RU2076906C1 - Method of preparing citric acid at continuous regime - Google Patents
Method of preparing citric acid at continuous regime Download PDFInfo
- Publication number
- RU2076906C1 RU2076906C1 RU94012671A RU94012671A RU2076906C1 RU 2076906 C1 RU2076906 C1 RU 2076906C1 RU 94012671 A RU94012671 A RU 94012671A RU 94012671 A RU94012671 A RU 94012671A RU 2076906 C1 RU2076906 C1 RU 2076906C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- medium
- citric acid
- molasses
- fermentation
- stage
- Prior art date
Links
Images
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Description
Изобретение относится к микробиологической промышленности, а именно к способу получения лимонной кислоты при культивировании гриба Asp.niger на питательной среде из мелассы, и может быть использовано в пищевой промышленности, медицине, фармакологии и т.д. The invention relates to the microbiological industry, and in particular to a method for producing citric acid by cultivation of Asp.niger fungus on a nutrient medium from molasses, and can be used in the food industry, medicine, pharmacology, etc.
Существующее на сегодняшний день производство лимонной кислоты микробиологическим способом основано на периодическом культивировании продуцента на предварительно подготовленной к ферментации мелассе. The current production of citric acid by the microbiological method is based on periodic cultivation of the producer on molasses previously prepared for fermentation.
Однако периодический способ производства из-за невысокой производительности и трудоемкости процесса мало эффективен с экономической точки зрения. Кроме того, эффективность производства лимонной кислоты во многом зависит от стадии подготовки мелассы к ферментации, в частности от освобождения мелассы от избытка железа и других тяжелых металлов. В производстве лимонной кислоты для этой цели мелассу обрабатывают гексацианоферратом калия К4[Fe(CN)6] (ЖКС) и другими комплексообразователями. При таком способе подготовки мелассы к ферментации в растворе остаются значительные количества свободных ионов ферроцианида. Для снятия их токсического действия (нейтрализации) обычно используют соли железа или гидросульфит натрия, что требует строгого контроля за содержанием ионов железа и серы, т.к. избыток существенно снижает выход лимонной кислоты. Кроме того, наличие свободного ферроцианида приводит к поступлению цианидов в биомассу гриба, что ограничивает варианты решения проблем по утилизации отходов с высоким содержанием биологически активных веществ.However, the periodic method of production due to the low productivity and complexity of the process is not very effective from an economic point of view. In addition, the efficiency of citric acid production largely depends on the stage of preparation of molasses for fermentation, in particular on the release of molasses from excess iron and other heavy metals. In the production of citric acid for this purpose, molasses is treated with potassium hexacyanoferrate K 4 [Fe (CN) 6 ] (FSW) and other complexing agents. With this method of preparing molasses for fermentation, significant amounts of free ferrocyanide ions remain in solution. To remove their toxic effect (neutralization), iron salts or sodium hydrosulfite are usually used, which requires strict control over the content of iron and sulfur ions, because excess significantly reduces the yield of citric acid. In addition, the presence of free ferrocyanide leads to the entry of cyanides into the biomass of the fungus, which limits the options for solving problems in the disposal of waste with a high content of biologically active substances.
Известен способ получения лимонной кислоты при культивировании гриба А. niger в периодическом режиме на мелассной питательной среде предварительно обработанной K4[Fe(CN)>6] по А.С. N 813968 СССР, С 12 Р 7/48.A known method of producing citric acid by cultivation of the fungus A. niger in batch mode on molasses nutrient medium pre-treated with K 4 [Fe (CN)> 6 ] according to A.S. N 813968 USSR, C 12
Недостатком указанного способа является то, что производство лимонной кислоты осуществляют в периодическом режиме, что существенно снижает производительность процесса. Кроме того, обработка мелассы ЖСК приводит к наличию свободного ферроцианида в среде, что сопровождается поступлением цианидов в биомассу мицелия и жидкостные потоки после отделения лимонной кислоты. The disadvantage of this method is that the production of citric acid is carried out in a batch mode, which significantly reduces the productivity of the process. In addition, the treatment of molasses HFS leads to the presence of free ferrocyanide in the medium, which is accompanied by the influx of cyanides into the mycelium biomass and liquid flows after separation of citric acid.
Наиболее близким аналогом по своей технической сущности является способ получения лимонной кислоты в непрерывном режиме в две стадии на питательной среде, содержащей в качестве источника углерода сахар по патенту Fr С 12 Р 7/48, N 2503736, 1982. Недостатком изложенного способа наряду с невысокой продуктивностью процесса является высокая стоимость сырья (сахара), что существенно снижает экономическую эффективность процесса. The closest analogue in its technical essence is a method for producing citric acid in a continuous mode in two stages on a nutrient medium containing sugar as a carbon source according to the patent Fr С 12 Р 7/48, N 2503736, 1982. The disadvantage of the above method along with low productivity the process is the high cost of raw materials (sugar), which significantly reduces the economic efficiency of the process.
Технический результат предлагаемого способа заключается в повышении эффективности ферментируемости мелассы в лимонную кислоту и повышении производства лимонной кислоты за счет создания непрерывного способа ее производства. The technical result of the proposed method is to increase the fermentability of molasses into citric acid and increase the production of citric acid by creating a continuous method for its production.
Повышение ферментируемости мелассы достигается путем сорбционной очистки мелассы на цеолите. При этом достигается освобождение мелассы от избытка тяжелых металлов, особенно железа, а также хлоридов, сульфатов и коллоидов до величины, необходимой для поддержания основных биологических функций гриба, при одновременном обогащении мелассы микроэлементами, стимулирующими кислотообразование. The increase in fermentability of molasses is achieved by sorption purification of molasses on zeolite. At the same time, molasses is freed from the excess of heavy metals, especially iron, as well as chlorides, sulfates and colloids to the value necessary to maintain the basic biological functions of the fungus, while the molasses is enriched with trace elements stimulating acid formation.
Для сорбционной очистки мелассы на клиноптилолите разбавленный водопроводной водой до требуемой концентрации раствор мелассы пропускают с определенной скоростью через колонку, заполненную фильтрующей загрузкой-клиноптилолитом зернением 0,2 2,0 мм. For sorption purification of molasses on clinoptilolite, diluted with tap water to the required concentration, molasses solution is passed at a certain speed through a column filled with a filter loading of clinoptilolite with a grain size of 0.2 2.0 mm.
Клиноптилолит цеолит осадочного происхождения, основой цеолитового каркаса являются тетраэды SiO4 и AlO4. Он относится к группе цеолитов с трехмерным каркасом и является выраженным микропористым адсорбентом.Clinoptilolite is a zeolite of sedimentary origin, the basis of the zeolite framework are the tetrahedra SiO 4 and AlO 4 . It belongs to the group of zeolites with a three-dimensional skeleton and is a pronounced microporous adsorbent.
Оптимальная скорость фильтрования мелассы через клиноптилолитовый фильтр в пределах от 6 до 10 м/ч. Объем пропущенной жидкости может колебаться в зависимости от состава мелассы от 10 до 200 объемов на 1 объем клиноптилолита. The optimum speed for filtering molasses through a clinoptilolite filter is in the range of 6 to 10 m / h. The volume of skipped fluid may vary, depending on the molasses composition, from 10 to 200 volumes per 1 volume of clinoptilolite.
Результаты сорбционной очистки мелассы на клиноптилолитовом фильтре представлены в табл. 1, из которых видно, что клиноптилолит лучше чем ЖКС удаляет избыток железа, кальция, меди, сульфат ионов и т.д. The results of sorption purification of molasses on clinoptilolite filter are presented in table. 1, from which it is clear that clinoptilolite better than FSW removes excess iron, calcium, copper, sulfate ions, etc.
Отработанную указанным способом мелассную среду после установления рН и стерилизации используют для культивирования гриба А.niger, которое, согласно изобретению, осуществляют в непрерывном режиме в две стадии. The molasses medium worked out in this way after pH adjustment and sterilization is used to cultivate A. niger fungus, which, according to the invention, is carried out continuously in two stages.
Культивирование на первой стадии осуществляют при рН среды 6,0 6,8, при температуре 33oС, скорости перемешивания среды 250 об/мин и подаче воздуха 1 1,5 л/л среды. Через 24 36 ч от начала культивирования после сформирования мицелия рН среды снижают до 2,5 3,0 путем подачи в ферментер 10%-ного раствора Н2SO4 или HCl. Резкое снижение рН среды после формирования мицелия способствует биосинтезу продуцентом преимущественно лимонной кислоты, так как в щелочной среде гриб А.niger интенсивно синтезирует щавелевую кислоту, а при рН 5 глюконовую. Кроме того, подщелачивание среды способствует частичной инактивации бактериальной и дрожжевой микрофлоры среды, подавляющей биосинтетическую активность гриба.The cultivation in the first stage is carried out at a pH of 6.0 to 6.8, at a temperature of 33 ° C. , a stirring speed of the medium of 250 rpm and an air supply of 1 1.5 l / l of medium. After 24 to 36 hours from the start of cultivation after the formation of mycelium, the pH of the medium is reduced to 2.5 3.0 by feeding a 10% solution of H 2 SO 4 or HCl to the fermenter. A sharp decrease in the pH of the medium after the formation of mycelium promotes biosynthesis by the producer of predominantly citric acid, since in the alkaline medium A.niger fungus intensively synthesizes oxalic acid, and at
Затем, когда рост культуры-продуцента замедляется и начинается активный рост лимонной кислоты в среде, процесс переводят на непрерывный режим путем подачи в ферментер стерильной мелассной среды (очищенной на клиноптилолитовом фильтре) со скоростью разбавления среды (Д), равной 0,03 ч-1 (табл.2). Перетекающая суспензия поступает во второй ферментер, культивирование на второй стадии осуществляют при температуре 31oС, и при непрерывной или периодической подаче в среду определенных концентраций ПАВ (табл.3), индуцирующих экскрецию лимонной кислоты путем влияния на проницаемость клеток продуцента, со второго ферментера суспензия поступает в специальный сборник. Результаты, представленные в табл.3, показывают что наибольшее накопление лимонной кислоты имеет место при концентрациях ПАВ 0,001 0,01% При увеличении концентрации ПАВ выше 0,01% концентрация лимонной кислоты в среде снижается.Then, when the growth of the producer culture is slowed down and the active growth of citric acid in the medium begins, the process is transferred to a continuous mode by feeding a sterile molasses medium (purified on a clinoptilolite filter) to the fermenter with a dilution rate of medium (D) of 0.03 h -1 (table 2). The flowing suspension enters the second fermenter, the cultivation in the second stage is carried out at a temperature of 31 o C, and with continuous or periodic supply to the medium of certain concentrations of surfactants (table 3), inducing the excretion of citric acid by affecting the permeability of producer cells, from the second fermenter suspension enters a special collection. The results presented in Table 3 show that the greatest accumulation of citric acid occurs at surfactant concentrations of 0.001 0.01%. With an increase in surfactant concentration above 0.01%, the concentration of citric acid in the medium decreases.
Таким образом, при производстве лимонной кислоты в указанном режиме достигается увеличение выработки лимонной кислоты по сравнению с контрольными вариантами (пример 1) выработка 3,86 г/ч, пример 7 выработка 7 г/ч) в среднем на 40 50% Кроме того, предлагаемый способ очистки мелассы предотвращает поступление цианидов в биомассу мицелия и жидкостные стоки, что позволяет использовать их в качестве биологически активных соединений в животноводстве. Thus, in the production of citric acid in the specified mode, an increase in the production of citric acid is achieved in comparison with the control variants (example 1) production of 3.86 g / h, example 7 production of 7 g / h) by an average of 40 50% In addition, the proposed The molasses purification method prevents cyanides from entering the mycelium biomass and liquid effluents, which makes it possible to use them as biologically active compounds in animal husbandry.
Биосинтез лимонной кислоты в зависимости от времени изменения и величины рН представлен на чертеже, где 1 контроль (естественное изменение рН); 2 - снижение рН среды через 12 ч, 3 то же, через 24, 4, 36, 5, 48 ч. The biosynthesis of citric acid, depending on the time of change and the pH value is shown in the drawing, where 1 control (natural change in pH); 2 - decrease in pH after 12 hours, 3 the same, after 24, 4, 36, 5, 48 hours
Изобретение поясняется примерами реализации. The invention is illustrated by examples of implementation.
Пример 1 (контрольный периодический процесс, меласса обработана K4[Fe(CN)6]
Гриб Aspergillus niger ВСБ 228 культивировали периодическим способом в аппарате с рабочем объемом 10 л на мелласной питательной среде, обработанной K4[Fe(CN)6] (при концентрации 250 мг/л). Обработку проводили при температуре 80 90oС. После установления рН 6,8 среду стерилизовали и использовали в процессе ферментации.Example 1 (control batch process, molasses processed K 4 [Fe (CN) 6 ]
The Aspergillus niger VSB 228 fungus was cultured batchwise in an apparatus with a working volume of 10 l on a mellaceous culture medium treated with K 4 [Fe (CN) 6 ] (at a concentration of 250 mg / l). The treatment was carried out at a temperature of 80 90 o C. After establishing a pH of 6.8, the medium was sterilized and used in the fermentation process.
Режим ферментации. Меласса рН 6,8 содержала 8% редуцирующих веществ (РВ). Культивирование осуществляли при начальной температуре 33oС в течение 48 ч. Затем при 31oС, при скорости перемешивания 250 об/м и аэрации среды 1 м/мин/л среды. Содержание минеральных элементов в мелассе до и после обработки как показано в табл.1. Длительность ферментации 7 суток.Fermentation mode. Molasses pH 6.8 contained 8% reducing substances (RV). The cultivation was carried out at an initial temperature of 33 o C for 48 hours. Then at 31 o C, with a stirring speed of 250 rpm and aeration of the medium 1 m / min / l of medium. The content of mineral elements in molasses before and after treatment as shown in table 1. The duration of the fermentation is 7 days.
Концентрация лимонной кислоты в среде 65 г/л, производство лимонной кислоты 92,6 г/сут или 3,86 г/ч. The concentration of citric acid in the medium is 65 g / l; the production of citric acid is 92.6 g / day or 3.86 g / h.
Пример 2. Гриб А.niger ВСБ-228 культивировали непрерывным способом на мелассной питательной среде после сорбционной очистки на клиноптилолитовом фильтре. Example 2. Mushroom A.niger VSB-228 was cultivated in a continuous manner on molasses culture medium after sorption purification on a clinoptilolite filter.
Режим подготовки мелассы к ферментации. Мелассу развели водопроводной водой до концентрации РВ 6 пропустили через колонку, заполненную клиноптилолитом со скоростью 8 м/ч, установили рН 6,8 и после стерилизации при температуре 100oС в течение 45 м использовали в процессе ферментации. Ферментацию проводили в две стадии.The mode of preparation of molasses for fermentation. The molasses was diluted with tap water until the concentration of
Режим ферментации. Культивирование гриба на первой стадии ферментации осуществляли в аппарате с рабочим объемом 10 л, при температуре 33oС, первоначальном значении рН 6,8, скорости перемешивания среды 250 об/мин и аэрации 1 л/л среды в 1 мин. Через 48 ч от начала культивирования, после снижения интенсивности образования мицелиальной массы, процесс перевели на непрерывный режим путем подачи в ферментер свежей мелассной среды, очищенной на клиноптилолитном фильтре; со скоростью разбавления среды (Д) 0,03 ч-1. Перетекающая суспензия с такой же скоростью поступала во второй ферментер (2-я стадия), где культивирование осуществляли при температуре 31oС, аэрации среды 1 л/л среды в 1 мин и оборотах мешалки 250 об/мин. Длительность ферментации 5 суток. Концентрация лимонной кислоты в среде 30 г/л, производительность лимонной кислоты 216 г/сутки или 9 г/ч.Fermentation mode. The cultivation of the fungus in the first stage of fermentation was carried out in an apparatus with a working volume of 10 l, at a temperature of 33 ° C, an initial pH of 6.8, a stirring speed of the medium of 250 rpm and aeration of 1 l / l of medium for 1 min. 48 hours after the start of cultivation, after a decrease in the intensity of formation of mycelial mass, the process was switched to a continuous mode by feeding fresh molasses medium purified on a clinoptilolite filter to the fermenter; with a dilution rate of the medium (D) of 0.03 h -1 . The flowing suspension entered the second fermenter at the same speed (stage 2), where cultivation was carried out at a temperature of 31 ° C, aeration of the medium 1 l / l of medium for 1 min and stirrer revolutions of 250 rpm. The duration of fermentation is 5 days. The concentration of citric acid in the medium is 30 g / l, the productivity of citric acid is 216 g / day or 9 g / h.
Таким образом, введение процесса производства лимонной кислоты в две стадии со скоростью разбавления среды 0,03 ч-1 способствует повышению эффективности производства лимонной кислоты, что выражается в увеличении производства лимонной кислоты в 1 ч от 3,86 г в периодическом режиме до 9 г в непрерывном процессе.Thus, the introduction of the process of production of citric acid in two stages with a dilution rate of 0.03 h -1 increases the efficiency of production of citric acid, which is expressed in an increase in the production of citric acid in 1 h from 3.86 g in a batch mode to 9 g continuous process.
Пример 3. Гриб А.niger ВСБ-228 культивировали непрерывным способом на мелассной питательной среде после сорбционной очистки на клиноптилолитовом фильтре. Example 3. The fungus A.niger VSB-228 was cultivated in a continuous manner on molasses culture medium after sorption purification on a clinoptilolite filter.
Режим подготовки мелассы к ферментации: мелассу с содержанием РВ 6% пропускали через колонку, заполненную клиноптилолитом со скоростью 8 м/ч. После установления рН среды 6,8 мелассную среду стерилизовали и использовали в процессе ферментации. Содержание минеральных элементов в мелассе до и после обработки показано в табл.1. The mode of preparation of molasses for fermentation: molasses with a PB content of 6% was passed through a column filled with clinoptilolite at a speed of 8 m / h. After establishing the pH of the medium, 6.8 molasses medium was sterilized and used in the fermentation process. The content of mineral elements in molasses before and after treatment is shown in table 1.
Режим ферментации: культивирование гриба на первой ферментации осуществляли в аппарате с рабочим объемом 10 л на мелассной среде, содержащей 8% РВ, при температуре 33oC, первоначальном значении рН 6,8, скорости перемешивания среды 250 об/мин и аэрации 1л/л среды. Через 24 ч от начала культивирования рН среды снизили до 2,5 путем подачи в ферментер 10% H2SO4. После прекращения роста мицелия процесс перевели на непрерывный режим путем подачи в ферментер свежей мелассной среды: очищенной на клиноптилолитовом фильтре со скоростью разбавления среды (Д)-0,03 ч-1. Перетекающая суспензия с такой же скоростью (Д-0,03 ч -1) поступала во второй ферментер (2-я стадия). Культивирование на второй стадии осуществляли при температуре -31oC, аэрации 1 л/л среды в 1 мин, скорости перемешивания среды 250 об/мин и периодической подаче в среду 10 мг/л додецилсульфата натрия. Длительность ферментации 5 суток. Концентрация лимонной кислоты в среде 45 г/л, производство лимонной кислоты 324 г/сутки или 13,5 г/ч.Fermentation mode: the cultivation of the fungus in the first fermentation was carried out in an apparatus with a working volume of 10 l on molasses medium containing 8% PB, at a temperature of 33 o C, an initial pH of 6.8, a stirring speed of the medium of 250 rpm and aeration of 1 l / l Wednesday. After 24 hours from the start of cultivation, the pH of the medium was reduced to 2.5 by feeding 10% H 2 SO 4 to the fermenter. After the cessation of mycelium growth, the process was transferred to a continuous mode by supplying a fresh molasses medium to the fermenter: purified on a clinoptilolite filter with a medium dilution rate (D) of -0.03 h -1 . The flowing suspension with the same speed (D-0.03 h -1 ) entered the second fermenter (2nd stage). The cultivation in the second stage was carried out at a temperature of -31 o C, aeration of 1 l / l of medium for 1 min, stirring speed of the medium of 250 rpm and a periodic supply of 10 mg / l of sodium dodecyl sulfate to the medium. The duration of fermentation is 5 days. The concentration of citric acid in the medium is 45 g / l, the production of citric acid 324 g / day or 13.5 g / h.
Таким образом, снижение рН среды до 2,5 после формирования мицелиальной массы на 1-й стадии ферментации и введение додецилсульфата натрия в среду на 2-й стадии ферментации существенно повышает эффективность процесса производства лимонной кислоты. Thus, a decrease in the pH of the medium to 2.5 after the formation of mycelial mass at the 1st stage of fermentation and the introduction of sodium dodecyl sulfate in the medium at the 2nd stage of fermentation significantly increases the efficiency of the citric acid production process.
Пример 4. Культивирование гриба A.niger ВСБ-228 проводили непрерывным способом в две стадии по примеру 3. На 2-й стадии ферментации в аппарат подавали твин-40 в концентрации 20 мг/л. Длительность ферментации 5 суток. Концентрация лимонной кислоты в среде 43 г/л, производство лимонной кислоты-309 г/сутки или 12,9 г/ч. Example 4. The cultivation of the fungus A.niger VSB-228 was carried out continuously in two stages according to example 3. At the 2nd stage of fermentation, tween-40 was fed into the apparatus at a concentration of 20 mg / L. The duration of fermentation is 5 days. The concentration of citric acid in the medium is 43 g / l; the production of citric acid is 309 g / day or 12.9 g / h.
Таким образом, введение оптимальных концентраций твин-40 на 2-ю стадию ферментации гриба, где происходит преимущественно биосинтез лимонной кислоты, существенно повышает эффективность процесса производства лимонной кислоты. Thus, the introduction of optimal concentrations of tween-40 at the 2nd stage of fungal fermentation, where mainly the biosynthesis of citric acid occurs, significantly increases the efficiency of the citric acid production process.
Пример 5. Культивирование гриба А.niger ВСБ-228 осуществляли непрерывным способом в две стадии по примеру 3. На 2-й стадии ферментации в аппарат подавали твин-80 в концентрации 20 мг/л. Длительность ферментации 5 суток. Концентрация лимонной кислоты в среде 45 г/л, производство лимонной кислоты 324,0 г/сутки или 13,5 г/ч. Example 5. The cultivation of the fungus A.niger VSB-228 was carried out continuously in two stages according to example 3. At the 2nd stage of fermentation, tween-80 was fed into the apparatus at a concentration of 20 mg / L. The duration of fermentation is 5 days. The concentration of citric acid in the medium is 45 g / l; the production of citric acid is 324.0 g / day or 13.5 g / h.
Пример 6. Культивирование гриба А.niger ВСБ-228 осуществляли непрерывным способом в две стадии, в условиях перемешивания и аэрации, при различных значениях рН и температуры на различных стадиях по примеру 3. На 2-й стадии ферментации в аппарат подавали додециламмоний ацетат в концентрации 50 мг/л. Длительность ферментации 5 суток. Концентрация лимонной кислоты в среде 45 г/л, производство лимонной кислоты 324,0 г/сутки или 13,5 г/ч. Example 6. Cultivation of the fungus A.niger VSB-228 was carried out continuously in two stages, under conditions of stirring and aeration, at different pH and temperature at various stages of example 3. At the 2nd stage of fermentation, dodecylammonium acetate was introduced into the apparatus at a
Пример 7. Гриб А.niger ВСБ-228 культивировали в непрерывном (одностадийном) режиме на мелассной питательной среде после сорбционной очистки. Подготовку мелассы к ферментации осуществляли по примеру 3. Example 7. The fungus A.niger VSB-228 was cultivated in a continuous (single-stage) mode on molasses culture medium after sorption purification. Preparation of molasses for fermentation was carried out according to example 3.
Режим ферментации: культивирование гриба осуществляли непрерывным способом при одностадийной ферментации в аппарате с рабочим объемом 10 л, при первоначальной t 33oС и рН 6,8. Скорость перемешивания и степень аэрации среды по примеру 3. После формирования мицелиальной массы, снижения скорости роста t среды снизили до 31oС, и процесс перевели на непрерывный режим путем подачи в ферментер свежей мелассной среды с содержанием РВ 6% Мелассную питательную среду подавали со скоростью разбавления среды Д 0,03 час-1. В ферментер подавали также 10 мг/л додецилсульфата натрия. Длительность ферментации 5 суток. Концентрация лимонной кислоты в среде 25 г/л, производство лимонной кислоты 180 г/сутки или 7 г/ч.Fermentation mode: the cultivation of the fungus was carried out in a continuous way with single-stage fermentation in an apparatus with a working volume of 10 l, with an initial t of 33 o C and a pH of 6.8. The mixing speed and the degree of aeration of the medium according to example 3. After the formation of the mycelial mass, reducing the growth rate t of the medium was reduced to 31 o C, and the process was transferred to a continuous mode by feeding fresh molasses medium with a content of 6% in the fermenter. Molassic nutrient medium was fed at a speed dilution of the medium D 0.03 hour -1 . 10 mg / L sodium dodecyl sulfate was also fed to the fermenter. The duration of fermentation is 5 days. The concentration of citric acid in the medium is 25 g / l; the production of citric acid is 180 g / day or 7 g / h.
Таким образом, при производстве лимонной кислоты непрерывным 2-х стадийным способом, но без снижения рН на первой стадии и без подачи пермеабилизирующих реагентов на вторую стадию ферментации, концентрации лимонной кислоты в среде на 40 50% ниже чем в предлагаемом способе (примеры 3 6). Thus, in the production of citric acid in a continuous 2-stage method, but without lowering the pH in the first stage and without supplying permeabilizing reagents to the second stage of fermentation, the concentration of citric acid in the medium is 40 to 50% lower than in the proposed method (examples 3 to 6) .
Claims (1)
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что в качестве пермеабилизирующих реагентов используют поверхностно-активные вещества додецилсульфат натрия, твин 40, твин 80 и додециламмоний ацетат.1. A method of producing citric acid in a continuous mode, comprising cultivating Aspergillus niger fungus under conditions of aeration and stirring the medium while maintaining a pH of 2.5 3 in the first stage, isolating citric acid, characterized in that in the first stage, after 24 36 hours from the beginning of cultivation, the pH of the medium is reduced to 2.5 3 due to the introduction of acidic titrants into the medium, and in the second stage, the culture medium is treated with permeabilizing reagents at concentrations of 0.001 0.01%
2. The method according to p. 1, characterized in that as permeabilizing reagents use surfactants sodium dodecyl sulfate, tween 40, tween 80 and dodecylammonium acetate.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU94012671A RU2076906C1 (en) | 1994-04-11 | 1994-04-11 | Method of preparing citric acid at continuous regime |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU94012671A RU2076906C1 (en) | 1994-04-11 | 1994-04-11 | Method of preparing citric acid at continuous regime |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU94012671A RU94012671A (en) | 1996-01-27 |
| RU2076906C1 true RU2076906C1 (en) | 1997-04-10 |
Family
ID=20154555
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU94012671A RU2076906C1 (en) | 1994-04-11 | 1994-04-11 | Method of preparing citric acid at continuous regime |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU2076906C1 (en) |
-
1994
- 1994-04-11 RU RU94012671A patent/RU2076906C1/en active
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Патент Франции N 2503736, кл. C 12P 7/48, 1982. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN106082532A (en) | For processing the preparation method of the biochemical preparation of Threonine Fermentation waste water | |
| CN105921099A (en) | Biochemical preparation for treating threonine fermentation sewage | |
| RU2076906C1 (en) | Method of preparing citric acid at continuous regime | |
| CN108342338A (en) | A kind of processing method of the pharmacy waste water containing antibiotics | |
| CS277658B6 (en) | Process for preparing 6-hydroxynicotinic acid | |
| US4505821A (en) | Method of treating waste liquors containing phenolics and formaldehyde | |
| CN107827244A (en) | Bacterial-algae complexing agent for aquaculture sewage treatment and preparation method thereof | |
| JP3506394B2 (en) | Method and apparatus for desulfurizing clay using sulfur-oxidizing bacteria | |
| JPS5835660B2 (en) | Method of manufacturing animal feed | |
| RU2312073C1 (en) | Process for biosorption purification of effluents to remove heavy metal ions | |
| JP2833700B2 (en) | Production method of mixed culture | |
| CN107814440A (en) | Bacterial-algae complexing agent for sewage treatment and preparation method thereof | |
| SU990812A1 (en) | Method for producing bacterial amilases | |
| SI9600120A (en) | New and improved fermentative procedure for the production of clavulanic acid and its salts | |
| JPH0236320B2 (en) | HAISUISHORIHOHO | |
| SU1465453A1 (en) | Method of producing molybdenum from diluted aqueous solutions | |
| SU1198023A1 (en) | Method of two-step biological purification of highly concentrated waste water | |
| SU1017733A1 (en) | Process for producing citric acid | |
| CA1150654A (en) | Process for the production of citric acid | |
| RU2093981C1 (en) | Method for growing green feed plants in hydroponic unit | |
| SU1039962A1 (en) | Culture medium for culturing fungum eremothecium ashby ii producing riboflavin | |
| JP2005073542A (en) | Method for producing feed or fertilizer from animal excrement as raw material | |
| SU1634710A1 (en) | Process for growing baker yeast | |
| KR20000007270A (en) | Process for producting water soluble amino acid by using bacteria strain which can decompose aquatic waste | |
| SU1564183A1 (en) | Method of preparing nutrient medium for yeast growing |