RU2134694C1 - Аминоолигосахарид ск-4416, способ его получения, ингибитор сахаридгидролазы и антибактериальный агент - Google Patents
Аминоолигосахарид ск-4416, способ его получения, ингибитор сахаридгидролазы и антибактериальный агент Download PDFInfo
- Publication number
- RU2134694C1 RU2134694C1 RU97112927/04A RU97112927A RU2134694C1 RU 2134694 C1 RU2134694 C1 RU 2134694C1 RU 97112927/04 A RU97112927/04 A RU 97112927/04A RU 97112927 A RU97112927 A RU 97112927A RU 2134694 C1 RU2134694 C1 RU 2134694C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- pharmaceutically acceptable
- compound
- formula
- aminooligosaccharide
- amino
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 11
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 title claims abstract description 8
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 title abstract description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 title abstract 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 title abstract 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 11
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 3
- 229920001542 oligosaccharide Polymers 0.000 claims description 18
- -1 alkyl hydroxide Chemical compound 0.000 claims description 17
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 15
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 15
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 9
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims description 5
- 239000004093 hydrolase inhibitor Substances 0.000 claims description 4
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims description 3
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 229940124036 Hydrolase inhibitor Drugs 0.000 claims 1
- 241000187180 Streptomyces sp. Species 0.000 claims 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 abstract description 39
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 abstract description 19
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 15
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 9
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 abstract description 6
- 239000002689 soil Substances 0.000 abstract description 5
- 239000008194 pharmaceutical composition Chemical class 0.000 abstract description 3
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 abstract description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 abstract description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 21
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 9
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 9
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 9
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 9
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 9
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 9
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 8
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 7
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 7
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 7
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 6
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 6
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 5
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 5
- 102000016679 alpha-Glucosidases Human genes 0.000 description 5
- 108010028144 alpha-Glucosidases Proteins 0.000 description 5
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 5
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 5
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000004382 Amylase Substances 0.000 description 4
- 102000013142 Amylases Human genes 0.000 description 4
- 108010065511 Amylases Proteins 0.000 description 4
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 102000004157 Hydrolases Human genes 0.000 description 4
- 108090000604 Hydrolases Proteins 0.000 description 4
- 208000031226 Hyperlipidaemia Diseases 0.000 description 4
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 4
- OMOVVBIIQSXZSZ-UHFFFAOYSA-N [6-(4-acetyloxy-5,9a-dimethyl-2,7-dioxo-4,5a,6,9-tetrahydro-3h-pyrano[3,4-b]oxepin-5-yl)-5-formyloxy-3-(furan-3-yl)-3a-methyl-7-methylidene-1a,2,3,4,5,6-hexahydroindeno[1,7a-b]oxiren-4-yl] 2-hydroxy-3-methylpentanoate Chemical compound CC12C(OC(=O)C(O)C(C)CC)C(OC=O)C(C3(C)C(CC(=O)OC4(C)COC(=O)CC43)OC(C)=O)C(=C)C32OC3CC1C=1C=COC=1 OMOVVBIIQSXZSZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000019418 amylase Nutrition 0.000 description 4
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 4
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 4
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 3
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241001453268 Comamonas terrigena Species 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical compound CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 3
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 3
- 238000001460 carbon-13 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 3
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 3
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 3
- 238000000425 proton nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 2-Aminoethan-1-ol Chemical compound NCCO HZAXFHJVJLSVMW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SXAMGRAIZSSWIH-UHFFFAOYSA-N 2-[3-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]-1,2,4-oxadiazol-5-yl]-1-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)ethanone Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)C1=NOC(=N1)CC(=O)N1CC2=C(CC1)NN=N2 SXAMGRAIZSSWIH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 2
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 2
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 2
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 2
- XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N Melanin Chemical compound O=C1C(=O)C(C2=CNC3=C(C(C(=O)C4=C32)=O)C)=C2C4=CNC2=C1C XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 2
- 229920005654 Sephadex Polymers 0.000 description 2
- 239000012507 Sephadex™ Substances 0.000 description 2
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 2
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 2
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 2
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 239000002585 base Substances 0.000 description 2
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 2
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 2
- 238000004992 fast atom bombardment mass spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 235000003642 hunger Nutrition 0.000 description 2
- 208000020346 hyperlipoproteinemia Diseases 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N insulin Chemical compound N1C(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(NC(=O)CN)C(C)CC)CSSCC(C(NC(CO)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CCC(N)=O)C(=O)NC(CC(C)C)C(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(=O)NC(CC=2C=CC(O)=CC=2)C(=O)NC(CSSCC(NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2C=CC(O)=CC=2)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(C)NC(=O)C(CCC(O)=O)NC(=O)C(C(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC=2NC=NC=2)NC(=O)C(CO)NC(=O)CNC2=O)C(=O)NCC(=O)NC(CCC(O)=O)C(=O)NC(CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC=CC=3)C(=O)NC(CC=3C=CC(O)=CC=3)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)N3C(CCC3)C(=O)NC(CCCCN)C(=O)NC(C)C(O)=O)C(=O)NC(CC(N)=O)C(O)=O)=O)NC(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CO)NC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C1CSSCC2NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(N)CC=1C=CC=CC=1)C(C)C)CC1=CN=CN1 NOESYZHRGYRDHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 229910052748 manganese Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 2
- GLDOVTGHNKAZLK-UHFFFAOYSA-N octadecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCO GLDOVTGHNKAZLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N platinum Chemical compound [Pt] BASFCYQUMIYNBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L potassium carbonate Chemical compound [K+].[K+].[O-]C([O-])=O BWHMMNNQKKPAPP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 2
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 2
- 238000011218 seed culture Methods 0.000 description 2
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 2
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 2
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 2
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 229910052725 zinc Inorganic materials 0.000 description 2
- ZRPAUEVGEGEPFQ-UHFFFAOYSA-N 2-[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]pyrazol-1-yl]-1-(2,4,6,7-tetrahydrotriazolo[4,5-c]pyridin-5-yl)ethanone Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)C=1C=NN(C=1)CC(=O)N1CC2=C(CC1)NN=N2 ZRPAUEVGEGEPFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JVKRKMWZYMKVTQ-UHFFFAOYSA-N 2-[4-[2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-ylamino)pyrimidin-5-yl]pyrazol-1-yl]-N-(2-oxo-3H-1,3-benzoxazol-6-yl)acetamide Chemical compound C1C(CC2=CC=CC=C12)NC1=NC=C(C=N1)C=1C=NN(C=1)CC(=O)NC1=CC2=C(NC(O2)=O)C=C1 JVKRKMWZYMKVTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 244000075850 Avena orientalis Species 0.000 description 1
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 206010008631 Cholera Diseases 0.000 description 1
- 229920000742 Cotton Polymers 0.000 description 1
- BWLUMTFWVZZZND-UHFFFAOYSA-N Dibenzylamine Chemical compound C=1C=CC=CC=1CNCC1=CC=CC=C1 BWLUMTFWVZZZND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000192125 Firmicutes Species 0.000 description 1
- 235000019733 Fish meal Nutrition 0.000 description 1
- 239000004366 Glucose oxidase Substances 0.000 description 1
- 108010015776 Glucose oxidase Proteins 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 102000004877 Insulin Human genes 0.000 description 1
- 108090001061 Insulin Proteins 0.000 description 1
- 229930191313 Oligostatin Natural products 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 101710184309 Probable sucrose-6-phosphate hydrolase Proteins 0.000 description 1
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 1
- 241000576755 Sclerotia Species 0.000 description 1
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000970232 Streptomyces flavochromogenes Species 0.000 description 1
- 241000813834 Streptomyces myxogenes Species 0.000 description 1
- 102400000472 Sucrase Human genes 0.000 description 1
- 101710112652 Sucrose-6-phosphate hydrolase Proteins 0.000 description 1
- GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N Triethanolamine Chemical compound OCCN(CCO)CCO GSEJCLTVZPLZKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 1
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 231100000215 acute (single dose) toxicity testing Toxicity 0.000 description 1
- 238000011047 acute toxicity test Methods 0.000 description 1
- COAIBTZEXXESAS-TZSLYBJXSA-N adiposin Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1N[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C(CO)=C1 COAIBTZEXXESAS-TZSLYBJXSA-N 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N ammonia Natural products N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000000922 anti-bactericidal effect Effects 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- 239000002518 antifoaming agent Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 229910052788 barium Inorganic materials 0.000 description 1
- JUHORIMYRDESRB-UHFFFAOYSA-N benzathine Chemical compound C=1C=CC=CC=1CNCCNCC1=CC=CC=C1 JUHORIMYRDESRB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 238000012754 cardiac puncture Methods 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 235000013339 cereals Nutrition 0.000 description 1
- 239000003638 chemical reducing agent Substances 0.000 description 1
- GVPFVAHMJGGAJG-UHFFFAOYSA-L cobalt dichloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Co+2] GVPFVAHMJGGAJG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 238000009585 enzyme analysis Methods 0.000 description 1
- INCWELKXTZCRSA-UHFFFAOYSA-N ethyl acetate;methanol;hydrate Chemical compound O.OC.CCOC(C)=O INCWELKXTZCRSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000004467 fishmeal Substances 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000001641 gel filtration chromatography Methods 0.000 description 1
- 229940116332 glucose oxidase Drugs 0.000 description 1
- 235000019420 glucose oxidase Nutrition 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 1
- 229910017053 inorganic salt Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940125396 insulin Drugs 0.000 description 1
- 235000011073 invertase Nutrition 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000009630 liquid culture Methods 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 1
- 230000000877 morphologic effect Effects 0.000 description 1
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 150000002482 oligosaccharides Chemical class 0.000 description 1
- 210000003463 organelle Anatomy 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- 239000008055 phosphate buffer solution Substances 0.000 description 1
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 1
- SIOXPEMLGUPBBT-UHFFFAOYSA-N picolinic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=N1 SIOXPEMLGUPBBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 229910052697 platinum Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000027 potassium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002953 preparative HPLC Methods 0.000 description 1
- MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N procaine Chemical compound CCN(CC)CCOC(=O)C1=CC=C(N)C=C1 MFDFERRIHVXMIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960004919 procaine Drugs 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N pyridine Substances C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910052710 silicon Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010703 silicon Substances 0.000 description 1
- AEJXATYENFDWAH-UHFFFAOYSA-M silver sodium hydroxide nitrate Chemical compound [OH-].[Na+].[Ag+].[O-][N+]([O-])=O AEJXATYENFDWAH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- FGCSIJPPCNCQJB-FAOVPRGRSA-M sodium;(2r,3s,4r,5r)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;chloride Chemical compound [Na+].[Cl-].OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C=O FGCSIJPPCNCQJB-FAOVPRGRSA-M 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 235000015112 vegetable and seed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000008158 vegetable oil Substances 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H17/00—Compounds containing heterocyclic radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H17/04—Heterocyclic radicals containing only oxygen as ring hetero atoms
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/26—Preparation of nitrogen-containing carbohydrates
- C12P19/28—N-glycosides
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
Изобретение касается нового аминоолигосахарида СК-4416 формулы I, где m - целое число, 0 или 1; n = 1-4, m+n - целое число от 1 до 5; R1 - низший алкилгидроксид и R2 - водород или низший алкил, и его фармацевтически пригодных нетоксичных солей, которые обладают сильной способностью ингибирования сахаридгидролазы и антибактериальной активностью. Изобретение касается также способа получения данного соединения и фармацевтических композиций, содержащих его в качестве активного ингредиента. В соответствии с изобретением авторы выделили новое аминоолигосахаридное производное из почвенного микроорганизма, классифицированного как Streptomyces вид, и обнаружили, что его можно применять в качестве сильнодействующего ингибитора сахаридгидролазы, а также в качестве антибактериальных агентов. 4 с.п. ф-лы, 4 ил., 6 табл. 
Description
Настоящее изобретение касается нового аминоолигосахаридного производного и его фармацевтически пригодных нетоксичных солей, которые обладают сильной способностью ингибирования сахаридгидролазы и антибактериальной активностью. Изобретение касается также способа получения данного продукта и фармацевтических композиций, содержащих его в качестве активного ингредиента.
Описание уровня техники
Хорошо известно, что при лечении или профилактике диабета, гиперлипопротеинемии, гиперлипидемии, ожирения или других связанных с ними вторичных симптомов можно применять такие ингибиторы сахаридгидролазы, как амилазу и сахаразу.
Хорошо известно, что при лечении или профилактике диабета, гиперлипопротеинемии, гиперлипидемии, ожирения или других связанных с ними вторичных симптомов можно применять такие ингибиторы сахаридгидролазы, как амилазу и сахаразу.
С этой точки зрения сообщается о некоторых аминоолигосахаридных производных как о сильнодействующих ингибиторах сахаридгидролазы, таких как, например, А-2396, который производит Streptomyces вид А2396 (смотри: выложенный патент Японии (Sho) 54-92909), Oligostatin, который производит Streptomyces myxogenes (смотри: J. Antibiotics, 34:1424-1433 (1981)), Adiposin (смотри: J. Antibiotics, 35: 1234-1236 (1982), и NS комплекс, который производит Streptomyces флавохромоген (смотри: выложенный открытый Патент Японии (Hei) 3-19239).
С другой стороны, NS комплекс, химическая структура которого совершенно эквивалентна структуре аминоолигосахаридного производного данного изобретения, описывается представленной ниже формулой:
В соответствии с настоящим изобретением заявители выделили новое аминоолигосахаридное производное из почвенного микроорганизма, квалифицировав его как Streptomyces вид, и обнаружили, что его можно применять в качестве сильнодействующего ингибитора для сахаридгидролазы, а также в качестве антибактериального агента.
В соответствии с настоящим изобретением заявители выделили новое аминоолигосахаридное производное из почвенного микроорганизма, квалифицировав его как Streptomyces вид, и обнаружили, что его можно применять в качестве сильнодействующего ингибитора для сахаридгидролазы, а также в качестве антибактериального агента.
Краткое описание изобретения
Таким образом, первым объектом настоящего изобретения является новое аминоолигосахаридное производное СК-4416, представленное общей формулой (I), и его соли:
где m - целое число, 0 или 1;
n - целое число от 1 до 4;
m + n - целое число от 1 до 5;
R1 - низший алкилгидроксид; и
R2 - водород или низший алкил.
Таким образом, первым объектом настоящего изобретения является новое аминоолигосахаридное производное СК-4416, представленное общей формулой (I), и его соли:
где m - целое число, 0 или 1;
n - целое число от 1 до 4;
m + n - целое число от 1 до 5;
R1 - низший алкилгидроксид; и
R2 - водород или низший алкил.
Другим объектом настоящего изобретения является применение аминоолигосахаридного производного в качестве ингибиторов сахаридгидролазы и антибактериальных агентов.
Следующим объектом настоящего изобретения является способ получения аминоолигосахаридного производного из Streptomyces вида СК-4416.
Краткое описание рисунков
Указанные выше и другие объекты и отличительные признаки настоящего изобретения будут ясны из следующего описания, данного в связи с чертежами, в которых:
на фиг. 1 приведен ИК спектр вещества СК-4416 по данному изобретению;
на фиг. 2 приведен спектр ЯМР 1H СК-4416;
на фиг. 3 приведен спектр ЯМР 13C СК-4416; и
на фиг. 4 приведен спектр FAB-MS/MS (масс-спектрометрия с бомбардировкой быстрыми электронами) СК-4416.
Указанные выше и другие объекты и отличительные признаки настоящего изобретения будут ясны из следующего описания, данного в связи с чертежами, в которых:
на фиг. 1 приведен ИК спектр вещества СК-4416 по данному изобретению;
на фиг. 2 приведен спектр ЯМР 1H СК-4416;
на фиг. 3 приведен спектр ЯМР 13C СК-4416; и
на фиг. 4 приведен спектр FAB-MS/MS (масс-спектрометрия с бомбардировкой быстрыми электронами) СК-4416.
Подробное описание изобретения
Заявители настоящего изобретения провели скрининговые исследования почвенных микроорганизмов с целью выделения микроба, производящего аминоолигосахаридное производное по настоящему изобретению. Выделенный таким образом микроб идентифицировали как вид Streptomyces рода и назвали Streptomyces вид СК-4416. Кроме того, было установлено, что полученное из него аминоолигосахаридное производное является новым и его обозначили как СК-4416.
Заявители настоящего изобретения провели скрининговые исследования почвенных микроорганизмов с целью выделения микроба, производящего аминоолигосахаридное производное по настоящему изобретению. Выделенный таким образом микроб идентифицировали как вид Streptomyces рода и назвали Streptomyces вид СК-4416. Кроме того, было установлено, что полученное из него аминоолигосахаридное производное является новым и его обозначили как СК-4416.
СК-4416 получают посредством культивирования Streptomyces вида СК-4416 на среде, содержащей источники углерода и азота, в аэробных условиях, применяя культуру со встряхиванием или культуру с постоянным аэробным перемешиванием. В качестве источника углерода можно использовать коммерчески доступные глюкозу, глицерин, мальтозу, крахмал, сахарозу, мелассу и декстрин; в качестве источника азота можно использовать коммерчески доступные соевую муку, жидкость для замачивания зерна, мясной экстракт, муку из семян хлопка, пептон, семя пшеницы, рыбную муку, неорганические соли аммония и NaNO3; в качестве неорганических солей можно использовать CaCO3, NaCl, KCl, MgSO4 и фосфаты. Кроме того, среда для культивирования Streptomyces вида СК-4416, при необходимости, может содержать некоторые ионы металлов, такие как Fe, Mn и Zn, в следовых количествах и противовспенивающий агент, такой как растительные масла, - высшие спирты, включая октадеканол, и соединения кремния. Среда может также содержать любые соединения, облегчающие культуре Streptomyces вида СК-4416 вырабатывать вещество СК-4416 с высоким выходом.
Streptomyces вид СК-4416 культивируют согласно общепринятым в практике способам, с использованием твердых и жидких культур. Культивирование жидкости обычно осуществляют, применяя стационарную культуру, культуру с постоянным перемешиванием, культуру со встряхиванием и культуру с аэрацией, более предпочтительны культура со встряхиванием и погруженная культура с аэрацией. Инкубацию проводят при температуре в диапазоне от 20 до 37oC, более предпочтительно от 25 до 30oC, при нейтральном pH от 6 до 8 в течение периода от 24 до 192 часов, более предпочтительно от 48 до 120 часов.
СК-4416 получают из культуры Streptomyces вида СК-4416 в соответствии с общеизвестными в практике способами очистки, применяя ионообменную, адсорбционную, разделительную и гельфильтрационную хроматографию. СК-4416 можно также выделить способом высокоэффективной жидкостной хроматографии ВЭЖХ или тонкослойной хроматографии (ТСХ).
CK-4416 можно применять при лечении или профилактике инсулин-независимого диабета, гиперлипопротеинемии и ожирения, вызванного гиперлипидемией, или в качестве восстановительного агента при иммунологической недостаточности, а также можно использовать в качестве антибактериального агента.
Кроме того, настоящее изобретение проиллюстрировано следующими далее примерами, которые не ограничивают область изобретения.
Пример 1: Выделение и идентификация Streptomyces вида CK-4416.
Проводят отбор почвенных микроорганизмов с целью выделения микроорганизма, указанного в названии, и выделяют его из лесной почвы, собранной в районе Chochun-Eup, Buk-Kun, Cheju-Do, Korea. Выделенный микроорганизм характеризуют следующим образом.
1. Характеристики роста
Характеристики роста выделенного микроорганизма на разнообразных питательных средах суммированы в приведенной в конце описания табл. 1.
Характеристики роста выделенного микроорганизма на разнообразных питательных средах суммированы в приведенной в конце описания табл. 1.
2. Морфологические характеристики
Микроскопическое исследование Streptomyces вида СК-4416 выявило, что наблюдают одну или три спирали из более чем 20 спор на цепь, которые растут из концов воздушного мицелия, при этом мутовчатого мицелия и фрагментации не наблюдают. Наблюдают овальные споры, которые имеют гладкие поверхности и размеры (0,6 - 0,7) х (0,5 - 1,0) мкм, при этом не наблюдают специфических органелл, таких как склероций и спорангий.
Микроскопическое исследование Streptomyces вида СК-4416 выявило, что наблюдают одну или три спирали из более чем 20 спор на цепь, которые растут из концов воздушного мицелия, при этом мутовчатого мицелия и фрагментации не наблюдают. Наблюдают овальные споры, которые имеют гладкие поверхности и размеры (0,6 - 0,7) х (0,5 - 1,0) мкм, при этом не наблюдают специфических органелл, таких как склероций и спорангий.
3. Влияние температуры роста (инкубация на агаре с отваром из овса в течение 14 дней)
4oC: нет роста
15oC: слабый рост, воздушного мицелия нет
20oC: слабый рост, скудный воздушный мицелий
28oC: умеренный рост, хороший воздушный мицелий
37oC: умеренный рост, хороший воздушный мицелий
45oC: умеренный рост, умеренный воздушный мицелий
55oC: нет роста
4. Физиологические характеристики
1) Гидролиз крахмала (Агар с крахмалом-неорганической солью): (+)
2) Производство меланинового пигмента: (-)
5. Способность усваивания углеродного источника.
4oC: нет роста
15oC: слабый рост, воздушного мицелия нет
20oC: слабый рост, скудный воздушный мицелий
28oC: умеренный рост, хороший воздушный мицелий
37oC: умеренный рост, хороший воздушный мицелий
45oC: умеренный рост, умеренный воздушный мицелий
55oC: нет роста
4. Физиологические характеристики
1) Гидролиз крахмала (Агар с крахмалом-неорганической солью): (+)
2) Производство меланинового пигмента: (-)
5. Способность усваивания углеродного источника.
Streptomyces вид СК-4416 культивируют при температуре 28oC в течение 14 дней на питательной среде Pridham-Gottlieb gar medium (ISN N 9), включающей соответствующие сахара, представленные в Таблице 2 (см. в конце описания) и определяют способность усваивания для этих сахаров.
6. Состав стенок клеток Streptomyces вида СК-4416. Определяют LL-диаминопимелловую кислоту и глицин во фракции стенок клеток.
Из исследования роста, морфологии, физиологии и способности усваивания углеродных источников для микроорганизма, выделенного в настоящем изобретении, в заключение идентифицируют микроорганизм как род Streptomyces, который не описан. В связи с этим новый микроорганизм назван Streptomyces вид СК-4416 и занесен в Коллекцию Типов Культур Кореи (КСТС) и размещен в KRIBB, KIST, PO Box 115, Yusong-Ku, Taejon, 305-600, Korea, an international depository authority (IDA) с входящим номером N КСТС 0131 ВР.
Пример 2: Культура Streptomyces вида СК-4416.
В четыре колбы Эрленмейера на 500 мл добавляют по 100 мл среды для посевной культуры (pH 6,5), содержащей глюкозу 1% (масса/объем), декстрин 1% (масса/объем), NZ -амин (типа А) 0,5% (масса/объем), дрожжевой экстракт 0,5% (масса/объем) и карбонат кальция 0,1% (масса/объем), и стерилизуют при 120oC в течение 15 минут. В каждую из четырех колб вносят 1 платиновую петлю культуры Streptomyces вида СК-4416 на скошенном агаре, полученной из субкультуры, и инкубируют при встряхивании при 27oC в течение 3 дней. Затем к 200 мл материала в 500 мл колбе Эрленмейера добавляют 100 мл культуральной среды (pH 6,5), содержащей растворимый крахмал в количестве 3% (масса/объем), порошок из соевых бобов 1,5% (масса/объем), жидкость для замачивания кукурузы 1,5% (масса/объем), полипептон 0,2% (масса/объем), Na2S2O3 0,1% (масса/объем), карбонат кальция 0,5% (масса/объем), хлорид кобальта 0,0001% (масса/объем), и стерилизуют при 120oC в течение 30 минут. 2% (объем/объем) посевной культуры добавляют к среде и инкубируют при встряхивании со скоростью 240 об/мин при 27oC в течение 3 дней. Количественно определяют СК-4416 путем определения антимикробной активности, используя тестовый организм Comamonas terrigena (АТСС 8461) в соответствии с общеизвестным способом с применением бумажных дисков. Через 3 дня культивирования определяют pH и выход, которые составляют 7,2 и 0,06 мг/мл, соответственно.
Пример 3. Выделение вещества СК-4416 (1).
18 л культуры, полученной в Примере 2, центрифугируют для удаления осадка клеток и собирают 14 л супернатанта. Доводят кислотность супернатанта до величины pH 3,1, вносят в колонку 6 см х 30 см со скоростью потока 50 мл/мин, заполненную активированным углем (Wako Junyaku, Japan), который является адсорбционной смолой, промывают 5 л дистиллированной воды, и элюируют 50% (объем/объем) метанолом. Так как элюат фракционируют по 400 мл, СК-4416 извлекают из фракций NN 3-6. Эти фракции собирают и концентрируют при пониженном давлении, получая 14 г желтого маслянистого вещества. Это вещество растворяют в 50 мл дистиллированной воды и регулируют кислотность раствора до pH 3,1. Полученный раствор вносят в колонку 6 см х 30 см, заполненную Sp-Sephadex(H+) от Sigma Chemical Co., США, при скорости потока 20 мл/минуту, промывают 5 л дистиллированной воды и элюируют 1 N водным раствором аммиака. Так как элюат фракционируют по 400 мл, фракции, содержащие вещество СК-4416, элюируются под NN 3-4. Эти фракции собирают, концентрируют при пониженном давлении и сушат, получая 1 г желтого порошка. Затем этот порошок растворяют в 30 мл дистиллированной воды. Кислотность полученного раствора доводят по pH 3,1, раствор вносят в колонку (3 см х 40 см), заполненную Dawex 50 W-8X (соль пиридина) от Sigma Chemical Co., США, при скорости потока 5 мл/минуту, промывают 2 л дистиллированной воды и элюируют 3 л буферного раствора пиридина-муравьиной кислоты (pH 3,1) с градиентом от О до 0,2М. Так как элюат фракционируют по 15 мл, вещество А извлекают из фракций NN 79-120, а вещество В из фракций NN 129-159, соответственно. Каждый элюат концентрируют при пониженном давлении, получая, соответственно, 500 мг вещества A и 90 мг вещества B в виде светло-желтого порошка.
Пример 4: Выделение вещества СК-4416 (II).
Вещество А, полученное в Примере 3, растворяют в 4 мл дистиллированной воды, вносят в колонку 3 см х 50 см, заполненную Sephadex. Q-10 от Sigma Chemical Co. , США, и элюируют водой. Так как элюат фракционируют по 5 мл, активное вещество выделяют из фракций NN 39-45. Эти фракции концентрируют и сушат, получая 390 мг белого порошка. Аналогично обрабатывают вещество B из Примера 3, получая 50 мг белого порошка.
Пример 5: Выделение вещества СК-4416 (III).
60 мг вещества A, полученного в Примере 4, вносят в колонку для препаративной высокоэффективной жидкостной хроматографии (колонка: Tosoh Amid - 80, растворитель: 60% (объем/объем) ацетонитрил) от Shimadzu, Япония. Среди соединений, представленных общей формулой (I), последовательно элюируются соединение формулы (I), в котором m = 1, n = 2, R1 = метилгидроксид и R2 = водород; соединение формулы (I), в котором m = 0; n = 4, R1 = метилгидроксид и R2 = водород; и соединение формулы (I), в котором m = 1, n = 3, R1 = метилгидроксид и R2 = водород. Три эти элюата концентрируют при пониженном давлении и сушат при замораживании, получая, соответственно, 5 мг, 45 мг и 3 мг белого порошка.
Берут 30 мг вещества B, полученного в Примере 4, и обрабатывают аналогичным образом при аналогичных условиях. Среди соединений, представленных формулой (I), получают, соответственно, 10 мг соединения формулы (I), в котором m = 0, n = 2, R1 = метилгидроксид и R2 = водород; 7 мг соединения формулы (I), в котором m = 1, n = 1, R1 = метилгидроксид и R1 = водород; и 8 мг соединения формулы (I), в котором m = 0, n = 3, R1 = метилгидроксид и R2 = водород.
Пример 6: Идентификация соединения СК-4416.
Соединение СК-4416 идентифицируют посредством определения физико-химических характеристик олигосахаридного производного формулы (I) для соединения, в котором m = 0, n = 4, R1 = метилгидроксид и R2 = водород, применяя физические и химические способы анализа.
1. Цвет и тип: белый порошок
Элементный анализ (см. в Таблице 2а)
3. Молекулярная формула: C37H63NO30
4. Молекулярный вес: 1001, 9
FAB-MS/MS(M+H)+ 1002 (см. Рис. 4)
5. Точка плавления: 162oC
6. Удельное вращение: [α]D = +146o (C 0,1 в H2O)
7. Спектр УФ поглощения (растворитель: вода, конц.= 0,1 мг/мл): наблюдают конечную абсорбцию
8. ИК спектр: ИК спектр измеряют способом с KBr (см. фиг. 1)
Основные длины волн (см-1): 3400; 2900; 1630; 1410; 1390 и 1050.
Элементный анализ (см. в Таблице 2а)
3. Молекулярная формула: C37H63NO30
4. Молекулярный вес: 1001, 9
FAB-MS/MS(M+H)+ 1002 (см. Рис. 4)
5. Точка плавления: 162oC
6. Удельное вращение: [α]D = +146o (C 0,1 в H2O)
7. Спектр УФ поглощения (растворитель: вода, конц.= 0,1 мг/мл): наблюдают конечную абсорбцию
8. ИК спектр: ИК спектр измеряют способом с KBr (см. фиг. 1)
Основные длины волн (см-1): 3400; 2900; 1630; 1410; 1390 и 1050.
9. Спектр ЯМР 1H: Спектр ЯМР 1H измеряют в D2O (см. фиг. 2)
10. Спектр ЯМР 13C: Спектр ЯМР 13C измеряют в D2O (см. фиг. 3)
11. Растворимость: Растворим в воде и этаноле, нерастворим в бензоле и нормальном гексане
12. Цветная реакция: положительная в реакции с нитратом серебра-гидроксидом натрия, в реакции Somoginelson и реакции с перманганатом; отрицательная в реакции с нингидрином и реакции Sakaguchi
13. Кислотные, нейтральный и основные свойства: слабоосновные
14. Тонкослойная хроматография (TLC). R1:O.14 [Tokyo Kasei К. К., силикагель f(S201), Япония] ; растворитель: этилацетат-метанол-вода = 5:3:2 (объем/объем/объем).
10. Спектр ЯМР 13C: Спектр ЯМР 13C измеряют в D2O (см. фиг. 3)
11. Растворимость: Растворим в воде и этаноле, нерастворим в бензоле и нормальном гексане
12. Цветная реакция: положительная в реакции с нитратом серебра-гидроксидом натрия, в реакции Somoginelson и реакции с перманганатом; отрицательная в реакции с нингидрином и реакции Sakaguchi
13. Кислотные, нейтральный и основные свойства: слабоосновные
14. Тонкослойная хроматография (TLC). R1:O.14 [Tokyo Kasei К. К., силикагель f(S201), Япония] ; растворитель: этилацетат-метанол-вода = 5:3:2 (объем/объем/объем).
Кроме того, установлено также, что соединение формулы (I), в котором m = 0, n = 2, R1 = метилгидроксид и R2 = водород, имеет молекулярную формулу C25H43NO20 и молекулярный вес 677,6111; соединение формулы (I), в котором m = 1, n = 1, R1 = метилгидроксид и R2 = водород, имеет молекулярную формулу C25H43NO20 и молекулярный вес 677,6111; соединение формулы (I), в котором m = 0, n = 3, R1 = метилгидроксид и R2 = водород, имеет молекулярную формулу C31H53NO25 и молекулярный вес 839,7514; соединение формулы (I), в котором m = 1, n = 2, R1 = метилгидроксид и R2 = водород, имеет молекулярную формулу C31H53NO25 и молекулярный вес 839,7514; и соединение формулы (I), в котором m = 1, n = 3, R1 = метилгидроксид и R2 = водород, имеет молекулярную формулу C37H63NO30 и молекулярный вес 1001, 8934.
Из анализа приведенных выше результатов установили, что аминоолигосахаридное производное данного изобретения является новым соединением.
Пример 7: Биологическая активность СК-4416. Определяют биологическую активность СК-4416 для соединения аминоолигосахарида, представленного формулой (I), в котором m = 0, n = 4, R1 = метилгидроксид и R2 = водород.
Пример 7-1: Антибактериальная активность.
Антибактериальную активность для грам-положительных и отрицательных бактериальных штаммов определяют на образце 1 мг/мл СК-4416, применяя способ с использованием бумажных дисков. Судя по результатам, не наблюдают активности для грам-положительного бактериального штамма, в то время как для грам-отрицательного бактериального штамма, а именно, Comamonas terrigena (АТСС 8461), получена 24,8 мм зона ингибирования.
Пример 7-2: Ингибирование активности амилазы.
Готовят раствор фермента (здесь далее обозначен как "раствор А"), содержащий амилазу, растворенную в 0,25 М фосфатном буфере (pH 7,0), 0,25 М раствор фосфатного буфера (pH 7,0) (здесь далее обозначен как "раствор В") и 0,04% (вес/объем) раствор крахмала (здесь далее обозначен как "раствор C"), соответственно. Затем объединяют 0,05 мл раствора B, содержащего растворенный СК-4416, 0,1 мл раствора B и 0,05 мл раствора B, инкубируют раствор при 37oC в течение 5 минут и затем инкубируют в течение 30 минут после добавления 0,5 мл раствора C. После инкубации определяют поглощение, при 660 нм для образца СК-4416 (T) и контроля (C), не содержащего образца. В завершение определяют коэффициент полуингибирования (50%) для активности амилазы (IC50), который рассчитывают по приведенному ниже уравнению и который составляет 1,6 • 10-6 М.
Коэффициент ингибирования = (C-T) • 100.
Пример 7-3: Снижение уровня сахара в крови.
Самцам SD крыс, разделенным на две группы по 5 животных в каждой и не принимавшим пищу в течение 12 часов, вводят орально крахмал, 1,5 г/кг, вместе с образцом, 40 мг/кг и 80 мг/кг. Через 1 час после введения у крыс берут кровь и определяют уровень глюкозы в крови способом с применением глюкозооксидазы и сравнивают с контрольной группой, животным которой не давали образец СК-4416. Результаты приведены ниже в Таблице 3 (см. в конце описания). Как можно видеть из Таблицы 3, ясно определено, что СК-4416 данного изобретения, способен снижать уровень сахара в крови, в большей степени, чем любое другое описанное ранее в литературе аминолигосахаридное соединение, например, NS-комплекс.
Пример 7-4: Токсичность.
Тесты на острую токсичность СК-4416 проводят после орального введения 1 г/кг СК-4416 пяти ICR мышам, за которыми наблюдают в течение 14 дней. Результаты выявили, что мыши выживают.
Фармацевтически приемлемые соли получают обычными способами, включающими взаимодействие соединения формулы (I) c основаниями щелочных (Na, K) и щелочноземельных (Ca, Ba, Zn, Mn) металлов, более предпочтительно, с такими основаниями щелочных металлов, как, например, разбавленные растворы гидроксида натрия и карбоната калия. Кроме того, фармацевтически пригодные соли получают обычными способами, включающими реакцию с аминами, такими как, например, триэтиламин, дибензиламин, триэтаноламин, этаноламин, N,N'-дибензилэтилендиамин, прокаин и эквивалентные амины.
Из соединений настоящего изобретения можно получать препаративные формы любым из известных подходящих способов с фармацевтически пригодным носителем и, если необходимо, разбавителем. Например, для орального приема соединения настоящего изобретения можно включать в твердые препараты, такие как таблетки, пилюли, гранулы, порошки, капсулы и подобное, или в жидкие препараты, такие как раствор, суспензия, эмульсия и подобное. Когда препараты применяют для парентерального введения, их можно готовить в виде препаратов для инъекций, препаратов для внутривенных капельных вливаний и подобного. Для приготовления препарата для инъекций соединение предпочтительно растворяют в дистиллированной воде или водном растворе соли, такой как хлорид натрия. Для приготовления препарата для внутривенных капельных вливаний соединение можно растворять в подходящей жидкой среде, такой как физиологический соляной раствор, раствор глюкозы-хлорида натрия и подобное.
Количество активного компонента, который является соединениями формулы (I) настоящего изобретения, в фармацевтической композиции и ее стандартной дозированной форме можно варьировать или регулировать в широких пределах в зависимости от конкретного применения, потенциала конкретного соединения, требуемой концентрации. Обычно количество активного компонента меняется в диапазоне от 0,5% до 90% от веса композиции.
Эффективную дозу соединения настоящего изобретения можно варьировать в зависимости от физического состояния пациентов. В основном, показано, что для достижения нужного результата преимущественно вводить активные соединения в количестве примерно от 50 до 1000 мг на 1 м2 площади поверхности тела.
Пример 8: Биологическая активность СК-4416(11).
Биологическую активность СК-4416 исследовали с помощью пяти аминоолигосахаридных соединений, представленных формулой (I), в которой m, n, R1 и R2 представлены в Таблице 4 в конце описания.
Пример 8-1: Антибактерицидная активность.
С целью определения антибактерицидной активности указанных пяти аминоолигосахаридных соединений общей формулы (I), антибактерицидную активность против грам-отрицательных и грам-положительных бактериальных штаммов определяли способом, как описано в Примере 7-1, за исключением того, что использовали пять соединений, таких как СК-4416. Из результатов видно, что для соединений a1, b, b1, c и d не наблюдали никакой активности в отношении грам-положительных бактерий. Однако зоны ингибирования с диаметром 25,0 мм, 23,3 мм, 14,8 мм и 13,2 мм соответственно были показаны для грам-отрицательного бактериального штамма. В связи с этим Comamonas terrigena (ATCC 8461), которые были известны как возбудители таких болезней, как сепсис и холера, использовали в качестве грам-отрицательных бактерий.
Пример 8-2: Ингибирование действия мальтазы и сахаразы in vitro.
Хорошо известно, что мальтаза и сахараза являются двумя из основных сахаридных гидролаз в организме человека (см.: W.F.Caspary et al., Res. Exp. Med. (Berl), 175: 1-6(1979)). С целью исследования ингибиторной активности указанных пяти соединений общей формулы (I) в отношении мальтазы и сахаразы осуществляли in vitro ферментный анализ аналогично тому, как описано в Примере 7-2, за исключением того, что раствор А заменяли ферментным раствором, содержащим мальтазу или сахаразу, и раствор С заменяли раствором сахара, содержащим мальтозу или сахарозу. Результаты, обобщенные в Таблице 5 (см. в конце описания) показывают, что соединения a1, b, b1, c и d эффективно ингибируют активность сахаразы и мальтазы.
Пример 8-3: Снижение уровня сахара в крови.
Ингибиторную активность in vivo указанных пяти соединений в отношении сахаридных гидролаз исследовали следующим образом: мужские особи крыс Wistar (вес тела 180-230 г), поставляемых фирмой Charles River Labs., Japan, использовали в качестве экспериментальных животных. Трем группам из 7 голодающих крыс вводили перорально (а) 1,5 г/кг веса тела вареного крахмала, (b) 2,0г/кг веса тела мальтозы или (с) 2,0 г/кг веса тела сахарозы. Пятнадцать других групп из 7 голодающих крыс получали те же углеводы, в таких же количествах, как описано выше, одновременно с соединением a1, b, b1, c или d, соответственно, в количестве от 1 до 50 мг/кг веса тела. В качестве контрольной группы семь других крыс получали подходящий объем физиологического раствора. Образцы крови отбирали путем сердечной пункции под эфирной анестезией. Уровни содержания глюкозы в крови (восстанавливаемый сахар) измеряли с использованием Blood Glucose Meter (ONE TOUCHR, Lifescan).
Результаты, представленные в Таблице 6 в конце описания, показывают, что соединения a1, b, b1, с и d значительно ингибируют повышение уровня глюкозы в крови в зависимости от введенного сахара крахмала, мальтозы или сахарозы.
Результаты, представленные в Таблице 6, ясно показывают, что соединения a1, b, b1, c и d можно применять для лечения или профилактики сахарного диабета с высокой эффективностью.
Claims (4)
1. Аминоолигосахарид СК-4416, представленный общей формулой I, и его фармацевтически пригодные соли
отличающийся тем, что:
m равно целому числу 0 или 1;
n равно целому числу от 1 до 4;
m + n равно целому числу от 1 до 5;
R1 обозначает низший алкилгидроксид;
R2 обозначает водород или низший алкил.
отличающийся тем, что:
m равно целому числу 0 или 1;
n равно целому числу от 1 до 4;
m + n равно целому числу от 1 до 5;
R1 обозначает низший алкилгидроксид;
R2 обозначает водород или низший алкил.
2. Ингибитор сахаридгидролазы, содержащий в качестве активных ингредиентов аминоолигосахарид СК-4416 или его фармацевтически пригодные соли по п. 1 и фармацевтически приемлемый носитель.
3. Антибактериальный агент, содержащий в качестве активных ингредиентов аминоолигосахарид СК-4416 или его фармацевтически пригодные соли по п.1 и фармацевтически приемлемый носитель.
4. Способ получения аминоолигосахарида СК-4416 или его фармацевтически приемлемых солей по п.1, включающий стадии культивирования Streptomyces sp. СК-4416 (КСТС 0131ВР) на среде, содержащей источники углерода и азота, в аэробных условиях и выделения СК-4416 хроматографически.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| KR1019940039755A KR960022566A (ko) | 1994-12-30 | 1994-12-30 | 신규한 아미노올리고당 유도체 및 그의 제조방법 |
| KR1994/39755 | 1994-12-30 | ||
| PCT/KR1995/000184 WO1996020945A1 (en) | 1994-12-30 | 1995-12-30 | Novel aminooligosaccharide derivative and process for preparing the same |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU97112927A RU97112927A (ru) | 1999-06-10 |
| RU2134694C1 true RU2134694C1 (ru) | 1999-08-20 |
Family
ID=19405792
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU97112927/04A RU2134694C1 (ru) | 1994-12-30 | 1995-12-30 | Аминоолигосахарид ск-4416, способ его получения, ингибитор сахаридгидролазы и антибактериальный агент |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5866377A (ru) |
| EP (1) | EP0871638B1 (ru) |
| JP (1) | JP2863637B2 (ru) |
| KR (2) | KR960022566A (ru) |
| CN (1) | CN1051559C (ru) |
| AU (1) | AU686920B2 (ru) |
| CA (1) | CA2208707C (ru) |
| DE (1) | DE69527445T2 (ru) |
| RU (1) | RU2134694C1 (ru) |
| WO (1) | WO1996020945A1 (ru) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7022684B2 (en) | 2000-05-24 | 2006-04-04 | Pfizer Inc. | Treatment of rumen acidosis with α-amylase inhibitors |
| US20190300945A1 (en) | 2010-04-05 | 2019-10-03 | Prognosys Biosciences, Inc. | Spatially Encoded Biological Assays |
| PT2556171E (pt) | 2010-04-05 | 2015-12-21 | Prognosys Biosciences Inc | Ensaios biológicos codificados espacialmente |
| US10787701B2 (en) | 2010-04-05 | 2020-09-29 | Prognosys Biosciences, Inc. | Spatially encoded biological assays |
| GB201106254D0 (en) | 2011-04-13 | 2011-05-25 | Frisen Jonas | Method and product |
| US9879313B2 (en) | 2013-06-25 | 2018-01-30 | Prognosys Biosciences, Inc. | Methods and systems for determining spatial patterns of biological targets in a sample |
| CN113186256A (zh) | 2015-04-10 | 2021-07-30 | 空间转录公司 | 生物样本的空间区别、多重核酸分析 |
Family Cites Families (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS58172400A (ja) * | 1982-04-05 | 1983-10-11 | Tokyo Tanabe Co Ltd | 新規なアミノオリゴ糖誘導体 |
| EP0257418B1 (de) * | 1986-08-13 | 1993-05-19 | Hoechst Aktiengesellschaft | Oxiran-Pseudooligosaccharide, Verfahren zu deren Herstellung, deren Verwendung und pharmazeutische Präparate |
| JPH0319239A (ja) * | 1989-06-15 | 1991-01-28 | Matsushita Electron Corp | 半導体装置の製造方法 |
-
1994
- 1994-12-30 KR KR1019940039755A patent/KR960022566A/ko unknown
-
1995
- 1995-12-30 EP EP95941922A patent/EP0871638B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1995-12-30 CA CA002208707A patent/CA2208707C/en not_active Expired - Fee Related
- 1995-12-30 JP JP8520864A patent/JP2863637B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1995-12-30 KR KR1019970704330A patent/KR100230961B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1995-12-30 DE DE69527445T patent/DE69527445T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1995-12-30 WO PCT/KR1995/000184 patent/WO1996020945A1/en active IP Right Grant
- 1995-12-30 RU RU97112927/04A patent/RU2134694C1/ru not_active IP Right Cessation
- 1995-12-30 CN CN95197214A patent/CN1051559C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1995-12-30 AU AU43174/96A patent/AU686920B2/en not_active Ceased
- 1995-12-30 US US08/875,146 patent/US5866377A/en not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Chemical Abstarts, v.100, N 19, 07. May 1984 (Columbus, Ohio, USA) p.421, obstract N 155200 x , Tokyo Tanabe Co., Ltd, "Production of aminooligosacchanides", Jpn. Kokai Tokkyo Koho JP 58-172400. * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH10508033A (ja) | 1998-08-04 |
| AU686920B2 (en) | 1998-02-12 |
| DE69527445T2 (de) | 2002-10-31 |
| KR960022566A (ko) | 1996-07-18 |
| DE69527445D1 (de) | 2002-08-22 |
| US5866377A (en) | 1999-02-02 |
| CA2208707C (en) | 2000-02-22 |
| CN1051559C (zh) | 2000-04-19 |
| WO1996020945A1 (en) | 1996-07-11 |
| CA2208707A1 (en) | 1996-07-11 |
| CN1171790A (zh) | 1998-01-28 |
| EP0871638B1 (en) | 2002-07-17 |
| JP2863637B2 (ja) | 1999-03-03 |
| KR100230961B1 (ko) | 1999-12-01 |
| AU4317496A (en) | 1996-07-24 |
| EP0871638A1 (en) | 1998-10-21 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| KR850001050B1 (ko) | 악타플라닌의 가비당체의 제조방법 | |
| EP0182315B1 (en) | Novel antibiotic nk84-0218 pharmaceutical compositions containing it and process for the production of the same | |
| CA1153966A (en) | Physiologically active substance, ebelactone and production thereof | |
| RU2134694C1 (ru) | Аминоолигосахарид ск-4416, способ его получения, ингибитор сахаридгидролазы и антибактериальный агент | |
| JPS6244553B2 (ru) | ||
| CA1225333A (en) | Antiviral agents | |
| US4792522A (en) | Rigolettone antitumor complex | |
| CA2012013C (en) | Antitumor antibiotic bmy-41339 | |
| JPS5831327B2 (ja) | 動物用医薬組成物 | |
| EP0042172B1 (en) | Antibiotic compounds, pharmaceutical compositions containing such compounds, process for production thereof | |
| EP0702691B1 (en) | New thiodepsipeptide isolated from a marine actinomycete | |
| JPH1045738A (ja) | 抗生物質エポキシキノマイシンｃおよびｄとその製造法ならびに抗リウマチ剤 | |
| EP0808843B1 (en) | Novel macrolide compound 0406 | |
| EP0253413A2 (en) | New antibiotics called "mureidomycins A, B, C and D" A process for their preparation and their therapeutic use | |
| JPS6253157B2 (ru) | ||
| EP0025713B1 (en) | An anthracycline antibiotic and a pharmaceutical composition containing the same | |
| JP2004137175A (ja) | 新規抗生物質キガマイシン類とその用途 | |
| JP3068700B2 (ja) | 新規トレハゾリン誘導体およびその製造法 | |
| JP2849460B2 (ja) | 新規化合物ａ―７０６１５物質及びその製造法 | |
| JPH0625095B2 (ja) | 抗生物質ｓｆ−２４１５物質およびその製造法 | |
| EP0423247B1 (en) | Coumamidine compounds | |
| JPS6256487A (ja) | 新規抗生物質５−デオキシエンテロシン | |
| JPS61289898A (ja) | 植物病原菌胞子発芽抑制因子の製造方法 | |
| JPS6253518B2 (ru) | ||
| JPH0325440B2 (ru) |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20031231 |