RU2014152417A

RU2014152417A - Способ многоаналитного иммуноанализа

Info

Publication number: RU2014152417A
Application number: RU2014152417A
Authority: RU
Inventors: Николай Сергеевич Осин; Наталья Игоревна Бекман; Вера Гавриловна Помелова; Надия Хайдаровна Гранцева
Original assignee: Закрытое акционерное общество "ИММУНОСКРИН" (ЗАО "ИММУНОСКРИН")
Priority date: 2014-12-23
Filing date: 2014-12-23
Publication date: 2016-07-10
Also published as: RU2593787C2

Abstract

1. Способ многоаналитного иммуноанализа, включающий иммобилизацию на дне лунок микропланшета первых биоспецифических компонентов, специфичных к определяемым аналитам, в виде дискретных микрообластей, размещенных в заданном порядке, внесение в лунки образца, содержащего искомые аналиты, и вторых биоспецифических компонентов, состоящих из конъюгатов антител к определяемым аналитам с биотином и стрептавидином, меченых Pt копропорфирином, проведение реакции биоспецифического связывания между первыми и вторыми биоспецифическими компонентами и детектирование в режиме временного разрешения излучения фосфоресценции метки, связанной с искомыми аналитами, путем сканирования каждой дискретной микрообласти сфокусированным световым лучом, отличающийся тем, что для одновременного детектирования множества наркотических и/или психотропных веществ в крови и/или моче пациента в качестве первых биоспецифических компонентов используют растворы конъюгатов бензоилекгонина, тетрагидроканнабинола, амфетамина, морфина, фентанила, метамфетамина, метилендиокситамфетамина, метадона, бензодиазепина, барбитурата и котинина с белком, которые в различных сочетаниях иммобилизуют в виде по крайней мере двух микрообластей, при проведении анализа в часть лунок микропланшета вносят мультианалитные калибровочные пробы, содержащие смесь указанных конъюгатов наркотиков с белком в буферном растворе, причем для исследования образцов мочи и сыворотки крови используют одни и те же мультианалитные калибровочные пробы, в остальные лунки вносят исследуемые образцы мочи и/или крови, во все лунки добавляют раствор в реакционном буфере смес

Claims

1. Способ многоаналитного иммуноанализа, включающий иммобилизацию на дне лунок микропланшета первых биоспецифических компонентов, специфичных к определяемым аналитам, в виде дискретных микрообластей, размещенных в заданном порядке, внесение в лунки образца, содержащего искомые аналиты, и вторых биоспецифических компонентов, состоящих из конъюгатов антител к определяемым аналитам с биотином и стрептавидином, меченых Pt копропорфирином, проведение реакции биоспецифического связывания между первыми и вторыми биоспецифическими компонентами и детектирование в режиме временного разрешения излучения фосфоресценции метки, связанной с искомыми аналитами, путем сканирования каждой дискретной микрообласти сфокусированным световым лучом, отличающийся тем, что для одновременного детектирования множества наркотических и/или психотропных веществ в крови и/или моче пациента в качестве первых биоспецифических компонентов используют растворы конъюгатов бензоилекгонина, тетрагидроканнабинола, амфетамина, морфина, фентанила, метамфетамина, метилендиокситамфетамина, метадона, бензодиазепина, барбитурата и котинина с белком, которые в различных сочетаниях иммобилизуют в виде по крайней мере двух микрообластей, при проведении анализа в часть лунок микропланшета вносят мультианалитные калибровочные пробы, содержащие смесь указанных конъюгатов наркотиков с белком в буферном растворе, причем для исследования образцов мочи и сыворотки крови используют одни и те же мультианалитные калибровочные пробы, в остальные лунки вносят исследуемые образцы мочи и/или крови, во все лунки добавляют раствор в реакционном буфере смеси биотинилированных мышиных моноклональных антител к искомым наркотикам для получения меченых биотином иммунных комплексов на дискретных микрообластях, при этом образцы во всех лунках разводят не менее чем в четыре раза, детектируют излучение фосфоресценции на каждой дискретной микрообласти во всех лунках одновременно, по результатам измерений мультианалитных калибровочных проб строят калибровочные кривые, с которыми сравнивают измеренные значения фосфоресценции в микрообластях остальных лунок.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что конъюгат морфин - бычий сывороточный альбумин используют для выявления опиатов.

3. Способ по п. 1, отличающийся тем, что конъюгат котинин - бычий сывороточный альбумин используют для выявления никотина.

4. Способ по п. 1, отличающийся тем, что конъюгат бензоилекгонин - бычий сывороточный альбумин используют для выявления кокаина.

5. Способ по п. 1, отличающийся тем, что конъюгат тетрагидроканнабинол - бычий сывороточный альбумин используют для выявления марихуаны.

6. Способ по п. 1, отличающийся тем, что конъюгат фентанил - бычий сывороточный альбумин используют для выявления фентанила.

7. Способ по п. 1, отличающийся тем, что конъюгат метадон - бычий сывороточный альбумин используют для выявления метадона.

8. Способ по п. 1, отличающийся тем, что конъюгат бензодиазепин - бычий сывороточный альбумин используют для выявления бензодиазепинов.

9. Способ по п. 1, отличающийся тем, что конъюгат барбитурат - бычий сывороточный альбумин используют для выявления барбитуратов.

10. Способ по п. 1, отличающийся тем, что конъюгаты амфетамин - бычий сывороточный альбумин, метамфетамин - бычий сывороточный альбумин и метилендиоксиметамфетамин - бычий сывороточный альбумин используют для выявления амфетаминов.