RU2005138583A

RU2005138583A - Способ консервации биологических образцов, обеспечивающий сохранность нуклеиновых кислот

Info

Publication number: RU2005138583A
Application number: RU2005138583/15A
Authority: RU
Inventors: Елена Владимировна Четверина (RU); Елена Владимировна Четверина; Александр Борисович Четверин (RU); Александр Борисович Четверин; Александра Владимировна Кравченко (RU); Александра Владимировна Кравченко
Original assignee: Институт белка Российской академии наук (RU); Институт белка Российской академии наук
Priority date: 2005-12-13
Filing date: 2005-12-13
Publication date: 2007-06-20
Also published as: RU2322058C2

Claims

1. Способ консервации биологических образцов, включающий получение лизата путем смешивания биологического материала с консервирующим раствором, содержащим соединение гуанидина в количестве, достаточном для существенно полной денатурации содержащихся в образце нуклеаз, отличающийся тем, что консервирующий раствор также содержит следующие компоненты, препятствующие деградации нуклеиновых кислот: (1) восстановитель белковых S-S-связей в количестве, обеспечивающем существенно полное восстановление S-S-связей в белках лизата; (2) сильный детергент, не образующий нерастворимого соединения с гуанидином, в количестве, достаточном для формирования мицелл в лизате; (3) по крайней мере, один комплексон ионов двух- и трехвалентных металлов в количестве, обеспечивающем его молярную концентрацию в лизате заведомо более высокую, чем ожидаемая максимальная молярная концентрация ионов двух- и трехвалентных металлов; (4) буфер, поддерживающий значение рН лизата в диапазоне от 6 до 8.

2. Способ по п.1, отличающийся тем, что в процессе смешивания с консервирующим раствором биологический материал гомогенизируют.

3. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве восстановителя белковых S-S-связей используют вещество, выбранное из группы веществ, включающей 2-меркаптоэтанол, дитиотрейтол, тиомочевину и глутатион.

4. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве восстановителя белковых S-S-связей используют 2-меркаптоэтанол.

5. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве детергента используют вещество, выбранное из группы веществ, включающей саркозил, эфиры полиэтиленгликоля и полиоксиэтиленсорбитаны.

6. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве детергента используют саркозил.

7. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве комплексона используют вещество, выбранное из группы веществ, включающей ЭДТА, ЭГТА, 8-гидроксихинолин и 1,10-фенантролин.

8. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве комплексона используют ЭДТА.

9. Способ по п.1, отличающийся тем, что в качестве буфера используют соль лимонной кислоты.

10. Способ по п.1, отличающийся тем, что полученный лизат смешивают с водорастворимым органическим растворителем, способным вызывать преципитацию нуклеиновых кислот, взятым в количестве, достаточном для обеспечения существенно полной преципитации нуклеиновых кислот, присутствующих в лизате.

11. Способ по п.10, отличающийся тем, что в качестве органического растворителя используют вещество, выбранное из группы веществ, включающей низкомолекулярные спирты, ацетон, полиэтиленгликоль и диметилсульфоксид.

12. Способ по п.10, отличающийся тем, что в качестве органического растворителя используют изопропанол.

13. Способ по п.12, отличающийся тем, что объем добавляемого изопропанола вдвое больше объема лизата.