RU2015101081A - Стабилизированный gp120 - Google Patents

Abstract

1. Выделенный полипептид, содержащий полипептид gp120 или растворимый полипептид gp140 ВИЧ, стабилизированный в конформации, при которой одновременно экспонированы как CD4-связанный эпитоп, так и эпитоп сайта связывания CD4.2. Выделенный полипептид по п. 1, где полипептид gp120 или растворимый полипептид gp140 ВИЧ включает внутренний домен, включающий слои 1, 2 и 3 и стабилизирован одним или более межслойными контактами между указанными слоями 1 и 2 и/или между указанными слоями 2 и 3, образованными дисульфидной связью.3. Выделенный полипептид по п. 2, в котором дисульфидная связь образована между остатками цистеина в положениях, эквивалентных одной или более парам аминокислот: V59C и S109C, V95C и W465C, V95C и R462C, V95C и L469C и/или Н99С и R462C в SEQ ID NO: 2.4. Выделенный полипептид по п. 1, отличающийся тем, что стабилизированный полипептид gp120 или растворимый полипептид gp140 ВИЧ содержит аминокислотную последовательность, которая имеет по меньшей мере 90% идентичности с последовательностью внутреннего домена, приведенной в SEQ ID NO: 2, и содержит одну или более пар неприродных остатков цистеина в положениях, эквивалентных V59 и S109, V95 и W465, V95 и R462, V95 и L469 и/или Н99 и R462 в SEQ ID NO: 2.5. Выделенный полипептид по п. 1, отличающийся тем, что стабилизированный полипептид gp120 или растворимый полипептид gp140 ВИЧ содержит аминокислотную последовательность, которая имеет по меньшей мере 90% идентичности с последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 2, и содержит одну или более пар неприродных остатков цистеина в положениях, эквивалентных V59 и S109, V95 и W465, V95 и R462, V95 и L469 и/или Н99 и R462 в SEQ ID NO: 2.6. Выделенный полипептид по п. 1, отличающийся тем, что стабилизированный полипептид gp120 или растворимый полипептид gp140 ВИЧ содержит одну или более не кодируемых естественных пар остатков цистеина в положениях, соответствующих W90 и Е268, 1103 и Q413 в SEQ ID NO: 2.7.

Claims (18)

1. Выделенный полипептид, содержащий полипептид gp120 или растворимый полипептид gp140 ВИЧ, стабилизированный в конформации, при которой одновременно экспонированы как CD4-связанный эпитоп, так и эпитоп сайта связывания CD4.

2. Выделенный полипептид по п. 1, где полипептид gp120 или растворимый полипептид gp140 ВИЧ включает внутренний домен, включающий слои 1, 2 и 3 и стабилизирован одним или более межслойными контактами между указанными слоями 1 и 2 и/или между указанными слоями 2 и 3, образованными дисульфидной связью.

3. Выделенный полипептид по п. 2, в котором дисульфидная связь образована между остатками цистеина в положениях, эквивалентных одной или более парам аминокислот: V59C и S109C, V95C и W465C, V95C и R462C, V95C и L469C и/или Н99С и R462C в SEQ ID NO: 2.

4. Выделенный полипептид по п. 1, отличающийся тем, что стабилизированный полипептид gp120 или растворимый полипептид gp140 ВИЧ содержит аминокислотную последовательность, которая имеет по меньшей мере 90% идентичности с последовательностью внутреннего домена, приведенной в SEQ ID NO: 2, и содержит одну или более пар неприродных остатков цистеина в положениях, эквивалентных V59 и S109, V95 и W465, V95 и R462, V95 и L469 и/или Н99 и R462 в SEQ ID NO: 2.

5. Выделенный полипептид по п. 1, отличающийся тем, что стабилизированный полипептид gp120 или растворимый полипептид gp140 ВИЧ содержит аминокислотную последовательность, которая имеет по меньшей мере 90% идентичности с последовательностью, приведенной в SEQ ID NO: 2, и содержит одну или более пар неприродных остатков цистеина в положениях, эквивалентных V59 и S109, V95 и W465, V95 и R462, V95 и L469 и/или Н99 и R462 в SEQ ID NO: 2.

6. Выделенный полипептид по п. 1, отличающийся тем, что стабилизированный полипептид gp120 или растворимый полипептид gp140 ВИЧ содержит одну или более не кодируемых естественных пар остатков цистеина в положениях, соответствующих W90 и Е268, 1103 и Q413 в SEQ ID NO: 2.

7. Выделенный полипептид по п. 4 или 5, отличающийся тем, что стабилизированный полипептид gp120 ВИЧ содержит аминокислотную последовательность, приведенную в SEQ ID NOs: 4, 6, 8, 10, 12, 14, 16, 18, 20 или 22.

8. Иммуногенный фрагмент выделенного полипептида по п. 1, который содержит и экспонирует как CD4-связанный эпитоп, так и эпитоп сайта связывания CD4 gp120 ВИЧ.

9. Слитый белок, содержащий выделенный полипептид по любому из пп. 1-6 или иммуногенный фрагмент по п. 8 и дополнительный полипептид.

10. Слитый белок, содержащий выделенный полипептид по п. 7.

11. Тример, содержащий три субъединицы, при этом каждая субъединица независимо выбрана из группы, состоящей из выделенного полипептида по любому из пп. 1-7, иммуногенного фрагмента по п. 8 и слитого белка по п. 9 или 10.

12. Выделенный полинуклеотид, кодирующий выделенный полипептид по любому из пп. 1-7, иммуногенный фрагмент по п. 8 или слитый белок по п. 9 или 10.

13. Полинуклеотид по п. 12, содержащий нуклеотидную последовательность, имеющую по меньшей мере 90% идентичности с последовательностью, приведенной в SEQ ID NOs: 3, 5, 7, 9, 11, 13, 15, 17, 19 или 21.

14. Иммуногенная композиция, содержащая выделенный полипептид по любому из пп. 1-7, иммуногенный фрагмент по п. 8, слитый белок по п. 9 или 10, тример по п. 11 и/или полинуклеотид по п. 12 или 13.

15. Иммуногенная композиция по п. 14, дополнительно содержащая адъювант.

16. Способ генерирования иммунного ответа у пациента, включающий введение выделенного полипептида по любому из пп. 1-7, иммуногенного фрагмента по п. 8, слитого белка по п. 9 или 10, тримера по п. 11, полинуклеотида по п. 12 или 13 или иммуногенной композиции по п. 14 или 15, пациенту.

17. Выделенный полипептид по любому из пп. 1-7, иммуногенный фрагмент по п. 8, слитый белок по п. 9 или 10, тример по п. 11, полинуклеотид по п. 12 или 13 и/или иммуногенная композиция по п. 14 или 15 для применения в лечении или профилактике ВИЧ-инфекции и/или СПИДа у пациента.

18. Выделенный полипептид, иммуногенный фрагмент, слитый белок, тример, полинуклеотид или иммуногенная композиция по п. 17, причем пациентом является человек.