RU2019143638A - Способы модификации поверхностного заряда для получения биспецифических антител - Google Patents

Способы модификации поверхностного заряда для получения биспецифических антител Download PDF

Info

Publication number
RU2019143638A
RU2019143638A RU2019143638A RU2019143638A RU2019143638A RU 2019143638 A RU2019143638 A RU 2019143638A RU 2019143638 A RU2019143638 A RU 2019143638A RU 2019143638 A RU2019143638 A RU 2019143638A RU 2019143638 A RU2019143638 A RU 2019143638A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
amino acid
acid residues
antibody
charged amino
positions
Prior art date
Application number
RU2019143638A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2019143638A3 (ru
RU2803096C2 (ru
Inventor
Томас НЕССПОР
Original Assignee
Янссен Байотек, Инк.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Янссен Байотек, Инк. filed Critical Янссен Байотек, Инк.
Publication of RU2019143638A publication Critical patent/RU2019143638A/ru
Publication of RU2019143638A3 publication Critical patent/RU2019143638A3/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2803096C2 publication Critical patent/RU2803096C2/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/46—Hybrid immunoglobulins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2875—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the NGF/TNF superfamily, e.g. CD70, CD95L, CD153, CD154
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/06—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies from serum
    • C07K16/065—Purification, fragmentation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/24—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
    • C07K16/241—Tumor Necrosis Factors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2803—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily
    • C07K16/2818—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the immunoglobulin superfamily against CD28 or CD152
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2839—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the integrin superfamily
    • C07K16/2848—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against the integrin superfamily against integrin beta3-subunit-containing molecules, e.g. CD41, CD51, CD61
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/31—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency multispecific
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/51—Complete heavy chain or Fd fragment, i.e. VH + CH1
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/515—Complete light chain, i.e. VL + CL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/567—Framework region [FR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance

Claims (46)

1. Способ модификации изоэлектрической точки антитела, причем указанный способ включает:
обеспечение антитела, при этом указанное антитело содержит:
первый полипептид, содержащий вариабельную область тяжелой цепи, и
второй полипептид, содержащий вариабельную область тяжелой цепи; и
замещение в по меньшей мере одном из первого и второго полипептидов антитела одного или более аминокислотных остатков вариабельной области тяжелой цепи (VH) в положениях 7, 9, 11, 14, 41, 70, 74, 82a, 84 и 113 в соответствии с системой нумерации по Кабату, при этом указанное замещение увеличивает или уменьшает изоэлектрическую точку антитела.
2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что когда один или более аминокислотных остатков VH в положениях 7, 9, 11, 14, 41, 74, 84, и 113 (нумерация по Кабату) представляют собой нейтрально заряженные аминокислотные остатки, указанное замещение включает обмен указанных одного или более нейтрально заряженных аминокислотных остатков на один или более положительно заряженных аминокислотных остатков для увеличения изоэлектрической точки антитела.
3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что когда один или более аминокислотных остатков VH в положениях 7, 9, 11, 14, 41, 74, 84, и 113 (нумерация по Кабату) представляют собой отрицательно заряженные аминокислотные остатки, указанное замещение включает обмен указанных одного или более отрицательно заряженных аминокислотных остатков на один или более нейтрально или положительно заряженных аминокислотных остатков для увеличения изоэлектрической точки антитела.
4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что когда один или более аминокислотных остатков VH в положениях 9, 70, 74, 82a, и 84 (нумерация по Кабату) представляют собой нейтрально заряженные аминокислотные остатки, указанное замещение включает обмен указанных одного или более нейтрально заряженных аминокислотных остатков на один или более отрицательно заряженных аминокислотных остатков для уменьшения изоэлектрической точки антитела.
5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что когда один или более аминокислотных остатков VH в положениях 9, 70, 74, 82a, и 84 (нумерация по Кабату) представляют собой положительно заряженные аминокислотные остатки, указанное замещение включает обмен указанных одного или более положительно заряженных аминокислотных остатков на один или более нейтрально или отрицательно заряженных аминокислотных остатков для снижения изоэлектрической точки антитела.
6. Способ по п. 1, отличающийся тем, что антитело представляет собой мультиспецифическое антитело, а первый и второй полипептиды содержат разные вариабельные области тяжелой цепи.
7. Способ по п. 6, отличающийся тем, что указанное замещение выполняют только в одном из первого или второго полипептидов.
8. Способ по п. 6, отличающийся тем, что указанное замещение выполняют в обоих из первого или второго полипептидов.
9. Способ по п. 8, отличающийся тем, что замены одного или более аминокислотных остатков первого полипептида отличаются от замен одного или более аминокислотных остатков второго полипептида.
10. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанное замещение включает обмен аминокислотного остатка VH в положении 74 (нумерация по Кабату) в по меньшей мере одном из первого или второго полипептидов на отрицательно заряженный аминокислотный остаток.
11. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанное замещение включает обмен аминокислотного остатка VH в положении 82a (нумерация по Кабату) в по меньшей мере одном из первого или второго полипептидов на отрицательно заряженный аминокислотный остаток.
12. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанное замещение включает обмен аминокислотного остатка VH в положении 84 (нумерация по Кабату) в по меньшей мере одном из первого или второго полипептидов на отрицательно заряженный аминокислотный остаток.
13. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанное замещение включает обмен аминокислотного остатка VH по меньшей мере в двух положениях, выбранных из положений 74, 82a и 84 (нумерация по Кабату), в по меньшей мере одном из первого или второго полипептидов на отрицательно заряженный аминокислотный остаток.
14. Способ по п. 1, отличающийся тем, что указанное замещение включает обмен аминокислотного остатка VH во всех трех положениях 74, 82a, и 84 (нумерация по Кабату) в по меньшей мере одном из первого или второго полипептидов на отрицательно заряженный аминокислотный остаток.
15. Способ по п. 1, отличающийся тем, что антитело представляет собой антитело IgG.
16. Способ по п. 1, отличающийся тем, что антитело представляет собой химерное антитело, гуманизированное антитело или человеческое антитело.
17. Антитело, имеющее модифицированную изоэлектрическую точку, полученную при помощи способа по п. 1.
18. Способ увеличения степени разделения биспецифического антитела от двух исходных антител, причем указанный способ включает:
обеспечение первого и второго исходного антител, при этом каждое исходное антитело содержит вариабельную область тяжелой цепи;
замещение в по меньшей мере одном из первого и второго исходных антител одного или более аминокислотных остатков в вариабельной области тяжелой цепи (VH) в положениях 7, 9, 11, 14, 41, 70, 74, 82a, 84 и 113, в соответствии с системой нумерации по Кабату, при этом указанное замещение увеличивает или уменьшает изоэлектрическую точку первого исходного антитела относительно второго исходного антитела;
получение биспецифического антитела из двух исходных антител после указанного замещения;
отделение полученного биспецифического антитела от его двух исходных антител, при этом указанное разделение увеличивается в результате указанного замещения.
19. Способ по п. 18, отличающийся тем, что когда один или более аминокислотных остатков VH в положениях 7, 9, 11, 14, 41, 74, 84, и 113 (нумерация по Кабату) первого исходного антитела представляют собой нейтрально заряженные аминокислотные остатки, указанное замещение включает обмен указанных одного или более нейтрально заряженных аминокислотных остатков на один или более положительно заряженных аминокислотных остатков для увеличения изоэлектрической точки первого исходного антитела.
20. Способ по п. 18, отличающийся тем, что когда один или более аминокислотных остатков VH в положениях 7, 9, 11, 14, 41, 74, 84, и 113 (нумерация по Кабату) первого исходного антитела представляют собой отрицательно заряженные аминокислотные остатки, указанное замещение включает обмен указанных одного или более отрицательно заряженных аминокислотных остатков на один или более нейтрально или положительно заряженных аминокислотных остатков для увеличения изоэлектрической точки первого исходного антитела.
21. Способ по п. 18, отличающийся тем, что когда один или более аминокислотных остатков VH в положениях 9, 70, 74, 82a, и 84 (нумерация по Кабату) первого исходного антитела представляют собой нейтрально заряженные аминокислотные остатки, указанное замещение включает обмен указанных одного или более нейтрально заряженных аминокислотных остатков на один или более отрицательно заряженных аминокислотных остатков для уменьшения изоэлектрической точки первого исходного антитела.
22. Способ по п. 18, отличающийся тем, что когда один или более аминокислотных остатков VH в положениях 9, 70, 74, 82a, и 84 (нумерация по Кабату) первого исходного антитела представляют собой положительно заряженные аминокислотные остатки, указанное замещение включает обмен указанных одного или более положительно заряженных аминокислотных остатков на один или более нейтрально или отрицательно заряженных аминокислотных остатков для снижения изоэлектрической точки первого исходного антитела.
23. Способ по п. 18, отличающийся тем, что указанное замещение включает обмен аминокислотного остатка VH в положении 74 (нумерация по Кабату) в первом исходном антителе на отрицательно заряженный аминокислотный остаток для уменьшения изоэлектрической точки первого исходного антитела.
24. Способ по п. 18, отличающийся тем, что указанное замещение включает обмен аминокислотного остатка VH в положении 82a (нумерация по Кабату) в первом исходном антителе на отрицательно заряженный аминокислотный остаток для уменьшения изоэлектрической точки первого исходного антитела.
25. Способ по п. 18, отличающийся тем, что указанное замещение включает обмен аминокислотного остатка VH в положении 84 (нумерация по Кабату) в первом исходном антителе на отрицательно заряженный аминокислотный остаток для уменьшения изоэлектрической точки первого исходного антитела.
26. Способ по п. 18, отличающийся тем, что указанное замещение включает обмен аминокислотного остатка VH по меньшей мере в двух положениях, выбранных из положений 74, 82a и 84 (нумерация по Кабату) в первом исходном антителе, на отрицательно заряженный аминокислотный остаток для уменьшения изоэлектрической точки первого исходного антитела.
27. Способ по п. 18, отличающийся тем, что указанное замещение включает обмен аминокислотного остатка VH во всех трех положениях 74, 82a, и 84 (нумерация по Кабату) в первом исходном антителе на отрицательно заряженный аминокислотный остаток для уменьшения изоэлектрической точки первого исходного антитела.
28. Мультиспецифическое антитело, содержащее
первый полипептид, содержащий вариабельную область тяжелой цепи, и
второй полипептид, содержащий вариабельную область тяжелой цепи, причем изоэлектрическая точка первого полипептида ниже, чем изоэлектрическая точка второго полипептида, и один или более аминокислотных остатков в положениях 9, 70, 74, 82a и 84 (нумерация по Кабату) вариабельной области тяжелой цепи первого полипептида содержат нейтрально или отрицательно заряженный аминокислотный остаток, и один или более аминокислотных остатков в соответствующих положениях вариабельной области тяжелой цепи второго полипептида содержат аминокислотный остаток с отличающимся зарядом по сравнению с первым полипептидом.
29. Мультиспецифическое антитело по п. 28, отличающееся тем, один или более аминокислотных остатков в положениях 7, 9, 11, 14, 41, 74, 84, и 113 вариабельной области тяжелой цепи второго полипептида содержат нейтрально или положительно заряженный аминокислотный остаток, и один или более аминокислотных остатков в соответствующих положениях вариабельной области тяжелой цепи первого полипептида содержат аминокислотный остаток с отличающимся зарядом по сравнению со вторым полипептидом.
30. Мультиспецифическое антитело по п. 28, отличающееся тем, что нейтрально или отрицательно заряженные аминокислотные остатки в одном или более положениях 9, 70, 74, 82а и 84 (нумерация по Кабату) представляют собой аминокислотные замены.
31. Мультиспецифическое антитело, содержащее
первый полипептид, содержащий вариабельную область тяжелой цепи, и
второй полипептид, содержащий вариабельную область тяжелой цепи, причем изоэлектрическая точка первого полипептида выше, чем изоэлектрическая точка второго полипептида, и один или более аминокислотных остатков в положениях 7, 9, 11, 14, 41, 74, 84, и 113 (нумерация по Кабату) вариабельной области тяжелой цепи первого полипептида содержат нейтрально или положительно заряженный аминокислотный остаток, и один или более аминокислотных остатков в соответствующих положениях вариабельной области тяжелой цепи второго полипептида содержат аминокислотный остаток с отличающимся зарядом по сравнению с первым полипептидом.
32. Мультиспецифическое антитело по п. 30, отличающееся тем, один или более аминокислотных остатков в положениях 9, 70, 74, 82a, и 84 (нумерация по Кабату) вариабельной области тяжелой цепи второго полипептида содержат нейтрально или отрицательно заряженный аминокислотный остаток, и один или более аминокислотных остатков в соответствующих положениях вариабельной области тяжелой цепи первого полипептида содержат аминокислотный остаток с отличающимся зарядом по сравнению со вторым полипептидом.
33. Мультиспецифическое антитело по п. 31, отличающееся тем, что нейтрально или положительно заряженные аминокислотные остатки в одном или более положениях 7, 9, 11, 14, 41, 74, 84, и 113 (нумерация по Кабату) представляют собой аминокислотные замены.
34. Мультиспецифическое антитело по любому одному из пп. 28-33, отличающееся тем, что мультиспецифическое антитело представляет собой биспецифическое антитело.
RU2019143638A 2017-06-05 2018-06-04 Способы модификации поверхностного заряда для получения биспецифических антител RU2803096C2 (ru)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201762515297P 2017-06-05 2017-06-05
US62/515,297 2017-06-05
PCT/IB2018/053996 WO2018224950A1 (en) 2017-06-05 2018-06-04 Methods of engineering surface charge for bispecific antibody production

Publications (3)

Publication Number Publication Date
RU2019143638A true RU2019143638A (ru) 2021-07-09
RU2019143638A3 RU2019143638A3 (ru) 2022-02-10
RU2803096C2 RU2803096C2 (ru) 2023-09-06

Family

ID=

Also Published As

Publication number Publication date
RU2019143638A3 (ru) 2022-02-10
CA3065447A1 (en) 2018-12-13
EP3634994A4 (en) 2021-06-30
AU2018279278A1 (en) 2019-12-19
US11192951B2 (en) 2021-12-07
US20190031764A1 (en) 2019-01-31
KR20240056666A (ko) 2024-04-30
JP2020522573A (ja) 2020-07-30
KR20200014385A (ko) 2020-02-10
MX2019014572A (es) 2020-07-29
WO2018224950A1 (en) 2018-12-13
US20220169741A1 (en) 2022-06-02
CN110959012A (zh) 2020-04-03
JP7268011B2 (ja) 2023-05-02
BR112019025612A2 (pt) 2020-06-16
EP3634994A1 (en) 2020-04-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP2015146822A5 (ru)
RU2510400C9 (ru) Способ модификации изоэлектрической точки антитела с помощью аминокислотных замен в cdr
RU2018146050A (ru) Биспецифические связывающие белки, которые связывают иммуномодулирующий белок и опухолевый антиген
RU2022102446A (ru) Биспецифические связывающие белки и пути их применения
RU2017125758A (ru) Антитела к с5 и способы их применения
WO2018057735A8 (en) Antibodies for siglec-15 and methods of use thereof
FI3551660T3 (fi) Anti-ctla-4-vasta-aineita ja niiden käyttömenetelmiä
PE20181451A1 (es) Anticuerpos neutralizadores del virus de inmunodeficiencia humana
PE20231958A1 (es) Moleculas de union a pd-1 y metodos de uso de las mismas
EA201600276A1 (ru) Анти-il-17-антитела, способ их получения и способ применения
FI3392276T3 (fi) Heterodimeerimolekyyli, joka perustuu rakenteelliseen CH3-domeeniin, sekä menetelmä sen valmistamiseksi ja sen käyttö
HRP20211794T1 (hr) Humana antitijela za pd-1
JP2016536322A5 (ru)
RU2018119686A (ru) Антитела и фрагменты антител для сайт-специфического конъюгирования
RU2016106577A (ru) САЙТЫ АНТИТЕЛ, СПЕЦИФИЧНО СВЯЗЫВАЮЩИЕ EGFRvIII
RU2018146533A (ru) Антитела к cd40 и пути их применения
RU2013140350A (ru) Антитела против человеческого il33r и их применение
RU2017102312A (ru) Конструкции мультиспецифичных антител
JP2017529067A5 (ru)
JP2014518883A5 (ru)
RU2016114504A (ru) Би- или полиспецифические полипептиды, связывающие поверхностные антигены иммунных эффекторных клеток и антигены hbv для лечения инфекций bv и ассоциированных с ними состояний
JP2012514997A5 (ru)
RU2015155601A (ru) Нейтрализующие цитомегаловирус (цмв) антигенсвязывающие белки
RU2019111862A (ru) Новые антитела против фактора xi и их применения
EA201890447A1 (ru) Гуманизированные антитела к рецептору ccr7