RU2082976C1 - Способ прогнозирования варианта течения неходжкинских лимфом - Google Patents
Способ прогнозирования варианта течения неходжкинских лимфом Download PDFInfo
- Publication number
- RU2082976C1 RU2082976C1 RU93028217A RU93028217A RU2082976C1 RU 2082976 C1 RU2082976 C1 RU 2082976C1 RU 93028217 A RU93028217 A RU 93028217A RU 93028217 A RU93028217 A RU 93028217A RU 2082976 C1 RU2082976 C1 RU 2082976C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cells
- course
- variant
- patient
- determined
- Prior art date
Links
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Использование: в медицине, в частности в гематологии, и может применяться для определения варианта течения неходжкинских лимфом (НХЛ). Сущность изобретения: в периферической крови больного определяют процентное содержание лимфоидных клеток с повышенным уровнем активности нуклеолярного аппарата и находящихся в стадии S/G2 клеточного цикла, причем определение уровня активности нуклеолярного аппарата лимфоидных клеток крови осуществляют по наличию в ядрышках этих клеток нуклеолярного липидного компонента, при этом стандартные мазки крови окрашивают бензо[а]пиреном по известной методике и подсчитывают процентное содержание клеток с флуоресциирующими ядрышками, при отсутствии таких клеток определяют первый вариант течения неходжкинских лимфом (безрецидивный); при обнаружении лимфоидных клеток с флуоресциирующими ядрышками проводят второй этап исследования, при котором другой мазок крови больного окрашивают по Фельгену и определяют долю клеток в стадиях S/G2 клеточного цикла; при отрицательном значении этого теста определяют второй вариант (рецидивирующее медленнопрогрессирующее течение), при положительном - третий вариант (быстропрогрессирующее течение). Способ позволяет упростить метод при сохранении точности прогнозирования характера течения НХЛ.
Description
Изобретение относится к медицине, в частности к гематологии, и может быть использовано для определения варианта течения неходжкинских лимфом (НХЛ).
Известен способ определения прогноза НХЛ, заключающийся в том, что лимфоидные клетки, извлеченные из периферической крови больного, инкубируют с Н3-тимидином, покрывают фотоэмульсией, экспонируют, затем в препаратах-радиавтографах определяют содержание меченых клеток. Если процентное содержание таких клеток более 2% определяется высокая степень злокачественности лимфомы (быстропрогрессирующий вариант), если таких клеток менее 2% то определяется низкая степень злокачественности (медленнопрогрессирующий вариант) [1]
Однако для этого способа характерна недостаточная точность прогнозирования, поскольку не учитываются факторы, влияющие на включение Н3-тимидина в пролиферирующие клетки. Эти факторы изучены в специальных исследованиях по применению Н3 -тимидина и описаны в обзоре В.М. Котельникова [2] где указывается, что истинный уровень пролиферативной активности может искажаться по следующим причинам.
Однако для этого способа характерна недостаточная точность прогнозирования, поскольку не учитываются факторы, влияющие на включение Н3-тимидина в пролиферирующие клетки. Эти факторы изучены в специальных исследованиях по применению Н3 -тимидина и описаны в обзоре В.М. Котельникова [2] где указывается, что истинный уровень пролиферативной активности может искажаться по следующим причинам.
1. Изменение соотношения основного и запасного пути биосинтеза тимидинтрифосфата при злокачественной трансформации.
2. Снижение активности тимидинкиназы в опухолевых клетках.
3. Наличие свободного тимидина в опухолевых клетках.
4. Неравномерность включения Н3 -тимидина на протяжении S-фазы.
Наиболее близким к изобретению является способ определения варианта НХЛ по уровню активации нуклеолярного аппарата в лимфоидных клетках и по наличию клеток S/G2 в периферической крови больных [3]
Уровень активности нуклеолярного аппарата проводится на первом этапе исследования и заключается в том, что стандартные мазки крови окрашиваются азотно-кислым серебром, а затем на системе текстурного анализатора изображения ("TAS", "Leitz", ФРГ) определяется площадью Ag-содержащих зон. Площади зон менее 0,4 мкм соответствовала низкая степень злокачественности лимфомы и медленнопрогрессирующий вариант, более 0,6 мкм высокая степень злокачественности и быстропрогрессирующий вариант заболевания. Определение доли клеток в S/G2 стадиях клеточного цикла проводится на втором этапе исследования, согласно которому стандартные мазки крови окрашивают по Фельгену и на цитофотометре определяют долю клеток в S/G2, при наличии таких клеток определяют быстропрегрессирующий вариант, при отсутствии - медленнопрогрессирующий вариант.
Уровень активности нуклеолярного аппарата проводится на первом этапе исследования и заключается в том, что стандартные мазки крови окрашиваются азотно-кислым серебром, а затем на системе текстурного анализатора изображения ("TAS", "Leitz", ФРГ) определяется площадью Ag-содержащих зон. Площади зон менее 0,4 мкм соответствовала низкая степень злокачественности лимфомы и медленнопрогрессирующий вариант, более 0,6 мкм высокая степень злокачественности и быстропрогрессирующий вариант заболевания. Определение доли клеток в S/G2 стадиях клеточного цикла проводится на втором этапе исследования, согласно которому стандартные мазки крови окрашивают по Фельгену и на цитофотометре определяют долю клеток в S/G2, при наличии таких клеток определяют быстропрегрессирующий вариант, при отсутствии - медленнопрогрессирующий вариант.
Недостатком данного способа является сложность реализации в связи с использованием импортной техники системы текстурного анализа изображения "TAS".
Суть изобретения заключается в упрощении метода при сохранении точности прогнозирования характера течения НХЛ.
Предложенный способ осуществляется следующим образом.
Из периферической крови больного стандартным способом приготовляются мазки. Затем исследование осуществляется в два этапа.
1. Определение уровня активации нуклеолярного аппарата с помощью НЛК-теста. Мазок окрашивается 0,1%-ным раствором бензо[а]пирена в кофеине по известной методике [4] затем с помощью люминесцентного микроскопа ЛЮМАМ-ИЗ определяется доля клеток с флуоресциирующими ядрышками (НЛК-позитивных клеток). Если в 100 исследованных лимфоидных клетках больного не обнаруживаются клетки с флуоресциирующими ядрышками, то определяется безрецидивный вариант течения НХЛ с наиболее благоприятным прогнозом. Если НЛК-позитивные клетки выявлены, то проводится второй этап исследования.
2. Исследование кинетических параметров лимфоидных клеток. Мазок фиксируется смесью метанола, ледяной уксусной кислоты (3:1) и 40% формалина при конечной концентрации его 2% по методике [5] Затем с помощью цитофотометра [5] определяется доля лимфоидных клеток в стадиях S/G2 клеточного цикла. Если таких клеток не обнаружено, то определяется медленнопрогрессирующий вариант НХЛ с рецидивирующим характером заболевания. В том случае, когда такие клетки обнаруживаются, определяется быстропрогрессирующий вариант развития НХЛ.
Ниже приводятся примеры прогнозирования процесса у трех больных НХЛ с различными вариантами течения заболевания.
Пример 1. Больной З. 58 лет, болен с января 1989 г. У больного установлен лимфобластный вариант НХЛ, диффузный характер роста опухоли, 2 стадия заболевания. При клиническом обследовании до лечения обнаружено увеличение шейных, надключичных и подмышечных лимфоузлов до 2-5 см, лейкоцитоз и лимфоцитоз в периферической крови не выявлены. В 1989 г проведено 6 курсов по программе СОР и телегамматерапия. В настоящее время больной находится пятый год под наблюдением гематолога. В течение первых 3 лет лечения проходил противорецидивные курсы полихимиотерапии, с 1989 г полная клиническая ремиссия.
До лечения больной обследован по описанной выше методике, НЛК-тест дал отрицательный результат, пролиферирующих клеток в S/G2 стадии клеточного цикла в периферической крови не выявлено.
Пример 2. Больная Н. 54 лет, больна с февраля 1991 г. У больной установлен пролимфоцитарный вариант НХЛ, диффузный характер роста опухоли, 2 стадия заболевания. При клиническом обследовании обнаружено увеличение лимфоузлов брюшной полости и паховых лимфоузлов до 3-4 см, лейкоцитоз и лимфоцитоз в периферической крови не выявлены. В 1991 г больной проведено 6 курсов по программе СОР, после чего установлено состояние клинической ремиссии, однако в мае 1992 г отмечен первый рецидив заболевания. В настоящее время у больной наблюдается рецидивирующий характер развития заболевания.
До лечения больная обследована по описанной выше методике прогнозирования, НЛК-тест дал положительный результат 6% НЛК-позитивных лимфоидных клеток, пролиферирующих клеток в периферической крови не выявлено.
Пример 3. Больная Ч. 25 лет, больна с августа 1990 г. У больной установлен лимфоцитарный вариант НХЛ, диффузный характер роста опухоли, 2 стадия. При клиническом обследовании у больной обнаружено увеличение подчелюстных и шейных лимфоузлов до 3 см и образование на коже головы опухолевой природы. Лейкоцитоз и лимфоцитоз в периферической крови не выявлены, но обнаружены пролимфоциты 7% В апреле 1991 г после 7 курсов ПХТ (СОР, АСОР, АСОР-bleo) и телегамматерапии у больной наблюдается прогрессия опухолевого заболевания, увеличение подчелюстных, подмышечных, шейных лимфоузлов, лейкемизация процесса. Проводимые курсы интенсивной полихимиотерапии оказываются неэффективными и в мае 1991 г больная скончалась.
До лечения больная обследована по предлагаемой методике прогнозирования, НЛК-тест дал положительный результат 23% НЛК-позитивных клеток, кроме того в периферической крови больной обнаружены клетки в стадиях S/G2 клеточного цикла.
Литературные источники, принятые во внимание
1. Соболева Т.Н. Морозова В.Т. Касаткина В.В. и др. Авторадиографическое изучение лимфоидных клеток крови в злокачественных лимфомах. Лабораторное дело, 1988, N 12, с. 27-33.
1. Соболева Т.Н. Морозова В.Т. Касаткина В.В. и др. Авторадиографическое изучение лимфоидных клеток крови в злокачественных лимфомах. Лабораторное дело, 1988, N 12, с. 27-33.
2. Котельников В.М. Факторы, влияющие на заключение Н3-тимидина в клетки, синтезирующие ДНК. Экспериментальная онкология, 1986, N 6.
3. Погорелов В.М. Даровский В.М. Котельников В.М. и др. Морфометрическая характеристика аргентофильных структур нуклеол лимфоидных клеток периферической крови больных неходжкинскими лимфомами и хроническим лимфолейкозом. -Экспериментальная онкология, 1987, N 3, с. 43-47.
4. Э. Пирс. Гистохимия.
5. Козинец Г.И. Котельников В.М. Гольдберг В.Е. Цитофотометрия гемопоэтических клеток. Томск: Издательство Томского ун-та, 1986. 223 с.
Claims (1)
- Способ прогнозирования варианта течения неходжкинских лимфом (НХЛ) путем определения в периферической крови больного процентного содержания лимфоидных клеток с повышенным уровнем активности нуклеолярного аппарата и находящихся в стадии S/G2 клеточного цикла, отличающийся тем, что стандартные мазки крови окрашивают бензо[а]пиреном по известной методике и с помощью люминесцентного микроскопа определяют наличие клеток с флуоресцирующими ядрышками, при отсутствии которых прогнозируют первый вариант течения НХЛ (безрецидивный), а при их обнаружении проводят второй этап исследования, при котором другой мазок крови больного окрашивают по Фельгену и определяют долю клеток в стадиях S/G2 клеточного цикла, причем при отрицательном значении теста прогнозируют второй вариант (рецидивирующее медленнопрогрессирующее течение), при положительном - третий вариант (быстропрогрессирующее течение).
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU93028217A RU2082976C1 (ru) | 1993-05-24 | 1993-05-24 | Способ прогнозирования варианта течения неходжкинских лимфом |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
RU93028217A RU2082976C1 (ru) | 1993-05-24 | 1993-05-24 | Способ прогнозирования варианта течения неходжкинских лимфом |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU93028217A RU93028217A (ru) | 1996-04-10 |
RU2082976C1 true RU2082976C1 (ru) | 1997-06-27 |
Family
ID=20142161
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
RU93028217A RU2082976C1 (ru) | 1993-05-24 | 1993-05-24 | Способ прогнозирования варианта течения неходжкинских лимфом |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2082976C1 (ru) |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2490638C1 (ru) * | 2012-08-01 | 2013-08-20 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Уфимский научно-исследовательский институт медицины труда и экологии человека" | Способ прогнозирования развития в-клеточных и т-клеточных неходжкинских лимфом |
RU2647454C2 (ru) * | 2016-03-16 | 2018-03-15 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ростовский научно-исследовательский онкологический институт" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ прогнозирования риска прогрессирования первичных В-клеточных неходжкинских лимфом с поражением костного мозга |
RU2772187C1 (ru) * | 2021-09-17 | 2022-05-18 | федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр онкологии" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ прогнозирования течения первичной медиастинальной В-крупноклеточной лимфомы |
-
1993
- 1993-05-24 RU RU93028217A patent/RU2082976C1/ru active
Non-Patent Citations (1)
Title |
---|
Погорелов В.М. и др. Морфометрическая характеристика аргентофильных структур нуклеоллимфоидных клеток периферической крови больных неходжкинскими лимфомами и хроническим лимфолейкозом. - Экспериментальная онкология.- 1987, N 3, с.43 - 47. * |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
RU2490638C1 (ru) * | 2012-08-01 | 2013-08-20 | Федеральное бюджетное учреждение науки "Уфимский научно-исследовательский институт медицины труда и экологии человека" | Способ прогнозирования развития в-клеточных и т-клеточных неходжкинских лимфом |
RU2647454C2 (ru) * | 2016-03-16 | 2018-03-15 | Федеральное государственное бюджетное учреждение "Ростовский научно-исследовательский онкологический институт" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ прогнозирования риска прогрессирования первичных В-клеточных неходжкинских лимфом с поражением костного мозга |
RU2772187C1 (ru) * | 2021-09-17 | 2022-05-18 | федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр онкологии" Министерства здравоохранения Российской Федерации | Способ прогнозирования течения первичной медиастинальной В-крупноклеточной лимфомы |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
Makino et al. | Effects of ionizing radiations on DNA replication in cultured mammalian cells | |
Wertz et al. | Rapid stimulation of phospholipid metabolism in bovine lymphocytes by tumor-promoting phorbol esters | |
Yui et al. | Liquid-chromatographic determination of norepinephrine and epinephrine in human plasma. | |
Arias et al. | Determination of the β-blocker atenolol in plasma by capillary zone electrophoresis | |
CN109385472B (zh) | 一种血清miRNA标志物及其检测电离辐射损伤的方法 | |
Waalkes et al. | The determination of pentamidine (4, 4′-diamidinophenoxypentane) in plasma, urine, and tissues | |
RU2082976C1 (ru) | Способ прогнозирования варианта течения неходжкинских лимфом | |
Molnar et al. | The Biosynthesis of Glycoproteins: V. Incorporation of Glucosamine-1-14C into Macromolecules by Ehrlich Ascites Carcinoma Cells | |
GB1603773A (en) | Determination of unbound hormone pharmaceutical or vitamin | |
Diez et al. | Value of serum neuron-specific enolase in nonsmall cell lung cancer | |
Dnistrian et al. | Lipid-bound sialic acid as a tumor marker | |
Kohail et al. | A multifactorial analysis of steroid hormone receptors in stages I and II breast cancer. | |
CN111537629B (zh) | 用于检测活动性肺结核的粪便中脂质及其检测系统 | |
Xiu-Shuang et al. | Facile determination of anesthetic drug propofol based on electrochemiluminescence quenching | |
Royer et al. | Cyclic AMP and cyclic GMP production in normal and psoriatic epidermis | |
CN111595967A (zh) | 一种液相色谱-串联质谱法测定血浆中替诺福韦艾拉酚胺浓度的方法 | |
Thyssen et al. | Quantification of distinct molecular species of platelet activating factor in ulcerative colitis | |
Ohsawa et al. | Determination of xylitol in the human serum and saliva by ion chromatography with pulsed amperometric detection | |
CN112098529A (zh) | 用于检测活动性肺结核疗效的粪便代谢物及其检测系统 | |
Feldstein et al. | Comparison between levels of trace elements in normal and cancer inoculated mice by XRF and PIXE | |
Balazs et al. | Hydralazine-induced antinuclear antibodies in beagle dogs | |
Papatestas et al. | The association of carcinoembryonic antigen and peripheral lymphocytes | |
CN110849869A (zh) | 一种检定放射性注射液中铜离子浓度限度的显色方法及试剂盒 | |
CN111562321B (zh) | 用于检测活动性肺结核的粪便代谢物及其检测系统 | |
Kunitake et al. | Molecular weight distributions of polydisperse systems: application to very low density lipoproteins |