RU2238713C2 - Biologically active additive for cosmetic products and a method for preparation thereof - Google Patents

Biologically active additive for cosmetic products and a method for preparation thereof Download PDF

Info

Publication number
RU2238713C2
RU2238713C2 RU2001114305A RU2001114305A RU2238713C2 RU 2238713 C2 RU2238713 C2 RU 2238713C2 RU 2001114305 A RU2001114305 A RU 2001114305A RU 2001114305 A RU2001114305 A RU 2001114305A RU 2238713 C2 RU2238713 C2 RU 2238713C2
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
biologically active
leech
additive
medical
cosmetics
Prior art date
Application number
RU2001114305A
Other languages
Russian (ru)
Other versions
RU2001114305A (en
Inventor
Г.И. Никонов (RU)
Г.И. Никонов
Original Assignee
Никонов Геннадий Иванович
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Никонов Геннадий Иванович filed Critical Никонов Геннадий Иванович
Priority to RU2001114305A priority Critical patent/RU2238713C2/en
Publication of RU2001114305A publication Critical patent/RU2001114305A/en
Application granted granted Critical
Publication of RU2238713C2 publication Critical patent/RU2238713C2/en

Links

Landscapes

  • Cosmetics (AREA)

Abstract

FIELD: cosmetics.
SUBSTANCE: biologically active additive for cosmetic products with therapeutic and preventive properties are prepared be freezing and then thawing medical leeches, after which leech mass is homogenized and extracted to obtain liquid phase as desired product. Method increases biological activity of desired product because of eliminated possibility for additive to form complex on the surface of membrane of symbiotic bacterium of medical leech and because of release of new biologically active substances in active form. This, in turn, contributes to improvement of following characteristics of additive: enhanced protein exchange and lipid exchange, antinflammatory activity, reduced malonic dialdehyde content, lack of irritating and allergizing effects, increased degree of blocking formation of thrombi, antihypoxyc and hypotensive activities.
EFFECT: improved consumer's properties of additive.
2 cl, 1 tbl, 9 ex

Description

Изобретение относится к области медицины, а именно к косметологии, и может быть использовано при производстве косметических средств с лечебно-профилактическими свойствами.The invention relates to medicine, namely to cosmetology, and can be used in the manufacture of cosmetics with therapeutic and prophylactic properties.

Известно, что в процессе жизнедеятельности медицинская пиявка (Hirudo medicinalis) вырабатывает широкий спектр биологически активных веществ (БАВ): гирудин, ингибитор калликреина плазмы крови, бделлины, эглины, гиалуронидазу, дестабилазный комплекс, липазы, простагландины и др.It is known that in the process of life, a medical leech (Hirudo medicinalis) produces a wide range of biologically active substances (BAS): hirudin, an inhibitor of blood plasma kallikrein, bdellins, aeglins, hyaluronidase, destabilase complex, lipases, prostaglandins, etc.

В зависимости от способа обработки медицинской пиявки выделяют комплексы БАВ, различные по своей структуре и составу, которые обуславливают свойства получаемых из них препаратов.Depending on the method of processing medical leeches, BAS complexes are distinguished that are different in their structure and composition, which determine the properties of the preparations obtained from them.

Известны препараты (Никонов Г.И. “Медицинская пиявка. Основы трудотерапии”. СПб.: “СДС”, 1998, с.32-68, 206-242, Патент РФ №2153325, МКИ А 61 К 7/48, опубл. 2000 г.), полученные путем гомогенизации медицинской пиявки и применяемые в виде нативного гомогената или его экстракта.Known drugs (Nikonov G.I. “Medical leech. Fundamentals of occupational therapy.” St. Petersburg: “SDS”, 1998, p.32-68, 206-242, RF Patent No. 2153325, MKI A 61 K 7/48, publ. 2000), obtained by homogenizing a medical leech and used as a native homogenate or its extract.

Однако низкое содержание биологически активных веществ, находящихся в активном состоянии и способных обеспечивать стимуляцию белково-липидного обмена в коже и подкожной клетчатке, не позволяет эффективно использовать их в качестве биологически активных добавок в косметических средствах.However, the low content of biologically active substances that are in an active state and capable of stimulating protein-lipid metabolism in the skin and subcutaneous tissue does not allow their effective use as biologically active additives in cosmetics.

При этом продукты, полученные непосредственно из живой пиявки, сильно загрязнены балластными веществами, различными бактериями и, прежде всего, продуктами жизнедеятельности (эндо- и экзопептидазами) бактерии-симбионта пиявки (Aeromonas hirudinis), и их применение часто провоцирует аллергические реакции организма. Кроме того, БАВ в нативном гомогенате сохраняют свою активность лишь незначительный срок. Поэтому препараты на основе гомогената или экстракта гомогената из медицинских пиявок и их частей имеют крайне ограниченное применение как в лечебных, так и в косметических средствах.Moreover, products obtained directly from a live leech are heavily contaminated with ballast substances, various bacteria, and, above all, the waste products (endo- and exopeptidases) of the leech symbiont bacteria (Aeromonas hirudinis), and their use often provokes allergic reactions of the body. In addition, biologically active substances in the native homogenate retain their activity for only a short time. Therefore, preparations based on homogenate or homogenate extract from medical leeches and their parts have extremely limited use in both therapeutic and cosmetic products.

Попытки применить методы криообработки гомогената, полученного из медицинской пиявки (заявка №94031070, МКИ7 А 61 К 35/62, опубл. 10.09.96 г.), позволили несколько повысить биологическую активность целевого продукта.Attempts to apply the methods of cryoprocessing a homogenate obtained from a medical leech (application No. 94031070, MKI 7 A 61 K 35/62, publ. 10.09.96), allowed to slightly increase the biological activity of the target product.

Однако степень его воздействия на кожу остается низкой, а проявляемые свойства имеют нестабильный характер, поскольку в результате гомогенизации подавляющее количество БАВ, адсорбированных на стенке бактерии-симбионта пиявки и на поверхности балластных веществ кутикулы пиявки, остаются в связанном состоянии и не переходят в надосадочную жидкость.However, the degree of its effect on the skin remains low, and the properties shown are unstable, because as a result of homogenization, the overwhelming amount of biologically active substances adsorbed on the wall of the leech symbiont bacterium and on the surface of the leech cuticle ballast substances remain in the bound state and do not pass into the supernatant.

Частично решить эти проблемы удалось при использовании технологий получения препарата из медицинских пиявок путем их замораживания с последующим лиофильным высушиванием (Патент РФ №2033173, МКИ А 61 К 35/62, опубл. 95 г.). Полученное таким образом порошкообразное вещество содержит достаточно широкий комплекс биологически активных соединений, длительное время сохраняет активность и используется как самостоятельно в лечебных целях, например, в качестве препарата, обладающего антитромботическим, тромболитическим, антиатеросклеротическим и гипотензивным действием, так и в составе косметических средств.Partial solution to these problems was achieved by using technologies for obtaining the drug from medical leeches by freezing them, followed by freeze drying (RF Patent No. 2033173, MKI A 61 K 35/62, publ. 95 g). The powdery substance obtained in this way contains a wide range of biologically active compounds, remains active for a long time and is used both independently for medicinal purposes, for example, as a drug with antithrombotic, thrombolytic, antiatherosclerotic and hypotensive effects, and as a part of cosmetics.

Наиболее близким из известных к описываемому изобретению является способ получения биологически активной добавки для косметических средств (Патент РФ №2113843, МКИ7 А 61 К 7/48, опубл. 98 г.) путем замораживания медицинской пиявки. Полученная известным способом биологически активная добавка (БАД) представляет собой надосадочную жидкость экстракта из порошка лиофильно высушенных медицинских пиявок и при включении в косметические средства оказывает некоторое влияние на белково-липидный обмен в коже.The closest known to the described invention is a method of obtaining a biologically active additives for cosmetics (RF Patent No. 2113843, MKI 7 A 61 K 7/48, publ. 98 g) by freezing a medical leech. Obtained in a known manner, a biologically active additive (BAA) is a supernatant of an extract from a powder of lyophilized dried medical leeches and, when incorporated into cosmetics, has some effect on protein-lipid metabolism in the skin.

Однако известный способ получения БАД включает лиофильную сушку медицинской пиявки и измельчение лиофилизата до порошкообразного состояния, что не способствует сохранению БАВ в активном состоянии и, прежде всего, липосомы (дестабилазный комплекс). В процессе лиофилизации большая часть БАВ адсорбируется на стенке пищеварительного тракта, мышечных клетках тела пиявки, а также на балластных веществах кутикулы пиявки и не переходят в жидкую фазу в процессе экстрагирования, утрачивая свойства ингибировать ферменты. Кроме того, известный способ получения БАД для косметических средств требует предварительного промывания медицинской пиявки дистиллированной водой или физиологическим раствором и просушивания ее перед замораживанием, в результате чего происходит непроизвольный выброс секрета слюнных желез, а потому имеют место потери ценных биологически активных веществ (БАВ). И, как следствие, полученная известным способом БАД не обладает достаточной степенью активности из-за низкого содержания антиоксидантов, а также веществ, обеспечивающих стимуляцию белково-липидного обмена в коже и подкожной клетчатке, что является причиной проявления такого нежелательного эффекта, как накопление суммарных липидов в коже (нарушение метаболизма липидов). Кроме того, отсутствие веществ, стимулирующих увеличение парциального содержания кислорода в крови микроциркулярного русла кожи, не позволяют получить БАД для косметических средств с антигипоксическими свойствами.However, the known method for producing dietary supplements includes freeze drying a medical leech and grinding the lyophilisate to a powder state, which does not help to maintain the active substance in an active state and, above all, liposomes (destabilase complex). During lyophilization, most of the biologically active substances are adsorbed on the wall of the digestive tract, muscle cells of the leech body, as well as on the ballast substances of the leech cuticle and do not pass into the liquid phase during extraction, losing their ability to inhibit enzymes. In addition, the known method for producing dietary supplements for cosmetics requires the preliminary washing of a medical leech with distilled water or saline and drying it before freezing, as a result of which an involuntary release of the secretion of the salivary glands occurs, and therefore valuable biologically active substances (BAS) are lost. And, as a result, the dietary supplement obtained in a known manner does not have a sufficient degree of activity due to the low content of antioxidants, as well as substances that stimulate protein-lipid metabolism in the skin and subcutaneous tissue, which is the reason for the manifestation of such an undesirable effect as the accumulation of total lipids in skin (impaired lipid metabolism). In addition, the absence of substances that stimulate an increase in the partial oxygen content in the blood of the microvasculature of the skin does not allow obtaining dietary supplements for cosmetics with antihypoxic properties.

При этом загрязнение конечного состава известной БАД балластными веществами и продуктами жизнедеятельности бактерии-симбионта пиявки увеличивают ее протеолитическую активность, которая является нежелательным фактором воздействия на клетки кожи, поскольку вызывает снижение собственной ферментативной активности клетки кожи, а при длительном применении может вызвать аллергический ответ.At the same time, contamination of the final composition of the known dietary supplement with ballast substances and waste products of the leech symbiont bacteria increases its proteolytic activity, which is an undesirable factor in affecting skin cells, since it causes a decrease in the skin's own enzymatic activity, and with prolonged use it can cause an allergic response.

Таким образом, технический результат, получаемый при реализации описываемого изобретения, состоит в повышении биологической активности целевого продукта, получаемого из медицинской пиявки, за счет устранения возможности комплексообразования БАВ на поверхности мембраны бактерии-симбионта медицинской пиявки и высвобождения новых БАВ в активной форме.Thus, the technical result obtained by the implementation of the described invention consists in increasing the biological activity of the target product obtained from a medical leech, by eliminating the possibility of complex formation of biologically active substances on the membrane surface of the bacterium-symbiont of medical leeches and the release of new biologically active substances in active form.

Указанный технический результат достигается тем, что в способе получения биологически активной добавки для косметических средств путем замораживания медицинской пиявки замороженную пиявку оттаивают, гомогенизируют, полученный гомогенат экстрагируют в воде или физиологическом растворе и выдерживают в течение 2-10 часов при комнатной температуре, после чего выделяют жидкую фазу в качестве целевого продукта.The specified technical result is achieved by the fact that in the method of producing a biologically active additive for cosmetics by freezing a medical leech, the frozen leech is thawed, homogenized, the resulting homogenate is extracted in water or physiological saline and kept for 2-10 hours at room temperature, after which a liquid is isolated phase as the target product.

При этом для получения БАД с антипрокоагулянтным и гипотензивным действием выделенную жидкую фазу дополнительно подкисляют до значения рН 5,2-6,0 и прогревают на кипящей водяной бане в течение 10-25 минут.Moreover, to obtain dietary supplements with antiprocoagulant and hypotensive effects, the isolated liquid phase is additionally acidified to a pH of 5.2-6.0 and heated in a boiling water bath for 10-25 minutes.

Указанный технический результат достигается также биологически активной добавкой, полученной по описанному выше способу.The specified technical result is also achieved by a biologically active additive obtained by the method described above.

Биологически активная добавка для косметических средств, полученная в соответствии с настоящим изобретением, содержит следующие ингредиенты: гиалуронидазу, гирудин, липосому (дестабилазный комплекс, структурированный в липосому, который разрушается при лиофилизации), антиоксиданты, стабильный аналог простациклина (6-keto-PGF), ингибиторы трипсина, плазмина и тромбина, липаза и холестерин-эстераза, а также антигипоксанты.The dietary supplement for cosmetics obtained in accordance with the present invention contains the following ingredients: hyaluronidase, hirudin, liposome (a destabilase complex structured into a liposome that breaks down by lyophilization), antioxidants, a stable prostacyclin analog (6-keto-PGF ) , trypsin, plasmin and thrombin inhibitors, lipase and cholesterol esterase, as well as antihypoxants.

Полученная композиция БАВ позволяет стимулировать белковый обмен и повысить уровень суммарных липидов в коже, обладает выраженным антиоксидантным и антигипоксичесим действием, не проявляя при этом пртеолитической активности, раздражающего или аллергизирующего действия.The resulting composition of biologically active substances allows you to stimulate protein metabolism and increase the level of total lipids in the skin, has a pronounced antioxidant and antihypoxic effect, without showing any proteolytic activity, irritating or allergenic effect.

Описываемый способ получения БАД для косметических средств осуществляют следующим образом.The described method of producing dietary supplements for cosmetics is as follows.

Медицинские пиявки замораживают, например, в бытовой морозильной камере, замороженную массу оттаивают при комнатной температуре, гомогенизируют, заливают водой или физиологическим раствором и выдерживают при комнатной температуре 2-10 часов, после чего полученный препарат перемешивают и выделяют жидкую фазу. Полученный жидкий продукт используют непосредственно в качестве БАД для косметической продукции.Medical leeches are frozen, for example, in a household freezer, the frozen mass is thawed at room temperature, homogenized, poured with water or saline and kept at room temperature for 2-10 hours, after which the resulting preparation is mixed and the liquid phase is isolated. The resulting liquid product is used directly as a dietary supplement for cosmetic products.

Выделение жидкой фазы осуществляют любым известным способом, например центрифугированием, фильтрованием или отстаиванием. Продукт может быть передан на следующую стадию - подкисления и термической обработки - для получения БАД с антипрокоагулянтным и гипотензивным действием и/или подвергнут выпариванию до порошкообразного состояния с целью длительного хранения.The selection of the liquid phase is carried out in any known manner, for example by centrifugation, filtration or sedimentation. The product can be transferred to the next stage - acidification and heat treatment - to obtain dietary supplements with antiprocoagulant and hypotensive effects and / or subjected to evaporation to a powder state for long-term storage.

Установлено специфичное для биологии медицинской пиявки явление. Симбионт пиявки - бактерия Aeromonas hirudinis, обитающая в кишечном канале пиявки и обеспечивающая пиявку необходимыми для ее жизни веществами, синтезирует биологически активные вещества не только своими органеллами, но и на поверхности мембраны (в примембранном матриксе). Причем имеют место специфическая (синтез дистабилазного комплекса; активация неактивных форм предшественников БАВ) и неспецифическая (депонирование гирудина, антигипоксантов, простагландинов и т.д.) адсорбция БАВ на внешней поверхности мембраны. Процесс криообработки путем замораживания целой живой пиявки с последующим ее оттаиванием позволяет перевести бактерию в состояние спор при сохранении целостности бактерии-симбионта. При этом разрушаются адсорбционные связи между БАВ и стенкой бактерии, что приводит к переводу БАВ из связанного с матриксом состояния в свободное, т.е. происходит преобразование БАВ из состояния предшественника в активную форму. В результате последующей гомогенизации пиявочной массы и экстрагирования гомогената освобожденные БАВ легко переходят в жидкую фазу, в то время как бактерия и осколки ее оболочек после гомогенизации вместе с протеолитическими ферментами, эндо- и экзопептитазами поступает в осадок. Полученная водная субстанция активизированных БАВ и есть целевой продукт.A phenomenon specific to the biology of a medical leech has been established. The leech symbiont is the bacterium Aeromonas hirudinis, which lives in the intestinal canal of the leech and provides the leech with the substances necessary for its life, synthesizes biologically active substances not only with its organelles, but also on the membrane surface (in the membrane matrix). Moreover, there are specific (synthesis of a distabilase complex; activation of inactive forms of precursors of biologically active substances) and non-specific (deposition of hirudin, antihypoxants, prostaglandins, etc.) adsorption of biologically active substances on the outer surface of the membrane. The process of cryoprocessing by freezing a whole living leech with its subsequent thawing allows you to put the bacterium in a state of spores while maintaining the integrity of the symbiont bacteria. In this case, the adsorption bonds between the BAS and the bacterial wall are destroyed, which leads to the transfer of the BAS from the state associated with the matrix to the free state, i.e. the conversion of biologically active substances from the state of the precursor to the active form occurs. As a result of the subsequent homogenization of the leech mass and extraction of the homogenate, the released biologically active substances easily pass into the liquid phase, while the bacterium and fragments of its shells after homogenization, together with proteolytic enzymes, endo- and exopeptitases, precipitate. The resulting water substance of activated biologically active substances is the target product.

При этом установлено, что применение приемов замораживания-оттаивания уже размельченной пиявочной массы (гомогената), как это предлагается в упомянутом выше аналоге, не приводит к спорообразованию, комплексы БАВ - стенка бактерии-симбионта сохраняются, БАВ остаются в связанном с частями бактерии состоянии и не переходят в раствор, поступая в осадок, а потому не наблюдается какого-либо значительного повышения биологической активности.It was found that the use of methods of freezing and thawing of the already ground leech mass (homogenate), as proposed in the analogue mentioned above, does not lead to spore formation, the biologically active complexes - the wall of the bacterium-symbiont are preserved, the biologically active substances remain in a state associated with parts of the bacterium and do not pass into the solution, entering the precipitate, and therefore there is no significant increase in biological activity.

В таблице представлены свойства полученной в соответствии с описываемым способом биологически активной добавки (А) в сравнении с характеристиками известных препаратов аналогичного действия (БАД по прототипу - патент РФ 2113843 (С) и препарата, полученного с применением приемов криообработки гомогената из медицинской пиявки (заявка РФ 94031070 (В)).The table shows the properties of the biologically active additive (A) obtained in accordance with the described method in comparison with the characteristics of known drugs of similar action (dietary supplement according to the prototype - RF patent 2113843 (C) and the drug obtained using homogenate cryoprocessing techniques from a medical leech (RF application 94031070 (B)).

Сущность изобретения поясняется конкретными примерами реализации описываемого изобретения, где в примерах 1 и 2 показаны варианты осуществления способа получения БАД для косметических средств, а в примерах 3-9 приведена экспериментальная оценка эффективности полученной БАД.The invention is illustrated by specific examples of the implementation of the described invention, where examples 1 and 2 show embodiments of a method for producing dietary supplements for cosmetics, and examples 3-9 show an experimental evaluation of the effectiveness of the obtained dietary supplement.

Пример 1Example 1

Берут 500 медицинских пиявок общим весом 600 г, замораживают при температуре -4° С, оттаивают при комнатной температуре на льду в течение шести часов, гомогенизируют в гомогенизаторе Politron P-40 до состояния однородной массы.500 medical leeches with a total weight of 600 g are taken, frozen at -4 ° C, thawed at room temperature on ice for six hours, homogenized in a Politron P-40 homogenizer to a state of uniform mass.

Полученную массу заливают дистиллированной водой, доводя объем гомогената до 1 литра (соотношение объемов 1:1), выдерживают при комнатной температуре в течение 10 часов, перемешивают, центрифугируют и собирают выделенную жидкость. Таким образом получают 650 мл жидкого целевого продукта. В целях длительного хранения продукт подвергают выпариванию, получая 25 г порошкообразной БАД к косметическим средствам.The resulting mass is poured with distilled water, bringing the volume of the homogenate to 1 liter (volume ratio 1: 1), kept at room temperature for 10 hours, stirred, centrifuged and the recovered liquid is collected. Thus, 650 ml of a liquid target product is obtained. For long-term storage, the product is evaporated to obtain 25 g of powdered dietary supplement for cosmetics.

Пример 2Example 2

Берут 100 медицинских пиявок (общий вес 120 г), замораживают при температуре -4° С, оттаивают при комнатной температуре в течение четырех часов, гомогенизируют, доводят дистиллированной водой объем гомогената до 240 мл, перемешивают и выдерживают при комнатной температуре в течение шести часов, собирают супернатант и определяют активности.Take 100 medical leeches (total weight 120 g), freeze at -4 ° C, thaw at room temperature for four hours, homogenize, bring the volume of the homogenate to 240 ml with distilled water, mix and maintain at room temperature for six hours, collect the supernatant and determine the activity.

В полученный супернатант добавляют 0,1% раствор НСl до значения рН=5,6, после чего раствор прогревают в кипящей бане в течение 15 минут, центрифугируют и собирают выделенную жидкость. Получают 100 мл жидкого целевого продукта.A 0.1% HCl solution was added to the obtained supernatant to a pH value of 5.6, after which the solution was heated in a boiling bath for 15 minutes, centrifuged and the separated liquid was collected. Receive 100 ml of a liquid target product.

Пример 3. Изучение раздражающего и аллергизирующего действия БАД, ее подострой токсичности, влияния накожных длительных аппликаций препаратов на морфологические структуры кожи и печени экспериментальных животных.Example 3. The study of the irritating and allergenic effects of dietary supplements, its subacute toxicity, the effect of cutaneous prolonged application of drugs on the morphological structures of the skin and liver of experimental animals.

Исследования проводились на 90 половозрелых морских свинках, находящихся на обычном рационе питания. Полученную по способу, описанному в примере 1, жидкую БАД наносили на кожу морских свинок ежедневно в течение 30 дней в концентрации 0,001% (n=30), 0,01% (n=30), и 0,1% (n=15). В качестве контроля животным апплицировали 0,85% раствор NaCl (физиологический раствор; n=15).Studies were conducted on 90 sexually mature guinea pigs on a normal diet. Obtained by the method described in example 1, a liquid dietary supplement was applied to the skin of guinea pigs daily for 30 days at a concentration of 0.001% (n = 30), 0.01% (n = 30), and 0.1% (n = 15 ) As a control, 0.85% NaCl solution (saline; n = 15) was applied to animals.

Результаты исследований показали, что полученный в соответствии с описываемым способом продукт не обладает раздражающим и аллергизирующим действием на кожу, отрицательного действия на морфологические структуры кожи и печени не оказывает, не вызывает общетоксического действия на организм подопытных животных. Животные не отставали в прибавлении веса от контрольных, были активны, подвижны, имели блестящую шерсть, хороший аппетит. При анализе влияния препарата-прототипа установлено аллергизирующее действие на кожу животных, которое выражалось в нарушении пигментации отдельных участков кожи и расчесывании кожи. Таким образом, полученные результаты свидетельствуют об отсутствии отрицательного воздействия полученного комплекса БАВ на состояние кожи экспериментальных животных.The research results showed that the product obtained in accordance with the described method does not have an irritating and allergenic effect on the skin, does not have a negative effect on the morphological structures of the skin and liver, and does not cause a general toxic effect on the body of experimental animals. Animals did not lag behind the control in weight gain, were active, mobile, had a shiny coat, good appetite. When analyzing the influence of the prototype drug, an allergenic effect on the skin of animals was established, which was expressed in violation of pigmentation of individual skin areas and combing of the skin. Thus, the results obtained indicate the absence of a negative effect of the obtained BAS complex on the skin condition of experimental animals.

Пример 4. Изучение содержания общего растворимого белка в коже.Example 4. The study of the content of total soluble protein in the skin.

Исследования проводились по стандартному методу Д.Бейли.The studies were carried out according to the standard method of D. Bailey.

Полученный по способу, описанному в примере 1, жидкий продукт наносили на кожу экспериментальных животных по методике и в режиме, аналогично описанному в примере 3.Obtained by the method described in example 1, the liquid product was applied to the skin of experimental animals by the method and in a mode similar to that described in example 3.

Результаты испытаний, приведенные в таблице, свидетельствуют об эффективности полученного в соответствии с описываемым изобретением препарата в стимулировании белкового обмена.The test results shown in the table indicate the effectiveness of the preparation obtained in accordance with the described invention in stimulating protein metabolism.

Пример 5. Изучение суммарных липидов в коже.Example 5. The study of total lipids in the skin.

Воздействие полученным препаратом на исследуемых животных проводили по методике, аналогичной описанной в примере 3, содержание суммарных липидов определялось по общепринятой методике Хуэрго.The effect of the obtained drug on the studied animals was carried out according to the method similar to that described in example 3, the content of total lipids was determined according to the generally accepted method of Huergo.

Результаты, приведенные в таблице, свидетельствуют о выраженном влиянии исследуемого препарата на метаболизм липидов, обусловленном избирательным воздействием описываемого комплекса БАВ на свободные липиды, в то время как при воздействии БАД согласно прототипу происходит делипидизация мембранной клетки, т.е. разрушение структурных липидов.The results shown in the table indicate a pronounced effect of the studied drug on lipid metabolism, due to the selective effect of the described biologically active substances complex on free lipids, while under the influence of dietary supplements according to the prototype membrane cell delipidization occurs, i.e. destruction of structural lipids.

Пример 6. Изучение содержания малонового диальдегида.Example 6. The study of the content of malondialdehyde.

Исследования проводились по стандартному методу В.Стальной.The studies were carried out according to the standard method of V. Steel.

Результаты отражены в таблице.The results are shown in the table.

Достоверное снижение уровня малонового диальдегида является показателем антиоксидантной активности исследуемого комплекса БАВ.A significant decrease in the level of malondialdehyde is an indicator of the antioxidant activity of the studied complex of biologically active substances.

Пример 7. Изучение антигипоксического действия БАД.Example 7. The study of the antihypoxic effect of dietary supplements.

Исследование проводилось по стандартному методу Н.Агаджаняна “Определение устойчивости к гипоксии в группе крыс” на 28-ми половозрелых крысах-самцах линии Вистар, находящихся на обычном рационе питания.The study was conducted according to the standard method of N. Agadzhanyan “Determination of resistance to hypoxia in the group of rats” on 28 sexually mature male Wistar rats that are on a normal diet.

Жидкую БАД, полученную в соответствии с настоящим изобретением, наносили на кожу 14-ти животных ежедневно в течение 45 дней в концентрации 0,01% (n=14). В контрольной группе (n=14) животным апплицировали 0,85% раствор NaCl (физиологический раствор). Обе группы животных были помещены в барокамеру, в которой производилась откачка воздуха до давления, соответствующего высоте 12000 м над уровнем моря. Спустя 4 минуты восстанавливали исходное давление воздуха. В контрольной группе выжило 2 крысы (14,3%), в опытной - 8 (57,1%). То есть выживаемость крыс при использовании описываемой БАД увеличивается в 4 раза, что свидетельствует об антигипоксическом действии препарата.The liquid dietary supplement obtained in accordance with the present invention was applied to the skin of 14 animals daily for 45 days at a concentration of 0.01% (n = 14). In the control group (n = 14), 0.85% NaCl solution (physiological saline) was applied to animals. Both groups of animals were placed in a pressure chamber, in which air was pumped out to a pressure corresponding to an altitude of 12,000 m above sea level. After 4 minutes, the original air pressure was restored. In the control group, 2 rats survived (14.3%), in the experimental group, 8 (57.1%). That is, the survival of rats when using the described dietary supplement increases 4 times, which indicates the antihypoxic effect of the drug.

Пример 8. Изучение антипрокоагулянтного действия.Example 8. The study of antiprocoagulant action.

Противотромботическое действие препарата, полученного по способу, описанному в примере 2, определяли на крысах с использованием метода тромбообразования по Весслеру. Степень блокады тромбообразования оценивали при интервале между введением раствора препарата и активированной стеклом сыворотки крови человека, составляющем 4 часа, и выражали в процентах относительно контроля (равный объем физиологического раствора).The antithrombotic effect of the drug obtained by the method described in example 2 was determined in rats using the Wessler method of thrombosis. The degree of thrombosis blockade was evaluated during the interval between the administration of the drug solution and the activated glass of human blood serum of 4 hours, and was expressed as a percentage relative to the control (equal volume of physiological saline).

При внутривенном введении 0,3 мл как 0,01%, так и 0,001% раствора препарата степень блокады тромбообразования составила 100%.With the intravenous administration of 0.3 ml of both 0.01% and 0.001% solution of the drug, the degree of thrombosis blockade was 100%.

При введении 0,3 мл 0,001% раствора препарата по прототипу (С) степень блокады тромбообразования составила 45%, а препарата (В) - 85%.With the introduction of 0.3 ml of a 0.001% solution of the drug according to the prototype (C), the degree of thrombosis blockade was 45%, and that of the drug (B) was 85%.

Пример 9. Изучение гипотензивного действия.Example 9. The study of antihypertensive effects.

Гипотензивное действие определяли при пероральном введении 2 мл препарата крысам линии SHR (спонтанно гипертензивные). Исходный уровень давления составлял 165-5 мм рт. ст. Спустя 10 часов анализировали уровень давления в хвостовой вене крыс. Гипотензивное действие выражали в процентах относительно контроля (равный объем физиологического раствора). Экспериментальным животным вводили препарат, получение которого описано в примере 2.The antihypertensive effect was determined by oral administration of 2 ml of the drug to SHR rats (spontaneously hypertensive). The initial pressure level was 165-5 mm RT. Art. After 10 hours, the pressure level in the tail vein of rats was analyzed. The antihypertensive effect was expressed as a percentage relative to the control (equal volume of saline). The experimental animals were injected with a preparation, the preparation of which is described in example 2.

Уровень давления в хвостовой вене крыс составил при введении 0,001% раствора БАД по сравнению с контролем 15-5%, при введении 0,01% раствора - 25-5%, что свидетельствует о выраженном гипотензивном действии препарата.The pressure level in the tail vein of rats amounted to 15-5% when administering a 0.001% dietary supplement solution compared to the control, and 25-5% when administering a 0.01% solution, which indicates a pronounced hypotensive effect of the drug.

Другие свойства описываемого продукта, представленные в таблице, анализировали по общепринятым методикам для определения каждого параметра. Сведения, представленные в таблице, указывают на значительное увеличение активности препарата по сравнению с аналогичными продуктами, полученными из медицинской пиявки.Other properties of the described product, presented in the table, were analyzed by conventional methods to determine each parameter. The information presented in the table indicates a significant increase in the activity of the drug compared to similar products obtained from medical leeches.

Полученный комплекс БАВ стимулирует белковый обмен, увеличивает содержание суммарных липидов в коже, обладает выраженным антиоксидантным, антигипоксическим и гипотензивным действием, не проявляет раздражающего и аллергизирующего действия на кожу и предназначен для использования в качестве биологически активной добавки для косметических средств.The obtained BAS complex stimulates protein metabolism, increases the content of total lipids in the skin, has a pronounced antioxidant, antihypoxic and hypotensive effect, does not exhibit irritating and allergenic effects on the skin, and is intended for use as a biologically active additive for cosmetics.

Figure 00000001
Figure 00000001

Claims (3)

1. Способ получения биологически активной добавки для косметических средств путем замораживания медицинской пиявки, отличающийся тем, что замороженную пиявку оттаивают, гомогенизируют, полученный гомогенат экстрагируют в воде или физиологическом растворе и выдерживают в течение 2-10 ч при комнатной температуре, после чего выделяют жидкую фазу в качестве целевого продукта.1. A method of obtaining a biologically active additive for cosmetics by freezing a medical leech, characterized in that the frozen leech is thawed, homogenized, the resulting homogenate is extracted in water or saline and kept for 2-10 hours at room temperature, after which the liquid phase is isolated as the target product. 2. Способ по п.1, отличающийся тем, что выделенную жидкую фазу дополнительно подкисляют до значения рН 5,2-6,0 и прогревают на кипящей водяной бане в течение 10-25 мин.2. The method according to claim 1, characterized in that the isolated liquid phase is additionally acidified to a pH of 5.2-6.0 and heated in a boiling water bath for 10-25 minutes. 3. Биологически активная добавка для косметических средств, отличающаяся тем, что она получена по способу в соответствии с п.1.3. Dietary supplement for cosmetics, characterized in that it is obtained by the method in accordance with claim 1.
RU2001114305A 2001-05-30 2001-05-30 Biologically active additive for cosmetic products and a method for preparation thereof RU2238713C2 (en)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2001114305A RU2238713C2 (en) 2001-05-30 2001-05-30 Biologically active additive for cosmetic products and a method for preparation thereof

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2001114305A RU2238713C2 (en) 2001-05-30 2001-05-30 Biologically active additive for cosmetic products and a method for preparation thereof

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2001114305A RU2001114305A (en) 2003-03-10
RU2238713C2 true RU2238713C2 (en) 2004-10-27

Family

ID=33536847

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2001114305A RU2238713C2 (en) 2001-05-30 2001-05-30 Biologically active additive for cosmetic products and a method for preparation thereof

Country Status (1)

Country Link
RU (1) RU2238713C2 (en)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011045427A1 (en) * 2009-10-15 2011-04-21 Centre National De La Recherche Scientifique Use of extract of leeches as anti-bacterial agent

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Корпачев В.В. Целебная фауна. - М.: Наука, 1989, с.93. *

Cited By (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2011045427A1 (en) * 2009-10-15 2011-04-21 Centre National De La Recherche Scientifique Use of extract of leeches as anti-bacterial agent
EP2316465A1 (en) * 2009-10-15 2011-05-04 Centre National De La Recherche Scientifique Use of extract of leeches' saliva as anti-bacterial agent for the manufacture of different compositons

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JPH05230100A (en) Protein fraction, its isolation, effective substance concentrate containing said fraction and preparation for skin care and/or medical treatment of inflammatory skin
KR20180108504A (en) Fermented product of colostrum and a cosmetic composition using the same
JP2010155820A (en) Skin ameliorating agent, and vascular ameliorating agent, and pharmaceutical composition, food, feed and cosmetic comprising the same
KR100828494B1 (en) A composition of a cosmetic essense and the method of prepating it for improvenent of wrinkle
JPH0987189A (en) Antiallergic agent containing isodon japonicus hara, paeonia suffruticosa andrews, perilla frutescens britton var. acuta kudo, and/or arunica montana linne
JPH0657659B2 (en) Enzyme compositions that act as digestion enhancers at various levels in the digestive tract
KR102165525B1 (en) Composition for improving acne skin
US20030124199A1 (en) Use of fly larval extracts for wound treatment
KR20190060556A (en) A cosmetic composition of fermented colostrum product for anti-acne
RU2238713C2 (en) Biologically active additive for cosmetic products and a method for preparation thereof
CN111450039A (en) Mild and non-irritant moisturizing and anti-aging eye cream and preparation method thereof
JP2003517017A (en) Pharmaceutical component obtained from spider toxin used for treating tumor, method for producing the same, and method for using the same
JP3073862B2 (en) Hyaluronic acid production promoter
JP3413220B2 (en) Skin roughness improver
JP3172599B2 (en) Cell activator
JP3805975B2 (en) Wound healing agent
RU2238718C2 (en) Cosmetics-destination biologically active additive
EP0073173A1 (en) Products extracted from invertebrate sea-animals, their preparation and their uses in dietetics,pharmaceutics and cosmetology
CA2295690A1 (en) Lipid-based immune modulator composition
RU2238717C2 (en) Cosmetics-destination biologically active additive and a method for preparation thereof
RU2639255C2 (en) Method for producing cosmetic masks
KR101609217B1 (en) Method for making glycoprotein from jelly fish and cosmetics containing the same
FR2843883A1 (en) Non-irritating leech extract, having antiinflammatory and/or antipsoriatic activity, obtained by suspending homogenized crude extract in saline, incubating and recovering supernatant
JP3947263B2 (en) Hyaluronidase inhibitor
RU2141828C1 (en) Substance prolonging garlic powder efficiency

Legal Events

Date Code Title Description
HE4A Notice of change of address of a patent owner
QB4A Licence on use of patent

Free format text: LICENCE

Effective date: 20150824