RU2034564C1 - Способ получения ингибитора пролиферации опухолевых клеток - Google Patents
Способ получения ингибитора пролиферации опухолевых клеток Download PDFInfo
- Publication number
- RU2034564C1 RU2034564C1 SU915010005A SU5010005A RU2034564C1 RU 2034564 C1 RU2034564 C1 RU 2034564C1 SU 915010005 A SU915010005 A SU 915010005A SU 5010005 A SU5010005 A SU 5010005A RU 2034564 C1 RU2034564 C1 RU 2034564C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- inhibitor
- acid
- condensation polymer
- molecular weight
- low molecular
- Prior art date
Links
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 title claims abstract description 24
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 18
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 title claims description 5
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 title description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-REOHCLBHSA-N L-lactic acid Chemical compound C[C@H](O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-REOHCLBHSA-N 0.000 claims abstract description 18
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 16
- 238000009833 condensation Methods 0.000 claims abstract description 10
- 230000005494 condensation Effects 0.000 claims abstract description 10
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 claims abstract description 10
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 claims abstract description 7
- 102000015636 Oligopeptides Human genes 0.000 claims abstract description 5
- 108010038807 Oligopeptides Proteins 0.000 claims abstract description 5
- ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 5-oxo-L-proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-VKHMYHEASA-N 0.000 claims abstract description 4
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims abstract description 4
- 239000003054 catalyst Substances 0.000 claims abstract description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 3
- YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N Toluene Chemical compound CC1=CC=CC=C1 YXFVVABEGXRONW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 12
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 claims description 11
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 8
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims description 6
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims description 3
- CYDQOEWLBCCFJZ-UHFFFAOYSA-N 4-(4-fluorophenyl)oxane-4-carboxylic acid Chemical compound C=1C=C(F)C=CC=1C1(C(=O)O)CCOCC1 CYDQOEWLBCCFJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000001540 sodium lactate Substances 0.000 claims description 2
- 229940005581 sodium lactate Drugs 0.000 claims description 2
- 235000011088 sodium lactate Nutrition 0.000 claims description 2
- -1 saccharide salt Chemical class 0.000 claims 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 abstract description 8
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 6
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 abstract description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 4
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 abstract description 3
- 239000002184 metal Substances 0.000 abstract description 3
- ODHCTXKNWHHXJC-GSVOUGTGSA-N Pyroglutamic acid Natural products OC(=O)[C@H]1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-GSVOUGTGSA-N 0.000 abstract description 2
- ODHCTXKNWHHXJC-UHFFFAOYSA-N acide pyroglutamique Natural products OC(=O)C1CCC(=O)N1 ODHCTXKNWHHXJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 13
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 13
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 11
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 10
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 6
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 5
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 5
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 230000003327 cancerostatic effect Effects 0.000 description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 3
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 2
- 208000005718 Stomach Neoplasms Diseases 0.000 description 2
- 238000011580 nude mouse model Methods 0.000 description 2
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 2
- 150000005846 sugar alcohols Chemical class 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 231100000820 toxicity test Toxicity 0.000 description 2
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 2
- LDVVTQMJQSCDMK-UHFFFAOYSA-N 1,3-dihydroxypropan-2-yl formate Chemical compound OCC(CO)OC=O LDVVTQMJQSCDMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KVZLHPXEUGJPAH-UHFFFAOYSA-N 2-oxidanylpropanoic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O.CC(O)C(O)=O KVZLHPXEUGJPAH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- 206010036790 Productive cough Diseases 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 1
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 231100000215 acute (single dose) toxicity testing Toxicity 0.000 description 1
- 238000011047 acute toxicity test Methods 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 229940061720 alpha hydroxy acid Drugs 0.000 description 1
- 150000001280 alpha hydroxy acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000002585 base Substances 0.000 description 1
- 208000024753 bloody sputum Diseases 0.000 description 1
- 239000001045 blue dye Substances 0.000 description 1
- 230000009702 cancer cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 208000019065 cervical carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000001647 drug administration Methods 0.000 description 1
- 208000017574 dry cough Diseases 0.000 description 1
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 235000013373 food additive Nutrition 0.000 description 1
- 239000002778 food additive Substances 0.000 description 1
- 206010017758 gastric cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000009499 grossing Methods 0.000 description 1
- ZNYQHFLBAPNPRC-UHFFFAOYSA-N heptadecan-2-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(C)O ZNYQHFLBAPNPRC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 1
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- CXKWCBBOMKCUKX-UHFFFAOYSA-M methylene blue Chemical compound [Cl-].C1=CC(N(C)C)=CC2=[S+]C3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 CXKWCBBOMKCUKX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229960000907 methylthioninium chloride Drugs 0.000 description 1
- 231100000957 no side effect Toxicity 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 210000002151 serous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 239000012265 solid product Substances 0.000 description 1
- 208000024794 sputum Diseases 0.000 description 1
- 210000003802 sputum Anatomy 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 201000011549 stomach cancer Diseases 0.000 description 1
- 201000000498 stomach carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 231100000397 ulcer Toxicity 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
- A61K47/34—Macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyesters, polyamino acids, polysiloxanes, polyphosphazines, copolymers of polyalkylene glycol or poloxamers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Inorganic Chemistry (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
Abstract
Использование: изобретение относится к медицине и иммунохимии и может быть использовано для получения ингибитора пролиферации опухолевых клеток. Сущность изобретения: смешивают низкомолекулярный конденсационный полимер α -гидроксипропионовой кислоты, олигопептид, содержащий, по крайней мере, один остаток пироглутаминовой кислоты, и стабилизатор, включающий сахарид или сахароспирт, и соли металла a -гидрокпропионовой кислоты в качестве катализатора в соотношении (10:1)-(4:1)-(3:05)-1,0. 4 з.п. ф-лы.
Description
Изобретение относится к способу получения ингибитора пролиферации опухолевых клеток у животных, в том числе у человека.
Несмотря на то, что исследования развития карциностатических средств энергично проводятся во всем мире, ни одно из современных карциностатических средств не является полностью свободным от побочного действия, вызываемого этими средствами. Также, учитывая существующее в настоящее время мнение, что радиотерапия в малых дозах неэффективна, имеется потребность в скорейшем создании удовлетворительных карциностатических средств.
Принимая во внимание эти соображения, авторы настоящего изобретения ранее предложили ингибитор пролиферации злокачественных опухолевых клеток человека в патентах США N 4, 810, 495 и 4, 963, 358, а также способ получения ингибитора пролиферации злокачественных опухолевых клеток у животных в патенте США N 4, 595, 657.
Однако в этих патентах не раскрыты конкретные вещества, ингибирующие пролиферацию клеток злокачественной опухоли.
Кроме того, ранее предлагался ингибитор пролиферации злокачественных опухолевых клеток у человека, включающий 2-гидрокси-1(Р-гидроксифенил)-5-метилгек- сан-3-он в патенте Японии 2-247121 (выложенная заявка N 247121/1995 того же заявителя) ингибитор пролиферации злокачественных опухолевых клеток у человека, включающий моноглицерид в патенте Японии N 2-247125 (выложенная заявка N 247125/1995 того же заявителя), и ингибитор пролиферации злокачественных опухолевых клеток у человека, включающий 2-гептадеканол, в патенте Японии 2-247120 (выложенная заявка N 247120/1995 того же заявителя).
Задача изобретения заключается в создании способа получения ингибитора пролиферации опухолевых клеток, который бы отличался от веществ, которые были предложены в перечисленных выше документах, практически не оказывал бы воздействия на пролиферацию нормальных клеток в тестах на токсичность с использованием нормальных клеток; и чтобы далее в тесте на ингибирование пролиферации опухолевых клеток человека, трансплантированных голым мышам, этот ингибитор останавливал бы пролиферацию через несколько дней после введения ингибитора, так же как и приводил к значительному уменьшению опухоли без дополнительного введения препарата, показывал стабильную эффективность при подкожном введении и обладал стабильным пролонгированным действием в организме пациента.
Способ предусматривает смешивание низкомолекулярного конденсационного полимера альфа-гидроксикислоты, олигопептида, содержащего, по меньшей мере, один остаток проглутаминовой кислоты, стабилизатора, включающего сахарид или сахароспирт и соли металла альфа-гидропропионовой кислоты, в качестве катализатора в соотношении 10=(1-4):(1-3):(0,5-1).
Предпочтительный вариант осуществления изобретения.
П р и м е р 1. Получение олигомера молочной кислоты (низкомолекулярного конденсационного полимера α-гидроксипропионовой кислоты).
Молочная кислота ( α-гидроксипропионовая кислота) химически характеризуется высокой реакционной способностью и отверждается при нагревании при 140оС в течение 100 мин. После того как твердый продукт растворяют в воде и добавляют к нему щелочь, выпадает осадок, с трудом растворяющийся даже при добавлении кислоты. После нагревания осадка в течение 2 ч при 175оС он превращается в вещество, которое не растворяется в воде, но растворяется в метаноле. Требование, которое сформулировано здесь, состоит в том, чтобы создать вещество, которое было бы растворимо в воде и было бы стабильно. Способ получения такого вещества, которое удовлетворяет этим условиям, описан ниже: 1) 0,7 мл 6N хлористоводородной кислоты добавляют к 50 мл L-молочной кислоты и смесь нагревают с обратным холодильником в течение 100 мин от 120 до 160оС или кипятят в течение 2 ч
2) 0,5 г NaHCO3 растворяют в 50 мл L-молочной кислоты, затем туда добавляют 150 мл толуола, и смесь нагревают в течение 2 часов от 140 до 160оС.
2) 0,5 г NaHCO3 растворяют в 50 мл L-молочной кислоты, затем туда добавляют 150 мл толуола, и смесь нагревают в течение 2 часов от 140 до 160оС.
3) 2 мл лактата натрия добавляют к 50 мл L-молочной кислоты, затем добавляют 100 мл бензола, и смесь нагревают от 3 до 6 часов при 140оС.
4) 0,2 г MgCl2 (или CaCl2) и 150 мл толуола добавляют к 50 мл L-молочной кислоты, и смесь нагревают при кипении от 2 до 4 часов.
В результате вышеперечисленных процессов получают соединение, включающее конденсационный полимер L-гидроксипропионовой кислоты.
П р и м е р 2. Низкомолекулярный конденсационный полимер для олигомер α-гидроксипропионовой кислоты, описанный в вышеприведенном примере 1, олигопептид, содержащий, по меньшей мере, один остаток пироглутаминовой кислоты, и стабилизатор, включающий сахарид или сахароспирт, смешивают в массовом отношении (10:1)-4:(1-3), и к этой смеси добавляют небольшое количество соли металла L-гидроксипропионовой кислоты в качестве катализатора для получения ингибитора пролиферации опухолевых клеток.
Результаты эксперимента. Эксперимент 1. Тест на острую токсичность. 10 мл каждого ингибитора, содержащего соответствующие дозы (стабилизатор на основе сорбитола), добавили к 990 мл коммерчески доступной синтетической среды Eagle's МЕМ, к которой добавлено 10% эмбриональной сыворотки теленка, каждый из них как среда был добавлен в пластмассовую чашку диаметром 15 мм с 24 лунками, имплантированными 1х105 кожных фибробластов и после культивации при 37оС в течение 72 ч в атмосфере СО2, измерили поглощение красителя метиленового синего в клетках при длине волны 620 нм.
По величине поглощения в этот момент времени рассчитывали степень выживания. Взаимосвязь между степенью выживания и дозами ингибитора приведены ниже:
Доза ингибитора, мг 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 1,2
Степень выживания, 99,9 99,0 98,5 98,0 97,4 96,2
Эксперимент 2. Эксперимент по ингибированию полиферации злокачественных опухолевых клеток А:Метод:1х107 клеток установленной культуры, HelaS-3 выделенных их карциномы шейки матки, были трансплантированы в дорсальную область каждой или голой мыши (ICRNU)NU; возраст 5 недель, затем на 5 день после трансплантации экспериментальной группе мышей ввели 20 мг ингибитора (с сорбитолом в качестве стаби-лизатора) в 0,5 мл Н2О, введение проводили раз в сутки в течение 10 дней непрерывно, а контрольной группе аналогичным образом вводили 0,5 физиологического раствора. После этого введения прекратили и к седьмой недели после трансплантации опухоли были удалены и взвешены.
Доза ингибитора, мг 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 1,2
Степень выживания, 99,9 99,0 98,5 98,0 97,4 96,2
Эксперимент 2. Эксперимент по ингибированию полиферации злокачественных опухолевых клеток А:Метод:1х107 клеток установленной культуры, HelaS-3 выделенных их карциномы шейки матки, были трансплантированы в дорсальную область каждой или голой мыши (ICRNU)NU; возраст 5 недель, затем на 5 день после трансплантации экспериментальной группе мышей ввели 20 мг ингибитора (с сорбитолом в качестве стаби-лизатора) в 0,5 мл Н2О, введение проводили раз в сутки в течение 10 дней непрерывно, а контрольной группе аналогичным образом вводили 0,5 физиологического раствора. После этого введения прекратили и к седьмой недели после трансплантации опухоли были удалены и взвешены.
Доза: 20 мг/0,5 мл Н2О для введения
Метод введения подкожная инъекция (SC)
Результаты: массы опухолей из каждой экспериментальной и контрольной группы приведены ниже:
N Контрольная группа (г) Экспериментальная группа (г)
1 3,25 0,25
2 3,15 0,63
3 4,13 0,54
4 3,46 0,62
5 3,27 0,64
Σх 17,26 2,68
Х1 3,452 0,536
Эффективность ингибирования: 84,5%
Эффективность ингибирования определяли по следующей формуле:
1 
100
В) Был повторен метод (А) за одним исключением, введение препарата (стабилизатор-глюкоза) осуществляли два раза в сутки и, следовательно, число инъекций составило 20. Массы образцов пяти опытов из каждой контрольной и экспериментальной группы, представлены ниже:
N Контрольная группа, г Экспериментальная группа
1 3,41 0,28
2 3,26 0,31
3 4,38 0,41
4 3,81 0,37
5 4,20 0,29
ΣХ 19,06 1,00
X 3,821 0,328
Эффективность ингибирования: 91,4%
С) был повторен метод (А) за одним исключением, в качестве культуры клеток были использованы клетки МКN-1, выделенные из раковой опухоли желудка человека. (В качестве стабилизатора, в препарате использовали глюкозу).
Метод введения подкожная инъекция (SC)
Результаты: массы опухолей из каждой экспериментальной и контрольной группы приведены ниже:
N Контрольная группа (г) Экспериментальная группа (г)
1 3,25 0,25
2 3,15 0,63
3 4,13 0,54
4 3,46 0,62
5 3,27 0,64
Σх 17,26 2,68
Х1 3,452 0,536
Эффективность ингибирования: 84,5%
Эффективность ингибирования определяли по следующей формуле:
В) Был повторен метод (А) за одним исключением, введение препарата (стабилизатор-глюкоза) осуществляли два раза в сутки и, следовательно, число инъекций составило 20. Массы образцов пяти опытов из каждой контрольной и экспериментальной группы, представлены ниже:
N Контрольная группа, г Экспериментальная группа
1 3,41 0,28
2 3,26 0,31
3 4,38 0,41
4 3,81 0,37
5 4,20 0,29
ΣХ 19,06 1,00
X 3,821 0,328
Эффективность ингибирования: 91,4%
С) был повторен метод (А) за одним исключением, в качестве культуры клеток были использованы клетки МКN-1, выделенные из раковой опухоли желудка человека. (В качестве стабилизатора, в препарате использовали глюкозу).
Результаты: массы опухолей образцов каждой контрольной и экспериментальной группы приведены ниже:
N Контрольная группа, г Экспериментальная группа, г
1 5,04 0,73
2 4,41 0,55
3 5,67 0,81
4 4,90 0,69
5 4,93 0,67
ΣХ 24,95 3,45
Х 4,99 0,86
Эффективность ингибирования: 86,2%
Промышленная применимость. Ингибитор пролиферации опухолевых клеток, полученный по предлагаемому способу, представляет собой низкомолекулярное производное вещество, существующее в организмах или пищевых добавках, и не оказывает вредного воздействия на пролиферацию нормальных клеток, что было доказано во всех тестах на токсичность с использованием нормальных клеток. Далее в тестах по ингибированию пролиферации злокачественных опухолевых клеток, трансплантированным белым мышам, было установлено, что через несколько дней после введения ингибитора по предлагаемому способу пролиферация злокачественных клеток останавливалась, а сама опухоль даже без дополнительного введения ингибитора значительно уменьшалась. При введении предлагаемого ингибитора подкожно, поскольку в этом случае его эффективность стабильна, он представляет собой вещество, которое оказывает стабильное пролонгирующее действие на организм. В экспериментах на животных не наблюдалось никаких побочных эффектов, и, следовательно, ингибитор предлагаемого изобретения подходит для использования в качестве эффективного карциностатического средства, которое можно будет использовать без опасений.
N Контрольная группа, г Экспериментальная группа, г
1 5,04 0,73
2 4,41 0,55
3 5,67 0,81
4 4,90 0,69
5 4,93 0,67
ΣХ 24,95 3,45
Х 4,99 0,86
Эффективность ингибирования: 86,2%
Промышленная применимость. Ингибитор пролиферации опухолевых клеток, полученный по предлагаемому способу, представляет собой низкомолекулярное производное вещество, существующее в организмах или пищевых добавках, и не оказывает вредного воздействия на пролиферацию нормальных клеток, что было доказано во всех тестах на токсичность с использованием нормальных клеток. Далее в тестах по ингибированию пролиферации злокачественных опухолевых клеток, трансплантированным белым мышам, было установлено, что через несколько дней после введения ингибитора по предлагаемому способу пролиферация злокачественных клеток останавливалась, а сама опухоль даже без дополнительного введения ингибитора значительно уменьшалась. При введении предлагаемого ингибитора подкожно, поскольку в этом случае его эффективность стабильна, он представляет собой вещество, которое оказывает стабильное пролонгирующее действие на организм. В экспериментах на животных не наблюдалось никаких побочных эффектов, и, следовательно, ингибитор предлагаемого изобретения подходит для использования в качестве эффективного карциностатического средства, которое можно будет использовать без опасений.
Клинические испытания. Метод:1d л раствора (раствора ингибитора) получили растворением 90 г олигомера нейтрализованной соли j-оксипропионовой кислоты и 10 г пироглутаминовой кислоты, содержащей нейтрализованную соль олигопептида в 10% -ном растворе декстрозы. 16 мл этого полученного раствора ингибитора смешали с 500 мл раствора глюкозы, предназначенной для капельного вливания, для использования полученного раствора эффективен метод внутривенного капельного вливания.
П р и м е р 1. Больной раком желудка. При введении вышесказанным путем препарата раз в день в течение десяти дней больному раку желудка (мужчина в возрасте 55 лет), с метастазами в лимфатические узлы и кровотечением через пять дней после введения препарата кровотечение прекратилось, а через 10 дней истощенный организм стал восстанавливаться. Рентгенографическое обследование и обследование в гастрокамере, проведенное через месяц, показало наличие улучшений, например, уменьшение раковой опухоли, разрушившей серозную мембрану и растущей, сплющивание окружной стенки опухоли, а также сглаживание основания язвы.
П р и м е р 2. Больной раком легких (бронхиальный рак). При введении препарата тем же образом раз в день в течение десяти дней раком больному (мужчина в возрасте 45 лет) жаловавшемуся на кровянистую мокроту и раздражающий сухой кашель, рентгеновское обследование которого показало наличие влажного затемнения, а при цитодиагнозе мокроты в ней были обнаружены раковые клетки, установлено, что через шесть дней после начала введения препарата прекратилось кровотечение, смягчился кашель и улучшилось общее состояние. Через два месяца отмечены заметные улучшения в общем состоянии и сокращение затемнения.
Claims (5)
1. СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ИНГИБИТОРА ПРОЛИФЕРАЦИИ ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТОК, отличающийся тем, что он предусматривает смешивание низкомолекулярного конденсационного полимера α -гидроксипропионовой кислоты, олигопептида, содержащего по крайней мере один остаток пироглутаминовой кислоты, стабилизатора, включающего сахарид или сахароспирт, и соли металла a -гидропропионовой кислоты в качестве катализатора в соотношении 10:1-4:1-3:0,5-1,0.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что низкомолекулярный конденсационный полимер a -гидроксипропионовой кислоты получают добавлением 0,7 мл 6 Н. хлористоводородной кислоты к 50 мл L-молочной кислоты и нагреванием с обратным холодильником в течение 2 ч или нагреванием в течение 100 мин при 120 160oС.
3. Способ по п.1, отличающийся тем, что низкомолекулярный конденсационный полимер a -гидроксипропионовой кислоты получают растворением 0,5 г NaHCO3 в 50 мл L-молочной кислоты с последующим добавлением толуола и нагреванием полученной смеси в течение 2 ч при 140 160oС.
4. Способ по п.1, отличающийся тем, что низкомолекулярный конденсационный полимер a -гидроксипропионовой кислоты получают добавлением 2 мл лактата натрия к 50 мл L-молочной кислоты, последующим добавлением 100 мл бензола и нагреванием смеси в течение 3 6 ч при 140oС.
5. Способ по п.1, отличающийся тем, что низкомолекулярный конденсационный полимер a -гидроксипропионовой кислоты получают добавлением 0,2г MgCl2 (или CaCl2) и 150 мл толуола к 50 мл L-молочной кислоты и нагреванием с обратным холодильником смеси в течение 4 ч.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP1332870A JP2997488B2 (ja) | 1989-12-25 | 1989-12-25 | 腫瘍細胞増殖抑制剤 |
| JP332870/89 | 1989-12-25 | ||
| PCT/JP1990/001678 WO1991009612A1 (fr) | 1989-12-25 | 1990-12-21 | Inhibiteur de croissance de cellules tumorales |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2034564C1 true RU2034564C1 (ru) | 1995-05-10 |
Family
ID=18259725
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SU915010005A RU2034564C1 (ru) | 1989-12-25 | 1991-08-23 | Способ получения ингибитора пролиферации опухолевых клеток |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US5972879A (ru) |
| EP (1) | EP0460232B1 (ru) |
| JP (1) | JP2997488B2 (ru) |
| KR (1) | KR920700671A (ru) |
| AT (1) | ATE164075T1 (ru) |
| AU (1) | AU635802B2 (ru) |
| CA (1) | CA2044621A1 (ru) |
| DE (1) | DE69032158T2 (ru) |
| DK (1) | DK0460232T3 (ru) |
| ES (1) | ES2113370T3 (ru) |
| NO (1) | NO913322D0 (ru) |
| RU (1) | RU2034564C1 (ru) |
| WO (1) | WO1991009612A1 (ru) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2006104424A1 (fr) * | 2005-03-30 | 2006-10-05 | Boris Vladimirovich Afanasiev | Procede de fabrication de facteurs de croissance de nature proteique, facteur de croissance de nature proteique et inhibiteur de proliferation des fibroblastes |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2001021612A1 (fr) | 1999-09-20 | 2001-03-29 | Amato Pharmaceutical Products, Ltd. | Procede de preparation d'oligomeres cycliques d'acide lactique |
| JP2002275256A (ja) * | 2001-03-19 | 2002-09-25 | Tendou Seiyaku Kk | 乳酸オリゴマーの製造方法 |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4211769A (en) * | 1977-08-24 | 1980-07-08 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Preparations for vaginal administration |
| EP0115473A3 (de) * | 1983-01-27 | 1987-01-21 | Ciba-Geigy Ag | Substituierte Pyrrolidinonderivate und Verfahren zu ihrer Herstellung |
| FI840260A (fi) * | 1983-01-27 | 1984-07-28 | Ciba Geigy Ag | Pyrrolidinonderivat och foerfarande foer deras framstaellning. |
| EP0127426A1 (en) * | 1983-05-23 | 1984-12-05 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Percutaneous pharmaceutical compositions for external use |
| JPS6023326A (ja) * | 1983-07-18 | 1985-02-05 | Takeda Chem Ind Ltd | ペプチド含有経口投与製剤 |
| DE3428372A1 (de) * | 1984-08-01 | 1986-02-13 | Hoechst Ag, 6230 Frankfurt | Mikrokapseln von regulatorischen peptiden mit kontrollierter freisetzung, verfahren zu ihrer herstellung und injektionszubereitungen |
| JPS6163613A (ja) * | 1984-09-04 | 1986-04-01 | Mitsui Toatsu Chem Inc | 顆粒状に調整された徐放性製剤 |
-
1989
- 1989-12-25 JP JP1332870A patent/JP2997488B2/ja not_active Expired - Fee Related
-
1990
- 1990-12-21 AT AT91900944T patent/ATE164075T1/de not_active IP Right Cessation
- 1990-12-21 DK DK91900944.9T patent/DK0460232T3/da active
- 1990-12-21 US US07/700,158 patent/US5972879A/en not_active Expired - Fee Related
- 1990-12-21 ES ES91900944T patent/ES2113370T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1990-12-21 WO PCT/JP1990/001678 patent/WO1991009612A1/ja active IP Right Grant
- 1990-12-21 CA CA002044621A patent/CA2044621A1/en not_active Abandoned
- 1990-12-21 DE DE69032158T patent/DE69032158T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1990-12-21 AU AU69127/91A patent/AU635802B2/en not_active Ceased
- 1990-12-21 EP EP91900944A patent/EP0460232B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1990-12-21 KR KR1019910700779A patent/KR920700671A/ko not_active Application Discontinuation
-
1991
- 1991-08-23 RU SU915010005A patent/RU2034564C1/ru not_active IP Right Cessation
- 1991-08-23 NO NO913322A patent/NO913322D0/no unknown
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| Pat US 4.963358, A 61K 35/12, опублик. 1990. * |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2006104424A1 (fr) * | 2005-03-30 | 2006-10-05 | Boris Vladimirovich Afanasiev | Procede de fabrication de facteurs de croissance de nature proteique, facteur de croissance de nature proteique et inhibiteur de proliferation des fibroblastes |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| AU6912791A (en) | 1991-07-24 |
| AU635802B2 (en) | 1993-04-01 |
| CA2044621A1 (en) | 1991-06-26 |
| WO1991009612A1 (fr) | 1991-07-11 |
| NO913322L (no) | 1991-08-23 |
| DE69032158D1 (de) | 1998-04-23 |
| JP2997488B2 (ja) | 2000-01-11 |
| US5972879A (en) | 1999-10-26 |
| EP0460232B1 (en) | 1998-03-18 |
| EP0460232A1 (en) | 1991-12-11 |
| DE69032158T2 (de) | 1998-08-06 |
| JPH03193731A (ja) | 1991-08-23 |
| EP0460232A4 (en) | 1993-03-17 |
| ATE164075T1 (de) | 1998-04-15 |
| ES2113370T3 (es) | 1998-05-01 |
| KR920700671A (ko) | 1992-08-10 |
| NO913322D0 (no) | 1991-08-23 |
| DK0460232T3 (da) | 1998-04-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Diamond et al. | Photodynamic therapy of malignant tumours | |
| US6652884B2 (en) | Method for the treatment of solid tumors by albumin microparticles incorporating paclitaxel | |
| CN1315479C (zh) | 橄榄苦苷在制备抑制血管生成药物中的用途 | |
| GB1583661A (en) | Tumour antidote | |
| JP2824917B2 (ja) | 抗腫瘍剤 | |
| DE2710327C3 (de) | Verwendung von Benzaldehyd | |
| Tutton | Control of epithelial cell proliferation in the small intestinal crypt | |
| RU2034564C1 (ru) | Способ получения ингибитора пролиферации опухолевых клеток | |
| RU2376985C1 (ru) | Средство для активации стволовых клеток | |
| Ackerman et al. | Localization of aminoacridine fluorescence in lung tumors of rats | |
| Yuhas et al. | Responsiveness of senescent mice to the antitumor properties of Corynebacterium parvum | |
| Ciaranfi et al. | Studies on the anti-tumour activity of aliphatic aldehydes—II: Effects on survival of yoshida ascites hepatoma-bearing rats | |
| JP2004536120A (ja) | 細胞殺傷活性を有するカルシウム塩 | |
| EP0392662B1 (en) | Use of complexes of tetrachloroplatinate with a diazo dye as antitumour agents | |
| US3803116A (en) | Compound for restoring radiation injury and process for preparation thereof | |
| Forman et al. | TUMOR IMMUNITY IN VIVO: Use of the: 125: IUdR Prelabeling Technique to Monitor Cell Death in Immune Animals | |
| Purdy | The propagation of the Rous sarcoma No. 1 in ducklings | |
| JPH0971528A (ja) | 抗腫瘍剤 | |
| CN114901643A (zh) | 新化合物l-赖氨酸-9-氧代吖啶基-10-乙酸盐 | |
| RU2136276C1 (ru) | Средство, повышающее эффективность лечения туберкулеза | |
| RU2320334C1 (ru) | Средство для ингибирования роста опухоли и способ ингибирования роста опухоли в эксперименте | |
| Pollia | Observations on rats with a transplantable fibrosarcoma treated with cevitamic (ascorbic) acid | |
| Manwaring | ANTICARCINOGENIC SERUM | |
| Saleh et al. | Effect of cysteine on the hepatic toxicity and antischistosomal activity of antimonyl potassium tartrate | |
| Bates | In vivo staining of induced and transplanted brain tumors. |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM4A | The patent is invalid due to non-payment of fees |
Effective date: 20071222 |
|
| REG | Reference to a code of a succession state |
Ref country code: RU Ref legal event code: MM4A Effective date: 20071222 |