RU2009116566A

RU2009116566A - Последовательности днк, кодирующие терапевтическое моноклональное антитело, способ продукции моноклонального антитела и последовательности днк, использованные для получения высокоэффективного продуцента

Info

Publication number: RU2009116566A
Application number: RU2009116566/10A
Authority: RU
Inventors: Владимир Михайлович Колышкин (RU); Владимир Михайлович Колышкин; Андрей Александрович Леонов (RU); Андрей Александрович Леонов
Original assignee: Общество с ограниченной ответственностью "ПРОМОГЕН" (RU); Общество с ограниченной ответственностью "ПРОМОГЕН"
Priority date: 2009-05-04
Filing date: 2009-05-04
Publication date: 2010-11-10
Also published as: RU2416645C2

Abstract

1. Средство, нейтрализующее активность фактора некроза опухоли (ФНО-альфа), характеризующееся тем, что включает одноцепочечное антитело, связывающее ФНО-альфа, содержащее аминокислотную последовательность SEQ ID #21. ! 2. ДНК SEQ ID #22, кодирующая экспрессионную конструкцию одноцепочечного фрагмента антитела инфликсимаб, для продукции в Е. coli. ! 3. ДНК SEQ ID #2, кодирующая кодон-оптимизированный вариабельный фрагмент тяжелой цепи антитела инфликсимаб, с аминокислотной последовательностью по SEQ ID #21. ! 4. ДНК SEQ ID #3, кодирующая кодон-оптимизированный вариабельный фрагмент тяжелой цепи антитела инфликсимаб с аминокислотной последовательностью по SEQ ID #21. ! 5. ДНК SEQ ID #4-20, кодирующие субфрагменты одноцепоченого антитела, состоящего из вариабельных фрагментов тяжелой и легкой цепей антитела инфликсимаб. ! 6. ДНК SEQ ID ##24-30. ! 7. Плазмидная ДНК SEQ ID #23, содержащая нуклеотидную последовательность SEQ ID NO 1, включающую нуклеотидные последовательности по пп.2 и 3, и экспрессирующая одноцепочечное антитело, связывающее фактор некроза опухоли (ФНО-альфа). ! 8. Способ получения антитела, связывающего человеческий фактор некроза опухоли, характеризующийся тем, что в клетку-хозяина вводят плазмидную ДНК по п.4, культивируют в среде культивирования в условиях, необходимых для продуцирования антитела, с дальнейшим выделением и очисткой указанного одноцепочечного антитела, последовательности вариабельных участков которого имеют, по меньшей мере, 99,5% - (99,9%) идентичности с последовательностями вариабельных участков легкой и тяжелой цепей антитела инфликсимаб.

Claims

1. Средство, нейтрализующее активность фактора некроза опухоли (ФНО-альфа), характеризующееся тем, что включает одноцепочечное антитело, связывающее ФНО-альфа, содержащее аминокислотную последовательность SEQ ID #21.

2. ДНК SEQ ID #22, кодирующая экспрессионную конструкцию одноцепочечного фрагмента антитела инфликсимаб, для продукции в Е. coli.

3. ДНК SEQ ID #2, кодирующая кодон-оптимизированный вариабельный фрагмент тяжелой цепи антитела инфликсимаб, с аминокислотной последовательностью по SEQ ID #21.

4. ДНК SEQ ID #3, кодирующая кодон-оптимизированный вариабельный фрагмент тяжелой цепи антитела инфликсимаб с аминокислотной последовательностью по SEQ ID #21.

5. ДНК SEQ ID #4-20, кодирующие субфрагменты одноцепоченого антитела, состоящего из вариабельных фрагментов тяжелой и легкой цепей антитела инфликсимаб.

6. ДНК SEQ ID ##24-30.

7. Плазмидная ДНК SEQ ID #23, содержащая нуклеотидную последовательность SEQ ID NO 1, включающую нуклеотидные последовательности по пп.2 и 3, и экспрессирующая одноцепочечное антитело, связывающее фактор некроза опухоли (ФНО-альфа).

8. Способ получения антитела, связывающего человеческий фактор некроза опухоли, характеризующийся тем, что в клетку-хозяина вводят плазмидную ДНК по п.4, культивируют в среде культивирования в условиях, необходимых для продуцирования антитела, с дальнейшим выделением и очисткой указанного одноцепочечного антитела, последовательности вариабельных участков которого имеют, по меньшей мере, 99,5% - (99,9%) идентичности с последовательностями вариабельных участков легкой и тяжелой цепей антитела инфликсимаб.