RU2199582C2 - Способ получения обогащенной селеном биомассы спирулины (spirulina platensis) - Google Patents
Способ получения обогащенной селеном биомассы спирулины (spirulina platensis) Download PDFInfo
- Publication number
- RU2199582C2 RU2199582C2 RU2000126580/13A RU2000126580A RU2199582C2 RU 2199582 C2 RU2199582 C2 RU 2199582C2 RU 2000126580/13 A RU2000126580/13 A RU 2000126580/13A RU 2000126580 A RU2000126580 A RU 2000126580A RU 2199582 C2 RU2199582 C2 RU 2199582C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- biomass
- selenium
- preparing
- spirulina
- sulfur
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к способам получения биологически активных соединений, обогащенных селеном на основе биомассы микроводорослей, и может быть применено в фитобиотехнологии, микробиологии, медицине, альгологии, пищевой промышленности и в сельском хозяйстве. Предлагаемый способ получения обогащенной селеном биомассы Spirulina platensis заключается в подготовке инокулята путем предварительной адаптации клеток при культивировании в течение 7-10 пассажей на агаризованных средах с низким содержанием серы (5-10% от нормы) в присутствии 15-30 мг/л селенита натрия и использовании полученного таким образом инокулята для ведения производства в питательной среде с таким же содержанием селена, как и при подготовке инокулята, и с содержанием серы 15-30 мг/л (5-10% от нормы). Изобретение позволяет получить биомассу Spirulina platensis с различным обогащением селеном в составе биологически активных соединений путем управления процессом его накопления, при высокой скорости роста и накопления биомассы, что обусловливает высокую производительность по выходу биомассы. 4 табл.
Description
Предлагаемое изобретение относится к способам получения биологически активных соединений (БАС), обогащенных селеном на основе биомассы микроводорослей, и может быть применено в фитобиотехнологии, микробиологии, медицине, альгологии, пищевой промышленности и в сельском хозяйстве.
Недостаток селена отрицательно сказывается на деятельности организма и хорошо усваивается лишь в виде органических соединений селена.
Известен способ получения селенсодержащего препарата на основе биомассы спирулины путем введения соли неорганического селена в среду и последующего выращивания культуры (Патент DE заявка 3421644, МКИ А 61 К 33/04, опубликованный в 1985 г.).
К недостаткам аналога относится низкое содержание селена в органических соединениях в получаемой биомассе спирулины.
Известен другой способ получения обогащенной селеном биомассы спирулины, заключающийся во введении неорганических солей селена в питательную среду в начале и в первой половине логарифмической фазы роста культуры спирулины на 5-10 сут после начала инкубации (Патент РФ 2096037, МКИ А 61 К 33/04, опубликованный 20. 11. 97, БИ 32).
В настоящем способе обеспечивается высокое содержание селена в биомассе.
Однако это достигается путем длительного культивирования спирулины (30 суток), что обусловливает низкую производительность получения полезного продукта. Кроме того, этим способом не обеспечиваются отсутствие в биомассе неорганического селена и возможность управления процессом накопления селена в БАС.
Задачей настоящего изобретения является разработка нового способа получения биомассы спирулины с различным обогащением селеном в составе БАС путем управления процессом его накопления, при высокой скорости роста и накопления биомассы, что обусловливает высокую производительность по выходу биомассы.
Задача решена тем, что разработан новый способ получения обогащенной селеном биомассы спирулины, заключающийся в подготовке инокулята путем предварительной адаптации клеток при культивировании в течение 7-10 пассажей на агаризованных средах с использованием полученного таким образом инокулята для ведения производства в питательной среде с таким же содержанием селена, как и при подготовке инокулята и с содержанием серы 15-30 мг/л (5-10% от нормы).
Сущность изобретения заключается в том, что, как известно, сульфаты тормозят поглощение и метаболизм селена растениями, микроорганизмами и микроводорослями, который в присутствии серы адсорбируется клетками в неорганической форме и плохо включается в БАС из-за слабой конкуренции с серой. Сера значительно легче чем селен метаболизируется и входит в состав белков, ферментов, пептидов, серосодержащих аминокислот, сульфолипидов и других органических соединений клетки.
Из научно-технической и патентной литературы авторам не известны технические решения, которые могли бы в предлагаемой совокупности существенных признаков позволить получить биомассу микроводорослей с заранее заданным содержанием селена в БАС с высокой производительностью по выходу полезного продукта и без ингибирования скорости роста и накопления селенсодержащей биомассы при внесении соли селена в среду культивирования.
Изобретение иллюстрируется следующими примерами.
ПРИМЕР 1
Проводят подготовку инокулята путем предварительного выращивания спирулины в течение 7 пассажей на агаризованной среде Зарука (таблицы 1-3), отличающейся тем, что в ней уменьшено содержание серы до 15 мг/л (0,05 г/л K2SO4, 5% от нормы в среде Зарука) и внесено 15 мг/л селенита натрия. Инокулят засевают до конечной плотности 0,05-0,2 мг/л в питательную среду Зарука с таким же содержанием селена и серы, как и при подготовке инокулята. Выращивание культуры проводят при температуре 34oС и освещенности 80-100 Вт/м2.
Проводят подготовку инокулята путем предварительного выращивания спирулины в течение 7 пассажей на агаризованной среде Зарука (таблицы 1-3), отличающейся тем, что в ней уменьшено содержание серы до 15 мг/л (0,05 г/л K2SO4, 5% от нормы в среде Зарука) и внесено 15 мг/л селенита натрия. Инокулят засевают до конечной плотности 0,05-0,2 мг/л в питательную среду Зарука с таким же содержанием селена и серы, как и при подготовке инокулята. Выращивание культуры проводят при температуре 34oС и освещенности 80-100 Вт/м2.
При приготовлении всех сред и растворов их компоненты последовательно растворяют в воде, затем вносят микроэлементы, раствор Fe+EDTA и селенит натрия.
Время культивирования составляет 5-6 суток, что определяется выходом на максимальную плотность суспензии, составляющую 7 г сухой массы в 1 л суспензии. 95% объема фотореактора, в котором культивируется спирулина, сливают и полученную биомассу отделяют от среды фильтрованием, промывают от способного сорбироваться клеточными мембранами внеклеточного селена водой объемом, равным объему суспензии, и высушивают. Получают биомассу, внутриклеточный селен которой полностью включается в состав БАС и содержание которого составляет 570 мг/кг сухой массы. Результаты по примерам 1-5 представлены в таблице 4.
ПРИМЕР 2
Для засева фотореактора используют суспензию, полученную при культивировании в примере 1 или инокулят, полученный, как описано в примере 1. Инокулят засевают в питательную среду, содержащую 15 мг/л Na2SeO3 и 30 мг/л серы (10% серы от нормы в среде Зарука). Водоросли выращивают в тех же условиях, как в примере 1, в течение 5-6 дней до стационарной плотности 7 г/л. Сбор, отмывку и высушивание биомассы проводят согласно примеру 1. Получают биомассу, внутриклеточный селен который полностью включился в состав БАС и содержание которого составляет 530 мг/кг сухой массы.
Для засева фотореактора используют суспензию, полученную при культивировании в примере 1 или инокулят, полученный, как описано в примере 1. Инокулят засевают в питательную среду, содержащую 15 мг/л Na2SeO3 и 30 мг/л серы (10% серы от нормы в среде Зарука). Водоросли выращивают в тех же условиях, как в примере 1, в течение 5-6 дней до стационарной плотности 7 г/л. Сбор, отмывку и высушивание биомассы проводят согласно примеру 1. Получают биомассу, внутриклеточный селен который полностью включился в состав БАС и содержание которого составляет 530 мг/кг сухой массы.
ПРИМЕР 3
Инокулят, полученный согласно примеру 2, засевают в питательную среду, содержащую 20 мг/л Na2SeO3 и 15 мг/л серы (5% от нормы). Водоросли выращивают в тех же условиях, как в примере 1, в течение 5-6 дней до стационарной плотности 7 г/л. Сбор, отмывку и высушивание биомассы проводят согласно примеру 1. Получают содержание внутриклеточного селена, равное 4000 мг/кг сухой массы, в том числе в составе БАС 3980 мг/кг сухой биомассы.
Инокулят, полученный согласно примеру 2, засевают в питательную среду, содержащую 20 мг/л Na2SeO3 и 15 мг/л серы (5% от нормы). Водоросли выращивают в тех же условиях, как в примере 1, в течение 5-6 дней до стационарной плотности 7 г/л. Сбор, отмывку и высушивание биомассы проводят согласно примеру 1. Получают содержание внутриклеточного селена, равное 4000 мг/кг сухой массы, в том числе в составе БАС 3980 мг/кг сухой биомассы.
ПРИМЕР 4
Инокулят, полученный согласно примеру 2, засевают в питательную среду, содержащую 25 мг/л Na2SeO3 и 30 мг/л серы (10% от нормального содержания в среде Зарука). Водоросли выращивают в тех же условиях, как в примере 1, в течение 5-6 дней до стационарной плотности 7 г/л. Сбор, отмывку и высушивание биомассы проводят согласно примеру 1. Получают содержание внутриклеточного селена, равное 4100 мг/кг сухой массы, в том числе в составе БАС 4050 мг/кг сухой биомассы.
Инокулят, полученный согласно примеру 2, засевают в питательную среду, содержащую 25 мг/л Na2SeO3 и 30 мг/л серы (10% от нормального содержания в среде Зарука). Водоросли выращивают в тех же условиях, как в примере 1, в течение 5-6 дней до стационарной плотности 7 г/л. Сбор, отмывку и высушивание биомассы проводят согласно примеру 1. Получают содержание внутриклеточного селена, равное 4100 мг/кг сухой массы, в том числе в составе БАС 4050 мг/кг сухой биомассы.
ПРИМЕР 5
Инокулят, полученный согласно примеру 2, засевают в питательную среду, содержащую 30 мг/л Na2SeO3 и 30 мг/л серы (10% от нормального содержания в среде Зарука). Водоросли выращивают в тех же условиях, как в примере 1, в течение 5-6 дней до стационарной плотности 7 г/л. Сбор, отмывку и высушивание биомассы проводят согласно примеру 1. Получают содержание внутриклеточного селена, равное 4200 мг/кг сухой массы, в том числе в составе БАС 4130 мг/кг сухой биомассы.
Инокулят, полученный согласно примеру 2, засевают в питательную среду, содержащую 30 мг/л Na2SeO3 и 30 мг/л серы (10% от нормального содержания в среде Зарука). Водоросли выращивают в тех же условиях, как в примере 1, в течение 5-6 дней до стационарной плотности 7 г/л. Сбор, отмывку и высушивание биомассы проводят согласно примеру 1. Получают содержание внутриклеточного селена, равное 4200 мг/кг сухой массы, в том числе в составе БАС 4130 мг/кг сухой биомассы.
Как следует из результатов таблицы 4, настоящее изобретение, а именно предварительная адаптация спирулины при подготовке инокулята в течение 7-10 пассажей на средах с содержанием серы до 5-10% от нормы, и внесение в среду селенита натрия в количестве 15-30 мг/л позволило получить биомассу спирулины, с разным обогащением селеном в концентрациях 530-4130 мг/кг, который полностью включился в БАС и не сорбировался клетками. При этом за короткие сроки (5-6 дней культивирования) был достигнут высокий выход биомассы 7 г/л, и не наблюдалось ингибирование скорости роста культуры солями селена.
Claims (1)
- Способ получения обогащенной селеном биомассы спирулины (Spirulina platensis) путем выращивания культуры в присутствии селенита натрия, отличающийся тем, что культуру S.platensis предварительно адаптируют к недостатку серы посредством культивирования в течение 7 - 10 пассажей на агаризованных средах с низким содержанием серы 15 - 30 мг/л в присутствии селенита натрия в количестве 15 - 30 мг/л, а затем проводят выращивание адаптированной культуры при содержании серы 15 - 30 мг/л и селенита натрия 15 - 30 мг/л в среде культивирования.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2000126580/13A RU2199582C2 (ru) | 2000-10-24 | 2000-10-24 | Способ получения обогащенной селеном биомассы спирулины (spirulina platensis) |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2000126580/13A RU2199582C2 (ru) | 2000-10-24 | 2000-10-24 | Способ получения обогащенной селеном биомассы спирулины (spirulina platensis) |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2000126580A RU2000126580A (ru) | 2003-01-27 |
RU2199582C2 true RU2199582C2 (ru) | 2003-02-27 |
Family
ID=20241300
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2000126580/13A RU2199582C2 (ru) | 2000-10-24 | 2000-10-24 | Способ получения обогащенной селеном биомассы спирулины (spirulina platensis) |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2199582C2 (ru) |
Cited By (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
MD4123C1 (ru) * | 2011-03-24 | 2012-02-29 | Sova Sergiu | Способ получения селенита железа Fe2Se3O9∙6H2O и способ культивирования цианобактерии Spirulina platensis с его использованием |
CN102845747A (zh) * | 2012-09-01 | 2013-01-02 | 山东博然螺旋藻生物股份有限公司 | 一种富硒速冻螺旋藻的制备方法 |
CN108431203A (zh) * | 2015-12-14 | 2018-08-21 | 梅塔伯琉姆公司 | 使原生生物富集富含多不饱和脂肪酸,更特别地ω3类别的多不饱和脂肪酸的脂质的方法,以及用于产生这些脂质的其实施 |
CN112645999A (zh) * | 2020-12-29 | 2021-04-13 | 广西大学 | 一种富硒螺旋藻蛋白分离纯化的方法 |
-
2000
- 2000-10-24 RU RU2000126580/13A patent/RU2199582C2/ru active
Cited By (8)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
MD4123C1 (ru) * | 2011-03-24 | 2012-02-29 | Sova Sergiu | Способ получения селенита железа Fe2Se3O9∙6H2O и способ культивирования цианобактерии Spirulina platensis с его использованием |
CN102845747A (zh) * | 2012-09-01 | 2013-01-02 | 山东博然螺旋藻生物股份有限公司 | 一种富硒速冻螺旋藻的制备方法 |
CN102845747B (zh) * | 2012-09-01 | 2013-08-14 | 山东博然螺旋藻生物股份有限公司 | 一种富硒速冻螺旋藻的制备方法 |
CN108431203A (zh) * | 2015-12-14 | 2018-08-21 | 梅塔伯琉姆公司 | 使原生生物富集富含多不饱和脂肪酸,更特别地ω3类别的多不饱和脂肪酸的脂质的方法,以及用于产生这些脂质的其实施 |
US11427799B2 (en) | 2015-12-14 | 2022-08-30 | Biorea | Method for enriching protists with lipids rich in polyunsaturated fatty acids |
CN108431203B (zh) * | 2015-12-14 | 2023-11-07 | 梅塔伯琉姆公司 | 使原生生物富集富含多不饱和脂肪酸,更特别地ω3类别的多不饱和脂肪酸的脂质的方法,以及用于产生这些脂质的其实施 |
CN112645999A (zh) * | 2020-12-29 | 2021-04-13 | 广西大学 | 一种富硒螺旋藻蛋白分离纯化的方法 |
CN112645999B (zh) * | 2020-12-29 | 2023-07-18 | 广西大学 | 一种富硒螺旋藻蛋白分离纯化的方法 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
KR101577820B1 (ko) | 종속영양 미세조류의 신규 배양 방법 | |
RU2478700C2 (ru) | Золотистые водоросли и способ их производства | |
CN108864218A (zh) | 一种甘油葡萄糖苷产品及甘油葡萄糖苷的纯化方法与应用 | |
CN108277163B (zh) | 一种分离纯化裸藻藻种的方法 | |
CN105409740A (zh) | 一种金线莲水培栽培方法 | |
CN110157621B (zh) | 一种高浓缩微藻活细胞长效保存剂的制备方法 | |
WO2015085631A1 (zh) | 一种高产率的葡萄藻培养方法 | |
RU2199582C2 (ru) | Способ получения обогащенной селеном биомассы спирулины (spirulina platensis) | |
CN106811417B (zh) | 一种用于微小亚历山大藻的培养基及其培养方法 | |
CN104450849A (zh) | 胁迫盐生杜氏藻积累β-胡萝卜素的方法 | |
CN103160453A (zh) | 一种降解亚硝酸盐的微生态制剂的制备方法、所得微生态制剂及其用途 | |
CN107446909B (zh) | 一种大肠杆菌的固定化方法及利用固定化大肠杆菌补料发酵生产l-赖氨酸的方法 | |
CN113862179A (zh) | 一种沼泽红假单胞菌及其制备5-ala的用途和方法 | |
CN106754385A (zh) | 一种利用蓝藻水华为原料培育小球藻属浮游植物的方法 | |
CN109090007A (zh) | 一种淡、海水族鱼池虾池全生态过滤系统的制作方法 | |
CN107904276A (zh) | 一种土霉素片的生产工艺 | |
CN115449485B (zh) | 一种养殖海水小球藻的方法 | |
CN116496967B (zh) | 一种提高微藻活性物质含量的促进剂及其应用 | |
CN113040075B (zh) | 一种用虾头发酵液培养海水轮虫的方法 | |
CN101928682A (zh) | 一种l-精氨酸产生菌谷氨酸棒杆菌及制备方法和应用 | |
RU2277124C1 (ru) | Способ получения обогащенной цинком биомассы спирулины (spirulina platensis) | |
CN109762366B (zh) | 一种生产纯化藻红素的工艺 | |
JPS62239981A (ja) | エイコサペンタエン酸高含有藻体の製造方法 | |
JP2620045B2 (ja) | 高クロロフィル含有性クロレラ属変異株 | |
RU2146287C1 (ru) | Способ получения селенсодержащей спирулины |