RU2687364C2 - DENSE NUTRIENT MEDIUM FOR CULTIVATION OF INFECTIOUS EPIDIDYMITIS AGENT OF RAMS B.ovis - Google Patents
DENSE NUTRIENT MEDIUM FOR CULTIVATION OF INFECTIOUS EPIDIDYMITIS AGENT OF RAMS B.ovis Download PDFInfo
- Publication number
- RU2687364C2 RU2687364C2 RU2017122868A RU2017122868A RU2687364C2 RU 2687364 C2 RU2687364 C2 RU 2687364C2 RU 2017122868 A RU2017122868 A RU 2017122868A RU 2017122868 A RU2017122868 A RU 2017122868A RU 2687364 C2 RU2687364 C2 RU 2687364C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- ovis
- infectious
- epididymitis
- cultivation
- nutrient medium
- Prior art date
Links
- 201000010063 epididymitis Diseases 0.000 title claims abstract description 13
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 title claims abstract description 13
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 title claims abstract description 13
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 title claims description 24
- 241000223850 Babesia ovis Species 0.000 title claims 2
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 claims abstract description 27
- 239000008272 agar Substances 0.000 claims abstract description 27
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 26
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims abstract description 22
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 claims abstract description 15
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 15
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 claims abstract description 13
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 claims abstract description 12
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims abstract description 11
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims abstract description 10
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 claims abstract description 10
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims abstract description 10
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 claims abstract description 10
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 claims abstract description 9
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 claims abstract description 9
- HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L sodium disulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S(=O)S([O-])(=O)=O HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims abstract description 9
- 235000010262 sodium metabisulphite Nutrition 0.000 claims abstract description 9
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims abstract description 8
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 8
- 239000004296 sodium metabisulphite Substances 0.000 claims abstract description 3
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 claims description 9
- 244000052769 pathogen Species 0.000 claims description 7
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims description 6
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 claims description 6
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 claims description 4
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-N sodium;hydron;carbonate Chemical compound [Na+].OC(O)=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 abstract description 10
- 230000002440 hepatic effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 2
- 235000001727 glucose Nutrition 0.000 abstract description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 abstract 2
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 abstract 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 abstract 1
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 abstract 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 abstract 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 abstract 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 26
- 241000589568 Brucella ovis Species 0.000 description 22
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 8
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 7
- 231100000676 disease causative agent Toxicity 0.000 description 6
- 229940001584 sodium metabisulfite Drugs 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 241000589562 Brucella Species 0.000 description 5
- 238000009331 sowing Methods 0.000 description 5
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 4
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 4
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 4
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 4
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 238000000034 method Methods 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010006500 Brucellosis Diseases 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RAHZWNYVWXNFOC-UHFFFAOYSA-N Sulphur dioxide Chemical compound O=S=O RAHZWNYVWXNFOC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 2
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 description 2
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 2
- 239000012888 bovine serum Substances 0.000 description 2
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 2
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 210000003298 dental enamel Anatomy 0.000 description 2
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 2
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 2
- 235000015110 jellies Nutrition 0.000 description 2
- 239000008274 jelly Substances 0.000 description 2
- 239000006402 liver broth Substances 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 238000010899 nucleation Methods 0.000 description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 239000008399 tap water Substances 0.000 description 2
- 235000020679 tap water Nutrition 0.000 description 2
- XDIYNQZUNSSENW-UUBOPVPUSA-N (2R,3S,4R,5R)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O.OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O XDIYNQZUNSSENW-UUBOPVPUSA-N 0.000 description 1
- 241000193738 Bacillus anthracis Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 206010008631 Cholera Diseases 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- 208000004023 Legionellosis Diseases 0.000 description 1
- 241000283898 Ovis Species 0.000 description 1
- 206010035148 Plague Diseases 0.000 description 1
- 208000034784 Tularaemia Diseases 0.000 description 1
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- 235000021336 beef liver Nutrition 0.000 description 1
- 238000005842 biochemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 238000001311 chemical methods and process Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000010411 cooking Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000035622 drinking Effects 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 235000020993 ground meat Nutrition 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002655 kraft paper Substances 0.000 description 1
- 238000003771 laboratory diagnosis Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000006241 metabolic reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 230000035790 physiological processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 239000013630 prepared media Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- JVBXVOWTABLYPX-UHFFFAOYSA-L sodium dithionite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S(=O)S([O-])=O JVBXVOWTABLYPX-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 210000002435 tendon Anatomy 0.000 description 1
- 238000005979 thermal decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
- C12Q1/04—Determining presence or kind of microorganism; Use of selective media for testing antibiotics or bacteriocides; Compositions containing a chemical indicator therefor
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Virology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к биотехнологии и микробиологии именно к разработке питательных сред, которые создают оптимальные условия для культивирования возбудителя инфекционного эпидидимита баранов Brucella ovis.The invention relates to biotechnology and microbiology, namely the development of nutrient media that create optimal conditions for the cultivation of the causative agent of infectious epididymitis of Brucella ovis rams.
Известна питательная среда мясопептонный агар для выращивания бруцеллезного микроба, основой которой является мясная вода до 1000,0 мл; пептон ферментативный - 10,0 г; натрия хлорид - 5,0 г; кровь - 10,0 г; агар микробиологический - 15,0-20,0 г; рН 7,3±0,2. Среду автоклавируют 30 мин при температуре 121°С (М.С. Поляк; В.И. Сухаревич; М.Э. Сухаревич. Питательные среды для медицинской и санитарной микробиологии. СПб.: ЭЛБИ-СП6. - 2008. - С. 64-65.; С. - 269).Known nutrient medium meat-peptone agar for the cultivation of Brucella microbe, which is based on meat water to 1000.0 ml; enzyme peptone - 10.0 g; sodium chloride - 5.0 g; blood - 10.0 g; microbiological agar - 15.0-20.0 g; pH 7.3 ± 0.2. Wednesday autoclave 30 minutes at a temperature of 121 ° C (MS Polyak; VI Suharevich; ME Suharevich. Nutrient media for medical and sanitary microbiology. SPb .: ELBI-SP6. - 2008. - P. 64 -65; c. - 269).
Недостатком данной среды является недостаточная питательная ценность для бруцелл.The disadvantage of this environment is insufficient nutritional value for Brucella.
Наиболее близкой к заявляемому изобретению является питательная среда для культивирования бруцелл В. ovis содержащая г/л: мясопептонный агар, к которому добавляют 1% декстрозы (глюкозы) и 2% глицерина. Среду разливают в необходимую посуду и стерилизуют при 116°С в течение 15 минут. Перед посевом к расплавленной и остуженной до 50°С среде добавляют 20% нормальной сыворотки крови крупного рогатого скота или 10% аминопептида. (Профилактика и лабораторная диагностика бруцеллеза людей. Методические указания МУ 3.1.7.1189-03. Издание официальное. Минздрав России Москва 2003 г. с. 56).Closest to the claimed invention is a nutrient medium for the cultivation of Brucella B. ovis containing g / l: meat-peptone agar, to which is added 1% dextrose (glucose) and 2% glycerol. Wednesday poured into the necessary utensils and sterilized at 116 ° C for 15 minutes. Before seeding, 20% of normal bovine serum or 10% of the aminopeptide are added to the medium melted and cooled to 50 ° C. (Prevention and laboratory diagnosis of human brucellosis. Guidelines MU 3.1.7.1189-03. Official publication. Ministry of Health of Russia Moscow 2003 p. 56).
Недостатком данной среды является недостаточная эффективность, ввиду позднего роста возбудителя.The disadvantage of this environment is insufficient efficiency, due to the late growth of the pathogen.
Целью изобретения является разработка рецептуры питательной среды плотной для культивирования возбудителя инфекционного эпидидимита баранов В. ovis, которая обеспечивает активный рост через 24 ч.The aim of the invention is to develop a formulation of a nutrient medium dense for the cultivation of the causative agent of infectious epididymitis of rams B. ovis, which ensures active growth after 24 hours.
Сущность предполагаемого изобретения заключается в том, что в качестве основного источника азотистого питания в предлагаемой среде используется мясная вода, печеночный отвар, пептон ферментативный, сыворотка крови крупного рогатого скота, для поддержания изотоничности среды и окислительно-восстановительного потенциала натрий хлористый, для насыщения среды углекислотой - натрий углекислый кислый, в качестве стимулирующих добавок - глюкоза, глицерин, натрия метабисульфит, а также агар микробиологический, питьевая вода, в следующих количествах на 1 л среды:The essence of the proposed invention is that as the main source of nitrogen nutrition in the proposed environment is used meat water, liver broth, enzyme peptone, cattle blood serum, to maintain the isotonicity of the environment and the redox potential of sodium chloride, to saturate the environment with carbon dioxide - acid sodium carbonate, as stimulating additives - glucose, glycerin, sodium metabisulphite, as well as microbial agar, drinking water, in the following amounts honors 1 liter of medium:
Мясная вода - говяжье мясо освобождают от костей, жира, сухожилий, пропускают через мясорубку, 1 кг мясного фарша заливают 2 л водопроводной воды и кипятят в течение часа, накипь снимают. После кипения, мясную воду остужают, фильтруют через ватно-марлевый фильтр до полной прозрачности, затем доливают водопроводной водой до первоначального объема, разливают в бутыли и стерилизуют 20 минут при 120°С. (Лабинская А.С. Микробиология с техникой микробиологичеких исследований. Издательство «Медицина». Москва - 1972. 437 с.).Meat water - beef meat is freed from bones, fat, tendons, passed through a meat grinder, 1 kg of ground meat is poured over 2 liters of tap water and boiled for an hour, the scum is removed. After boiling, the meat water is cooled, filtered through a cotton-gauze filter to full transparency, then topped up with tap water to the original volume, poured into bottles and sterilized for 20 minutes at 120 ° C. (Labinskaya AS Microbiology with the technique of microbiological research. Meditsina Publishing House. Moscow - 1972. 437 p.).
Печеночный отвар - фарш из свежей говяжьей печени заливают питьевой водой (1 л на 1 кг фарша), затем настаивают 3 ч при 25-30°С или 6-10 ч при 4-10°С, затем варят около 2 ч; после варки отвар фильтруют через ватно-марлевый фильтр и стерилизуют при 115-120°С 20 мин. (Биргер М.О.. Справочник по микробиологическим и вирусологическим методам исследования. Москва «Медицина» 1982. 82. с.).Liver broth - minced fresh beef liver is poured with drinking water (1 l per 1 kg of minced meat), then insist 3 hours at 25-30 ° C or 6-10 hours at 4-10 ° C, then boil for about 2 hours; after cooking, the broth is filtered through a cotton-gauze filter and sterilized at 115-120 ° C for 20 minutes. (Birger, MO. A Handbook of microbiological and virological research methods. Moscow "Medicine" 1982. 82. p.).
Пептон сухой ферментативный для бактериологических целей - ГОСТ 13805-76. Производитель «НПО Порт-Петровск».Enzymatic dry peptone for bacteriological purposes - GOST 13805-76. Manufacturer NPO Port-Petrovsk.
Натрий хлористый, хч, ГОСТ 4233-77 партия 24. Бактерии нуждаются в минимальном количестве солей. Будучи растворены в питательной среде и находясь в состоянии электролитического распада, ионизируемые минеральные соединения являются одновременно катализаторами различных химических процессов, происходящих в микробной клетке.Sodium chloride, hch, GOST 4233-77 batch 24. Bacteria need a minimum amount of salts. Being dissolved in a nutrient medium and being in a state of electrolytic decomposition, ionizable mineral compounds are at the same time catalysts for various chemical processes occurring in a microbial cell.
Натрий углекислый кислый ГОСТ4201-79, хч. Партия 8. «РУСХИМ». Вводится в питательную среду для насыщения среды углекислотой, которая необходима для культивирования возбудителя инфекционного эпидидимита В. ovis.Sour sodium carbonate GOST4201-79, hch. Party 8. “RUSHIM”. It is introduced into the nutrient medium to saturate the environment with carbon dioxide, which is necessary for the cultivation of the pathogen of infectious epididymitis B. ovis.
Глюкоза кристаллическая, чда, партия 20140327 ЩЩЩ «МСД Торговая компания». Срок годности 3 года. С внесением в питательную среду глюкозы - улучшается ее ростовые свойства в концентрации 1%.Crystalline glucose, chd, batch 20140327 ЩЩЩ "MSD Trading Company". Shelf life 3 years. With the introduction of glucose into the nutrient medium, its growth properties are improved in a concentration of 1%.
Глицерин ГОСТ 6259-75, партия 5, срок годности 3 года. С внесением в питательную среду глицерина в концентрации 2% - улучшается ее ростовые свойства.Glycerin GOST 6259-75, batch 5, shelf life 3 years. With the introduction of glycerol into the nutrient medium at a concentration of 2%, its growth properties are improved.
Натрия метабисульфит ГОСТ 11683-76 в средах переходит в гидросульфит натрия, при нагревании происходит термическое разложение с выделением двуокиси серы (SO2), что способствует нейтрализации продуктов жизнедеятельности культивируемых микроорганизмов.Sodium metabisulfite GOST 11683-76 in the environment turns into sodium hydrosulfite, when heated, thermal decomposition occurs with the release of sulfur dioxide (SO 2 ), which helps to neutralize the waste products of cultured microorganisms.
Сыворотка крови крупного рогатого скота для культивирования микроорганизмов жидкая, стерильная. Производство «БИОЛОТ», С-Петербург, а/я 25.Bovine blood serum for the cultivation of microorganisms is liquid, sterile. Production "BIOLOT", St. Petersburg, PO Box 25.
Агар микробиологический - агар бактериологический (европейский тип). Производитель: «Pronadisa» Испания. Партия LF 15130184. Срок годности до 10.2017 г. Дата изготовления: октябрь 2013 г. Порошок светло-кремового цвета сероватого оттенка, запах без постороннего, свойственный студню с массовой долей сухого агара 0,85%. Температура плавления студня с массовой долей сухого агара 0.85% не ниже 80°С, температура застудневания - 30-37°С, прочность студня не менее - 350±40 г. Главная особенность агара его желирующая способность при 90°С.Microbiological agar - bacteriological agar (European type). Manufacturer: "Pronadisa" Spain. Party LF 15130184. Expiration date to 10.2017. Date of manufacture: October 2013. Powder of a light cream color of a grayish tint, odor without an extraneous, peculiar to jelly with a mass fraction of dry agar of 0.85%. The melting temperature of the jelly with a mass fraction of dry agar is 0.85% not lower than 80 ° C, the temperature of the gel is 30-37 ° C, the strength of the gel is no less than 350 ± 40 g. The main feature of the agar is its gelling capacity at 90 ° C.
Питьевая вода-ГОСТ Р 51232-98 отвечает всем гигиеническим требованиям. Вода составляет 80-90% от клеточной массы микроорганизмов и играет важную роль в их физиологических функциях. Она входит в состав структурных элементов клетки, служит средой для биохимических реакций, источником кислорода в процессах метаболизма, непосредственно участвует в метаболических реакциях, например в реакциях гидролиза. Вода является хорошим растворителем, обеспечивая клетку питательными веществами. Вода - важнейший компонент всех питательных сред. В отсутствии воды замедляются или полностью прекращаются процессы жизнедеятельности микроорганизмов.Drinking water-GOST R 51232-98 meets all hygienic requirements. Water makes up 80-90% of the cellular mass of microorganisms and plays an important role in their physiological functions. It is part of the structural elements of the cell, serves as a medium for biochemical reactions, a source of oxygen in metabolic processes, is directly involved in metabolic reactions, such as hydrolysis reactions. Water is a good solvent, providing the cell with nutrients. Water is the most important component of all nutrient media. In the absence of water, the vital activity of microorganisms is slowed down or completely stopped.
Приготовление плотной питательной средыPreparation of a dense nutrient medium
Для приготовления питательной среды плотной отмеряют- 250,0 мл мясной воды в мерном стакане, выливают в эмалированную кастрюлю, затем вливают печеночный отвара - 500,0 мл, взвешивают на механических весах пептон сухой ферментативный - 10,0 г, натрий хлористый - 5,0, натрий углекислый кислый 17,0 мл 10% раствор, агар микробиологический 15,0 г ссыпают в эмалированную кастрюлю вливают питьевой воды 250,0 мл тщательно перемешивают до образования однородной массы. Подогревают до кипения, затем кипятят до полного расплавления агара в течение 2 мин. Фильтруют через ватно-марлевый фильтр. Сбор фильтрата помещают в эмалированную кастрюлю, затем добавляют глюкозу 10,0 г, натрия метабисульфит 0,3 г и глицерин 20,0 мл. Готовый фильтрат имеет светло-желтый цвет, рН корректируют раствором соляной кислоты (1:1) до 7,3±0,1.To prepare a nutrient medium, measure 250.0 ml of meat water in a measuring glass, pour it into an enameled pan, then pour in hepatic decoction - 500.0 ml, weigh the enzymatic peptone dry on the balance - 10.0 g, sodium chloride - 5, 0, sodium carbonate acidic 17.0 ml of a 10% solution, microbiological agar 15.0 g poured into an enamel saucepan pour in 250.0 ml of drinking water is thoroughly mixed until a homogeneous mass. Heat to boiling, then boil until agar is completely melted for 2 minutes. Filter through a cotton gauze filter. The collection of the filtrate is placed in an enamel pot, then glucose 10.0 g, sodium metabisulfite 0.3 g and glycerin 20.0 ml are added. The finished filtrate has a light yellow color, the pH is adjusted with a solution of hydrochloric acid (1: 1) to 7.3 ± 0.1.
Приготовленную среду разливают в градуированные флаконы по 200±0,1 мл, которые герметично укупоривают ватно-марлевыми пробками и бумагой Крафт. Стерилизуют в автоклаве при 121°С в течение 30 мин. После стерилизации и остуживания до 46°С в каждый флакон добавляют стерильно 20% сыворотки крови крупного рогатого скота, затем разливают на чашки Петри по 35-40 мл питательной среды. Сочетанное применение выше описанных ингредиентов, обеспечивает существенное усиление ростовых качеств при культивирования возбудителя инфекционного эпидидимита Brucella ovis в значительно ранние сроки через 24±1 ч на пластинках питательного агара. Готовую питательную среду плотную используют для культивирования возбудителя инфекционного эпидидимита баранов В. ovis.The prepared medium is poured into 200 ± 0.1 ml graduated bottles, which are hermetically sealed with cotton-gauze stoppers and Kraft paper. Sterilized in an autoclave at 121 ° C for 30 min. After sterilization and cooling to 46 ° C, 20% of cattle blood serum is added sterile to each vial, then poured into Petri dishes in 35-40 ml of nutrient medium. The combined use of the above ingredients, provides a significant increase in growth qualities in the cultivation of the causative agent of infectious epididymitis Brucella ovis in a much earlier period after 24 ± 1 h on plates of nutrient agar. Prepared dense nutrient medium is used for cultivation of the pathogen of infectious epididymitis of rams B. ovis.
Эффективность полученной среды оценивают в соответствии с методическими указаниями (МУ 3.3.2.2124-06) «Контроль диагностических питательных сред по биологическим показателям для возбудителей чумы, холеры, сибирской язвы, туляремии, бруцеллеза, легионеллеза», Москва, 2007 г., с использованием вирулентных культур барана: В. ovis 703; В. ovis 704; В. ovis 706;. В. ovis 709; В. ovis 711; В. ovis 713; В. ovis 717; ovis 718. Испытуемые культуры выращивают на поверхности скошенного агара рН 7,2±0,1 при температуре 37°С в течение 48 ч. Из двухсуточных культур тест-штаммов бруцелл смывают с поверхности скошенного агара 0,9% раствором натрия хлорида, доводят концентрацию микробной взвеси до 10 единиц по оптическому стандарту мутности ОСО 42-28-85 ГИСК им. Л.А. Тарасевича, эквивалентную 1,7×109 бруцелл 1 мл. Полученную микробную взвесь культуры разводят сначала до концентрации 1×109 м.к./мл затем серийными десятикратными разведениями до 1×106 и 1×107 м.к./мл. В процессе разведения перенос взвеси в следующую пробирку производят стерильной пипеткой объемом 1 мл, меняя пипетку для каждого разведения. По 0,1 мл каждой культуры В. ovis из разведений 106 (100 м.к.) и 107 (10 м.к.) высевают на 3 чашки Петри с испытуемыми средами и равномерно распределяют покачиванием по всей поверхности. Посевы инкубируют при температуре 37±1°С.The effectiveness of the obtained environment is assessed in accordance with the guidelines (MU 3.3.2.2124-06) "Control of diagnostic nutrient media by biological indicators for pathogens of plague, cholera, anthrax, tularemia, brucellosis, legionellosis", Moscow, 2007, using virulent ram cultures: B. ovis 703; B. ovis 704; B. ovis 706; B. ovis 709; B. ovis 711; B. ovis 713; B. ovis 717; ovis 718. The test cultures were grown on the surface of canted agar pH 7.2 ± 0.1 at 37 ° C for 48 hours. From two-day cultures of test strains, Brucella was washed from the surface of the canted agar with 0.9% sodium chloride solution and the concentration was adjusted microbial suspension up to 10 units according to the optical turbidity standard OCO 42-28-85 L.A. Tarasevich, equivalent to 1.7 × 10 9 Brucella 1 ml. The obtained microbial suspension of the culture is diluted first to a concentration of 1 × 10 9 mc / ml, then serial tenfold dilutions to 1 × 10 6 and 1 × 10 7 mc / ml. In the process of dilution, the suspension is transferred to the next tube with a sterile pipette with a volume of 1 ml, changing the pipette for each dilution. At 0.1 ml of each B. ovis culture from a dilution of 10 6 (100 m.k.) and 10 7 (10 m.k.) are seeded into 3 Petri dishes with the test media and evenly distributed by shaking over the entire surface. Crops are incubated at 37 ± 1 ° C.
Учет результатов. Оценку ростовых свойств питательной среды плотной для культивирования возбудителя инфекционного эпидидимита баранов В. ovis проводят путем подсчета количества выросших колоний бруцелл посуточно на пластинках агара с плотной питательной средой через каждые 24-48-72-120 ч. В качестве контролей использовали агар мясопептонный и агар Альбими.Accounting results. Evaluation of the growth properties of the nutrient medium dense for the cultivation of the causative agent of infectious epididymitis of rams B. ovis is carried out by counting the number of grown Brucella colonies per day on agar plates with a dense nutrient medium every 24-48-72-120 h. .
Пример 1. Культуры выращивали на питательной среде плотной для культивирования возбудителя инфекционного эпидидимита баранов В. ovis, содержащая следующие ингредиенты в следующих количествах на 1 л среды: мясная вода - 150,0 мл; печеночный отвар - 400,0 мл; пептон сухой ферментативный - 8,0 г; натрий хлористый - 4,0 г; натрий углекислый кислый 10% раствор - 15,0 мл; глюкоза - 0.03 г; глицерин - 0.01 г; метабисульфит натрия - 0,2 г; сыворотка крови крупного рогатого скота - 0,1 мл; агар микробиологический - 13,0 г; питьевая вода остальное.Example 1. Cultures were grown on nutrient medium dense for the cultivation of the causative agent of infectious epididymitis of rams B. ovis, containing the following ingredients in the following amounts per 1 l of medium: meat water - 150.0 ml; hepatic decoction - 400.0 ml; enzyme dry peptone - 8.0 g; sodium chloride - 4.0 g; sodium carbonic acid 10% solution - 15.0 ml; glucose - 0.03 g; glycerin - 0.01 g; sodium metabisulfite - 0.2 g; serum of cattle - 0.1 ml; microbiological agar - 13.0 g; drinking water else.
При таком соотношении ингредиентов на испытуемой среде колонии В. ovis начинали формироваться через 30 часа, на мясопептонном агаре через 60 ч, а на агаре Альбими рост отсутствовал при посеве 10 м.к., а при посеве 100 м.к. вырастало менее 2% колоний через 80 ч.With such a ratio of ingredients on the test medium, the colonies of B. ovis began to form after 30 hours, on meat-peptone agar after 60 hours, and on Albimi agar there was no growth when seeding 10 mc, and when sowing 100 mc less than 2% of colonies grew after 80 h.
Пример 2. Культуры выращивали на питательной среде плотной для культивирования возбудителя инфекционного эпидидимита баранов В. ovis, содержащая следующие ингредиенты в следующих количествах на 1 л среды: мясная вода - 250,0 мл; печеночный отвар - 500,0 мл; пептон сухой ферментативный - 10,0 г; натрий хлористый - 5,0 г; натрий углекислый кислый 10% раствор - 17,0 мл; глюкоза - 0,06 г; глицерин - 0,02 г; агар микробиологический - 15,0 г; метабисульфит натрия - 0,3 г; сыворотка крови крупного рогатого скота - 0,2 мл; агар микробиологический - 15,0 г; питьевая вода остальное.Example 2. Cultures were grown on nutrient medium dense for the cultivation of the causative agent of infectious epididymitis of rams B. ovis, containing the following ingredients in the following amounts per 1 l of medium: meat water - 250.0 ml; liver decoction - 500.0 ml; peptone dry enzymatic - 10.0 g; sodium chloride - 5.0 g; sodium carbonic acid 10% solution - 17.0 ml; glucose - 0.06 g; glycerin - 0.02 g; microbiological agar - 15.0 g; sodium metabisulfite - 0.3 g; bovine blood serum - 0.2 ml; microbiological agar - 15.0 g; drinking water else.
При таком соотношении ингредиентов на испытуемой среде колонии В. ovis начинали формироваться через 24 часа, на мясопептонном агаре через 48 ч, а на агаре Альбими рост отсутствовал при посеве 10 м.к., а при посеве 100 м.к. вырастало менее 20% колоний через 72 ч.With this ratio of ingredients on the test medium, the colonies of B. ovis began to form after 24 hours, on meat-peptone agar after 48 hours, and on Albimi agar there was no growth when sowing 10 mc, and when sowing 100 mc less than 20% of colonies grew after 72 h.
Пример 3. Культуры выращивали на питательной среде плотной для культивирования возбудителя инфекционного эпидидимита баранов В. ovis, содержащая следующие ингредиенты в следующих количествах на 1 л среды: мясная вода - 350,0 мл; печеночный отвар - 600,0 мл; пептон сухой ферментативный - 12,0 г; натрий хлористый - 6,0 г; натрий углекислый кислый 10% раствор - 19,0 мл; глюкоза - 0.09 г; глицерин - 0.03 г; метабисульфит натрия - 0,4 г; сыворотка крупного рогатого скота - 0,3 мл; агар микробиологический - 17,0 г; питьевая вода остальное.Example 3. Cultures were grown on nutrient medium dense for the cultivation of the pathogen of infectious epididymitis of rams B. ovis, containing the following ingredients in the following amounts per 1 l of medium: meat water - 350.0 ml; liver decoction - 600.0 ml; enzymatic dry peptone - 12.0 g; sodium chloride - 6.0 g; sodium carbonic acid 10% solution - 19.0 ml; glucose - 0.09 g; glycerin - 0.03 g; sodium metabisulfite - 0.4 g; bovine serum - 0.3 ml; microbiological agar - 17.0 g; drinking water else.
При таком соотношении ингредиентов на испытуемой среде колонии В. ovis начинали формироваться через 29 часа, на мясопептонном агаре через 55 ч, а на агаре Альбими рост отсутствовал при посеве 10 м.к., а при посеве 100 м.к. вырастало менее 2% колоний через 85 ч.With such a ratio of ingredients on the test medium, colonies of B. ovis began to form after 29 hours, on meat-peptone agar after 55 hours, and on Albimi agar there was no growth when sowing 10 mc, and when sowing 100 mc less than 2% of colonies grew after 85 h.
Таким образом заявленная питательная среда плотная для культивирования возбудителя инфекционного эпидидимита баранов В. ovis (пример №2) является оптимальной по количеству подобранных ингредиентов, что позволяет получить достаточное количество колоний максимально в ранние сроки через 24±1.Thus, the stated nutrient medium is dense for the cultivation of the pathogen of infectious epididymitis of rams B. ovis (Example No. 2) is optimal in terms of the number of selected ingredients, which makes it possible to obtain a sufficient number of colonies as early as possible within 24 ± 1.
Claims (2)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017122868A RU2687364C2 (en) | 2017-06-28 | 2017-06-28 | DENSE NUTRIENT MEDIUM FOR CULTIVATION OF INFECTIOUS EPIDIDYMITIS AGENT OF RAMS B.ovis |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2017122868A RU2687364C2 (en) | 2017-06-28 | 2017-06-28 | DENSE NUTRIENT MEDIUM FOR CULTIVATION OF INFECTIOUS EPIDIDYMITIS AGENT OF RAMS B.ovis |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2017122868A RU2017122868A (en) | 2018-12-28 |
| RU2017122868A3 RU2017122868A3 (en) | 2018-12-28 |
| RU2687364C2 true RU2687364C2 (en) | 2019-05-13 |
Family
ID=64977444
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2017122868A RU2687364C2 (en) | 2017-06-28 | 2017-06-28 | DENSE NUTRIENT MEDIUM FOR CULTIVATION OF INFECTIOUS EPIDIDYMITIS AGENT OF RAMS B.ovis |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2687364C2 (en) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU523932A1 (en) * | 1974-04-24 | 1976-08-05 | Казахский Научно-Исследовательский Ветеринарный Институт | Nutrient medium for growing brucella species ois |
| RU2238973C1 (en) * | 2003-03-24 | 2004-10-27 | Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт | Liquid nutrient medium for culturing brucella |
| RU2299238C2 (en) * | 2005-07-22 | 2007-05-20 | Федеральное государственное учреждение здравоохранения Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт Федерального агентства по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия населения | Nutrient medium for brucella culturing |
-
2017
- 2017-06-28 RU RU2017122868A patent/RU2687364C2/en not_active IP Right Cessation
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SU523932A1 (en) * | 1974-04-24 | 1976-08-05 | Казахский Научно-Исследовательский Ветеринарный Институт | Nutrient medium for growing brucella species ois |
| RU2238973C1 (en) * | 2003-03-24 | 2004-10-27 | Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт | Liquid nutrient medium for culturing brucella |
| RU2299238C2 (en) * | 2005-07-22 | 2007-05-20 | Федеральное государственное учреждение здравоохранения Ставропольский научно-исследовательский противочумный институт Федерального агентства по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия населения | Nutrient medium for brucella culturing |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| МУ 3.1.7.1189-03. Профилактика инфекционных болезней. Инфекции, общие для человека и животных. 2003, Роспотребнадзор, с. 8-25. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2017122868A (en) | 2018-12-28 |
| RU2017122868A3 (en) | 2018-12-28 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN103622125B (en) | A kind of ginseng drink and preparation method thereof | |
| RU2412240C1 (en) | Culture medium for growing legionella | |
| RU2681285C1 (en) | Nutrient medium for cultivation of brucella neotomae species cultivation | |
| RU2687364C2 (en) | DENSE NUTRIENT MEDIUM FOR CULTIVATION OF INFECTIOUS EPIDIDYMITIS AGENT OF RAMS B.ovis | |
| RU2626568C1 (en) | Dense nutrient medium for cultivation and collection of biomass of plague microbe of ypestis ev vaccine strain | |
| RU2688335C1 (en) | Dense nutrient medium for cultivation of brucellosis agent | |
| RU2415923C1 (en) | Method for production of fermentative hydrolysate of fresh white cabbage and nutritive medium for cultivation lactobacteria based thereon | |
| RU2529364C1 (en) | Biphasic transport nutrient medium for isolation and growing brucellar microbe | |
| RU2435842C1 (en) | Transport nutrient medium (liquid) for cultivation of brucellous microbe | |
| RU2748808C1 (en) | Dense universal nutrient medium for growing brucella biomass | |
| RU2681499C1 (en) | Nutrient medium on basis of secondary product of beef hydrolyzate for cultivation of microorganisms | |
| RU2702174C1 (en) | Dense nutrient medium for cultivation and collection of biomass of vaccine strain of plague microbe yersinia pestis ev | |
| RU2648153C1 (en) | Solid nutrient medium cultivation of a plague microbe | |
| RU2299238C2 (en) | Nutrient medium for brucella culturing | |
| RU2460774C1 (en) | Nutrient medium for legionella cultivation | |
| RU2394905C1 (en) | Nutrient medium for cultivation of plague microbe | |
| RU2644248C2 (en) | Dense nutrient medium for cultivation and growing of tularemic microbe | |
| Al-Azzauy et al. | The beetroot juice as a bacterial growth and maintenance medium for many pathogenic bacteria | |
| RU2764139C1 (en) | Dense nutrient medium with kombucha hydrolysate, stimulating the accumulation of bacterial mass of brucella | |
| RU2333948C2 (en) | Nutritional medium for growing causative agent of tularemia | |
| RU2415922C1 (en) | Nutrient medium for lactic acid bacilli cultivation | |
| RU2425871C1 (en) | Nutrient medium for legionella cultivation | |
| RU2392310C2 (en) | Enrichment medium for excretion of cholera vibrio | |
| RU2708029C1 (en) | Nutrient medium for cultivation of yersinia pestis ev | |
| RU2725733C1 (en) | Transport liquid nutrient medium for maintaining the viability of the brucellous microbe |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20190629 |