RU2098140C1 - Способ проведения экстракорпоральной иммуносорбции - Google Patents
Способ проведения экстракорпоральной иммуносорбции Download PDFInfo
- Publication number
- RU2098140C1 RU2098140C1 RU94042053A RU94042053A RU2098140C1 RU 2098140 C1 RU2098140 C1 RU 2098140C1 RU 94042053 A RU94042053 A RU 94042053A RU 94042053 A RU94042053 A RU 94042053A RU 2098140 C1 RU2098140 C1 RU 2098140C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- granules
- column
- immunosorption
- hydrogel
- decrease
- Prior art date
Links
Landscapes
- Solid-Sorbent Or Filter-Aiding Compositions (AREA)
- External Artificial Organs (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Изобретение относится к области медицины, а именно к экстракорпоральным методам извлечения специфических антител из крови и других биологических жидкостей, и может применяться в ревматологии и биотехнологии. Цель изобретения - улучшение реологических и гемодинамических свойств гидрогелей. Поставленная цель достигается путем включения частиц ферромагнитного материала в структуру гранулы гидрогеля, а колонка с гранулами помещается в устройство, создающее осевой и поперечный градиент магнитного поля. Предложенный способ позволяет улучшить реологические свойства гидрогелевых иммуносорбентов: уменьшить сжимаемость последних и снизить их высокое гидродинамическое сопротивление, уменьшить утечку гранул за пределы экстракорпорального контура, существенно снизить риск тромбообразования в колонке с сорбентом. За счет улучшения перфузионных характеристик сорбента, улучшения его контакта с кровью удалось увеличить эффективность иммуносорбции. 1 ил.
Description
Изобретение относится к медицине, а именно к экстракорпоральным методам извлечения специфических антител из крови и других биологических жидкостей, и может применяться в ревматологии и биотехнологии.
Известен способ очистки крови от экзогенных и эндогенных токсинов с помощью иммуносорбентов. Иммуносорбенты представляют собой нерастворимые частицы, к которым физически или химически прикреплены молекулы вещества (антигена или специфических антител), имеющего сродство к удаляемому из крови биологически активному веществу. После пропускания крови через колонку с подобным сорбентом на последнем специфически сорбируются удаляемые из крови компоненты. Очищенная кровь возвращается обратно в организм больного.
В настоящее время в качестве матриц (нерастворимой основы для иммобилизации лигандов) при изготовлении иммуносорбентов применяют активированные угли, сефарозу, коллаген и другие носители. Активированные угли имеют высокую механическую прочность, хорошие перфузионные характеристики, но их применение связано с выраженным травмированием форменных элементов крови; сефароза не имеет недостатков активированных углей, однако стоимость данного носителя настолько высока, что невозможно рассчитывать на возможность его широкого клинического применения [1]
Наиболее близким к предложенному по принципу действия и достигаемому результату является проведение иммуносорбции с использованием в качестве носителей гидрогелей. Последние характеризуются высокой гемосовместимостью, низкой специфической емкостью и хорошей проницаемостью для высокомолекулярных веществ [1]
Недостатком указанного способа является высокое гидродинамическое сопротивление гидрогелей и плохие перфузионные характеристики.
Наиболее близким к предложенному по принципу действия и достигаемому результату является проведение иммуносорбции с использованием в качестве носителей гидрогелей. Последние характеризуются высокой гемосовместимостью, низкой специфической емкостью и хорошей проницаемостью для высокомолекулярных веществ [1]
Недостатком указанного способа является высокое гидродинамическое сопротивление гидрогелей и плохие перфузионные характеристики.
Цель изобретения улучшения реологических и гемодинамических свойств гидрогелей.
Поставленная цель достигается путем включения частиц ферромагнитного материала в структуру гранулы гидрогеля, а колонка с гранулами помещается в устройство, создающее осевой и поперечный градиент магнитного поля.
Пример 1. Получение гранул гидрогеля.
В качестве гранул гидрогеля использовали полиакриламидные гранулы, содержащие нативную ДНК, полученные методом эмульсионной полимеризации в потоке газообразного азота. Внутрь гранул включались частицы ферромагнитного материала окиси железа, закиси железа или окиси-закиси железа. Размер получаемых гранул 10-100 мкм. Подробно технология получения гранул описана в авт. св. N 1797253.
Пример 2. Установка, создающая осевой и поперечный градиент магнитного поля.
В качестве установки, создающей градиент магнитного поля, использовалось оригинальное устройство, принципиальная схема которого приведена на чертеже. Магнитное поле, создаваемое установкой, принудительно перемещает гранулы вдоль и поперек тока биологических жидкостей, что способствует большому контакту сорбента с протекающей жидкостью и препятствует адгезии частиц друг с другом.
Пример 3. Сжимаемость гранул гидрогеля с использованием предложенного способа.
Через колонку с гранулами гидрогеля объемом 5 мл перфузировалась с помощью насоса "Microperpex" (LKB, Швеция) цельная кровь со скоростью 250 мл/ч. В опыте колонка с гранулами гидрогеля помещалась в устройство, создающее магнитное поле. В контроле использовалась та же колонка, но без использования магнитного поля.
На чертеже показана установка для проведения иммуносорбции в магнитном поле, поясняющая предлагаемый способ.
В экспериментах начальный объем гранул составил 5,0+0,02 мл, конечный объем без применения магнитного поля составил 3,62+0,049 мл (динамика достоверна p < 0.05), при применении вышеуказанного устройства: начальный объем 5,0+0,02, конечный 4,94+0,031 мл (динамика недостоверна, p > 0.05) (проведено 10 экспериментов).
Пример 4. Проверка утечки гранул за пределы экстракорпорального контура.
Использование магнитного поля позволило существенно снизить утечку гранул за пределы экстракорпорального контура. Если гранулы применялись для иммуносорбции в обычной колонке, то при начальном весе гранул 4897 мг утечка сорбента составляла 265 + 24 мг вещества на колонку объемом 5 мл (динамика достоверна p < 0,05). Если гидрогель использовался в колонке, помещенной в оригинальное устройство, то утечка сорбента составляла 0,85 + 0,22 мг вещества (динамика недостоверна, p < 0,05) (проведено 10 экспериментов).
Пример 5. Исследование частоты тромбообразования в колонке с гранулами гидрогеля.
Через колонку с гранулами гидрогеля пропускали гепаринизированную кровь доноров в течение 1 ч. После окончания процедуры колонку отмывали 0,9% раствором NaCl и визуально оценивали наличие тромбов.
Частота тромбообразования в колонке с гранулами гидрогеля без использования магнитного поля составила 7 случаев из 20, причем в 3 из них тромбы препятствовали току крови. При проведении иммуносорбции в вышеуказанной установке 1 раз из 20 наблюдений были обнаружены микротромбы, которые не были препятствием для успешного завершения процедуры иммуносорбции (критерий хи-квадрат равен 16,88, p < 0.001).
Пример 6. Исследование эффективности сорбции антител с использованием предложенного способа и без него.
В экспериментах по проверке сорбционных свойств гранул использовались ДНК-содержащие гранулы гидрогеля. Через 1 мл гранул перфузировались 3 мл сыворотки крови больных системной красной волчанкой, имеющих указанные выше антитела, со скоростью 5 мл/ч. После отмывки колонки 0,9% раствором NaCl до значений экстинции в отмывной жидкости менее 0,05 на длине волны 280 нм проводилась элюция антител буфером глицин-HCl, pH 2,8. Элюат нейтрaлизовался до нормальных значений pH 1М раствором K2HPO4, после чего проводился диализ элюатов 18 ч при 4oC против 0,9% раствора NaCl. Впоследствии в элюатах определялся уровень общего белка по Лоури (проведено 10 экспериментов).
Эксперименты показали, что использование установки для проведения иммуносорбции в магнитном поле позитивно влияет на эффективность сорбции. Если в обычных условиях сорбционная емкость составила 3,5+0,3 мг/мл сорбента, то в магнитном поле данный показатель был равен 4,845+0,24 мг/мл ИГАП (различия достоверны, p < 0,005).
Пример 7. Удаление антител к нативной ДНК из сыворотки крови экспериментальных животных в экспериментах in vivo.
Перед проведением экспериментов in vivo была проведена иммунизация 6 лабораторных животных (кроликов) дезоксирибонуклеиновой кислотой.
После стерилизации колонки этиловым спиртом под нембуталовым наркозом была проведена иммуносорбция антител к нативной ДНК с использованием указанных выше гранул.
Исследования показали, что колонка с ИГАП не тромбировалась в процессе процедуры иммуносорбции. Лишь 1 раз после процедуры в колонке были обнаружены микротромбы, которые не препятствовали нормальному току крови.
Сорбционная емкость ИГАП, определяемая после процедуры, была равна 4,36+0,13 мг/мл сорбента.
Взвешивание гранул показало отсутствие их утечки за пределы экстракорпорального контура за время сеанса; вес гранул составил до сорбции 5238+84, после нее 5197+63 (динамика недостоверна, p > 0,1).
Таким образом, эксперименты показали, что предложенный способ позволяет улучшить реологические свойства гидрогелевых иммуносорбентов: уменьшить сжимаемость последних и снизить их высокое гидродинамическое сопротивление, уменьшить утечку гранул за пределы экстракорпорального контура, существенно снизить риск тромбообразования в колонке с сорбентом. За счет улучшения перфузионных характеристик сорбента, улучшения его контакта с кровью удалось увеличить эффективность иммуносорбции.
Предложенный способ был успешно осуществлен в экспериментах in vivo с использованием лабораторных животных.
Claims (1)
- Способ проведения экстракорпоральной иммуносорбции путем пропускания крови через колонку с антигенсодержащими гранулами гидрогеля, отличающийся тем, что в гранулы включают частицы ферромагнитного материала, а колонку с гранулами помещают в устройство, создающее осевой и поперечный градиент магнитного поля.
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU94042053A RU2098140C1 (ru) | 1994-11-18 | 1994-11-18 | Способ проведения экстракорпоральной иммуносорбции |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU94042053A RU2098140C1 (ru) | 1994-11-18 | 1994-11-18 | Способ проведения экстракорпоральной иммуносорбции |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU94042053A RU94042053A (ru) | 1996-09-20 |
RU2098140C1 true RU2098140C1 (ru) | 1997-12-10 |
Family
ID=20162612
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU94042053A RU2098140C1 (ru) | 1994-11-18 | 1994-11-18 | Способ проведения экстракорпоральной иммуносорбции |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2098140C1 (ru) |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2739352C1 (ru) * | 2020-03-23 | 2020-12-23 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт клинической и экспериментальной ревматологии имени А.Б. Зборовского" | Способ получения препарата для удаления ревматоидного фактора из крови больных ревматоидным артритом |
-
1994
- 1994-11-18 RU RU94042053A patent/RU2098140C1/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Лопаткин Н.А., Лопухин Ю.М. Эфферентные методы в медицине. - М.: Медицина, 1989, с. 56 - 70. * |
Cited By (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2739352C1 (ru) * | 2020-03-23 | 2020-12-23 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт клинической и экспериментальной ревматологии имени А.Б. Зборовского" | Способ получения препарата для удаления ревматоидного фактора из крови больных ревматоидным артритом |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU94042053A (ru) | 1996-09-20 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
EP0110409B2 (en) | Adsorbent and process for preparing the same | |
US5149425A (en) | Affinity supports for hemoperfusion | |
US5240601A (en) | Affinity supports for hemoperfusion | |
US20040140265A1 (en) | Extracorporeal capturing of specific bio-macromolecular entities from extracellular body fluids | |
US20050249724A1 (en) | Extracorporeal stablised expanded bed adsorption method for the treatment of sepsis | |
EP0306617A2 (en) | Use of Adsorbent and of apparatus for removing autoantibodies | |
JP4578405B2 (ja) | 全血処理が可能な低密度リポ蛋白およびフィブリノーゲンの吸着材、及び吸着器 | |
RU2098140C1 (ru) | Способ проведения экстракорпоральной иммуносорбции | |
JPH01171638A (ja) | 血清アミロイドa蛋白用吸着体 | |
JPH0622633B2 (ja) | 吸着体およびそれを用いた除去装置 | |
JPS59186558A (ja) | リウマチ因子および/またはその免疫複合体の吸着材 | |
JPH0611333B2 (ja) | 免疫複合体の吸着体およびそれを用いた免疫複合体の除去装置 | |
JPS59186559A (ja) | 自己抗体および/または免疫複合体吸着材 | |
RU2027192C1 (ru) | Способ очистки крови от ревматоидного фактора | |
JPS5810055A (ja) | 免疫吸着器の製造方法 | |
JPH01265972A (ja) | 体液中の有害成分の除去方法 | |
JP3157026B2 (ja) | 血液浄化用吸着材 | |
Marcus et al. | A New Immunoadsorbent for Hemoperfusion: Agarose-Polyacrolein Microspheres Beads I. In Vitro Studies | |
Denizli et al. | Biologically modified PHEMA beads for hemoperfusion: preliminary studies | |
JPH0771632B2 (ja) | 吸着体およびそれを用いた除去装置 | |
Panikkar et al. | Modified Polyacrylamide Microspheres as Immunosorbent: Trivandrum-695012. India. | |
JP2991721B2 (ja) | 抗甲状腺刺激ホルモンレセプター抗体の吸着体とそれを用いた抗甲状腺刺激ホルモンレセプター抗体の除去装置 | |
JPH0226988B2 (ru) | ||
JP2726662B2 (ja) | 吸着体およびそれを用いた除去装置 | |
JP3251547B2 (ja) | 免疫複合体の除去装置 |