RU2008101659A

RU2008101659A - Высокоаттенуированные штаммы поксвирусов, способ их получения и их применение в качестве индукторов параиммунитета или для получения векторных вакцин

Info

Publication number: RU2008101659A
Application number: RU2008101659/13A
Authority: RU
Inventors: Антон МАЙР (DE); Антон Майр
Original assignee: Антон МАЙР (DE); Антон Майр
Priority date: 2005-06-16
Filing date: 2006-06-16
Publication date: 2009-07-27
Also published as: CN101198339A; US20080305129A1; MX2007016004A; WO2006133947A1; BRPI0611979A2; ZA200710562B; CA2610277A1; DE102005027956B4; EP1893223A1; DE102005027956A1; JP2008546377A; AU2006257065A1

Abstract

1. Высокоаттенуированный поксвирус животных, полученный на основе штамма поксвирусов животных семейства poxviridae, характеризуемый тем, что указанный поксвирус больше не обладает вирулентностью и иммунизирующими свойствами и имеет более низкую молекулярную массу вирусной нуклеиновой кислоты, более частые делеции в терминальном участке и увеличенную потерю цитокиновых рецепторов, по сравнению со штаммами оспы животных, аттенуированных общепринятым способом. ! 2. Высокоаттенуированный поксвирус животных по п.1, у которого отсутствуют цитокиновые рецепторы для интерферона α и γ. ! 3. Высокоаттенуированный поксвирус животных по п.1, вирусный геном которого примерно на 20% меньше, чем вирусный геном дикого типа. ! 4. Высокоаттенуированный поксвирус животных по п.1, являющийся штаммом вируса оспы верблюдов. ! 5. Высокоаттенуированный поксвирус животных по п.4, представляющий собой штамм вируса оспы верблюдов h-M 27 с депозитным номером 05040602 (ЕСАСС). ! 6. Высокоаттенуированный поксвирус животных по п.1, являющийся штаммом вируса миксомы. ! 7. Высокоаттенуированный поксвирус животных по п.6, представляющий собой штамм вируса миксомы h-M 2 с депозитным номером 05040601 (ЕСАСС). ! 8. Высокоаттенуированный поксвирус животных по п.1, являющийся штаммом оспы птиц h-HP1. ! 9. Высокоаттенуированный поксвирус животных по п.1, являющийся штаммом эктромелии h-M 1. ! 10. Высокоаттенуированный поксвирус животных по п.1, полученный с помощью следующего способа: ! (а) адаптация оспы животных к пермиссивной клеточной системе или клеточным культурам; ! (b) перенос и продолжение культивирования поксвирусов животных для аттенуации путем длительных пассажей в различн

Claims

1. Высокоаттенуированный поксвирус животных, полученный на основе штамма поксвирусов животных семейства poxviridae, характеризуемый тем, что указанный поксвирус больше не обладает вирулентностью и иммунизирующими свойствами и имеет более низкую молекулярную массу вирусной нуклеиновой кислоты, более частые делеции в терминальном участке и увеличенную потерю цитокиновых рецепторов, по сравнению со штаммами оспы животных, аттенуированных общепринятым способом.

2. Высокоаттенуированный поксвирус животных по п.1, у которого отсутствуют цитокиновые рецепторы для интерферона α и γ.

3. Высокоаттенуированный поксвирус животных по п.1, вирусный геном которого примерно на 20% меньше, чем вирусный геном дикого типа.

4. Высокоаттенуированный поксвирус животных по п.1, являющийся штаммом вируса оспы верблюдов.

5. Высокоаттенуированный поксвирус животных по п.4, представляющий собой штамм вируса оспы верблюдов h-M 27 с депозитным номером 05040602 (ЕСАСС).

6. Высокоаттенуированный поксвирус животных по п.1, являющийся штаммом вируса миксомы.

7. Высокоаттенуированный поксвирус животных по п.6, представляющий собой штамм вируса миксомы h-M 2 с депозитным номером 05040601 (ЕСАСС).

8. Высокоаттенуированный поксвирус животных по п.1, являющийся штаммом оспы птиц h-HP1.

9. Высокоаттенуированный поксвирус животных по п.1, являющийся штаммом эктромелии h-M 1.

10. Высокоаттенуированный поксвирус животных по п.1, полученный с помощью следующего способа:

(а) адаптация оспы животных к пермиссивной клеточной системе или клеточным культурам;

(b) перенос и продолжение культивирования поксвирусов животных для аттенуации путем длительных пассажей в различных пермиссивных клеточных системах, которые обеспечивают возможность оптимальных инфекционных титров;

(c) перенос и продолжение культивирования поксвирусов животных для аттенуации в оптимальной клеточной системе на протяжении примерно 100-300 пассажей;

(d) перенос и продолжение культивирования поксвирусов животных в VERO-клетках, по меньшей мере, на протяжении 90 пассажей.

11. Индуктор параиммунитета, полученный на основе штаммов поксвирусов животных семейства poxviridae, характеризуемых тем, что штаммы поксвирусов аттенуированы в высокой степени и больше не обладают никакой вирулентностью и иммунизирующими свойствами.

12. Индуктор параиммунитета по п.11, полученный на основе штамма поксвируса животных по любому из пп.1-10.

13. Способ получения индукторов параиммунитета из высокоаттенуированных поксвирусов животных, включающий:

(а) адаптацию оспы животных к пермиссивной клеточной системе или клеточным культурам;

14. Способ получения индукторов параиммунитета из высокоаттенуированных вирусов миксомы, включающий:

(a) выделение поксвирусов животных из заболевших животных с помощью хорионаллантоисной мембраны (САМ) 10-дневных куриных эмбрионов и продолжение культивирования в этой клеточной системе на протяжении, по меньшей мере, 2 пассажей;

(b) перенос и продолжение культивирования выделенных поксвирусов животных из эмбрионов цыплят, инкубированных в течение 10 дней (FHE), на протяжении, по меньшей мере, 300 пассажей в культурах AVIVER-клеток и VERO-клеток;

(c) перенос и продолжение культивирования поксвирусов животных в МА-клетках, по меньшей мере, на протяжении 100 пассажей;

(d) перенос и продолжение культивирования поксвирусов животных в VERO-клетках, по меньшей мере, на протяжении 170 пассажей.

15. Способ по п.14, где образованные высокоаттенуированные вирусы миксомы имеют инфекционный титр около 10^6,75 CID₅₀/мл.

16. Способ по п.14, где вирусы миксомы являются штаммом h-M 2 вируса миксомы с депозитным номером 05040601 (ЕСАСС).

17. Способ получения индуктора параиммунитета из высокоаттенуированных вирусов оспы верблюдов, включающий:

(a) выделение поксвирусов животных из заболевших животных путем культивирования на хорионаллантоисной мембране (САМ) 10-дневных куриных эмбрионов и продолжение культивирования выделенного вируса оспы верблюдов на протяжении, по меньшей мере, 2 пассажей в САМ;

(b) перенос и продолжение культивирования поксвирусов животных на протяжении, по меньшей мере, 120 пассажей в культурах VERO-клеток (АТСС CCL-81, WHO, Американская коллекция культур);

(c) перенос и продолжение культивирования поксвирусов животных в AVIVER-клетках на протяжении примерно 24 пассажей;

(d) перенос и продолжение культивирования поксвирусов животных на протяжении примерно 157 дополнительных пассажей в VERO-клетках;

(e) перенос и продолжение культивирования поксвирусов животных на протяжении 114 дополнительных пассажей в МА-клетках;

(f) перенос и продолжение культивирования поксвирусов животных на протяжении 179 дополнительных пассажей в VERO-клетках.

18. Способ по п.17, где образованные высокоаттенуированные вирусы оспы верблюдов имеют инфекционный титр около 10⁷ СID₅₀/мл.

19. Способ по п.17, где вирусы оспы верблюдов являются штаммом h-M 27 вируса оспы верблюдов с депозитным номером 05040602 (ЕСАСС).

20. Векторная вакцина, включающая делеционную нуклеиновую кислоту высокоаттенуированного, невирулентного, неиммунизирующего поксвируса животных по любому из пп.1-10 и последовательности нуклеиновой кислоты, встроенные в делении, для экспрессии иммунизирующего пептида или белка.

21. Векторная вакцина по п.20, где делеционная нуклеиновая кислота высокоаттенуированного, невирулентного, неиммунизирующего поксвируса животных и последовательности нуклеиновой кислоты иммунизирующего пептида или белка находятся в плазмиде.

22. Фармацевтическая композиция, включающая один или более индукторов параиммунитета по пп.11 и 12.

23. Фармацевтическая композиция по п.22 для локального или парентерального введения.

24. Фармацевтическая композиция по пп.22 и 23, дополнительно включающая фармацевтически приемлемый носитель.

25. Применение индуктора параиммунитета по пп.11 и 12 для активации параспецифичной иммунной системы у млекопитающих или у человека.

26. Применение индуктора параиммунитета по пп.11 и 12 для получения фармацевтической композиции для профилактики и/или лечения нарушений, связанных с иммунодефицитом.

27. Применение по п.26, где нарушение, связанное с иммунодефицитом, выбирают из группы, состоящей из дисфункций иммунной системы, иммуносупрессии, иммунодефицитных нарушений, дисфункций гомеодинамики между гормональной системой, кровообращением, метаболической и нервной системой, неонатальной угрозой возникновения инфекции, неопластических заболеваний, вирусных заболеваний, бактериальных заболеваний, заболеваний, устойчивых к терапии инфекционных факторов, смешанных вирусных и бактериальных инфекций, хронических проявлений инфекционных процессов, заболеваний печени различного происхождения, хронических заболеваний кожи, заболеваний герпесом, хронического гепатита, гриппозных инфекций, повреждения эндотоксином.

28. Применение по п.26, где высокоаттенуированные индукторы параиммунитета применяют в фармацевтической композиции для облегчения заживления ран, предупреждения развития вторичных инфекций, возникающих в результате хирургических операций или повреждений.

29. Применение векторной вакцины по пп.20 и 21 для индукции параспецифичного и специфичного иммунного ответа у млекопитающих или у человека.

30. Способ получения высокоаттенуированных поксвирусов животных, включающий стадии:

(а) адаптацию оспы животных в пермиссивной клеточной системе или клеточных культурах;

(d) перенос и продолжение культивирования поксвирусов животных в VERO-клетках на протяжении, по меньшей мере, 90 пассажей.