RU2198921C2 - Способ получения нативной споровой суспензии для приготовления сибиреязвенных вакцин - Google Patents
Способ получения нативной споровой суспензии для приготовления сибиреязвенных вакцин Download PDFInfo
- Publication number
- RU2198921C2 RU2198921C2 RU2001106406A RU2001106406A RU2198921C2 RU 2198921 C2 RU2198921 C2 RU 2198921C2 RU 2001106406 A RU2001106406 A RU 2001106406A RU 2001106406 A RU2001106406 A RU 2001106406A RU 2198921 C2 RU2198921 C2 RU 2198921C2
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- carried out
- preparing
- stage
- cultivation
- spores
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
Изобретение относится к медицине, в частности к производству сибиреязвенных вакцин. Получение нативной споровой суспензии при глубинном аэробном культивировании вакцинных штаммов B. acillus anthracis осуществляют в два этапа: на первом этапе культивирование проводят при непрерывном перемешивании и аэрации воздухом, поддерживая температуру 30-34oС. Когда завершается созревание спор, осуществляют переход на второй этап, повышая температуру до 35-38oС, и периодически кратковременно перемешивают культуральную жидкость. Способ позволяет почти до 100% повысить содержание полноценных зрелых спор в культуральной жидкости, более точно определять время завершения процесса культивирования и примерно на два часа сократить его продолжительность. 2 з.п. ф-лы, 2 табл.
Description
Изобретение относится к лекарственным препаратам, содержащим живые бактерии, в частности к производству сибиреязвенных вакцин, и может быть использовано в медицине и ветеринарии.
Известны способы получения нативной споровой суспензии (НСС) для приготовления живой сибиреязвенной вакцины при аэробном культивировании B. anthracis на плотных и жидком питательных средах /1-4/. Наиболее производительным способом получения НСС является глубинное аэробное культивирование некапсулирующих, непротеолитических и авирулентных штаммов B. anthracis.
Недостатком этого способа являются значительные различия в выходах полноценных нормально окрашиваемых по Цилю-Нильсену спор, из-за гетерогенности в развитии популяции к концу процесса глубинного культивирования - одновременное нахождение в культуральной жидкости (КЖ) вегетативных клеток, проспор, незрелых спор, спор и проросших спор. Причем процентное соотношение клеток и спор, находящихся на различных стадиях развития, относительно быстро изменяется и точно определить момент завершения процесса, когда в КЖ находится максимальное процентное содержание полноценных спор, не всегда удается.
Прототипом изобретения служит способ получения НСС /3/ при глубинном аэробном культивировании штамма В. anthracis с введением добавки КУКа в период завершения накопления вегетативной биомассы.
Недостатком этого способа является относительно низкий процентный выход полноценных зрелых спор в КЖ.
Заявляемое изобретение направлено на повышение производительности стадии культивирования за счет синхронизации развития популяции на завершающем этапе процесса культивирования и, как следствие, к увеличению в КЖ процентного содержания полноценных спор.
Поставленная цель достигается тем, что предложен способ получения нативной споровой суспензии при глубинном аэробном культивировании вакцинных штаммов В. anthracis, отличающийся тем, что для получения полноценных спор процесс выращивания культур необходимо осуществлять в два этапа: на первом этапе, когда последовательно идет прорастание спор, накопление вегетативной биомассы и ее переход в стадию спорообразования, культивирование проводят при непрерывном перемешивании и аэрации воздухом, поддерживая температуру нативной жидкости 30-34oС, а на втором этапе, когда завершается созревание спор - в статике, повышая температуру культуральной жидкости до 35-38oС, с периодическим кратковременным перемешиванием нативной жидкости.
При этом переход с первого этапа культивирования на второй осуществляется при образовании в культуре суммарно не менее (70±10)% проспор и спор.
Для поддержания в статике заданной температуры культивирования осуществляется перемешивание КЖ за счет периодического включения мешалки каждые 10-15 минут на 2-3 минуты.
Указанный способ позволяет почти до 100% повысить содержание полноценных зрелых спор в КЖ и примерно на два часа сократить продолжительность процесса культивирования.
Пример 1. Получение НСС для приготовления живой сибиреязвенной вакцины (существующий способ).
В качестве исходной культуры для получения НСС используют эталонный вакцинный, некапсулирующий, непротеолитический сибиреязвенный штамм СТИ-1. В стерильную питательную среду на основе 1%-ного солянокислотного гидролизата рыбной муки, кукурузного экстракта с добавлением солей вводится посевной материал в количестве (3-5)•105 спор на 1 мл (один из вариантов). Процесс культивирования вакцинного штамма СТИ-1 ведут при температуре 32oС, осуществляя постоянное перемешивание и аэрацию КЖ воздухом.
Динамика изменения цитоморфологических показателей в процессе культивирования штамма СТИ-1 при температуре 32oС и постоянном перемешивании и аэрации КЖ воздухом (без статики) приведена в табл. 1.
Пример 2. Получение НСС дня приготовления живой сибиреязвенной вакцины (предлагаемый способ).
Начальные условия проведения процесса культивирования те же, что и в примере 1. Отличие заключается в том, что процесс культивирования осуществляется в два этапа - на первом при температуре 32oС и постоянном перемешивании и аэрации КЖ, а на втором - в статике при температуре 37оС.
Динамика изменения цитоморфологических показателей в процессе культивирования штамма СТИ-1 в два этапа - на первом при температуре 32oС и постоянном перемешивании и аэрации КЖ, а на втором - в статике при температуре 37oС приведена в табл. 2.
Как видно из данных, приведенных в табл. 1 и 2, предлагаемый способ получения НСС позволяет почти до 100% повысить содержание полноценных зрелых спор в КЖ, более точно определять время завершения процесса культивирования и сократить его продолжительность.
Полученная при культивировании вакцинного штамма СТИ-1 по предлагаемой технологии НСС концентрировалась, и из нее готовилась живая сибиреязвенная вакцина.
Все серии полученной вакцины удовлетворяли требованиям ГИСК им. Л.А. Тарасевича /1/.
Источники информации
1. Межреспубликанские технические условия на сибиреязвенную живую сухую вакцину для скарификационного применения (МРТУ-42 10), 1964.
1. Межреспубликанские технические условия на сибиреязвенную живую сухую вакцину для скарификационного применения (МРТУ-42 10), 1964.
2. Регламент производства сибиреязвенной живой вакцины СТИ для людей. Тбилисский НИИВС, 1958.
3. Патент 2142010. Способ глубинного культивирования сибиреязвенного вакцинного штамма СТИ-1. Заявка 97115505/13(016405) от 23.09.97 г.
4. Шенцев И.В., Шумилов Г.П., Садовой Н.В. и др. Стабильность основных свойств живой сибиреязвенной вакцины, полученной в жидких и на плотных питательных средах - ЖМЭИ, 1981, 7. - С. 113-114.
Claims (3)
1. Способ получения нативной споровой суспензии при глубинном аэробном культивировании вакцинных штаммов Bacillus anthracis, отличающийся тем, что процесс культивирования осуществляют в два этапа: на первом этапе культивирование проводят при непрерывном перемешивании и аэрации воздухом, поддерживая температуру 30-34oС, а когда завершается созревание спор, осуществляют переход на второй этап, при этом повышают температуру культуральной жидкости до 35-38oС и периодически кратковременно перемешивают культуральную жидкость.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что переход с первого этапа культивирования на второй осуществляется при образовании в культуре суммарно не менее (70±10)% проспор и спор.
3. Способ по п.1, отличающийся тем, что на втором этапе перемешивание культуральной жидкости осуществляется за счет периодического включения мешалки каждые 10-15 мин на 2-3 мин.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2001106406A RU2198921C2 (ru) | 2001-03-06 | 2001-03-06 | Способ получения нативной споровой суспензии для приготовления сибиреязвенных вакцин |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU2001106406A RU2198921C2 (ru) | 2001-03-06 | 2001-03-06 | Способ получения нативной споровой суспензии для приготовления сибиреязвенных вакцин |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2001106406A RU2001106406A (ru) | 2003-01-20 |
RU2198921C2 true RU2198921C2 (ru) | 2003-02-20 |
Family
ID=20246963
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU2001106406A RU2198921C2 (ru) | 2001-03-06 | 2001-03-06 | Способ получения нативной споровой суспензии для приготовления сибиреязвенных вакцин |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2198921C2 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US8409590B2 (en) | 2004-02-11 | 2013-04-02 | Ligocyte Pharmaceuticals, Inc. | Anthrax antigens and methods of use |
-
2001
- 2001-03-06 RU RU2001106406A patent/RU2198921C2/ru not_active IP Right Cessation
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
ОНИЩЕНКО Г.Г. и др. Сибирская язва: актуальные аспекты микробиологии, эпидемиологии, клиники, диагностики, лечения и профилактики. - М.: ВУНМЦ МЗ РФ, 1999, с.309-319. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US8409590B2 (en) | 2004-02-11 | 2013-04-02 | Ligocyte Pharmaceuticals, Inc. | Anthrax antigens and methods of use |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN102037856B (zh) | 一种简易蛹虫草菌种复壮的方法 | |
CN110301291A (zh) | 一种羊肚菌菌种的培育方法 | |
Frengova et al. | Use of whey ultrafiltrate as a substrate for production of carotenoids by the yeast Rhodotorula rubra | |
CN102964170A (zh) | 双孢菇液体菌种配方及其制备方法 | |
CN105441371A (zh) | 一种基因工程菌及其在生产辅酶q10中的应用 | |
US10364446B2 (en) | Streptomyces psammoticus and methods of using the same for vanillin production | |
CN102796680B (zh) | 一种玫瑰孢链霉菌及其利用组合前体生产达托霉素的方法 | |
EP3483280B1 (en) | A fermentation method for producing gellan gum | |
RU2198921C2 (ru) | Способ получения нативной споровой суспензии для приготовления сибиреязвенных вакцин | |
CN108342292A (zh) | 一种利用传统玫瑰醋米醅曲深层发酵生产米醋的方法 | |
JPH10127298A (ja) | アカルボース調製のためのオスモル濃度制御発酵法 | |
RU2053294C1 (ru) | Способ культивирования бифидобактерий | |
RU2124366C1 (ru) | Способ изготовления вакцины против сальмонеллеза сельскохозяйственных животных и птиц | |
SU908092A1 (ru) | Способ получени рибофлавина | |
RU2676144C1 (ru) | Способ получения инвертазы и лимонной кислоты | |
SI9600120A (en) | New and improved fermentative procedure for the production of clavulanic acid and its salts | |
RU1566532C (ru) | Способ изготовления вакцины против сибирской язвы животных | |
RU2129015C1 (ru) | Способ изготовления вакцины против пастереллеза сельскохозяйственных животных и птиц | |
RU2129440C1 (ru) | Способ изготовления вакцин против пастереллеза животных и птиц | |
KR102548494B1 (ko) | 비지를 주성분으로 포함하는 흑국균 배양용 배지 및 이를 이용한 흑국 제조방법 | |
RU2431664C1 (ru) | Способ получения вакцины против аэромоноза рыб | |
RU2627182C1 (ru) | Штамм Aneurinibacillus migulanus и его применение для получения грамицидина С | |
RU2053790C1 (ru) | Способ изготовления вакцины против листериоза сельскохозяйственных животных | |
RU2223114C2 (ru) | Способ получения сибиреязвенного нативного протективного антигена | |
RU2062788C1 (ru) | Способ непрерывного получения экзополисахаридов |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20100307 |
|
NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20120627 |
|
PC43 | Official registration of the transfer of the exclusive right without contract for inventions |
Effective date: 20121206 |
|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20130307 |
|
NF4A | Reinstatement of patent |
Effective date: 20140220 |
|
MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20190307 |