RU2246537C2 - Штамм бактерий bacillus subtilis, используемый для получения пробиотического препарата, предназначенного для профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний сельскохозяйственных животных, птицы и рыбы - Google Patents
Штамм бактерий bacillus subtilis, используемый для получения пробиотического препарата, предназначенного для профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний сельскохозяйственных животных, птицы и рыбы Download PDFInfo
- Publication number
- RU2246537C2 RU2246537C2 RU2002129937/13A RU2002129937A RU2246537C2 RU 2246537 C2 RU2246537 C2 RU 2246537C2 RU 2002129937/13 A RU2002129937/13 A RU 2002129937/13A RU 2002129937 A RU2002129937 A RU 2002129937A RU 2246537 C2 RU2246537 C2 RU 2246537C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- strain
- bacillus subtilis
- preparation
- treatment
- fish
- Prior art date
Links
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Fodder In General (AREA)
Abstract
Изобретение относится к биотехнологии, ветеринарии и может быть использовано для получения препарата из группы пробиотиков. Штамм бактерий Bacillus subtilis BKM В-2287 выделен из почвы. Клетки грамположительны, капсулы не образуют, образуют круглые споры, тип дыхания - аэробный. Гидролизует глюкозу, маннит, лактозу. Не сбраживает сахарозу, инозит, сорбит, мальтозу. Не образует газа при сбраживании. Подавляет рост стафилококков, кишечной палочки, энтеробактерий, цитробактерий, аэромонас. Штамм используют как производственный для получения пробиотического препарата, названного авторами "Субтилис+". Препарат нормализует деятельность желудочно-кишечного тракта сельскохозяйственных животных, птицы, рыбы; перспективен в лечении и профилактике бактериальных инфекций. 1 табл.
Description
Изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано в микробиологической промышленности для получения пробиотического препарата, применяемого в ветеринарии при лечении и профилактике желудочно-кишечных заболеваний животных, птицы и рыб.
Известен штамм Bacillus subtilis 534 - продуцент пробиотика “Споробактерин”, который предназначен для профилактики и лечения желудочно-кишечного тракта, дисбактериозов. SU 1708350, кл. А 61 К 35/66.
Недостатком является небольшие сроки хранения, т.к. содержит живые бактерии, которые не могут длительное время сохранять свои свойства, низкая чистота препарата, что имеет узкую область применения - как кормовая добавка для животных. Штамм также чувствителен к антибиотикам за исключением полимиксина, что ограничивает сферу применения препарата.
Известен штамм Bacillus subtilis 3Н (ГИСК №248), несущий свойство антибиотикорезистентности, используемый для получения пробиотического препарата “Бактиспорин”, который применяют совместно с антибиотиками для лечения и профилактики дисбактериоза, ферментной недостаточности органов пищеварения, гнойных инфекций, пищевой аллергии. RU 2067616 С1, кл. А 61 К 35/74, 10.10.1996.
Известен штамм Bacillus subtilis TPAXC-KM-117, проявляющий ингибирующую активность по отношению к патогенным видам микроорганизмов и обладающий множественной лекарственной устойчивостью. Штамм резистентен к тетратциклину, рифампицину, аленициллину, хлорамфениколу, апректомицину. На его основе готовят антибиотикорезистентный пробиотик для лечения и профилактики инфекционных заболеваний при одноименной антибиотикотерапии (RU 2118364 С1, кл. С 12 N 1/20, 27.08.1988).
Известен штамм Bacillus subtilis ВКМ B-2250 (RU №2184774, кл. А 61 К 35/74, 10.07.02), который является основой препарата для ветеринарных целей и рыбного хозяйства.
Задачей, на решение которой направлено изобретение, является выявление нового эффективного штамма-продуцента пробиотического препарата для ветеринарных целей и рыбного хозяйства.
Технический результат, достигаемый при осуществлении изобретения, заключается в повышении эффективности лечения, увеличения усвояемости кормов, продуктивности и привесов животных, птицы, рыб за счет использования пробиотического препарата на основе предложенного штамма-продуцента, стабильности препарата при хранении в широком диапазоне температур внешней среды.
Штамм Bacillus subtilis Б-9 выделен из почвы, депонирован во Всероссийской коллекции микроорганизмов (ИБФМ им. К.Г.Скрябина) под номером ВКМ В-2287.
Штамм Bacillus subtilis ВКМ В-2287 может храниться в лиофилизированном состоянии в течение нескольких лет или на косяках с агаризованной средой на основе мясопептонного бульона с обязательным пересевом не реже 1 раза в 2 месяца на эту же среду.
Характеристики штамма.
Культурально-морфологические признаки. Палочки. Размер односуточной агаровой культуры 3-5 мкм. Клетки окрашиваются положительно по Грамму, образуют круглые споры, одиночные, центральные диаметры меньше диаметра клетки. Колонии на МПА белые, пигмент в среду не выделяют.
Физиологические признаки. Аэроб, оптимальная температура роста 37° С и рН 3,5-8,0. Возможен рост в диапазоне температур 4-50° С. Отношение к NaCl - рост при содержании до 3%.
Биохимические признаки. Расщепляет глюкозу, лактозу, маннит. Несбраживаемые соединения углерода: сахароза, инозит, сорбит, мальтоза, лактоза. Утилизирует цитрат и ацетат. При сбраживании не образует газа. Продуцирует оксидазу, каталазу.
Антагонистические признаки. Штамм Bacillus subtilis BKM В-2287 подавляет рост стафилококков, протея, клебсиелл, кишечной палочки, энтеробактерий, цитробактерий, аэромонас, дрожжевых грибов.
Штамм Bacillus subtilis BKM В-2287 не является патогенным для растений, животных, рыбы и человека.
Данные таблицы 1 показывают антагонистическую активность тестовых штаммов микроорганизмов (метод отсроченного антагонизма).
Для культивирования штамма Bacillus subtilis BKM В-2287 используют жидкую питательную среду, содержащую гидролизат казеина - 5 см3· дм-3 (NaM =300 мг%); кукурузный экстракт - 80 см3· дм-3 (Naм=290 мг %), MnSO4 5Н2О - 0,250 г-дм-3; MgSO47H2O - 0,300 г-дм-3; FeSO4 7H2О - 0,015 г-дм-3; CaCl2 2Н2О - 0,052 г-дм-3; NaCl - 11,000 г-дм-3, дистиллированную воду.
Предварительно сухую биомассу микроорганизмов высевают в пробирку с бульоном. При появлении видимого роста колонии пересевают на мясопептонный агар в пробирки.
Отбирают типичные колонии, которые пересевают на жидкую среду во флаконах. Через 22 часа всю выросшую массу переносят в 20-литровую бутыль с 10-ю литрами питательной среды и культивируют 26 часов при 37-39° С, получая посевной материал.
Питательную среду на основе гидролизата казеина помещают в биологический реактор, стерилизуют 60 мин при 1 атм, охлаждают до 39° С и засевают посевным материалом из бутыли в соотношении 1:9.
В процессе аэробного культивирования рН среды поддерживают в пределах (6,8-7,2) ед. рН, подпитывая среду (10-15)% -ной глюкозой до конечной концентрации (0,1-0,2)%. При достижении биологической концентрации по БК (15-20) 109 кл.см-3 и (8-10) 109 кл.см-3 по БKt прекращают добавление глюкозы до снижения рН 4,0 и отключают подачу воздуха. Затем отключают обогрев реактора, среду охлаждают до (15-19)° С. Полученную охлажденную культуру перекачивают в емкости или расфасовывают во флаконы.
При указанном способе культивирования получают пробиотический препарат в виде жидкой формы с содержанием (80-95)% спор и живых вегетативных клеток бактерий штамма Bacillus subtilis ВКМ В-2287.
Предложенный пробиотический препарат безвреден, не содержит посторонней микрофлоры. Безвредность проверена на белых мышах массой тела (18-20) г, которым перорально вводили препарат в объеме 1,0 мл.
Препарат обладает специфической активностью: количество клеток в одной дозе препарата (8-20)109 кл.см-3, антагонистическая активность - зона задержки роста тестовых микроорганизмов составляет от 10 до 38 мм.
Таким образом, предлагаемый штамм Bacillus subtilis ВКМ В-2287 может быть использован как производственный для получения препарата пробиотического действия, рекомендуемого для профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний животных, птицы, рыбы.
Авторы просят назвать пробиотический препарат, получаемый на основе предложенного штамма, “Субтилис+”.
Изобретение поясняется примерами.
Пример 1. Испытания предложенного пробиотического препарата на новорожденных телятах и поросятах.
Эффективность препарата на основе предложенного штамма Bacillus subtilis ВКМ В-2287 была испытана на новорожденных телятах и поросятах с диагнозом диарея, протекавшей на фоне сложной эпизоотической обстановки в хозяйстве. Контрольные группы телят и поросят содержались согласно принятой в хозяйстве технологии. Телятам и поросятам опытных групп дополнительно задавали препарат на основе предложенного штамма Bacillus subtilis BKM В-2287 перорально с небольшим количеством воды за 20 минут до кормления в разовой дозе на голову по 15 мл телятам и по 20 мл поросятам три раза в сутки в течение трех суток. Наблюдения показали, что в опытных группах через сутки после дачи препарата улучшилось общее состояние всех животных, диарея прекратилась, а еще через двое суток все животные были практически здоровы. Состояние животных в контрольных группах характеризовалось продолжением состояния диареи, падеж составил 10% у телят и 22% у поросят.
Пример 2. Добавление пробиотического препарата “Субтилис+” в корм аквариумных рыб.
Проводилось кормление подрощенной молоди золотых рыб (оранда) экструдированным кормом с добавлением пробиотического препарата “Субтилис+”. Количество корма составляло 10 кг, добавленного пробиотика 1 мл. Количество рыб в опытной и контрольной группах составляло по 250 экз. Кормление осуществляли 4-6 раз в сутки. Корм поедался охотно. Темп роста молоди в опытной группе по сравнению с контрольной составил 22%. Выход рыб в опытной - 98%, в контрольной - 78%. Вода в аквариумах не портилась, мутность отсутствовала.
Пример 3. Сохранность цыплят в первые недели.
Проведены испытания “Субтилис+” на цыплятах бройлерной птицефабрики (по 5 птичников в опытной и в контрольной группах). Отход цыплят контрольной группы, не получавших пробиотик, составил 4%, опытных - 0,2%. В опытных группах цыплята более интенсивно набирали вес. После первых трех дней средний вес цыпленка в контрольной группе равнялся 61 г, в опытной - 70 г.
Проведенные испытания показали эффективность препарата “Субтилис+”, получаемого на основе предложенного штамма Bacillus subtilis BKM В-2287.
| Таблица 1 | |
| Спектр антагонистической активности штамма Bacillus subtilis BKM В-2287. | |
| Тест культуры | Зоны торможения роста, мм |
| Salmonella veslaco 247/49 | 26-30 |
| Staphylococcus aureus 209 | 27-33 |
| S. aureus 1023 | 24-35 |
| P. aerugenosa 4141 | 5-7 |
| P. vulgaris 72 | 16-19 |
| Klebsiella pneumoniae T-24 | 13-16 |
| Escherechia coli 157 | 33-38 |
| Candida tropicalis | 26-30 |
| C. albicans | 23-28 |
Claims (1)
- Штамм бактерий Bacillus subtilis BKM В-2287, используемый для получения пробиотического препарата, предназначенного для профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний животных, птицы и рыбы.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2002129937/13A RU2246537C2 (ru) | 2002-11-11 | 2002-11-11 | Штамм бактерий bacillus subtilis, используемый для получения пробиотического препарата, предназначенного для профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний сельскохозяйственных животных, птицы и рыбы |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2002129937/13A RU2246537C2 (ru) | 2002-11-11 | 2002-11-11 | Штамм бактерий bacillus subtilis, используемый для получения пробиотического препарата, предназначенного для профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний сельскохозяйственных животных, птицы и рыбы |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2002129937A RU2002129937A (ru) | 2004-05-27 |
| RU2246537C2 true RU2246537C2 (ru) | 2005-02-20 |
Family
ID=35218944
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2002129937/13A RU2246537C2 (ru) | 2002-11-11 | 2002-11-11 | Штамм бактерий bacillus subtilis, используемый для получения пробиотического препарата, предназначенного для профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний сельскохозяйственных животных, птицы и рыбы |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2246537C2 (ru) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2642320C2 (ru) * | 2012-12-12 | 2018-01-24 | Лезафр Э Компани | Пробиотические штаммы для лечения и/или профилактики диареи |
| RU2804275C1 (ru) * | 2023-01-09 | 2023-09-26 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Алтайский государственный университет" | Штамм бактерий Bacillus mojavensis RCAM05965, обладающий антагонистической активностью по отношению к Candida albicans, Serratia marcescens, Escherichia coli и перспективный для производства пробиотика для человека и/или животных |
-
2002
- 2002-11-11 RU RU2002129937/13A patent/RU2246537C2/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| БАКУЛИНА Л.Ф. и др. Пробиотики на основе спорообразующих микроорганизмов рода Bacillus и их использование в ветеринарии. Биотехнология. №2, 2001, с.48-56. * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| RU2642320C2 (ru) * | 2012-12-12 | 2018-01-24 | Лезафр Э Компани | Пробиотические штаммы для лечения и/или профилактики диареи |
| RU2804275C1 (ru) * | 2023-01-09 | 2023-09-26 | федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Алтайский государственный университет" | Штамм бактерий Bacillus mojavensis RCAM05965, обладающий антагонистической активностью по отношению к Candida albicans, Serratia marcescens, Escherichia coli и перспективный для производства пробиотика для человека и/или животных |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR20010031131A (ko) | 돼지의 경쟁적 독점 배양 | |
| CN103045498B (zh) | 解淀粉芽孢杆菌及其用途 | |
| CN114134083B (zh) | 一种贝莱斯芽孢杆菌及应用 | |
| KR20080050506A (ko) | 동물용 사료 첨가제 | |
| JPH08502019A (ja) | サルモネラ菌抑制のためのプロバイオテック | |
| LT6270B (lt) | Probiotiniai fermentuoti pašarų priedai | |
| KR101735574B1 (ko) | 가금류용 유산균 발효 조성물 및 이의 제조방법 | |
| JP5025177B2 (ja) | 動物用飼料添加剤 | |
| KR100287825B1 (ko) | 가축용 복합 미생물 제제 | |
| RU2398872C1 (ru) | ШТАММ БАКТЕРИЙ Bacillus licheniformis, ИСПОЛЬЗУЕМЫЙ ДЛЯ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОБИОТИЧЕСКОЙ КОРМОВОЙ ДОБАВКИ, ПРЕДНАЗНАЧЕННОЙ ДЛЯ ПРОИЗВОДСТВА ВЫСОКОКАЧЕСТВЕННЫХ КОРМОВ, ПОВЫШАЮЩИХ ПРОДУКТИВНОСТЬ И СНИЖАЮЩИХ РИСК ЖЕЛУДОЧНО-КИШЕЧНЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ ЖИВОТНЫХ, ПТИЦЫ И РЫБ | |
| CN112741210A (zh) | 提高动物机体免疫功能的生物制剂及制备方法 | |
| CN112226389A (zh) | 一种三黄肉雏鸡肠道益生菌群的定植培养方法及其应用 | |
| CN114891705B (zh) | 一种产酸的民猪源罗伊氏乳杆菌及其培养方法与应用 | |
| KR100371503B1 (ko) | 양식어류의 사료첨가제용 미생물 제제 및 그 제조방법 | |
| CN110904013A (zh) | 一种次枯草芽孢杆菌菌株及其应用 | |
| KR20170142635A (ko) | 알파글루코시다아제 저해제를 다량 생산하는 바실러스 리케니포르미스 ny1505 균주 | |
| RU2246537C2 (ru) | Штамм бактерий bacillus subtilis, используемый для получения пробиотического препарата, предназначенного для профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний сельскохозяйственных животных, птицы и рыбы | |
| RU2184774C1 (ru) | Штамм бактерий bacillus subtilis, используемый для получения пробиотического препарата, предназначенного для профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний животных, птицы и рыбы | |
| RU2203947C1 (ru) | Штамм бактерий bacillus licheniformis, используемый для получения пробиотического препарата, предназначенного для профилактики и лечения желудочно-кишечных заболеваний животных, птицы и рыбы | |
| Chobchuenchom et al. | Isolation and characterization of pathogens attacking Pomacea canaliculata | |
| US8414878B2 (en) | Irilis biopreparation based on bacillus-strain bacteria, bacillus subtilis and bacillus licheniformis contained therein | |
| Manguntungi et al. | The profile analysis of lactic acid bacteria (LAB) from Sumbawa white honey and its potential producing antibacterial compounds | |
| KR20210076221A (ko) | 페디오코커스 펜토사세우스 kcc-45 및 이를 포함하는 조성물 | |
| CN115595284B (zh) | 一株植物乳杆菌y1和巴氏毕赤酵母y2及其益生菌制剂和应用 | |
| RU2678978C2 (ru) | Способ получения жидкого пробиотического препарата |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20051112 |
|
| NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20071210 |
|
| PC4A | Invention patent assignment |
Effective date: 20071220 |
|
| PC4A | Invention patent assignment |
Effective date: 20090805 |
|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20111112 |