RU202181U1 - Устройство для иммунохроматографической экспрессной лабораторной и внелабораторной одновременной индивидуальной детекции токсичных контаминантов в воде - Google Patents
Устройство для иммунохроматографической экспрессной лабораторной и внелабораторной одновременной индивидуальной детекции токсичных контаминантов в воде Download PDFInfo
- Publication number
- RU202181U1 RU202181U1 RU2020130162U RU2020130162U RU202181U1 RU 202181 U1 RU202181 U1 RU 202181U1 RU 2020130162 U RU2020130162 U RU 2020130162U RU 2020130162 U RU2020130162 U RU 2020130162U RU 202181 U1 RU202181 U1 RU 202181U1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- bisphenol
- nonylphenol
- membrane
- test
- octylphenol
- Prior art date
Links
- 238000001514 detection method Methods 0.000 title claims abstract description 42
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 29
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 title claims abstract description 17
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 title claims abstract description 17
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 title claims abstract description 16
- IISBACLAFKSPIT-UHFFFAOYSA-N bisphenol A Chemical compound C=1C=C(O)C=CC=1C(C)(C)C1=CC=C(O)C=C1 IISBACLAFKSPIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 175
- 238000012360 testing method Methods 0.000 claims abstract description 141
- IGFHQQFPSIBGKE-UHFFFAOYSA-N Nonylphenol Natural products CCCCCCCCCC1=CC=C(O)C=C1 IGFHQQFPSIBGKE-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 91
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims abstract description 88
- SNQQPOLDUKLAAF-UHFFFAOYSA-N nonylphenol Chemical compound CCCCCCCCCC1=CC=CC=C1O SNQQPOLDUKLAAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 88
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 claims abstract description 22
- PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N gold Chemical compound [Au] PCHJSUWPFVWCPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 21
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 claims abstract description 14
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 claims abstract description 14
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 claims abstract description 12
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 claims abstract description 12
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 claims abstract description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims abstract description 8
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 claims abstract description 8
- 241000283707 Capra Species 0.000 claims abstract description 7
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims abstract description 7
- 239000003463 adsorbent Substances 0.000 claims abstract description 7
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims abstract description 7
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 claims abstract description 7
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 claims abstract description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 4
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 claims abstract 5
- 229940098773 bovine serum albumin Drugs 0.000 claims abstract 5
- 101710162629 Trypsin inhibitor Proteins 0.000 claims abstract 2
- 229940122618 Trypsin inhibitor Drugs 0.000 claims abstract 2
- 239000002753 trypsin inhibitor Substances 0.000 claims abstract 2
- 229930185605 Bisphenol Natural products 0.000 claims description 3
- 239000011152 fibreglass Substances 0.000 claims description 3
- 101000689231 Aeromonas salmonicida S-layer protein Proteins 0.000 claims 1
- 101000748795 Thermus thermophilus (strain ATCC 27634 / DSM 579 / HB8) Cytochrome c oxidase polypeptide I+III Proteins 0.000 claims 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 claims 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 abstract description 69
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 abstract description 29
- 239000003365 glass fiber Substances 0.000 abstract description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 abstract description 8
- 239000007787 solid Substances 0.000 abstract description 8
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 abstract description 7
- 239000002131 composite material Substances 0.000 abstract description 6
- 238000000926 separation method Methods 0.000 abstract description 6
- 238000003556 assay Methods 0.000 abstract description 2
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 abstract 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 abstract 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 19
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 13
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 9
- 239000002351 wastewater Substances 0.000 description 9
- 230000035622 drinking Effects 0.000 description 6
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 5
- 238000004040 coloring Methods 0.000 description 5
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 4
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 238000011161 development Methods 0.000 description 4
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 4
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 4
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 4
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 239000004753 textile Substances 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 2
- 230000001076 estrogenic effect Effects 0.000 description 2
- 239000004816 latex Substances 0.000 description 2
- 229920000126 latex Polymers 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 108091023037 Aptamer Proteins 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 239000002250 absorbent Substances 0.000 description 1
- 230000002745 absorbent Effects 0.000 description 1
- 239000003945 anionic surfactant Substances 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 238000005251 capillar electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 239000002537 cosmetic Substances 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 239000002270 dispersing agent Substances 0.000 description 1
- 239000003995 emulsifying agent Substances 0.000 description 1
- 230000001804 emulsifying effect Effects 0.000 description 1
- 210000000750 endocrine system Anatomy 0.000 description 1
- 239000003344 environmental pollutant Substances 0.000 description 1
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 1
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 1
- 102000015694 estrogen receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010038795 estrogen receptors Proteins 0.000 description 1
- 230000003203 everyday effect Effects 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000003845 household chemical Substances 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 description 1
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 239000008239 natural water Substances 0.000 description 1
- 239000002736 nonionic surfactant Substances 0.000 description 1
- -1 octylphenol Chemical compound 0.000 description 1
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 1
- 230000010287 polarization Effects 0.000 description 1
- 231100000719 pollutant Toxicity 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 230000003381 solubilizing effect Effects 0.000 description 1
- 231100000378 teratogenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003390 teratogenic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001685 thyroid gland Anatomy 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 1
- 238000009736 wetting Methods 0.000 description 1
- 239000000080 wetting agent Substances 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/18—Water
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/558—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor using diffusion or migration of antigen or antibody
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A20/00—Water conservation; Efficient water supply; Efficient water use
- Y02A20/20—Controlling water pollution; Waste water treatment
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Immunology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Pathology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Investigating Or Analyzing Non-Biological Materials By The Use Of Chemical Means (AREA)
Abstract
Заявленная полезная модель предназначена для иммунохроматографической экспрессной лабораторной и внелабораторной одновременной индивидуальной детекции токсичных контаминантов – поверхностно-активных веществ (ПАВ) бисфенола А, нонилфенола и октилфенола в воде. Устройство представляет собой мультимембранный композит с нанесенными иммунореагентами (тест-полоску). Мультимембранный композит состоит из рабочей нитроцеллюлозной мембраны на твердой полистироловой основе с нанесенными иммунореагентами, стекловолоконной мембраны с нанесенными иммунореагентами, мембраны для впитывания и сепарации исследуемого образца и конечной адсорбирующей мембраны для впитывания компонентов образца после прохождения реакции. Отличительной особенностью заявленного устройства является то, что в контрольную зону (К.З.) нанесены поликлональные козьи антитела, специфичные к иммуноглобулинам кролика. В первую тестовую зону (Т.З.1) нанесен конъюгат бисфенола А с белком-носителем соевым ингибитором трипсина (СИТ). Во вторую тестовую зону (Т.З.2) нанесен конъюгат нонилфенола с белком-носителем бычьим сывороточным альбумином (БСА). В третью тестовую зону (Т.З.3) нанесен конъюгат октилфенола с белком-носителем БСА. На стекловолоконную мембрану нанесена смесь конъюгатов поликлональных кроличьих антител, специфичных к бисфенолу А, с коллоидным золотом (КЗ), поликлональных кроличьих антител, специфичных к нонилфенолу, с КЗ и поликлональных кроличьих антител, специфичных к октилфенолу, с КЗ. Для проведения анализа не требуется никаких дополнительных приспособлений. Продолжительность анализа составляет 10 мин.Технической задачей заявленной полезной модели является одновременная индивидуальная детекция трех токсичных контаминантов - ПАВ бисфенола А, нонилфенола и октилфенола в воде.Технический результат заявленной полезной модели заключается в одновременной индивидуальной детекции на одной тест-полоске трех токсичных контаминантов - ПАВ бисфенола А, нонилфенола и октилфенола с использованием простой одностадийной процедуры проведения анализа, обеспечиваемой за счет нанесения на тест-полоску всех необходимых реагентов.
Description
Полезная модель относится к определению токсичных контаминантов - поверхностно активных веществ (ПАВ) бисфенола А, нонилфенола и октилфенола, и может быть использована как экспрессное средство лабораторного и внелабораторного контроля для обеспечения безопасности разных видов потребительской продукции (питьевой и бытовой воды) и мониторинга окружающей среды (природных и сточных вод).
Устройство предназначено для иммунохроматографической экспрессной лабораторной и внелабораторной одновременной индивидуальной детекции токсичных контаминантов - ПАВ бисфенола А, нонилфенола и октилфенола в воде.
ПАВ широко используются человеком в повседневной жизни в составе моющих средств, при производстве текстиля, бумаги и пр. в качестве эмульгирующих, солюбилизирующих, смачивающих и диспергирующих агентов. Большое количество ПАВ постоянно сбрасывается в окружающую среду и распространяется в составе сточных и природных вод. В связи с возрастающими объемами потребления ПАВ являются загрязнителями мирового масштаба. В промышленности широко применяются анионные ПАВ - линейные алкилбензолсульфонаты, например, бисфенол А, и неионные ПАВ - нонилфенолполиэтоксилаты, которые в процессе деградации образуют стабильные продукты нонилфенол и октилфенол.
Структура бисфенола А сходна со структурой эстрогенов, поэтому данное соединение и его аналоги отнесены к факторам разрушения эндокринной системы. Связываясь с рецепторами эстрогенов, данные соединения нарушают нормальное функционирование щитовидной и поджелудочной желез, мозга, иммунной системы. В связи с этим в странах Евросоюза установлена предельно допустимая концентрация (ПДК) бисфенола А в воде и почве - 0,6 мг/кг. В РФ нормативы содержания бисфенола А в почве и пище не установлены, в воде установлена предельная допустимая концентрация ПДК, равная 0,01 мг/дм3.
Нонилфенол и октилфенол также обладают сильными тератогенными и эстрогенными свойствами. Было обнаружено, что эти метаболиты токсичны для беспозвоночных. Их токсичность возрастает с уменьшением длины этоксилатной цепи (октилфенол обладает более высокой эстрогенной активностью, чем нонилфенол). С 2005 г. оксиэтилированные нонилфенолы (неонолы) запрещены Еврокомиссией к использованию в концентрации свыше 0,1% в промышленных средствах очистки, товарах бытовой химии, косметике, и других областях применения на территории ЕС. В РФ установлена ПДК нонилфенола и октилфенола в воде водных объектов рыбохозяйственного значения в пределах от 0,0001 до 0,3 мг/дм3.
Для определения ПАВ используются инструментальные методы анализа - жидкостная хроматография, газовая хроматография с масс-спектрометрической детекцией, капиллярный электрофорез. Преимуществами этих методов являются высокая точность и низкий предел обнаружения. Однако для их применения необходимо дорогостоящее оборудование, высокоочищенные растворители и квалифицированный персонал. Стоимость характеристики одной пробы инструментальными методами довольно высока.
Перспективным направлением выявления токсичных контаминантов является применение в аналитических системах антител в качестве рецепторных молекул. Возможности иммуноанализа связаны с его методической простотой, а также производительностью, обеспечивающей одновременное тестирование до 80 проб в течение 1-2 часов, а в кинетических форматах - в течение 10-20 мин. Поэтому в последнее время для определения ПАВ активно развиваются альтернативные методы - иммуноферментный анализ, поляризационный флуороиммуноанализ, рассматривается применение аптамеров в качестве рецепторных молекул и различных наночастиц в качестве маркеров.
Наиболее простой в использовании формой иммунохимического анализа является иммунохроматографический анализ (ИХА), который обнаруживает присутствие антигена (токсичного контаминанта) в жидкой пробе за 5-15 минут. ИХА основан на движении жидкой пробы вдоль мембраны, которое приводит к образованию на разных участках мембраны специфических иммунных комплексов. Конъюгированный со специфическими антителами окрашенный маркер (коллоидное золото, латексные частицы и др.) распределяется по мембране, и его наличие или отсутствие в определенных участках мембраны по окончании анализа является основанием для вывода о полученных результатах. Использование ИХА для детекции токсичных контаминантов обеспечивает достижение ряда преимуществ - проведение эффективного контроля в лабораторных и внелабораторных условиях, экспрессность проведения анализа при минимальной пробоподготовке, проведение анализа в одну стадию без необходимости в дополнительных реагентах и манипуляциях и простоту детектирования и интерпретации результатов анализа.
В научной и коммерческой литературе описаны разработки устройств для иммунохроматографического определения одного ПАВ - бисфенола А (1-5), нонилфенола (6), и одновременного определения двух ПАВ - нонилфенола и бисфенола А (7). Устройства для одновременного иммунохроматографического определения трех ПАВ в научной и коммерческой литературе не описаны.
Наиболее близкими аналогами заявляемой полезной модели являются устройства для иммунохроматографической детекции одного и двух ПАВ:
- иммунохроматографическая тест-система для определения бисфенола А в талой воде, описанная в публикации Дзантиева и соавторов «Lateral flow immunoassay for bisphenol A: Development of test strips and their application for ecological monitoring» (Иммунохроматографический анализ бисфенола А: разработка тестов и их применение для экологического мониторинга), International Conference on Applied Physics, Power and Material Science, IOP Conf. Series: Journal of Physics: Conf. Series, 2019, 1172, 012088. DOI: 10.1088/1742-6596/1172/1/012088;
- иммунохроматографическая тест-система для определения нонилфенола в сточных водах текстильного производства, описанная в патенте № CN 102507959 А «Rapid detecting card of nonyl phenol and detecting method thereof» (Устройство для быстрой детекции нонилфенола и метод определения с использованием заявляемого устройства). 2012. China (Китай). https://patents.google.com/patent/CN102507959A/en;
- иммунохроматографическая тест-система для одновременного определения нонилфенола и бисфенола А в питьевых, бытовых, природных и сточных водах, описанная в патенте РФ №196383 «Устройство для иммунохроматографической экспрессной лабораторной и внелабораторной одновременной детекции токсичных контаминантов – поверхностно-активных веществ нонилфенола и бисфенола А, в питьевых, бытовых, природных и сточных водах». Опубликовано 27.02.2020. Бюл. №6.
Представленная в публикации Дзантиева и соавторов тест-система представляет собой мультимембранный композит размерами 78×3,5×1,5 мм, который состоит из:
- нитроцеллюлозной рабочей мембраны на твердой полистироловой основе с нанесенными в контрольную зону поликлональными козьими антителами к иммуноглобулинам кролика и нанесенным в тестовую зону конъюгатом бисфенола А с белком-носителем СИТ;
- стекловолоконной мембраны с нанесенным конъюгатом поликлональных кроличьих антител, специфичных к бисфенолу А, с коллоидным золотом;
- мембраны для впитывания и сепарации исследуемого образца;
- конечной адсорбирующей мембраны для впитывания компонентов образца после прохождения реакции.
Анализ проводят следующим образом:
1. Образцы снега расплавляют при комнатной температуре, твердые примеси отфильтровывают и полученную талую воду используют для ИХА.
2. 100 мкл фильтрованной талой воды переносят в пластиковую пробирку вместимостью 1,5 мл.
3. Тест-полоску погружают вертикально нижним концом мембраны для впитывания образца в жидкость на 10 мин.
4. Через 10 мин тест-полоску вынимают. Результат анализа фиксируют визуально или с использованием детектора с видеоцифровой регистрацией.
Результат анализа интерпретируют следующим образом:
1. Если через 10 мин на рабочей мембране тест-полоски появляются две линии (контрольная и тестовая), окрашенные в темно-красный цвет, то результат анализа считается отрицательным, т.е. в образце не содержится бисфенол А или его концентрация ниже предела обнаружения.
2. Если через 10 мин на рабочей мембране тест-полоски появляется одна темно-красная линия (контрольная), то результат анализа считается положительным, т.е. в образце содержится бисфенол А в концентрации равной или выше предела обнаружения.
3. Если через 10 мин на рабочей мембране тест-полоски не образуется ни одной окрашенной линии или образуется только одна тестовая окрашенная линия, то результат анализа считается недействительным.
Описанная в публикации Дзантиева и соавторов тест-система дает информацию о содержании в талой воде только одного ПАВ - бисфенола А.
Описанная в патенте № CN 102507959 A тест-система представляет собой пластиковую кассету длиной 70 мм, шириной 20 мм, толщиной 5 мм (в собранном виде), с толщиной стенки корпуса 1 мм. На передней панели кассеты размещены круглое окно для внесения жидкой пробы и прямоугольное окно для считывания результатов анализа. В кассету помещена тест-полоска размерами 60×4×2,5 мм, которая состоит из:
- нитроцеллюлозной рабочей мембраны на твердой полистироловой основе с нанесенными в контрольную зону кроличьими анти-мышиными антителами и нанесенным в тестовую зону конъюгатом нонилфенола с белком-носителем; размеры нитроцеллюлозной мембраны (20-25)×4×0,5 мм;
- стекловолоконной мембраны с нанесенным конъюгатом моноклональных антител, специфичных к нонилфенолу, с коллоидным золотом (или окрашенными частицами латекса); размеры стекловолоконной мембраны 5×4×(0,5-0,8) мм;
- мембраны для впитывания и сепарации исследуемого образца размерами 20×4×(0,5-0,8) мм;
- конечной адсорбирующей мембраны для впитывания компонентов образца после прохождения реакции размерами (16-20)×4×(0,5-0,8) мм.
Анализ проводят следующим образом:
1. Мутные пробы сточных вод очищают от крупных частиц взвеси путем фильтрования или центрифугирования, прозрачные пробы используют для ИХА без предварительной пробоподготовки.
2. Пробу воды вносят в круглое окно кассеты с помощью пипетки.
3. Результат анализа фиксируют визуально через 5-10 мин после внесения пробы.
Результат анализа интерпретируют следующим образом:
1. Если через 5-10 мин на рабочей мембране тест-полоски появляются две окрашенные линии (контрольная и тестовая), то результат анализа считается отрицательным, т.е. в образце не содержится нонилфенол или его концентрация ниже предела обнаружения.
2. Если через 5-10 мин на рабочей мембране тест-полоски появляется одна окрашенная линия (контрольная), то результат анализа считается положительным, т.е. в образце содержится нонилфенол в концентрации равной или выше предела обнаружения.
3. Если через 5-10 мин на рабочей мембране тест-полоски не образуется ни одной окрашенной линии или образуется только одна тестовая окрашенная линия, то результат анализа считается недействительным.
Описанная в патенте № CN 102507959 A (Китай) тест-система дает информацию о содержании в сточных водах текстильного производства только одного ПАВ - нонилфенола.
Описанная в патенте №196383 тест-система представляет собой мультимембранный композит размерами 78×3,5×1,5 мм, который состоит из:
- нитроцеллюлозной рабочей мембраны на твердой полистироловой основе с нанесенными в контрольную зону поликлональными козьими антителами к иммуноглобулинам кролика, нанесенным в первую тестовую зону конъюгатом нонилфенола с белком-носителем БСА и нанесенным во вторую тестовую зону конъюгатом бисфенола А с белком-носителем СИТ;
- стекловолоконной мембраны с нанесенной эквимолярной смесью конъюгатов поликлональных кроличьих антител, специфичных к нонилфенолу, с коллоидным золотом и поликлональных кроличьих антител, специфичных к бисфенолу А, с коллоидным золотом;
- мембраны для впитывания и сепарации исследуемого образца;
- конечной адсорбирующей мембраны для впитывания компонентов образца после прохождения реакции.
Анализ проводят следующим образом:
1. 100-120 мкл анализируемой воды (питьевой, бытовой, природной, сточной) вносят в пластиковую пробирку вместимостью 1,5 мл.
2. Тест-полоску погружают вертикально нижним концом мембраны для впитывания образца на глубину 0,5 см в жидкость и инкубируют при комнатной температуре в течение 1 мин.
3. Вынимают тест-полоску и помещают ее на сухую горизонтальную поверхность на 9 мин.
4. Через 10 мин после начала движения жидкости по тест-полоске результат анализа фиксируют визуально или с использованием детектора с видеоцифровой регистрацией.
Результат анализа интерпретируют следующим образом:
1. Если через 10 мин на рабочей мембране тест-полоски появляются три красные линии (контрольная и две тестовые), то результат анализа считается отрицательным, т.е. в образце не содержатся нонилфенол и бисфенол А или их концентрации ниже пределов обнаружения.
2. Если через 10 мин на рабочей мембране тест-полоски появляются две красные линии (контрольная и первая по ходу движения жидкости тестовая), то результат анализа считается положительным по бисфенолу А и отрицательным по нонилфенолу, т.е. в образце содержится бисфенол А в концентрации равной или выше предела обнаружения и не содержится нонилфенол (или его концентрация ниже предела обнаружения).
3. Если через 10 мин на рабочей мембране тест-полоски появляются две красные линии (контрольная и вторая по ходу движения жидкости тестовая), то результат анализа считается положительным по нонилфенолу и отрицательным по бисфенолу А, т.е. в образце содержится нонилфенол в концентрации, равной или выше предела обнаружения и не содержится бисфенол А (или его концентрация ниже предела обнаружения).
4. Если через 10 мин на рабочей мембране тест-полоски появляется одна красная линия (контрольная), то результат анализа считается положительным по нонилфенолу и бисфенолу А, т.е. в образце содержатся нонилфенол и бисфенол А в концентрациях равных или выше пределов обнаружения.
5. Если через 10 мин на рабочей мембране тест-полоски не образуется ни одной окрашенной линии или образуются только тестовые линии (одна или две), то результат анализа считается недействительным.
Описанная в патенте №196383 (РФ) тест-система дает информацию о раздельном и/или одновременном содержании в питьевых, бытовых, природных и сточных водах двух ПАВ - нонилфенола и бисфенола А.
Технической задачей заявляемой полезной модели является одновременная индивидуальная детекция трех токсичных контаминантов - ПАВ нонилфенола, октилфенола и бисфенола А в воде.
Технический результат заявляемой полезной модели заключается в одновременной индивидуальной детекции на одной тест-полоске трех токсичных контаминантов - ПАВ нонилфенола, октилфенола и бисфенола А с использованием простой одностадийной процедуры проведения анализа, обеспечиваемой за счет нанесения на тест-полоску всех необходимых реагентов.
Предлагается устройство для иммунохроматографической экспрессной лабораторной и внелабораторной одновременной индивидуальной детекции токсичных контаминантов - ПАВ бисфенола А, нонилфенола и октилфенола в воде. Устройство представляет собой мультимембранный композит с нанесенными иммунореагентами (тест-полоску). Мультимембранный композит состоит из рабочей нитроцеллюлозной мембраны на твердой полистироловой основе с нанесенными иммунореагентами, стекловолоконной мембраны с нанесенными иммунореагентами, мембраны для впитывания и сепарации исследуемого образца и конечной адсорбирующей мембраны для впитывания компонентов образца после прохождения реакции.
Указанный технический результат достигается тем, что:
- в К.З. нанесены поликлональные козьи антитела, специфичные к иммуноглобулинам кролика;
- в Т.З.1 нанесен конъюгат бисфенола А с белком-носителем СИТ;
- в Т.З.2 нанесен конъюгат нонилфенола с белком-носителем БСА;
- в Т.З.3 нанесен конъюгат октилфенола с белком-носителем БСА;
- на стекловолоконную мембрану нанесена смесь конъюгатов поликлональных кроличьих антител, специфичных к бисфенолу А, с коллоидным золотом, поликлональных кроличьих антител, специфичных к нонилфенолу, с коллоидным золотом и поликлональных кроличьих антител, специфичных к октилфенолу, с коллоидным золотом.
На прилагаемом чертеже (рис. 1) представлено заявляемое устройство, где 1 - твердая основа рабочей нитроцеллюлозной мембраны из полистирола, 2 -рабочая нитроцеллюлозная мембрана с нанесенными и высушенными иммунореагентами, 3 - конечная адсорбирующая мембрана для впитывания компонентов образца после прохождения реакции, 4 - стекловолоконная мембрана с нанесенными и высушенными иммунореагентами, 5 - мембрана для впитывания и сепарации исследуемого образца, А - К.З. с нанесенными поликлональными козьими антителами, специфичными к иммуноглобулинам кролика, Б - Т.З.3 с нанесенным конъюгатом октилфенола с белком-носителем БСА, В - Т.З.2 с нанесенным конъюгатом нонилфенола с белком-носителем БСА, Г - Т.З.1 с нанесенным конъюгатом бисфенола А с белком-носителем СИТ.
В таблице 1 приведена характеристика материалов, из которых изготовлены элементы заявляемого устройства.
Анализ с помощью заявляемого устройства проводят следующим образом:
1. 100-120 мкл анализируемой пробы воды вносят в пластиковую пробирку вместимостью 1,5 мл.
2. Тест-полоску погружают вертикально нижним концом мембраны для впитывания образца на глубину 0,5 см в жидкость и инкубируют при комнатной температуре в течение 1 мин.
3. Вынимают тест-полоску и помещают ее на сухую горизонтальную поверхность на 9 мин.
4. Через 10 мин после начала движения жидкости по тест-полоске результат анализа фиксируют визуально или с использованием детектора с видеоцифровой регистрацией.
Заявляемое устройство функционирует следующим образом (см. рис. 1): Если в образце присутствуют ПАВ (нонилфенол, октилфенол, бисфенол А), то они с потоком жидкости перемещаются по впитывающей мембране (5), доходят до стекловолоконной мембраны (4) и реагируют с конъюгатами коллоидного золота со специфичными к ПАВ антителами с образованием двойных окрашенных иммунокомплексов (растворенный антиген-специфические антитела, меченные коллоидным золотом). Образовавшиеся двойные окрашенные иммунокомплексы под действием капиллярных сил движутся вдоль рабочей нитроцеллюлозной мембраны (2) и взаимодействуют с иммобилизованными в Т.З.1 (Г), Т.З.2 (В) и Т.З.3 (Б) конъюгатами антигенов бисфенола А с СИТ (Т.З.1, Г), нонилфенола с БСА (Т.З.2, В) и октилфенола с БСА (Т.З.3, Б) с образованием тройных иммунокомплексов (иммобилизованный на мембране через белок-носитель антиген-меченные коллоидным золотом специфические антитела-антиген из пробы). Избыток не связавшихся двойных окрашенных иммунокомплексов продолжает двигаться вдоль рабочей нитроцеллюлозной мембраны (2) и взаимодействует с антивидовыми антителами, иммобилизованными в К.З. (А), с образованием двойных иммунных комплексов (иммобилизованные на мембране антивидовые антитела-специфические антитела, меченные коллоидным золотом).
Интерпретация результатов анализа производится в соответствие со схемой, представленной на рис. 2:
1. Если через 10 мин на рабочей мембране тест-полоски появляются четыре красные линии (К.З., Т.З.1, Т.З.2 и Т.З.3), то результат анализа считается отрицательным, т.е. в образце не содержатся бисфенол А, нонилфенол и октилфенол или их концентрации ниже пределов обнаружения (рис. 2а).
2. Если через 10 мин на рабочей мембране тест-полоски появляются две красные линии (К.З. и первая по ходу движения жидкости Т.З.1), то результат анализа считается отрицательным по бисфенолу А и положительным по нонилфенолу и октилфенолу, т.е. в образце не содержится бисфенол А (или его концентрация ниже предела обнаружения) и содержатся нонилфенол и октилфенол в концентрациях, равных или выше пределов обнаружения (рис. 2б).
3. Если через 10 мин на рабочей мембране тест-полоски появляются две красные линии (К.З. и вторая по ходу движения жидкости Т.З.2), то результат анализа считается отрицательным по нонилфенолу и положительным по бисфенолу А и октилфенолу, т.е. в образце не содержится нонилфенол (или его концентрация ниже предела обнаружения) и содержатся бисфенол А и октилфенол в концентрациях, равных или выше пределов обнаружения (рис. 2в).
4. Если через 10 мин на рабочей мембране тест-полоски появляются две красные линии (К.З. и третья по ходу движения жидкости Т.З.3), то результат анализа считается отрицательным по октилфенолу и положительным по бисфенолу А и нонилфенолу, т.е. в образце не содержится октилфенол (или его концентрация ниже предела обнаружения) и содержатся бисфенол А и нонилфенол в концентрациях, равных или выше пределов обнаружения (рис. 2г).
5. Если через 10 мин на рабочей мембране тест-полоски появляются три красные линии (К.З., вторая и третья по ходу движения жидкости, Т.З.2 и Т.З.3), то результат анализа считается положительным по бисфенолу А и отрицательным по нонилфенолу и октилфенолу, т.е. в образце содержится бисфенол А в концентрации, равной или выше предела обнаружения, и не содержатся нонилфенол и октилфенол (или их концентрации ниже предела обнаружения) (рис. 2д).
6. Если через 10 мин на рабочей мембране тест-полоски появляются три красные линии (К.З., первая и третья по ходу движения жидкости, Т.З.1 и Т.З.3), то результат анализа считается положительным по нонилфенолу и отрицательным по бисфенолу А и октилфенолу, т.е. в образце содержится нонилфенол в концентрации, равной или выше предела обнаружения, и не содержатся бисфенол А и октилфенол (или их концентрации ниже предела обнаружения) (рис. 2е).
7. Если через 10 мин на рабочей мембране тест-полоски появляются три красные линии (К.З., первая и вторая по ходу движения жидкости, Т.З.1 и Т.З.2), то результат анализа считается положительным по октилфенолу и отрицательным по бисфенолу А и нонилфенолу, т.е. в образце содержится октилфенол в концентрации, равной или выше предела обнаружения, и не содержатся бисфенол А и нонилфенол (или их концентрации ниже предела обнаружения) (рис. 2ж).
8. Если через 10 мин на рабочей мембране тест-полоски появляется одна красная линия (К.З.), то результат анализа считается положительным по бисфенолу А нонилфенолу и октилфенолу, т.е. в образце содержатся бисфенол А, нонилфенол и октилфенол в концентрациях, равных или выше пределов обнаружения (рис. 2з).
9. Если через 10 мин на рабочей мембране тест-полоски не образуется ни одной окрашенной линии или образуются только тестовые линии (одна, две или три в любых комбинациях), то результат анализа считается недействительным (рис. 2и).
Эффективность данного подхода подтверждается следующими представленными ниже примерами:
Пример 1 (исследование времени получения отрицательных по бисфенолу А, нонилфенолу и октилфенолу результатов анализа с использованием заявляемого устройства):
С использованием заявляемого устройства проводят анализ пробы воды, не содержащей бисфенол А, нонилфенол и октилфенол по данным ИФА. 120 мкл пробы вносят в пробирку. Заявляемое устройство (тест-полоску) погружают вертикально нижним концом мембраны для впитывания образца на глубину 0,5 см в жидкость и инкубируют при комнатной температуре в течение 1 мин. Вынимают тест-полоску и помещают ее в паз выдвижной каретки детектирующего устройства для видеоцифровой регистрации. Результат анализа оценивают через 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 и 15 мин с помощью программного обеспечения видеоцифрового детектора. Время анализа контролируют с помощью секундомера. Анализ проводят в пяти повторностях, используя тест-полоски пяти разных серий (полоски №№ 1-5).
Результаты анализа приведены в таблице 2. Интенсивности окрашивания каждой из зон связывания нормированы на ее среднее значение, полученное через 15 мин после начала анализа. Из приведенных экспериментальных данных видно, что через 10 мин после начала анализа интенсивности окрашивания К.З. достигают 100,2-100,6%, зон связывания бисфенола А (Т.З.1) - 100,0-100,5%, зон связывания нонилфенола (Т.З.2) - 99,6-100,0%, зон связывания октилфенола (Т.З.3) - 99,0-100,0% и практически не изменяются в течение следующих пяти минут, т.е. время анализа с использованием заявленного устройства при отсутствии в пробе бисфенола А, нонилфенола и октилфенола составляет 10 мин.
Пример 2 (исследование времени получения положительного по бисфенолу А и отрицательного по нонилфенолу и октилфенолу результатов анализа с использованием заявляемого устройства):
С использованием заявляемого устройства проводят анализ пробы воды, содержащей бисфенол А в концентрации 0,1 мкг/мл и не содержащей нонилфенол и октилфенол по данным ИФА. 120 мкл пробы вносят в пробирку. Заявляемое устройство (тест-полоску) погружают вертикально нижним концом мембраны для впитывания образца на глубину 0,5 см в жидкую пробу и инкубируют при комнатной температуре в течение 1 мин. Вынимают тест-полоску и помещают ее в паз выдвижной каретки детектирующего устройства для видеоцифровой регистрации. Результат анализа оценивают через 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 и 15 мин с помощью программного обеспечения видеоцифрового детектора. Время анализа контролируют с помощью секундомера. Анализ проводят в пяти повторностях, используя тест-полоски пяти разных серий (полоски №№ 1-5).
Результаты анализа приведены в таблице 3. Интенсивности окрашивания К.З., Т.З.2 и Т.З.3 нормированы на их средние значения, полученные через 15 мин после начала анализа. Интенсивности окрашивания Т.З.1 нормированы на ее среднее значение, полученное при отсутствии бисфенола А в пробе (см. Пример 1).
Из приведенных экспериментальных данных видно, что через 10 мин после начала анализа интенсивности окрашивания К.З. достигают 99,8-100,4%, зон связывания нонилфенола (Т.З.2) - 99,4-100,0%, зон связывания октилфенола (Т.З.3) - 99,2-99,8% и практически не изменяются в течение следующих пяти минут. Интенсивности окрашивания тестовых зон связывания бисфенола А (Т.З.1) через 10 мин после начала анализа составляют от 0 до 0,3% и практически не изменяются в течение следующих пяти минут. Таким образом, время анализа пробы воды, содержащей бисфенол А в концентрации 0,1 мкг/мл и не содержащей нонилфенол и октилфенол по данным ИФА, с использованием заявленного устройства составляет 10 мин.
Пример 3 (исследование времени получения положительного по нонилфенолу и отрицательного по бисфенолу А и октилфенолу результатов анализа с использованием заявляемого устройства):
С использованием заявляемого устройства проводят анализ пробы воды, содержащей нонилфенол в концентрации 1,0 мкг/мл и не содержащей бисфенол А и октилфенол по данным ИФА. 120 мкл пробы воды вносят в пробирку. Заявляемое устройство (тест-полоску) погружают вертикально нижним концом мембраны для впитывания образца на глубину 0,5 см в жидкую пробу и инкубируют при комнатной температуре в течение 1 мин. Вынимают тест-полоску и помещают ее в паз выдвижной каретки детектирующего устройства для видеоцифровой регистрации. Результат анализа оценивают через 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 и 15 мин с помощью программного обеспечения видеоцифрового детектора. Время анализа контролируют с помощью секундомера. Анализ проводят в пяти повторностях, используя тест-полоски пяти разных серий (полоски №№ 1-5).
Результаты анализа приведены в таблице 4. Интенсивности окрашивания К.З., Т.З.1 и Т.3.3 нормированы на их средние значения, полученные через 15 мин после начала анализа. Интенсивности окрашивания Т.З.2 нормированы на ее среднее значение, полученное при отсутствии нонилфенола в пробе (см. Пример 1)
Из приведенных экспериментальных данных видно, что через 10 мин после начала анализа интенсивности окрашивания К.З. достигают 99,9-100,5%, зон связывания бисфенола А (Т.З.1) - 99,8-100,4%, зон связывания октилфенола (Т.З.3) - 99,1-99,6% и практически не изменяются в течение следующих пяти минут. Интенсивности окрашивания тестовых зон связывания нонилфенола (Т.З.2) через 10 мин после начала анализа составляют от 0 до 0,3% и практически не изменяются в течение следующих пяти минут. Таким образом, время анализа пробы воды, содержащей нонилфенол в концентрации 1,0 мкг/мл и не содержащей бисфенол А и октилфенол по данным ИФА, с использованием заявленного устройства составляет 10 мин.
Пример 4 (исследование времени получения положительного по октилфенолу и отрицательного по бисфенолу А и нонилфенолу результатов анализа с использованием заявляемого устройства):
С использованием заявляемого устройства проводят анализ пробы воды, содержащей октилфенол в концентрации 1,0 мкг/мл и не содержащей бисфенол А и нонилфенол по данным ИФА. 120 мкл пробы вносят в пробирку. Заявляемое устройство (тест-полоску) погружают вертикально нижним концом мембраны для впитывания образца на глубину 0,5 см в жидкую пробу и инкубируют при комнатной температуре в течение 1 мин. Вынимают тест-полоску и помещают ее в паз выдвижной каретки детектирующего устройства для видеоцифровой регистрации. Результат анализа оценивают через 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 и 15 мин с помощью программного обеспечения видеоцифрового детектора. Время анализа контролируют с помощью секундомера. Анализ проводят в пяти повторностях, используя тест-полоски пяти разных серий (полоски №№ 1-5).
Результаты анализа приведены в таблице 5. Интенсивности окрашивания К.З., Т.З.1 и Т.З.2 нормированы на их средние значения, полученные через 15 мин после начала анализа. Интенсивности окрашивания Т.З.3 нормированы на ее среднее значение, полученное при отсутствии октилфенола в пробе (см. Пример 1).
Из приведенных экспериментальных данных видно, что через 10 мин после начала анализа интенсивности окрашивания К.З. достигают 100-100,5%, зон связывания бисфенола А (Т.З.1) - 99,8-100,3%, зон связывания нонилфенола (Т.З.2) - 99,2-100,0% и практически не изменяются в течение следующих пяти минут. Интенсивности окрашивания тестовых зон связывания октилфенола (Т.З.3) через 10 мин после начала анализа составляют от 0,1 до 0,6% и практически не изменяются в течение следующих пяти минут. Таким образом, время анализа пробы воды, содержащей октилфенол в концентрации 1,0 мкг/мл и не содержащей бисфенол А и нонилфенол по данным ИФА, с использованием заявленного устройства составляет 10 мин.
Пример 5 (исследование времени получения положительного по бисфенолу А, нонилфенолу и октилфенолу результатов анализа с использованием заявляемого устройства):
С использованием заявляемого устройства проводят анализ пробы воды, содержащей бисфенол А в концентрации 0,1 мкг/мл, нонилфенол и октилфенол в концентрациях 1,0 мкг/мл по данным ИФА. 120 мкл пробы вносят в пробирку. Заявляемое устройство (тест-полоску) погружают вертикально нижним концом мембраны для впитывания образца на глубину 0,5 см в жидкую пробу и инкубируют при комнатной температуре в течение 1 мин. Вынимают тест-полоску и помещают ее в паз выдвижной каретки детектирующего устройства для видеоцифровой регистрации. Результат анализа оценивают через 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 и 15 мин с помощью программного обеспечения видеоцифрового детектора. Время анализа контролируют с помощью секундомера. Анализ проводят в пяти повторностях, используя тест-полоски пяти разных серий (полоски №№ 1-5).
Результаты анализа приведены в таблице 6. Интенсивности окрашивания К.З. нормированы на ее среднее значение, полученное через 15 мин после начала анализа. Интенсивности окрашивания Т.З.1, Т.З.2 и Т.З.3 нормированы на их средние значения, полученные при отсутствии бисфенола А, нонилфенола и октилфенола в пробе (см. Пример 1).
Из приведенных экспериментальных данных видно, что через 10 мин после начала анализа интенсивности окрашивания К.З. достигают 99,8-100,5% и практически не изменяются в течение следующих пяти минут. Интенсивности окрашивания тестовых зон связывания бисфенола А (Т.З.1), нонилфенола (Т.З.2) и октилфенола (Т.З.3) через 10 мин после начала анализа составляют от 0 до 0,5% и практически не изменяются в течение следующих пяти минут. Таким образом, время анализа пробы, содержащей бисфенол А в концентрации 0,1 мкг/мл, нонилфенол и октилфенол в концентрациях 1,0 мкг/мл по данным ИФА, с использованием заявленного устройства составляет 10 мин.
Ссылки
1. Signal-enhancement type immunochromatographic gold-labeled test strip and preparation method thereof. 2014. Patent CN 102507929. China.
2. Maiolini E., et al. Bisphenol A determination in baby bottles by chemiluminescence enzyme-linked immunosorbent assay, lateral flow immunoassay and liquid chromatography tandem mass spectrometry. Analyst. 2014, 139(1): 318-324.
3. Sheng W., et al. Lateral flow quantum-dot-based immunochromatographic assay and fluorescence quenching immunochromatographic assay with quantum dots as fluorescence donors to visually detect bisphenol A in food and water samples. Food Anal. Meth. 2018, 11(3): 675-685.
4. Peng X.Y., et al. A signal-enhanced lateral flow strip biosensor for ultrasensitive and on-site detection of bisphenol A. Food Agric. Immunol. 2018, 29(1): 216-227.
5. Dzantiev B.B., et al. Lateral flow immunoassay for bisphenol A: Development of test strips and their application for ecological monitoring. J. Physics: Confer. Series. 2019, 1172, article number 012088.
6. Rapid detecting card of nonyl phenol and detecting method thereof. 2012. Patent CN 102507959 A. China.
7. Устройство для иммунохроматографической экспрессной лабораторной и внелабораторной одновременной детекции токсичных контаминантов - поверхностно активных веществ нонилфенола и бисфенола А, в питьевых, бытовых, природных и сточных водах. 2020. Патент на полезную модель №196383. РФ.
Краткое описание чертежей
На рис. 1 изображена схема заявляемого устройства для иммунохроматографической экспрессной лабораторной и внелабораторной одновременной индивидуальной детекции токсичных контаминантов - ПАВ бисфенола А, нонилфенола и октилфенола в воде. 1 - твердая основа рабочей нитроцеллюлозной мембраны из полистирола, 2 - рабочая нитроцеллюлозная мембрана с нанесенными и высушенными иммунореагентами, 3 - конечная адсорбирующая мембрана для впитывания компонентов образца после прохождения реакции, 4 - стекловолоконная мембрана с нанесенными и высушенными иммунореагентами, 5 - мембрана для впитывания и сепарации исследуемого образца, А - К.З. с нанесенными поликлональными козьими антителами, специфичными к иммуноглобулинам кролика, Б - Т.З.3 с нанесенным конъюгатом октилфенола с белком-носителем БСА, В - Т.З.2 с нанесенным конъюгатом нонилфенола с белком-носителем БСА, Г - Т.З.1 с нанесенным конъюгатом бисфенола А с белком-носителем СИТ.
На рис. 2 изображен алгоритм интерпретации результатов анализа. В том случае, когда на рабочей мембране тест-полоски появляются четыре красные линии (К.З., Т.З.1, Т.З.2 и Т.З.3), результат анализа считается отрицательным по трем ПАВ (рис. 2а). В том случае, когда на рабочей мембране тест-полоски появляются две красные линии (К.З. и Т.З.1), результат анализа считается отрицательным по бисфенолу А и положительным по нонилфенолу и октилфенолу (рис. 2б). В том случае, когда на рабочей мембране тест-полоски появляются две красные линии (К.З. и Т.З.2), результат анализа считается отрицательным по нонилфенолу и положительным по бисфенолу А и октилфенолу (рис. 2в). В том случае, когда на рабочей мембране тест-полоски появляются две красные линии (К.З. и Т.З.3), результат анализа считается отрицательным по октилфенолу и положительным по бисфенолу А и нонилфенолу (рис. 2г). В том случае, когда на рабочей мембране тест-полоски появляются три красные линии (К.З., Т.З.2 и Т.З.3), результат анализа считается отрицательным по нонилфенолу и октилфенолу и положительным по бисфенолу А (рис. 2д). В том случае, когда на рабочей мембране тест-полоски появляются три красные линии (К.З., Т.З.1 и Т.З.3), результат анализа считается отрицательным по бисфенолу А и октилфенолу и положительным по нонилфенолу (рис. 2е). В том случае, когда на рабочей мембране тест-полоски появляются три красные линии (К.З., Т.З.1 и Т.З.2), результат анализа считается отрицательным по бисфенолу А и нонилфенолу и положительным по октилфенолу (рис. 2ж). В том случае, когда на рабочей мембране тест-полоски появляется одна красная линия (К.З.), результат анализа считается положительным по трем ПАВ (рис. 2з). В том случае, когда на рабочей мембране тест-полоски не образуется ни одной окрашенной линии или образуются только тестовые линии (одна, две или три в любой комбинации), результат анализа считается недействительным (рис. 2и).
Claims (1)
- Устройство для иммунохроматографической экспрессной лабораторной и внелабораторной одновременной индивидуальной детекции токсичных контаминантов в воде, содержащее тест-полоску, состоящую из полистироловой подложки, на которую наклеены нитроцеллюлозная мембрана с нанесенными и высушенными иммунореагентами, стекловолоконная мембрана с нанесенными и высушенными иммунореагентами, мембрана для впитывания и сепарации исследуемого образца и конечная адсорбирующая мембрана для впитывания компонентов образца после прохождения реакции, на нитроцеллюлозную мембрану нанесены контрольная и три тестовые зоны, отличающееся тем, что в контрольную зону нанесены поликлональные козьи антитела, специфичные к иммуноглобулинам кролика, в первую тестовую зону нанесен конъюгат бисфенола А с белком-носителем соевым ингибитором трипсина, во вторую тестовую зону нанесен конъюгат нонилфенола с белком-носителем бычьим сывороточным альбумином и в третью тестовую зону нанесен конъюгат октилфенола с белком-носителем бычьим сывороточным альбумином, на стекловолоконную мембрану нанесена смесь конъюгатов поликлональных кроличьих антител, специфичных к бисфенолу А, с коллоидным золотом, поликлональных кроличьих антител, специфичных к нонилфенолу, с коллоидным золотом и поликлональных кроличьих антител, специфичных к октилфенолу, с коллоидным золотом.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2020130162U RU202181U1 (ru) | 2020-09-14 | 2020-09-14 | Устройство для иммунохроматографической экспрессной лабораторной и внелабораторной одновременной индивидуальной детекции токсичных контаминантов в воде |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| RU2020130162U RU202181U1 (ru) | 2020-09-14 | 2020-09-14 | Устройство для иммунохроматографической экспрессной лабораторной и внелабораторной одновременной индивидуальной детекции токсичных контаминантов в воде |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU202181U1 true RU202181U1 (ru) | 2021-02-05 |
Family
ID=74551075
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2020130162U RU202181U1 (ru) | 2020-09-14 | 2020-09-14 | Устройство для иммунохроматографической экспрессной лабораторной и внелабораторной одновременной индивидуальной детекции токсичных контаминантов в воде |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RU (1) | RU202181U1 (ru) |
Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101533014A (zh) * | 2009-04-09 | 2009-09-16 | 江南大学 | 一种快速检测双酚a的胶体金层析试纸条及制备方法 |
| CN102183642A (zh) * | 2011-03-08 | 2011-09-14 | 无锡安迪生物工程有限公司 | 一种双酚a快速检测卡及其检测方法 |
| CN102507959A (zh) * | 2011-11-08 | 2012-06-20 | 无锡安迪生物工程有限公司 | 一种壬基酚快速检测卡及其检测方法 |
| CN103018467B (zh) * | 2012-09-27 | 2016-12-21 | 江苏维赛科技生物发展有限公司 | 双酚a的胶体金检测卡及其制备方法 |
| WO2018174733A1 (en) * | 2017-03-21 | 2018-09-27 | Gdanski Uniwersytet Medyczny | Method for determining bisphenol a in biological material, diagnostic device for detection of bisphenol a in biological material, diagnostic kit for detection of bisphenol a in biological material |
| RU191660U1 (ru) * | 2019-02-21 | 2019-08-15 | Общество с ограниченной ответственностью «Милкгуард» | Иммунохроматографическая тест-полоска для проведения экспресс-метода определения четырех групп антибиотиков в молоке с исключением возможной фальсификации образца |
| RU196383U1 (ru) * | 2019-11-29 | 2020-02-27 | Федеральное государственное учреждение "Федеральный исследовательский центр "Фундаментальные основы биотехнологии" Российской академии наук" (ФИЦ Биотехнологии РАН) | Устройство для иммунохроматографической экспрессной лабораторной и внелабораторной одновременной детекции токсичных контаминантов - поверхностно активных веществ нонилфенола и бисфенола а в питьевых, бытовых, природных и сточных водах |
-
2020
- 2020-09-14 RU RU2020130162U patent/RU202181U1/ru active
Patent Citations (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101533014A (zh) * | 2009-04-09 | 2009-09-16 | 江南大学 | 一种快速检测双酚a的胶体金层析试纸条及制备方法 |
| CN102183642A (zh) * | 2011-03-08 | 2011-09-14 | 无锡安迪生物工程有限公司 | 一种双酚a快速检测卡及其检测方法 |
| CN102507959A (zh) * | 2011-11-08 | 2012-06-20 | 无锡安迪生物工程有限公司 | 一种壬基酚快速检测卡及其检测方法 |
| CN103018467B (zh) * | 2012-09-27 | 2016-12-21 | 江苏维赛科技生物发展有限公司 | 双酚a的胶体金检测卡及其制备方法 |
| WO2018174733A1 (en) * | 2017-03-21 | 2018-09-27 | Gdanski Uniwersytet Medyczny | Method for determining bisphenol a in biological material, diagnostic device for detection of bisphenol a in biological material, diagnostic kit for detection of bisphenol a in biological material |
| RU191660U1 (ru) * | 2019-02-21 | 2019-08-15 | Общество с ограниченной ответственностью «Милкгуард» | Иммунохроматографическая тест-полоска для проведения экспресс-метода определения четырех групп антибиотиков в молоке с исключением возможной фальсификации образца |
| RU196383U1 (ru) * | 2019-11-29 | 2020-02-27 | Федеральное государственное учреждение "Федеральный исследовательский центр "Фундаментальные основы биотехнологии" Российской академии наук" (ФИЦ Биотехнологии РАН) | Устройство для иммунохроматографической экспрессной лабораторной и внелабораторной одновременной детекции токсичных контаминантов - поверхностно активных веществ нонилфенола и бисфенола а в питьевых, бытовых, природных и сточных водах |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| СТАРОДУБ Н.Ф. и др. Иммуноферментный анализ неионных поверхностно-активных веществ в воде. Украхнський біохімічний журнал, 2005, т.77, N6, с. 116-121. * |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| EP2063269B1 (en) | Chromatography apparatus for detecting Staphylococcus aureus | |
| DE69421582T2 (de) | Verfahren für nicht-kompetitive Bindungsassays | |
| WO2010001598A1 (ja) | 結合アッセイ用多孔性固相及びこれを用いた結合アッセイ法 | |
| KR890002667A (ko) | 비-금속 콜로이드성 입자 면역검정 | |
| KR830009486A (ko) | 물질의 분석방법 및 장치 | |
| DE68924129T2 (de) | Immunoassay auf einer vorbeschichteten, festen Oberfläche. | |
| US20040235189A1 (en) | Reversed chromatographic immunoassay | |
| EP3339862A1 (en) | Immunological detection method and test strip used therefor | |
| Yazynina et al. | Immunoassay techniques for detection of the herbicide simazine based on use of oppositely charged water-soluble polyelectrolytes | |
| RU196383U1 (ru) | Устройство для иммунохроматографической экспрессной лабораторной и внелабораторной одновременной детекции токсичных контаминантов - поверхностно активных веществ нонилфенола и бисфенола а в питьевых, бытовых, природных и сточных водах | |
| CN100430726C (zh) | 免疫色谱试验片及色谱分析方法 | |
| RU202181U1 (ru) | Устройство для иммунохроматографической экспрессной лабораторной и внелабораторной одновременной индивидуальной детекции токсичных контаминантов в воде | |
| Yang et al. | Time-resolved fluorescence immunoassay with measurement of a europium chelate in solution: dissociation conditions and application for determination of cortisol | |
| Glad et al. | Immunocapillarymigration—a new method for immunochemical quantitation | |
| KR102593963B1 (ko) | 면역학적 측정용 시약 조성물 및 이의 용도 | |
| US6130097A (en) | Process and device for detecting dust-associated substances | |
| DK1825273T3 (en) | Particle-based binding component | |
| Yeow et al. | Indirect antiglobulin paper test for red blood cell antigen typing by flow-through method | |
| US8039268B2 (en) | Immunochromatoassay method and immunochromatoassay kit | |
| Rubtsova et al. | Simultaneous determination of several pesticides with chemiluminescent immunoassay on a multi‐spot membrane strip | |
| EP0893690A1 (en) | Detection of mycotoxins by flow-through membrane-based enzyme immunoassay | |
| Stangl et al. | Increased sensitivity and selectivity of an enzyme-linked immunosorbent assay for the determination of atrazine by use of non-ionic surfactants | |
| Fluoroimmunoassay et al. | Flow injection fluoroimmunoassay for human transferrin using a protein A immunoreactor | |
| RU2789545C1 (ru) | Способ высокочувствительного конкурентного иммунохроматографического анализа | |
| KR100193267B1 (ko) | 면역 멤브레인 스트립 및 그의 제조방법 |