RU2020115720A - Конструкции полиспецифических антител - Google Patents

Claims (29)

1. Молекула полиспецифического антитела, включающая:

a) полипептидную цепь формулы (I): V _H -СН ₁ -Х-V ₁ ; и

b) полипептидную цепь формулы (II): V _L -C _L -Y-V ₂ ;

или состоящую из a) и b), где:

V_Н представляет собой вариабельный домен тяжелой цепи;

CH₁ представляет собой домен константной области тяжелой цепи, например, ее домен 1;

Х представляет собой связь или линкер;

Y представляет собой связь или линкер;

V₁ представляет собой dsscFv;

V_L представляет собой вариабельный домен легкой цепи;

C_L представляет собой домен из константной области легкой цепи, такой как Cкаппа;

V₂ представляет собой dsscFv;

где каждый из VH/VL, V1 и V2 образует антигенсвязывающий сайт, и

где только один из V_H/V_L, V₁ и V₂ обладает специфичностью в отношении белка-носителя в сыворотке крови.

2. Молекула полиспецифического антитела по п. 1, где указанный белок-носитель в сыворотке крови выбран из списка, состоящего из альбумина, тироксин-связывающего белка, транстиретина, α1-кислого гликопротеина, трансферрина и фибриногена, или фрагмента любого из них.

3. Молекула полиспецифического антитела по п. 1, где указанный белок-носитель в сыворотке крови представляет собой человеческий сывороточный альбумин, и где указанные V_H/V_L или V₁ или V₂, обладающие специфичностью в отношении белка-носителя в сыворотке крови, образуют альбуминсвязывающий сайт.

4. Молекула полиспецифического антитела по п. 3, где указанный альбуминсвязывающий сайт содержит SEQ ID NO: 71 в качестве CDRH1, SEQ ID NO: 72 в качестве CDRH2, SEQ ID NO: 73 в качестве CDRH3, SEQ ID NO: 74 в качестве CDRL1, SEQ ID NO: 75 в качестве CDRL2 и SEQ ID NO: 76 в качестве CDRL3; или вариабельный домен тяжелой цепи, выбранный из SEQ ID NO: 77 и SEQ ID NO: 78, и вариабельный домен легкой цепи, выбранный из SEQ ID NO: 79 и SEQ ID NO: 80.

5. Молекула полиспецифического антитела по п. 4, где указанные 6 CDR с последовательностями SEQ ID NO: 71-76 или вариабельные домены с последовательностями SEQ ID NO: 77-80 находятся в положении V_H/V_L или V₁ или V₂.

6. Молекула полиспецифического антитела по п. 4 или 5, где вариабельный домен тяжелой цепи с последовательностью SEQ ID NO: 78 и вариабельный домен легкой цепи с последовательностью SEQ ID NO: 80 находятся в положении V₂, и где указанные вариабельный домен легкой цепи или вариабельный домен тяжелой цепи из V₂ присоединены к Y, например, с помощью пептидной связи.

7. Молекула полиспецифического антитела по любому из пп. 1-6, где указанная молекула антитела способна селективно связывать два или более различных представляющих интерес антигена.

8. Молекула полиспецифического антитела по любому из пп. 1-7, где вариабельные домены легкой цепи и тяжелой цепи из V₁ и/или вариабельные домены легкой цепи и тяжелой цепи из V₂ связаны дисульфидной связью между двумя сконструированными остатками цистеина, где положение указанной пары остатков цистеина представляет собой V_H44 и V_L100.

9. Молекула полиспецифического антитела по любому из пп. 1-8, где Х и/или Y представляют собой пептидный линкер, например, SEQ ID NO:1, 2, 69 и 70.

10. Полинуклеотид, кодирующий молекулу полиспецифического антитела по любому из пп. 1-9.

11. Вектор, включающий полинуклеотид, определенный в п. 10.

12. Клетка-хозяин, включающая один или более полинуклеотидов или векторов по п. 10 или 11, соответственно.

13. Клетка-хозяин, включающая два вектора, где первый вектор включает полинуклеотид, кодирующий полипептидную цепь формулы (I) молекулы полиспецифического антитела по любому из пп. 1-9, и второй вектор включает полинуклеотид, кодирующий полипептидную цепь формулы (II) указанной молекулы полиспецифического антитела.

14. Способ, включающий экспрессию молекулы полиспецифического антитела из клетки-хозяина, определенной в п. 12 или 13.

15. Фармацевтическая композиция, включающая молекулу полиспецифического антитела по любому из пп. 1-9 и по крайней мере один эксципиент.

16. Молекула полиспецифического антитела по любому из пп. 1-9 или фармацевтическая композиция по п. 15 для применения в лечении.