RU2019138721A - КОМПОЗИЦИИ иРНК ДЛЯ СХОДНОГО С АНГИОПОЭТИНОМ 3 (ANGPTL3) БЕЛКА И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ - Google Patents

Claims (64)

1. Двухцепочечная рибонуклеиновая кислота (дцРНК) для ингибирования экспрессии ANGPTL3,

где дцРНК содержит смысловую цепь и антисмысловую цепь, где антисмысловая цепь содержит участок комплементарности мРНК, кодирующей ANGPTL3, и где участок комплементарности включает по меньшей мере 15 смежных нуклеотидов, отличающихся не более чем на 3 нуклеотида от любой из следующих антисмысловых нуклеотидных последовательностей:

(a1) 5’-UAAAAAGACUGAUCAAAUA-3’

(a2) 5’-AAAGACUGAUCAAAUAUGU-3’

(a3) 5’-AUAAAAAGACUGAUCAAAU-3’

(a4) 5’-AGACUGAUCAAAUAUGUUG-3’

(a5) 5’-AAAAAGACUGAUCAAAUAUGUUG-3’

(a6) 5’-AAAGACUGAUCAAAUAUGUUGAG-3’

(a7) 5’-AAAAGACUGAUCAAAUAUGUUGA-3’

(a8) 5’-AUAGAUCAUAAAAAGACUGAUCA-3’

(a9) 5’-AUCAAAUAUGUUGAGUUUUUGAA-3’

(a10) 5’-AAGACUGAUCAAAUAUGUUGAGU-3’

(a11) 5’-UAAAAAGACUGAUCAAAUAUGUU-3’

(a12) 5’-UAGAUCAUAAAAAGACUGAUCAA-3’.

2. ДцРНК по п. 1, где участок комплементарности состоит из любой из антисмысловых последовательностей.

3. ДцРНК по п. 1 или 2, где нуклеотидная последовательность смысловой цепи состоит из последовательности смысловой цепи, выбранной из следующих смысловых нуклеотидных последовательностей:

(s1) 5’-UAUUUGAUCAGUCUUUUUA-3’

(s2) 5’-ACAUAUUUGAUCAGUCUUU-3’

(s3) 5’-AUUUGAUCAGUCUUUUUAU-3’

(s4) 5’-CAACAUAUUUGAUCAGUCU-3’

(s5) 5’-ACAUAUUUGAUCAGUCUUUUU-3’

(s6) 5’-CAACAUAUUUGAUCAGUCUUU-3’

(s7) 5’-AACAUAUUUGAUCAGUCUUUU-3’

(s8) 5’-AUCAGUCUUUUUAUGAUCUAU-3’

(s9) 5’-CAAAAACUCAACAUAUUUGAU-3’

(s10) 5’-UCAACAUAUUUGAUCAGUCUU-3’

(s11) 5’-CAUAUUUGAUCAGUCUUUUUA-3’

(s12) 5’-GAUCAGUCUUUUUAUGAUCUA-3’.

4. ДцРНК по п. 1, где нуклеотидная последовательность смысловой цепи включает нуклеотидную последовательность 5’-ACAUAUUUGAUCAGUCUUUUU-3’, а нуклеотидная последовательность антисмысловой цепи включает нуклеотидную последовательность 5’-AAAAAGACUGAUCAAAUAUGUUG-3’.

5. ДцРНК по любому из пп. 1-4, отличающаяся тем, что дцРНК содержит по меньшей мере один модифицированный нуклеотид, причем предпочтительно по меньшей мере один из указанных модифицированных нуклеотидов выбран из группы, состоящей из 2'-O-метил-модифицированного нуклеотида, нуклеотида, содержащего 5'-фосфоротиоатную группу, концевого нуклеотида, связанного с производным холестерина или бисдециламидной группой додекановой кислоты, 2'-дезокси-2'-фтор-модифицированного нуклеотида, 2'-дезоксимодифицированного нуклеотида, замкнутого нуклеотида, нуклеотида с удаленными азотистыми основаниями, 2’-аминомодифицированного нуклеотида, 2’-алкилмодифицированного нуклеотида, морфолинового нуклеотида, фосфорамидата и содержащего неприродное основание нуклеотида.

6. ДцРНК по п. 3, где нуклеотидные последовательности смысловой цепи и антисмысловой цепи соответственно являются следующими:

(a) 5’-uAuuuGAucAGucuuuuuAdTsdT-3’ и 5’-uAAAAAGACUGAUcAAAuAdTsdT-3’;

(b) 5’-AcAuAuuuGAucAGucuuudTsdT-3’ и 5’-AAAGACUGAUcAAAuAUGUdTsdT-3’;

(c) 5’-AuuuGAucAGucuuuuuAudTsdT-3’ и 5’-AuAAAAAGACUGAUcAAAUdTsdT-3’;

(d) 5’-cAAcAuAuuuGAucAGucudTsdT-3’ и AGACUGAUcAAAuAUGUUGdTsdT-3’;

(e) 5’-AfcAfuAfuUfuGfAfUfcAfgUfcUfuUfuUf-3’ и 5’-aAfaAfaGfaCfuGfaucAfaAfuAfuGfusUfsg-3’;

(f) 5’-CfaAfcAfuAfuUfUfGfaUfcAfgUfcUfuUf-3’ и 5’-aAfaGfaCfuGfaUfcaaAfuAfuGfuUfgsAfsg-3’;

(g) 5’-AfaCfaUfaUfuUfGfAfuCfaGfuCfuUfuUf-3’ и 5’-aAfaAfgAfcUfgAfucaAfaUfaUfgUfusGfsa-3’;

(h) 5’-AfuCfaGfuCfuUfUfUfuAfuGfaUfcUfaUf-3’ и 5’-aUfaGfaUfcAfuAfaaaAfgAfcUfgAfusCfsa-3’;

(i) 5’-CfaAfaAfaCfuCfAfAfcAfuAfuUfuGfaUf-3’ и 5’-aUfcAfaAfuAfuGfuugAfgUfuUfuUfgsAfsa-3’;

(j) 5’-UfcAfaCfaUfaUfUfUfgAfuCfaGfuCfuUf-3’ и 5’-aAfgAfcUfgAfuCfaaaUfaUfgUfuGfasGfsu-3’;

(k) 5’-CfaUfaUfuUfgAfUfCfaGfuCfuUfuUfuAf-3’ и 5’-uAfaAfaAfgAfcUfgauCfaAfaUfaUfgsUfsu-3’;

(l) 5’-GfaUfcAfgUfcUfUfUfuUfaUfgAfuCfuAf-3’ и 5’-uAfgAfuCfaUfaAfaaaGfaCfuGfaUfcsAfsa-3’;

где строчные буквы a, c, g и u обозначают соответствующий 2’-O-метилнуклеотид; s представляет собой тиофосфатную связь; буква, за которой следует «f», обозначает соответствующий 2’-фторнуклеотид.

7. ДцРНК по любому из пп. 1-6, где область комплементарности составляет по меньшей мере 17 нуклеотидов в длину или от 19 до 21 нуклеотидов в длину.

8. ДцРНК по п. 7, где область комплементарности имеет длину 19 нуклеотидов.

9. ДцРНК по любому из пп. 1-8, где каждая цепь имеет длину не более 30 нуклеотидов.

10. ДцРНК по любому из пп. 1-9, где по меньшей мере одна цепь содержит 3’-липкий конец по меньшей мере из 1 нуклеотида или по меньшей мере из 2 нуклеотидов.

11. ДцРНК по любому из пп. 1-10, дополнительно содержащая лиганд.

12. ДцРНК по любому из пп. 1-11, где лиганд конъюгирован с 3'-концом смысловой цепи дцРНК.

13. ДцРНК по любому из пп. 1-11, где лиганд представляет собой производное N-ацетилгалактозамина (GalNAc).

14. ДцРНК по п. 13, где лиганд представляет собой

15. Клетка in vitro, содержащая дцРНК по любому из пп. 1-14.

16. Фармацевтическая композиция для ингибирования экспрессии гена ANGPTL3, содержащая дцРНК по любому из пп. 1-14.

17. Фармацевтическая композиция по п. 16, дополнительно содержащая липидный состав.

18. Фармацевтическая композиция по п. 17, где липидный состав включает МС3.

19. Способ ингибирования экспрессии ANGPTL3 в клетке in vitro, включающий:

(а) приведение клетки в контакт с дцРНК по любому из пп. 1-14; и

(b) поддержание клетки, продуцируемой на стадии (а), в течение времени, достаточного для получения деградации транскрипта мРНК гена ANGPTL3, тем самым ингибируя экспрессию гена ANGPTL3 в клетке.

20. Способ лечения индивидуума с нарушением, на которое окажет благоприятное действие снижение экспрессии ANGPTL3, включающий введение индивидууму терапевтически эффективного количества дцРНК по любому из пп. 1-14.

21. Способ по п. 20, где нарушение представляет собой нарушение метаболизма липидов.

22. Способ по п. 21, в котором нарушение метаболизма липидов представляет собой гиперлипидемию или гипертриглицеридемию.

23. Способ по любому из пп. 20-22, в котором дцРНК вводят индивидууму в дозе от приблизительно 0,01 мг/кг до приблизительно 10 мг/кг или от приблизительно 5 мг/кг до приблизительно 50 мг/кг.