CN104151424B - 一种藻蓝蛋白的提取方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种藻蓝蛋白的提取方法，属于生物医药技术领域。为了解决现有的破壁周期长和对环境污染大的问题，提供一种藻蓝蛋白的提取方法，该方法包括将含有藻蓝蛋白的鲜藻或经过预浸泡的藻粉加入‑50℃～‑10℃的冰粉中，将搅拌速度控制在1000r/min～3000r/min的条件下进行破壁处理，得到含有藻蓝蛋白的破壁液；再将得到的含有藻蓝蛋白的破壁液进行分离、纯化和干燥，得到成品藻蓝蛋白。本发明的方法具有破壁周期短和长环境友好的优点，且得到的产品纯度高。

Description

一种藻蓝蛋白的提取方法

技术领域

本发明涉及一种藻蓝蛋白的提取方法，属于生物医药技术领域。

背景技术

藻蓝蛋白是从含藻胆体的藻类细胞中提取，是蓝藻中仅有的捕光色素蛋白，是非常少见的天然蓝色色素和营养素，具有独特的药用功效和荧光性质。其中以螺旋藻为代表的蓝藻中具有丰富的藻蓝蛋白，并具有安全性和高消化吸收率，经中国卫生部和美国食品药品管理局认证螺旋藻完全无毒副作用，是安全的植物药品及保健品。

然而，现有的细胞破碎法有自然溶胀法、反复冻融法、超声波法和酶解法。自然溶胀法一般需要10到20天，且破壁效率不高，容易导致微生物大量繁殖腐败，生产过程难以控制。反复冻融法一般需要三次以上才能达到有效破壁，且每次冻融需要3到5天，整个破壁流程需要9到15天以上，且能耗巨大。超声波法需要在低浓度的藻细胞溶液中有效，高浓度的藻液中超声难以传播，低浓度的藻溶液给后续的干燥带来困难，而且超声波容易导致蛋白质变性失活，产品收率低。酶解法使用的破壁酶价格昂贵，且市场不能持续稳定供应，对体系的温度和PH值要求严格。原有公布的纯化方法有硫酸铵沉淀法，双水相法，色谱柱层析法等。硫酸铵沉淀和双水相法，使用大量的化工原料硫酸盐和聚乙二醇类，给环境造成污染。而且产品中硫酸铵的残留难以全部清除。色谱层析法，需要消耗大量昂贵的填料耗材，且设备难以放大，层析速度慢。如中国专利申请(CN103304068A)公开了一种藻蓝蛋白的制备方法，以鲜藻或螺旋藻粉为原料，加入去离子水，混匀，然后置于-20℃～-10℃冰冻，冻结后，取出置35℃融溶，冻融3～4次，用120目纱布过滤，离心分离，得上清液，纯度为1.0左右，再进行双水相萃取、超滤分离纯化，冷冻干燥，得到藻蓝蛋白。其采用反复冻融法存在生产周期长的问题，而采用双水相法对环境的污染较大。

发明内容

本发明针对以上现有技术中存在的问题，提供一种藻蓝蛋白的提取方法，具有提取效率和破壁率高且对环境污染少的效果。

本发明的目的是通过以下技术方案得以实现的，一种藻蓝蛋白的提取方法，该方法包括以下步骤：

A、破壁：将含有藻蓝蛋白的鲜藻或经过预浸泡的藻粉加入-50℃～-10℃的冰粉中，将搅拌速度控制在1000r/min～3000r/min的条件下进行破壁处理，得到含有藻蓝蛋白的破壁液；

B、将得到的含有藻蓝蛋白的破壁液进行分离、纯化和干燥，得到成品藻蓝蛋白。

上述藻蓝蛋白的提取方法中，所述的分离可以采用本领域常规的方法，如采用沉淀法分离或离心分离方法等。作为优选，步骤B中所述分离具体为：

将采用医用脱脂棉制成的棉柱插入上述步骤A中得到的含有藻蓝蛋白的破壁液中使藻蓝蛋白吸附在棉柱上，分离棉柱上的蓝色部分，采用挤压和水进行冲洗，得到含藻蓝蛋白的水溶液。采用本发明的分离方法不仅能够提高产品的纯度，且对环境友好，无需采用硫酸铵等化学试剂。当然，采用本发明的分离方法，而采用本领域常规的破壁方法如反复冻融法、超声波破壁法，同样能够实现提高产品纯度的效果。

上述藻蓝蛋白的提取方法中，作为优选，步骤B中所述纯化和干燥具体为：

将得到的含藻蓝蛋白的水溶液采用超滤膜进行过滤和浓缩，得到含藻蓝蛋白的浓缩液；再将含藻蓝蛋白的浓缩液进行干燥，得到成品藻蓝蛋白。

本发明的藻蓝蛋白的提取方法，通过在高速碾磨搅拌条件下，依靠冰粉和含有藻蓝蛋白的藻细胞之间产生的摩擦力和剪切力，使达到细胞破壁的作用，从而实现使藻蓝蛋白从细胞内流出的效果，而对于分离、纯化和干燥采用本领域常规的方法即可实现。但为了更好的实现本发明，通过将采用医用脱脂棉制成的棉柱插入上述含有藻蓝蛋白的破壁液中，使棉柱高度的大部分在液面以上，而仅使棉柱高度的小部分插入液面以下，使能够实现更有效的分离。如使棉柱的高度的2/3～3/4保持在液面以上，而棉柱的高度和宽度可以根据实际需要进行调整即可，最好使棉柱的高度大于棉柱的宽度。又由于藻蓝蛋白具有高度亲水性，而水能够不断的被棉柱吸附到液面以上，随着水在棉柱上不断的扩散和蒸发，藻蓝蛋白也被不断的提取到棉柱上，并且吸附在棉纤维(脱脂棉)上。当棉柱上的脱脂棉充分吸水后，取走液面以上脱脂棉蓝色的部分，并且可以填充新的脱脂棉，直至破壁液被吸干。而另一方面，由于破壁液中大量的不溶解的细胞碎片不能随水分子扩散，被滞留在容器底部，而叶绿素和胡萝卜素等色素是脂溶性的，也不能随水分子扩散，被滞留在容器底部，藻多糖和核糖核酸等细胞内物质由于亲水性和水溶解度不如藻蓝蛋白，则在棉纤维上的扩散相对较慢，滞留在棉柱的下部。经检测该提取液的纯度能够达到A620nm/A280nm>1.0，远远超过食品行业普遍使用的A620nm/A280nm>0.7的要求。

在上述的藻蓝蛋白的提取方法中，所述含藻蓝蛋白的藻粉可以是螺旋藻、鱼腥藻或水华蓝藻等。作为优选，所述含藻蓝蛋白的藻粉选自螺旋藻。由于螺旋藻的形态是螺旋状的结构，在高速搅拌的条件下，冻粉与螺旋藻之间具有更好的摩擦力和剪切力，从而实现更好的破壁效果，破壁率能够达到95％以上。

在上述的藻蓝蛋白的提取方法中，作为优选，所述步骤A中所述的冰粉采用0.5～1.0mol/L的氯化钠水溶液制成。通过在水中加入氯化钠再制成相应的冰粉，能够提高冰粉的硬度，提高冰粉与含有藻蓝蛋白的藻细胞之间的摩擦和剪切效果。

在上述的藻蓝蛋白的提取方法中，步骤A中所述破壁处理过程中最好使体系温度保温在0℃以下进行。通过控制体系的温度在0℃以下，能够使加入的冰粉不易于融化，更有利于达到破壁效果。当然也可以在室温条件下进行，但由于室温下冰粉容易融化，所以，在破壁处理过程中如果冰粉融化过多，则可以通过补加冰粉再搅拌来达到破壁效果。作为优选，步骤A中所述破壁处理过程中体系温度控制在-10℃以下，更优选，所述破壁处理过程中体系温度控制在0℃～-20℃之间。

在上述的藻蓝蛋白的提取方法中，作为优选，步骤B中所述棉柱的高度的2/3保持在液面以上。使棉柱的高度的2/3保持在液面以上，能够更有效的分离出藻蓝蛋白，而使叶绿素、藻多糖和核糖核酸等细胞内物质等亲水性和水溶解度相对弱的杂质残留在底部，进一步的提高藻蓝蛋白的纯度。所述棉柱可以采用不锈钢滤网进行固定。

在上述的藻蓝蛋白的提取方法中，作为优选，所述纯化具体为：

将得到的含藻蓝蛋白的水溶液先采用分子量为50万～150万道尔顿的超滤膜进行过滤，然后，再采用分子量为20万～40万道尔顿的超滤膜进行过滤和浓缩，得到含藻蓝蛋白的浓缩液。

由于藻蓝蛋白分子间通过氢键交联结合，实际上其在水溶液中往往容易形成三聚体、六聚体等多聚体大分子蛋白，其聚合物分子量可达到30万道尔顿以上，因此，通过采用分子量为50万～150万道尔顿的超滤膜过滤，目的是为了充分高效的实现藻蓝蛋白和其他生物大分子杂质以及细胞碎片的分离，并且获得较大的藻蓝蛋白回收率，同时,还能够除去细菌等微生物，实现无需采用高温灭菌的优点。而采用分子量为20万～40万道尔顿的超滤膜能够更多的去除小分子杂质、重金属、无机盐等，同时达到浓缩的效果。

在上述的藻蓝蛋白的提取方法中，作为优选，步骤A中所述藻粉与冰粉的质量比1：10～20。

在上述的藻蓝蛋白的提取方法中，作为优选，步骤A中所述的冰粉的温度为-30℃～-20℃。

在上述的藻蓝蛋白的提取方法中，作为优选，步骤A中所述冰粉的平均粒径为20～60目。

综上所述，本发明与现有技术相比具有以下优点：

1.本发明藻蓝蛋白的提取方法，通过在高速搅拌的条件下，使冰粉与藻粉之间形成摩擦力和剪切力，无需采用反复冰融法，就能够实现破壁效果，而且周期短，大大的提高了生产效率。

2.本发明的藻蓝蛋白的提取方法，通过采用棉柱进行分离，能够有效的分离出藻蓝蛋白，且具有纯度高的效果，经过该步分离得到的藻蓝蛋白的纯度就能够达到A620nm/A280nm>1.0的效果。省去了传统的过滤除渣环节，实现了无需采用双水相法萃取，具有对环境友好的优点，且得到的产品无硫酸盐和有机溶剂的残留。

3.本发明的藻蓝蛋白的提取方法，通过先采用50万～150万道尔顿的超滤膜过滤，实现脱除大分子生物杂质和实现除菌的效果。

具体实施方式

下面通过具体实施例，对本发明的技术方案作进一步具体的说明，但是本发明并不限于这些实施例。

本发明的藻蓝蛋白的提取方法，通过将含有藻蓝蛋白的鲜藻或经过预浸泡的藻粉加入-50℃～-10℃的冰粉中，优选为-30℃～-20℃，将搅拌速度控制在1000r/min～3000r/min的条件下并控制体系温度在0℃以下保温进行破壁处理，破壁处理结束后，使体系内的冰粉自然融化，得到含有藻蓝蛋白的破壁液，经过检测，藻细胞的破壁率达到95％以上；再将得到的含有藻蓝蛋白的破壁液进行分离、纯化和干燥，得到成品藻蓝蛋白。作为优选，所述的冰粉是采用0.5～1.0mol/L的氯化钠水溶液制成；作为优选，所述含藻蓝蛋白的藻粉可以是螺旋藻、鱼腥藻或水华蓝。通过在水中加入氯化钠再制成相应的冰粉，能够提高冰粉的硬度，提高冰粉与含有藻蓝蛋白的藻细胞之间的摩擦和剪切效果，更好的实现破壁效果；所述冰冰粉的平均粒径最好为20～60目。上述所述的分离、纯化和干燥采用本领域常规的方法即可，如采用离心法进行分离得到上清液，再采用双水相萃取法、硫酸铵沉淀法纯化和色谱纯化法等，再进行冷冻干燥后，得到相应的成品藻蓝蛋白。

作为另一种实施方式，采用本领域常规的方法(如反复冻融法)将新鲜的含藻蓝蛋白的藻泥或藻粉(藻粉最好预先经过浸泡处理)进行破壁处理，得到相应的含有藻蓝蛋白的破壁液，然后，将采用医用脱脂棉制成的棉柱插入上述含有藻蓝蛋白的破壁液中使藻蓝蛋白吸附在棉柱上，分离棉柱上的蓝色部分，采用挤压和水进行冲洗，得到含藻蓝蛋白的水溶液，经检测该含藻蓝蛋白的水溶液的纯度能够达到A620nm/A280nm>1.0，将得到的含藻蓝蛋白的水溶液采用超滤膜进行过滤和浓缩，得到含藻蓝蛋白的浓缩液，再将含藻蓝蛋白的浓缩液进行干燥，得到成品藻蓝蛋白。

实施例1

取新鲜的螺旋藻藻泥，称重，再按照藻泥与冰粉的重量比为1：10的比例加入-10℃的冰粉，冰粉的粒径为40～20目，将上述的螺旋藻藻泥和冰粉一起加入搅拌罐内，将搅拌速度控制在1000r/min的条件下并控制体系温度在0℃以下保温进行破壁处理80min，破壁处理结束后，使体系内的冰粉自然融化，得到含有藻蓝蛋白的破壁液，经过检测，藻细胞的破壁率达到95％以上；

将采用医用脱脂棉制成的棉柱插入上述含有藻蓝蛋白的破壁液中使藻蓝蛋白吸附在棉柱上，所述医用脱脂棉可以采用不锈钢滤网进行固定，棉柱的高度可以根据实际需要进行调整，同时，使棉柱的高度的2/3保持在液面以上，直到破壁液被棉柱吸干，取出棉柱的蓝色部分的脱脂棉(吸附藻蓝蛋白的部分)，由于藻蓝蛋白为蓝色的物质，易于分离，通过挤压和采用水进行冲洗，直至蓝色的脱脂棉被冲洗至白色为止，分离出棉柱上的藻蓝蛋白，得到含藻蓝蛋白的水溶液；经检测本步藻蓝蛋白的纯度A620nm/A280nm>1.0；

将得到的含藻蓝蛋白的水溶液采用超滤膜进行过滤和浓缩，得到含藻蓝蛋白的浓缩液；

将含藻蓝蛋白的浓缩液进行冷冻干燥，所述冷冻干燥采用常规的方法即可，得到成品藻蓝蛋白，经检测，产品纯度A620nm/A280nm>2.0,完全能够达到医用级别。

实施例2

取螺旋藻的藻粉，称重，最好将上述藻粉与水按1：3的重量比预浸泡处理。再按照藻粉与冰粉的重量比为1：20的比例加入-50℃的冰粉，冰粉的粒径为40～20目，将上述预浸泡好的螺旋藻的藻粉和冰粉一起加入搅拌罐内，将搅拌速度控制在3000r/min的条件下并控制体系温度在-10℃以下保温进行破壁处理70分钟，破壁处理结束后，使体系内的冰粉自然融化，得到含有藻蓝蛋白的破壁液，经过检测，藻细胞的破壁率达到95％以上；

将采用医用脱脂棉制成的棉柱插入上述含有藻蓝蛋白的破壁液中使藻蓝蛋白吸附在棉柱上，所述医用脱脂棉可以采用不锈钢滤网进行固定，棉柱的高度可以根据实际需要进行调整，同时，使棉柱的高度的2/3保持在液面以上，直到破壁液被棉柱吸干，取出棉柱的蓝色部分的脱脂棉(吸附藻蓝蛋白的部分)，由于藻蓝蛋白为蓝色的物质，易于分离，通过挤压和采用水进行冲洗，直至蓝色的脱脂棉被冲洗至白色为止，分离出棉柱上的藻蓝蛋白，得到含藻蓝蛋白的水溶液；经检测本步藻蓝蛋白的纯度A620nm/A280nm>1.0；

将得到的含藻蓝蛋白的水溶液先采用分子量为50万道尔顿的超滤膜进行过滤，然后，再采用分子量为20万道尔顿的超滤膜进行过滤和浓缩，得到含藻蓝蛋白的浓缩液；

将含藻蓝蛋白的浓缩液进行冷冻干燥，所述冷冻干燥采用常规的方法即可，得到成品藻蓝蛋白，经检测，纯度A620nm/A280nm>2.0,完全能够达到医用级别。

实施例3

取水华蓝藻的藻粉，最好将上述水华蓝藻的藻粉与水按1：3的重量比例预浸泡处理。称重，再按照藻粉与冰粉的重量比为1：15的比例加入-30℃的冰粉，冰粉的粒径为40～20目，将上述的水华蓝藻的藻粉和冰粉一起加入搅拌罐内，将搅拌速度控制在2000r/min的条件下并控制体系温度在0℃～-20℃之间保温进行破壁处理90min，破壁处理结束后，使体系内的冰粉自然融化，得到含有藻蓝蛋白的破壁液，经过检测，藻细胞的破壁率达到95％以上；

将采用医用脱脂棉制成的棉柱插入上述含有藻蓝蛋白的破壁液中使藻蓝蛋白吸附在棉柱上，所述医用脱脂棉可以采用不锈钢滤网进行固定，棉柱的高度可以根据实际需要进行调整，同时，使棉柱的高度的2/3保持在液面以上，直到破壁液被棉柱吸干，取出棉柱的蓝色部分的脱脂棉(吸附藻蓝蛋白的部分)，由于藻蓝蛋白为蓝色的物质，易于分离，通过挤压和采用水进行冲洗，直至蓝色的脱脂棉被冲洗至白色止，分离出棉柱上的藻蓝蛋白，得到含藻蓝蛋白的水溶液；经检测本步藻蓝蛋白的纯度A620nm/A280nm>1.0；

将得到的含藻蓝蛋白的水溶液先采用分子量为100万道尔顿的超滤膜进行过滤，然后，再采用分子量为20万万道尔顿的超滤膜进行过滤和浓缩，得到含藻蓝蛋白的浓缩液；

将含藻蓝蛋白的浓缩液进行冷冻干燥，所述冷冻干燥采用常规的方法即可，得到成品藻蓝蛋白，经检测，纯度A620nm/A280nm>2.0,完全能够达到医用级别。

实施例4

取新鲜的鱼腥藻的藻泥，称重，再按照藻泥与冰粉的重量比为1：20的比例加入-40℃的冰粉，冰粉的粒径为40～20目，所述的冰粉是采用0.5～1.0mol/L的氯化钠水溶液制成，将上述的鱼腥藻的藻泥和冰粉一起加入搅拌罐内，将搅拌速度控制在2500r/min的条件下并控制体系温度在-5℃以下保温进行破壁处理80min，破壁处理结束后，使体系内的冰粉自然融化，得到含有藻蓝蛋白的破壁液，经过检测，藻细胞的破壁率达到95％以上；当然也可以是室温下进行破壁处理，破壁处理过程中如果冰粉融化过多，则可以通过补加冰粉后再进行破壁处理来达到破壁效果。

将采用医用脱脂棉制成的棉柱插入上述含有藻蓝蛋白的破壁液中使藻蓝蛋白吸附在棉柱上，所述医用脱脂棉可以采用不锈钢滤网进行固定，棉柱的高度可以根据实际需要进行调整，同时，使棉柱高度的3/4保持在液面以上，直到破壁液被棉柱吸干，取出棉柱的蓝色部分的脱脂棉(吸附藻蓝蛋白的部分)，由于藻蓝蛋白为蓝色的物质，易于分离，通过挤压和采用水进行冲洗，直至蓝色的脱脂棉被冲洗至白色为止，分离出棉柱上的藻蓝蛋白，得到含藻蓝蛋白的水溶液；经检测本步藻蓝蛋白的纯度A620nm/A280nm>1.0；

将得到的含藻蓝蛋白的水溶液先采用分子量为150万道尔顿的超滤膜进行过滤，然后，再采用分子量为40万道尔顿的超滤膜进行过滤，得到含藻蓝蛋白的过滤液和浓缩液。

将含藻蓝蛋白的浓缩液进行冷冻干燥，所述冷冻干燥采用常规的方法即可，得到成品藻蓝蛋白，经检测，纯度A620nm/A280nm>2.0,完全能够达到医用级别。

实施例5

取螺旋藻的藻粉，称重，再按照藻粉与冰粉的重量比为1：20的比例加入-50℃的冰粉，冰粉的粒径为40～20目，所述的冰粉是采用0.5～1.0mol/L的氯化钠水溶液制成，最好将上述的藻粉预先经过浸泡处理，将上述的螺旋藻的藻粉和冰粉一起加入搅拌罐内，将搅拌速度控制在3000r/min的条件下并控制体系温度在-15℃以下保温进行破壁处理60min，破壁处理结束后，使体系内的冰粉自然融化，得到含有藻蓝蛋白的破壁液，经过检测，藻细胞的破壁率达到95％以上；相比较与实施例2可以看了，本实施例中通过采用0.5～1.0mol/L的氯化钠水溶液制成的冰粉，破壁处理速度更快，破壁效率得到较大的提高；

将采用医用脱脂棉制成的棉柱插入上述含有藻蓝蛋白的破壁液中使藻蓝蛋白吸附在棉柱上，所述医用脱脂棉可以采用不锈钢滤网进行固定，棉柱的高度可以根据实际需要进行调整，同时，使棉柱的高度的2/3保持在液面以上，直到破壁液被棉柱吸干，取出棉柱的蓝色部分的脱脂棉(吸附藻蓝蛋白的部分)，由于藻蓝蛋白为蓝色的物质，易于分离，通过挤压和采用水进行冲洗，直至蓝色的脱脂棉被冲洗至白色为止，分离出棉柱上的藻蓝蛋白，得到含藻蓝蛋白的水溶液；经检测本步藻蓝蛋白的纯度A620nm/A280nm>1.0；

将得到的含藻蓝蛋白的水溶液先采用分子量为100万道尔顿的超滤膜进行过滤，然后，再采用分子量为30万道尔顿的超滤膜进行过滤和浓缩，得到含藻蓝蛋白的浓缩液；

将含藻蓝蛋白的浓缩液进行冷冻干燥，所述冷冻干燥采用常规的方法即可，得到成品藻蓝蛋白，经检测，纯度A620nm/A280nm>2.0,完全能够达到医用级别。

本发明中所描述的具体实施例仅是对本发明精神作举例说明。本发明所属技术领域的技术人员可以对所描述的具体实施例做各种各样的修改或补充或采用类似的方式替代，但并不会偏离本发明的精神或者超越所附权利要求书所定义的范围。

尽管对本发明已作出了详细的说明并引证了一些具体实施

例，但是对本领域熟练技术人员来说，只要不离开本发明的精神和范围可作各种变化或修正是显然的。

Claims (8)

1.一种藻蓝蛋白的提取方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

A、破壁：将含有藻蓝蛋白的鲜藻或经过预浸泡的藻粉加入-50℃～-10℃的冰粉中，将搅拌速度控制在1000r/min～3000r/min的条件下进行破壁处理，得到含有藻蓝蛋白的破壁液；

B、将得到的含有藻蓝蛋白的破壁液进行分离、纯化和干燥，得到成品藻蓝蛋白；所述分离具体为：

将采用医用脱脂棉制成的棉柱插入上述步骤A中得到的含有藻蓝蛋白的破壁液中使藻蓝蛋白吸附在棉柱上，分离棉柱上的蓝色部分，采用挤压和水进行冲洗，得到含藻蓝蛋白的水溶液；所述棉柱的高度的2/3保持在液面以上。

2.根据权利要求1所述藻蓝蛋白的提取方法，其特征在于，步骤B中所述纯化和干燥具体为：

将得到的含藻蓝蛋白的水溶液采用超滤膜进行过滤和浓缩，得到含藻蓝蛋白的浓缩液；再将含藻蓝蛋白的浓缩液进行干燥，得到成品藻蓝蛋白。

3.根据权利要求1所述藻蓝蛋白的提取方法，其特征在于，所述含藻蓝蛋白的藻粉选自螺旋藻、鱼腥藻或水华蓝藻。

4.根据权利要求1-3任意一项所述的藻蓝蛋白的提取方法，其特征在于，步骤A中所述的冰粉采用0.5～1.0mol/L的氯化钠水溶液制成。

5.根据权利要求1所述藻蓝蛋白的提取方法，其特征在于，步骤B所述纯化具体为：

将得到的含藻蓝蛋白的水溶液先采用分子量为50万～150万道尔顿的超滤膜进行过滤，然后，再采用分子量为20万～40万道尔顿的超滤膜进行过滤和浓缩，得到含藻蓝蛋白的浓缩液。

6.根据权利要求1-3任意一项所述藻蓝蛋白的提取方法，其特征在于，步骤A中所述藻粉与冰粉的质量比1：10～20。

7.根据权利要求1所述藻蓝蛋白的提取方法，其特征在于，步骤A中所述冰粉的温度为-30℃～-20℃。

8.根据权利要求1所述藻蓝蛋白的提取方法，其特征在于，步骤A中所述的冰粉颗粒的大小为20目～60目。