RU2011145429A - Способ получения полимеров из белков шелка пауков - Google Patents

Способ получения полимеров из белков шелка пауков Download PDF

Info

Publication number
RU2011145429A
RU2011145429A RU2011145429/10A RU2011145429A RU2011145429A RU 2011145429 A RU2011145429 A RU 2011145429A RU 2011145429/10 A RU2011145429/10 A RU 2011145429/10A RU 2011145429 A RU2011145429 A RU 2011145429A RU 2011145429 A RU2011145429 A RU 2011145429A
Authority
RU
Russia
Prior art keywords
amino acid
spider silk
acid residues
silk protein
protein
Prior art date
Application number
RU2011145429/10A
Other languages
English (en)
Other versions
RU2560437C2 (ru
Inventor
Ян Йоханссон
Мю ХЕДХАММАР
Анна РИСИНГ
Керстин НОРДЛИНГ
Original Assignee
Спибер Текнолоджиз Аб
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from EP09158445A external-priority patent/EP2243792A1/en
Application filed by Спибер Текнолоджиз Аб filed Critical Спибер Текнолоджиз Аб
Publication of RU2011145429A publication Critical patent/RU2011145429A/ru
Application granted granted Critical
Publication of RU2560437C2 publication Critical patent/RU2560437C2/ru

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/43504—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from invertebrates
    • C07K14/43513—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from invertebrates from arachnidae
    • C07K14/43518—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from invertebrates from arachnidae from spiders

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Insects & Arthropods (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

1. Способ получения полимеров выделенного белка шелка паука, включающий стадии, на которых:(1) берут белок шелка паука, состоящий из 170-760 аминокислотных остатков и содержащий:N-концевой фрагмент, состоящий по меньшей мере из одного фрагмента из 100-160 аминокислотных остатков, происходящих из N-концевого фрагмента белка шелка паука; иповторяющийся фрагмент из 70-300 аминокислотных остатков, происходящих из повторяющегося фрагмента белка шелка паука; и возможноC-концевой фрагмент из 70-120 аминокислотных остатков, который происходит из C-концевого фрагмента белка шелка паука;(2) берут раствор указанного белка шелка паука в жидкой среде с рН 6,4 или выше и/или ионной композицией, которая предотвращает полимеризацию указанного белка шелка паука, возможно включают удаление липополисахаридов и других пирогенов;(3) корректируют свойства указанной жидкой среды до рН 6,3 или ниже и ионной композиции, которая обеспечивает полимеризацию указанного белка шелка паука;(4) оставляют белок шелка паука для образования полимеров в жидкой среде, имеющей рН 6,3 или ниже и ионную композицию, которая обеспечивает полимеризацию указанного белка шелка паука; и(5) выделяют полимеры белка шелка паука из указанной жидкой среды.2. Способ по п.1, где рН жидкой среды со стадий (3) и (4) составляет 6,2 или ниже, например 6,0 или ниже, и/или где рН жидкой среды со стадий (3) и (4) составляет 3 или выше, например 4,2 или выше.3. Способ по п.1, где ионная сила жидкой среды со стадий (3) и (4) находится в диапазоне от 1 до 250 мМ.4. Способ по п.1, где рН жидкой среды со стадии (2) составляет 6,7 или выше, например 7,0 или выше.5. Способ по п.1, где рН жидкой среды со стадии (2) находится в диапазоне от

Claims (55)

1. Способ получения полимеров выделенного белка шелка паука, включающий стадии, на которых:
(1) берут белок шелка паука, состоящий из 170-760 аминокислотных остатков и содержащий:
N-концевой фрагмент, состоящий по меньшей мере из одного фрагмента из 100-160 аминокислотных остатков, происходящих из N-концевого фрагмента белка шелка паука; и
повторяющийся фрагмент из 70-300 аминокислотных остатков, происходящих из повторяющегося фрагмента белка шелка паука; и возможно
C-концевой фрагмент из 70-120 аминокислотных остатков, который происходит из C-концевого фрагмента белка шелка паука;
(2) берут раствор указанного белка шелка паука в жидкой среде с рН 6,4 или выше и/или ионной композицией, которая предотвращает полимеризацию указанного белка шелка паука, возможно включают удаление липополисахаридов и других пирогенов;
(3) корректируют свойства указанной жидкой среды до рН 6,3 или ниже и ионной композиции, которая обеспечивает полимеризацию указанного белка шелка паука;
(4) оставляют белок шелка паука для образования полимеров в жидкой среде, имеющей рН 6,3 или ниже и ионную композицию, которая обеспечивает полимеризацию указанного белка шелка паука; и
(5) выделяют полимеры белка шелка паука из указанной жидкой среды.
2. Способ по п.1, где рН жидкой среды со стадий (3) и (4) составляет 6,2 или ниже, например 6,0 или ниже, и/или где рН жидкой среды со стадий (3) и (4) составляет 3 или выше, например 4,2 или выше.
3. Способ по п.1, где ионная сила жидкой среды со стадий (3) и (4) находится в диапазоне от 1 до 250 мМ.
4. Способ по п.1, где рН жидкой среды со стадии (2) составляет 6,7 или выше, например 7,0 или выше.
5. Способ по п.1, где рН жидкой среды со стадии (2) находится в диапазоне от 6,4 до 6,8.
6. Способ по п.1, где указанный полимер представляет собой волокно, пленку, пену, сеть или ячеистую структуру.
7. Способ по п.6, где указанный полимер представляет собой волокно, имеющее диаметр более 0,1 мкм и длину более 5 мм.
8. Способ получения димеров выделенного белка шелка паука, включающий стадии, на которых:
(1) берут белок шелка паука из 170-760 аминокислотных остатков, содержащий:
N-концевой фрагмент, состоящий по меньшей мере из одного фрагмента из 100-160 аминокислотных остатков, происходящих из N-концевого фрагмента белка шелка паука; и
повторяющийся фрагмент из 70-300 аминокислотных остатков, происходящих из повторяющегося фрагмента белка шелка паука; и возможно
C-концевой фрагмент из 70-120 аминокислотных остатков, который происходит из C-концевого фрагмента белка шелка паука;
(2) берут раствор димеров белка шелка паука в жидкой среде с рН 6,4 или выше и/или ионной композицией, которая предотвращает полимеризацию указанного белка шелка паука; и
(3) выделяют димеры, полученные на стадии (2), возможно включают удаление липополисахаридов и других пирогенов.
9. Способ по п.8, где рН жидкой среды со стадии (2) составляет 6,7 или выше, например 7,0 или выше.
10. Способ по п.1 или 8, где стадия (1), на которой берут указанный белок шелка паука, включает подстадии, на которых:
(а) экспрессируют молекулу полинуклеиновой кислоты, которая кодирует указанный белок шелка паука в подходящем хозяине; и
(б) выделяют белок, полученный на подстадии (а), возможно включают удаление липополисахаридов и других пирогенов.
11. Способ по п.1 или 8, где белок шелка паука, который берут на стадии (1), состоит из 170-600 аминокислотных остатков и содержит один N-концевой фрагмент из 100-160 аминокислотных остатков, происходящих из N-концевого фрагмента белка шелка паука.
12. Способ по п.1 или 8, где N-концевой фрагмент белка шелка паука, который берут на стадии (1), содержит по меньшей мере два фрагмента из 100-160 аминокислотных остатков, происходящих из N-концевого фрагмента белка шелка паука.
13. Способ по п.1 или 8, где указанный белок выбран из группы белков, определенных формулами NT2-REP-CT, NT-REP-CT, NT2-REP и NT-REP, где
NT представляет собой белковый фрагмент, имеющий от 100 до 160 аминокислотных остатков, который представляет собой N-концевой фрагмент, происходящий из белка шелка паука;
REP представляет собой белковый фрагмент, имеющий от 70 до 300 аминокислотных остатков, где указанный фрагмент выбран из группы L(AG)nL, L(AG)nAL, L(GA)nL, L(GA)nGL, где
n представляет собой целое число от 2 до 10;
каждый индивидуальный сегмент А представляет собой аминокислотную последовательность из 8-18 аминокислотных остатков, где от 0 до 3 аминокислотных остатков не являются Ala, а остальные аминокислотные остатки представляют собой Ala;
каждый индивидуальный сегмент G представляет собой аминокислотную последовательность из 12-30 аминокислотных остатков, где по меньшей мере 40% аминокислотных остатков представляют собой Gly; и
каждый индивидуальный сегмент L представляет собой линкерную аминокислотную последовательность из 0-20 аминокислотных остатков; и
СТ представляет собой белковый фрагмент, имеющий от 70 до 120 аминокислотных остатков, который представляет собой C-концевой фрагмент, происходящий из белка шелка паука.
14. Полимер белка шелка паука, где указанный белок состоит из 170-760 аминокислотных остатков и содержит:
N-концевой фрагмент, состоящий по меньшей мере из одного фрагмента из 100-160 аминокислотных остатков, происходящих из N-концевого фрагмента белка шелка паука; и
повторяющийся фрагмент из 70-300 аминокислотных остатков, происходящих из повторяющегося фрагмента белка шелка паука; и возможно
C-концевой фрагмент из 70-120 аминокислотных остатков, который происходит из C-концевого фрагмента белка шелка паука.
15. Полимер белка шелка паука по п.14, где белок шелка паука состоит из 170-600 аминокислотных остатков и содержит один N-концевой фрагмент из 100-160 аминокислотных остатков, происходящих из N-концевого фрагмента белка шелка паука.
16. Полимер белка шелка паука по п.14, где N-концевой фрагмент белка шелка паука содержит по меньшей мере два фрагмента из 100-160 аминокислотных остатков, происходящих из N-концевого фрагмента белка шелка паука.
17. Полимер белка шелка паука по п.14, где указанный белок выбран из группы белков, определенных формулами NT2-REP-CT, NT-REP-CT, NT2-REP и NT-REP, где
NT представляет собой белковый фрагмент, имеющий от 100 до 160 аминокислотных остатков, который представляет собой N-концевой фрагмент, происходящий из белка шелка паука;
REP представляет собой белковый фрагмент, имеющий от 70 до 300 аминокислотных остатков, где указанный фрагмент выбран из группы L(AG)nL, L(AG)nAL, L(GA)nL, L(GA)nGL, где
n представляет собой целое число от 2 до 10;
каждый индивидуальный сегмент А представляет собой аминокислотную последовательность из 8-18 аминокислотных остатков, где от 0 до 3 аминокислотных остатков не являются Ala, а остальные аминокислотные остатки представляют собой Ala;
каждый индивидуальный сегмент G представляет собой аминокислотную последовательность из 12-30 аминокислотных остатков, где по меньшей мере 40% аминокислотных остатков представляют собой Gly; и
каждый индивидуальный сегмент L представляет собой линкерную аминокислотную последовательность из 0-20 аминокислотных остатков; и
СТ представляет собой белковый фрагмент, имеющий от 70 до 120 аминокислотных остатков, который представляет собой C-концевой фрагмент, происходящий из белка шелка паука.
18. Полимер белка шелка паука по п.14, состоящий из полимеризованных димеров указанного белка.
19. Полимер белка шелка паука по п.14, где содержание липополисахаридов и других пирогенов составляет 1 EU(эндотоксиновая единица)/мг выделенного белка или ниже.
20. Полимер белка шелка паука по любому из пп.14-19, представляющий собой волокно, пленку, пену, сеть или ячеистую структуру.
21. Полимер белка шелка паука по п.20, представляющий собой волокно, имеющее диаметр более 0,1 мкм и длину более 5 мм.
22. Димер белка шелка паука, где указанный белок состоит из 170-760 аминокислотных остатков и содержит:
N-концевой фрагмент, состоящий по меньшей мере из одного фрагмента из 100-160 аминокислотных остатков, происходящих из N-концевого фрагмента белка шелка паука; и
повторяющийся фрагмент из 70-300 аминокислотных остатков, происходящих из повторяющегося фрагмента белка шелка паука; и возможно
C-концевой фрагмент из 70-120 аминокислотных остатков, который происходит из C-концевого фрагмента белка шелка паука.
23. Димер белка шелка паука по п.22, где белок шелка паука состоит из 170-600 аминокислотных остатков и содержит один N-концевой фрагмент из 100-160 аминокислотных остатков, происходящих из N-концевого фрагмента белка шелка паука.
24. Димер белка шелка паука по п.22, где N-концевой фрагмент белка шелка паука содержит по меньшей мере два фрагмента из 100-160 аминокислотных остатков, происходящих из N-концевого фрагмента белка шелка паука.
25. Димер белка шелка паука по любому из пп.22-24, где указанный белок выбран из группы белков, определенных формулами NT2-REP-CT, NT-REP-CT, NT2-REP и NT-REP, где
NT представляет собой белковый фрагмент, имеющий от 100 до 160 аминокислотных остатков, который представляет собой N-концевой фрагмент, происходящий из белка шелка паука;
REP представляет собой белковый фрагмент, имеющий от 70 до 300 аминокислотных остатков, где указанный фрагмент выбран из группы L(AG)nL, L(AG)nAL, L(GA)nL, L(GA)nGL, где
n представляет собой целое число от 2 до 10;
каждый индивидуальный сегмент А представляет собой аминокислотную последовательность из 8-18 аминокислотных остатков, где от 0 до 3 аминокислотных остатков не являются Ala, а остальные аминокислотные остатки представляют собой Ala;
каждый индивидуальный сегмент G представляет собой аминокислотную последовательность из 12-30 аминокислотных остатков, где по меньшей мере 40% аминокислотных остатков представляют собой Gly; и
каждый индивидуальный сегмент L представляет собой линкерную аминокислотную последовательность из 0-20 аминокислотных остатков; и
СТ представляет собой белковый фрагмент, имеющий от 70 до 120 аминокислотных остатков, который представляет собой C-концевой фрагмент, происходящий из белка шелка паука.
26. Выделенный белок шелка паука, который состоит из 170-760 аминокислотных остатков и выбран из группы белков, определенных формулами NT2-REP-CT, NT-REP-CT, NT2-REP и NT-REP, где
NT представляет собой белковый фрагмент, имеющий от 100 до 160 аминокислотных остатков, который представляет собой N-концевой фрагмент, происходящий из белка шелка паука.
REP представляет собой белковый фрагмент, имеющий от 70 до 300 аминокислотных остатков, где указанный фрагмент выбран из группы L(AG)nL, L(AG)nAL, L(GA)nL, L(GA)nGL, где
n представляет собой целое число от 2 до 10;
каждый индивидуальный сегмент А представляет собой аминокислотную последовательность из 8-18 аминокислотных остатков, где от 0 до 3 аминокислотных остатков не являются Ala, а остальные аминокислотные остатки представляют собой Ala;
каждый индивидуальный сегмент G представляет собой аминокислотную последовательность из 12-30 аминокислотных остатков, где по меньшей мере 40% аминокислотных остатков представляют собой Gly; и
каждый индивидуальный сегмент L представляет собой линкерную аминокислотную последовательность из 0-20 аминокислотных остатков; и СТ представляет собой белковый фрагмент, имеющий от 70 до 120 аминокислотных остатков, который представляет собой C-концевой фрагмент, происходящий из белка шелка паука.
27. Выделенный белок шелка паука по п.26, выбранный из группы, состоящей из SEQ ID NO:3-5, 17, 19-23, 25 и 31.
28. Композиция, содержащая выделенный белок шелка паука по любому из пп.26 и 27, растворенный в жидкой среде, имеющей рН 6,4 или выше и/или ионную композицию, которая предотвращает полимеризацию указанного белка шелка паука.
29. Композиция по п.28, где указанная жидкая среда имеет рН 7,0 или выше.
30. Композиция по любому из пп.28 и 29, где содержание липополисахаридов и других пирогенов составляет 1 EU/мг выделенного белка или ниже.
31. Применение белка шелка паука по любому из пп.26 и 27 для получения димеров белка шелка паука.
32. Применение белка шелка паука по любому из пп.26 и 27 для получения полимеров белка шелка паука.
33. Применение димера белка шелка паука по любому из пп.22-25 для получения полимеров выделенного белка шелка паука.
34. Применение по любому из пп.32-33, где указанные полимеры получают в жидкой среде, имеющей рН 6,3 или ниже и ионную композицию, которая обеспечивает полимеризацию указанного белка шелка паука.
35. Выделенная молекула полинуклеиновой кислоты, содержащая последовательность нуклеиновой кислоты, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO:14-16, 18 и 24; последовательности нуклеиновой кислоты, кодирующие SEQ ID NO:3-5, 17, 19-23, 25 и 31; последовательности нуклеиновой кислоты, которые кодируют белок шелка паука по п.23; и комплементарные им последовательности нуклеиновых кислот.
36. Способ получения белка шелка паука по любому из пп.26 и 27, включающий стадии, на которых:
(1) экспрессируют молекулу полинуклеиновой кислоты, которая кодирует указанный белок шелка паука в подходящем хозяине; и
(2) выделяют белок, полученный на стадии (1), возможно включают удаление липополисахаридов и других пирогенов.
37. Способ обратимой сборки полимера или олигомера из молекул одного типа или молекул нескольких разных типов, включающий стадии, на которых:
(1) берут указанные молекулы, причем каждая молекула содержит:
(а) по меньшей мере одну первую связывающую группировку из 100-160 аминокислотных остатков, которая происходит из N-концевого фрагмента белка шелка паука, и
(б) вторую группировку, которая индивидуально выбрана из белков, нуклеиновых кислот, углеводов и липидов;
(2) берут раствор указанных молекул в жидкой среде с рН 6,4 или выше и/или ионной композицией, которая предотвращает полимеризацию или олигомеризацию указанных(ой) молекул(ы) через указанные связывающие группировки;
(3) корректируют свойства указанной жидкой среды до рН 6,3 или ниже и ионной композиции, которая обеспечивает полимеризацию или олигомеризацию указанных молекул через указанные связывающие группировки;
(4) обеспечивают сборку указанных молекул в полимер или олигомер через указанные связывающие группировки в жидкой среде, имеющей рН 6,3 или ниже и ионную композицию, которая обеспечивает полимеризацию или олигомеризацию указанных молекул через указанные связывающие группировки.
38. Способ по п.37, где указанные молекулы со стадии (1) являются идентичными, и где указанный полимер или олигомер со стадии (4) представляет собой гомополимер или гомоолигомер.
39. Способ по п.37, где указанные молекулы со стадии (1) не являются идентичными, и где указанный полимер или олигомер со стадии (4) представляет собой гетерополимер или гетеролигомер.
40. Способ по п.37, где указанный полимер или олигомер со стадии (4) растворяют в указанной жидкой среде, имеющей рН 6,3 или ниже и ионную композицию, которая обеспечивает полимеризацию или олигомеризацию указанных молекул.
41. Способ по п.37, где рН жидкой среды со стадий (3) и (4) составляет 6,2 или ниже, например 6,0 или ниже, и/или где рН жидкой среды со стадий (3) и (4) составляет 3 или выше, например 4,2 или выше.
42. Способ по п.37, где ионная сила жидкой среды со стадии (4) находится в диапазоне от 1 до 250 нМ.
43. Способ по п.37, где рН жидкой среды со стадии (2) составляет 6,7 или выше, например 7,0 или выше.
44. Способ по п.37, где рН жидкой среды со стадии (2) находится в диапазоне от 6,4 до 6,8.
45. Способ по п.37, где указанная вторая группировка представляет собой белок.
46. Способ по п.37, дополнительно включающий стадию:
(5) корректировки свойств указанной жидкой среды до рН 6,4 или выше и/или ионной композиции, которая предотвращает полимеризацию или олигомеризацию указанных молекул, для разборки указанного полимера или олигомера.
47. Способ по п.46, где рН жидкой среды со стадии (5) составляет 6,7 или выше, например 7,0 или выше.
48. Способ по п.46, где рН жидкой среды со стадии (5) находится в диапазоне от 6,4 до 6,8.
49. Способ по п.46, где полимер или олигомер со стадии (4) используют в исследованиях взаимодействия, разделении, индукции активности ферментных комплексов или в анализах FRET (резонансный перенос энергии флуоресценции).
50. Способ по любому из пп.37-49, где по меньшей мере один тип молекулы со стадии (1) иммобилизован на твердой подложке или на матрице аффинной среды.
51. Способ детекции взаимодействий связывания между поднабором молекул, содержащимся в наборе молекул, включающий стадии, на которых:
(1) берут указанный набор молекул, где каждая молекула содержит:
(а) по меньшей мере одну первую связывающую группировку из 100-160 аминокислотных остатков, которая происходит из N-концевого фрагмента белка шелка паука, и
(б) вторую группировку, которая индивидуально выбрана из белков, нуклеиновых кислот, углеводов и липидов;
(2) берут раствор указанного набора молекул в жидкой среде с рН 6,4 или выше и/или ионной композицией, которая предотвращает полимеризацию или олигомеризацию указанных молекул;
(3) корректируют свойства указанной жидкой среды до рН 6,3 или ниже и ионной композиции, которая обеспечивает полимеризацию или олигомеризацию указанных молекул;
(4) обеспечивают сборку указанных молекул в полимер или олигомер через указанные связывающие группировки в жидкой среде, имеющей рН 6,3 или ниже и ионную композицию, которая обеспечивает полимеризацию или олигомеризацию указанных молекул;
(5) корректируют свойства указанной жидкой среды до рН 6,4 или выше и/или ионной композиции, которая предотвращает полимеризацию или олигомеризацию указанных молекул, для разборки указанного полимера или олигомера; и
(6) определяют присутствие взаимодействий связывания, которые не опосредованы через указанные связывающие группировки, между двумя или более чем двумя разными молекулами, которые образуют указанный поднабор молекул.
52. Применение одной или более молекул, каждая из которых содержит:
(а) по меньшей мере одну первую связывающую группировку из 100-160 аминокислотных остатков, которая происходит из N-концевого фрагмента белка шелка паука, и
(б) вторую группировку, которая индивидуально выбрана из белков, нуклеиновых кислот, углеводов и липидов;
для обратимой сборки полимера или олигомера из указанных молекул через указанные связывающие группировки в растворе с рН 6,3 или ниже и ионной композицией, которая обеспечивает полимеризацию или олигомеризацию указанных молекул.
53. Применение по п.52, где полимер или олигомер используют в исследованиях взаимодействий, разделении, индукции антивности ферментных комплексов или анализе FRET.
54. Аффинная среда, содержащая матрицу и лиганд для аффинных взаимодействий, связанный с указанной матрицей, где лиганд содержит по меньшей мере один фрагмент из 100-160 аминокислотных остатков, который происходит из N-концевого фрагмента белка шелка паука.
55. Аффинная среда по п.54, где матрица выбрана из группы, состоящей из частиц и фильтров.
RU2011145429/10A 2009-04-22 2010-04-21 Способ получения полимеров из белков шелка пауков RU2560437C2 (ru)

Applications Claiming Priority (7)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP09158445A EP2243792A1 (en) 2009-04-22 2009-04-22 Methods of producing polymers of spider silk proteins
EP09158445.8 2009-04-22
EP10156923.4 2010-03-18
EP10156927.5 2010-03-18
EP10156923 2010-03-18
EP10156927 2010-03-18
PCT/SE2010/050439 WO2010123450A1 (en) 2009-04-22 2010-04-21 Method of producing polymers of spider silk proteins

Publications (2)

Publication Number Publication Date
RU2011145429A true RU2011145429A (ru) 2013-05-27
RU2560437C2 RU2560437C2 (ru) 2015-08-20

Family

ID=43011348

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RU2011145429/10A RU2560437C2 (ru) 2009-04-22 2010-04-21 Способ получения полимеров из белков шелка пауков

Country Status (9)

Country Link
US (1) US8642734B2 (ru)
EP (1) EP2421890B1 (ru)
JP (1) JP5912077B2 (ru)
CN (1) CN102395601A (ru)
AU (1) AU2010239773B2 (ru)
CA (1) CA2759465C (ru)
DK (1) DK2421890T3 (ru)
RU (1) RU2560437C2 (ru)
WO (1) WO2010123450A1 (ru)

Families Citing this family (27)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102844437B (zh) * 2010-03-18 2015-06-03 思百博技术股份公司 蛋白质和多肽的制备
US9115204B2 (en) 2010-10-27 2015-08-25 Spiber Technologies Ab Spider silk fusion protein structures for binding to an organic target
CN103502516B (zh) 2011-06-01 2015-04-22 丝芭博株式会社 人造多肽纤维及其制造方法
CA2872056A1 (en) * 2012-05-02 2013-11-07 Spiber Technologies Ab Spider silk fusion protein structures without repetitive fragment for binding to an organic target
WO2015042164A2 (en) 2013-09-17 2015-03-26 Refactored Materials, Inc. Methods and compositions for synthesizing improved silk fibers
KR20170099920A (ko) 2014-12-02 2017-09-01 실크 테라퓨틱스, 인코퍼레이티드 실크 성능 의류와 제품들 및 이의 제조 방법
JP2018512407A (ja) * 2015-03-16 2018-05-17 ボルト スレッズ インコーポレイテッド 改善されたシルク繊維
CN107849100B (zh) 2015-04-09 2022-02-08 丝芭博株式会社 极性溶剂溶液及其制造方法
JP6856828B2 (ja) 2015-04-09 2021-04-14 Ｓｐｉｂｅｒ株式会社 極性溶媒溶液及びその製造方法
US20180216260A1 (en) 2015-06-11 2018-08-02 Bolt Threads, Inc. Recombinant protein fiber yarns with improved properties
CN105031723B (zh) * 2015-06-23 2017-05-24 上海交通大学 基于蜘蛛丝蛋白的温敏性水凝胶
JP6956066B2 (ja) 2015-07-14 2021-10-27 エボルブド バイ ネイチャー， インコーポレイテッド シルク性能衣服及び製品、並びにこれらを製造する方法
JP2018159137A (ja) 2015-08-20 2018-10-11 国立研究開発法人理化学研究所 クモ糸様構造を有するポリペプチド繊維の製造方法
CA3005073A1 (en) 2015-11-13 2017-05-18 Spiber Technologies Ab Charge-reversed n-terminal spider silk protein domain and uses thereof
GB201522610D0 (en) * 2015-12-22 2016-02-03 Univ Southampton Protein
AU2017266702A1 (en) * 2016-05-16 2019-01-03 Spiber Technologies Ab Spider silk coating of solid surfaces
WO2017214618A1 (en) * 2016-06-10 2017-12-14 Bolt Threads, Inc. Recombinant protein fiber yarns with improved properties
EP3263593A1 (en) 2016-07-01 2018-01-03 Anna Rising Engineered spider silk proteins and uses thereof
US11447532B2 (en) 2016-09-14 2022-09-20 Bolt Threads, Inc. Long uniform recombinant protein fibers
EP3538859A1 (en) * 2016-11-11 2019-09-18 Amsilk GmbH Use of a shrinkable biopolymer fiber as sensor
CN107475807A (zh) * 2017-08-30 2017-12-15 常州豫春化工有限公司 一种改性尼龙6纤维的制备方法
JP7240401B2 (ja) * 2017-09-26 2023-03-15 スピベル テクノロジーズ アクティエボラーグ 表面活性高分子の構造化
US11390988B2 (en) 2017-09-27 2022-07-19 Evolved By Nature, Inc. Silk coated fabrics and products and methods of preparing the same
JP2021035330A (ja) * 2017-09-29 2021-03-04 Ｓｐｉｂｅｒ株式会社 発現カセット
CN110551194B (zh) * 2019-09-19 2023-03-21 天津大学 重组蜘蛛卵鞘丝蛋白复合物及其生成的人造卵鞘丝
WO2024091831A2 (en) * 2022-10-28 2024-05-02 National Taiwan University A recombinant spider silk protein and method for tag-free and time-saving purification thereof
DE102023105437B3 (de) 2023-03-06 2024-06-13 Dr. Ing. H.C. F. Porsche Aktiengesellschaft Fahrzeugkomponente mit wenigstens einer Fahrzeuginnenraumkomponente

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20070260039A1 (en) 2002-01-11 2007-11-08 Karatzas Costas N Methods of Producing Silk Polypeptides and Products Thereof
EP2520584A1 (en) * 2004-07-22 2012-11-07 AMSilk GmbH Recombinant spider silk proteins
US8173772B2 (en) * 2005-12-30 2012-05-08 Spiber Technologies Ab Spider silk proteins and methods for producing spider silk proteins
BRPI0701826B1 (pt) * 2007-03-16 2021-02-17 Embrapa - Empresa Brasileira De Pesquisa Agropecuária proteínas da teia de aranha nephilengys cruentata, avicularia juruensis e parawixia bistriata isoladas da biodiversidade brasileira
WO2008154547A2 (en) 2007-06-11 2008-12-18 The Regents Of The University Of California Spider silk dragline polynucleotides, polypeptides and methods of use thereof

Also Published As

Publication number Publication date
CA2759465A1 (en) 2010-10-28
CN102395601A (zh) 2012-03-28
US8642734B2 (en) 2014-02-04
CA2759465C (en) 2017-12-12
WO2010123450A1 (en) 2010-10-28
JP2012531889A (ja) 2012-12-13
JP5912077B2 (ja) 2016-04-27
AU2010239773B2 (en) 2014-11-06
EP2421890A1 (en) 2012-02-29
RU2560437C2 (ru) 2015-08-20
EP2421890B1 (en) 2015-08-26
DK2421890T3 (en) 2015-11-23
US20120041177A1 (en) 2012-02-16
AU2010239773A1 (en) 2011-11-03
EP2421890A4 (en) 2012-10-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2011145429A (ru) Способ получения полимеров из белков шелка пауков
van Balkom et al. Proteomic signature of mesenchymal stromal cell‐derived small extracellular vesicles
JP2021501572A5 (ru)
JP2012531889A5 (ru)
Biswas et al. A tubular biocontainer: metal ion-induced 1D assembly of a molecularly engineered chaperonin
RU2624036C2 (ru) Структуры слитого белка шелка пауков для связывания с органической мишенью
US10772321B2 (en) Method for treating blood, blood products and organs
Prevelige et al. Pressure denaturation of the bacteriophage P22 coat protein and its entropic stabilization in icosahedral shells
AU2007250331A1 (en) Multimer for immunostimulation
JP6159737B2 (ja) 分離方法における、フィブリルセルロースを含む固定相の使用
EP2844361B1 (en) Spider silk fusion protein structures incorporating immunoglobulin fragments as affinity ligands
Ghufran Rafique et al. Two‐dimensional supramolecular polymerization of DNA amphiphiles is driven by sequence‐dependent DNA‐chromophore interactions
US8877500B2 (en) Thermally induced gelation of collagen hydrogel and method of thermally inducing gelling a collagen hydrogel
Li et al. Identification, expression and pro-inflammatory effect of interleukin-17 N in common carp (Cyprinus carpio L.)
Lindberg et al. Staphylococcal display for combinatorial protein engineering of a head‐to‐tail affibody dimer binding the Alzheimer amyloid‐β peptide
Tomczak et al. Biochemical and biophysical characterization of cytokine-like protein 1 (CYTL1)
US20240317882A1 (en) CD99-targeting chimeric antigen receptor and application thereof
CN114015696A (zh) 卵形鲳鲹干扰素调节因子irf6基因、蛋白、制备方法及应用
Al Balawi et al. Synthesis, Characterization, and Application of Poly (4, 4′‐Cyclohexylidene Bisphenol Oxalate) for Solid‐Phase Extraction of DNA
CN114907467B (zh) 一种融合碳端的重组蛛丝蛋白及其制备方法与基于重组蛛丝蛋白的载药微球
CN101298475A (zh) 人工重组的五联体蛋白a及其构建方法与用途
WO2022075460A1 (ja) 均質なβ－１，３－グルカン／核酸複合体、及びその用途
CN1262658C (zh) 抑制白血病细胞增殖的重组表达载体
CN117531012B (zh) 一种基于dna佐剂水凝胶的肽疫苗及其制备方法和应用
JP7391997B2 (ja) 豚熱ウイルス感染を予防するための組換えタンパク質、それを含む組成物及び細胞