RU2007133094A

RU2007133094A - Способ получения полимерных конъюгатов

Info

Publication number: RU2007133094A
Application number: RU2007133094/04A
Authority: RU
Inventors: Дэчунь У (US); Дэчунь У; Хун ЧЖАО (US); Хун Чжао; Ричард Б. ГРИНВАЛЬД (US); Ричард Б. ГРИНВАЛЬД
Original assignee: Энзон Фармасьютикалз, Инк. (Us); Энзон Фармасьютикалз, Инк.
Priority date: 2005-02-04
Filing date: 2006-01-31
Publication date: 2009-03-10
Also published as: KR20070100845A; WO2006084089A2; AU2006210603A1; WO2006084089A3; EP1848459B1; IL184690A0; RU2401283C2; US20060178474A1; EP1848459A4; CN101163507B; JP5305662B2; JP2008530271A; AU2006210603B2; EP1848459A2; CN101163507A; MX2007009434A; US7365127B2; CA2593908A1; CA2593908C

Claims

1. Способ получения активированного полимера, включающий:

a) взаимодействие активируемого полимерного остатка с активирующим веществом, способным предоставлять для этого уходящую группу, что дает первую реакционную смесь, которая содержит активированный полимерный остаток и активируемый полимерный остаток;

b) взаимодействие указанной первой реакционной смеси с многофункциональной связывающей группой, несущей на себе защитную группу, которая не взаимодействует с указанным активированным полимерным остатком, в условиях, в которых указанный активированный полимерный остаток из первой реакционной смеси присутствует в избытке по отношению к указанной многофункциональной связывающей группе, с образованием второй реакционной смеси, которая включает указанную первую реакционную смесь и содержащий защитную группу промежуточный полимер, получаемый в результате указанного взаимодействия указанного активированного полимерного остатка с указанной многофункциональной связывающей группой;

c) гашение указанной второй реакционной смеси с использованием достаточного количества первого гасящего реагента для инактивации в ней активированного полимерного остатка, с образованием третьей реакционной смеси, которая содержит указанный промежуточный полимер;

d) добавление к указанной третьей реакционной смеси достаточного количества второго гасящего реагента для инактивации в ней активируемого полимерного остатка и образования четвертой реакционной смеси, содержащей указанный промежуточный полимер;

e) удаление защитной группы из промежуточного полимера и нейтрализацию указанной четвертой реакционной смеси с образованием пятой реакционной смеси;

f) взаимодействие указанной пятой реакционной смеси с соединением, способным активировать в ней промежуточный полимер для связывания с биологически активной молекулой, и образование шестой реакционной смеси, которая содержит активированный полимер.

2. Способ по п.1, дополнительно включающий взаимодействие указанной шестой реакционной смеси с биологически активным соединением, молекулой для нацеливания или диагностическим средством с образованием полимерных конъюгатов.

3. Способ по п.2, дополнительно включающий выделение полимерных конъюгатов.

4. Способ по п.3, где указанное выделение осуществляют диафильтрацией или эксклюзионной хроматографией.

5. Способ по п.2, где полимерные конъюгаты имеют формулу:

(R)_n-L-D

где R представляет собой полимерный остаток;

L представляет собой многофункциональную алифатическую связывающую группу;

D представляет собой член группы, состоящей из биологически активных молекул, молекул для нацеливания и диагностических средств; и

n представляет собой положительное целое число.

6. Способ по п.5, где R представляет собой полиалкиленоксид.

7. Способ по п.6, где указанный полиалкиленоксид представляет собой полиэтиленгликоль.

8. Способ по п.7, где указанный полиэтиленгликоль имеет средневесовую молекулярную массу приблизительно от 200 до приблизительно 120000 Да.

9. Способ по п.8, где указанный полиэтиленгликоль имеет средневесовую молекулярную массу приблизительно от 2000 до приблизительно 80000 Да.

10. Способ по п.9, где указанный полиэтиленгликоль имеет средневесовую молекулярную массу приблизительно от 10000 до приблизительно 40000 Да.

11. Способ по п.1, где указанный активируемый полимерный остаток выбирают из группы, состоящей из mPEG-OH, mPEG-NH₂, mPEG-CO₂H, mPEG-SO₂ и mPEG-галогена.

12. Способ по п.11, где указанный активируемый полимерный остаток представляет собой mPEG-OH.

13. Способ по п.1, где указанный активированный полимерный остаток выбирают из группы, состоящей из

,

,

и

.

14. Способ по п.13, где активированный полимерный остаток представляет собой SC-PEG

.

15. Способ по п.1, где указанную многофункциональную связывающую группу, обладающую по крайней мере одной функциональной группой, которая не взаимодействует с указанным активированным полимерным остатком, выбирают из группы, состоящей из замещенных алкилдиаминов, триаминов, природных и искусственных производных аминокислот и производных сложного малонового эфира.

16. Способ по п.15, где указанную многофункциональную связывающую группу, обладающую по крайней мере одной функциональной группой, которая не взаимодействует с указанным активированным полимерным остатком, выбирают из лизина, диаминоалкилов, дигидроксиалкилов и дитиоалкилов.

17. Способ по п.15, где многофункциональная алифатическая связывающая группа, обладающая по крайней мере одной функциональной группой, которая не взаимодействует с указанным активированным полимерным остатком, представляет собой лизин, сложный эфир лизина или сложный этиловый эфир лизина.

18. Способ по п.1, где указанный первый гасящий реагент представляет собой соединение, содержащее свободную аминную, свободную тиольную или свободную гидроксильную группу.

19. Способ по п.18, где указанный первый гасящий реагент выбирают из группы, состоящей из цистеина, бензиламина, н-бутиламина, фенилэтиламина, аминокислот с защищенным C-концевым участком и их смесей.

20. Способ по п.1, где указанный второй гасящий реагент представляет собой соединение, содержащее силильную группу или хлорангидрид.

21. Способ по п.20, где указанный второй гасящий реагент выбирают из группы, состоящей из TBDMSiCl, TMSiCl, MeI, MeSO₄, CF₃SO₃Me и Me₃OBF₄.

22. Способ по п.21, где указанный второй гасящий реагент представляет собой TBDMSiCl.

23. Способ по п.21, где соединение, способное активировать промежуточный полимерный конъюгат, представляет собой N-гидроксисукцинимид (NHS).

24. Способ по п.2, где биологически активное соединение выбирают из белков, пептидов, полипептидов, ферментов, олигонуклеотидов, связывающих антигены одноцепочечных антител (SCA), фрагментов антител и природных или синтетических лекарственных химических веществ.

25. Способ по п.24, где белок представляет собой интерферон.

26. Способ по п.25, где интерферон представляет собой α-, β- или γ-интерферон.

27. Способ по п.2, где полимерные конъюгаты выбирают из группы, состоящей из

где R_1-2 представляют собой одинаковые или различные полимерные остатки;

Y_1-6 независимо представляют собой O, S или NR₁₀, где R₁₀ выбирают из группы, состоящей из H, алкилов и замещенных алкилов C_1-6, разветвленных алкилов и замещенных разветвленных алкилов C_3-6, а также циклоалкилов C_4-8;

J представляет собой бифункциональную связывающую группу; и

D представляет собой биологически активное соединение, молекулу для нацеливания или диагностическое вещество.

28. Способ по п.1, где активируемый полимерный остаток представляет собой mPEG-OH; активирующее вещество, способное предоставлять уходящую группу, представляет собой N-гидроксисукцинидил; активированный полимерный остаток представляет собой mPEG-сукцинимидилкарбонат, первый гасящий реагент представляет собой бензиламин; второй гасящий реагент представляет собой TBMSiCl; а соединение, способное активировать промежуточные полимерные конъюгаты для связывания с биологической молекулой, представляет собой N-гидроксисукцинимидил.

29. Способ по п.28, где активированный N-гидроксисукцинимидилом промежуточный полимерный конъюгат в дальнейшем взаимодействует с биологически активным соединением.

30. Способ получения активированного полимера, включающий:

b) взаимодействие указанной первой реакционной смеси с многофункциональной связывающей группой, несущей на себе защитную группу, которая не взаимодействует с указанным активированным полимерным остатком, в условиях, когда указанный активированный полимерный остаток из первой реакционной смеси присутствует в избытке по отношению к указанной многофункциональной связывающей группе, с образованием второй реакционной смеси, которая включает указанную первую реакционную смесь и содержащий защитную группу промежуточный полимер, получаемый в результате указанного взаимодействия указанного активированного полимерного остатка с указанной многофункциональной связывающей группой;

c) гашение указанной второй реакционной смеси с использованием достаточного количества первого гасящего реагента для инактивации в ней активируемого полимерного остатка, с образованием третьей реакционной смеси, которая содержит указанный промежуточный полимер;

d) добавление к указанной третьей реакционной смеси достаточного количества второго гасящего реагента для инактивации в ней активированного полимерного остатка и образования четвертой реакционной смеси, содержащей указанный промежуточный полимер;

e) удаление защитной группы в промежуточном полимере и нейтрализацию указанной четвертой реакционной смеси с образованием пятой реакционной смеси;