RU2229893C2

RU2229893C2 - Method for preparing staphylococcus anatoxin-vaccine

Info

Publication number: RU2229893C2
Application number: RU2001117707/13A
Authority: RU
Inventors: А.А. Евглевский (RU); А.А. Евглевский; А.А. Сидорчук (RU); А.А. Сидорчук
Original assignee: Закрытое акционерное общество "АгроБизнесЦентр" "AgroBusinessCentre"
Priority date: 2001-06-29
Filing date: 2001-06-29
Publication date: 2004-06-10

Abstract

FIELD: veterinary microbiology. SUBSTANCE: method involves culturing staphylococcus microorganisms followed by their destruction, detoxification the prepared mixture with formalin and its sterilization. Before sterilization carrying out 1-1.5% glycerol solution in the volume ratio = 1:(3-4) is added to the end product. Method provides enhancing quality of the end product and to prolong period of its storage. EFFECT: improved preparing method. 3 ex

Description

Изобретение относится к сельскому хозяйству, в частности к ветеринарии, и может быть использовано для профилактики и лечения стафилококкозов животных и птиц, ускорения заживления ран и неспецифической иммуностимуляции.The invention relates to agriculture, in particular to veterinary medicine, and can be used for the prevention and treatment of staphylococcosis of animals and birds, accelerate wound healing and nonspecific immunostimulation.

Известен способ получения стафилококковой анатоксин-вакцины путем выращивания с последующей деструкцией стафилококков, отделением культуральной жидкости, детоксикацией ее формалином, сорбцией целевого продукта на гидроокиси алюминия и его стерилизацией автоклавированием (Патент РФ № 2139091, МКИ⁶ А 61 К 39/085. Способ получения стафилококковой анатоксин-вакцины, Бюл. № 28, 1999). В известном способе деструкцию проводят нагреванием микробных клеток до 85-100°С в течение 1,0-1,5 часов, к культуральной жидкости добавляют формалин двукратно из расчета 0,3-0,4% и 0,5-0,6% формалина через 7-10 дней.A known method of producing a staphylococcal toxoid vaccine by growing followed by destruction of staphylococci, separation of the culture fluid, detoxification of it with formalin, sorption of the target product on aluminum hydroxide and its sterilization by autoclaving (RF Patent No. 2139091, MKI ⁶ A 61 K 39/085. Method for producing staphylococcus toxoid vaccines, Bull. No. 28, 1999). In the known method, the destruction is carried out by heating microbial cells to 85-100 ° C for 1.0-1.5 hours, formalin is added to the culture fluid twice from the calculation of 0.3-0.4% and 0.5-0.6% formalin after 7-10 days.

Недостатком известного способа является получение анатоксин-вакцины низкого качества (реактогенность возрастает через короткое время хранения).The disadvantage of this method is to obtain an toxoid vaccine of low quality (reactogenicity increases after a short storage time).

Целью предлагаемого изобретения является повышение качества целевого продукта.The aim of the invention is to improve the quality of the target product.

Поставленная цель достигается в способе получения стафилококковой анатоксин-вакцины путем выращивания стафилококков с последующей их деструкцией, детоксикацией смеси формалином и его стерилизацией тем, что до стерилизации к целевому продукту добавляют 1-1,5%-ный раствор глицерина в объемном соотношении 1:3-4.The goal is achieved in a method for producing a staphylococcal toxoid vaccine by growing staphylococci followed by their destruction, detoxification of the mixture with formalin and its sterilization by adding 1-1.5% glycerol solution to the target product in a volume ratio of 1: 3- 4.

В патентной и научно-технической литературе неизвестны технические решения, аналогичные заявляемому, что позволяет сделать вывод о соответствии предложения условию патентоспособности ″новизна″.In the patent and scientific and technical literature unknown technical solutions similar to the claimed, which allows us to conclude that the proposal meets the condition of patentability ″ novelty ″.

Только сочетание заявленных режимов в определенной последовательности позволяет достичь эффекта, указанного в цели изобретения, т.е. заявленный способ удовлетворяет условию патентоспособности ″изобретательский уровень″, в частности добавление глицерина при определенных соотношениях компонентов позволило получить неочевидный положительный эффект - снижение реактогенности целевого продукта без использования химических консервантов.Only a combination of the claimed modes in a certain sequence allows to achieve the effect indicated in the purpose of the invention, i.e. the claimed method satisfies the condition of patentability "inventive step", in particular the addition of glycerol at certain ratios of components allowed to obtain an unobvious positive effect - a decrease in the reactogenicity of the target product without the use of chemical preservatives.

Способ используют для получения стафилококковой анатоксин-вакцины, используемой для профилактики стафилококкоза птиц, плотоядных, а также для профилактики и лечения маститов, пневмоний, ускорения заживления ран и неспецифической иммуностимуляции, поэтому заявленное предложение соответствует условию патентоспособности ″промышленная применимость″.The method is used to obtain staphylococcal toxoid vaccine used for the prevention of staphylococcosis of birds, carnivores, as well as for the prevention and treatment of mastitis, pneumonia, accelerate wound healing and nonspecific immunostimulation, therefore, the claimed proposal meets the patentability condition ″ industrial applicability ″.

Предлагаемое изобретение иллюстрируется на следующих примерах.The invention is illustrated by the following examples.

Пример 1. Стафилококки выращивают, как и в известном способе, на питательной среде в течение 10 дней. Затем проводят автоклавирование при 1,0 атм в течение 30 минут. Детоксикацию проводят добавлением к суспензии стафилококков формалина в два этапа: до концентрации его в смеси 0,3%-ной и инкубацией при температуре 37°С в течение 7 суток с последующим добавлением формалина до его конечной концентрации 0,5% и инкубацией смеси при температуре 44°С в течение 5 суток. По завершении процесса детоксикации к суспензии стафилококков добавляют 1%-ный раствор глицерина в объемном соотношении 1:3 и расфасовывают по флаконам, закрывают резиновыми пробками и обкатывают алюминиевыми колпачками, подвергают автоклавированию при 0,6 атм в течение 20 минут.Example 1. Staphylococci are grown, as in the known method, on a nutrient medium for 10 days. Then autoclaving is carried out at 1.0 atm for 30 minutes. Detoxification is carried out by adding formalin to staphylococcus suspension in two stages: until it is concentrated in a mixture of 0.3% and incubated at 37 ° C for 7 days, followed by formalin to its final concentration of 0.5% and incubation of the mixture at a temperature 44 ° C for 5 days. At the end of the detoxification process, a 1% glycerol solution in a volume ratio of 1: 3 is added to a suspension of staphylococci and packaged in bottles, closed with rubber stoppers and wrapped in aluminum caps, autoclaved at 0.6 atm for 20 minutes.

Пример 2. Стафилококки выращивают, как и в известном способе, на питательной среде в течение 15 дней. Затем проводят гамма-облучение Со⁶⁰ силой 1,0×10⁶R. Детоксикацию проводят добавлением к суспензии стафилококков формалина в два этапа: до концентрации его в смеси 0,4% и инкубацией при температуре 40°С в течение 10 суток с последующим добавлением формалина до его конечной концентрации 0,6% и инкубацией смеси при температуре 46°С в течение 8 суток. По завершении процесса детоксикации к суспензии стафилококков добавляют 1,5%-ный раствор глицерина в объемном соотношении 1:4 и расфасовывают по флаконам, закрывают резиновыми пробками и обкатывают алюминиевыми колпачками, подвергают автоклавированию при 0,6 атм в течение 20 минут.Example 2. Staphylococci are grown, as in the known method, on a nutrient medium for 15 days. Then, gamma irradiation With ^{60 of} 1.0 × 10 ⁶ R is carried out. Detoxification is carried out by adding formalin to the suspension of staphylococci in two stages: until it is concentrated in a mixture of 0.4% and incubated at 40 ° C for 10 days, followed by addition formalin to its final concentration of 0.6% and incubation of the mixture at a temperature of 46 ° C for 8 days. At the end of the detoxification process, a 1.5% glycerol solution in a volume ratio of 1: 4 is added to the suspension of staphylococci and packaged in bottles, closed with rubber stoppers and wrapped in aluminum caps, subjected to autoclaving at 0.6 atm for 20 minutes.

Пример 3. Стафилококки выращивают, как и в известном способе, на питательной среде в течение 10 дней. Затем проводят гамма-облучение Со силой 2,0×10⁶R. Детоксикацию проводят добавлением к суспензии стафилококков формалина в два этапа: до концентрации его в смеси 0,3%-ной и инкубацией при температуре 37°С в течение 7 суток с последующим добавлением формалина до его конечной концентрации 0,5% и инкубацией смеси при температуре 44°С в течение 5 суток. По завершении процесса детоксикации к суспензии стафилококков добавляют 1,25%-ный раствор глицерина в объемном соотношении 1:3,5 и расфасовывают по флаконам, закрывают резиновыми пробками и обкатывают алюминиевыми колпачками, подвергают автоклавированию при 0,6 атм в течение 20 минут.Example 3. Staphylococci are grown, as in the known method, on a nutrient medium for 10 days. Then gamma irradiation is carried out With a force of 2.0 × 10 ⁶ R. Detoxification is carried out by adding formalin to the suspension of staphylococci in two stages: until it is concentrated in a mixture of 0.3% and incubated at 37 ° C for 7 days, followed by adding formalin to its final concentration of 0.5% and incubating the mixture at a temperature of 44 ° C for 5 days. At the end of the detoxification process, a 1.25% glycerol solution in a volume ratio of 1: 3.5 is added to the staphylococcus suspension and packaged in bottles, closed with rubber stoppers and wrapped in aluminum caps, autoclaved at 0.6 atm for 20 minutes.

Предлагаемый способ позволяет в сравнении с известным способом снижать реактогенность целевого продукта более чем в два раза, что позволяет увеличить сроки хранения целевого продукта без снижения его качества.The proposed method allows, in comparison with the known method, to reduce the reactogenicity of the target product by more than two times, which allows to increase the shelf life of the target product without reducing its quality.

Claims

A method of obtaining a staphylococcal toxoid vaccine by growing staphylococci followed by their destruction, detoxification of the mixture with formalin and its sterilization, characterized in that a 1-1.5% glycerol solution in a volume ratio of 1: 3-4 is added to the target product before sterilization.