JPH0971528A - 抗腫瘍剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【課題】 著明な抗腫瘍作用を示しつつも、副作用を起
こし難い、安全な抗腫瘍剤を提供することを課題とす
る。 【解決手段】 有効成分として３−［４−ヒドロキシ−
３，５−ビス（３−メチル−２−ブテニル）フェニル］
−２−プロペン酸又はその生理学的に許容される塩を含
んでなる抗腫瘍剤により解決する。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】この発明は抗腫瘍剤、とりわ
け、有効成分として３−［４−ヒドロキシ−３，５−ビ
ス（３−メチル−２−ブテニル）フェニル］−２−プロ
ペン酸又はその生理学的に許容される塩を含んでなる抗
腫瘍剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】悪性腫瘍を治療する現在の医療現場にお
いては、悪性腫瘍の早期発見と外科的切除に主眼が置か
れている。悪性腫瘍が外科的に切除し難い部位に発生し
たり、原発部位以外の部位への転移や浸潤が考えられる
場合には、患部に放射線を照射したり、抗腫瘍剤を定期
的に投与する治療法が行なわれる。

【０００３】後者の治療法の場合、現在頻用されている
抗腫瘍剤は、（ｉ）免疫賦活作用を利用するタイプ、
（ｉｉ）代謝拮抗作用を利用するタイプ及び（ｉｉｉ）
腫瘍細胞を直接殺傷する作用を利用するタイプに大別す
ることができる。このうち、（ｉｉ）及び（ｉｉｉ）の
タイプ、とりわけ、人工的に創成したものは抗腫瘍作用
が強い半面、副作用が強く、長期連用の難しいことがあ
る。（ｉ）のタイプは副作用は弱いものの、抗腫瘍作用
が充分でないものが多く、その多くは他の薬剤と併用す
るか、末期の悪性腫瘍患者で、他に有効な治療方法がな
い場合に適用されることが多い。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】斯かる状況に鑑み、こ
の発明の目的は著明な抗腫瘍作用を示しつつも、副作用
を起こし難い、安全な抗腫瘍剤を提供することにある。

【０００５】

【課題を解決するための手段】斯かる課題を解決すべ
く、本発明者が種々の天然抽出物、とりわけ、プロポリ
ス抽出物中の抗腫瘍性物質について鋭意研究したとこ
ろ、カルボン酸の一種である３−［４−ヒドロキシ−
３，５−ビス（３−メチル−２−ブテニル）フェニル］
−２−プロペン酸及びその塩に著明な抗腫瘍作用のある
ことが判明した。

【０００６】プロポリス抽出物は、抗菌剤、抗炎症剤、
抗腫瘍剤などとして古くから民間伝承薬として用いられ
ている。最近になってプロポリス抽出物の生物作用に近
代科学のメスが入るようになり、例えば、松田忍『フー
ズ・アンド・フード・イングレディエンツ・ジャーナル
・オブ・ジャパン』、１９９４年、第１６０号、第６４
乃至７３頁には、プロポリス抽出物に含まれるケルセチ
ン、カフェイン酸フェネチルエステル及びクロレダン系
ジテルペンに分類される新規化合物がヒトの悪性腫瘍に
対して抗腫瘍作用を発揮したことが記載されている。

【０００７】本発明者がプロポリス抽出物中に存在と抗
腫瘍作用を確認した３−［４−ヒドロキシ−３，５−ビ
ス（３−メチル−２−ブテニル）フェニル］−２−プロ
ペン酸は自体公知の化合物であり、例えば、本特許出願
人は特開平６−２５６１７７号公報において同化合物を
プロポリス抽出物から単離し得ることを開示した。しか
しながら、本発明者が知るかぎりにおいて、同化合物の
抗腫瘍作用を教示又は示唆する刊行物等は存在せず、そ
れを有効成分として含んでなる抗腫瘍剤はこの発明をも
って嚆矢とするものである。

【０００８】

【作用】有効成分として３−［４−ヒドロキシ−３，５
−ビス（３−メチル−２−ブテニル）フェニル］−２−
プロペン酸又はその生理学的に許容される塩を含んでな
るこの発明の抗腫瘍剤は、ヒトに発生する種々の悪性腫
瘍に対して著明な抗腫瘍作用を発揮する。実験動物を用
いる急性毒性試験の結果に依ると、それら化合物は毒性
が極めて低い。

【０００９】以下、この発明の抗腫瘍剤について詳細に
説明すると、この発明の抗腫瘍剤で用いる３−［４−ヒ
ドロキシ−３，５−ビス（３−メチル−２−ブテニル）
フェニル］−２−プロペン酸及びその塩は下記の化１に
示す構造を有している。化１において、Ｘは生理学的に
許容される陽イオンを表わし、斯かる陽イオンとして
は、例えば、水素イオン、ナトリウムイオン、カリウム
イオン、カルシウムイオン、マグネシウムイオン、アン
モニウムイオンなどが挙げられる。

【００１０】

【化１】

【００１１】この発明で用いる３−［４−ヒドロキシ−
３，５−ビス（３−メチル−２−ブテニル）フェニル］
−２−プロペン酸及びその塩は天然の給源から採取して
も化学合成してもよく、所期の効果を発揮するかぎり、
出所・由来は問わない。天然の給源としてはプロポリス
や、例えば、カワラヨモギなどのキク科植物の葉茎が挙
げられ、例えば、特開平６−２５６１７７号公報、シー
・ツェロら『フィトケミストリー』、第２５巻、第１２
号、第２，８４１乃至２，８５５頁（１９８６年）及び
アイ・オクノら『ケミカル・ファーマシューティカル・
ブレティン』、第３６巻、第２号、第７６９乃至７７５
頁（１９８８年）には、それら給源から３−［４−ヒド
ロキシ−３，５−ビス（３−メチル−２−ブテニル）フ
ェニル］−２−プロペン酸を単離する方法が詳述されて
いる。化学合成する場合には、例えば、特開昭６０−１
６３８４１号公報に開示された方法が有利に適用でき
る。

【００１２】天然の給源から単離する方法について概説
すれば、まず、原料のプロポリスやキク科植物の葉茎を
破砕し、水若しくはメタノール、エタノール、アセト
ン、ジエチルエーテル、酢酸エチルなどの有機溶媒又は
それらの混液により抽出し、得られた抽出物を濃縮し、
精製する。抽出物の濃縮・精製には類似の化合物を濃縮
・精製するための通常の方法を適用すればよく、斯かる
方法としては、例えば、塩析、透析、濾過、分液、分別
沈澱、結晶化、ゲル濾過クロマトグラフィー、イオン交
換クロマトグラフィー、ガスクロマトグラフィー、高速
液体クロマトグラフィーなどが挙げられ、これらは必要
に応じて適宜組合せて適用される。なお、３−［４−ヒ
ドロキシ−３，５−ビス（３−メチル−２−ブテニル）
フェニル］−２−プロペン酸の生理学的に許容される塩
を得るには、３−［４−ヒドロキシ−３，５−ビス（３
−メチル−２−ブテニル）フェニル］−２−プロペン酸
に、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸
化カルシウム、水酸化マグネシウム、水酸化アンモニウ
ムなどの水酸化物を作用させればよい。斯かる塩は３−
［４−ヒドロキシ−３，５−ビス（３−メチル−２−ブ
テニル）フェニル］−２−プロペン酸に比べて水溶性良
好であり、製剤化や高用量投与の際の取扱いに優れてい
る。

【００１３】この発明でいう抗腫瘍剤とは、３−［４−
ヒドロキシ−３，５−ビス（３−メチル−２−ブテニ
ル）フェニル］−２−プロペン酸又はその塩単独の形態
はもとより、これらと製剤化に際して通常用いられる、
例えば、担体、賦形剤、希釈剤、安定剤、さらには、必
要に応じて、インターフェロン−α、インターフェロン
−β、インターフェロン−γ、インターロイキン２、イ
ンターロイキン１２、ＴＮＦ−α、ＴＮＦ−β、シクロ
フォスファミド、アドリアマイシン、α−ジフルオロメ
チルオルニチン、メルファラン、５−フルオロウラシ
ル、ドキソルビシン、クロラムブシル、ビンブラスチ
ン、１，３−ビス（２−クロロエチル）−１−ニトロソ
ウレア、シスプラチン、レバミゾール、Ｄ−ペニシラ
ン、金製剤、ＢＣＧ、クレスチン、ピシバニール（ＯＫ
−４３２）、丸山ワクチン及びレンチナンを始めとする
他の生理活性物質の１種又は２種以上との組成物として
の形態をも包含する。

【００１４】さらに、この発明の抗腫瘍剤は投薬単位形
態の薬剤としての形態であってもよく、その投薬単位形
態の薬剤とは、この発明の抗腫瘍剤における有効成分で
ある３−［４−ヒドロキシ−３，５−ビス（３−メチル
−２−ブテニル）フェニル］−２−プロペン酸又はその
塩の１回当りの用量又はその整数倍（４倍まで）若しく
はその約数（１／４０まで）に相当する量を含有し、投
与に適した物理的に分離した一体の剤形にある形態を意
味する。斯かる投薬単位形態の薬剤とは、例えば、注射
剤、液剤、散剤、顆粒剤、錠剤、カプセル剤、舌下剤、
点眼剤、点鼻剤、坐剤などが挙げられる。剤形にも依る
が、この発明の抗腫瘍剤は、通常、３−［４−ヒドロキ
シ−３，５−ビス（３−メチル−２−ブテニル）フェニ
ル］−２−プロペン酸又はその塩を０．０１重量％以上
含有する。

【００１５】この発明の抗腫瘍剤の使用方法について説
明すると、この発明の抗腫瘍剤は経口的に投与しても非
経口的に投与しても、著明な抗腫瘍作用を発揮する。悪
性腫瘍の種類と症状にも依るが、具体的には、患者の症
状や投与後の経過を観察しながら、成人当たり約１μｇ
乃至１０ｍｇ、望ましくは、約１０μｇ乃至１ｍｇを１
乃至４回／日又は１乃至５回／週の用量で経口投与する
か、皮内、皮下、筋肉内若しくは静脈内又は経皮的に非
経口投与すればよい。

【００１６】この発明の抗腫瘍剤は、ヒトに発生する各
種の悪性腫瘍に対して著明な抗腫瘍作用を発揮する。個
々の悪性腫瘍としては、例えば、結腸癌、直腸癌、胃
癌、甲状腺癌、舌癌、膀胱癌、絨毛癌、肝癌、子宮癌、
前立腺癌、喉頭癌、肺癌、乳癌、悪性黒色腫、カポジ肉
腫、脳腫瘍、神経芽細胞腫、卵巣腫瘍、睾丸腫瘍、骨肉
腫、膵臓癌、腎癌、副腎腫、血管内皮腫などの固形腫瘍
及び白血病、リンパ腫などの血球系悪性腫瘍が挙げられ
る。

【００１７】次の実験例では、齧歯類を用いる動物実験
に基づきこの発明の抗腫瘍剤の有効性と毒性を説明する
が、齧歯類における後記悪性腫瘍がヒトにおける悪性腫
瘍の信頼できるモデルであることはすでに知られてい
る。

【００１８】

【実験例１】 〈３−［４−ヒドロキシ−３，５−ビス（３−メチル−
２−ブテニル）フェニル］−２−プロペン酸及びその塩
の調製〉

【００１９】

【実験例１−１】 〈３−［４−ヒドロキシ−３，５−ビス（３−メチル−
２−ブテニル）フェニル］−２−プロペン酸の調製〉特
開平６−２５６１７７号公報に記載された方法にしたが
って、プラジル産プロポリスから３−［４−ヒドロキシ
−３，５−ビス（３−メチル−２−ブテニル）フェニ
ル］−２−プロペン酸（以下、「化合物１」と言う。）
を調製した。

【００２０】すなわち、プラジル産プロポリス塊１５
３．３重量部を破砕し、酢酸エチルを加えて抽出後、メ
タノールを加え、生じた沈澱部を遠心分離により除去す
る一方、エバポレータにより上清部を濃縮し、エタノー
ルを加えた。新たに生じた沈澱部を遠心分離により除去
し、残る上清部を上記と同様に濃縮後、メタノールを加
えて抽出液６３．９重量部を得た。

【００２１】この抽出液を固形物換算で３５重量部と
り、片山化学工業製『シリカゲル６０Ｇ６５０』のカラ
ムに負荷し、濃度勾配下、ヘキサンと酢酸エチルの混液
を通液した。そして、ヘキサンと酢酸エチルの濃度比が
５９：４１乃至５７：４３の範囲で溶出した画分を採取
し、これをファルマシア製『セファデックスＬＨ−２
０』のカラムに負荷し、メタノールをＳＶ０．１６で通
液し、ゲル容量の１．１倍付近で溶出した画分を採取
し、濃縮したところ、結晶が析出した。この結晶をヘキ
サンで洗浄後、乾燥したところ、結晶性固状物が０．２
８重量部得られた。

【００２２】この結晶性固状物の一部を採り、常法にし
たがって元素分析法、質量分析法、紫外線分光法、赤外
線分光法及び核磁気共鳴分光法により分析し、分析結果
をアイ・オクノら『ケミカル・ファーマシューティカル
・ブレティン』、第３６巻、第２号、第７６９乃至７７
５頁（１９８８年）に報告されている３−［４−ヒドロ
キシ−３，５−ビス（３−メチル−２−ブテニル）フェ
ニル］−２−プロペン酸の分析結果と比較したところ、
いずれも良好な一致を示した。斯くして、上記操作によ
りプロポリスから得られた結晶状の化合物は３−［４−
ヒドロキシ−３，５−ビス（３−メチル−２−ブテニ
ル）フェニル］−２−プロペン酸と同定された。

【００２３】

【実験例１−２】 〈３−［４−ヒドロキシ−３，５−ビス（３−メチル−
２−ブテニル）フェニル］−２−プロペン酸塩の調製〉
実験例１−１の方法で調製した化合物１を約１０重量％
になるようにエタノールに溶解し、等モルの水酸化ナト
リウム、水酸化カルシウム、水酸化マグネシウム又は水
酸化カリウムを加えた後、遠心濃縮機により濃縮・乾燥
して固状物を得た。実験例１−１の方法により調製した
化合物１及び本例において調製したそれらナトリウム塩
（以下、「化合物２」と言う。）、カルシウム塩（以
下、「化合物３」と言う。）、マグネシウム塩（以下、
「化合物４」と言う。）及びカリウム塩（以下、「化合
物５」と言う。）を適宜濃度の水溶液とし、常法により
滅菌濾過した後、次に述べる動物実験に供した。

【００２４】

【実験例２】 〈担癌マウスにおける抗腫瘍作用〉８週齢の雄ＢＡＬＢ
／ｃマウスの腹腔内にＭｅｔｈ Ａ腹水腫瘍細胞を約１
×１０⁶ 個／匹注射移植した。翌日よりマウスを１群１
０匹とし、毎週２回、化合物１乃至５のいずれかを０．
０００５μｇ、０．００５μｇ、０．０５μｇ又は０．
５μｇ含む生理食塩水０．２ｍｌを腹腔内に注射投与
し、４０日間観察を続けた。対照群には、同じ投与スケ
ジュールで薬剤無含有の生理食塩水を０．２ｍｌ／回腹
腔内注射投与した。

【００２５】上記の条件における投与群の平均生存日数
（Ｔ）と対照群の平均生存日数（Ｃ）に基づき、下記の
数１により延命率（Ｔ／Ｃ ％）を算出した。結果を表
１に示す。

【００２６】

【数１】

【００２７】

【表１】

【００２８】表１の結果から明らかなように、化合物１
乃至５はいずれも０．０５μｇ／匹／回以上の用量で同
系腫瘍担癌マウスに対して著明な延命効果を発揮した。

【００２９】

【実験例３】 〈腫瘍増殖抑制による抗腫瘍作用〉実験例２の結果よ
り、ヌードマウスにおける化合物１乃至５の最少有効用
量を０．０５μｇ／匹／回前後と推定し、ヒトの悪性腫
瘍を移植したヌードマウスに同用量の化合物１乃至５を
投与したときの抗腫瘍作用について試験した。

【００３０】すなわち、８週齢の雄ＢＡＬＢ／ｃヌード
マウスの背部皮下に表２に示すヒトの悪性腫瘍細胞を５
×１０⁷ 個／匹注射移植した。その後、着生の確認され
た個体を１群７匹とし、週２回、化合物２を０．０５μ
ｇ含む生理食塩水０．２ｍｌを背部皮下に注射投与し、
さらに２５日間観察を続けた。対照群には、同じ投与ス
ケジュールで薬剤無含有の生理食塩水を０．２ｍｌ／回
投与した。

【００３１】移植から２７日目に、腫瘍湿重量を『人癌
とヌードマウス』、１９８２年、医歯薬出版発行、第３
２１乃至３２３頁に記載されている方法に準じて測定す
るとともに、３５日目の生存率（％）を計算した。結果
を表２に示す。

【００３２】

【表２】

【００３３】表２の結果から明らかなように、化合物２
は比較的低用量を投与したにも拘らず、ヒトの肺癌、胃
癌、肝癌、子宮癌、大腸癌、結腸癌、鼻咽腔癌、喉頭
癌、悪性黒色腫、白血病、リンパ腫などのヒトの悪性腫
瘍に対して著明な抗腫瘍作用を発揮し、移植後３５日目
におけるマウスの生存率も高かった。なお、データは示
していないものの、化合物１及び化合物３乃至５につい
て同様の試験をしたところ、ほぼ同様の結果が得られ
た。

【００３４】

【実験例４】 〈急性毒性試験〉体重１０乃至２０ｇのｄｄｙマウス１
０匹を１群とし、その腹腔内に実験例１−１及び１−２
の方法により得た適宜濃度の化合物１乃至５と５重量％
アラビアガムを含む生理食塩水を注射投与するか、胃ゾ
ンデにより経口投与し、その後７日間観察して死亡数を
調べ、Ｖａｎ ｄｅｒ Ｖａｅｒｄｅｎの面積法により
ＬＤ５０値を求めた。

【００３５】その結果、化合物１乃至５のＬＤ５０値は
いずれの投与経路によっても２００ｍｇ／ｋｇ以上と著
しく高く、これは、３−［４−ヒドロキシ−３，５−ビ
ス（３−メチル−２−ブテニル）フェニル］−２−プロ
ペン酸及びその塩が、通常、成人において数μｇ／回以
上の用量で有効であることを考え併せれば、この発明の
抗腫瘍剤が極めて安全性の高いことを裏付けていると言
える。

【００３６】以下、実施例によりこの発明を具体的に説
明する。

【００３７】

【実施例１】 〈錠剤〉常法により、１錠当たり実験例１−１及び１−
２の方法により得た化合物１乃至５のいずれかを０．１
ｍｇ、乳糖７９．９ｍｇ、コーンスターチ６２．５ｍｇ
及び蔗糖脂肪酸エステル７．５ｍｇ含有する５種類の錠
剤を調製した。なお、錠剤が胃溶性剤の場合には、５重
量％のヒドロキシプロピルメチルセルロースでコーティ
ングした後、糖衣を施し、腸溶性剤の場合には、１０重
量％のヒドロキシプロピルメチルセルロースでコーティ
ングした後、糖衣を施した。

【００３８】本例の錠剤は、いずれも胃癌、肺癌、肝
癌、子宮癌、乳癌、大腸癌、結腸癌及び悪性黒色腫を始
めとするヒトの悪性腫瘍の治療剤として有用である。

【００３９】

【実施例２】 〈カプセル剤〉常法により、１錠当たり実験例１−１及
び１−２の方法により得た化合物１乃至５のいずれかを
０．２ｍｇ、乳糖１４６．８ｍｇ及び蔗糖脂肪酸エステ
ル３．０ｍｇ含有する５種類のカプセル剤を調製した。

【００４０】本例のカプセル剤は、いずれも胃癌、肺
癌、肝癌、子宮癌、乳癌、大腸癌、結腸癌及び悪性黒色
腫を始めとするヒトの悪性腫瘍の治療剤として有用であ
る。

【００４１】

【実施例３】 〈注射剤〉常法により、重炭酸ナトリウム５ｇに実験例
１−１及び１−２の方法により得た化合物１乃至５のい
ずれかを５ｍｇ混和し、滅菌したガラス容器に０．１ｇ
ずつ充填して５種類の注射剤を調製した。

【００４２】本例の注射剤は、いずれも用時溶解型の注
射剤であり、胃癌、肺癌、肝癌、子宮癌、乳癌、大腸
癌、結腸癌及び悪性黒色腫を始めとするヒトの悪性腫瘍
の治療剤として有用である。

【００４３】

【実施例４】 〈外用剤〉常法により、実験例１−１及び１−２の方法
により得た化合物１乃至５のいずれかを有効成分として
少量の流動パラフィンに研和した後、ワセリンを加えて
有効成分を５ｍｇ／ｇ含有する５種類の外用剤を調製し
た。

【００４４】本例の外用剤は、いずれも皮膚癌、乳癌及
びリンパ腫を始めとするヒトの悪性腫瘍の治療剤として
有用である。

【００４５】

【実施例５】 〈散剤〉常法により、１回用量当たり実験例１−１及び
１−２の方法により得た化合物１乃至５のいずれかを
０．３ｍｇ及び重炭酸ナトリウム４９９．７ｍｇを含有
する５種類の散剤を調製した。

【００４６】本例の散剤は、いずれも胃癌、肺癌、肝臓
癌、子宮癌、乳癌、大腸癌、結腸癌及び悪性黒色腫を始
めとするヒトの悪性腫瘍の治療剤として有用である。

【００４７】

【実施例６】 〈坐剤〉常法により、１回用量当たり実験例１−１及び
１−２の方法により得た化合物１乃至５のいずれかを
０．３ｍｇ、ポリエチレングリコール＃１０００を１，
２８０ｍｇ、ポリエチレングリコール＃４０００を３１
９．７ｍｇ含有する５種類の坐剤を調製した。

【００４８】本例の坐剤は、いずれも大腸癌及び結腸癌
を始めとするヒトの悪性腫瘍の治療剤として有用であ
る。

【００４９】

【発明の効果】以上説明のごとく、この発明は３−［４
−ヒドロキシ−３，５−ビス（３−メチル−２−ブテニ
ル）フェニル］−２−プロペン酸及びその生理学的に許
容される陽イオンとの塩がヒトの悪性腫瘍に対して著明
な抗腫瘍作用を発揮するという独自の知見に基づくもの
である。これら化合物は自然界の生物から単離された物
質であり、人工的に創成されたものと比べて安全性が高
い。したがって、有効成分としてこれら化合物を含んで
なるこの発明の抗腫瘍剤は重篤な副作用を惹起すること
なく、ヒトの悪性腫瘍の治療に安全に用いることができ
る実益がある。

【００５０】斯くも顕著な作用効果を発揮するこの発明
は、斯界に貢献すること誠に多大な、意義のある発明で
あるといえる。

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 有効成分として３−［４−ヒドロキシ−
   ３，５−ビス（３−メチル−２−ブテニル）フェニル］
   −２−プロペン酸又はその生理学的に許容される塩を含
   んでなる抗腫瘍剤。
2. 【請求項２】 有効成分として３−［４−ヒドロキシ−
   ３，５−ビス（３−メチル−２−ブテニル）フェニル］
   −２−プロペン酸又はその生理学的に許容される塩を
   ０．０１重量％以上含んでなる請求項１に記載の抗腫瘍
   剤。
3. 【請求項３】 ３−［４−ヒドロキシ−３，５−ビス
   （３−メチル−２−ブテニル）フェニル］−２−プロペ
   ン酸又はその生理学的に許容される塩がプロポリスから
   採取されたものである請求項１又は２に記載の抗腫瘍
   剤。
4. 【請求項４】 生理学的に許容される塩がナトリウム
   塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩又はア
   ンモニウム塩である請求項１、２又は３に記載の抗腫瘍
   剤。