100 м.к., составило через 48 и 72 часа соответственно 275; сплошной рост; 200; сплошной рост. То есть накопительный эффект для B.melitensis 565 составил после 72/120 ч подращивания 89/98%, а для B.abortus 55/98%.(liquid phase) nutrient broth for the cultivation of microorganisms dry (SPB) 15.0: sodium citrate 5.0, glucose 10.0, distilled water - the rest. With this ratio of ingredients, the number of colonies grown on solid agar plates when reseeding from a liquid medium, for both types of brucella, seeded from vials at a sowing dose of 100 mk, was 275 after 48 and 72 hours, respectively; continuous growth; 200; continuous growth. That is, the cumulative effect for B. melitensis 565 was after growth 89/98% after 72/120 h, and 55/98% for B. abortus.

Пример 3. Тест-штаммы выращивали на двухфазной питательной среде, содержащей, г/л: (плотная фаза) патока рафинадная 22,0, натрия хлорид 6,0, натрий фосфорнокислый двузамещенный 5,0, дрожжевой экстракт 12,0, микробиологический агар 20,0, водопроводная вода - остальное,Example 3. Test strains were grown on a two-phase nutrient medium containing, g / l: (dense phase) refined molasses 22.0, sodium chloride 6.0, sodium phosphate disubstituted 5.0, yeast extract 12.0, microbiological agar 20 , 0, tap water - the rest,

(жидкая фаза) питательный бульон для культивирования микроорганизмов сухой (СПБ) 17,0: лимоннокислый натрий 6,0: глюкоза 12,0: дистиллированная вода - остальное. При таком соотношении ингредиентов количество колоний, выросших на плотных пластинках агара при пересеве из жидкой среды, для бруцелл обеих видов, высеянных из флаконов при посевной дозе 100 м.к., составило через 48 и 72 ч соответственно 130; 602; 97; 124. То есть накопительный эффект для B.melitensis 565 составил после 72/120 ч подращивания 45/55%, а для B.abortus 61/69%.(liquid phase) nutrient broth for the cultivation of microorganisms dry (SPB) 17.0: sodium citrate 6.0: glucose 12.0: distilled water - the rest. With this ratio of ingredients, the number of colonies grown on solid agar plates when reseeding from a liquid medium for both types of brucella, seeded from vials at a sowing dose of 100 mk, amounted to 130 after 48 and 72 hours, respectively; 602; 97; 124. That is, the cumulative effect for B. melitensis 565 was after growth 72/205 hours 45/55%, and for B. abortus 61/69%.

Таким образом вариант 2 - двухфазная питательная среда - является оптимальным по количеству подобранных ингредиентов двух питательных фаз, они в совокупности позволяют получить достаточное количество колоний бруцеллезного микроба в ранние сроки (2-3 сутки).Thus, option 2 - a two-phase nutrient medium - is optimal in terms of the number of selected ingredients of the two nutrient phases, they together allow you to get a sufficient number of colonies of brucellosis microbe in the early stages (2-3 days).

Claims (1)

Двухфазная питательная среда для выделения бруцеллезного микроба, содержащая плотную фазу, включающую соответственно, г/л:
Патока рафинадная 18,0-22,0 Натрия хлорид 4,0-6,0 Натрий фосфорнокислый двузамещенный 3,0-5,0 Дрожжевой экстракт 8,0-12,0 Микробиологический агар 16,0-20,0 Водопроводная вода остальное

и жидкую фазу, представленную, г/л:
Питательный бульон для культивирования микроорганизмов сухой (СПБ) 13,0-17,0 Лимоннокислый натрий 4,0-6,0 Глюкоза 8,0-12,0 Дистиллированная вода остальное
A two-phase nutrient medium for the isolation of a brucellosis microbe, containing a dense phase, respectively, including g / l:
Molasses 18.0-22.0 Sodium chloride 4.0-6.0 Disubstituted sodium phosphate 3.0-5.0 Yeast extract 8.0-12.0 Microbiological agar 16.0-20.0 Tap water rest

and the liquid phase represented, g / l:
Cultivation Broth microorganisms dry (SPB) 13.0-17.0 Sodium Citrate 4.0-6.0 Glucose 8.0-12.0 Distilled water rest
RU2007117968/13A 2007-05-14 2007-05-14 Two-phase nutrient medium for isolating brucellosis microbe RU2346052C1 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2007117968/13A RU2346052C1 (en) 2007-05-14 2007-05-14 Two-phase nutrient medium for isolating brucellosis microbe

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2007117968/13A RU2346052C1 (en) 2007-05-14 2007-05-14 Two-phase nutrient medium for isolating brucellosis microbe

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RU2346052C1 true RU2346052C1 (en) 2009-02-10

Family

ID=40546719

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2007117968/13A RU2346052C1 (en) 2007-05-14 2007-05-14 Two-phase nutrient medium for isolating brucellosis microbe

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2346052C1 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2529364C1 (en) * 2013-05-07 2014-09-27 Федеральное казённое учреждение здравоохранения Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав портребителей и благополучия человека Biphasic transport nutrient medium for isolation and growing brucellar microbe

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Методы общей бактериологии. / Под ред. Ф. ГЕРХАРДТА. - М.: Мир, 1983, с.331-332. Под ред. А.С. ЛАБИНСКОЙ. Частная медицинская микробиология с техникой микробиологических исследований. - М.: Медицина, 2005, с.521-527. КОЗЛОВ Ю.А. Питательные среды в медицинской микробиологии. - М.: Медгиз, 1950, с.69-171. *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RU2529364C1 (en) * 2013-05-07 2014-09-27 Федеральное казённое учреждение здравоохранения Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав портребителей и благополучия человека Biphasic transport nutrient medium for isolation and growing brucellar microbe

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN110205355A (en) A kind of highly sensitive detection culture medium of microorganism and its preparation method and application
RU2412240C1 (en) Culture medium for growing legionella
RU2346052C1 (en) Two-phase nutrient medium for isolating brucellosis microbe
RU2626568C1 (en) Dense nutrient medium for cultivation and collection of biomass of plague microbe of ypestis ev vaccine strain
RU2681285C1 (en) Nutrient medium for cultivation of brucella neotomae species cultivation
RU2435842C1 (en) Transport nutrient medium (liquid) for cultivation of brucellous microbe
RU2688335C1 (en) Dense nutrient medium for cultivation of brucellosis agent
CN102908312B (en) Liquid combination for resisting hepatitis B viruses
CN106860891A (en) A kind of benzalkonium bromide sodium choride irrigation and preparation method thereof
RU2529364C1 (en) Biphasic transport nutrient medium for isolation and growing brucellar microbe
RU2460774C1 (en) Nutrient medium for legionella cultivation
RU2460768C1 (en) Solid nutrient medium for legionella cultivation
RU2687364C2 (en) DENSE NUTRIENT MEDIUM FOR CULTIVATION OF INFECTIOUS EPIDIDYMITIS AGENT OF RAMS B.ovis
RU2247775C1 (en) Liquid nutrient transporting medium for collection, culturing and transportation of patient blood with suspicion for brucellosis
RU2333948C2 (en) Nutritional medium for growing causative agent of tularemia
RU2748808C1 (en) Dense universal nutrient medium for growing brucella biomass
RU2425871C1 (en) Nutrient medium for legionella cultivation
RU2528101C2 (en) Nutrient medium for legionella culture
CN107998138A (en) A kind of glycine and preparation associated with kanamycins
RU2550256C1 (en) Method of production of nutrient medium for cultivation of lactobacilli
RU2764139C1 (en) Dense nutrient medium with kombucha hydrolysate, stimulating the accumulation of bacterial mass of brucella
RU2410424C1 (en) Culture medium for growing microorganism
RU2041947C1 (en) Culture medium for isolation of diphtheritic microbe
RU2738858C1 (en) Method of extracting uncultivated forms of staphylococci
RU2264455C2 (en) Broth for selective accumulation yersinia enterocolitica and yersinia pseudotuberculosis

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20090515