RU2125043C1 - Производные октагидронафталиноксима, фармацевтическая композиция, способ лечения и способ их получения - Google Patents

Производные октагидронафталиноксима, фармацевтическая композиция, способ лечения и способ их получения Download PDF

Info

Publication number
RU2125043C1
RU2125043C1 RU93005182/04A RU93005182A RU2125043C1 RU 2125043 C1 RU2125043 C1 RU 2125043C1 RU 93005182/04 A RU93005182/04 A RU 93005182/04A RU 93005182 A RU93005182 A RU 93005182A RU 2125043 C1 RU2125043 C1 RU 2125043C1
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
multiplet
doublet
compound
methyl
esters
Prior art date
Application number
RU93005182/04A
Other languages
English (en)
Other versions
RU93005182A (ru
Inventor
Хироси Коген (JP)
Хироси Коген
Теисиро Кога (JP)
Теисиро Кога
Тору Комаи (JP)
Тору Комаи
Харуо Изабуси (JP)
Харуо Изабуси
си Масааки Кураба (JP)
Масааки Курабаяси
Original Assignee
Санкио Компани Лимитед
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Санкио Компани Лимитед filed Critical Санкио Компани Лимитед
Publication of RU93005182A publication Critical patent/RU93005182A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2125043C1 publication Critical patent/RU2125043C1/ru

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D295/00—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D295/04—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms
    • C07D295/08—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by singly bound oxygen or sulfur atoms
    • C07D295/084—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by singly bound oxygen or sulfur atoms with the ring nitrogen atoms and the oxygen or sulfur atoms attached to the same carbon chain, which is not interrupted by carbocyclic rings
    • C07D295/088—Heterocyclic compounds containing polymethylene-imine rings with at least five ring members, 3-azabicyclo [3.2.2] nonane, piperazine, morpholine or thiomorpholine rings, having only hydrogen atoms directly attached to the ring carbon atoms with substituted hydrocarbon radicals attached to ring nitrogen atoms substituted by singly bound oxygen or sulfur atoms with the ring nitrogen atoms and the oxygen or sulfur atoms attached to the same carbon chain, which is not interrupted by carbocyclic rings to an acyclic saturated chain
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C251/00—Compounds containing nitrogen atoms doubly-bound to a carbon skeleton
    • C07C251/32—Oximes
    • C07C251/34—Oximes with oxygen atoms of oxyimino groups bound to hydrogen atoms or to carbon atoms of unsubstituted hydrocarbon radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C251/00—Compounds containing nitrogen atoms doubly-bound to a carbon skeleton
    • C07C251/32—Oximes
    • C07C251/50—Oximes having oxygen atoms of oxyimino groups bound to carbon atoms of substituted hydrocarbon radicals
    • C07C251/52—Oximes having oxygen atoms of oxyimino groups bound to carbon atoms of substituted hydrocarbon radicals of hydrocarbon radicals substituted by halogen atoms or by nitro or nitroso groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C251/00—Compounds containing nitrogen atoms doubly-bound to a carbon skeleton
    • C07C251/32—Oximes
    • C07C251/50—Oximes having oxygen atoms of oxyimino groups bound to carbon atoms of substituted hydrocarbon radicals
    • C07C251/54—Oximes having oxygen atoms of oxyimino groups bound to carbon atoms of substituted hydrocarbon radicals of hydrocarbon radicals substituted by singly-bound oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C251/00—Compounds containing nitrogen atoms doubly-bound to a carbon skeleton
    • C07C251/32—Oximes
    • C07C251/50—Oximes having oxygen atoms of oxyimino groups bound to carbon atoms of substituted hydrocarbon radicals
    • C07C251/58—Oximes having oxygen atoms of oxyimino groups bound to carbon atoms of substituted hydrocarbon radicals of hydrocarbon radicals substituted by nitrogen atoms not being part of nitro or nitroso groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C251/00—Compounds containing nitrogen atoms doubly-bound to a carbon skeleton
    • C07C251/32—Oximes
    • C07C251/50—Oximes having oxygen atoms of oxyimino groups bound to carbon atoms of substituted hydrocarbon radicals
    • C07C251/60—Oximes having oxygen atoms of oxyimino groups bound to carbon atoms of substituted hydrocarbon radicals of hydrocarbon radicals substituted by carboxyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C255/00—Carboxylic acid nitriles
    • C07C255/49—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton
    • C07C255/54—Carboxylic acid nitriles having cyano groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton containing cyano groups and etherified hydroxy groups bound to the carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D261/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-oxazole or hydrogenated 1,2-oxazole rings
    • C07D261/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-oxazole or hydrogenated 1,2-oxazole rings not condensed with other rings
    • C07D261/06—Heterocyclic compounds containing 1,2-oxazole or hydrogenated 1,2-oxazole rings not condensed with other rings having two or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D261/08—Heterocyclic compounds containing 1,2-oxazole or hydrogenated 1,2-oxazole rings not condensed with other rings having two or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D307/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom
    • C07D307/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D307/34—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D307/38—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one oxygen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D307/40—Radicals substituted by oxygen atoms
    • C07D307/42—Singly bound oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D319/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having two oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D319/04—1,3-Dioxanes; Hydrogenated 1,3-dioxanes
    • C07D319/06—1,3-Dioxanes; Hydrogenated 1,3-dioxanes not condensed with other rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D333/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
    • C07D333/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom
    • C07D333/06—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings not substituted on the ring sulphur atom with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D333/14—Radicals substituted by singly bound hetero atoms other than halogen
    • C07D333/16—Radicals substituted by singly bound hetero atoms other than halogen by oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
    • C12N1/145—Fungal isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
    • C12P17/02—Oxygen as only ring hetero atoms
    • C12P17/06—Oxygen as only ring hetero atoms containing a six-membered hetero ring, e.g. fluorescein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/04—Systems containing only non-condensed rings with a four-membered ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/06—Systems containing only non-condensed rings with a five-membered ring
    • C07C2601/08—Systems containing only non-condensed rings with a five-membered ring the ring being saturated
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/12—Systems containing only non-condensed rings with a six-membered ring
    • C07C2601/14—The ring being saturated
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2602/00—Systems containing two condensed rings
    • C07C2602/02—Systems containing two condensed rings the rings having only two atoms in common
    • C07C2602/14—All rings being cycloaliphatic
    • C07C2602/26—All rings being cycloaliphatic the ring system containing ten carbon atoms
    • C07C2602/28—Hydrogenated naphthalenes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2603/00—Systems containing at least three condensed rings
    • C07C2603/56—Ring systems containing bridged rings
    • C07C2603/58—Ring systems containing bridged rings containing three rings
    • C07C2603/70—Ring systems containing bridged rings containing three rings containing only six-membered rings
    • C07C2603/74—Adamantanes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
    • C12R2001/80—Penicillium

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Indole Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Heterocyclic Compounds That Contain Two Or More Ring Oxygen Atoms (AREA)
  • Heterocyclic Compounds Containing Sulfur Atoms (AREA)

Abstract

Производные октагидронафталиноксима пригодны для фармацевтической композиции ингибирующей расстройства, возникающие в результате нарушения баланса холестерина. Игибирование достигается в дозе 1-10 мг в день. Производные октагидронафталиноксима формулы I, где х-С1-C10-алкил; А-С1-С10-алкилен; R - водород; Y - водород, фенил, возможно замещенный заместителями, включающими: галоген С1-С4-алкокси, или представляет гетероциклическую группу с 5 или 6 кольцевыми атомами, 1-3 из которых азот и/или кислород и/или сера. Гетероциклическая группа возможно замещена по крайней мере одним С1-C5-алкилом. Описывается фармацевтическая композиция для ингибирования биосинтеза/холестерина, где в качестве активного соединения она содержит соединение формулы I или его фармацевтически приемлемые соли или сложные эфиры в эффективном количестве. Предложен способ ингибирования расстройств, возникающих в результате нарушения баланса холестерина, путем введения млекопитающим соединение формулы I и способ получения производных октагидронафталиноксима формулы I, заключающийся в том, что соединение формулы II, где R, X, У, А указаны выше, а Ra - низший алкил, низший алкенил или фенил, подвергают окислению с получением соединения формулы III, где R, Y, Ra, A указаны выше, с последующей, в случае необходимости, его деэтерификацией или превращением его в соль. 4 с. и 15 з.п. ф-лы, 4 табл.
Figure 00000001

Figure 00000002

Description

Настоящее изобретение относится к ряду новых производных октагидронафталиноксима, которые обладают способностью ингибировать биосинтез холестерина. Изобретение также предоставляет способы и композиции, использующие эти соединения, а также способы их получения.
Известен ряд соединений, которые могут быть в общем виде описаны как 7-(замещенный 1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил)-3,5-дигидроксигептаноаты, из которых наиболее близкими считаются соединения, имеющие формулу A
Figure 00000007

в которой
A, R, X и Y имеют в основном значения, определенные здесь ниже в отношении соединений настоящего изобретения).
Эти соединения описываются, между прочим, в европейской патентной публикации N 314435, в которой описываются также более подробно, чем в данном описании, разработки и предшествующие исследования этих типов соединений. Эти соединения формулы A мы считаем наиболее близкими соединениями к соединениям настоящего изобретения. Соединения предшествующего уровня техники, также как и соединения настоящего изобретения, обладают способностью ингибировать биосинтез холестерина, и таким образом, могут использоваться для лечения и профилактики различных заболеваний, вызываемых гиперхолестеринемией, таких как атеросклероз и различные сердечные нарушения.
Другими, аналогичными классами соединений, которые также имеют некоторое сходство с соединениями настоящего изобретения, являются соединения, описанные в японской патентной заявке Кокаи N Sho 60-123445 (европейская патентная публикация N 142146) и в Journal of Medicinal Chemistry 32, 197 (1989). Они могут быть представлены формулами B и C
Figure 00000008

Figure 00000009

в которых
E представляет группу формулы -CH2CH2-, -CH=CH- или -(CH2)3-;
A1 представляет атом водорода или низшую алкильную группу;
A2 представляет низшую алкильную группу;
A3 представляет атом водорода или метильную группу;
A4, A5 и A6, которые являются одинаковыми или отличаются друг от друга, каждый представляет атом водорода, атом галогена, низшую алкильную группу или незамещенную фенильную группу.
Соединения, соответствующие этим соединениям формулы B и C, но имеющие гидроксигруппу в 5-положении вместо 5-оксо группы, также известны. Известно, что они обладают способностью ингибировать биосинтез холестерина, которая выше, чем способность соответствующих 5-оксосоединений.
В настоящее время мы совершенно неожиданно обнаружили, что 5-оксосоединения, соответствующие 5-гидроксисоединениям формулы A, обладают гораздо большей ингибирующей активностью биосинтеза холестерина, чем 5-гидроксисоединения формулы A.
Таким образом, настоящее изобретение предлагает новые соединения формулы I
Figure 00000010

в которой
R представляет атом водорода;
X представляет алкильную группу, имеющую от 1 до 10 атомов углерода;
A представляет алкиленовую группу, имеющую от 1 до 10 атомов углерода;
Y представляет атом водорода, фенильную группу, необязательно замещенную по крайней мере одним заместителем, выбранным из галогена и C1-C4 алкокси; или гетероциклическую группу, имеющую 5 или 6 кольцевых атомов, из которых от 1 до 3 является гетероатомами, выбранными из группы, состоящей из атомов азота, кислорода и серы; причем указанная гетероциклическая группа является незамещенной или имеет по крайней мере один C1-C5 алкильный заместитель,
и их фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры.
Изобретение также предлагает фармацевтическую композицию, включающую агент для ингибирования биосинтеза холестерина в смеси с фармацевтически приемлемым носителем или разбавителем, в которой указанный агент выбран из группы, состоящей из соединений формулы I, определено выше, и их фармацевтически приемлемых солей и сложных эфиров.
Изобретение далее предлагает способ лечения млекопитающих, страдающих от расстройств, возникающих в результате дисбаланса холестерина в крови, который предусматривает назначение млекопитающему для приема эффективного количества агента, ингибирующего биосинтез холестерина, в котором указанный агент выбран из группы, состоящей из соединений формулы I, определенной выше, и их фармацевтически приемлемых солей и сложных эфиров.
Изобретение также прелагает способы получения соединений настоящего изобретения, которые описываются более подробно ниже в данном описании.
В приведенной выше формуле I, когда X представляет алкильную группу, ею может быть алкильная группа с прямой или разветвленной цепью, имеющая от 1 до 10 атомов углерода, предпочтительно, от 1 до 7 атомов углерода, например, метильная, этильная, пропильная, изопропильная, бутильная, втор-бутильная, изобутильная, трет-бутильная, пентильная, 1-метилбутильная, 2-метилбутильная, изопентильная, 1,1-диметилпропильная, неопентильная, 1,2-диметилпропильная, 1-этилпропильная, гексильная, 1-метилпентильная, 2-метилпентильная, 1,1-диметилбутильная, 1,3-диметилбутильная, 1-этилбутильная, 2-этилбутильная, 1-метил-1-этилпропильная, гептильная, 1-метил-1-этилбутильная, 2-метил-2-этилбутильная, октильная, 1-метилгептильная, 2-этилгексильная, 1,1,3,3-тетраметилбутильная, нонильная, децильная или 3,7-диметилоктильная группа.
Группа A представляет алкиленовую группу, имеющую от 1 до 10 атомов углерода, предпочтительно от 1 до 5 атомов углерода. Данная группа может быть группой с прямой или разветвленной цепью, и две "свободные" валентности могут быть у одного и того же атома углерода (в данном случае группа известна иногда как "алкилиденовая" группа), или они могут быть у разных атомов углерода. Примеры таких групп включают метилен, этилиден, этилен, 1-метилэтилен, триметилен, 1,2-диметилэтилен, 1-этилэтилен, 1-метилтриметилен, 2-метилтриметилен, тетраметилен, 1-пропилэтилен, 1-этил-2-метилэтилен, 1-этилтриметилен, 2-этилтриметилен, 1,3-диметилтриметилен, 1-метилтетраметилен, 2-метилтетраметилен, пентаметилен, 1-бутилэтилен, 1-метил-2-пропилэтилен, 1,2-диэтилэтилен, 1-метил-1-пропилэтилен, 2-пропилтриэтилен, 1-этил-3-метилтриметилен, 1-этилтетраметилен, 2-этилтетраметилен, 1,3-диметилтетраметилен, 1-метилпентаметилен, 2-метилпентаметилен, 3-метилпентаметилен, гексаметилен, 1-пентилэтилен, 1-бутил-2-метилэтилен, 1-этил-2-пропилэтилен, 1-бутилтриметилен, 2-бутил-триметилен, 1,3-диэтилтриметилен, 1-метил-3-пропилтриметилен, 1-пропилтетраметилен, 2-пропилтетраметилен, 1-этил-4-метилтетраметилен, 3-этил-1-метилтетраметилен, 1-этилпентаметилен, 3-этилпентаметилен, 1,3-диметилпентаметилен, 1-метилгексаметилен, 3-метилгексаметилен, гептаметилен, 1-гексилэтилен, 1-метил-2-пентилэтилен, 1-бутил-2-этилэтилен, 1,2-дипропилэтилен, 1-пентилтриметилен, 2-пентилтриметилен, 1-бутил-3-метилтриметилен, 1-бутил-2-метилтриметилен, 1-этил-3-пропилтриметилен, 1,2-диметил-3-пропилтриметилен, 1-бутилтетраметилен, 1-метил-4-пропилтетраметилен, 1-пропилпентаметилен, 3-пропилпентаметилен, 2-этил-4-метилпентаметилен, 1-этилгексаметилен, 3-этилгексаметилен, 1,3-диметилгексаметилен, 1-метилгептаметилен, 4-метилгептаметилен, октаметилен и 2,6-диметилоктаметилен.
Когда Y представляет гетероциклическую группу, ею может быть простая 5- или 6-членная гетероциклическая группа, содержащая от 1 до 3 атомов кислорода и/или атомов серы и/или атомов азота, которая может быть замещенной или незамещенной. Когда группа содержит 3 гетероатома, предпочитается, чтобы 1, 2 или 3 из них были атомами азота, и соответственно, чтобы 2, 1 или 0 были атомами кислорода или серы. Более предпочтительно группа содержит 1 или 2 гетероатома; которым, когда содержится один гетероатом, может быть атом азота, кислорода или серы, или, когда имеется два гетероатома, предпочтительно один из них является атомом азота, а другой - атомом азота, кислорода или серы. Примеры незамещенных групп включают 2-фурил, 3-фурил, 2-тиенил, 3-тиенил, 2-тиазолил, 4-тиазолил, 1-пирролил, 2-пирролил, 3-пиридил, 4-пиридил, 2-пиримидинил, 5-пиримидинил, 2-пиранил, 4-пиранил, 3-изоксазолил, 4-изоксазолил, 5-изоксазолил, 2-оксазолил и 5-оксазолильная группа.
Альтернативно ею может быть 5- или 6-членная насыщенная гетероциклическая группа, содержащая от 1 до 3 атомов кислорода и/или атомов азота, которая может быть замещенной или незамещенной. Когда данная группа содержит 3 гетероатома, предпочитается, чтобы 1, 2 или 3 из них были атомами азота, и соответственно, чтобы 2, 1 или 0 были атомами кислорода или серы. Более предпочтительно данная группа содержит 1 или 2 гетероатома, которым, когда имеется один гетероатом, может быть атом азота, кислорода или серы, или, когда содержится два гетероатома, предпочтительно одним из них является атом азота, а другим - атом азота, кислорода или серы, или оба являются атомами кислорода.
Примеры незамещенных групп включают 2-тетрагидрофурил, 3-тетрагидрофурил, 2-тетрагидротиенил, 3-тетрагидротиенил, 1-пирролидинил, 3-пирролидинил, 2-пиперазил, пиперидино, 2-пиперидил, морфолино, 3-морфолинил, 2-тетрагидропиранил, 4-тетрагидропиранил, 1, 4- диоксан-2-ил, 1,3-диоксан-4-ил и 1,3-диоксан-5-ильную группу.
Гетероциклические группы, представленные символом Y, могут быть замещенными или незамещенными, и, если они являются замещенными, заместители выбраны из C1 - C5-алкильных групп.
(1-5)C алкильные группы, могут быть группами с прямой или разветвленной цепью, такими как метильная, этильная, пропильная, бутильная и пентильная группы.
Поскольку соединения настоящего изобретения обязательно содержать по крайней мере одну карбоксигруппу, эти соединения являются кислотами и таким образом могут образовывать соли и сложные эфиры. Нет каких-либо особых ограничений в отношении характера таких солей и эфиров при условии, что, когда они предназначаются для терапевтического использования, они должны быть "фармацевтически приемлемыми", что, как хорошо известно специалистам в данной области, означает, что они не должны иметь пониженную активность (или неприемлемо повышенную токсичность) по сравнению со свободными кислотами. Когда эти соединения предназначаются для нетерапевтического использования, например, в качестве промежуточных продуктов при получении других соединений, даже эти ограничения неприменимы.
Примеры сложноэфирных групп включают:
алкильные группы, имеющие от 1 до 20 атомов углерода, более предпочтительно от 1 до 10 атомов углерода, еще более предпочтительно от 1 до 7 атомов углерода, и наиболее предпочтительно от 1 до 5 атомов углерода, такие как группы, примеры которых приведены в отношении алкильных групп, которые могут быть представлены символом X, и высшие алкильные группы, хорошо известные в технике, такие как додецил, тридецил, пентадецил, октадецил, нонадецильная и икозильная группы, предпочтительно метил, этил, пропил, изопропил, бутил, изобутил, трет-бутильная и пентильная группы, но наиболее предпочтительно метильная, этильная и трет-бутильная группы;
циклоалкильные группы, имеющие от 3 до 7 атомов углерода, например циклопропильная, циклобутильная, циклопентильная, циклогексильная и циклогептильная группы;
аралкильные группы, в которых алкильная часть имеет от 1 до 3 атомов углерода, а арильная часть представляет карбоциклическую ароматическую группу, имеющую от 6 до 14 атомов углерода, которая может быть замещенной или незамещенной, хотя предпочтительными являются незамещенные группы; обычно мы предпочитаем аралкильные группы, имеющие в общем от 7 до 9 атомов углерода; примеры таких аралкильных групп включают бензил, фенэтил, 1-фенэтил, 3-фенилпропил, 2-фенилпропил, 1-нафтилметил, 2-нафтилметил, 2-(2-нафтил)этил, 2-(2-нафтил)этил, бензгидрил, (т.е. дифенилметил), трифенилметил: бис(о-нитрофенил)метил, 9-антрилметил, 2,4,6- триметилбензил, 4-бромбензил, 2-нитробензил, 4-нитробензил, 3-нитробензил, 4-метоксибензил и пиперонильная группа;
алкенильные группы, имеющие от 2 до 10 атомов углерода, более предпочтительно от 3 до 10 атомов углерода, и еще более предпочтительно от 3 до 5 атомов углерода, такие как винильная, аллильная, 2-метилаллильная, 1-пропенильная, изопропенильная, 1-бутенильная, 2-бутенильная, 3-бутенильная, 1-пентенильная, 2-пентенильная, 3-пентенильная, 4-пентенильная, 1-гексенильная, 2-гексенильная, 3-гексенильная, 4-гексенильная, 5-гексенильная, 1-гептенильная, 1-октенильная, 1-ноненильная и 1-деценильная группы, из которых наиболее предпочтительными являются винильная, аллильная, 2-метилаллильная, 1-пропенильная, изопропенильная и бутенильная группы и наиболее предпочтительны аллильная и 2-метилалльная группы.
Галоидированные алкильные группы, имеющие от 1 до 6, предпочтительно от 1 до 4 атомов углерода, в которых алкильная часть является такой, как определена и проиллюстрирована примерами в отношении алкильных групп, приведенных выше, а атомом галогена является хлор, фтор, бром или иод, такие как хлорметильная, бромметильная, иодметильная, фторметильная, трихлорметильная, трифторметильная, дихлорметильная, дифторметильная, 2,2,2-трихлорэтильная, 2-галоидэтильная (например, 2-хлорэтильная, 2-фторэтильная, 2-бромэтильная или 2-иодэтильная), 2,2-диброэтильная и 2,2,2-трибромэтильная группы;
замещенные силилалкильные группы, в которых алкильной частью является группа, определенная и проиллюстрированная примерами выше, а силильная группа имеет до 3 заместителей, выбранных из алкильных групп, имеющих от 1 до 6 атомов углерода, и фенильных групп, которые являются незамещенными или имеют по крайней мере один заместитель, выбранный из заместителей Д, определенных и проиллюстрированных примерами выше, например, 2-триметилсилилэтильную группу;
фенильные группы, в которых фенильная группа является незамещенной или замещенной, предпочтительно по крайней мере одной алкильной группой, имеющей от 1 до 4 атомов углерода, или ациламино группой, например, фенильную, толильную и бензамидофенильную группы;
фенацильные группы, которые могут быть незамещенными или имеют по крайней мере один из заместителей Д, определенных и показанных в виде примеров выше, например, саму фенацильную группу или п-бромфенацильную группу;
циклические и ациклические терпенильные группы, например, геранильную, нерильную, линалильную, фитильную, ментильную (особенно м- и п-ментильную), туйильную, карильную, пинанильную, борнильную, камфенильную и норборненильную группы;
алкоксиметильные группы, в которых алкокси часть имеет от 1 до 6, предпочтительно от 1 до 4 атомов углерода, и может быть сама по себе замещена единственной незамещенной алкокси группой, такую как метоксиметильную, этоксиметильную, пропоксиметильную, изопропоксиметильную, бутоксиметильную и метоксиэтоксиметильную группы;
алифатические ацилоксиалкильные группы, в которых ацильная группа предпочтительно является алканоильной группой, и более предпочтительно, алканоильной группой, имеющей от 2 до 6 атомов углерода, а алкильная часть имеет от 1 до 6 и предпочтительно от 1 до 4 атомов углерода, такие как ацетоксиметильную, пропионилоксиметильную, бутирилоксиметильную, изобутирилоксиметильную, пивалоилоксиметильную, 1-пивалоилоксиэтильную, 1-ацетоксиэтильную, 1-изобутирилоксиэтильную, 1-пивалоилоксипропильную, 2-метил-1-пивалоилоксипропильную, 2-пивалоилоксипропильную, 1-изобутирилоксиэтильную, 1-изобутирилоксипропильную, 1-ацетоксипропильную, 1-ацетокси-2-метилпропильную, 1-пропионилоксиэтильную, 1-пропионилоксипропильную, 2-ацетоксипропильную и 1-бутирилоксиэтильную группы;
циклоалкилзамещенные алифатические ацилоксиалкильные группы, в которых ацильная группа предпочтительно представляет алканоильную группу и более предпочтительно алканоильную группу, имеющую от 2 до 6 атомов углерода, циклоалкильный заместитель имеет от 3 до 7 атомов углерода, а алкильная часть имеет от 1 до 6, предпочтительно от 1 до 4, атомов углерода, такие как (циклогексилацетокси)метильную, 1-(циклогексилацетокси)этильную, 1-(циклогексилацетокси)пропильную, 2-метил-1-(циклогексилацетокси)пропильную, (циклопентилацетокси)метильную, 1-(циклопентилацетокси)-этильную, 1-(циклопентилацетокси)пропильную и 2-метил-1-(циклопентилацетокси)пропильную группы;
алкоксикарбонилоксиальные группы, особенно 1-(алкоксикарбонилокси)этильные группы, в которых алкокси часть имеет от 1 до 10, предпочтительно от 1 до 6, и более предпочтительно от 1 до 4, атомов углерода, а алкильная часть имеет от 1 до 6, предпочтительно от 1 до 4, атомов углерода, такие как 1-метоксикарбонилоксиэтильную, 1-этоксикарбонилоксиэтильную, 1-пропоксикарбонилоксиэтильную, 1-изопропоксикарбонилоксиэтильную, 1-бутоксикарбонилоксиэтильную, 1-изобутоксикарбонилоксиэтильную, 1-втор-бутоксикарбонилоксиэтильную, 1-трет-бутоксикарбонилоксиэтильную, 1-(1-этилпроксикарбонилокси)этильную и 1-(1,1-дипропилкарбонилокси)этильную группы и другие алкоксикарбонилалкильные группы, в которых и алкокси, и алкильная группы имеют от 1 до 6, предпочтительно от 1 до 4, атомов углерода, такие как 2-метил-1-(изопропоксикарбонил)-оксипропильную, 2-(изопропоксикарбонилокси)пропильную, изопропоксикарбонилоксиметильную, трет-бутоксикарбонилоксиметильную, метоксикаронилоксиметильную и этоксикарбонилоксиметильную группы;
циклоалкилкарбонилоксиалкильные и циклоалкилоксикарбонилоксиалкильные группы, в которых циклоалкильная группа имеет от 3 до 10, предпочтительно от 3 до 7, атомов углерода, является моно- или полициклической и необязательно замещена по крайней мере одной (и предпочтительно только одной) алкильной группой, имеющей от 1 до 4 атомов углерода (например, выбранной из тех алкильных групп, примеры которых приведены выше), а алкильная часть имеет от 1 до 6, предпочтительно от 1 до 4 атомов углерода (например, выбранная из алкильных групп, примеры которых приведены выше), и наиболее предпочтительно является метилом, этилом или пропилом, например, 1-метилциклогексилкарбонилоксиметил, 1-метилциклогексилоксикарбонилоксиметил, циклопентилоксикарбонилоксиметил, циклопентилкарбонилоксиметил, 1-циклогексилоксикарбонилоксиэтил, 1-циклогексилкарбонилоксиэтил, 1-циклопентилоксикарбонилоксиэтил, 1-циклопентилкарбонилоксиэтил, 1-циклогептилоксикарбонилоксиэтил, 1-циклогептилкарбонилоксиэтил, 1-метилциклопентилкарбонолоксиметил, 1-метилциклопентилоксикарбонилоксиметил, 2-метил-1-(1-метилциклогексилкарбонилокси-пропил, 1-(1-метилциклогексилкарбонилокси)пропил, 2-(1-метилциклогексилкарбонилокси)пропил, 1-(циклогексилкарбонилокси)пропил, 2-(циклогексилкарбонилокси)пропил, 2-метил-1-(1-метилциклопентилкарбонилокси)пропил, 1-(1-метилциклопентилкарбонилокси)пропил, 2-(1-метилциклопентилкарбонилокси)пропил, 1-(циклопентилкарбонилокси)пропил, 2-(циклопентилкарбонилокси)пропил, 1-(1-метилциклопентилкарбонилокси)этил, 1-(1-метилциклопентилкарбонилокси)пропил, адамантилоксикарбонилоксиметил, адамантилкарбонилоксиметил, 1-адамантилоксикарбонилоксиэтил и 1-адамантилкарбонилоксиэтильную группы;
циклоалкилалкоксикарбонилоксиалкильные группы, в которых алкокси группа имеет единственный циклоалкильный заместитель, причем циклоалкильный заместитель имеет от 3 до 10, предпочтительно от 3 до 7, атомов углерода и является моно- или поли-циклическим, например, циклопропил- метоксикарбонилоксиметильную, циклобутилметоксикарбонилоксиметильную, циклопентилметоксикарбонилоксиметильную, циклогексилметоксикарбонилоксиметильную, 1-(циклопропилметоксикарбонилокси)этильную, 1-(циклобутилметоксикарбонилокси)-этильную, 1-(циклопентилметоксикарбонилокси)этильную и 1-(циклогексилметоксикарбонилокси)этильную группы;
терпенилкарбонилоксиалкильные и терпенилоксикарбонилоксиалкильные группы, в которых терпенильная группа является такой, как проиллюстрированы примерами выше, и является предпочтительно циклической терпенильной группой, например, 1-(ментилоксикарбонилокси)этильную, 1-(ментилкарбонилокси)-этильную, ментилкарбонилоксиметильную, 1-(3-пинанилоксикарбонилокси)-этильную, метилоксикарбонилоксиметильную, 1-(3-пинанилкарбонилокси)этильную, 3-пинанилоксикарбонилоксиметильную и 3-пинанилкарбонилоксиметильную группы;
5-алкил или 5-фенил [которые могут быть замещены по крайней мере одним из заместителей Д, определенных и проиллюстрированных примерами выше] (2-оксо-1,3-диоксолен-4-мл)алкильные группы, в которых каждая алкильная группа (которые могут быть одинаковыми или различными) имеет от 1 до 6, предпочтительно от 1 до 4, атомов углерода, например, (5-метил-2-оксо-1,3-диоксолен-4-ил)метил, (5-фенил-2-оксо-1,3-диоксолен-4-ил)метил, (5-изопропил-2-оксо-1,3-диоксолен-4-ил)метил, (5-трет-бутил-2-оксо-1,3-диоксолен-4-ил)метил, 1-(5-метил-2-оксо-1,3-диоксолен-4-ил)этил;
и другие группы, особенно группы, которые являются легко удаляемыми in vivo, такие как фталидильная, инданильная и 2-оксо-4,5,6,7-тетрагидро-1,3-бензодиоксолен-4-ильная группы.
Из указанных выше групп мы особенно предпочитаем алкиловые сложноэфирные, особенно те, в которых алкильная группа имеет от 1 до 6 атомов углерода, такие как метиловый, этиловый, пропиловый, изопропиловый, бутиловый, изобутиловый и пентиловый сложные эфиры;
алкениловые сложные эфиры, особенно те, в которых алкенильная группа имеет 3 или 4 атома углерода, такие как аллиловый и металлиловый сложные эфиры; и аралкиловые сложные эфиры, в которых аралкильная группа является предпочтительно такой, как определена здесь выше в отношении X, такие как бензиловый и фенэтиловый сложные эфиры. Из них наиболее предпочтительными являются метиловый, этиловый, аллиловый и бензиловый сложные эфиры.
Примеры фармацевтически приемлемых солей карбоновых кислот формулы (I) включают металлические соли, соли аминокислот и аминные соли. Примеры солей металлов включают соли щелочных металлов, такие как соли натрия и калия; соли щелочноземельных металлов, такие как кальциевую и магниевую соли; и другие металлические соли, такие как алюминиевые соли, соли железа, цинка, меди, соли никеля и соли кобальта. Из них мы предпочитаем соли щелочных металлов, соли щелочноземельных металлов и алюминиевые соли, и наиболее предпочтительны соли натрия, калия, кальция и соли алюминия. Примеры аминокислотных солей включают соли с основными аминокислотами, такими как аргинин, лизин, гистидин, α, γ- диаминомасляная кислота и орнитин. Примеры солей аминов включают соли трет-октиламина, дибензиламина, дициклогексиламина, морфолина, алкилового эфира D-фенилглицина и соли D-глюкозамина. Из них предпочтительными являются натриевая, кальциевая и калиевая соли.
Из соединений изобретения, описанных выше, более предпочтительными соединениями являются:
1) Соединение формулы I, в которой R представляет атом водорода; X представляет алкильную группу, имеющую от 1 до 7 атомов углерода; A представляет алкиленовую группу, имеющую от 1 до 5 атомов углерода; Y представляет фенильную группу, которая может быть незамещенной или имеет 1 заместитель, выбранный из группы, состоящей из атомов галогена, алкокси групп, имеющих от 1 до 4 атомов углерода, и их фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры.
2) Соединения формулы I, в которой; R и X имеют значения, определенные в 1) выше; A представляет алкиленовую группу, имеющую от 1 до 5 атомов углерода; Y представляет гетероциклическую группу, имеющую 5 или 6 кольцевых атомов, из которых 1 или 2 являются гетероатомами, выбранными из группы, состоящей из гетероатомов азота, кислорода и серы, которая может быть незамещенной или имеет 1 C1-C5-алкильный заместитель, и их фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры.
3) Соединения формулы I, в которой R и X имеют значения, определенные в 1) выше; A представляет алкиленовую группу, имеющую от 1 до 10 атомов углерода; Y представляет атом водорода; и их фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры.
Примерами конкретных соединений изобретения являются те соединения формулы I, в которой R, X, Y и A имеют значения, определенные в следующей ниже таблице. Соединения изобретения далее в данном описании, когда это соответствует, идентифицируются номерами, приписанными им в данной таблице. В данной таблице используются следующие сокращения:
Ac - ацетил
Ada - адамантил
Bdix - 1,4-бензодиоксан-2-ил
Bfur - бензофуранил
Boz - бензоил
Bthi - бензотиенил
Bu - бутил
cBu - циклобутил
sBu - втор-бутил
tBu - трет-бутил
Bz - бензил
Chr - хроманил
Chre - хроменил
Dix - диоксанил...
1,3-Dix/5/представляет 1,3-диоксан-5-ил и 1,4-Dix/2/ представляет 1,4-диоксан-2-ил
Et - этил
Etc - этоксикарбонил
Fur - фурил
Hxe - гексенил
cHx - циклогексил
Ind - индолил
Isoc - изоксазолил
Me - метил
Mec - метоксикарбонил
Mor - морфолино
Np - нафтил
Ph \\\ фенил
Pin - пинанил
Pip - пиперидил
Piz - пиперазинил
Ph - пентил
cPh - циклопентил
tPn - трет-пентил
Pr - пропил
cPr - циклопропил
iPr - изопропил
Pre - пропенил
iPre - изопропенил
Pyr - пиридил
Pyrd - пирролидинил
Pyrr - пирролил
Quin - хинолил
iQuin - изохинолил
Tfm - трифторметил
Thf - тетрагидрофурил
Thi - тиенил
Thiz - тиазолил
Thp - тетрагидропиранил
Tht - тетрагидротиенил
Tol - толил
Из соединений, перечисленных выше, предпочтительными являются соединения NN 1, 6, 17, 18, 39, 45, 47, 54, 60, 61, 122, 123, 124, 126, 128, 129, 132, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141 и 142; и более предпочтительными являются соединения NN 1, 39, 54, 126, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141 и 142.
Наиболее предпочтительными конкретными соединениями являются соединения N:
1. 7-[5-Бензилоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)- 3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил]-3-гидрокси-5- оксогептановая кислота,
54. 7-[5-(1,3-диоксан-5-ил)метоксиимино-2-метил-8-(2- метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил]-3- гидрокси-5-оксогептановая кислота,
137. 7-[5-(2-тиенил)метоксиимино-2-метил-8-(2- метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3- гидрокси-5-оксогептановая кислота,
138. 7-[5-(изоксазол-4-ил)метоксиимино-2-метил-8-(2- метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил]-3- гидрокси-5-оксогептановая кислота,
139. 7-[5-(5-метилизоксазол-3-ил)метоксиимино-2-метил-8-(2- метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3- гидрокси-5-оксогептановая кислота,
140. 7-[5-(3-метилизоксазол-5-ил)метоксиимино-2-метил-8-(2- метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3- гидрокси-5-оксогептановая кислота,
141. 7-[5-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)метоксиимино-2-метил-8-(2- метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил]-3- гидрокси-5-оксогептановая кислота, и их фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры (особенно аллиловые и бензиловые эфиры).
Соединения настоящего изобретения содержат или могут содержать несколько асимметричных атомов углерода, и это обстоятельство может вызвать наличие различных оптических изомеров. Вследствие присутствия оксимного фрагмента (= NO-A-Y), могут также существовать син и анти стереоизомеры для всех соединений изобретения как свободных кислот формулы I, так и их солей и сложных эфиров. Хотя эти изомеры все представлены здесь формулой в одной плоскости, должно быть понятно, что настоящее изобретение охватывает, как индивидуальные раздельные изомеры, так и их смеси. Если соединения получаются с помощью приемов стереоспецифического синтеза, могут получаться индивидуальные изомеры. В противном случае может использоваться смесь изомеров как таковая, или индивидуальные изомеры могут отделяться с помощью хорошо известных технологических методов расщепления или разделения.
Соединения настоящего изобретения могут получаться с помощью разнообразных методов, общие приемы которых хорошо известны в области получения соединений данного типа. Например, они могут получаться с помощью окисления соединения формулы (II):
Figure 00000011

(в которой
X, Y, R и A имеют значения, определенные выше, и Ra представляет алкильную, алкенильную или аралкильную группу, как определено и проиллюстрировано примерами выше в отношении сложноэфирных групп), давая соединение формулы III
Figure 00000012

(в которой
X, Y, R, Ra и A имеют значения, определенные выше), и если необходимо, де-этерификации соединения формулы (III) с получением соединения формулы I, и, если необходимо, превращения указанного соединения формулы III или I в любой другой сложный эфир или соль.
Более подробно предлагаемая процедура получения соединений настоящего изобретения иллюстрируется с помощью следующей Схемы реакции.
Figure 00000013

В приведенных выше формулах X, Y, R, Ra и A имеют значения, определенные выше.
Соединение формулы IV, используемое в качестве исходного материала в данной схеме реакций, является известным и может быть получено, как описано в европейской патентной публикации N 314435, сведения о котором включены в данное описание для ссылки, или как описано более подробно ниже.
На стадии I данной реакционной схемы лактоновое кольцо соединения формулы (IV) подвергается гидролизу с раскрытием кольца, а затем продукт подвергается сложной этерификации с помощью известных процедур, давая соединение формулы II.
Реакция раскрытия лактонового кольца проводится с помощью введения в контакт соединения формулы IV с по крайней мере эквимолярным количеством, и предпочтительно большим, чем эквимолярное количество, щелочи, например, гидроокиси щелочного металла, такой как гидроокись натрия, гидроокись калия или гидроокись лития. Реакция обычно и предпочтительно проводится в присутствии растворителя. Нет никаких особых ограничений в отношении природы применяемого растворителя при условии, что он не оказывает отрицательного воздействия на реакцию или на участвующие в ней реагенты, и что он может растворять реагенты по крайней мере до некоторой степени. Примеры подходящих растворителей включают воду, спирты, такие как метанол, этанол, пропанол или этиленгликоль; простые эфиры, такие как тетрагидрофуран; или смесь воды с любым одним или более из этих органических растворителей.
Реакция может протекать в широком интервале температур, и точная температура реакции не является критической для изобретения. Обычно мы находим удобным осуществлять реакцию при температуре от 0 до 100oC, более предпочтительно примерно при комнатной температуре. Время, требуемое для реакции может также широко варьировать, в зависимости от многих факторов, в частности от температуры реакции и от характера применяемых реагентов и растворителя. Однако при условии, что реакция производится в предпочтительных условиях, описанных выше, обычно достаточным является период от 3 до 48 часов, более предпочтительно от 5 до 24 часов.
Стадия сложной этерификации может осуществляться с помощью удаления растворителя из реакционной смеси и затем контактирования металлической соли, получающейся в результате взаимодействия карбоновой кислоты с активным сложно-этерифицирующим агентом, соответствующим желаемой группе Ra, например, алкилгалогенидом, алкенилгалогенидом или аралкилгалогенидом. Реакция обычно и предпочтительно проводится в присутствии растворителя. Нет каких-либо особых ограничений в отношении характера применяемого растворителя при условии, что он не оказывает отрицательного влияния на реакцию и на применяемые реагенты и может растворять по крайней мере до некоторой степени реагенты. Примеры подходящих растворителей включают амиды, особенно формамидные соединения, такие как диметилформамид; простые эфиры, такие как тетрагидрофуран; диалкилсульфоксиды, такие как диметилсульфоксид; и кетоны, такие как ацетон. Альтернативно металлическая соль получающейся в результате карбоновой кислоты может растворяться в водном растворителе и превращаться в свободную карбоновую кислоту с помощью добавления минеральной кислоты (например, соляной кислоты), а затем карбоновая кислота вводится в контакт с диазоалканом, который предпочтительно используется в форме эфирного раствора.
На стадии 2 соединение формулы II, полученное, как описано на стадии I, превращается в соответствующее сложно-эфирное соединение настоящего изобретения, имеющее формулу (III). Реакция может проводится с помощью контактирования соединения формулы (II) с окисляющим агентом с помощью обычных средств. Примеры подходящих окисляющих агентов включают органические активные галоидные соединения, такие как N-бромацетамид, N-хлорсукцинимид, или N-бромфталимид; или окислительную систему, такую как диметилсульфоксид в сочетании с дициклогексилкарбодиимидом, диметилсульфоксид в сочетании с оксалилхлоридом, диметилсульфоксид в сочетании с трифторуксусным ангидридом, диметилсульфоксид в сочетании с пиридином и безводной серной кислотой, хлорформат пиридиния, дихромат пиридиния или карбонат серебра в сочетании с фильтровальным средством Целитом (торговая марка).
Когда применяется диметилсульфоксид в сочетании дициклогексилкарбодиимидом, предпочтительно используется также кислотный катализатор, такой как фосфорная кислота или трифторуксусная кислота. Когда применяется диметилсульфоксид в сочетании с оксалилхлоридом, диметилсульфоксид в сочетании с трифторуксусным ангидридом или диметилсульфоксид в сочетании с пиридином и безводной серной кислотой, реакция предпочтительно осуществляется в присутствии основного катализатора, такого как третичный алкиламин (например, триэтиламин).
Реакция обычно и предпочтительно проводится в присутствии растворителя. В отношении применяемого растворителя нет каких-либо особых ограничений при условии, что он не оказывает пагубного влияния на реакцию и применяемые реагенты и что он может растворять реагенты по крайней мере до некоторой степени, и поэтому предпочтительные растворители зависят от характера применяемой окисляющей системы. Например, когда используется органическое активное соединение галогена, примеры подходящих растворителей включают водно-органические растворители, такие как водные спирты (например, трет-бутанол), водные кетоны (например, ацетон) или водные амины (например, пиридин). Когда используется диметилсульфоксид в сочетании с дициклогексилкарбодиимидом, диметилсульфоксид в сочетании с оксалилхлоридом, диметилсульфоксид в сочетании с трифторуксусным ангидридом, диметилсульфоксид в сочетании с пиридином и водной серной кислотой, пиридинийхлорхромат, пиридинийдихромат или карбонат серебра в сочетании с Целитом, подходящие растворители включают, например, сульфоксиды, такие как диметилсульфоксид; ароматические углеводороды, такие как бензол или толуол; и галоидированные углеводороды, особенно галоидированные алифатические углеводороды, такие как метиленхлорид или хлороформ.
Реакция может проходить в широком интервале температур, и точная температура реакции не является критической для изобретения, хотя предпочтительная температура будет варьировать в зависимости от породы используемого окисляющего агента. Обычно, если используется диметилсульфоксид в сочетании с оксалилхлоридом, или диметилсульфоксид в сочетании с трифторуксусным ангидридом, мы считаем удобным осуществлять реакцию при температуре от -78 до 40oC, более предпочтительно от -50oC до примерно комнатной температуры; если используется карбонат серебра в сочетании с Целитом, подходящей является температура от 0 до 100oC, более предпочтительно от комнатной температуры до 100oC; если используется любой другой из окисляющих агентов, подходящей является температура от 0 до 50oC, более предпочтительно от 10 до 30oC. Время, требуемое для реакции, также может широко варьировать в зависимости от многих факторов, а именно от температуры реакции и природы применяемых реагентов и растворителя. Однако при условии, что реакция проводится при предпочтительных условиях, охарактеризованных выше, обычно достаточным является период от 10 минут до 12 часов.
После завершения реакции желаемое соединение может собираться из реакционной смеси с помощью обычных средств. Например, одна из подходящих процедур выделения включает добавление не смешиваемого с водой органического растворителя к реакционной смеси для того, чтобы экстрагировать желаемое соединение; органический слой затем промывается водой, и растворитель отгоняется с получением требуемого соединения. Если необходимо, желаемое соединение может дополнительно очищаться с помощью общепринятых средств, таких как перекристаллизация, переосаждение или различные приемы хроматографии, а именно, хроматографии на колонке.
Стадия 3 является необязательной стадией, на которой могут получаться карбоновая кислота формулы I или ее соль.
Реакция получения карбоновой кислоты осуществляется с помощью обработки сложноэфирного соединения формулы III по способу, аналогичному описанному выше на стадии I, согласно которой лактоновое соединение формулы IV гидролизуется. Например, реакция может проводиться с помощью контактирования сложноэфирного соединения формулы III с по крайней мере эквимолярным количеством щелочи, например, соединения щелочного металла, такого как гидроокись натрия, гидроокись калия или гидроокись лития. Реакция обычно и предпочтительно проводится в присутствии растворителя. Относительно характера применяемого растворителя нет каких-либо особых ограничений при условии, что он не оказывает вредного воздействия на реакцию и участвующие в ней реагенты, и что он может растворять реагенты по крайней мере до некоторой степени. Примеры подходящих растворителей включают воду, спирты, такие как метанол, этанол, пропанол или этиленгликоль; простые эфиры, такие как тетрагидрофуран или диоксан; или смесь воды с любым одним или более из указанных органических растворителей.
Реакция может протекать в широком интервале температур, и точная температура реакции не является критической для изобретения. Обычно мы считаем удобным осуществлять реакцию при температуре от 0 до 10oC, более предпочтительно примерно при комнатной температуре. Время, необходимое для реакции, также может широко варьировать в зависимости от многих факторов, а именно от температуры реакции и характера применяемых реагентов и растворителя. Однако при условии, что реакция проводится в предпочтительных условиях, охарактеризованных выше обычно достаточным является период от 3 до 48 часов, более предпочтительно от 5 до 24 часов.
После завершения реакции реакционный раствор подкисляется добавлением минеральной кислоты (например, соляной кислоты). Свободная карбоновая кислота затем может экстрагироваться путем добавления не смешиваемого с водой органического растворителя. Экстракт может затем промываться водой, и желаемая карбоновая кислота получается из экстракта с помощью удаления растворителя. Если необходимо, желаемая карбоновая кислота может дополнительно очищаться с помощью обычных средству, таких как перекристаллизация, переосаждение или различные приемы хроматографии, а именно колоночной хроматографии.
Альтернативно, карбоновая кислота формулы I может получаться с помощью взаимодействия сложноэфирного соединения формулы III, в которой Ra представляет алкенильную группу, с донором протонов в присутствии палладиевого комплекса в инертном растворителе. Такая реакция в настоящее время хорошо известна, и применяемыми реагентами могут быть реагенты, используемые для известных реакций данного типа. Например, подходящие комплексы палладия, которые могут применяться, включают комплексы, в которых палладий 0 валентности координируется с органическим фосфорным соединением, таким как трифенилфосфин, трибутилфосфин или триэтилфосфит, предпочтительно тетракис/трифенилфосфин/палладий/0/.
Подходящие доноры протонов включают, например: органические карбоновые кислоты, такие как муравьиная кислота, уксусная кислота или бензойная кислота; фенолы, такие как фенол или крезол; и активные метиленовые соединения, такие как диэтилмалонат или этилацетоацетат. Из них мы предпочитаем органические карбоновые кислоты.
Реакция обычно и предпочтительно проводится в присутствии растворителя. Нет никаких особых ограничений, касающихся природы используемого растворителя при условии, что он не оказывает вредного воздействия на реакцию или на применяемые реагенты, и что он может растворять реагенты по крайней мере до некоторой степени. Примеры подходящих растворителей включают: углеводороды, включая алифатические и ароматические углеводороды, такие как гексан или бензол; галоидированные углеводороды, особенно галоидированные алифатические углеводороды, такие как метиленхлорид или хлороформ; простые эфиры, такие как диэтиловый эфир, тетрагидрофуран или диоксан; спирты, такие как метанол, этанол или трет.-бутанол; кетоны, такие как ацетон или метиленкетон; сложные эфиры, такие как метилацетат или этилацетат; амиды такие как диметилформамид или диметилацетамид; и сульфоксиды, такие как диметилсульфоксид. Из них мы предпочитаем простые эфиры. Может применяться единственный из этих растворителей или смесь любых двух или более из них.
Реакция предпочтительно проводится в отсутствие кислорода, например, в токе азота. Реакция может протекать в широком интервале температур, но точная температура реакции не является существенной для изобретения. Обычно мы находим удобным осуществлять реакцию при температуре от 0 до 40oC. Время, требуемое для реакции, также может широко меняться в зависимости от многих факторов, а именно, от температуры реакции и от природы применяемых реагентов и растворителя. Однако при условии, что реакция проводится в предпочтительных условиях, описанных выше, обычно достаточным будет период от 30 минут до 24 часов. Реакция предпочтительнее проводится при перемешивании или отстаивании реакционной смеси.
После завершения реакции желаемое соединение, полученное в каждой реакции, может выделяться из реакционной смеси с помощью обычных средств. Например, одна из подходящих процедур выделения включает охлаждение реакционного раствора и отделение полученных кристаллов фильтрованием, альтернативно, любой нерастворимый материал удаляется с помощью фильтрования, добавляется вода, а затем смесь экстрагируется не смешиваемым с водой органическим растворителем; альтернативно, добавляется вода, водный слой подкисляется, и затем смесь экстрагируется не смешиваемым с водой органическим растворителем. Получающееся в результате соединение может, если необходимо, далее очищаться с помощью обычных методов, таких как перекристаллизация, переосаждение или различные приемы хроматографии, а именно хроматографии на колонке.
Альтернативно, карбоновая кислота формулы I может получаться с помощью каталитического восстановления сложноэфирного соединения формулы III, в которой Ra представляет аралкильную группу, в присутствии водорода. Давление применяемого водорода составляет предпочтительно от 1 до атмосфер.
Примеры подходящих катализаторов, которые могут применяться, включают палладий на угле, окись платины и никель Ренея, из которых мы предпочитаем палладий на угле.
Реакция обычно и предпочтительно проводится в присутствии растворителя. В отношении растворителя нет никаких особых ограничений при условии, что он не оказывает вредного воздействия на реакцию или на применяемые в ней реагенты, и что он может растворять реагенты по крайней мере в некоторой степени. Примеры подходящих растворителей включают: спирты, такие как метанол или этанол; простые эфиры, такие как диэтиловый эфир, тетрагидрофуран или диоксан; амиды, такие как диметилформамид или диметилацетамид; и водные органические растворители, например, водную органическую карбоновую кислоту, такую как водная муравьиная кислота или водная уксусная кислота. Из них мы предпочитаем использовать водную органическую кислоту или спирт. Реакция может протекать в широком интервале температур, но точная температура реакции не является существенной для изобретения. Обычно мы находим удобным осуществлять реакцию при температуре от 0 до 50oC, более предпочтительно примерно от комнатной температуры до 40oC. Время, необходимое для реакции, также может варьироваться широко, в зависимости от многих факторов, а именно от температуры реакции и характера применяемых реагентов и растворителя. Однако при условии, что реакция проводится в предпочтительных условиях, описанных выше, обычно достаточным является период от 1 до 6 часов.
После завершения реакции реакционная смесь может фильтроваться для удаления катализатора, и растворитель может затем удаляться, например, с помощью перегонки, для получения требуемого соединения. Если необходимо, получающееся в результате соединения может далее очищаться с помощью обычных средств, таких как перекристаллизация, переосаждение или различные приемы хроматографии, например, хроматографии на колонке.
Металлическая соль карбоновой кислоты формулы I может получаться с помощью обработки карбоновой кислоты гидроокисью металла или карбоната металла, соль которого хотят получить, например, гидроокисью натрия, гидроокисью калия, гидроокисью кальция или карбоната натрия, в воде или в подходящем водном органическом растворителе, таком как водный спирт, водный ацетон или водный диоксан. Количество металлического соединения не является критическим, хотя лучше всего использовать эквимолярное количество или несколько большее, чем количество карбоновой кислоты, так чтобы уменьшить до предела потери карбоновой кислоты. Обычно мы предпочитаем использовать от 1 до 1,5 моль гидроокиси металла или карбоната металла на моль карбоновой кислоты.
После завершения реакции желаемое соединение может получаться из реакционной смеси с помощью обычных средств, например, желаемое соединение может выделяться из реакционной смеси с помощью отгонки растворителя при пониженном давлении, а затем сушки смеси вымораживанием. Получающееся соединение может, если необходимо, дополнительно очищаться с помощью обычных средств, таких как перекристаллизация, переосаждение или различные приемы хроматографии, например, хроматографии на колонке.
Как упоминалось выше, соединения формулы (IV), которые используются в качестве исходных материалов, в указанной выше реакционной схеме, известны и описаны в японской патентной заявке N Sho 58-55443 (европейская патентная публикация N 76601) и в японской патентной заявке Кокаи N Hei 2-255 (европейская патентная публикация N 314435) и могут получаться согласно методам, описанным в этих патентах. Исходные материалы, ML -236B, MB-530B, M-4 и M-4', которые могут использоваться для получения соединений формулы (IV), также описаны в японской патентной заявке Кокаи N Sho 58-55443 и японской патентной заявке Кокаи N Hei 2-255, но могут также получаться с помощью выращивания или культивирования микроорганизмов, упомянутых ниже.
Например штамм микроорганизма, способный продуцировать ML -236B представляет Penicillium Citrinum Thom SANK 13380, который принадлежит к роду Penicillium и депонирован по условиям Будапештского Договора в Исследовательском Институте Микробиологической Техники, Агентства промышленной науки и техники, Министерство торговли и промышленности, Токио, Япония, под депозитарным номером FERM BP-4129: дата депонирования, 22-е декабря 1992 г.).
Микологические свойства штамма SANK 13380 являются следующими.
Колонии на дрожжевой автолизатной среде Czapek (CYA) были в диаметре 1.8 см после роста в течение 7 дней при 25oC. Поверхность по цвету была белой (1 A 1) до светло-желтой (2 A 4), и поверхность была покрыта белыми хлопьевидными воздушными гифами. Обратная сторона была окрашена в белый (1 A 1) до слегка желтого (2 A 4) цвета, и наблюдались радиальные складки. Не обнаруживались ни эксудаты, ни растворимые пигменты.
Колонии на агаровой среде с соловым экстрактом (МЕА) имели диаметр 1,3 см (после роста при 25oC в течение 7 дней). Поверхность была окрашена в бледно-желтый (2 A 3) цвет, внешний вид поверхности менялся от бархатистой до порошкообразной. Обратная сторона была окрашена в коричневато-оранжевый цвет (7 C 7).
Колонии на агаровой среде с 25% вес/объем нитрата глицерина (G 25 N) имели диаметр 1,6 см (после роста при 25oC в течение 7 дней). Окраска поверхности менялась от белой (1 A 1) до желтовато-белой (1 A 2), и поверхность была покрыта хлопьевидными гифами. Обратная сторона была окрашена в бледно-желтый цвет (2 A 3).
На любой из этих сред при 5oC или 37oC никакого роста не наблюдалось.
Поверхности конидиофоров гладкие и бимутовчатые. Ветви конидиеносца цилиндрические и слегка ячеистые, и имеют размер 9 - 15 • 3 - 4 мкм. Стеригмы (короткие несущие опоры веточки) ампуловидные, и имеют размер 8 - 10 • 3 - 4 мкм. Конидии шарообразные, а поверхности гладкие до слегка грубых в диаметре 2,5 • 4 мкм.
При сравнении этих свойств со свойствами известных видов было обнаружено, что свойства данного штамма соответствуют свойствам Penicillium citrinum From описанного автором J.I. Pitt В работе "The genus Penicillium and its teleomorpholic states, Eupenicillium and Talaromyces", стр. 634, Академик Пресс (1979). Соответственно, данный штамм идентифицировался как Penicilium citraum From.
Описание цветовых оттенков выполнено в соответствии с руководством автором A. Kornerup и Н.Н. Wansher в "Methuen Handbook of Colour", 3-е издание (1978) Публикация Eyre Methuen (Лондон).
Очевидно понятно, что SANK 13380, или любой штамм, способный продуцировать ML-236B, может субкультивироваться или изменяться или модифицироваться биотехнологически, давая организм с иными характеристиками. Единственное требование состоит в том, чтобы получающийся в результате организм был способен продуцировать требуемое соединение. Изменения могу происходить естественным путем или искусственно индуцированием их, например ультрафиолетовым излучением, волнами высокой частоты, облучением и химическими мутагенами.
Такие изменения и модификации могут принимать любую желаемую форму, или могут быть результатом таких обстоятельств, как например, условия культуры. Штаммы могут модифицироваться при культивировании и таким образом могут подбираться так, чтобы проявлять такие характеристики, как усиленный рост, или рост при более низких/более высоких температурах.
Биотехнологические модификации обычно являются преднамеренными и могут вводить селекционируемые характеристики, такие как устойчивость или восприимчивость к бактериостату, или сочетание их, для того, чтобы сохранить чистоту, или обеспечить возможность очистки культур, особенно посевных культур, время от времени.
Другими характеристиками, которые могут вводиться с помощью генетического манипулирования, являются любые характеристики, которые допустимы в случае Penicillium spp. Например, могут включаться плазмиды, кодирующие устойчивость, или любые встречающиеся в естественных условиях плазмиды могут удаляться. Благоприятные или полезные плазмиды включают те, которые придают или сообщают ауксотрофию. Плазмиды могут получаться из любых подходящих источников, или могут производиться методами инженерии, путем изолирования встречающейся в природе плазмиды Penicillium и инсерцией (включением) желаемого гена или генов из другого источника. Природные плазмиды могут также модифицироваться любым другим способом, который может считаться желательным.
В процессе настоящего изобретения может применяться любой такой модифицированный штамм при единственном условии, что штамм способен продуцировать ML-236B, что может легко оцениваться с помощью простого и обычного экспериментирования.
Для того, чтобы получить ML-213B из культуры подходящего микроорганизма, микроорганизм должен ферментироваться в подходящей среде. Такие среды обычно хорошо известны в данной области техники, и часто являются средами типов, обычно используемых при получении других продуктов ферментации.
В типичном случае необходимо, чтобы среда включала любое сочетание источника углерода, источника азота и одной или более неорганических солей, усваиваемых соответствующим микроорганизмом. Минимальным требованием к среде является то, чтобы она содержала ингредиенты, которые являются неотъемлемыми для роста микроорганизма.
Подходящие источники углерода включают любой содержащий углерод материал, который способен усваиваться микроорганизмом, например: углероды, такие как глюкоза, фруктоза, мальтоза, лактоза, сахароза, крахмал, маннит, декстрин, глицерин, густой солодовый сироп, меласса, черная меласса, овсяная мука, рисовая мука, кукурузный крахмал, картофель, кукурузная мука, соевая мука; или солодовый экстракт; масла или жиры, такие как соевое масло, хлопковое масло, оливковое масло, жир печени трески или лярд-ойл; органические кислоты, такие как лимонная кислота, аскорбат натрия, яблочная кислота, уксусная, фумаровая, винная, янтарная или глюконовая кислота; спирты, такие как метанол, этанол, пропанол, изопропанол, бутанол, изобутанол, или трет-бутанол; и аминокислоты, такие как глютаминовая кислота. Эти вещества могут использоваться по одному или в смеси любых двух или более из них. Типичные количества находятся в интервале примерно от 1 до 10% вес/объем количества среды, хотя данное количество может меняться в зависимости от желания, и в соответствии с желаемым результатом.
Подходящие источники азота включают любой азотсодержащий материал, который ассимилируется микроорганизмом, например, любое вещество, содержащее протеин, или другой легко усваиваемый источник азота. Характерными примерами источников азота являются: органические источники азота животного и растительного происхождения, и могут быть экстрактами из таких природных источников, как соевая мука, пшеничные отруби, пшеничные зародыши, арахисовая мука, мука хлопковых семян, хлопковое масло, изолят соевого протеина, казамино кислота, казеиновый гидролизат, фермамин, рыбная мука, кукурузно-замочная жидкость, пентон, мясной экстракт, дрожжи, дрожжевой автолизат, дрожжевой экстракт, солодовый экстракт и мочевина; аминокислоты, такие как аспарагиновая кислота, глютамин, цистин или аланин; аммониевые соли, такие как сульфат аммония, нитрат аммония, хлорид аммония или фосфат аммония; и неорганические соединения азота, такие как нитрат натрия или нитрат калия. Как и в случае углеродных источников, они могут применяться по одному или в любом сочетании. Подходящие количества в типичном случае составляют в интервале примерно от 0,2 до 6% вес/объем от количества среды.
Подходящими питательными неорганическими солями являются соли, которые обеспечивают следы элементов (микроэлементы) а также основную составляющую соли. Предпочтительно соли должны давать такие ионы, как натрий, калий, магний, аммоний, кальций, фосфат, сульфат, хлорид или карбонат в ассимилируемой форме, и предпочтительно следы таких металлов, как молибдена, бора, меди, кобальта, марганца и железа. Примеры подходящих соединений включают: хлорид натрия, хлорид магния, хлорид кобальта, хлорид калия, хлорид кальция, карбонат кальция, алюмокалиевый сульфат, сульфат марганца, сульфат меди, сульфат кобальта, сульфат цинка, сульфат железа, сульфат магния, монокалиевый фосфат, дикалийфосфат, динатрийфосфат или молибдат аммония. В дополнение, в любом подходящем сочетании могут использоваться любые другие добавки, необходимые для роста микроорганизма и для промотирования образования ML-236B.
Добавление соединения серы, ассимилируемого микроорганизмом из среды, может иногда повышать производство желаемого соединения. Подходящие соединения серы включают неорганические серные соединения, включающие: сульфаты, такие как сульфат цинка, сульфат меди, сульфат железа, или сульфат аммония; тиосульфаты, такие как тиосульфат аммония; и сульфиты, такие как сульфит аммония; или органические серные соединения, включающие: серусодержащие аминокислоты, такие как цистин, цистеин, или L-тиазолин-4-карбоновую кислоту; сульфатные соединения тяжелых металлов, такие как сульфат железа или сульфат меди; витамины, такие как витамины B1 или биотин; и промотирующие бактериальный рост факторы, такие как тиамин.
К среде может добавляться пеногасящий агент, такой как силиконове масло, полиалкиленгликолевый эфир, растительное масло или подходящий поверхностно-активный агент. Такое добавление может быть особенно соответствующим, когда микроорганизм ферментируется в жидкой культуре.
Предпочтительно, чтобы pH культуральной среды для культивирования Penicillium citrinum From SANK 13380, при использовании для получения ML-236B, поддерживалась в интервале pH 5,0 - 8,0, более предпочтительно от pH 6,0 до pH 7,0, ходя единственным требованием является то, чтобы величина pH не препятствовала росту микроорганизма, или не оказывала необратимое воздействие на качество конечного продукта.
Penicillium citrinum Fhom SANK 13380 обычно растет при температурах в интервале от 15 до 35oC, и хорошо растет при температуре от 22oC до 30oC. Другие температуры, не охватываемые данными пределами, могут быть применимы тогда, когда разработан штамм, который может расти при более низких или более высоких температурах, или для других особых целей, как это хорошо известно в технике. Для продуцирования ML - 236B подходящей является температура между 22 и 26oC, более предпочтительно примерно 24oC.
Нет каких-либо особых ограничений в отношении приемов культивирования, используемых для получения ML-236B, и в равной мере в данном изобретении может использоваться любой метод культивирования, обычно применяемый для бактериального роста. Однако в идеальном случае ML-236B получается при аэробном выращивании, и может применяться любой подходящий прием аэробного культивирования, такой как прием с использованием твердой культуры, перемешиваемой культуры, стационарной культуры, встряхиваемой культуры или культуры с аэрированием-перемешиванием.
Если культивирование проводится в небольшом масштабе, тогда обычно предпочитается встряхиваемая культура, ферментируемая в течение нескольких дней при температуре от 20 до 30oC, более предпочтительно примерно при 24oC.
Для начала ферментативного культивирования по предпочтительной технологии применяется начальный инокулюм, приготовленный в одну или две стадии, например, в колбе Эрленмейера, которая предпочтительно снабжена перегородками (стенка для регулирования водного потока). Для культуральной среды источник углерода и источник азота могут использоваться в сочетании. Колба с затравкой (посевным материалом) встряхивается в термостатическом инкубаторе при подходящей температуре, например от 22 до 26oC, более предпочтительно примерно при 24oC, в течение подходящего периода времени, обычно от 2 до 7 дней, или до тех пор, пока не будет наблюдаться достаточный рост, предпочтительно от 3 до 5 дней. Получающаяся в результате затравочная культура может затем использоваться для инокулирования еще одной затравочной культуры или для производственной культуры. Если проводится еще одна затравка, это может выполняться обычным образом, и частично используется для инокуляции производственной среды. Колба, в которую инокулируется затравочная культура, встряхивается в течение подходящего периода времени, например от 2 до 7 дней, или до тех пор, пока не будет достигнуто максимальное продуцирование, при подходящей температуре, например при 24oC. Когда инкубирование завершается, содержимое колбы может собираться с помощью центрифугирования или фильтрования.
Если культивирование предполагается проводить в большом масштабе, может быть предпочтительным культивирование в подходящем ферментере с аэрированием-перемешиванием. Согласно данной процедуре питательная среда может получаться в ферментере. Среда сначала стерилизуется при подходящей высокой температуре, например, примерно 120oC, после чего она охлаждается и засевается инокулюмом, предварительно выращенным на стерилизованной среде. Культивирование предпочтительно проводится при температуре от 20 до 26oC, предпочтительно от 22 до 24oC, при перемешивании и аэрировании. Данная процедура является подходящей для получения огромных количеств соединения.
Количество ML-236B, продуцируемого культурой с течением времени, может контролироваться путем отбора проб и оценки содержания ML-236B, с помощью например, жидкостной хроматографии высокой разрешающей способности (ВЭЖХ), ML-236B может существовать как в форме лактона, так и в гидроксиформе, и обычно продуцируется в виде смеси этих форм. Количество каждой из форм может определяться в одно и то же время. Обычно количество продуцируемого ML-236B достигает максимального после промежутка времени между 72 и 300 часами.
ML-236B, продуцируемый культурой, существует как в фильтрате культуры, так и в бактериальных клетках. ML-236B может существовать или в гидрокси-кислотной форме, или в лактонной форме, каждая из которых может меняться в другую. В дополнение к этому гидрокси-кислотная форма может образовывать соль, которая является стабильной.
Следовательно ML-236B может экстрагироваться и собираться непосредственно при использовании данного свойства в сочетании с другими свойствами, например, следующим образом.
Метод 1
Бактериальные клетки и другие твердые материалы в среде центрифугируются или фильтруются с использованием такого фильтровального средства, как диатомовая земля, для разделения на плавающий сверху слой и бактериальные клетки.
(1) Плавающий сверху слой (супернатант)
Лактонное кольцо лактонной формы молекулы ML-236B, существующей в супернатанте, гидролизуется в щелочных условиях (предпочтительно при pH 12 или выше), вследствие чего оно раскрывается и весь ML-236B превращается в форму соли гидрокси-кислоты. Соль затем превращается в соответствующую свободную гидрокси-кислоту с помощью осторожного подкисления; а затем ML-236B получается из данной смеси в виде свободной гидроксикислоты с помощью экстрагирования не смешиваемым с водой органическим растворителем, например: алифатическим углеводородом, таким как гексан или гептан; ароматическим углеводородом, таким как бензол, толуол или ксилол; галоидированным углеводородом, таким как метиленхлорид, хлороформ, четыреххлористый углерод, дихлорэтан, хлорбензол, или дихлорбензол; простым эфиром, таким как диэтиловый эфир или диизопропиловый эфир; или сложным эфиром, таким как этилформат, этилацетат, пропилацетат, бутилацетат или диэтилкарбонат. Может использоваться один из этих растворителей, или смесь любых двух или более из них.
(2) Бактериальные клетки
Бактериальные клетки смешиваются со смешиваемым с водой растворителем, например, спиртом, таким как метанол или этанол; кетоном, таким как ацетон; нитрилом, таким как ацетонитрил или изобутиронитриламидом, таким как диметилформамид, диметилацетамид, N-метил-2-пирролидон, N-метилпирролидон или гексаметилфосфорный триамид. Конечная концентрация бактериальных клеток в получающейся смеси составляет предпочтительно от 50 до 90%. Получающаяся в результате смесь затем предпочтительно обрабатывается по способу, аналогичному тому, что описан выше для супернатанта, с получением свободной гидроксикислоты.
Метод 2
Культурная среда обрабатывается в щелочных условиях (предпочтительно при pH 12 или выше), при нагревании или при комнатной температуре, для разрушения клеток и для гидролиза и раскрытия лактонового кольца в молекуле. В это время весь ML-236B превращается в его форму соли гидроксикислоты. ML-236B в форме свободной гидроксикислоты получается после превращения солевой формы в его соответствующую форму свободной гидроксикислоты с помощью обработки аналогичной описанной выше для супернатанта по Методу 1.
Получающаяся форма свободной гидроксикислоты может растворяться в форме соли в водном растворе щелочнометаллического основания, например, гидроокиси щелочного металла, такой как гидроокись натрия. Кроме того, форма свободной гидроксикислоты может превращаться в соль, которая способна легко получаться и наиболее стабильна.
Альтернативно, получающаяся форма свободной гидроксикислоты может превращаться в его лактонную форму с помощью дегидратации при нагревании или с помощью замыкания кольца в органическом растворителе.
Выделение и очистка форм свободной гидроксикислоты, соли гидроксикислоты и лактона, получаемых таким образом, могут производиться с помощью общепринятых средств, обычно используемых для отделения и очистки органических соединений. Примеры таких способов включают метод с использованием синтетического адсорбента, такой как хроматография с использованием носителя, Сефадекс LH-20 (торговая марка для продукта фирмы Фармация), Амберлит XAD-11 (торговая марка продукта фирмы Ром энд Хаас) или Диаион HP-20 (торговая марка продукта фирмы Мицубиси Кем. Инд.). Альтернативно она может выделяться и очищаться с использованием обычнофазной или обратнофазной хроматографии на колонке с использованием силикагеля или алкилированного силикагеля (предпочтительно, жидкостной хроматографии высокого разрешения) с последующим элюированием подходящим растворителем.
Лактоновая форма может также очищаться с помощью хроматографии на адсорбционной колонке с использованием такого носителя как силикагель, окись алюминия или флорисил (торговая марка носителя магнийсиликагельного типа).
Примеры растворителей, которые могут применяться в качестве элюента, включают: алифатические углеводороды, такие как гексан, гептан, лигроин или петролейный эфир; ароматические углеводороды, такие как бензол, толуол, или ксилол; галоидированные углеводороды, такие как метиленхлорид, хлороформ, четыреххлористый углерод, дихлорэтан, хлорбензол или дихлорбензол; сложные эфиры, такие, как этилформат, этилацетат, пропилацетат, бутилацетат или диэтилкарбонат; и простые эфиры, такие как диэтиловый эфир, диизопропиловый эфир, тетрагидрофуран, диоксан, диметоксиэтан, или диэтиленгликольдиметиловый эфир.
Альтернативно она может получаться с помощью пропускания экстрагированного раствора через колонку с использованием адсорбента для удаления примесей; или с помощью адсорбции свободной гидроксикислотной формы на такой колонке с последующим элюированием водным спиртом, таким как водный метанол, водный этанол, водный бутанол или водный изопропанол, или водный кетон, такой как водный ацетон. Подходящий адсорбирующий агент, который может применяться, включает активированный уголь или адсорбирующую смолу, такую как Амберлит XASD-2, XAD-4 (торговая марка продукта фирмы Ром энд Хаас) или Диаион HP-10, HP-20, CHP-20, HP-50 (торговая марка продукта фирмы Мицубиси Кем. Инд.).
Свободная гидроксикислота и соль гидроксикислоты могут превращаться друг в друга с помощью обычных средств, и очищаться в любой желаемой форме.
ML-236B может также получаться химически путем с помощью методов, описанных в приведенном ниже списке литературы.
Микроорганизмы, способные продуцировать МВ-530В, включают, например, Monascus ruber van Tieghem SANK 15679, принадлежащий к роду Monascus. Данный штамм депонирован по условиям Будапештского договора в Исследовательском Институте науки и техники жизни. Агентства Промышленной науки и техники, Министерство торговли и промышленности, Токио, Япония (ранее известный как Исследовательский институт микробиологической техники) под депозитарным номером FERM BP-4246: дата депонирования 24 марта 1993 г. Monascus ruber van Tieghem SANK 15679 депонирован в международном органе во второй раз, поскольку данный штамм был описан ранее, например, в британском патенте N 204737 как Monascus ruber 1005, депонированный в международном органе под N FERM BP-682. Его микологические свойства и метод культивирования являются теми же, как описаны в данном британском патенте.
M-4 и M-4' могут получаться с помощью ферментативного стереоспецифического гидроксилирования в положении 6 вещества ML-236B. Примером микроорганизации, способного превращать ML-236B в M-4 с помощью гидроксилирования, является микроорганизм, Amycolata autotrophica SANK 62981, принадлежащий к роду Amycolafa. Данный штамм депонирован в международном органе по условиям Будапештского договора в Исследовательском институте микробиологической техники. Агентство промышленной науки и техники, Министерство государственной (внутренней) торговли и промышленности, под депозитарным номером FERM - 4105: дата депонирования 8 декабря 1992 г.
Примером микроорганизма способного превращать ML-236B в M-4' с помощью гидроксилирования является Syncephalastrum nigricans Vnillemin SANK 42372, принадлежащий к роду Syncephalastrum. Данный штамм депонирован по условиям Будапештского договора в Исследовательском институте микробиологической техники, Агентство промышленной науки и техники, Министерство государственной торговли и промышленности, под депозитарным номером, FERM BP-4106: дата депонирования 8 декабря 1992 г.
Микологические свойства этих штаммов является следующими: Микологические свойства Amycolata autotrophica SANK 62981
Штамм наблюдался в соответствии с методами Shirheig и Gottlieb[International Journal of Systematic Bacteriology 16,313 - 340 (1968) и S. A. Waksman [The Actenomycetes], на протяжении 14 дней.
(1) Морфологическкие характеристики
Внешняя форма верхушки воздушных грифов: прямая с изгибами
Способ ветвления грифов: простое ветвление
Деление грифов: наблюдаемое
Поверхностная структура артспор: гладкая
Другие органы: отсутствуют
(2) Свойства различных видов сред для классификации
Штамм хорошо растет на любой испытанной среде.
Штамм SANK 62981 растет, обнаруживая окраску от коричневато-белой до бледной желтовато-оранжевой. По мере культивации наблюдаются коричневато-фиолетовые пятна.
На иных средах, чем агаровая среда с дрожжевым экстрактом - солодовым экстрактом, наблюдается включение светло-коричневато-серых воздушных гифов.
Образование нерастворимого пигмента не наблюдается.
В табл. 2 G, AM, R и SP означает рост, воздушный мицелий, реверс и растворимый пигмент, соответственно.
Оттенки цвета указываются в табл. 2 в соответствии с номерными обозначениями цвета, описанными в (Стандартной цветовой таблице), опубликованной фирмой Нихон Сикисаи Кенкюдзо.
(3) Физиологические свойства
Восстановление нитратов: Положительное
Гидролиз крахмала: Отрицательный
Образование меланоидного пигмента: Отрицательное
(Среда 1): Триптон•дрожжевой экстракт бульон (ISP I)
(Среда 2): Пептон•дрожжевой экстракт•железо агар (ISP 6)
(Среда 3): Тирозин агар (ISP 7)
(4) Способность ассимилировать (усваивать) различные виды источников углерода
С помощью использования агаровой среды Pridham - Gottlieb (ISP 9) проверялось усвоение источников углерода и оценивалось после культивирования в течение 14 дней при 28oC.
В следующей таблице:
+ означает усвоение
± означает небольшое усвоение
- означает отсутствие усвоения
D-Глюкоза: + Инозит: +
L-Арабиноза: + Сахароза: -
D-Ксилоза: + Рафиноза: -
D-фруктоза: + D-Маннит: +
L-Рамноза: ± Контроль: -
(5) Внутриклеточные компоненты
С помощью бумажной хроматографии анализировались кислотные гидролизаты клеток этих штаммов согласно методам B.Becker и др. /Applied Microbiology 12, 236 (1965)/, и M.P. Lechenvalier и др./The Actinomycetales by H. Prauser стр. 311 (1970)/.
В стенках клеток обнаружена мезо-2,6-диаменопимелиновая кислота, а арабиноза и галактоза отмечены в качестве сахарных компонентов бактериальных клеток, на основании чего подтверждалось, что бактериальные компоненты являются компонентами типа IV-A.
Миколовая кислота не найдена.
На основе этих результатов определялось, что штамм SANK 62981 принадлежат к виду Amycolata autotrophica. Однако SANK 62981 при росте обнаруживает оттенок цвета аметиста и может быть, таким образом, подвидом Amycolata autotrophica.
Данный штамм депонирован по условиям Будапештского договора в Исследовательском институте микробиологической техники, Агентство промышленной науки и техники, Министерство государственной торговли и промышленности, Японии, под депозитарным номером FERM BP 4105.
Данный штамм идентифицировался согласно стандартам International Streptomyces Project; [Bergey's Manual of Determinative Bacteriology, 8-e cyg.]; [The Actinomycetes, том 2] by S.A. Waksman; и недавние сообщения об актиномицетах. Под Amycolata до сих пор классифицировался как часть рода Nocardia. Однако вследствие различий в компонентах бактериальных клеток теперь считается, что Amycolata является родом независимым от Nocardia, и каждый образует новый род /International Journal of Systematic Bacteriology 36, 29 (1986/.
Микологические свойства штамма Syncephalastrum nigricans Vuillimin SANK 42372
Вегетативные гифы хорошо разливаются и быстро растут.
Спорангиофоры стоят вертикально относительно гифов, являются бледно-коричневыми по цвету с ризоидными и нерегулярными ветвями, и образуют перегородку.
Боковые ветви иногда резко искривляются.
На верхушках главной оси и боковых ветвей образуются пузырьки. Пузырьки слегка сферические или овальные, иногда эллипсообразные по форме, и те, которые образуются на верхушке главной оси, имеют диаметр 28 - 50 мкм, а те, которые образуются на верхушке боковых ветвей, имеют в диаметре 15 - 25 мкм.
По всей поверхности образуется много мероспорангиев. Спорангиофоры имеют вид единичных палочек, или являются пальцеобразными по форме, и часто образуется от 5 до 10 спор на одной линии.
Споры являются почти бесцветными с гладкими поверхностями, одноклеточные, и от слегка сферических до овальных по форме, в диаметре имеют от 3,5 до 6,5 мкм.
Зигоспоры не наблюдаются.
Сравнение этих свойств со свойствами известных штаммов показывают, что свойства данного штамма хорошо согласуются со свойствами Syncephalastrum nigricaus Vuillemin, описанным в "An Illustrated Book of Fungi", изданной Кейсуке Цубаки и Сун-ити Удагава, Коданса; стр. 303 - 304 (1978).
Данный штамм депонирован по условиям Будапештского договора в Исследовательском институте микробиологической техники, Агентства промышленной науки и техники, Министерство внутренней торговли и промышленности, под депозитарным номером FERM BP-4106.
Эти микроорганизмы могут использоваться для введения гидроксигруппы в 6-положении, например, ML-236B, с помощью культивирования конвертирующего микроорганизма на среде, содержащей питательные вещества, усваиваемые микроорганизмом, и при подходящих условиях культивирования для роста конвертирующего (превращающего) микроорганизма, в соответствии с любым из следующих методов:
Метод 1
На промежуточной стадии культивирования превращающего микроорганизма к среде добавляется исходное соединение, например, ML-236B и во время дальнейшего культивирования контактирует с микроорганизмом.
Метод 2
Превращенный микроорганизм выращивается и собирается. Затем, получающиеся в результате клетки вводятся в контакт с исходным соединением.
Метод 3
Свободный от клеток экстракт, содержащий активный фермент, приготавливают из клеток превращающего микроорганизма, и раствор экстракта, без клеток, вводят в контакт с исходным соединением.
Примеры сред, содержащих питательные вещества, усваиваемые превращающим микроорганизмом, общий метод культивирования, величина pH среды, подходящая для роста превращающего микроорганизма, температура среды, подходящая для роста превращающего микроорганизма, и условия выделения и очистки все являются такими, как описаны выше в отношении получения ML-236B.
Вполне понятно, что штаммы, упомянутые выше, или любой другой штамм способный проявлять аналогичную активность, могут субкультивироваться или изменяться или модифицироваться биотехнологическим методом для получения организма с иными характеристиками. Единственным требованием является то, что получающийся в результате организм способен был давать требуемое соединение. Изменения могут происходить естественным путем, или искусственно, с помощью индукции.
Такие изменения и модификации могут принимать любую желаемую форму, или могут быть следствием таких факторов, как например, условия культивирования. Штаммы могут модифицироваться при культивировании и подбираются так, чтобы проявлять такие характеристики, как усиленный рост, или рост при более низких - более высоких температурах.
Биотехнологические модификации обычно являются преднамеренными и могут вводить селекционируемые характеристики такие, как устойчивость или восприимчивость к бактериостату, или их сочетание, для того, чтобы сохранять чистоту, или обеспечить возможность очистки культур время от времени, особенно посевных культур.
Другими характеристиками, которые могут вводиться с помощью генетических манипуляций, являются любые, которые допустимы в пределах вида, из которого происходят приведенные выше штаммы. Например, могут вводиться плазмиды, кодирующие свойства устойчивости, или любые встречающиеся естественным путем плазмиды, могут удаляться. Благоприятные плазмиды включают те, которые придают ауксотрофность. Плазмиды могут получаться из любого подходящего источника, или могут производиться методами инженерии с помощью выделения встречающейся в природе плазмиды и включения желаемого гена или генов из еще одного источника. Природные плазмиды также могут модифицироваться любым другим образом, который может считаться желательным.
В процессе настоящего изобретения может применяться любой такой модифицированный штамм при единственном условии, что штамм способен проявлять требуемую активность, что является предметом, который может быть оценен с помощью простого обычного экспериментирования.
Биологическая активность
Соединения настоящего изобретения обнаруживают заметную способность снижать уровень холестерина в сыворотке. В частности, соединения ингибируют биосинтез холестерина в системе ферментов или в системе культуры клеток, выделенной из экспериментального животного, путем ингибирования 3-гидрокси-3-метилглутарил-CoA редуктазы (HMG - CoA), скорость ограничения фермента биосинтеза стерина, путем конкурирования с HMG - CoA. Это означает, что соединения будут проявлять сильное действие понижения холестерина в сыворотке при применении при лечении людей и других животных. Определение ингибирующей активности соединений производилось с использованием метода авторов Курода и др., /"Biochimica et Biophysica Acta" т. 486, стр. 70 - 81 (1977)/, который является модификацией известного метода D. J. Shapiro и др./" Analytical Biochemistry" том 31, стр. 383 - 390 (1969)/ с некоторыми усовершенствования.
Результаты показаны в табл. 3
Примечание:
1* Данное соединение получалось с помощью обработки соединения Получения 1, аналогичной той, что описана в Примере 1b, с последующей обработкой аналогичной описанной в Примере 1c. Данное соединение является тем же соединением, что описано в Примере 1b японской патентной заявки Кокаи N Hei-2-255.
2* Данное соединение получалось с помощью обработки соединения Получения 9 аналогичной обработке, описанной в Примере 1b, с последующей обработкой, аналогичной описанной в Примере 1c.
3* Данное соединение получалось с помощью обработки соединения Получения 11, аналогичной описанной в Примере 1b, с последующей обработкой, аналогичной описанной в Примере 1c.
4* Данное соединение является натриевой солью соединения, описанного как Соединение N 2 в Журнале медицинской химии 29, 849 - 852 (1986), и является также натриевой солью одного из соединений, включенных в Таблицу IV японской патентной публикации N Sho-64-1476, где R представляет 1-метилпропильную группу.
5* Данное соединение представляет 5-оксо производное соединения 4*, упомянутое выше. В табл/ 1 японской патентной заявки Кокаи N Sho-123445, включено данное соединение, в котором R7OC представляет 2-метилбутирил, R8 представляет -CH3, X представляет -O-, и каждый из символов a и b представляет двойную связь.
6* Данное соединение является натриевой солью соединения, описанного в качестве Соединение N 16 в Журнале медицинской химии 29, 849-852 (1986), а также является натриевой солью одного из соединений, включенных в Таблицу IV японской патентной публикации N Sho-64-1476, где P представляет 1.1-диметилпропил. Данное изобретение представляет натриевую соль синвастатина (обычное наименование, взятое из публикации "Новые лекарственные препараты в Японии").
7* Данное соединение представляет 5-оксо производное Соединения 6* упомянутого выше. В Таблицу 1 японской патентной заявки Кокаи N Sho-60-123445 включено данное соединение, в котором R7OC- представляет собой 2,2-диметилбутирил, R8 представляет метил, X представляет -O-, и каждый из a и b представляет двойную связь.
Из табл. 3 можно ясно видеть, что соединения настоящего изобретения все имеют активность лучшую, чем активность их непосредственно сравниваемых гидроксиэквивалентов, и что у соединений 5x и 7x, которые получаются окислением гидроксигруппы в 5-положении соединений 4x и 6x, соответственно, активность весьма гораздо ниже, чем у их первоначальных гидроксисоединений. С другой стороны, у 5-оксо соединений октагидронафталинзамещенных оксимных производных настоящего изобретения активность выше, чем у первоначальных гидроксильных соединений.
Дополнительным подтверждением общего эффекта соединений изобретения является результат испытания, приведенный в качестве иллюстративного подтверждающего материала по соответствующей заявке США. В данном испытании активность натриевых солей соединения, полученного в Примере 3b настоящей заявки, сравнивается с активностью соединения примера 16(b) патент США 4997848, которое отличается лишь наличием в 5-положении гидроксигруппы вместо оксогруппы.
Сравнительный эксперимент
Определение ингибирующей активности против синтеза стерина в печени мышей.
Синтез стерина в печени мышей измерялся по методу Кода и др. (Bichem. Biophys. Acta, 1045, 115-120, (1990)).
Каждой мыши инъецировалось интраперитонально 15 мкл [14C] ацетата (20 μC:/ ). Спустя час животных убивали обезглавливанием и вырезали печень. Синтез стерина в печени измерялся по включению [14C] активности в осаждаемые дигитонином стерины. Предпочтительные испытываемые соединения, растворенные с 1% Твин 80, вводились мышам орально за 2 часа до инъекции [14C] ацетата.
Активность синтеза стерина у контрольных животных, получавших только раствор 1% Твин 80, определялась как 100%. Определялось относительное ингибирование синтеза стерина в печени мышей, получавших различные дозы испытываемого соединения, и вычислялись величины ED50 (мг/кг) (т.е. доза, требуемая для ингибирования синтеза стерина в печени на 50%).
Результаты приведены в табл. 4.
Из табл. 4 ясно видно, что соединения согласно изобретению, имеющие кетогруппу в 5-положении, проявляют неожиданно лучшую активность, чем соединения с гидроксигруппой в 5-положении.
Соединения настоящего изобретения действуют таким образом что они ингибируют синтез холестерина, и тем самым снижают уровень липидов в крови. Они могут, следовательно, использоваться при лечении, например, в качестве гиполипемического агента или в качестве агента профилактики артериосклероза.
Эти соединения могут назначаться орально или парентерально, например, в виде капсул, таблеток, инъецируемых препаратов, или в виде других дозированных форм. Дозировка такого соединения зависит от возраста, состояния и веса пациента, а также от характера и тяжести симптомов заболевания, но мы обычно предлагаем дозу для взрослого человека от 0,5 мг до 500 мг в сутки, например, 1-10 мг, которая может назначаться для приема в виде одной дозы или в виде раздельных доз, предпочтительно в виде раздельных доз, ежедневного приема, например, 2-4 доз. Однако оно может использоваться в количестве выше данного интервала, если необходимо.
Соединения изобретения могут и предпочтительно назначаются в виде общепринятых фармацевических готовых форм препаратов (или препаративных форм) в смеси с одним или более обычными эксципиентами, носителями или разбавителями, как хорошо известно для использования соединений, имеющих данный тип активности.
Изобретение далее иллюстрируется с помощью следующих примеров, которые иллюстрируют готовые препаративные формы композиций согласно изобретению, получение соединений настоящего изобретения. Последующие Получения иллюстрируют получение некоторых из исходных материалов, используемых при получении соединений данного изобретения.
Препаративная форма 1 - Твердые капсулы
Следующие ниже ингредиенты заполнялись в стандартные твердые желатиновые капсулы, состоящие из двух частей, для получения единых капсул, каждая из которых затем промывалась и сушилась.
Натриевая соль соединения Примера 3b - 5 мг
Гидроксипропилцеллюлоза (низкое замещение) - 10 мг
Гидроксипропилцеллюлоза - 3 мг
Стеарат магния - 1 мг
Лактоза - 81 мг
Общее - 100 мг
Препаративная форма 2 Форма порошка
Форма порошка, содержащая ингредиенты, перечисленные ниже, приготавливалась с использованием общепринятых приемов.
Натриевая соль соединения Примера 3b - 5 мг
Гидроксипропилцеллюлоза (низкое замещение) - 20 мг
Гидроксипропилцеллюлоза - 40 мг
Стеарат магния - 5 мг
Лактоза - 930 мг
Общее - 1000 мг
Препаративная форма 3 Форма таблеток
Таблетки, содержащие ингредиенты, перечисленные ниже, приготавливались с использованием общепринятых приемов.
Натриевая соль соединения Примера 3b - 5 мг
Гидроксипропилцеллюлоза (низкое замещение) - 10 мг
Гидроксипропилцеллюлоза - 3 мг
Стеарат магния - 1 мг
Лактоза - 81 мг
Общее - 100 мг
На таблетки, если необходимо, может наноситься покрытие. Приемы нанесения покрытия и компоненты покрытия хорошо известны в данной области.
Пример 1a
Аллил 7-[5-бензилоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо- 1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил]-3-гидрокси-5-оксогептаноат
(аллиловый эфир Соединения N 1)
Figure 00000014

182 мкл (1,3 ммоля) трифторуксуснуого ангидрида растворялось 2 мл безводного толуола, и получающийся раствор охлаждался до -78oC. К охлажденному раствору на протяжении периода 5 минут по каплям в атмосфере азота добавлялся 1 мл безводного толуола, в котором было растворено 121 мкл (1,71 ммоля) диметилсульфоксида. После того, как добавление заканчивалось, смешанный раствор перемешивался в течение 3 минут, а затем по каплям на протяжении 15 минут добавлялось 3 мл безводного толуола, в котором было растворено 500 мг (0,86 ммоля) аллил 7-[5-бензилоксиимино-2-метил-8-(2-диметилбутирилокси) -3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3,5-дигидроксигептаноата (полученного, как описано в Получении 1). Раствор перемешивался в течение 15 минут при -78oC, а затем по каплям на протяжении 5 минут добавлялось 0,6 мл (4,3 ммоля) триэтиламина. Получающаяся в результате реакционная смесь перемешивалась в течение 20 минут при -78oC, и в течение дополнительных 40 минут при 0oC. В конце данного периода времени к реакционной смеси добавлялось 30 мл 10% вес/объем водного раствора лимонной кислоты, и смесь экстрагировалась при комнатной температуре этилацетатом. Этилацетатный экстракт промывался насыщенным водным раствором бикарбоната натрия, а затем насыщенным водным раствором хлорида натрия, после чего она сушилась над безводным сульфатом магния, фильтровалась и конденсировалась с помощью выпаривания при пониженном давлении. Получающийся в результате масляный остаток очищался с помощью флэш хроматографии через силикагель с использованием 2:1 по объему смеси этилацетата и гексана в качестве элюента, и получалось 183 мг (выход 48%) целевого соединения. В это время также выделялось 166 мг непрореагировавшего исходного материала.
Спектр ядерно-магниевого резонанса (CDCl3, 270 МГц) δ млн. дол.: 0.86 (3H, триплет, J = 7.3 Гц), 1.01 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.10 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.34-1.81 (4H, мультиплет), 1.91-2.10 (1H, мультиплет), 2.15-2.71 (10H, мультиплет), 2.54 (2H, дублет, J = 6.4 Гц), 3.11-3.24 (1H, мультиплет), 3.28-3.37 (1H, мультиплет, обмениваемый с D2O), 4.40-4.52 (1H, мультиплет), 4.61 (2H, дублет, J = 5.9 Гц), 5.13-5.38 (2H, мультиплет), 5.20 (2H, дублет, J = 2.9 Гц), 5.43-5.50 (1H, мультиплет), 5.82-6.00 (1H, мультиплет), 6.51 (1H, дублет, J = 2.5 Гц), 7.28-7.41 (5H, мультиплет).
Спектр инфракрасного поглощения (CHCl3) νмакс см-1:
3500, 2950, 1720, 1660, 1450, 1370, 1180, 1150, 1050, 980. Масс спектр m/z = 581 (M+).
Пример 1b
7-[5-Бензилоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо- 1,2,3,5-6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил]-3-гидрокси-5-оксогептановая кислота
(Соединение N 1)
Figure 00000015

239 мг (0,4 ммоля) аллил 7-[5-бензилоксиимино-2-метил-8-(2- метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3- гидрокси-5-оксогептаноата (полученного как описано в Примере 1a) растворялось в 3.3 мл безводного тетрагидрофурана, и к раствору добавлялось 20.7 мг (0.02 ммоля) тетракис/трифенилфосфин/палладия/0/, 21.5 мг (0.08 ммоля) трифенилфосфина и 31 мкл (0.82 ммоля) муравьиной кислоты, и получающаяся в результате смесь перемешивалась в течение 18 часов в атмосфере азота. В конце данного периода времени реакционная смесь конденсировалась выпариванием при пониженном давлении, и остаток растворялся в 50% объем/вес/о/о/ водном растворе ацетонитрила. Раствор фильтровался через насадку SEP-PAK C-18 (торговая марка продукта фирмы Уотерс Ко.) и экстрагировался этилацетатом. Получающийся в результате этилацетатный экстракт сушился над безводным сульфатом магния, фильтровался и конденсировался выпариванием при пониженном давлении. Получающийся масляный остаток очищался через колонку Lobar в обратной фазе (RP - 18, Размер B, Мерк), с использованием в качестве элюента буферного раствора, состоящего из 1: 1 по объему смеси ацетонитрила и водной фосфорной кислоты (pH 3.0), содержащей 0.001 М триэтиламина, давая 106 мг (выход 48%) целевого соединения в виде масляного вещества.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCl3, МГц) δ млн. дол.: 0.87 (3H, триплет, J = 7.3 Гц), 1.00 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.10 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.35-1.82 (4H, мультиплет), 1.92-2.11 (1H, мультиплет), 2.13-2.70 (8H, мультиплет), 2.56 (2H, дублет, J = 6.4 Гц), 2.65 (2H, дублет, J = 6.1 Гц), 2.75-3.70 (2H, мультиплет, 2H обмениваемый с D2O), 3.18 (1H, дублет дублетов, J = 6.3 и 16.6 Гц), 4.41-4.52 (1H, мультиплет), 5.21 (2H, дублет, J = 2.9 Гц), 5.43-5.51 (1H, мультиплет), 6.52 (1H, дублет, J = 2.5 Гц), 7.28-7.41 (5H, мультиплет).
Инфракрасный спектр поглощения (CHCl3) νмакс см-1: 3500, 2950, 1720, 1660, 1450, 1410, 1371, 1180, 1150, 1010, 880.
Масс спектр m/z = 479 (M+).
Пример 1c.
7-[5-Бензилоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо- 1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил]-3-гидрокси-5-оксогептаноат натрия
(натриевая соль Соединения N 1)
Figure 00000016

103 мг 7-[5-бензилоксимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3- оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-окстагидро-1-нафтил] -3-гидрокси-5- оксогептановой кислоты (полученной, как описано в Примере 1b) растворялось в 2 мл 1:1 по объему смеси диоксана и воды. Затем к раствору на протяжении периода 5 минут при 0oC по каплям добавлялось 1,8 мл 0,1 н. водного раствора гидроокиси натрия, после чего раствор перемешивался в течение 1 часа при комнатной температуре. В конце данного периода времени раствор подвергался сушке вымораживанием, давая 107 мг целевого соединения в виде бесцветного чувствительного к влаге порошка.
Пример 2a.
Аллил 7-[5-(фуран-2-ил)метоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси) -3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-окстагидро-1-нафтил] -3-гидрокси-5-оксогептаноат (аллиловый эфир Соединения N 39)
Figure 00000017

Повторялась процедура сходная с процедурой, описанной в примере 1a, но с использованием 1,33 г аллил 7-[-5-(фуран-2-ил)метоксиимино- 2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-окстагидро- 1-нафтил] -3,5-дигидроксигептаноата (полученного, как описано в Получении 2), давая 599 мг целевого соединения
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCl3, 270 МГц) δ млн.дол.: 0.86 (3, триплет, J= 7.3 Гц), 1.01 (3H, дублет, J=7.3 Гц), 1.09 (3H, дублет, J=7.3 Гц), 1.22 - 1.86 (4H, мультиплет), 1.90 - 2.72 (11H, мультиплет), 2.55 (2H, дублет, J= 6.4 Гц), 3.07 - 3.20 (1H, мультиплет), 3.28 - 3.39 (1H, мультиплет, обмениваемый с D2O), 4.40 - 4.52 (1H, мультиплет), 4.61 (2H, дублет J= 5.9 Гц), 4.98 - 5.38 (2H, мультиплет), 5.12 (2H, дублет, J=2.0 Гц), 5.43 - 5.50 (1H, мультиплет), 5.85 - 6.00 (1H, мультиплет), 6.32 - 6.43 (2H, мультиплет), 6.51 (1H, дублет, J=2.4 Гц), 7.42 - 7.44 (1H, мультиплет).
Инфракрасный спектр поглощения (CHCl3) νмакс см-1: 3500, 2950, 1730, 1660, 1600, 1500, 1460, 1410, 1380, 1350, 1180, 1150, 1010, 980, 920, 880.
Масс спектр m/z=571 (M+).
Пример 2b
7-[5-(фуран-2-ил)метоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3- оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3-гидрокси-5- оксогептановая кислота (Соединение N 39)
Figure 00000018

Повторялось процедура сходная с описанной в Примере 1b, за исключением того, что использовалось 490 мг аллил 7-[5-(фуран-2-ил)метоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо- 1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил]-3-гидрокси-5-оксогептаноата (полученного, как описано в примере 2a), давая 329 мг целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCl3, 270 МГц) δ млн.дол.: 0.86 (3H, триплет, J=7.3 Гц), 1.01 (3H, дублет, J=7.8 Гц), 1.09 (3H, дублет, J= 7.3 Гц), 1.30 - 1.82 (4H, мультиплет), 1.90 - 2.74 (11H, мультиплет), 2.56 (2H, дублет, J= 6.3 Гц), 3.08 - 3.23 (1H, мультиплет), 3.24 - 4.82 (2H, мультиплет, 2H, обмениваемый с D2O); 4.41 - 4.53 (1H, мультиплет), 4.98 - 5.20 (2H, мультиплет), 5.44 - 5.51 (1H, мультиплет), 6.32 - 6.45 (2H, мультиплет), 6.52 (1H, дублет, J=2.4 Гц), 7.43 - 7.44 (1H, мультиплет).
Спектр инфракрасного поглощения (CHCl3) νмакс см-1: 3500, 2950, 1720, 1660, 1500, 1460, 1410, 1380, 1350, 1290, 1180, 1150, 1080, 1000, 980, 920, 880.
Масс спектр m/z=469 (M+-62).
Пример 3a
Аллил 7-[5-)1,3-диоксан-5-ил)метоксвиимино-2-метил-8-(2- метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил]- 3-гидрокси-5-оксогептаноат (аллиловый эфир Соединения N 54)
Figure 00000019

Повторялась процедура, аналогичная процедуре, описанной в примере 1a за исключением того, что использовалось 10,6 г аллил 7-[5-(1,3-диоксан-5-ил)метоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси) -3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3,5-дигидроксигептаноата (полученного, как описано в Получении 3), и получалось 4.3 г целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCCl3, 270 МГц) δ млн.дол.: 0.88 (3H, триплет, J=7.3 Гц), 1.00 (3H, дублет, J=7.3 Гц), 1.11 (3H, дублет, J= 7.3 Гц), 1.31 - 1.82 (5H, мультиплет, 1H обмениваемый с D2O), 1.91 - 2.73 (12H, мультиплет), 2.54 (2H, дублет, J=5.9 Гц), 3.04 - 3.19 (1H, мультиплет), 3.75 (2H, дублет дублетов, J=5.9 и 11.7 Гц), 3.99 (1H, дублет, J=3.9 Гц), 4.03 (1H, дублет, J=3.4 Гц), 4.25 (2H, дублет, J=6.8 Гц), 4.41 - 4.54 (1H, мультиплет), 4.62 (2H, дублет, J=5.9 Гц), 4.81 (1H, дублет, J=5.9 Гц), 4.89 (1H, дублет, J=5.9 Гц), 5.23 - 5.39 (2H, мультиплет), 5.45 - 5.52 (1H, мультиплет), 5.83 - 6.00 (1H, мультиплет), 6.49 (1H, дублет, J=2.4 Гц).
Инфракрасный спектр поглощения (CHCl3) νмакс cм-1: 3500, 2960, 2930, 2850, 1730, 1660, 1460, 1370, 1290, 1260, 1180, 1150, 1030, 980, 970, 930, 880.
Масс спектр m/z = 591 (M+).
Пример 3b
7-[5-(1,3-Диоксан-5-ил)метоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси) -3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил]-3-гидрокси-5- оксогептановая кислота (Соединение N 54)
Figure 00000020

Повторялась процедура, аналогичная процедура, описанной в примере 1b, за исключением того, что использовалось 4,9 г аллил 7-[5-(1,3-диоксан-5-ил)метоксиимино-2-метил-8-(2- метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидрок-1-нафтил] -3- гидрокси-5-оксогептаноата (полученного, как описано в примере 3a), и получалось 3.1 г целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCl3, 270 МГц) δ млн. дол.: 0.88 (3H, триплет, J = 7.3 Гц), 1.01 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.11 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.32-1.83 (4H, мультиплет), 1.94 - 2.88 (14H, мультиплет, 2H обмениваемые с D2O), 2.55 (2H, дублет, J = 6.2 Гц), 3.04 - 3.19 (1H, мультиплет), 3.75 (2H, дублет дублетов J = 6.4 и 11.7 Гц), 3.99 (1H, дублет, J = 3.4 Гц), 4.04 (1H, дублет J = 3.9 Гц), 4.25 (2H, дублет, J = 6.8 Гц), 4.41 - 4.54 (1H, мультиплет), 4.85 (2H, дублет дублетов, J = 5.9 и 20.0 Гц), 5.46 - 5.52 (1H, мультиплет), 6.49 (1H, дублет, J = 2.4 Гц).
Инфракрасный спектр поглощения (CHCl3) δмакс = см-1: 3500, 2950, 2920, 2850, 1720, 1660, 1550, 1460, 1410, 1370, 1290, 1260, 1180, 1150, 1090, 1030, 970, 930, 880.
Масс спектр m/z = 551 (M+).
Пример 4a
Аллил 7-[5-(2-этоксибензилоксиимино)-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3- оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3-гидрокси-5-оксогептаноат (аллиловый эфир Соединения N 126)
Figure 00000021

Повторялась процедура, аналогичная процедуре, описанной в примере 1a, за исключением того, что использовалось 670 мг аллил 7-[5-(2-этоксибензилоксиимино)-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3- оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3,5-дигидроксигептаноата (полученного, как описано в Получении 4), и получалось 205 мг целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCl3, 270 МГц) δ млн. дол.: 0.86 (3H, триплет, J = 7.3 Гц), 1.01 (3H, дублет. J = 7.3 Гц), 1.11 (3H, дублет, J = 6.8 Гц), 1.40 (3H, триплет, J = 7.3 Гц), 1.45 - 1.78 (6H, мультиплет, 1H, обмениваемый с D2O), 1.96 - 2.07 (2H, мультиплет), 2.17 - 2.56 (8H, мультиплет), 2.62 (2H, дублет, J = 4.3 Гц), 3.16 - 3.24 (1H, мультиплет), 4.02 - 4.10 (2H, мультиплет), 4.44 - 4.50 (1H, мультиплет), 4.62 (2H, дублет, J = 5.8 Гц), 5.23 - 5.36 (4H, мультиплет), 5.47 (1H, синглет), 5.84 - 5.96 (1H, мультиплет), 6.54 (1H, дублет, J = 2.4 Гц), 6.85 - 6.96 (2H, мультиплет), 7.23 - 7.33 (2H, мультиплет).
Инфракрасный спектр поглощения (CHCl3) νмакс см-1: 3500, 2925, 1725, 1660, 1490, 1450, 1180, 1150, 1010, 1020, 990, 900, 840.
Масс спектр m/z = (M+ + 1).
Пример 4b 7-[5-(2-Этоксибензилоксиимино)-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3- оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил]-3-гидрокси-5-оксогептановая кислота (Соединение N 126)
Figure 00000022

Повторялась процедура, аналогичная процедуре, описанной в примере 1b, за исключением того, что использовалось 1091 мг аллил 7-[5-(2-этоксибензилоксиимино)-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)- 3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3-гидрокси-5- оксогептаноата (полученного, как описано в Примере 4a), и получалось 164 мг целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCl3, 270 МГц) δ млн. дол.: 0.87 (3H, триплет, J = 7.3 Гц), 1.01 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.12 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.41 (3H, триплет, J = 6.8 Гц), 1.45 - 2.67 (15H, мультиплет, 2H обмениваемые с D2O), 2.57 (2H, дублет, J = 13.1 Гц), 2.64 (2H, дублет, J = 4.8 Гц), 3.16 - 3.24 (1H, мультиплет), 4.06 - 4.16 (2H, мультиплет), 4.43 - 4.52 (1H, мультиплет), 5.29 (2H, синглет), 5.48 (1H, синглет), 6.54 (1H, дублет, J = 2.4 Гц), 6.86 - 6.96 (2H, мультиплет), 7.23 - 7.33 (2H, мультиплет).
Инфракрасный спектр поглощения (CHCl3) νмакс см-1: 3500, 2975, 1725, 1660, 1490, 1450, 1375, 1240, 1180, 1150, 1010.
Масс спектр m/z = 566 (M+ -29).
Пример 5a
Аллил 7-[5-(2-хлорбензилоксиимино)-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо- 1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3-гидрокси-5-оксогептаноат (аллиловый эфир Соединения N 135)
Figure 00000023

Повторялась процедура, аналогичная той, что описана в примере 1a, с тем, исключением, что использовалось 960 мг аллил 7-[5-(2-хлорбензилоксиимино)-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо- 1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3,5-дигидрокси-гептаноата (полученного, как описано в Получении 5), и получалось 334 мг целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCl3, 270 МГц), δ млн.дол.: 0.87 (3H, триплет, J = 7.5 Гц), 1.01 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.09 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.37 - 1.79 (6H, мультиплет, 1H обмениваемый с D2O), 1.96 - 2.07 (2H, мультиплет), 2.18 - 2.71 (8H, мультиплет), 2.62 (2H, дублет, J = 4.3 Гц), 3.16 - 3.24 (1H, мультиплет), 4.44 - 4.53 (1H, мультиплет), 4.60 (2H, дублет, J = 5.8 Гц), 5.23 - 5.36 (4H, мультиплет), 5.47 (1H, синглет), 5.84 - 5.96 (1H, мультиплет), 6.51 (1H, дублет, J = 2.4 Гц), 7.24 - 7.41 (4H, мультиплет).
Инфракрасный спектр поглощения (CHCl3) νмакс = см-1: 3000, 2950, 1725, 1660, 1440, 1410, 1180, 1150, 1090, 1010.
Масс спектр m/z = 616 (M+).
Пример 5b 7-[5-(2-Хлорбензилоксиимино)-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо- 1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3-гидрокси-5- оксогептановая кислота (Соединение N 135)
Figure 00000024

Повторялась процедура, аналогичная процедуре, описанной в примере 1b, за исключением того, что применялось 289 мг аллил 7-[5-(2-хлорбензилоксиимино)-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо- 1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил]-3-гидрокси-5-оксогептаноата (полученного, как описано в Примере 5a), и получалось 209 мг целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCl3, 270 МГц), δ млн.дол.: 0.87 (3H, триплет, J = 7.5 Гц), 1.01 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.09 (3H, дублет, J = 6.8 Гц), 1.33 - 1.83 (4H, мультиплет), 1.94 - 2.67 (11H, мультиплет, 2H обмениваемый с D2O), 2.55 (2H, дублет, J = 6.3 Гц), 2.64 (2H, дублет, J = 4.3 Гц), 3.16 - 3.24 (1H, мультиплет), 4.43 - 4.52 (1H, мультиплет), 5.32 (2H, синглет), 5.48 (1H, синглет), 6.52 (1H, дублет, J = 2.4 Гц), 7.23 - 7.48 (4H, мультиплет).
Инфракрасный спектр поглощения (CHCl3) νмакс см-1: 3500, 2925, 1725, 1660, 1440, 1410, 1375, 1260, 1180, 1150, 1010.
Масс спектр m/z = 577 (M+).
Пример 6a
Аллил 7-[5-(2,6-дихлорбензилоксиимино)-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо- 1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3-гидрокси-5- оксогептаноат (аллиловый эфир Соединения N 136)
Figure 00000025

Повторялась процедура, аналогичная процедуре, описанной в примере 1a, за исключением того, что применялось 1,32 г аллил 7-[5-(2,6-дихлорбензилоксиимино)-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)- 3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил]-3,5-дигидроксигептаноата (полученного, как описано в Получении 6), и получалось 481 мг целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCl3, 270 МГц), δ млн.дол.: 0.86 (3H, триплет, J = 7.3 Гц), 1.01 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.09 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.31 - 1.90 (5H, мультиплет, 2H обмениваемый с D2O), 1.91 - 2.10 (2H, мультиплет), 2.10 - 2.73 (9H, мультиплет), 2.53 (2H, дублет, J = 6.4 Гц), 3.03 - 3.19 (1H, мультиплет), 4.39 - 4.52 (1H, мультиплет), 4.60 (2H, дублет, J = 5.9 Гц), 5.21 - 5.57 (3H, мультиплет), 5.50 (2H, дублет, J = 6.8 Гц), 5.83 - 6.00 (1H, мультиплет), 6.56 (1H, дублет, J = 2.4 Гц), 7.18 - 7.38 (3H, мультиплет).
Инфракрасный спектр поглощения (CHCl3) νмакс см-1: 3500, 1950, 1930, 1900, 1720, 1660, 1580, 1560, 1440, 1370, 1290, 1180, 1150, 1090, 1020, 990.
Масс спектр m/z = 631 (M+ - 19).
Пример 6b
7-[5-(2,6-Дихлорбензилоксиимино)-2-метил-8-(2-метилбутирилокси) -3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3-гидрокси-5-оксогептановая кислота (Соединение N 136)
Figure 00000026

Повторялась процедура, аналогичная процедуре, описанной в примере 1b, за исключением того, что применялось 465 мг аллил 7-[5-(2,6-дихлорбензилоксиимино)-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо- 1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3-гидрокси-5-оксогептаноата (полученного, как описано в Примере 6a), давая 339 мг целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCl3, 270 МГц), δ млн.дол.: 0.86 (3H, триплет, J = 7.3 Гц), 1.01 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.09 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.3 - 1.81 (4H, мультиплет), 1.91 - 2.91 (11H, мультиплет, 2H обмениваемые с D2O), 2.58 (2H, дублет, J = 5.9 Гц), 2.66 (2H, дублет, J = 5.5 Гц), 3.05 - 3.19 (1H, мультиплет), 4.41 - 4.53 (1H, мультиплет), 5.40 - 5.58 (3H, мультиплет), 6.55 (1H, дублет, J = 2.9 Гц), 7.18 - 7.39 (3H, мультиплет).
ИК спектр поглощения (CHCl3) νмакс = см-1: 3500, 2950, 1720, 1660, 1580, 1560, 1460, 1430, 1370, 1290, 1180, 1150, 1090, 1020, 990.
Масс спектр m/z = 445 (M+ - 165).
Пример 7a
Аллил 7-[5-(3-метилизоксазол-5-ил)метоксиимино-2-метил-8- (2-метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3- гидрокси-5-оксогептаноат (аллиловый эфир Соединения N 140)
Figure 00000027

Повторялась процедура аналогичная процедуре, описанной в Примере 1a, за исключением того, что применялось 727 мг аллил 7-[5-(3-метилизоксазол-5-ил)метоксиимино-2-метил-8- (2-метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1- нафтил] -3,5-дигидроксигептаноата (полученного, как описано в Получении 7), и получалось 298 мг целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCl3, 270 МГц), δ млн. дол.: 0.87 (3H, триплет, J = 7.3 Гц), 1.01 (3H, дуплет, J = 7.3 Гц), 1.10 (3H, дуплет, J = 7.3 Гц), 1.29 - 1.84 (4H, мультиплет), 1.91 - 2.12 (1H, мультиплет), 2.14 - 2.73 (11H, мультиплет, 1H обмениваемый с D2O), 2.31 (3H, синглет), 2.54 (2H, дуплет, J = 6.4 Гц), 3.08 - 3.22 (1H, мультиплет), 4.40 - 4.54 (1H, мультиплет), 4.62 (2H, дуплет, J = 5.9 Гц), 5.06 - 5.39 (2H, мультиплет), 5.20 (2H, синглет), 5.44 - 5.51 (1H, мультиплет), 5.83 - 6.00 (1H, мультиплет), 6.13 (1H, синглет), 6.43 (1H, дуплет, J = 2.4 Гц).
Инфракрасный спектр поглощения (CHCl3) νмакс см-1: 3500, 2950, 1730, 1660. 1610, 1410, 1380, 1360, 1290, 1180, 1030, 1000, 900.
Масс спектр m/z = 587 (M+ +1).
Пример 7b
7-[5-(3-Метилизоксазол-5-ил)метоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси) -3-оксо-1,2,3.5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3-гидрокси-5- оксогептановая кислота (Соединение N 140)
Figure 00000028

Повторялась процедура, аналогичная процедуре, описанной в Примере 1b, за исключением того, что применялось 285 мг аллил 7-[5-(3-метилизоксазол-5-ил)метоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси) -3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3-гидрокси-5-оксогептаноата (полученного, как описано в Примере 7a), и получалось 148 мг целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCl3, 270 МГц), δ млн. дол.: 0.88 (3H, триплет, J = 7.3 Гц), 1.01 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.10 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.32 - 1.85 (4H, мультиплет), 1.92 - 2.11 (1H, мультиплет), 2.15 - 3.02 (10H, мультиплет, 2H обмениваемые с D2O), 2.32 (3H, синглет), 2.57 (дуплет, J = 6.8 Гц), 2.61 (2H, дублет, J = 5.9 Гц), 3.08 - 3.23 (1H, мультиплет), 4.42 - 4.54 (1H, мультиплет), 5.20 (2H, синглет), 5.43 - 5.51 (1H, мультиплет), 6.13 (1H, синглет), 6.49 (1H, дуплет, J = 2.4 Гц).
ИК спектр поглощения (CHCl3) νмакс см-1:
3500, 2950, 1720, 1660, 1410, 1380, 1290, 1180, 1150, 1130, 1000.
Масс спектр m/z = 546 (M+).
Пример 8a
Аллил 7-[5-(2-тиенил)метоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси) -3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3-гидрокси -5-оксогептаноат (аллиловый эфир Соединения N 137)
Figure 00000029

Повторялась процедура, аналогичная процедуре, описанной в Примере 1a, за исключением того, что применялось 1,27 г аллил 7-[5-(2-тиенил)метоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3- оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3,5-дигидрокси- гептаноата (полученного, как описано в Получении 8), и получалось 450 мг целевого соединения.
Спектр ЯМР (CDCl3, 270 МГц) δ млн. дол.:
0.86 (3H, триплет, J = 7.5 Гц), 1.02 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.10 (3H, дублет, J = 6.8 Гц), 1.36 - 1.80 (6H, мультиплет, 1H обмениваемый с D2O), 1.91 - 2.08 (2H, мультиплет), 1.14 - 2.71 (8H, мультиплет), 2.62 (2H, дублет, J = 4.3 Гц), 3.08 - 3.17 (1H, мультиплет), 4.42 - 4.51 (1H, мультиплет), 4.62 (2H, дублет, J = 5.8 Гц), 5.23 - 5.36 (4H, мультиплет), 5.46 (1H, синглет), 5.86 - 5.99 (1H, мультиплет), 6.56 (1H, дублет, J = 2.4 Гц), 6.97 - 7.00 (1H, мультиплет), 7.07 - 7.09 (1H, мультиплет), 7.30 - 7.32 (1H, мультиплет).
Инфракрасный спектр поглощения (CHCl3) νмакс = см-1:
3525, 2950, 1725, 1660, 1460, 1410, 1180, 1150, 1000.
Масс спектр m/z = 587 (M+).
Пример 8b
7-5-(2-Тиенил)метоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо- 1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3-гидрокси-5-оксогептановая кислота (Соединение N 137)
Figure 00000030

Повторялась процедура, аналогичная процедуре, описанной в Примере 1b, за исключением того, что применялось 355 мг аллил 7-[5-(2-тиенил)метоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо- 1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3-гидрокси-5-оксогептаноата (полученного, как описано в Примере 8a), и получалось 311 мг целевого соединения.
Спектр ядерно-мангнитного резонанса (CDCl3, 270 МГц) δ млн. дол.: 0.86 (3H, триплет, J = 7.3 Гц), 1.02 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.08 (3H, дублет, J = 6.8 Гц), 1.37 - 1.80 (4H, мультиплет), 1.95 - 2.66 (11H, мультиплет, 2H, обмениваемые с D2O), 2.55 (2H, дублет, J = 6.3 Гц), 2.64 (2H, дублет, J = 4.3 Гц), 3.09 - 3.17 (1H, мультиплет), 4.42 - 4.52 (1H, мультиплет), 5.33 (2H, дублет, J = 0.9 Гц), 5.47 (1H, синглет), 6.57 (1H, дублет, J = 2.9 Гц), 6.97 - 7.01 (1H, мультиплет), 7.07 - 7.09 (1H, мультиплет), 7.30 - 7.33 (1H, мультиплет).
ИК спектр поглощения (CHCl3) νмакс см-1:
3500, 2950, 1725, 1660, 1460, 1430, 1375, 1220, 1180, 1150, 1000.
Масс спектр m/z = 485 (M+-62).
Пример 9a
Аллил 7-(5-(изоксазол-4-ил)метоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3- оксо-1,2,3,5,6.7.8,8a-октагидро-1-нафтил]-3-гидрокси-5-оксогептаноат (аллиловый эфир Соединения N 138)
Figure 00000031

Повторялась процедура, аналогичная процедуре, описанной в Примере 1a, за исключением того, что применялось 630 мг аллил 7-[5-(изоксазол-4-ил)метоксиимино)-2-метил-8-(2-метилбутирилокси) -3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3,5-дигидроксигептаноата (полученного, как описано в Получении 9), и получалось 208 мг целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCl3, 270 МГц), δ млн.дол.: 0.87 (3H, триплет, J = 7.3 Гц), 1.01 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.10 (3H, дублет, J = 6.8 Гц), 1.40 - 1.72 (4H, мультиплет), 1.98 - 2.04 (2H, мультиплет), 2.20 - 2.56 (9H, мультиплет, 1H обмениваемый с D2O), 2.61 - 2.65 (2H, мультиплет), 3.04 - 3.12 (1H, мультиплет), 3.33 (1H, синглет, обмениваемый с D2O), 4.45 - 4.49 (1H, мультиплет), 4.60 - 4.63 (2H, мультиплет), 5.09 (2H, синглет), 5.84 - 5.97 (1H, мультиплет), 6.49 (1H, дублет, J = 2.4 Гц), 6.48 (1H, синглет), 8.34 (1H, синглет).
ИК спектр поглощения (CHCl3) νмакс м-1: 3520, 2950, 1710, 1660, 1370, 1180, 980.
Масс спектр m/z = 515 (M+ - 57), 474, 452, 434, 389, 354, 342.
Пример 9b
7-[5-(2-Изоксазол-4-ил)метоксиимино)-2-метил-8-(2- метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3-гидрокси -5-оксогептановая кислота (Соединение N 138)
Figure 00000032

Повторялась процедура, аналогичная процедуре, описанной в Примере 1b, за исключением того, что применялось 196 мг аллил 7-[5-(изоксазол-4-ил)метоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси) -3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил]-3-гидрокси-5- оксогептаноата (полученного, как описано в Примере 9a), и получалось 171 мг целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCl3, 270 МГц), δ млн.дол.: 0.87 (3H, триплет, J = 7.3 Гц), 0.95 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.10 (3H, дублет, J = 6.8 Гц), 1.38 - 1.79 (5H, мультиплет), 1.97 - 2.09 (2H, мультиплет), 2.16 - 1.67 (10H, мультиплет), 4.00 (2H, широкий, 2H обмениваемый с D2O), 4.44 - 4.49 (1H, мультиплет), 5.09 (2H, синглет), 5.49 (1H, синглет), 6.50 (1H, дублет, J = 2.4 Гц), 6.48 (1H, синглет), 8.34 (1H, синглет).
Инфракрасный спектр поглощения (CHCl3) νмакс = см-1: 3525, 2950, 1710, 1660, 1370, 1180, 980.
Масс спектр m/z = 485 (M+ - 47), 435, 393, 372, 322, 314.
Пример 9c
7-[5-(Изоксазол-4-ил)метоксиимино)-2-метил-8-(2- метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил]-3- гидрокси-5-оксогептаноат натрия (натриевая соль Соединения N 138)
Figure 00000033

151 мг 7-[5-(изоксазол-4-ил)метоксиимино)-2-метил-8-(2- метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] - 3-гидрокси-5-оксогептановой кислоты (полученной, как описано в Примере 9b) растворялось в 2,5 мл 1:1 по объему смеси диоксана и воды. Затем по каплям на протяжении периода 5 минут при 0oC к раствору добавлялось 2,7 мл 0,1 н. водного раствора гидроокиси натрия, и получающаяся смесь перемешивалась в течение 1 часа при комнатной температуре. В конце данного периода времени раствор сушился вымораживанием, давая 153 мг целевого соединения в виде бесцветного чувствительного к влаге порошка.
Пример 10a
Аллил 7-[5-(5-метилизоксазол-3-ил)метоксимино-2-метил-8- (2-метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3- гидрокси-5-оксогептаноат (аллиловый эфир Соединения N 139)
Figure 00000034

Повторялась процедура, аналогичная процедуре, описанной в Примере 1a, за исключением того, что применялось 843 мг аллил 7-[5-(5-метилизоксазол-3-ил)метоксиимино)-2-метил-8-(2- метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] - 3,5-дигидроксигептаноата (полученного, как описано в Получении 10), и получалось 310 мг целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCl3, 270 МГц), δ млн.дол.: 0.87 (3H, триплет, J = 7.3 Гц), 1.01 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.10 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.33 - 1.85 (4H, мультиплет), 1.92 - 2.11 (1H, мультиплет), 2.15 - 2.74 (11H, мультиплет, 1H обмениваемый с D2O), 2.44 (3H, синглет), 2.54 (2H, дублет, J = 6.3 Гц), 3.08 - 3.21 (1H, мультиплет), 4.41 - 4.54 (1H, мультиплет), 4.63 (2H, дублет, J = 5.9 Гц), 5.14 - 5.39 (2H, мультиплет), 5.21 (2H, синглет), 5.44 - 5.51 (1H, мультиплет), 5.84 - 6.00 (1H, мультиплет), 6.05 (1H, синглет), 6.51 (1H, дублет, J = 2.4 Гц).
Инфракрасный спектр поглощения (CHCl3) νмакс м-1: 3500, 2950, 1730, 1660, 1600, 1460, 1380, 1300, 1180, 1150, 1040, 1010, 980.
Масс спектр m/z = 587 (M+ +1.
Пример 10b
7-[5-(2-Метилизоксазол-3-ил)метоксиимино-2-метил-8-(2- метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил]-3-гидрокси -5-оксогептановая кислота (Соединение N 139)
Figure 00000035

Повторялась процедура, аналогичная процедуре, описанной в Примере 1b, за исключением того, что применялось 290 мг аллил 7-[5-(5-метилизоксазол-3-ил)метоксиимино)-2-метил-8-(2- метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил]-3- гидрокси-5-оксогептаноата (полученного, как описано в Примере 10a), и получалось 201 мг целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCl3, 270 МГц), δ млн.дол.: 0.87 (3H, триплет, J = 7.3 Гц), 1.01 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.10 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.33 - 2.54 (14H, мультиплет, мультиплет, 1H обмениваемый с D2O); 2.44 (3H, синглет), 2.57 (2H, дублет, J = 6.4 Гц), 2.66 (2H, дублет, J = 5.9 Гц), 3.11 - 3.20 (1H, мультиплет), 3.27 - 3.83 (1H, мультиплет, обмениваемый с D2O), 4.42 - 4.53 (1H, мультиплет), 5.20 (2H, синглет), 5.45 - 5.52 (1H, мультиплет), 6.04 (1H, синглет), 6.51 (1H, дублет, J = 2.4 Гц).
Инфракрасный спектр поглощения (CHCl3) νмакс = см-1: 3500, 2950, 1720, 1660, 1600, 1380, 1340, 1290, 1180, 1150, 1040, 1000, 970, 900.
Масс спектр m/z = 484 (M+ -62).
Пример 11a
Аллил 7-[5-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)-метоксиимино-2-метил-8-(2- метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3- гидрокси-5-оксогептаноат (аллиловый эфир Соединения N 141)
Figure 00000036

Повторялась процедура, аналогичная процедуре, описанной в Примере 1a, за исключением того, что применялось 243 мг аллил 7-[5-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)метоксиимино-2-метил-8-(2- метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] - 3,5-дигидроксигептаноата (полученного, как описано в Получении 11), и получалось 95 мг целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCl3, 270 МГц) δ млн. дол.: 0.87 (3H, триплет, J = 7.3 Гц), 1.01 (3H, дублет. J = 7.3 Гц), 1.10 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.34 - 1.78 (4H, мультиплет), 1.91 - 2.68 (12H, мультиплет, 1H обмениваемый с D2O), 2.28 (3H, синглет), 2.41 (3H, синглет), 2.53 (2H, дублет, J = 6.4 Гц), 3.04 (1H, дублет дублетов, J = 6.8 и 17.9 Гц), 4.41 - 4.52 (1H, мультиплет), 4.61 (2H, дублет, J = 5.4 Гц), 4.95 (2H, синглет), 5.22 - 5.38 (2H, мультиплет), 5.43 - 5.49 (1H, мультиплет), 5.84 - 6.00 (1H, мультиплет), 6.47 (1H, дублет, J = 2.9 Гц).
Инфракрасный спектр поглощения (CHCl3) νмакс см-1: 3500, 2830, 1720, 1660, 1460, 1420, 1180, 1150, 1000.
Масс спектр высокой разрешающей способности:
Вычислено для C32H44O9N2 : 600.3031 (M+)
Найдено : 600.3033.
Пример 11b 7-[5-(3,5-Диметилизоксазол-4-ил)метоксиимино-2-метил-8-(2- метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3- гидрокси-5-оксогептановая кислота (Соединение N 141)
Figure 00000037

Повторялась процедура, аналогичная процедуре, описанной в Примере 1b, за исключением того, что применялось 218 мг аллил 7-[5-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)метоксиимино-2-метил-8-(2- метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил]- 3-гидрокси-5-оксогептаноата (полученного, как описано в Примере 11a), и получалось 155 мг целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCl3, 270 МГц) δ млн. дол.: 0.87 (3H, триплет, J = 7.3 Гц), 1.01 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.10 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.38 - 1.80 (4H, мультиплет), 1.92 - 3.20 (11H, мультиплет, 2H обмениваемые с D2O), 2.28 (3H, синглет), 2.41 (3H, синглет), 2.56 (2H, дублет, J = 6.4 Гц), 2.65 (2H, дублет, J = 6.3 Гц), 3.04 (1H, дублет дублетов, J = 6.8 и 17.9 Гц), 4.41 - 4.53 (1H, мультиплет), 4.95 (2H, синглет), 5.42 - 5.50 (1H, мультиплет), 6.48 (1H, дублет, J = 2.9 Гц).
Инфракрасный спектр поглощения (CHCl3) νмакс см-1: 3500, 2950, 1720, 1660, 1460, 1420, 1380, 1260, 1180, 1150, 1000.
Масс спектр m/z = 498 (M+ -62).
Пример 11c
7-[5-(3,5-Диметилизоксазол-4-ил)метоксиимино-2-метил-8-(2- метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3- гидрокси-5-оксогептаноат (натриевая соль Соединения N 141)
Figure 00000038

139 мг 7-[5-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)метоксиимино-2-метил- 8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] - 3-гидрокси-5-оксогептановой кислоты (полученной, как описано в Примере 11b), растворялось в 2,7 мл 1:1 по объему смеси диоксана и воды. К раствору по каплям при 0oC на протяжении 5 минут добавлялось 2,35 мл 0,1 н. водного раствора гидроокиси натрия, раствор затем перемешивали в течение 1 часа при комнатной температуре. В конце данного периода времени раствор подвергался сушке вымораживанием, и получалось 140 мг целевого соединения в виде бесцветного чувствительного к влаге порошка.
Пример 12a
Аллил 7-[5-гексилимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо- 1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3-гидрокси-5-оксогептаноат (аллиловый эфир Соединения N 142)
Figure 00000039

Повторялась процедура, аналогичная процедуре, описанной в Примере 1a, за исключением того, что применялось 515 мг аллил 7-[5-гексилимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо- 1,2,3,4,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3,5-дигидрокси-гептаноата (полученного, как описано в Получении 12) и получалось 149 мг целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCl, 270 МГц) δ млн.дол: 0.87 (3H, триплет, J= 7.3 Гц), 0.89 (1H, дуплет, J=6.4 Гц), 1.00 (3H, дуплет, J=7.3 Гц), 1.11 (3H, дуплет, J=7.3 Гц), 1.23 - 1.80 (12H, мультиплет), 1.93 - 2.09 (3H.мультиплет, 1H обмениваемый с D2O), 2.13 - 2.56 (9H, мультиплет), 2.61 - 2.72 (2H, мультиплет), 3.09 - 3.17 (1H, мультиплет), 4.11 - 4.21 (2H, мультиплет), 4.43 - 4.50 (1H, мультиплет), 4.60 - 4.63 (2H, мультиплет), 5.23 - 5.37 (2H, мультиплет), 5.47 (1H, синглет), 5.85 - 5.97 (1H, мультиплет), 6.52 (1H, дуплет, J = 2.9 Гц),
Инфракрасный спектр поглощения (CHCl3) νмакс см-1: 3525, 2925, 1720, 1660, 1460, 1380, 1180, 1150, 1020, 980.
Масс спектр высокой разрешающей способности:
Вычислено для C32H49O9N2 : 576.3502 (M+ + 1)
Найдено : 567.3498.
Пример 12b
7-[5-Гексилметоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо- 1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3-гидрокси-5-оксогептановая кислота (Соединение N 142)
Figure 00000040

Повторялась процедура, аналогичная процедуре, описанной в Примере 1b, за исключением того, что применялось 140 мг аллил 7-[5-гексилметоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо- 1,2,3,4,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3-гидрокси-5-оксо-гептаноата (полученного, как описано в Примере 12a), и получалось 106 мг целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCl3, 270 МГц), δ млн. дол.: 0.88 (3H, триплет, J=7.3 Гц), 0.89 (3H, дуплет, J=6.4 Гц), 1.01 (3H, дуплет, J= 7.3 Гц), 1.11 (3H, дуплет, J=6.8 Гц), 1.23 - 1.81 (13H, мультиплет), 1.98 - 2.10 (2H, мультиплет), 2.14 - 2.67 (10H, мультиплет), 3.09-3.19 (1H, мультиплет), 3.72 (2H, широкий, 1H обмениваемый с D2O), 4.08-4.24 (2H, мультиплет), 4.44 - 4.53 (1H, мультиплет), 5.49 (1H, синглет), 6.53 (1H, дуплет, J= 2.4 Гц).
Инфракрасный спектр поглощения (CHCl3) νмакс cм-1: 3500, 2925, 1720, 1660, 1460, 1380, 1180 1150, 1020, 900.
Масс спектр m/Z = 473 (M+ -62), 432, 371, 340.
Пример 13
Бензил 7-[5-(1,3-диоксан-5-ил)метоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо- 1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3-гидрокси-5-оксогептаноат (бензиловый эфир Соединения N 54)
Figure 00000041

Повторялась процедура аналогичная процедуре, описанной в Примере 1a, за исключением того, что применялось 11,7 г бензил 7-[5-(1,3-диоксан-5-ил)метоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо- 1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3,5-дигидроксигептаноата (полученного, как описано в Получении 13), и получалось 5,3 г целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCl, 270 МГц), δ/ млн.дол.: 0.87 (3H, триплет, J=7.3 Гц), 0.99 (3H, дублет,J=7.3 Гц), 1.11 (3H, дуплет, J = 7.3 Гц), 1.37-1.72 (4H, мультиплет), 1.90 - 2.90 (2H, мультиплет), 2.13 - 2.72 (12H, мультиплет), 3/04 - 3/18 (1H, мультиплет), 3.33 (1H, широкий синглет, обмениваемый с D2O), 3.75 (2H, дублет дублетов, J=6.3 и 11,6 Гц), 4.02 (2H, дублет дублетов, J=4.0 и 11,9 Гц), 4,25 (2H, дублет, J=6.6 Гц), 4.42 - 4.54 (1H, мультиплет), 4.85 (2H, АВ - квартет J=5.9 и 19.8 Гц), 5.15 (2H, синглет), 5.48 (1H, широкий синглет), 6.49 (1H, дублет, J=2.0 Гц), 7,36 (5H, синглет).
Получение 1
Аллил 7-[5-бензилоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)- 3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил]-3,5-дигидрокси-гептаноат
Figure 00000042

0,98 г (1,87 ммоля) {2-[5-бензилоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо- 1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил]-этил}-4-гидрокси-3,4,5,6-тетрагидро- 2H-пиран-2-она растворялась в 20 мл 1:1 по объему смеси диоксана и воды. Затем по каплям на протяжении 2,5 часов при 0oC к раствору добавлялось 19,6 мл 0,1 н. раствора гидроокиси натрия, раствор затем перемешивался в течение 30 минут при той же температуре, а затем еще 1 час при комнатной температуре. В конце данного периода времени раствор сушился вымораживанием. Получающаяся в результате натриевая соль растворялась в 11 мл диметилформамида, а затем добавлялось 1,62 мл (18,7 ммоля) аллилбромида, и смесь перемешивалась в течение 17 часов в атмосфере азота. В конце данного периода времени диметилформамид удалялся из реакционной смеси с помощью перегонки при пониженном давлении. К остатку добавлялось 40 мл воды, и получающаяся смесь экстрагировалась этилацетатом (дважды, каждый раз 30 мл). Этилацетатный экстракт затем промывался насыщенным водным раствором хлористого натрия, сушился над безводным сульфатом магния, фильтровался и конденсировался с помощью выпаривания при пониженном давлении. Получающийся маслянистый остаток очищался с помощью мгновенной хроматографии (флэш-хроматография) на колонке через силикагель, и использованием 2:1 по объему смеси этилацетата и гексана в качестве элюента, давая 0,90 г (выход 84%) целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCl3, 270 МГц) δ млн.дол: 0.86 (3H, триплет, J=7.3 Гц), 1.04 (3H, дублет, J= 7.3 Гц), 1.10 (3H, дублет, 7,3 Гц), 1.15-1.84 (8H, мультиплет), 1.91 - 2.08 (1H, мультиплет), 2.16 - 2.79 (8H, мультиплет), 2H обмениваемые с D2O), 2.52 (2H, дублет, J=6.4 Гц), 3.10 - 3.22 (1H, мультиплет), 3.78 - 3.86 (1H, мультиплет), 4.21 - 4.32 (1H, мультиплет), 4.62 (2H, дублет, J=5.9 Гц), 5.12 - 5.39 (2H, мультиплет), 5.20 (2H, дублет, J= 2.9 Гц), 5.47 - 5.53 (1H, мультиплет), 5.82 - 6.01 (1H, мультиплет), 6,52 (1H, дублет, J= 2.5 Гц), 7,29 - 7,43 (5H, мультиплет).
Инфракрасный спектр поглощения (CHCl3) νмакс см-1: 3500, 2940, 1720, 1660, 1450, 1370, 1180, 1150, 1010, 980, 910.
Масс спектр m/Z = 583 (M+).
Получение 2
Аллил 7-[5-(фуран-2-ил)метоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси) -3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-окстагидро-1-нафтил]-3,5-дигидроксигептаноат
Figure 00000043

Повторялась процедура, аналогичная процедуре, описанной в Получении 1, по использовалось 1,31 г {2-[5-(фуран-2-ил)метоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3- оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил]-этил}-4-гидрокси-3,4,5,6- тетрагидро-2H-пиран-2-она, и получалось 1,34 целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCl3, 270 МГц) δ млн.дол.: 0.86 (3H, триплет, J=7.3 Гц), 1.02 (3H, дублет, J=7.3 Гц), 1.09 (3H, дублет, J= 7.3 Гц), 1.13 - 1.84 (8H, мультиплет), 1.91 - 2.68 (11H, мультиплет, 2H, обмениваемые с D2O), 3.07 - 3.20 (1H, мультиплет), 3.73 - 3.88 (1H, мультиплет), 4.20 - 4.33 (1H, мультиплет), 4.62 (2H, дублет, J=5.9 Гц), 5.03 - 5.39 (4H, мультиплет), 5.45 - 5.55 (1H, мультиплет), 5.84 - 6.00 (1H, мультиплет), 6.32 - 6.56 (3H, мультиплет), 7.43 (1H, дублет, J=2.4 Гц).
Инфракрасный спектр поглощения (CHCl3), δмакс см-1: 3500, 2950, 2850, 1720, 1660, 1500, 1430, 1370, 1350, 1320, 1180, 1150, 1080, 1000, 980, 920, 880.
Масс спектр m/z=556 (M+-17).
Получение 3
Аллил 7-[5-(1,3-диоксан-5-ил)метоксиимино-2-метил-8-(2- метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3,5-дигидроксигептаноат
Figure 00000044

Повторялась процедура, аналогичная процедуре, описанной в Получении 1, но с использованием 10,0 {2-[5-(1,3-диоксан-5-ил)метоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси) -3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил]-этил}-4-гидрокси -3,4,5,6-тетрагидро-2H-пиран-2-она, и получалось 10,6 г целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCl3, 270 МГц) δ млн.дол.: 0.87 (3H, триплет, J=7.3 Гц), 1.01 (3H, дублет, J=7.3 Гц), 1.10 (3H, дублет, J= 7.3 Гц), 1.15 - 2.08 (11H, мультиплет, 2H обмениваемые с D2O), 2.19 - 2.60 (7H, мультиплет), 2.52 (2H, дублет, J=5.9 Гц), 3.12 (1H, дублет дублетов, J= 5.9 и 16.1 Гц), 3.71 - 3.87 (1H, мультиплет), 3.74 (2H, дублет дублетов, = 6.4 и 11.7 Гц), 3.98 - 4.07 (2H,мультиплет), 4.22 - 4.32 (1H, мультиплет), 4.25 (2H, дублет, J=7.3 Гц), 4.62 (2H, дублет, J=5.9 Гц), 4.81 (1H, дублет, J=6.6 Гц), 4.88 (1H, дублет, J=5.9 Гц), 5.23 - 5.38 (2H, мультиплет), 5.50 - 5.55 (1H, мультиплет), 5.86 - 5.98 (1H, мультиплет), 6.49 (1H, дублет, J=2.2 Гц).
Инфракрасный спектр поглощения (CHCl3) νмакс = см-1: 3500, 2960, 2930, 2850, 1720, 1660, 1460, 1370, 1290, 1180, 1150, 1030, 980, 930, 880, 840.
Масс спектр m/z=593 (M+).
Получение 4
Аллил 7-[5-(2-этоксибензилоксиимино)-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо- 1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил]-3,5-дигидроксигептаноат
Figure 00000045

Повторялась процедура, аналогичная процедуре, описанной в Получении 1, но с использованием 690 мг {2-[5-(2-этоксибензилоксиимино)-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо -1,2,3,5,6,7,8,8a-оксагидро-1-нафтил] -этил} -4-гидрокси-3,4,5,6- тетрагидро-2H-пиран-2-она, и получалось 680 мг целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCl3, 270 МГц), δ млн.дол: 0.86 (3H, триплет, J=7.3 Гц), 1.02 (3H, дублет, J=7.3 Гц), 1.11 (3H, дублет, J= 6.8 Гц), 1.36 - 1.81 (12H, мультиплет) 1.92 - 2.04 (2H, мультиплет), 2.17 - 2.60 (8H, мультиплет, 1H, обмениваемый с D2O), 3.15 - 3.25 (1H, мультиплет), 3.78 - 3.83 (1H, мультиплет) 4.02 - 4.16 (2H, мутиплет), 4.24 - 4.29 (1H, мультиплет), 4.63 (2H, дублет, J=5.8 Гц), 5.23 - 5.37 (4H, мультиплет), 5.51 (1H, синглет), 5.84 - 5.99 (1H, мультиплет), 6.54 (1H, дублет, J=2.4 Гц), 6.86 - 6.96 (2H, мультиплет), 7.23 - 7.34 (2H, мультиплет).
Инфракрасный спектр поглощения (CHCl3) δмакс см-1: 3500, 2960, 1725, 1660, 1490, 1450, 1180, 1150, 1010.
Масс спектр m/z=627 (M+).
Получение 5
Аллил 7-[5-(2-хлорбензилоксиимино)-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо -1,2,3,4,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил]-3,5-дигидроксигептаноат
Figure 00000046

Повторялась процедура, аналогичная процедуре, описанной в Получении 1, но с использованием 970 мг {2-[5-(2-хлорбензилоксиимино)-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо- 1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил]-этил}-4-гидрокси-3,4,5,6- тетрагидро-2H-пиран-2он, и получалось 970 мг целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCl3, 270 МГц), δ млн.дол.: 0.86 (3H, триплет, J = 7.5 Гц), 1.02 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.11 (3H, дублет, J = 6.8 Гц), 1.36 - 1.82 (8H, мультиплет), 1.94 - 2.01 (1H, мультиплет), 2.19 - 2.60 (10H, мультиплет, 1H обмениваемый с D2O), 3.15 - 3.25 (1H, мультиплет), 3.76 - 3.85 (1H, мультиплет), 4.22 - 4.31 (1H, мультиплет), 4.63 (2H, дублет, J = 5.8 Гц), 5.23 - 5.37 (4H, мультиплет), 5.51 (1H, синглет), 5.84 - 5.99 (1H, мультиплет), 6.52 (1H, дублет, J = 2.4 Гц), 7.24 - 7.42 (4H, мультиплет).
Инфракрасный спектр поглощения (CHCl3) νмакс м-1: 3500, 2925, 1720, 1660, 1440, 1180, 1150, 1010.
Масс спектр m/z = 541 (M+ - 77).
Получение 6
7-[5-(2,6-дихлорбензилоксиимино)-2-метил-8-(2- метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил]-3,5- дигидроксигептаноат
Figure 00000047

Повторялась процедура, аналогичная процедуре, описанной в Получении 1, но с использованием 1,41 г {2-[5-(2,6-дихлорбензилоксиимино)-2-метил-8-(2- метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -этил} - 4-гидрокси-3,4,5,6-тетрагидро-2H-пиран-2-она, и получалось 1,33 г целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCl3, 270 МГц), δ млн.дол.: 0.86 (3H, триплет, J = 7.3 Гц), 1.02 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.08 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.13 - 1.30 (1H, мультиплет), 1.31 - 1.84 (9H, мультиплет, 2H обмениваемый с D2O), 1.92 - 2.08 (1H, мультиплет), 2.12 - 2.60 (6H, мультиплет), 2.51 (2H, дублет, J = 6.4 Гц), 3.05 - 3.19 (1H, мультиплет), 3.72 - 3.89 (1H, мультиплет), 4.20 - 4.32 (1H, мультиплет), 4.62 (2H, дублет, J = 5.9 Гц), 5.21 - 5.57 (3H, мультиплет), 5.50 (2H, дублет, J = 7.3 Гц), 5.83 - 6.00 (1H, мультиплет), 6.55 (1H, дублет, J = 2.4 Гц), 7.18 - 7.38 (3H, мультиплет).
Инфракрасный спектр поглощения (CHCl3) νмакс = м-1: 3500, 2950, 2930, 2900, 1720, 1660, 1580, 1560, 1440, 1370, 1290, 1180, 1150, 1090, 1020, 990, 900, 840.
Масс спектр m/z = 541 (M+ - 103).
Получение 7
Аллил 7-[5-(3-метилизоксазол-5-ил)метоксиимино)-2-метил-8-(2- метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -3,5- дигидроксигептаноат
Figure 00000048

Повторялась процедура, аналогичная процедуре, описанной в Получении 1, но с использованием 700 мг {2-[5-(3-метилизоксазол-5-ил)метоксиимино-2-метил-8-(2- метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] -этил} -4-гидрокси-3,4,5,6-тетрагидро-2H-пиран-2-она, и получалось 736 мг целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCl3, 270 МГц), δ млн.дол.: 0.87 (3H, триплет, J = 7.3 Гц), 1.02 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.10 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.15 - 1.27 (1H, мультиплет), 1.34 - 1.85 (7H, мультиплет), 1.93 - 2.70 (9H, мультиплет, 2H обмениваемый с D2O), 2.32 (3H, синглет), 2.51 (2H, дублет, J = 6.4 Гц), 3.07 - 3.21 (1H, мультиплет), 3.73 - 3.90 (1H, мультиплет), 4.20 - 4.34 (1H, мультиплет), 4.62 (2H, дублет, J = 5.4 Гц), 5.10 - 5.39 (2H, мультиплет), 5.20 (2H, синглет), 5.48 - 5.55 (1H, мультиплет), 5.83 - 6.00 (1H, мультиплет), 6.14 (1H, синглет), 6.49 (1H, дублет, J = 2.9 Гц).
Инфракрасный спектр поглощения (CHCl3) νмакс м-1: 3500, 2950, 1730, 1660, 1600, 1370, 1360, 1180, 1150, 1070, 1030, 1000, 980.
Масс спектр m/z = 571 (M+ - 17).
Получение 8
Аллил 7-[5-(2-тиенил)метоксиимино)-2-метил-8-(2- метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил]-3,5- дигидроксигептаноат
Figure 00000049

Повторялась процедура, аналогичная процедуре, описанной в Получении 1, но с использованием 1,37 г {2-[5-(2-тиенил)метоксиимино)-2-метил-8-(2- метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] этил} - 4-гидрокси-3,4,5,6-тетрагидро-2H-пиран-2-она, и получалось 1,28 г целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCl3, 270 МГц), δ млн.дол.: 0.85 (3H, триплет, J = 7.3 Гц), 1.03 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.10 (3H, дублет, J = 6.8 Гц), 1.33 - 1.80 (8H, мультиплет), 1.95 - 2.58 (9H, мультиплет), 3.09 - 3.18 (1H, мультиплет), 3.59 (1H, синглет, обмениваемый с D2O), 3.79 - 3.83 (2H, мультиплет, 1H обмениваемый с D2O), 4.26 - 4.29 (1H, мультиплет), 4.63 (2H, дублет, J = 5.8 Гц), 5.22 - 5.38 (4H, мультиплет), 5.50 (1H, синглет), 5.89 - 5.99 (1H, мультиплет), 6.57 (1H, дублет, J = 2.5 Гц), 6.97 - 7.01 (1H, мультиплет), 7.07 - 7.09 (1H, мультиплет), 7.30 - 7.33 (1H, мультиплет).
Инфракрасный спектр поглощения (CHCl3) νмакс см-1: 3500, 2925, 1725, 1660, 1460, 1180, 1150, 980.
Масс спектр m/z = 513 (M+ -76).
Получение 9
Аллил 7-[5-(изоксазол-4-ил)метоксиимино-2-метил-8-(2- метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил]-3,5- дигидроксигептаноат
Figure 00000050

Повторялась процедура, аналогичная процедуре, описанной в Получении 1, но с использованием 600 мг {2-[5-(изоксазол-4- ил)метоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо- 1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил]этил}-4-гидрокси-3,4,5,6- тетрагидро-2H-пиран-2-она, и получалось 630 мг целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCl3, 270 МГц) δ млн. дол.: 0.87 (3H, триплет, J = 7.3 Гц), 1.02 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.10 (3H, дублет, J = 6.8 Гц), 1.16 - 1.79 (7H, мультиплет), 1.96 - 2.09 (2H, мультиплет), 2.15 - 2.60 (10H, мультиплет, 2H обмениваемые с D2O), 2.61 - 2.65 (2H, мультиплет), 3.09 (1H, дублет дублетов, = 6.4 и 16.1 Гц), 3.78 - 3.84 (1H, мультиплет), 4.23 - 4.32 (1H, мультиплет), 4.61 - 4.64 (2H, мультиплет), 5.09 (2H, синглет), 5.24 - 5.37 (2H, мультиплет), 5.51 (1H, синглет), 5.85 - 5.99 (1H, мультиплет), 6.50 (1H, дублет, J = 2.4 Гц). 8.34 (1H, синглет), 8.48 (1H, синглет).
Инфракрасный спектр поглощения (CHCl3) νмакс = см-1: 3500, 2925, 1715, 1660, 1180, 980.
Масс спектр m/z = 538 (M+ -36), 476, 436, 374, 356.
Получение 10
Аллил 7-[5-(5-метилизоксазол-3-ил)метоксиимино-2-метил-8- (2-метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил]- 3,5-дигидроксигептаноат
Figure 00000051

Повторялась процедура, аналогичная процедуре, описанной в Получении 1, но с использованием 800 мг {2-[5-(5-метилизоксазол-3- ил)метоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо- 1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] этил} -4-гидрокси-3,4,5,6- тетрагидро-2H-пиран-2-она, и получалось 857 мг целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCl3, 270 МГц) δ млн. дол.: 0.87 (3H, триплет, J = 7.3 Гц), 1.02 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.10 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.17 - 1.89 (8H, мультиплет), 1.89 - 2.80 (9H, мультиплет, 2H обмениваемые с D2O), 2.43 (3H, синглет), 2.51 (2H, дублет, J = 6.3 Гц), 3.08 - 3.22 (1H, мультиплет), 3.70 - 3.90 (1H, мультиплет), 4.19 - 4.33 (1H, мультиплет), 4.61 (2H, дублет, J = 5.9 Гц), 5.13 - 5.39 (2H, мультиплет), 5.21 (2H, синглет), 5.45 - 5.56 (1H, мультиплет), 5.82 - 6.00 (1H, мультиплет), 6.05 (1H, синглет), 6.51 (1H, дублет, J = 2.9 Гц).
Инфракрасный спектр поглощения (CHCl3) νмакс см-1: 3500, 2900, 1720, 1660, 1370, 1180, 1150, 1070, 1030, 1000, 980.
Масс-спектр m/z = 589 (M+ +1).
Получение 11
Аллил 7-[5-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)метоксиимино-2- метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1- нафтил] -3,5-дигидроксигептаноат
Figure 00000052

Повторялась процедура, аналогичная описанной в Получении 1, но с использованием 1,01 г { 2-[5-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)метоксиимино- 2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1- нафтил] -этил}-4-гидрокси-3,4,5,6-тетрагидро-2H-пиран-2-она, и получалось 1,02 г целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCl3, 270 МГц) δ млн. дол: 0.86 (3H, триплет, J = 7.3 Гц), 1.01 (3H, дублет, J = 7.3 Гц). 1.10 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.16 - 1.27 (1H, мультиплет), 1.36 - 1.83 (7H, мультиплет), 1.93 - 2.04 (1H, мультиплет), 2.12 - 2.76 (8H, мультиплет, 1H обмениваемый с D2O), 2.29 (3H, синглет), 2.42 (3H, синглет), 2.51 (2H, дублет, J = 6.4 Гц), 3.05 (1H, дублет дублетов, J = 6.8 и 16.6 Гц) 3.75 - 3.86 (1H, мультиплет), 4.22 - 4.33 (1H, мультиплет), 4.63 (2H, дублет, J = 5.9 Гц), 4.95 (2H, синглет), 5.23 - 5.38 (2H, мультиплет), 5.48 - 5.54 (1H, мультиплет), 5.84 - 6.00 (1H, мультиплет), 6.48 (1H, дублет, J = 2.9 Гц).
Инфракрасный спектр поглощения (CHCl3) νмакс см-1: 3500, 2940, 1720, 1660, 1460, 1420, 1180, 1150, 1000.
Масс спектр высокого разрешения:
Вычислено ля C32H46O9N2 : 602,3181 (M+),
Найдено : 602,3183.
Получение 12
Аллил 7-[5-гексилимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо- 1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил]-3,5-дигидроксигептаноат
Figure 00000053

Повторялась процедура, аналогичная описанной в Получении 1, но с использованием 750 мл {2-[5-гексилимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)- 3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] этил} -4-гидрокси- 3,4,5,6-тетрагидро-2H-пиран-2-она, и получалось 563 мг целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCl3, 270 МГц) δ млн. дол: 0.86 (3H, триплет, J = 7.3 Гц), 0.89 (3H, дублет, J = 6.8 Гц), 1.02 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.11 (3H, дублет, J = 6.8 Гц), 1.19 - 1.81 (17H, мультиплет, 1H обмениваемый с D2O), 1.96 - 2.02 (1H, мультиплет), 2.16 - 2.30 (2H, мультиплет), 2.36 (1H, квартет, J = 6.8 Гц), 2.46 - 2.55 (4H, мультиплет), 3.13 (1H, дублет дублетов, J = 6.4 и 16.1 Гц), 3.59 (1H, синглет, обмениваемый с D2O), 3.78 - 3.84 (2H, мультиплет), 4.24 - 4.30 (1H, мультиплет), 4.61 - 4.64 (2H, мультиплет), 5.24 - 5.37 (2H, мультиплет), 5.52 (1H, синглет), 5.85 - 5.99 (1H, мультиплет), 6.53 (1H, дублет, J = 2.4 Гц).
Инфракрасный спектр поглощения (CHCl3) νмакс = см-1: 3500, 2925, 1730, 1660, 1460, 1380, 1180, 1150, 1020, 980.
Масс спектр высокого разрешения:
Вычислено: для C32H51O8N2: 577.3623 (M+),
Найдено: 577.3626.
Получение 13
Бензил 7-[5-(1,3-диоксан-5-ил)метоксиимино-2-метил-8-(2- метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил]- 3,5-дигидроксигептаноат
Figure 00000054

10,0 г (18,7 ммоля) {2-[5-(1,3-диоксан-5-ил)метоксиимино-2-метил- 8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8a-октагидро-1-нафтил] этил] - 4-гидрокси-3,4,5,6-тетрагидро-2H-пиран-2-она растворялось в 230 мл 1:1 по объему смеси диоксана и воды. К раствору по каплям на протяжении 3,5 часов добавлялось 196 мл 0,1 н. водного раствора гидроокиси натрия, и получающаяся смесь перемешивалась в течение 1 часа при 0oC, а затем еще в течение 1 часа при комнатной температуре. В конце данного периода времени раствор сушился вымораживанием. Получающаяся в результате натриевая соль растворялась в 110 мл диметилформамида, а затем добавлялось 6,67 мл (56,1 ммоля) бензилбромида, и смесь перемешивалась в течение 17 часов в атмосфере азота. В конце данного периода диметилформамид удалялся из реакционной смеси с помощью перегонки при пониженном давлении. К остатку добавлялось 400 мл воды, и затем получающаяся смесь экстрагировалась этилацетатом (два раза, каждый раз 300 мл). Этилацетатный слой промывался насыщенным водным раствором хлорида натрия, сушился над безводным сульфатом магния, фильтровался и конденсировался с помощью выпаривания при пониженном давлении. Получающийся маслянистый остаток очищался с помощью флэш хроматографии на колонке через силикагель, с использованием 1:2 по объему смеси этилацетата и гексана в качестве элюента, давая 11,7 г целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CDCl3, 2700 МГц), δ млн.дол.: 0.88 (3H, триплет, J = 7.3 Гц), 1.03 (3H, дублет, J = 7.3 Гц), 1.12 (3H, дублет, J = 6.6 Гц), 1.15 - 1.85 (11H, мультиплет, 2H обмениваемые с D2O), 1.92 - 2.07 (1H, мультиплет), 2.13 - 2.58 (4H, мультиплет), 2.53 (2H, дублет, J = 5.9 Гц), 3.11 (1H, дублет дублетов, J = 5.9 и 15.8 Гц), 3.72 - 3.88 (3H, мультиплет), 4.03 (2H, дублет дублетов, J = 4.0 и 11.9 Гц), 4.22 - 4.33 (1H, мультиплет), 4.27 (2H, дублет, J = 7.3 Гц), 4.83 (1H, дублет, J = 5.9 Гц), 4.90 (1H, дублет, J = 5.9 Гц), 5.18 (2H, синглет), 5.51 - 5.57 (1H, мультиплет), 6.51 (1H, дублет, J = 2.6 Гц), 7.38 (5H, синглет).
Инфракрасный спектр поглощения (CHCl3) νмакс см-1: 3500, 2960, 2930, 2850, 1720, 1660, 1460, 1380, 1290, 1180, 1150, 1030, 970.
Масс спектр m/z = 518 (M+ - 123).
Получение 14
Гидрохлорид o-фурфурилгидроксиламина
14(!) N-фурфурилоксифталимид
43,5 г N-гидроксифталимида добавлялось к раствору 31,1 г фурфурилхлорида в 80 мл диметилформамида, и смесь охлаждалась до 0oC. Затем к смеси по каплям добавлялось 40,6 мл триэтиламина, после чего реакционная смесь перемешивалась при 0oC в течение 2 часов, а затем при комнатной температуре в течение 24 часов. В конце данного периода времени реакционная смесь выливалась в смесь льда и воды. Получающиеся в результате бесцветные кристаллы собирались с помощью фильтрования, давая 53,1 г N-фурфурилоксифталимида, плавящегося при 145 - 147oC.
14(!!) Хлоргидрат o-фурфурилгидроксиламина
4,28 г N-фурфурилоксифталимида (полученного, как описано в стадии (!) выше) растворялось в 20 мл этанола, и к получающемуся раствору добавлялось 1,37 г бутиламина. Смесь затем перемешивалась в течение 1 часа при комнатной температуре, после чего добавлялся диэтиловый эфир. Смесь затем подкислялась добавлением 10% по объему метанольного раствора хлористого водорода, и получающиеся в результате кристаллы собирались с помощью фильтрования, давая 2,62 г целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CD3OD, 270 МГц) δ млн.дол.: 5.07 (2H, синглет), 6.54 (1H, дублет дублетов, J = 2 и 3 Гц), 6.72 (1H, дублет, J = 3 Гц), 7.67 (1H, дублет, J = 2 Гц).
Получение 15
O-o-хлорбензилгидроксиламин-гидрохлорид
15 (!) N-o-хлорбензилоксифталимид
Повторялась процедура, аналогичная процедуре, описанной в Получении 14 (! ), за исключением того, что применялось 8,10 г o-хлорбензилхлорида, и получалось 7,63 г N-o-хлорбензилоксифталимида в виде бесцветных кристаллов, плавящихся при 161 - 163oC.
15(!!) Хлоргидрат O-o-хлорбензилгидроксиламина
Затем следуя процедуре, аналогичной процедуре, описанной в Получении 14 (! ! ), но используя 2,87 г N-o-хлорбензилоксифталимида (полученного, как описано на стадии (!) выше) получали 1,54 г целевого соединения в виде бесцветных кристаллов, плавящихся при 143 - 145oC.
Получение 16
O-(2,6-Дихлорбензила)гидроксиламин-хлоргидрат
16 (!) N-(2,6-Дихлорбензилокси)фталимид
Повторялась процедура, аналогичная описанной в Получении 14 (!), за исключением того, что применялось 9,86 г 2,6-дихлорбензилхлорида, и получалось 8,31 г N-(2,6-дихлорбензилокси)фталимида в виде бесцветных кристаллов, плавящихся при 201 - 206oC.
16 (!!) Хлоргидрат O-(2,6-дихлорбензил)гидроксиламина
Затем при выполнении процедуры, аналогичной процедуре, описанной в Получении 14 (!!), но с использованием 3,22 г N-(2,6-дихлорбензилокси)фталимида (полученного, как описано в стадии (!) выше) получалось 2,11 г целевого соединения в виде бесцветных кристаллов, плавящихся при 165 - 167oC.
Получение 17
Хлоргидрат O-(3-метилизоксазол-5-ил)метилгидроксиламина
17 (!) N-(3-Метилизоксазол-5-ил)метоксифталимид
8,17 г N-гидроксифталимида и 23,9 г трифенилфосфина добавлялись к раствору 5,15 г 5-гидроксиметил-3-метилизоксазола в 245 мл тетрагидрофурина. Затем по каплям при комнатной температуре в атмосфере азота к получающемуся раствору добавлялся раствор 13,3 г диметилазодикарбоксилата в 20 мл тетрагидрофурана. Смесь затем оставлялась стоять в течение 30 минут, после чего растворитель удалялся с помощью перегонки при пониженном давлении. Получающийся остаток очищался с помощью флэш хроматографии через силикагельную колонку, с использованием 4:1 по объему смеси гексан и этилацетата в качестве элюента, давая 7, 21 г N-(3-метилизоксазол-5-ил)-метоксифталимида, плавящегося при 129 - 131oC.
17 (!!) Хлоргидрат O-(3-метилизоксазола-5-ил)-метилгидроксиламина
2,04 г бутиламина добавлялось к раствору 7,21 г N-(3-метилизоксазол-5-ил)метоксифталимида (полученного, как описано на стадии (!) в 80 мл этанола, и смесь перемешивалась в течение 1 часа при 60oC. В конце данного периода времени температура реакционной смеси понижалась до комнатной температуры, а затем реакционная смесь разбавлялась 300 мл диэтилового эфира и подкислялась добавлением 10% по объему метанольного раствора хлористого водорода при 0oC. Получающиеся в результате кристаллы собирались с помощью фильтрования, давая 3.22 г целевого соединения, плавящегося при 193 - 198oC.
Получение 18
Хлоргидрат O-(2-тиофенметил)гидроксиламина
20,3 мл триэтиламина и 9,0 мл мезилхлорида добавлялись при охлаждении льдом и перемешивании к раствору 8,31 г 2-тиофенметанола в 80 мл этилацетата, и смесь перемешивалась в течение 1 часа при 0oC, а затем еще в течение 3 часов при комнатной температуре, В конце данного периода времени реакционная смесь выливалась в смесь льда и воды и экстрагировалась этилацетатом. Экстракт промывался 10% вес/объем водной соляной кислотой, насыщенным водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия в указанном порядке. Экстракт затем сушился над безводным сульфатом натрия, после чего растворитель удалялся с помощью перегонки при пониженном давлении, давая 1,39 г маслянистого остатка. 1,07 г данного маслянистого остатка растворялось в 5 мл диметилформамида, а затем к получающемуся раствору добавлялось 0,91 г N-гидроксифталимида. Смесь охлаждалась до 0oC, а затем добавлялось 0,85 г триэтиламина, и смесь перемешивалась в течение 2 часов при 0oC, затем в течение 20 часов при комнатной температуре, и затем в течение 1 часа при 60oC. В конце данного периода времени реакционная смесь охлаждалась до комнатной температуры и разбавлялась водой. Водный раствор подкислялся добавлением 10% вес/объем водной соляной кислоты, и смесь затем экстрагировалась этилацетатом. Экстракт промывался 5% вес/объем водным раствором бикарбоната натрия и насыщенным водным раствором хлорида натрия в указанном порядке, после чего он сушился над безводным сульфатом натрия. Смесь фильтровалась, и затем растворитель удалялся с помощью перегонки при пониженном давлении, давая 7,23 г маслянистого остатка. Данный остаток растворялся в 36 мл диметилформамида, и к получающемуся раствору добавлялось 6,14 г N-гидроксифталимида. Смесь затем охлаждалась льдом, и к ней добавлялось 5,8 мл триэтиламина. Реакционная смесь перемешивалась в течение 15 минут при охлаждении льдом, и затем перемешивалась при комнатной температуре в течение 17 часов. В конце данного периода времени смесь разбавлялась водой и подкислялась добавлением 10% вес/объем водной соляной кислоты, и затем смесь экстрагировалась этилацетатом. Экстракт промывался 5% вес/объем водным раствором карбоната калия и насыщенным водным раствором хлорида натрия в данном порядке, после чего она сушилась над безводным сульфатом натрия и фильтровалась. Растворитель удалялся из фильтрата с помощью перегонки при пониженном давлении, давая 9,87 г N-(2-тиофенилметокси)фталимида. Все данное соединение растворялось в 75 мл этанола, и к получающемуся в результате раствору добавлялось 4,20 мл бутиламина. Смесь затем перемешивалась в течение 3 часов при 60oC. В конце данного периода времени реакционная смесь охлаждалась до комнатной температуры и разбавлялась диэтиловым эфиром. Затем она подкислялась добавлением 10% метанольного раствора хлористого водорода при охлаждении льдом, давая 5,79 г целевого соединения в виде бесцветных кристаллов, плавящихся при 164 - 167oC.
Получение 19
Хлоргидрат O-(изоксазол-4-ил)метилгидроксиламина
19 (!) 4-Гидроксиметилизоксазол
60 мл 1,0 M раствора в гексане диизобутилалюминийгидрида добавлялось в течение 13 минут и при -78oC к раствору 2,00 г этилизоксазол-4-карбоксилата в 20 мл метиленхлорида. Смесь затем перемешивалась в течение 5 минут при той же температуре, после чего добавлялось 4 мл метанола, и температуре смеси давали возможность повышаться до комнатной температуры. К реакционной смеси добавлялось 10 мл метиленхлорида и 3 мл насыщенного водного раствора хлорида натрия, а затем смесь фильтровалась через Целит (торговая марка). Фильтрат сушился над безводным сульфатом натрия, а затем осушающий агент удалялся фильтрованием. Растворитель удалялся с помощью перегонки при пониженном давлении, давая 781 мг маслянистого остатка, который очищался с помощью перегонки (120oC/7 мм рт.ст.) с использованием перегонной колбы, и получалось 510 мг 4-гидроксиметилизоксазола.
19 (!!) N-(Изоксазол-4-ил)метоксифталимид
Следуя процедуре, аналогичной описанной в Получении 17 (!), но при использовании 505 мг 4-гидроксиметилизоксазола (полученного, как описано на стадии (! ) выше), получался 621 г N-(изоксазол-4-ил)метоксифталимида, плавящегося при 133 - 135oC.
19 (!!!) Хлоргидрат O-(изоксазол-4-ил)метилгидроксиламина
Следуя процедуре, аналогичной процедуре, описанной в Получении 17 (!!), но при использовании 597 мг N-(изоксазол-4-ил)метоксифталимида (полученного, как описано в стадии (!!) выше), получали 338 мг целевого соединения.
Спектр ядерно-магнитного резонанса (CD3OD, 60 МГц), δ млн.дол.: 4,6 - 5,3 (2H, широкий синглет), 5,1 (2H, синглет), 8,64 (1H, синглет), 9,0 (1H, синглет).
Инфракрасный спектр поглощения (нуйол - торговая марка) νмакс см-1: 3123, 3099, 2656, 2002, 1615, 1173, 1120, 1004.
Получение 20
Хлоргидрат O-(5-метилизоксазол-3-ил)метилгидроксиамина
20 (!) N-(5-Метилизоксазол-3-ил)метоксифталимид
Повторялась процедура, аналогичная описанной в Получении 17 (!), но с использованием 565,6 мг 3-гидроксиметил-5-метилизоксазола, и получалось 1,13 г N-(5-метилизоксазол-3-ил)метоксифталимида.
20 (!!) O-(5-Метилизоксазол-3-ил)метилгидроксиламин-хлоргидрат
9,27 г N(5-метилизоксазол-3-ил)метоксифталимида (полученного, как описано на стадии (!) выше) затем обрабатывалось с помощью процедуры, аналогичной процедуре, описанной в Получении 17 (!!), и получалось 5,32 названного в заголовке соединения, плавящегося при 195 - 196oC.
Получение 21
Хлоргидрат O-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)метилгидроксиламина
21 (!) N-(3,5-Диметилизоксазол-4-ил)метоксифталимид
С помощью процедуры, аналогичной процедуре, описанной в Получении 14 (! ), но при использовании 291 мг 4-хлорметил-3,5-диметилизоксазола, получали 362 мг N-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)метоксифталимида, плавящегося при 144 - 146oC.
21 (!!) Хлоргидрат O-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)-метилгидроксиламина
Повторялась процедура, аналогичная процедуре, описанной в Получении 14 (! !), за исключением того, что применялось 14,8 г N-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)метоксифталимида, и получалось 8,93 г целевого соединения, плавящегося при 165 - 169oC.
Получение 22
Получение ML - 236 B
(1) Культура
Посевная культуральная среда:
Глицерин - 30 г
Глюкоза - 20 г
Соевая мука - 20 г
Микуни-пептон (Микуни Кемикал Индастриз Инк.) - 8 г
Нитрат натрия - 2 г
Сульфат магния - 1 г
Водопроводная вода - До 1000 мл
(pH: 6.0 - 6.5)
50 мл посевной культуральной среды, имеющей состав, описанный выше, загружалось в 500 мл колбу Эрленмейера и автоклавиваролось при 120oC в течение 30 минут перед тем, как инокулировался микроорганизм. Одну платиновую петлю со скоса Penicillium citrinum Thom 13380 (FERM BP-4129) переносилось асептическим образом в колбу, содержащую данную среду. Инокулированная колба инкубировалась при 24oC в течение 3 дней на вращающемся шейкере со скоростью 210 оборотов в минуту.
2000 мл колба Эрленмейера, содержащая 700 мл культуральной среды для посева, затем автоклавировалась при 120oC в течение 30 минут, после чего она инокулировалась весом (около 50 мл) ферментационным бульоном, полученным, как описано выше. Данная колба инкубировалась в течение 2 дней при 24oC на вращающемся шейкера со скоростью 210 об/мин, для получения еще одной генерационной культуры.
Для получения
Культуральная среда (1):
Достаточное количество водопроводной воды добавлялось к 150 г глицерина и 600 г жидкости Санмолт (Санва Старч Индастри, Лтд.) для доведения общего объема раствора до 5 литров. Культуральная среда для получения (1) (продукционная среда) затем стерилизовалась с помощью автоклавирования в течение 30 минут при 120oC.
Культуральная среда для получения (2):
Смешивались следующие компоненты:
Соевая мука - 300 г
Микуни-пептон - 150 г
Хонен CSL - 300 г
(Хонен Корпорейшн) Глютеновая мука (Нихон Фуд Процессинг Ко.) - 150 г
Сульфат магния - 15 г
Величина pH доводилась до 6,0 - 6,5 путем добавления 10% вес/объем водного раствора гидроокиси натрия, а затем весь объем доводился до 10 литров добавлением водопроводной воды. Продукционная культуральная среда (2) затем стерилизовалась с помощью автоклавирования в течение 30 минут при 120oC.
Питающая жидкость A:
Водопроводная вода добавлялась к смеси 1600 г глицерина и 6400 г Санмолт S (Санва Старч Индастри, Лтд.), а затем смесь нагревалась до температуры выше 90oC. После того, как Санмолт S полностью растворялся, водопроводная вода добавлялась к раствору для доведения общего объема до 10 литров. Раствор затем автоклавировался при 120oC в течение 30 минут.
Питающая жидкость B:
600 мл Санникс РР 2000 (Сане Кемикал Индастриз Ко., Лтд.) среды автоклавировались при 120oC в течение 30 минут.
После автоклавирования 5 литров продукционной культуральной среды (1) и 10 литров продукционной культуральной среды (2) загружались в 30-литровый ферментер из нержавеющей стали.
Все содержимое колбы Эрленмейера (примерно 700 мл), содержащей вторую генерационную культуру, полученную, как описано выше, затем использовали для инокуляции автоклавированной продукционной культуральной среды в ферментере. Ферментер инкубировался при 24oC при перемешивании с автоматически регулируемой скоростью 260 - 500 об./мин, при этом осуществлялась аэрация потоком воздуха 7,5 л/мин и при давлении 0,5 кг/см2 так, чтобы концентрация растворенного кислорода поддерживалась от 3 до 5 ч./мин.
В течение периода с третьего по шестой день после начала инкубирования к культуральной среде один раз в день (всего 4 раза) добавлялось по 150 мл питающей жидкости B. После того, как концентрация восстанавливающего сахара по оценкам составляла не более чем 1%, непрерывно добавлялась питающая среда A для того, чтобы величина pH бульона сохранялась на уровне примерно pH 4.
Через 14 дней получающийся в результате бульон собирался.
(2) Выделение
Величина pH культуральной среды бульона (40 литров) доводилась до 12 добавлением 800 мл 6 н. водного раствора гидроокиси натрия, и получающаяся смесь перемешивалась в течение 60 минут при комнатной температуре. В конце данного периода времени бульон смешивался с 1,5 кг Целитного фильтровального средства (Целит N 545, торговая марка продукта фирмы Джонс-Менвилл Продактс Корп. ), и смесь перемешивалась. Получающаяся в результате смесь фильтровалась через фильтр пресс для получения фильтрата.
К фильтрату осторожно добавлялось 850 мл 6 н. водной соляной кислоты, и величина pH смеси доводилась до 5,0. К получающему раствору добавлялось 80 литров этилацетат, и смесь перемешивалась для экстрагирования желаемого продукта. Объединенные этилацетатные экстракты затем экстрагировались 10 литрами 3% вес/объем водного раствора бикарбоната натрия. Водный слой отделялся, а органический слой снова экстрагировался 3% вес/объем водным раствором бикарбоната натрия.
К объединенным водным экстрактам добавлялось 1600 мл 6 н. водной соляной кислоты, и величина pH смеси доводилась до 5,0. К получающейся смеси добавлялось 20 литров этилацетата, и смесь перемешивалась для экстрагирования желаемого продукта. Органический слой отделялся, а водный слой обрабатывался 10 литрами этилацетата и перемешивался для экстрагирования желаемого продукта. Объединенные этилацетатные экстракты промывались 15 литрами 10% вес/объем водного раствора хлорида натрия. Экстракт затем сушился над 3000 г безводного сульфата натрия, и растворитель удалялся с помощью выпаривания досуха при пониженном давлении, с использованием роторного испарителя, давая маслянистый остаток.
Данный маслянистый остаток растворялся в 1000 мл этилацетата. К раствору добавлялось 0,5 мл трифторуксусной кислоты, и смесь нагревалась при дефлегмации в течение 30 минут в емкости, оборудованной дефлегмационным конденсором. Содержимое охлаждалось до 10oC, а затем промывалось дважды, каждый раз 500 мл 3% вес/объем водного раствора бикарбоната натрия, и один раз 500 мл 10% вес/объем водного раствора хлористого натрия, в указанном порядка. Органический слой сушился над 100 г безводного сульфата натрия и фильтровался. Фильтрат освобождался от растворителя путем выпаривания досуха при пониженном давлении, с использованием роторного испарителя, давая 50 г маслянистого остатка.
Весь маслянистый остаток растворялся в 500 мл ацетонитрила, и получающийся раствор разделялся на пять частей. Каждая часть очищалась с помощью хроматографии на ODS обратно-фазной колонке (ODS - 1050-20 SR, 10 см (внутренний диаметр) • 50 см, 15 - 30 мкм (размер частиц); Курита Когио Ко., Лтд.). Колонка элюировалась 70% по объему водным ацетонитрилом, используемым в качестве подвижной фазы, со скоростью потока 200 мл/минуту. Фракции, выделенные с колонки, проверялись с помощью ультрафиолетового поглощения, и на основании обнаруженных таким образом пиков собирались фракции, имеющие время удерживания между 30 и 36 минутами.
Чистота этих фракций анализировалась с помощью высокоскоростной жидкостной хроматографии через колонку (ODS - 262, Сенсю Кагаку Ко., Лтд.) с использованием 70% по объему водного ацетонитрила в качестве подвижной фазы со скоростью потока 1,0 мл/минуту при этом фракции проверялись (контролировались) ультрафиолетовым поглощением при 236 нм. Фракция имеющая время удерживания 11 минут, показала один пик характерного ультрафиолетового поглощения (абсорбции).
Те фракции, которые имели время удерживания между 30 и 36 минут в результате хроматографии на колонке с обратной фазой, концентрировались с помощью перегонки при пониженном давлении, с использованием роторного испарителя для отгонки ацетонитрила. Концентрат дважды экстрагировался половиной его объема этилацетата. Этилацетатные экстракты объединялись и концентрировались путем выпаривания досуха при пониженном давлении, давая 30 г маслянистого остатка.
Масло растиралось со смесью этанола и воды, вызывая кристаллизацию. Получалось 17 г целевого соединения в виде бесцветных кристаллов.
Физико-химические свойства данного соединения известны и идентичны свойствам, описанным в японской патентной публикации N Sho 5612114 (=патент Великобритании N 1453425) и другой литературе.
Получение 23
Получение натриевой соли М-4
Дрожжевая МУ культуральная среда:
Дрожжевой экстракт (Дифко) - 0,32 (вес/объем)
Солодовый экстракт (Дифко) - 0,3% (в/о)
Полипептон (Даиго Ньютришн Кемикалз Ко.) - 0,5% (в/о)
Глюкоза - 1,0% (в/о)
Водопроводная вода (pH не устанавливался) - Остальное
В колбу емкостью 500 мл Эрленмейера, содержащую 100 мл указанной культуральной среды дрожжей МУ, вводился инокулюм платиновая петля скоса Amycolata autotrophica SANK 62981 (FERM BP-4105). Колба инкубировалась при 28oC на вращающемся шейкере при скорости 200 об./мин.
Спустя 3 дня, двадцать колб Эрленмейера емкостью по 500 мл, каждая из которых содержала 100 мл дрожжевой МУ культуральной среды, инокулировались 5 мл содержимого колбы с посевной культурой. Культуры затем инкубировались при 28oC на вращающемся шейкере со скоростью 200 об./мин. Через 2 дня добавлялся водный раствор натриевой соли М-236B до конечной концентрации 0,1% натриевой соли, и смесь инкубировалась при 28oC на вращающемся шейкере при скорости 200 оборотов в мин в течение 5 дней.
В конце данного периода времени ферментационный бульон фильтровался, и фильтрат абсорбриовался на 200 мл неионной смолы Диаион НР-20 (торговая марка). Смола промывалась 300 мл дистиллированной воды, и фракции, содержащие целевое соединение элюировались 800 мл 50% о/о водного ацетона.
Элюат концентрировался выпариванием досуха при пониженном давлении, и концентрат очищался с помощью хроматографии на препаративной ODS колонке (ODS-H-5251) с использованием 480 : 520 : 1 по объему смеси ацетонтирила, воды и уксусной кислоты в качестве элюента, при контролировании фракций ультрафиолетовым поглощением при 237 нм. Требуемые фракции собирались, и их величина pH доводилась до 8,0 добавлением водного раствора гидроокиси натрия. Смесь затем концентрировалась с помощью выпаривания при пониженном давлении. Концентрат растворялся в воде, и получающийся в результате водный раствор обрабатывался 50 мл Диаион НР-20. Смола промывалась 100 мл дистиллированной воды, а затем элюировалась 200 мл 50% о/о водного ацетона, давая 618 мг целевого соединения.
Физико-химические свойства известны и идентичны свойствам, описанным в японской патентной публикации N Sho 61-13699 (= патент GB N 2077264) и другой литературе.

Claims (19)

1. Производные октагидронафталиноксима формулы I
Figure 00000055

где R - водород;
X - C1 - C10-алкил;
А - С1 - С10-алкилен;
Y - водород, фенил, необязательно замещенный по крайней мере одним заместителем, выбранным из галогена и алкокси групп, имеющих от 1 до 4 атомов углерода, или гетероциклическую группу, имеющую 5 или 6 кольцевых атомов, из которых от 1 до 3 являются гетероатомами азота, и/или кислорода, и/или серы, причем указанная гетероциклическая группа необязательно замещена по крайней мере одной алкильной группой, имеющей от 1 до 5 атомов углерода,
и их фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры.
2. Производные октагидронафталиноксима по п.1, в которых R - водород, Х - С1 - С10-алкил, А - С1 - С5-алкилен, Y - фенил, необязательно замещенный 1 или 2 заместителями, выбранными из атомов галогена и алкокси групп, имеющих от 1 до 4 атомов углерода, и их фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры.
3. Производные октагидронафталиноксима по п. 1, в которых А - С1 - С5-алкилен, Y - гетероциклическая группа, имеющая 5 или 6 кольцевых атомов, из которых 1 или 2 являются гетероатомами азота и/или кислорода, и необязательно замещенная 1 или 2 алкильными группами, имеющими от 1 до 5 атомов углерода, и их фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры.
4. Производные октагидронафталиноксима по п. 1, в которых Х - С1 - С10-алкил, А - С1 - С10-алкилен, Y - водород, и их фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры.
5. Производные октагидронафталиноксима по п. 1, в которых Х - С1 - С7-алкил, А - С1 - С5-алкилен, Y - фенил, необязательно замещенный 1 или 2 заместителями, выбранными из атомов галогена и алкокси групп, имеющих от 1 до 4 атомов углерода, и их фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры.
6. Производные октагидронафталиноксима по п. 1, в которых Х - С1 - С7-алкил, А - С1 - С5-алкилен, Y - гетероциклическая группа, имеющая 5 или 6 кольцевых атомов, из которых 1 или 2 являются гетероатомами азота и/или кислорода, и/или серы, и необязательно замещенная 1 или 2 алкильными группами, имеющими от 1 до 5 атомов углерода, и их фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры.
7. Производные октагидронафталиноксима по п. 1, в которых Х - С1 - С7-алкил, А - С1 - С5-алкилен, Y - фенил, необязательно замещенный 1 или 2 заместителями, выбранными из группы, включающей галоген или алкокси группы, имеющие от 1 до 4 атомов углерода, и их фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры.
8. Производные октагидронафталиноксима по п. 1, в которых Х - С1 - С7-алкил, А - С1 - С5-алкилен, Y - ненасыщенная гетероциклическая группа, имеющая 5 или 6 кольцевых атомов, из которых 1 или 2 являются гетероатомами азота, и/или кислорода, и/или серы, и необязательно замещенная 1 или 2 алкильными группами, имеющими от 1 до 5 атомов углерода, и их фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры.
9. Производные октагидронафталиноксима по п. 1, в которых Х - С1 - С7-алкил, А - С1 - С10-алкилен, Y - водород, и их фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры.
10. Соединение по п.1, представляющее 7-[5-бензилоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8а-октагидро-1-нафтил]-3-гидрокси-5-оксогептановую кислоту и ее фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры.
11. Соединение по п.1, представляющее 7-[5-(1,3-диоксан-5-ил)метоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8а-октагидро-1-нафтил] -3-гидрокси-5-оксогептановую кислоту и ее фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры.
12. Соединение по п.1, представляющее 7-[5-(2-тиенил)метоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8а-октагидро-1-нафтил] -3-гидрокси-5-оксогептановую кислоту и ее фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры.
13. Соединение по п.1, представляющее 7-[5-(изоксазол-4-ил)метоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8а-октагидро-1-нафтил] -3-гидрокси-5-оксогептановую кислоту и ее фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры.
14. Соединение по п. 1, представляющее 7-[5-(5-метилизоксазол-3-ил)метоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8а-октагидро-1-нафтил] -3-гидрокси-5-оксогептановую кислоту и ее фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры.
15. Соединение по п. 1, представляющее 7-[5-(3-метилизоксазол-5-ил)метоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8а-октагидро-1-нафтил] -3-гидрокси-5-оксогептановую кислоту и ее фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры.
16. Соединение по п. 1, представляющее 7-[5-(3,5-диметилизоксазол-4-ил)метоксиимино-2-метил-8-(2-метилбутирилокси)-3-оксо-1,2,3,5,6,7,8,8а-октагидро-1-нафтил] -3-гидрокси-5-оксогептановую кислоту и ее фармацевтически приемлемые соли и сложные эфиры.
17. Фармацевтическая композиция для ингибирования биосинтеза холестерина, включающая активное соединение и фармацевтически приемлемый носитель или разбавитель, отличающаяся тем, что в качестве активного соединения она содержит соединение формулы I по п.1 или его фармацевтически приемлемые соли или сложные эфиры в эффективном количестве.
18. Способ ингибирования расстройств, возникающих в результате нарушения баланса холестерина, путем введения млекопитающим активного соединения, отличающийся тем, что в качестве активного соединения используют соединение формулы I по п.1 или его фармацевтически приемлемые соли или сложные эфиры в дозе 1 - 10 мг в день.
19. Способ получения производных октагидронафталиноксима по п.1, отличающийся тем, что соединение формулы II
Figure 00000056

где R, X, Y, A имеют значения, определенные в п.1;
Rа - низший алкил, низший алкенил или фенил (низший) алкил,
подвергают окислению с получением соединения формумы III
Figure 00000057

где R, Y, Ra, A имеют значения, определенные выше,
с последующей, в случае необходимости, его деэтерификацией или превращением его в соль.
RU93005182/04A 1992-05-15 1993-05-14 Производные октагидронафталиноксима, фармацевтическая композиция, способ лечения и способ их получения RU2125043C1 (ru)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP4-122476 1992-05-15
JP12247692 1992-05-15

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU93005182A RU93005182A (ru) 1996-04-27
RU2125043C1 true RU2125043C1 (ru) 1999-01-20

Family

ID=14836794

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU93005182/04A RU2125043C1 (ru) 1992-05-15 1993-05-14 Производные октагидронафталиноксима, фармацевтическая композиция, способ лечения и способ их получения

Country Status (22)

Country Link
US (1) US5604256A (ru)
EP (1) EP0570245B1 (ru)
JP (1) JPH0641040A (ru)
KR (2) KR0177840B1 (ru)
CN (1) CN1034498C (ru)
AT (1) ATE144768T1 (ru)
AU (1) AU656855B2 (ru)
CA (1) CA2096281A1 (ru)
CZ (1) CZ281151B6 (ru)
DE (1) DE69305684T2 (ru)
DK (1) DK0570245T3 (ru)
ES (1) ES2096208T3 (ru)
FI (1) FI932188A (ru)
GR (1) GR3022095T3 (ru)
HK (1) HK31797A (ru)
HU (1) HU221854B1 (ru)
IL (1) IL105708A (ru)
MX (1) MX9302870A (ru)
NO (1) NO180443C (ru)
NZ (1) NZ247617A (ru)
RU (1) RU2125043C1 (ru)
ZA (1) ZA933359B (ru)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB9320597D0 (en) * 1993-10-06 1993-11-24 Proteus Molecular Design Improvements in and realting to vaccines
US5461049A (en) * 1994-05-27 1995-10-24 Warner-Lambert Company Amide tetrazole ACAT inhibitors
EP1175210A4 (en) 1999-03-19 2003-07-09 Enos Pharmaceuticals Inc STRENGTHENING THE BIODAVAILABILITY OF DRUGS IN THE BRAIN
EP1562555A2 (en) * 2002-10-24 2005-08-17 Enos Pharmaceuticals, Inc. Sustained release l-arginine formulations and methods of manufacture and use
US20080145424A1 (en) * 2002-10-24 2008-06-19 Enos Phramaceuticals, Inc. Sustained release L-arginine formulations and methods of manufacture and use
AU2004279298B2 (en) * 2003-09-29 2009-01-29 Palmetto Pharmaceuticals, Llc Sustained release L-arginine formulations and methods of manufacture and use

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5612114B2 (ru) 1974-06-07 1981-03-18
JPS5925599B2 (ja) 1979-02-20 1984-06-19 三共株式会社 新生理活性物質モナコリンｋおよびその製造法
JPS5612114A (en) 1979-07-11 1981-02-06 Tdk Corp Manufacture of piezoelectric body resonator
MX7065E (es) 1980-06-06 1987-04-10 Sankyo Co Un procedimiento microbiologico para preparar derivados de ml-236b
JPS5855443A (ja) 1981-09-25 1983-04-01 Sankyo Co Ltd オクタヒドロナフタリン誘導体およびその製造法
CA1327360C (en) 1983-11-14 1994-03-01 William F. Hoffman Oxo-analogs of mevinolin-like antihypercholesterolemic agents
JPS6113699A (ja) 1984-06-28 1986-01-21 三菱電機株式会社 電気機器のシ−ルド
JPH0687664B2 (ja) 1987-06-22 1994-11-02 株式会社東芝 循環電流制御型サイクロコンバ−タの制御装置
US4997848A (en) 1987-10-27 1991-03-05 Sankyo Company, Limited Octahydronaphthalene oxime derivatives for cholesterol synthesis inhibition
JP2542429B2 (ja) 1987-10-27 1996-10-09 三共株式会社 オクタヒドロナフタリン置換オキシム誘導体

Also Published As

Publication number Publication date
EP0570245B1 (en) 1996-10-30
IL105708A0 (en) 1993-09-22
CZ281151B6 (cs) 1996-06-12
ES2096208T3 (es) 1997-03-01
GR3022095T3 (en) 1997-03-31
DE69305684T2 (de) 1997-05-28
ATE144768T1 (de) 1996-11-15
ZA933359B (en) 1993-12-08
CA2096281A1 (en) 1993-11-16
MX9302870A (es) 1994-02-28
FI932188A0 (fi) 1993-05-13
DK0570245T3 (da) 1997-04-14
KR930023333A (ko) 1993-12-18
NO180443C (no) 1997-04-23
US5604256A (en) 1997-02-18
EP0570245A2 (en) 1993-11-18
NZ247617A (en) 1995-07-26
HU221854B1 (hu) 2003-02-28
NO180443B (no) 1997-01-13
KR100187482B1 (ko) 1999-04-01
EP0570245A3 (en) 1994-02-02
DE69305684D1 (de) 1996-12-05
AU656855B2 (en) 1995-02-16
HUT64302A (en) 1993-12-28
KR0177840B1 (ko) 1999-05-15
CN1084162A (zh) 1994-03-23
IL105708A (en) 1997-04-15
AU3858193A (en) 1993-11-18
JPH0641040A (ja) 1994-02-15
CN1034498C (zh) 1997-04-09
NO931752D0 (no) 1993-05-14
HU9301415D0 (en) 1993-09-28
FI932188A (fi) 1993-11-16
CZ89693A3 (en) 1994-06-15
NO931752L (no) 1993-11-16
HK31797A (en) 1997-03-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP0605230B1 (en) Hexahydronaphthalene ester derivatives, their preparation and their therapeutic uses
US4294926A (en) Hypocholesteremic fermentation products and process of preparation
US4517373A (en) IsoMB-530B derivatives
US4294846A (en) Hypocholesteremic fermentation products and products of preparation
US4376863A (en) Hypocholesterolemic fermentation products
JPH0371116B2 (ru)
US4420491A (en) Hypocholesteremic fermentation products and process of preparation
EP0215665B1 (en) Hydroxy-ml-236b derivatives, their preparation and use
RU2125043C1 (ru) Производные октагидронафталиноксима, фармацевтическая композиция, способ лечения и способ их получения
US4343814A (en) Hypocholesterolemic fermentation products
JPH0115491B2 (ru)
US4432996A (en) Hypocholesterolemic fermentation products and process of preparation
US4387242A (en) Hypocholesterolemic fermentation products and process of preparation
DE69415050T2 (de) Hexahydronaphthalenesterderivate, ihre Herstellung und ihre therapeutischen Anwendungen
EP1080220A1 (en) New biotechnological process for preparing hydroxylated ml-236b derivatives, known as m-4 and m-4', and analogues thereof

Legal Events

Date Code Title Description
MM4A The patent is invalid due to non-payment of fees

Effective date: 20030515