RU2302876C1 - Способ выделения натриевой соли днк из тканей животного происхождения - Google Patents
Способ выделения натриевой соли днк из тканей животного происхождения Download PDFInfo
- Publication number
- RU2302876C1 RU2302876C1 RU2005132525/15A RU2005132525A RU2302876C1 RU 2302876 C1 RU2302876 C1 RU 2302876C1 RU 2005132525/15 A RU2005132525/15 A RU 2005132525/15A RU 2005132525 A RU2005132525 A RU 2005132525A RU 2302876 C1 RU2302876 C1 RU 2302876C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- temperature
- extract
- sodium salt
- precipitate
- extraction
- Prior art date
Links
Landscapes
- Saccharide Compounds (AREA)
Abstract
Изобретение относится к получению биологически активных веществ и может быть использовано в медицинской и пищевой промышленности. Предлагаемым изобретением решаются задачи снижения трудоемкости, упрощения технологии, увеличения выхода конечного продукта. Отличительной особенностью предлагаемого способа выделения натриевой соли ДНК из тканей животного происхождения, является то, что размораживание сырья ведут при температуре плюс 25±5°С в асептических условиях, экстракцию проводят в 10% растворе натрия хлорида, взятого из расчета 3 л раствора на 1,5±0,1 кг сырья в реакторе при температуре плюс 95-98°С при перемешивании и сохранении постоянного объема жидкости, фильтрацию экстракта проводят со скоростью не более 0,5 л/мин, осадок, содержащий натриевую соль ДНК, получают путем добавления к экстракту этилового спирта из расчета 4 л на 1 кг сырья, смесь перемешивают и оставляют на 20-25 часов при температуре плюс 2-10°С, надосадочную жидкость декантируют, осадок отделяют центрифугированием и высушивают. Способ обеспечивает снижение трудоемкости, упрощение технологии, увеличение выхода целевого продукта. 1 з.п. ф-лы.
Description
Изобретение относится к получению биологически активных веществ и может быть использовано в медицинской и пищевой промышленности.
Наиболее близким техническим решением к предлагаемому способу является способ выделения натриевой соли ДНК из тканей животного происхождения, включающий размораживание сырья, экстракцию, фильтрацию экстракта, отделение и сушку осадка, при этом используется стерилизующая установка с фильтрами «Миллипор», ультрафильтрационная установка на полых волокнах. (Патент РФ №2139068 опубл. 10.10.99.)
Стерилизующая фильтрация требует использования дорогих стерилизующих и фильтрующих импортных пластин. Концентрация стерильного фильтрата в 6 раз по объему требует использования полуволоконных разделительных аппаратов, ультрафильтрационной установки. По этой технологии при добавлении спирта в соотношении 1:2 не обеспечивается полное осаждение целевого продукта в связи с его большой концентрацией.
Недостатком его является трудоемкость, длительность процесса, низкая производительность, необходимость использовать дорогостоящее оборудование и материалы, большие потери.
Предлагаемым изобретением решается задача снижение трудоемкости, упрощение технологии, увеличение выхода продукта.
Для решения поставленной задачи производят размораживание сырья, экстракцию, фильтрацию экстракта, отделение и сушку осадка, при этом размораживание ведут при температуре 25±5°С в асептических условиях, экстракцию проводят в 10% растворе натрия хлорида, взятого из расчета 3 л раствора на 1,5±0,1 кг сырья, в реакторе при температуре 95-98°С при перемешивании и сохранении постоянного объема жидкости, фильтрацию экстракта проводят со скоростью не более 0,5 л/мин, осадок, содержащий натриевую соль ДНК, получают путем добавления к экстракту этилового спирта из расчета 4 л на 1 кг сырья, смесь перемешивают и оставляют на 20-25 часов при температуре 2-10°С, надосадочную жидкость декантируют, осадок отделяют центрифугированием и высушивают.
Отличительными признаками предлагаемого решения от известного является то, что размораживание ведут при температуре 25±5°С в асептических условиях, экстракцию проводят в 10% растворе натрия хлорида, взятого из расчета 3 л раствора на 1,5±0,1 кг сырья в реакторе при температуре 95-98°С при перемешивании и сохранении постоянного объема жидкости, фильтрацию экстракта проводят со скоростью не более 0,5 л/мин, осадок, содержащий натриевую соль ДНК, получают путем добавления к экстракту этилового спирта из расчета 4 л на 1 кг сырья, смесь перемешивают и оставляют на 20-25 часов при температуре 2-10°С, надосадочную жидкость декантируют, осадок отделяют центрифугированием и высушивают.
Сущность предлагаемого способа заключается в следующем. Измельченное сырье (семенники крупного или мелкого рогатого скота, или жмых из него, или молоки лососевых), упакованное в чистые полиэтиленовые мешки (по 1 кг), хранят в морозильной камере при температуре (минус 18÷20°С) не более 6 месяцев. Перед экстракцией сырье вынимают из камеры и размораживают при температуре 25±5°С в асептических условиях (обеспечивающих микробиологическую чистоту продукта), чтобы не загрязнить исходное сырье на начальном этапе. Размораживание при температуре 25±5°С обеспечивает стабильность качества препарата от серии к серии и его свойств. Это является следствием условий осуществления этапа криодеструкции. Размороженное сырье переносят в реактор с 10% раствором натрия хлорида из расчета 3 л раствора на 1,5±0,1 кг сырья. Экстракцию проводят в реакторе при температуре 95÷98°С при перемешивании и сохранении постоянного объема жидкости путем добавления в реактор воды очищенной по мере ее испарения. Продолжительность экстракции 2÷2,5 часа. Использование температуры 95÷98°С позволяет ускорить процесс обменной реакции (соли с кислотой NaCl + ДНК) и увеличить количество прореагированных участков ДНК т.е. выход продукта Na - соль ДНК. При температуре 95÷98°С идет выкипание воды. Чтобы создать условия для стабильной реакции, воду подливают до постоянного уровня. Горячий экстракт из реактора сразу после окончания этапа экстракции подают по шлангам на тканевые стерильные хлопчатобумажные фильтры, например, миткалевые. Фильтрацию экстракта проводят со скоростью не более 0,5 л/мин. Фильтрация экстракта со скоростью не более 0,5 л/мин позволяет создать оптимальные условия отделения раствора, содержащего натриевую соль ДНК, от нерастворимых примесей (ткани семенников). Стерильные емкости с профильтрованным экстрактом герметично укупоривают и хранят до стадии осаждения (не более 20 часов) при температуре 2÷10°С в защищенном от света месте.
В камере "фриго" или в помещении с температурой окружающей среды 2÷10°С экстракт из бутылей сливают в реактор или в бак, объем которого превышает общий объем экстракта в 4 раза. К экстракту приливают этиловый спирт или подвергнутый регенерации использованный спирт (декантат) из расчета 4 л на 1 кг сырья. Смесь тщательно перемешивают и оставляют на 20÷25 часов при температуре 2÷10°С для формирования осадка. Добавление к полученному экстракту этилового спирта из расчета 4 л на 1 кг сырья обеспечивает оптимальный выход продукта в виде осадка. Этого количества спирта достаточно для осаждения всех присутствующих молекул натриевой соли ДНК из неконцентрированного экстракта. Перемешивание смеси и отстаивание в течение 20÷25 часов при температуре 2÷10°С обеспечивает выпадение в осадок оптимального количества целевого продукта. Надосадочную жидкость (смесь этилового спирта с солевым раствором) декантируют. Осадок, содержащий натриевую соль ДНК, с небольшим количеством надо-садочной жидкости подвергают центрифугированию. Центрифугирование обеспечивает максимальное отделение осадка от центрифугата. После этого осадок, находящийся в центрифужных стаканах, промывают один раз этиловым спиртом в количестве 600 мл. Фильтрат, представляющий собой смесь этилового спирта, воды и натрия хлорида с небольшой примесью белков, подвергают регенерации для повторного использования. Промытый осадок в асептических условиях вынимают из центрифужных стаканов стерильной лопаткой и раскладывают тонким слоем (не более 0,5 см), закрывают стерильной салфеткой и высушивают при температуре 65±5°С. Высушивание при температуре 65±5°С обеспечивает получение асептического продукта. Продолжительность высушивания определяется влажностью осадка, которая не должна превышать 10%. Высушенный осадок в асептических условиях размалывают на мельнице до мелкодисперсного состояния. Размер частиц не должен превышать 0,3 мм. Порошок, содержащий натриевую соль ДНК, выгружают из мельницы в контейнеры и направляют на производство, например таблеток или драже. До использования субстанцию хранят при температуре 2÷10°С в сухом защищенном от света месте не более 6 месяцев.
Пример.
Взято 15 кг сырья (жмых семенников полученных при производстве препарата лидаза), 30 л 10% водного раствора натрия. Получено 34 л экстракта. Использовано 60 л этилового спирта. Получено 102 л центрифугата и декантата (смесь этилового спирта с раствором натрия хлорида) и сырой осадок содержащий натриевую соль ДНК. После сушки осадка получено 250 г сухого порошка, содержащего натриевую соль ДНК. Контроль качества показал, что по показателям микробиологической чистоты и содержанию натриевой соли ДНК полученный порошок соответствует ТУ 9370-002-04862997-03. Декантат и центрифугат, содержащий смесь этилового спирта с раствором натрия хлорида, подвергают регенерации для повторного использования в техпроцессе.
Таким образом, предлагаемый способ упрощает технологию, снижает трудоемкость, увеличивает выход продукта, снижает его стоимость.
Claims (2)
1. Способ выделения натриевой соли ДНК из тканей животного происхождения, включающий размораживание сырья, экстракцию, фильтрацию экстракта, отделение и сушку осадка, отличающийся тем, что размораживание ведут при температуре 25±5°С в условиях, обеспечивающих микробиологическую чистоту продукта, экстракцию проводят 2-2,5 ч в растворе натрия хлорида взятого из расчета 3 л раствора на 1,5±0,1 кг сырья, в реакторе при температуре 95-98°С при перемешивании и сохранении постоянного объема жидкости, фильтрацию экстракта проводят со скоростью не более 0,5 л/мин, осадок, содержащий натриевую соль ДНК, получают путем добавления к экстракту этилового спирта из расчета 4 л на 1 кг сырья, смесь перемешивают и оставляют на 20-25 ч при температуре 2-10°С, надосадочную жидкость декантируют, осадок отделяют центрифугированием и высушивают при 65±5°С до достижения влажности не выше 10%, порошок измельчают до размера частиц не выше 0,3 мм.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что для повторного использования в качестве спирта используют регенерированный декантат.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2005132525/15A RU2302876C1 (ru) | 2005-10-21 | 2005-10-21 | Способ выделения натриевой соли днк из тканей животного происхождения |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2005132525/15A RU2302876C1 (ru) | 2005-10-21 | 2005-10-21 | Способ выделения натриевой соли днк из тканей животного происхождения |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2302876C1 true RU2302876C1 (ru) | 2007-07-20 |
Family
ID=38431019
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2005132525/15A RU2302876C1 (ru) | 2005-10-21 | 2005-10-21 | Способ выделения натриевой соли днк из тканей животного происхождения |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2302876C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2673802C1 (ru) * | 2018-02-13 | 2018-11-30 | Общество с ограниченной ответственностью "Фармацевтический завод иммунных лекарственных средств" | Способ производства стерильной фармацевтической субстанции |
-
2005
- 2005-10-21 RU RU2005132525/15A patent/RU2302876C1/ru active
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2673802C1 (ru) * | 2018-02-13 | 2018-11-30 | Общество с ограниченной ответственностью "Фармацевтический завод иммунных лекарственных средств" | Способ производства стерильной фармацевтической субстанции |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
RU2198548C1 (ru) | Способ получения экстракта из растения stevia rebaudiana bertoni | |
JP2007137890A5 (ru) | ||
CN104151424B (zh) | 一种藻蓝蛋白的提取方法 | |
CA2909226A1 (en) | Purification of beta-hydroxy-beta-methyl butyrate via recrystallization and organic extraction | |
CN109627269A (zh) | 一种提取n-乙酰神经氨酸的方法 | |
CN104557729B (zh) | 一种四氢嘧啶的提取工艺 | |
CN102070727A (zh) | 一种肝素钠的提取方法 | |
PL244350B1 (pl) | Sposób otrzymywania hialuronidazy ze zwierzęcych jąder oraz produkt otrzymany tym sposobem | |
CN101333245B (zh) | 一种人血白蛋白的分离方法 | |
RU2302876C1 (ru) | Способ выделения натриевой соли днк из тканей животного происхождения | |
CN100467061C (zh) | 一种鱿鱼墨汁多糖的制备方法 | |
CN106366159A (zh) | 一种肌肽的提取纯化方法 | |
RU2712094C1 (ru) | Способ получения очищенного инулина из растительного сырья | |
US11499051B2 (en) | Process for extraction and isolation of biochemical constituents from algae | |
CN113201522B (zh) | 一种蛋白酶的精制和干燥方法 | |
RU2305548C1 (ru) | Способ комплексной переработки плоских морских ежей | |
RU2309759C1 (ru) | Способ получения апирогенного иммуномодулятора | |
RU2298939C2 (ru) | Способ выделения белков из клеток костного мозга | |
CN109867603B (zh) | 一种菊苣酸的纯化方法 | |
RU2055837C1 (ru) | Способ получения стерильного раствора натриевой соли дезоксирибонуклеиновой кислоты | |
CN106883286B (zh) | 一种酪氨酸衍生物的提取纯化方法 | |
RU2657499C1 (ru) | Способ получения меланина из лузги подсолнечника | |
RU2414914C1 (ru) | Средство для поддерживающей терапии и способ его получения из лиофилизированной икры морских ежей | |
RU2236853C1 (ru) | Способ производства иммунотропного стерильного апирогенного толерантного препарата на основе натриевой соли низкомолекулярной нативной дезоксирибонуклеиновой кислоты | |
RU2189990C1 (ru) | Способ получения высокоочищенного агара и агарозы из красной водоросли анфельции тобучинской |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PC43 | Official registration of the transfer of the exclusive right without contract for inventions |
Effective date: 20180716 |
|
PD4A | Correction of name of patent owner |