RU2015122802A - Клонированное животное, отличное от человека, которое не содержит селективный маркер - Google Patents
Клонированное животное, отличное от человека, которое не содержит селективный маркер Download PDFInfo
- Publication number
- RU2015122802A RU2015122802A RU2015122802A RU2015122802A RU2015122802A RU 2015122802 A RU2015122802 A RU 2015122802A RU 2015122802 A RU2015122802 A RU 2015122802A RU 2015122802 A RU2015122802 A RU 2015122802A RU 2015122802 A RU2015122802 A RU 2015122802A
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- promoter
- recombinase
- somatic cell
- cells
- genetically modified
- Prior art date
Links
- 239000003550 marker Substances 0.000 title claims 24
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 title claims 6
- 210000001082 somatic cell Anatomy 0.000 claims 32
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims 31
- 108010091086 Recombinases Proteins 0.000 claims 22
- 102000018120 Recombinases Human genes 0.000 claims 21
- 108010052160 Site-specific recombinase Proteins 0.000 claims 20
- 210000000287 oocyte Anatomy 0.000 claims 19
- 230000006798 recombination Effects 0.000 claims 18
- 238000005215 recombination Methods 0.000 claims 18
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims 12
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims 12
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims 12
- 238000000034 method Methods 0.000 claims 11
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 claims 9
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 claims 7
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 claims 7
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 claims 6
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims 5
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims 5
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims 5
- 210000002459 blastocyst Anatomy 0.000 claims 4
- 230000035897 transcription Effects 0.000 claims 4
- 238000013518 transcription Methods 0.000 claims 4
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 claims 3
- 241000282412 Homo Species 0.000 claims 3
- 101710135898 Myc proto-oncogene protein Proteins 0.000 claims 3
- 102100038895 Myc proto-oncogene protein Human genes 0.000 claims 3
- 101100247004 Rattus norvegicus Qsox1 gene Proteins 0.000 claims 3
- 101710150448 Transcriptional regulator Myc Proteins 0.000 claims 3
- 101150111214 lin-28 gene Proteins 0.000 claims 3
- 210000001789 adipocyte Anatomy 0.000 claims 2
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 claims 2
- 210000002449 bone cell Anatomy 0.000 claims 2
- 210000005229 liver cell Anatomy 0.000 claims 2
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 claims 2
- 210000000663 muscle cell Anatomy 0.000 claims 2
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 claims 2
- 210000001778 pluripotent stem cell Anatomy 0.000 claims 2
- 210000004927 skin cell Anatomy 0.000 claims 2
- 241000283707 Capra Species 0.000 claims 1
- 241000283074 Equus asinus Species 0.000 claims 1
- 241000283073 Equus caballus Species 0.000 claims 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 claims 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 claims 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims 1
- 238000002513 implantation Methods 0.000 claims 1
- 210000003292 kidney cell Anatomy 0.000 claims 1
- 210000004291 uterus Anatomy 0.000 claims 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New or modified breeds of animals
- A01K67/027—New or modified breeds of vertebrates
- A01K67/0273—Cloned vertebrates
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61D—VETERINARY INSTRUMENTS, IMPLEMENTS, TOOLS, OR METHODS
- A61D19/00—Instruments or methods for reproduction or fertilisation
- A61D19/04—Instruments or methods for reproduction or fertilisation for embryo transplantation
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New or modified breeds of animals
- A01K67/027—New or modified breeds of vertebrates
- A01K67/0275—Genetically modified vertebrates, e.g. transgenic
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/87—Introduction of foreign genetic material using processes not otherwise provided for, e.g. co-transformation
- C12N15/873—Techniques for producing new embryos, e.g. nuclear transfer, manipulation of totipotent cells or production of chimeric embryos
- C12N15/877—Techniques for producing new mammalian cloned embryos
- C12N15/8771—Bovine embryos
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/87—Introduction of foreign genetic material using processes not otherwise provided for, e.g. co-transformation
- C12N15/873—Techniques for producing new embryos, e.g. nuclear transfer, manipulation of totipotent cells or production of chimeric embryos
- C12N15/877—Techniques for producing new mammalian cloned embryos
- C12N15/8778—Swine embryos
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2217/00—Genetically modified animals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2217/00—Genetically modified animals
- A01K2217/20—Animal model comprising regulated expression system
- A01K2217/203—Animal model comprising inducible/conditional expression system, e.g. hormones, tet
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2227/00—Animals characterised by species
- A01K2227/10—Mammal
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2267/00—Animals characterised by purpose
- A01K2267/01—Animal expressing industrially exogenous proteins
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2800/00—Nucleic acids vectors
- C12N2800/30—Vector systems comprising sequences for excision in presence of a recombinase, e.g. loxP or FRT
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2830/00—Vector systems having a special element relevant for transcription
- C12N2830/008—Vector systems having a special element relevant for transcription cell type or tissue specific enhancer/promoter combination
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2840/00—Vectors comprising a special translation-regulating system
- C12N2840/007—Vectors comprising a special translation-regulating system cell or tissue specific
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2999/00—Further aspects of viruses or vectors not covered by groups C12N2710/00 - C12N2796/00 or C12N2800/00
- C12N2999/007—Technological advancements, e.g. new system for producing known virus, cre-lox system for production of transgenic animals
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Developmental Biology & Embryology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Transplantation (AREA)
- Reproductive Health (AREA)
- Public Health (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Claims (54)
1. Генетически модифицированная соматическая клетка животного, отличного от человека, которая содержит самоудаляющуюся кассету для экспрессии рекомбиназы, содержащую ген сайт-специфической рекомбиназы, функционально связанный с промотором, специфичным для эмбриональных стволовых (ЭС) клеток,
причем указанная кассета с сайт-специфической рекомбиназой в 3'-5' направлении и в 5'-3' направлении фланкирована первым и вторым сайтами рекомбинации, ориентированными в одном и том же направлении по отношению друг к другу так, что указанная кассета может быть удалена в присутствии указанной сайт-специфической рекомбиназы, и
при этом указанный промотор, специфичный для ЭС-клеток, обеспечивает транскрипцию гена сайт-специфической рекомбиназы в недифференцированных плюрипотентных стволовых клетках, но не в генетически модифицированных соматических клетках.
2. Генетически модифицированная соматическая клетка по п. 1, отличающаяся тем, что указанная соматическая клетка выбрана из группы, состоящей из клетки кожи, клетки крови, нервной клетки, мышечной клетки, клетки кости, клетки почки, клетки печени и жировой клетки.
3. Генетически модифицированная соматическая клетка по п. 1, отличающаяся тем, что указанная соматическая клетка представляет собой фибробласт.
4. Генетически модифицированная соматическая клетка по п. 3, отличающаяся тем, что указанный фибробласт получен из свиньи.
5. Генетически модифицированная соматическая клетка по п. 4, отличающаяся тем, что указанная свинья является карликовой свиньей.
6. Генетически модифицированная соматическая клетка по п. 3, отличающаяся тем, что указанный фибробласт получен из коровы.
7. Генетически модифицированная соматическая клетка по п. 1, отличающаяся тем, что указанный промотор, специфичный для ЭС-клеток, выбран из группы, состоящей из промотора Oct-3/4, промотора Sox2, промотора Kif4, промотора с-Мус, промотора Nanog, промотора Lin28 и их комбинации.
8. Генетически модифицированная соматическая клетка по п. 1, отличающаяся тем, что указанный промотор, специфичный для ЭС-клеток, обеспечивает транскрипцию гена указанной сайт-специфической рекомбиназы в ЭС-клетках эмбриона на стадии бластоцисты.
9. Генетически модифицированная соматическая клетка по п. 1, отличающаяся тем, что указанная самоудаляющаяся кассета для экспрессии рекомбиназы дополнительно содержит ген селективного маркера между указанными первым и вторым сайтами рекомбинации, причем указанный ген селективного маркера функционально связан с промотором.
10. Генетически модифицированная соматическая клетка по п. 9, отличающаяся тем, что указанный промотор, функционально связанный с указанным геном селективного маркера, представляет собой конститутивный промотор.
11. Генетически модифицированная соматическая клетка по п. 1, отличающаяся тем, что указанная самоудаляющаяся кассета для экспрессии рекомбиназы не содержит гена селективного маркера, и указанный ген селективного маркера расположен в другом локусе генома указанной соматической клетки, и при этом указанный ген селективного маркера в 3'-5' направлении и в 5'-3' направлении фланкирован третьим и четвертым сайтами рекомбинации, ориентированными в одном и том же направлении по отношению друг к другу таким образом, что указанный селективный маркер может быть удален в присутствии указанной сайт-специфической рекомбиназы.
12. Генетически модифицированная соматическая клетка по п. 1, отличающаяся тем, что генетически модифицированный геном указанной соматической клетки содержит аллель, инактивирующийся в заданных условиях, и при этом указанный аллель, инактивирующийся в заданных условиях, в 3'-5' направлении и в 5'-3' направлении фланкирован первым и вторым сайтами рекомбинации так, что указанный аллель, инактивирующийся в заданных условиях, может быть удален в присутствии указанной сайт-специфической рекомбиназы.
13. Генетически модифицированная соматическая клетка по п. 1, отличающаяся тем, что указанная кассета для экспрессии рекомбиназы содержит нуклеотидную последовательность, гомологичную по меньшей мере одному экзону эндогенного гена-мишени, причем указанная нуклеотидная последовательность в 3'-5' направлении и в 5'-3' направлении фланкирована первым и вторым сайтами рекомбинации.
14. Генетически модифицированная соматическая клетка по п. 1, отличающаяся тем, что указанная кассета для экспрессии рекомбиназы содержит нуклеотидную последовательность, гомологичную по меньшей мере одному интрону эндогенного гена-мишени, причем указанная нуклеотидная последовательность в 3'-5' направлении и в 5'-3' направлении фланкирована первым и вторым сайтами рекомбинации.
15. Генетически модифицированная соматическая клетка по п. 1, отличающаяся тем, что указанная самоудаляющаяся кассета для экспрессии рекомбиназы располагается в транскрипционно активном локусе генома указанной соматической клетки.
16. Генетически модифицированная соматическая клетка по п. 1, отличающаяся тем, что указанная сайт-специфическая рекомбиназа выбрана из группы, состоящей из рекомбиназ Cre, Flp и Dre.
17. Способ получения генетически модифицированного и клонированного животного, отличного от человека, не содержащего гена селективного маркера и гена рекомбиназы, включающий:
(a) осуществление внедрения конструкции нуклеиновой кислоты в дифференцированную соматическую клетку животного, отличного от человека, с получением генетически модифицированного генома;
(b) осуществление переноса указанного генетически модифицированного генома, полученного на этапе (а), в ооцит хозяина с удаленным ядром;
(c) осуществление слияния и активации указанного ооцита, полученного на этапе (b), с получением искусственной зиготы;
(d) культивирование указанной искусственной зиготы, полученной на этапе (с), до момента достижения указанной зиготой стадии бластоцисты; и
(e) осуществление имплантации указанной бластоцисты, полученной на этапе (d), в матку суррогатной матери, с получением генетически модифицированного клонированного животного, отличного от человека, не содержащего гена указанного селективного маркера и указанного гена рекомбиназы,
причем указанная конструкция нуклеиновой кислоты содержит самоудаляющуюся кассету для экспрессии рекомбиназы, содержащую ген сайт-специфической рекомбиназы, функционально связанный с промотором, специфичным для ЭС клеток,
при этом указанная кассета для экспрессии рекомбиназы, в 3'-5' направлении и в 5'-3' направлении фланкирована первым и вторым сайтами рекомбинации, ориентированными в одном и том же направлении так, что кассета может быть удалена в присутствии указанной сайт-специфической рекомбиназы, и
причем указанный промотор, специфичный для ЭС-клеток, обеспечивает транскрипцию гена указанной сайт-специфической рекомбиназы в недифференцированных плюрипотентных стволовых клетках, но не в дифференцированной соматической клетке.
18. Способ по п. 17, отличающийся тем, что указанный промотор, специфичный для ЭС-клеток, выбран из группы, состоящей из промотора Oct-3/4, промотора Sox2, промотора Kif4, промотора с-Мус, промотора Nanog, промотора Lin28 и их комбинации.
19. Способ по п. 17, отличающийся тем, что указанная самоудаляющаяся кассета для экспрессии рекомбиназы содержит ген селективного маркера, расположенный между первым и вторым сайтами рекомбинации, причем указанный ген селективного маркера функционально связан с промотором.
20. Способ по п. 19, отличающийся тем, что указанный промотор, функционально связанный с указанным геном селективного маркера, является конститутивным промотором.
21. Способ по п. 17, отличающийся тем, что указанная самоудаляющаяся кассета для экспрессии рекомбиназы не содержит ген селективного маркера, и указанный ген селективного маркера расположен в другом локусе генома указанной соматической клетки, причем указанный ген селективного маркера в 3'-5' направлении и в 5'-3' направлении фланкирован третьим и четвертым сайтами рекомбинации, ориентированными в одном и том же направлении по отношению друг к другу таким образом, что указанный селективный маркер может быть удален в присутствии указанной сайт-специфической рекомбиназы.
22. Способ по п. 17, отличающийся тем, что геном указанной соматической клетки содержит аллель, инактивирующийся в заданных условиях, причем указанный аллель, инактивирующийся в заданных условиях, в 3'-5' направлении и в 5'-3' направлении фланкирован первым и вторым сайтами рекомбинации так, что указанный аллель, инактивирующийся в заданных условиях, может быть удален в присутствии указанной сайт-специфической рекомбиназы.
23. Способ по п. 17, отличающийся тем, что указанная конструкция нуклеиновой кислоты содержит нуклеотидную последовательность, гомологичную по меньшей мере одному экзону эндогенного гена-мишени, причем указанная нуклеотидная последовательность в 3'-5' направлении и в 5'-3' направлении фланкирована первым и вторым сайтами рекомбинации.
24. Способ по п. 17, отличающийся тем, что указанная конструкция нуклеиновой кислоты содержит нуклеотидную последовательность, гомологичную по меньшей мере одному интрону эндогенного гена-мишени, причем указанная нуклеотидная последовательность в 3'-5' направлении и в 5'-3' направлении фланкирована первым и вторым сайтами рекомбинации.
25. Способ по п. 17, отличающийся тем, что указанная конструкция нуклеиновой кислоты содержит ген селективного маркера, функционально связанный с промотором.
26. Способ по п. 23, отличающийся тем, что указанный промотор представляет собой конститутивный промотор.
27. Способ по п. 17, отличающийся тем, что указанная сайт-специфическая рекомбиназа выбрана из группы, состоящей из рекомбиназ Cre, Flp и Dre.
28. Клонированный ооцит животного, отличного от человека, содержащий генетически модифицированный геном дифференцированной соматической клетки, причем указанный генетически модифицированный геном содержит самоудаляющуюся кассету, для экспрессии рекомбиназы, в которой ген сайт-специфической рекомбиназы функционально связан с промотором, специфичным для ЭС-клеток, причем указанная самоудаляющаяся кассета для экспрессии рекомбиназы, фланкирована первым и вторым сайтами рекомбинации, ориентированными в одном и том же направлении по отношению друг к другу так, что указанная кассета может быть удалена в присутствии указанной сайт-специфической рекомбиназы.
29. Клонированный ооцит по п. 28, отличающийся тем, что указанное животное, отличное от человека, выбрано из группы, состоящей из мыши, крысы, кролика, птицы, коровы, свиньи, овцы, козы, лошади и осла.
30. Клонированный ооцит по п. 28, отличающийся тем, что указанная дифференцированная соматическая клетка выбрана из группы, состоящей из клетки кожи, клетки крови, нервной клетки, мышечной клетки, клетки кости, клетки печени и жировой клетки.
31. Клонированный ооцит по п. 28, отличающийся тем, что указанная дифференцированная соматическая клетка представляет собой фибробласт.
32. Клонированный ооцит по п. 31, отличающийся тем, что указанный фибробласт получен из свиньи.
33. Клонированный ооцит по п. 32, отличающийся тем, что указанная свинья является карликовой свиньей.
34. Клонированный ооцит по п. 31, отличающийся тем, что указанный фибробласт получен из коровы.
35. Клонированный ооцит по п. 28, отличающийся тем, что указанный промотор, специфичный для ЭС-клеток, выбран из группы, состоящей из промотора Oct-3/4, промотора Sox2, промотора Kif4, промотора с-Мус, промотора Nanog, промотора Lin28 и их комбинации.
36. Клонированный ооцит по п. 28, отличающийся тем, что указанный промотор, специфичный для ЭС-клеток, обеспечивает транскрипцию указанного гена сайт-специфической рекомбиназы в ЭС-клетках эмбриона на стадии бластоцисты.
37. Клонированный ооцит по п. 28, отличающийся тем, что указанная самоудаляющаяся кассета для экспрессии рекомбиназы дополнительно содержит ген селективного маркера между первым и вторым сайтами рекомбинации, причем указанный ген селективного маркера функционально связан с промотором.
38. Клонированный ооцит по п. 37, отличающийся тем, что указанный промотор, функционально связанный с геном указанного селективного маркера, является конститутивным промотором.
39. Клонированный ооцит по п. 28, отличающийся тем, что указанная самоудаляющаяся кассета для экспрессии рекомбиназы не содержит гена селективного маркера, и указанный ген селективного маркера расположен в другом локусе генома указанной соматической клетки, причем указанный ген селективного маркера в 3'-5' направлении и в 5'-3' направлении фланкирован третьим и четвертым сайтами рекомбинации, ориентированными в одном и том же направлении по отношению друг к другу таким образом, что указанный селективный маркер может быть удален в присутствии указанной сайт-специфической рекомбиназы.
40. Клонированный ооцит по п. 28, отличающийся тем, что указанный геном соматической клетки содержит аллель, инактивирующийся в заданных условиях, причем указанный аллель, инактивирующийся в заданных условиях, в 3'-5' направлении и в 5'-3' направлении фланкирован первым и вторым сайтами рекомбинации так, что указанный аллель, инактивирующийся в заданных условиях, может быть удален в присутствии указанной сайт-специфической рекомбиназы.
41. Клонированный ооцит по п. 28, отличающийся тем, что указанная самоудаляющаяся кассета для экспрессии рекомбиназы, содержит нуклеотидную последовательность, гомологичную по меньшей мере одному экзону эндогенного гена-мишени, причем указанная нуклеотидная последовательность в 3'-5' направлении и в 5'-3' направлении фланкирована первым и вторым сайтами рекомбинации.
42. Клонированный ооцит по п. 28, отличающийся тем, что указанная самоудаляющаяся кассета для экспрессии рекомбиназы содержит нуклеотидную последовательность, гомологичную по меньшей мере одному интрону эндогенного гена-мишени, причем указанная нуклеотидная последовательность в 3'-5' направлении и в 5'-3' направлении фланкирована первым и вторым сайтами рекомбинации.
43. Клонированный ооцит по п. 28, отличающийся тем, что указанная самоудаляющаяся кассета для экспрессии рекомбиназы расположена в транскрипционно активном локусе генома указанной соматической клетки.
44. Клонированный ооцит по п. 28, отличающийся тем, что указанная сайт-специфическая рекомбиназа выбрана из группы, состоящей из рекомбиназ Cre, Flp и Dre.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201261730771P | 2012-11-28 | 2012-11-28 | |
| US61/730,771 | 2012-11-28 | ||
| PCT/US2013/072088 WO2014085501A1 (en) | 2012-11-28 | 2013-11-26 | Cloned non-human animals free of selective markers |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RU2015122802A true RU2015122802A (ru) | 2017-01-10 |
Family
ID=49725406
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RU2015122802A RU2015122802A (ru) | 2012-11-28 | 2013-11-26 | Клонированное животное, отличное от человека, которое не содержит селективный маркер |
Country Status (16)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20140221734A1 (ru) |
| EP (1) | EP2925122A1 (ru) |
| JP (2) | JP6154479B2 (ru) |
| KR (1) | KR20150089004A (ru) |
| CN (1) | CN104918484A (ru) |
| AU (1) | AU2013352235A1 (ru) |
| BR (1) | BR112015012408A2 (ru) |
| CA (1) | CA2891163A1 (ru) |
| HK (1) | HK1211177A1 (ru) |
| IL (1) | IL238771A0 (ru) |
| MX (1) | MX353279B (ru) |
| MY (1) | MY193790A (ru) |
| RU (1) | RU2015122802A (ru) |
| SG (1) | SG11201503752SA (ru) |
| WO (1) | WO2014085501A1 (ru) |
| ZA (1) | ZA201503305B (ru) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP2877571B1 (en) | 2013-09-18 | 2018-05-30 | Kymab Limited | Methods, cells and organisms |
| US11246299B2 (en) | 2015-03-04 | 2022-02-15 | Pormedtec Co., Ltd. | Disease model pig exhibiting stable phenotype, and production method thereof |
| CN105200086A (zh) * | 2015-10-22 | 2015-12-30 | 中国农业科学院北京畜牧兽医研究所 | 一种无选择标记的多基因复合性状基因工程猪的制备方法 |
| CA3099441A1 (en) | 2018-06-13 | 2019-12-19 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | A rodent model of fibrodysplasia ossificans progressiva |
| CN109504708A (zh) * | 2018-12-03 | 2019-03-22 | 江苏集萃药康生物科技有限公司 | 一种筛选标记自我删除的基因打靶载体及方法 |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP1375654A3 (en) * | 1998-11-02 | 2008-01-16 | GTC Biotherapeutics, Inc. | Transgenic and cloned mammals |
| US7049480B1 (en) * | 2000-09-01 | 2006-05-23 | Avigenics, Inc. | Methods of enucleating an avian oocyte or zygote using two-photon laser scanning microscopy |
| WO2006035741A1 (ja) * | 2004-09-29 | 2006-04-06 | Dainippon Sumitomo Pharma Co., Ltd. | Ｅｓ細胞特異的発現遺伝子及びその利用 |
| WO2009121999A1 (es) * | 2008-04-04 | 2009-10-08 | Consejo Superior De Investigaciones Científicas | Promotor especifico de celulas troncales |
| US8354389B2 (en) * | 2009-08-14 | 2013-01-15 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | miRNA-regulated differentiation-dependent self-deleting cassette |
| CN102628061A (zh) * | 2012-04-09 | 2012-08-08 | 西北农林科技大学 | 一种hbd3 乳腺特异性表达载体及构建的重组细胞 |
-
2013
- 2013-11-26 KR KR1020157012263A patent/KR20150089004A/ko not_active Application Discontinuation
- 2013-11-26 JP JP2015544195A patent/JP6154479B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2013-11-26 BR BR112015012408A patent/BR112015012408A2/pt not_active IP Right Cessation
- 2013-11-26 SG SG11201503752SA patent/SG11201503752SA/en unknown
- 2013-11-26 CA CA2891163A patent/CA2891163A1/en not_active Abandoned
- 2013-11-26 EP EP13802213.2A patent/EP2925122A1/en not_active Withdrawn
- 2013-11-26 AU AU2013352235A patent/AU2013352235A1/en not_active Abandoned
- 2013-11-26 WO PCT/US2013/072088 patent/WO2014085501A1/en active Application Filing
- 2013-11-26 CN CN201380060720.0A patent/CN104918484A/zh active Pending
- 2013-11-26 MX MX2015006810A patent/MX353279B/es active IP Right Grant
- 2013-11-26 RU RU2015122802A patent/RU2015122802A/ru not_active Application Discontinuation
- 2013-11-26 US US14/091,207 patent/US20140221734A1/en not_active Abandoned
- 2013-11-26 MY MYPI2015001216A patent/MY193790A/en unknown
-
2015
- 2015-05-12 ZA ZA2015/03305A patent/ZA201503305B/en unknown
- 2015-05-12 IL IL238771A patent/IL238771A0/en unknown
- 2015-12-10 HK HK15112184.4A patent/HK1211177A1/xx unknown
-
2016
- 2016-11-22 JP JP2016226816A patent/JP6227747B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| SG11201503752SA (en) | 2015-06-29 |
| CN104918484A (zh) | 2015-09-16 |
| JP6227747B2 (ja) | 2017-11-08 |
| KR20150089004A (ko) | 2015-08-04 |
| AU2013352235A1 (en) | 2015-05-28 |
| MX2015006810A (es) | 2015-09-07 |
| MX353279B (es) | 2018-01-05 |
| BR112015012408A2 (pt) | 2017-07-11 |
| JP2017060502A (ja) | 2017-03-30 |
| EP2925122A1 (en) | 2015-10-07 |
| ZA201503305B (en) | 2016-05-25 |
| HK1211177A1 (en) | 2016-05-20 |
| CA2891163A1 (en) | 2014-06-05 |
| MY193790A (en) | 2022-10-27 |
| IL238771A0 (en) | 2015-06-30 |
| JP6154479B2 (ja) | 2017-06-28 |
| US20140221734A1 (en) | 2014-08-07 |
| JP2016502407A (ja) | 2016-01-28 |
| WO2014085501A1 (en) | 2014-06-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2731437T3 (es) | Métodos y composiciones para la modificación genética dirigida mediante el uso de pares de ARN guías | |
| RU2685914C1 (ru) | Способы и композиции для направленной модификации генома | |
| RU2015122802A (ru) | Клонированное животное, отличное от человека, которое не содержит селективный маркер | |
| JP2015533284A5 (ru) | ||
| RU2015101740A (ru) | Генетически модифицированные животные и способы их получения | |
| RU2015120467A (ru) | Контроль полового созревания у животных | |
| RU2018107842A (ru) | Устойчивые к патогенам животные, имеющие модифицированные гены cd163 | |
| JP2020108409A (ja) | ｌｉｎｃＲＮＡ欠失非ヒト動物 | |
| CN105142396A (zh) | 缺角家畜 | |
| JP2017513510A5 (ru) | ||
| JP2016502407A5 (ru) | ||
| JP2020534789A (ja) | 改変ヌクレアーゼを産生するトランスジェニック動物およびトランスジェニック胚 | |
| Yum et al. | Long-term health and germline transmission in transgenic cattle following transposon-mediated gene transfer | |
| RU2018103234A (ru) | Гуманизированная мышца сердца | |
| RU2017132331A (ru) | Etv2 и его применения | |
| JP2018522553A5 (ru) | ||
| Singh et al. | The domesticated buffalo-an emerging model for experimental and therapeutic use of extraembryonic tissues | |
| CN109679998A (zh) | 一种定点突变MSTN并同时定点整合PPARγ的载体 | |
| EP4144857A1 (en) | Animal preparation method | |
| ES2975317T3 (es) | Métodos y composiciones para la modificación dirigida de un genoma | |
| WO2011158845A1 (ja) | 誘導多能性幹細胞の製造方法、及びその製造方法により得られる誘導多能性幹細胞 | |
| Siripattarapravat et al. | The influence of donor nucleus source on the outcome of zebrafish somatic cell nuclear transfer | |
| Hussain et al. | CRISPR/Cas System and Stem Cell Editing: Prospects and Possibilities in Veterinary Sciences | |
| Rahimi et al. | Transgenic Mice and Pluripotent Stem Cells Express EGFP under the Control of miR-302 Promoter | |
| EP3120700A1 (en) | Microinjection into a cell's nucleus following somatic cell nuclear transfer |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FA94 | Acknowledgement of application withdrawn (non-payment of fees) |
Effective date: 20190626 |