RU2332454C2 - Способ получения и контроля пробиотических препаратов - Google Patents
Способ получения и контроля пробиотических препаратов Download PDFInfo
- Publication number
- RU2332454C2 RU2332454C2 RU2006121988/13A RU2006121988A RU2332454C2 RU 2332454 C2 RU2332454 C2 RU 2332454C2 RU 2006121988/13 A RU2006121988/13 A RU 2006121988/13A RU 2006121988 A RU2006121988 A RU 2006121988A RU 2332454 C2 RU2332454 C2 RU 2332454C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- medium
- yeast
- casein
- bifidobacteria
- seeding
- Prior art date
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано в производстве пробиотических препаратов на основе лакто- и бифидобактерий. Способ включает последовательные 3-кратные посевы бактерий на питательную среду при приготовлении маточной культуры, реакторное накопление биомассы бактерий и определение биологических параметров готового препарата. В качестве питательной среды используют казеиново-дрожжевую среду, содержащую 20-25% дрожжевого аутолизата и 10-15% казеинового гидролизата. При приготовлении маточной культуры бактерий 1-й и 3-й посев на казеиново-дрожжевую среду чередуют с посевом на другую питательную среду - МРС-1 для лактобактерий и модифицированную печеночную среду для бифидобактерий. Изобретение обеспечивает снижение затрат, унификацию питательных сред на этапах изготовления и контроля препаратов, а также снижение расхода полуфабрикатов при приготовлении казеиново-дрожжевой среды.
Description
Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано в производстве пробиотических препаратов на основе лакто- и бифидобактерий.
Известно, что в производстве пробиотических препаратов на основе лакто- и бифидобактерий (лактобактерин, бифидумбактерин, ацилакт, бифилиз, бифидин и др.) используют разнообразные питательные среды, наборы которых для каждого препарата отличаются между собой. Для приготовления маточных культур бактерий реакторного культивирования и контроля препаратов применяют печеночную, гидролизатно-молочную, дрожже-молочную и др. среды (см. патенты РФ №2072856, №2087532, №2160594).
Недостатком такого способа является необходимость приготовления большого количества полуфабрикатов для питательных сред, что повышает себестоимость и увеличивает трудоемкость процесса изготовления препарата.
Наиболее близким к предлагаемому изобретению является способ получения и контроля бифидосодержащих пробиотиков, предусматривающий использование модифицированной среды Блаурокка для трех пассажей при приготовлении маточной культуры производственного штамма В. bifidum 1, культивирование бифидобактерий в реакторе типа «Биор» на казеиново-дрожжевой среде и определение биологических параметров готового продукта путем подсчета общей концентрации клеток по оптической плотности суспензии и количества жизнеспособных клеток КОЕ/мл в модифицированной среде Блаурокка, активности кислотообразования (см. ДЕМЕШЕВА М.И. и др. Биотехнологические аспекты производства бифидосодержащих пробиотиков. Пробиотики, пребиотики, синбиотики и функциональные продукты питания. Современное состояние и перспективы. Сборник материалов международной конференции, М., 1-4 июня 2004, с.183-184).
Для достижения указанного технического результата предлагается в способе получения и контроля пробиотических препаратов на основе лакто- или бифидобактерий, включающем последовательные посевы бактерий на питательную среду при приготовлении маточной культуры, реакторное накопление биомассы бактерий и определение биологических параметров готового препарата, в качестве питательной среды использовать казеиново-дрожжевую среду, содержащую 20-25% дрожжевого аутолизата и 10-15% казеинового гидролизата от всего объема среды, при этом при приготовлении маточной культуры бактерий посев на казеиново-дрожжевую среду предлагается чередовать с посевом на другую питательную среду, например МРС-1 (Фармакопейная статья ФС 42-0054-00 "Лактобактерин сухой") для лактобактерий и модифицированную печеночную среду Блаурокка (Фармакопейная статья ФС 42-3947-00 "Бифидумбактерин сухой") для бифидобактерий.
Отличительными признаками предложенного способа получения и контроля пробиотических препаратов являются: использование в качестве питательной среды казеиново-дрожжевой среды, содержащей 20-25% дрожжевого аутолизата и 10-15% казеинового гидролизата от всего объема среды, при этом при приготовлении маточной культуры бактерий посев на казеиново-дрожжевую среду чередуют с посевом на другую питательную среду, например МРС-1 для лактобактерий и модифицированную печеночную среду Блаурокка для бифидобактерий.
Предлагаемый способ получения и контроля пробиотических препаратов на основе лакто- или бифидобактерий осуществляют следующим образом.
Производят последовательно посев бактерий на питательную среду при приготовлении маточной культуры, реакторное накопление биомассы бактерий и определение биологических параметров готовых препаратов. В качестве питательной среды на всех этапах используют казеиново-дрожжевую среду, содержащую 20-25% дрожжевого аутолизата и 10-15% казеинового гидролизата от всего объема среды. На этапе приготовления маточной культуры, включающей не менее 3-х посевов (пробирка-флакон-бутыль) казеиново-дрожжевую среду используют для 1-го и 3-го посевов. Посев на казеиново-дрожжевую среду чередуют с посевом на другую питательную среду, например МРС-1 для лактобактерий и модифицированную печеночную среду Блаурокка для бифидобактерий. При этом удельный вес казеиново-дрожжевой среды в общем расходе питательных сред на данном этапе составляет не менее 90%. Полученную бактериальную культуру используют в качестве инокулята для реакторного культивирования клеток в казеиново-дрожжевой среде. После завершения производственного накопления биомассы клеток бактериальную взвесь стабилизируют высушиванием.
В готовом препарате с помощью казеиново-дрожжевых сред определяют содержание жизнеспособных клеток и активность кислотообразования. Казеиново-дрожжевые среды обладают высокой эффективностью и чувствительностью, что является предпосылкой для применения этих сред на всех этапах получения и контроля пробиотических препаратов. Снижение содержания в их составе казеинового гидролизата (до 10-15%) и дрожжевого аутолизата (до 20-25%) не приводит к ухудшению указанных биологических параметров казеиново-дрожжевых сред, что позволяет использовать их в производстве пробиотиков. При приготовлении маточной культуры производственного штамма бактерий пассирование на одной питательной среде уступает, как правило, по эффективности чередованию посевов на разные питательные среды. Смена питательных сред способствует более высокому накоплению жизнеспособных клеток в последующем посеве при стационарном культивировании. Этим обусловлена предлагаемая частичная, а не полная замена применяемых питательных сред на казеиново-дрожжевые при приготовлении маточной культуры бактерий в производстве пробиотических препаратов.
Пример 1. Получение и контроль бифидумбактерина.
Из 33 л казеинового гидролизата и 44 л дрожжевого аутолизата готовят 220 л казеино-дрожжевой среды, в том числе 19 л для приготовления маточной культуры бифидобактерий штамма Bifidobacterium bifidum 1, 200 л для реакторного культивирования бифидобактерий и 1 л для контроля сухого препарата бифидобактерий. При приготовлении маточной культуры производят три последовательных посева бифидобактерий с использованием казеиново-дрожжевой среды (1-й и 3-й посевы) и среды Блаурокка (2-й посев), вся культура предыдущего посева является при этом инокулятом для последующего посева. Полученную маточную культуру бифидобактерий в количестве 20 л загружают в реактор, содержащий 200 л казеиново-дрожжевой среды, и проводят процесс культивирования в течение 20±4 ч при температуре 38°С. Полученную бактериальную взвесь, содержащую не менее 108 КОЕ/мл, смешивают с защитной средой, разливают во флаконы и подвергают лиофилизации. В готовом препарате с помощью казеиново-дрожжевой среды по стандартным методикам (Фармакопейная статья ФС 42-3947-00 "Бифидумбактерин сухой") определяют содержание жизнеспособных клеток, количество которых составляет не менее 107 КОЕ/ доза, а также активность кислотообразования, уровень которого составляет не менее 100°Т.
Пример 2. Получение и контроль лактобактерина.
Из 45 л дрожжевого аутолизата и 18 л казеинового гидролизата готовят 180 л казеиново-дрожжевой среды, в том числе 19 л для приготовления маточной культуры лактобактерий штамма Lactobacillus plantarum 8P-A3, 160 л для реакторного культивирования лактобактерий и 1 л для контроля сухого лактобактерина. При приготовлении маточной культуры производят три последовательных посева лактобактерий с использованием казеиново-дрожжевой среды (1-й и 3-й посев) и среды МРС-1 (2-й посев). Полученную маточную культуру лактобактерий в количестве 20 л загружают в реактор, содержащий 160 л казеиново-дрожжевой среды, и проводят процесс культивирования в течение 9±1 ч при температуре 37°С. Полученную бактериальную взвесь, содержащую не менее 1010 КОЕ/мл, смешивают с защитной средой, разливают во флаконы и подвергают лиофилизации. В готовом препарате с помощью казеиново-дрожжевой среды по стандартным методикам (Фармакопейная статья ФС 42-0054-00 "Лактобактерин сухой") определяют содержание жизнеспособных клеток, количество которых составляют не менее 109 КОЕ/доза, а также активность кислотообразования, уровень которого составляет не менее 220°Т.
Claims (1)
- Способ получения и контроля пробиотических препаратов на основе лакто- или бифидобактерий, включающий последовательные 3-кратные посевы бактерий на питательную среду при приготовлении маточной культуры, реакторное накопление биомассы бактерий на казеиново-дрожжевой среде и определение биологических параметров готового препарата, отличающийся тем, что используют казеиново-дрожжевую среду, содержащую 20-25% дрожжевого аутолизата и 10-15% казеинового гидролизата от объема среды, причем при приготовлении маточной культуры 1-й и 3-й посев на казеиново-дрожжевую среду чередуют с посевом на другую питательную среду - МРС-1 для лактобактерий и модифицированную печеночную среду Блаурокка для бифидобактерий, а при определении биологических параметров готового продукта используют казеиново-дрожжевую среду.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2006121988/13A RU2332454C2 (ru) | 2006-06-21 | 2006-06-21 | Способ получения и контроля пробиотических препаратов |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2006121988/13A RU2332454C2 (ru) | 2006-06-21 | 2006-06-21 | Способ получения и контроля пробиотических препаратов |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2006121988A RU2006121988A (ru) | 2008-01-10 |
| RU2332454C2 true RU2332454C2 (ru) | 2008-08-27 |
Family
ID=39019636
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2006121988/13A RU2332454C2 (ru) | 2006-06-21 | 2006-06-21 | Способ получения и контроля пробиотических препаратов |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2332454C2 (ru) |
-
2006
- 2006-06-21 RU RU2006121988/13A patent/RU2332454C2/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Демешбеа М.И. и др. Биотехнологические аспекты производства бифидосодержащих пробиотиков. Пробиотики, пребиотики, синбиотики и функциональные продукты питания. Современное состояние и перспективы. Сборник материалов международной конференции. - М., 2-4 июня 2004, с.163, 164. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RU2006121988A (ru) | 2008-01-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Lacroix et al. | Fermentation technologies for the production of probiotics with high viability and functionality | |
| Kedia et al. | Use of mixed cultures for the fermentation of cereal-based substrates with potential probiotic properties | |
| Yao et al. | Pantothenic acid, vitamin C, and biotin play important roles in the growth of Lactobacillus helveticus | |
| Kudra et al. | Thermal processing of bio-materials | |
| CN110643673B (zh) | 一种饲用复合微生态产品中凝结芽孢杆菌芽孢的计数方法 | |
| CN103937708B (zh) | 鼠李糖乳杆菌及其应用 | |
| US11981890B2 (en) | Method for preparing cultures of lactic acid bacteria | |
| CN100368519C (zh) | 黑曲霉脂肪酶及其用途 | |
| EP1891436B1 (en) | Quantification of the viability of lactic acid bacteria using flow cytometry | |
| CN109161496A (zh) | 鼠李糖乳杆菌高密度菌液及其包埋菌粉的制备方法 | |
| CN110004088A (zh) | 一种筛选适宜乳杆菌增殖的氮源的方法 | |
| TW201300526A (zh) | 培養基之製造方法及該方法所製造之培養基 | |
| CA2781516C (en) | Culture medium for specific growth, detection, and enumeration of bifidobacterium breve | |
| CN103958664A (zh) | 用于提高杆状细菌的生存力的手段和方法 | |
| CN105454422A (zh) | 一种新型开菲尔发酵剂的制备方法及应用 | |
| CN108642041A (zh) | 一种提高重组大肠杆菌发酵生产l-丙氨酸能力的方法 | |
| RU2332454C2 (ru) | Способ получения и контроля пробиотических препаратов | |
| Zhang et al. | Optimization of Culture Medium for using Box-Behnken Design | |
| CN116855387A (zh) | 一种高产菌体蛋白文氏镰刀真菌突变株及其应用 | |
| CN115537364A (zh) | 一种鼠李糖乳杆菌jl1高密度发酵的方法 | |
| EP4140311A1 (en) | Method to produce a non-kefir grain based synthetic kefir-like fermented product and method for kefir-grain free cultivation of kefir microorganism cultures | |
| Sochocka et al. | The kinetics of Escherichia coli B growth and bacteriophage T4 multiplication in SM-1 novel minimal culture medium | |
| CN103497988B (zh) | 一种安全高效乳酸菌产品的发酵生产方法 | |
| RU2678123C1 (ru) | Питательная среда для восстановления численности анаэробных бактерий после низкотемпературного хранения | |
| Самуйленко | Microorganisms and their consortiums used in the technology of national types of bread from rye flour |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20080622 |
|
| PC43 | Official registration of the transfer of the exclusive right without contract for inventions |
Effective date: 20180716 |
|
| PD4A | Correction of name of patent owner |