RU2022133051A - Процессы культивирования в системе посевных ферментеров и способы их применения - Google Patents
Процессы культивирования в системе посевных ферментеров и способы их применения Download PDFInfo
- Publication number
- RU2022133051A RU2022133051A RU2022133051A RU2022133051A RU2022133051A RU 2022133051 A RU2022133051 A RU 2022133051A RU 2022133051 A RU2022133051 A RU 2022133051A RU 2022133051 A RU2022133051 A RU 2022133051A RU 2022133051 A RU2022133051 A RU 2022133051A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- cells
- culture
- cell
- cell culture
- placing
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims 31
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims 53
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 claims 35
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 claims 18
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 claims 16
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 claims 14
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims 9
- 230000005526 G1 to G0 transition Effects 0.000 claims 6
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 claims 6
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 claims 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims 6
- 238000010257 thawing Methods 0.000 claims 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims 2
- 238000010924 continuous production Methods 0.000 claims 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims 1
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 claims 1
Claims (64)
1. Способ культивирования в системе посевных ферментеров, включающий:
(a) помещение некоторого количества клеток млекопитающих в первую культуральную среду, содержащуюся в сосуде, с получением первой культуры клеток;
(b) периодическое культивирование первой культуры клеток до диапазона плотности клеток от приблизительно 1,0×106 клеток/мл до приблизительно 5,0×106 клеток/мл;
(c) помещение некоторого объема первой культуры клеток из стадии (b) во вторую культуральную среду, содержащуюся в перфузионном биореакторе, с получением второй культуры клеток при исходной плотности клеток в диапазоне от приблизительно 0,25×106 клеток/мл до приблизительно 0,5×106 клеток/мл;
(d) перфузионное культивирование второй культуры клеток до диапазона плотности клеток от приблизительно 5×106 до приблизительно 120×106 клеток/мл;
(e) помещение некоторого объема второй культуры клеток из стадии (d) в третью культуральную среду, содержащуюся в производственном биореакторе, с получением культуры клеток-продуцентов при исходной плотности клеток в диапазоне от приблизительно 0,25×106 клеток/мл до приблизительно 8×106 клеток/мл; и
(f) перфузионное культивирование культуры клеток-продуцентов в условиях, которые позволяют рекомбинантным клеткам млекопитающих секретировать рекомбинантный белок.
2. Способ по п. 1, где помещение некоторого количества клеток млекопитающих на стадии (a) с получением первой культуры клеток включает:
размораживание замороженного клеточного банка и
помещение некоторого объема размороженного клеточного банка в первую культуральную среду.
3. Способ по п. 1, где помещение некоторого количества клеток млекопитающих на стадии (a) с получением первой культуры клеток включает помещение некоторого объема третьей культуры клеток, содержащей некоторое количество клеток млекопитающих, в первую культуральную среду.
4. Способ по п. 3, дополнительно включающий:
(1) помещение некоторого количества клеток млекопитающих в четвертую культуральную среду, содержащуюся в сосуде, с получением третьей культуры клеток; и
(2) периодическое культивирование третьей культуры клеток из стадии (1) до диапазона плотности клеток от приблизительно 1,0×106 клеток/мл до приблизительно 5,0×106 клеток/мл,
где некоторый объем третьей культуры клеток из стадии (2) помещают в первую культуральную среду на стадии (a).
5. Способ по п. 4, где помещение некоторого количества клеток млекопитающих на стадии (1) включает:
размораживание замороженного клеточного банка и
помещение некоторого объема размороженного клеточного банка в четвертую культуральную среду.
6. Способ по п. 1, где первая культура клеток на стадии (a) характеризуется диапазоном объема от приблизительно 1,0 л до приблизительно 50 л.
7. Способ по п. 1, где вторая культура клеток на стадии (с) характеризуется диапазоном объема от приблизительно 5 л до приблизительно 600 л.
8. Способ по п. 1, где культура клеток-продуцентов на стадии (e) характеризуется диапазоном объема от приблизительно 50 л до приблизительно 20000 л.
9. Способ по п. 1, где сосуд на стадии (a) характеризуется диапазоном внутреннего объема от приблизительно 1,5 л до приблизительно 100 л.
10. Способ по п. 1, где перфузионный биореактор на стадии (c) характеризуется диапазоном внутреннего объема от приблизительно 7,5 л до приблизительно 1000 л.
11. Способ по п. 1, где производственный биореактор на стадии (e) характеризуется диапазоном внутреннего объема от приблизительно 150 л до приблизительно 25000 л.
12. Способ по п. 1, где перфузионное культивирование на стадии (c) осуществляют с применением перфузионного биореактора, оснащенного устройством для фильтрации в переменном тангенциальном потоке.
13. Способ по п. 1, где:
исходная плотность клеток на стадии (e) находится в диапазоне от приблизительно 2,0×106 клеток/мл до приблизительно 8×106 клеток/мл; и/или
исходная плотность клеток на стадии (e) составляет по меньшей мере 10% от плотности клеток-продуцентов на стационарной фазе.
14. Способ по п. 1, где дополнительное перфузионное культивирование культуры клеток-продуцентов на стадии (e) приводит к получению культуры клеток-продуцентов, достигающей плотности клеток-продуцентов на стационарной фазе за период от приблизительно 1 дня до приблизительно 10 дней.
15. Способ по п.14, где дополнительное перфузионное культивирование культуры клеток-продуцентов на стадии (e) приводит к получению культуры клеток-продуцентов, достигающей плотности клеток-продуцентов на стационарной фазе за приблизительно 2 дней до приблизительно 5 дней.
16. Способ получения рекомбинантного белка, включающий:
(a) помещение некоторого количества рекомбинантных клеток млекопитающих в первую культуральную среду, содержащуюся в сосуде, с получением первой культуры клеток;
(b) периодическое культивирование первой культуры клеток до диапазона плотности клеток от приблизительно 1,0×106 клеток/мл до приблизительно 5,0×106 клеток/мл;
(c) помещение некоторого объема первой культуральной среды с клетками из стадии (b) во вторую культуральную среду, содержащуюся в перфузионном биореакторе, с получением второй культуры клеток при исходной плотности клеток в диапазоне от приблизительно 0,25×106 клеток/мл до приблизительно 0,5×106 клеток/мл;
(d) перфузионное культивирование второй культуры клеток до диапазона плотности клеток от приблизительно 50×106 клеток/мл до приблизительно 120×106 клеток/мл;
(e) помещение некоторого объема второй культуры клеток из стадии (d) в третью культуральную среду, содержащуюся в производственном биореакторе, с получением культуры клеток-продуцентов при исходной плотности клеток в диапазоне от приблизительно 5×106 клеток/мл до приблизительно 10×106 клеток/мл;
(f) перфузионное культивирование культуры клеток-продуцентов в условиях, которые позволяют рекомбинантным клеткам млекопитающих секретировать рекомбинантный белок; и
(g) сбор рекомбинантного белка из культуры клеток-продуцентов.
17. Способ по п. 16, где помещение некоторого количества рекомбинантных клеток млекопитающих на стадии (a) с получением первой культуры клеток включает:
размораживание замороженного клеточного банка и
помещение некоторого объема размороженного клеточного банка в первую культуральную среду.
18. Способ по п.16, где помещение некоторого количества рекомбинантных клеток млекопитающих на стадии (a) с получением первой культуры клеток включает помещение некоторого объема третьей культуры клеток, содержащей некоторое количество рекомбинантных клеток млекопитающих, в первую культуральную среду.
19. Способ по п.18, дополнительно включающий:
(1) помещение некоторого количества рекомбинантных клеток млекопитающих в четвертую культуральную среду, содержащуюся в сосуде, с получением третьей культуры клеток; и
(2) периодическое культивирование третьей культуры клеток на стадии (1) до диапазона плотности клеток от приблизительно 1,0×106 клеток/мл до приблизительно 5,0×106 клеток/мл.
20. Способ по п.19, где помещение некоторого количества рекомбинантных клеток млекопитающих на стадии (1) включает:
размораживание замороженного клеточного банка и
помещение некоторого объема размороженного клеточного банка в четвертую культуральную среду.
21. Способ по п.16, где:
первая культура клеток на стадии (a) характеризуется диапазоном объема от приблизительно 1,0 л до приблизительно 50 л;
вторая культура клеток на стадии (с) характеризуется диапазоном объема от приблизительно 5 л до приблизительно 600 л; и/или
культура клеток-продуцентов на стадии (e) характеризуется диапазоном объема от приблизительно 50 л до приблизительно 20000 л.
22. Способ по п.16, где:
сосуд на стадии (a) характеризуется диапазоном внутреннего объема от приблизительно 1,5 л до приблизительно 100 л;
перфузионный биореактор на стадии (c) характеризуется диапазоном внутреннего объема от приблизительно 7,5 л до приблизительно 1000 л; и/или
производственный биореактор на стадии (e) характеризуется диапазоном внутреннего объема от приблизительно 150 л до приблизительно 25000 л.
23. Способ по п. 16, где перфузионное культивирование на стадии (c) осуществляют с применением перфузионного биореактора, оснащенного устройством для фильтрации в переменном тангенциальном потоке.
24. Способ по п.16, где: исходная плотность клеток на стадии (e) составляет по меньшей мере 10% от плотности клеток-продуцентов на стационарной фазе.
25. Способ по п.16, где перфузионное культивирование на стадии (f) приводит к получению культуры клеток-продуцентов, достигающей плотности клеток-продуцентов на стационарной фазе за период от приблизительно 1 дня до приблизительно 10 дней.
26. Способ по п.16, где сбор на стадии (g) включает удаление культуральной среды из производственного биореактора.
27. Способ по п. 26, дополнительно включающий выделение рекомбинантного белка из удаленной культуральной среды.
28. Способ по п. 27, где выделение осуществляют с применением интегрированного и непрерывного процесса.
29. Способ по п. 28, дополнительно включающий составление выделенного рекомбинантного белка в фармацевтическое средство.
30. Способ по п. 25, где перфузионное культивирование на стадии (f) приводит к получению культуры клеток-продуцентов, достигающей плотности клеток-продуцентов на стационарной фазе за от приблизительно дней до приблизительно 5 дней.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US62/009,553 | 2014-06-09 |
Related Parent Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2019119708A Division RU2786997C2 (ru) | 2014-06-09 | 2015-06-08 | Процессы культивирования в системе посевных ферментеров и способы их применения |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2022133051A true RU2022133051A (ru) | 2024-06-17 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2016151316A (ru) | Процессы культивирования в системе посевных ферментеров и способы их применения | |
| CN103205396B (zh) | 一种hek-293t细胞的悬浮驯化和无血清驯化方法 | |
| RU2020131199A (ru) | Способ тестирования производственного процесса получения рекомбинантного белка | |
| CN103667187A (zh) | 一种人脂肪干细胞的分离培养方法和干细胞库的构建方法 | |
| CN102268405A (zh) | 自体nk细胞体外活化扩增培养的方法及其专用培养基 | |
| CN105420179A (zh) | 一种从脐带和胎盘羊膜组织同时提取上皮细胞和间充质干细胞的方法 | |
| CN105803010A (zh) | 一种基于异养微藻油脂积累的方法 | |
| CN202482320U (zh) | 一种细胞滤器 | |
| CN102690781B (zh) | 一种灌流式细胞培养的培养基更换方法 | |
| RU2022133051A (ru) | Процессы культивирования в системе посевных ферментеров и способы их применения | |
| CN202626198U (zh) | 一种易于细胞脱壁的高通量细胞培养器 | |
| CN111575229B (zh) | 一种胎盘底蜕膜干细胞的分离方法 | |
| CN103849570A (zh) | 一种利用悬浮载体快速吸附捕集的微藻收获方法 | |
| CN111139220A (zh) | 脐带间充质干细胞的三维培养方法 | |
| CN104293734A (zh) | 一种人γδT细胞的制备方法 | |
| CN109161526A (zh) | 一种绒毛膜间充质干细胞复苏培养基 | |
| CN104419676A (zh) | hTERT基因重组构建唐氏综合征细胞模型及其细胞库 | |
| CN107372463A (zh) | 杂交瘤细胞冻存保种的新方法 | |
| CN202543220U (zh) | 一种高通量细胞培养器 | |
| CN110218748B (zh) | 一种利用微藻低成本生产油脂的方法 | |
| CN201762336U (zh) | 便于乳腺腺泡体模型体外构建的试剂盒 | |
| CN104862265A (zh) | 植物细胞截留装置和截留方法 | |
| CN104419684A (zh) | 转染sv40lt基因构建18-三体综合征细胞模型及其细胞库 | |
| CN104419682A (zh) | 重组SV40LT和hTERT基因构建21-三体综合征细胞模型及其细胞库 | |
| CN202576400U (zh) | 一种关于药品生产的恒化器系统 |