RU2001580C1

RU2001580C1 - Method of lactic acid cultures preparation making

Info

Publication number: RU2001580C1
Authority: RU
Inventors: Натали Александровна Бавина; Наталь Сергеевна Королева; Владимир Матвеевич Хараш; Тать на Всеволодовна Соколова; Валерий Иосифович Рехтман; Сергей Львович Потапов; Марина Михайловна Гребенник
Priority date: 1992-08-18
Filing date: 1992-08-18
Publication date: 1993-10-30

Abstract

Использование биотехнологи молочна промышленность , может быть использовано дл непосредственного употреблени или в качестве добавки в питание людей различной возрастной категории Сущность изобретени способ получени препарата молочнокислых культур предусматривает сквашивание молочной основы, приготовленной на обезжиренном молоке с содержанием сухих веществ 16 - 18 мас% и лимоннокислого натри - 06-0.8 мас%. выдержанной в течение 2 - 3 ч дл набухани белков, закваской приготовленной на консорциуме молочнокислых купьтур Lactobactllus acidophilus ВКПМ В-6007. и обогащение ее биомассой кефирных грибков, прогретой при температуре 74 - 82&deg;С в течение 15-20 мин. вносимой в количестве 100 - 200 мл на 1 л биомассы Lacidophilus В 1 г сухого продукта содержитс не аг менее 10 живых клеток ацидофильных бактерий и 3 - 5 мг микробного полисахарида кефирных грибков 1 зп ф-лы, 1 таблThe use of biotechnology, the dairy industry, can be used directly or as an additive in the nutrition of people of different age categories. SUBSTANCE: invention provides a method for preparing a lactic acid culture product by fermenting a milk base prepared in skim milk with a solids content of 16-18 wt% and sodium citrate 06-0.8 wt.%. aged for 2 to 3 hours to swell the proteins, the starter culture prepared in a consortium of lactic acid cups Lactobactllus acidophilus VKPM B-6007. and enriching it with biomass of kefir fungi heated at a temperature of 74 - 82 ° C for 15-20 minutes. introduced in an amount of 100 - 200 ml per 1 liter of Lacidophilus biomass. 1 g of dry product contains not less than 10 living cells of acidophilic bacteria and 3-5 mg of microbial kefir fungal polysaccharide 1 cc ph, 1 tab.

Description

Изобретение О НР,:ИТСЙ к (кютехноло- ; ии и мо/.оч ой промышленности, можег испольоигано дл непосредственного употреблени или о качестве добавки в питание дл нормализации микрофлоры кишечника , профилактики и лечени острых и хронических желудочно-кишечных заболеваний , пищевых аллергий, дл повышени иммунитета организма, выведени из него вредных веществ. В 1 г сухого аципола содержитс не монее 10 живых клеток ацидофильных бактерий и 3-5 мг микробного полисахарида.Invention About НР,: ITSI to (cuotechnology; and the industry), can be used for direct use or as a nutritional supplement for normalizing intestinal microflora, prevention and treatment of acute and chronic gastrointestinal diseases, food allergies, to increase the body's immunity, remove harmful substances from it.In 1 g of dry acipol contains not more than 10 living cells of acidophilic bacteria and 3-5 mg of microbial polysaccharide.

Известно, что процесс подготовки комбинаций (заквасок) к сушке состоит из выра- щиванил их а стерильном обезжиренном молоке, содержащем 16 мас.% с.в. 0.1 % замещенного лимоннокислого натри , внесени их в защитную среду в соотношении 30:70, представл ющую собой водный раствор , содержащий 10% сахарозы. 5% жела- т о з ы . 2.5% глютамата натри и 5% трехзамещенного лимоннокислого натри . Смесь перемешивают и разливают по 1 мл п ампулы, замораживают при -40°С и высушивают сублимацией. Основной процесс протекает при -35°С весь процесс продол- жаэчсч 48 ч. влаж.югть не более2% Ампулы зап иеэюг м..юн тIt is known that the process of preparing combinations (starter cultures) for drying consists of growing them in sterile skim milk containing 16 wt.% Dw. 0.1% substituted sodium citrate, adding them to the protective medium at a ratio of 30:70, which is an aqueous solution containing 10% sucrose. 5% is desirable. 2.5% sodium glutamate and 5% trisubstituted sodium citrate. The mixture is stirred and poured into 1 ml p ampoules, frozen at -40 ° C and freeze-dried. The main process proceeds at -35 ° C. The whole process lasts 48 hours. Wet, no more than 2%. Ampoules

Нс:пиогме слизким по технической сущности и дос и. немому положительному ре- зуоьгаг 1 изобретению влнсгсг способ пс учени Fjn /гц еп рата молочнокислых культур Б1 фаиид , состо щего из жлг.ых к л сто I лглооас lu s nc id op hi Ins и bifiiduljaf : пит; vjbsp adolescent ., H-1. С ли..об прг-дусмгп рииает приготовление накопит ольной пи i ;. -ильной среды на осчопе ибетж HI /о Huof о молока стерилизацию сре;;ы охгахдвни0 ,о температуры заквашивани , зэкзашиипние инокул том, скпа- шир. -нпе. смешивание с защитной средой, розлиа и сублимационную сушку.Hs: piogme mucus in technical essence and dos and. a dumb positive result 1 of the invention is the method of teaching students Fjn / Hz of the lactic acid cultures of B1 faid, consisting of yellow and yellow I llooas lu s nc id op hi Ins and bifiiduljaf: pit; vjbsp adolescent., H-1. With l .. about prg-dusmgp prepares to accumulate ol pi i;. -silver environment on a safe place and HI / o Huof about milk sterilization;; oh ohhhdvni0, about the fermentation temperature, inoculation with the inoculum, scalpash. -npe. mixing with a protective environment, rosli and freeze-drying.

Однако в сосч JB этого препарата входит L.acidophiius неизвестного источника происхождени , а способ приготовлени бпо- препорага не гарантирует получени препарата с высоким содержанием бифидо- бактерии, которые развиваютс значительно медленнее чем ацидофильные.However, the JB sucker of this preparation contains L. acidophiius of unknown origin, and the preparation of the bp-prepara does not guarantee the preparation with a high content of bifidobacteria, which develop much more slowly than acidophilus.

Цель изобретени - повышение биологической и пищевой ценности продукта за счзт увеличени содержани живых клеток ацидофильных бактэрий, способных выводить из организма вредные вещества.The purpose of the invention is to increase the biological and nutritional value of the product due to the increase in the content of living cells of acidophilic bacteria, capable of removing harmful substances from the body.

Сущность изобретени заключаетс в row, что биопрепарат получают с использованием закваски, приготовленной на основе консорциума молочнокислых культур LactobocMlus acidophilus ВКПМ В-6007. содержащее разные штаммы L acidophilus. выделенные из разных источников обитани , и обеспечивающего получение продукта с высокой антибиотической активностью,The essence of the invention is in row, that the biological product is obtained using a starter culture prepared on the basis of a consortium of lactic acid cultures LactobocMlus acidophilus VKPM B-6007. containing different strains of L acidophilus. isolated from different sources of habitat, and providing a product with high antibiotic activity,

сгустка с оптимальным влагосодержанием и температурой сквашивани 37 38°С, оптимальной дл L.acidophilus, накапливающей в продукте не менее 108/см3 живых клеток.a clot with an optimum moisture content and a fermentation temperature of 37–38 ° C, which is optimal for L. acidophilus, accumulating at least 108 / cm3 of living cells in the product.

Консорциум АС-1 получен путем сочетани четырех штаммов L.acidophilus, образующих сгустки сметанообразной консистенции, имеющих близкие биохимические и культуральные свойства, но выделенных из разных источников обитани .The AC-1 consortium was obtained by combining four strains of L. acidophilus, forming clots of a creamy consistency, having similar biochemical and cultural properties, but isolated from different sources of habitat.

В соответствии с общеизвестными источниками обитании штамм MKi выделен Королевой Н.С из faecos здорового взрослою , получавшего в рационе молочные продукты: штамм N«2 выделен Королевой Н.С. из faeces здорового ребенка 12 мес., находившегос на смешанном вскармливании; штамм NKr, выделен Королевой Н.С. из faeces очрослого в рационе которого преобладала молочна пища, но не было ацидо- фипьныл продуктов: штамм NKi2 выделен Королевой Н С из faeces взрослого.In accordance with well-known sources of habitat, the MKi strain was isolated by N. Koroleva from faecos of a healthy adult who received dairy products in the diet: strain N “2 was isolated by N. Koroleva. from faeces of a healthy child 12 months., who was on mixed feeding; NKr strain isolated Koroleva N.S. from faeces of an adult, in whose diet dairy food prevailed, but there were no acid-rich products: the NKi2 strain was isolated by Queen Queen N C from adult faeces.

Селекцию отобранных штаммовSelection of selected strains

L.acidopi ius дл консорциума АС-1 прооо- дп,и по с/1 Эдующим признакамL. acidopi ius for the AC-1 consortium, and c / 1

o6p4:j(jn.inne колоний Р- ()Ормы, о препарате молочной i-ультуры крупные равномерно окрашенные палочки;o6p4: j (jn.inne colonies of P- () Orma, about the preparation of milk i-ultura large uniformly colored sticks;

свертывание молока при 37 и вне- оеими 1 % закнаски 56чcoagulation of milk at 37 and external 1% snacks 56h

пнтибиогическа -.тпвность по отношеыго к кишечной паличке, ..нигеллам Зонне.pntibiological. -parities with respect to the E. coli, ..nigella Sonne.

Флькснера проте сальмонеллам, стафиликоскам чероз 2-1-48 ч. Гибель соответстИРМ ,ID от 1(0 до Ci9 9 Х клетокFlxner prote salmonella, staphylocosus cheroz 2-1-48 hours. Death according to IRM, ID from 1 (0 to Ci9 9 X cells

устойчивое гь к 0.4 0.6% фенола в молокеresistant to 0.4 0.6% phenol in milk

нлагоудерживлющзл способность 3- З.Б мл/ 10 .non-retentive ability 3- Z.B ml / 10.

Консорциум АС-1 образует в молоке сгустки сметанообразной консистенции, ак- тивно свертывает молоко при температуре 37-38 С В нем представлены штаммы L.acidophilus, выделенные от ребенка и взрослых, ч го обеспечивает его уникальность при использовании дл разных возрастных групп. Таким образом, создан консорциум АС-1 из L.acidophilus NKi, NKz. NKfj. NKi2. который хранитс во Всесоюзной коллекции промышленных микроорганиз- моо под номером ВКПМ В-6007.The AC-1 consortium forms clots of creamy consistency in milk, actively coagulates milk at a temperature of 37-38 ° C. It contains L. acidophilus strains isolated from a child and adults, which ensures its uniqueness when used for different age groups. Thus, the AC-1 consortium was created from L. acidophilus NKi, NKz. NKfj. NKi2. which is stored in the All-Union Collection of Industrial Microorganisms under the number VKPM B-6007.

Характеристика наиболее важных производственных свойств отдельных штаммов и консорциума АС-1 представлена в таблицеThe characteristics of the most important production properties of individual strains and consortium AC-1 are presented in the table

Консорциум АС-1 обеспечивает высокую скорость свертывани молока, умеренную кислотность готового продукта Хорошо развиваетс в молоке при температуре 37- 38°С. Факультативные анаэробы, предназ- начены дл периодического способа культивировани Консорциум АС-1 способен длительно сохран тьс в лиофилизиро- ванном состо нии - в запа нных ампулах до 5 лет. во флаконах от 8 до 12 мес. и при субкультивировэнии в лабораторных услови хThe AC-1 consortium provides a high milk coagulation rate, moderate acidity of the finished product. It is well developed in milk at a temperature of 37-38 ° C. Optional anaerobes intended for batch cultivation. The AC-1 consortium is able to be stored for a long time in a lyophilized state - in sealed ampoules up to 5 years. in bottles from 8 to 12 months. and in case of subcultivation under laboratory conditions

Дл получени консорциума АС-1 в стерильное молоко петлей вносили соответственно штаммы NKi. NK2, NK5. NKi2 и сквашивали культуры при 37-38°С в течение 10-12 ч. Кислотность закваски должна быть в пределах 80-100°Т.To obtain the AC-1 consortium, NKi strains were introduced into the sterile milk by loop, respectively. NK2, NK5. NKi2 and fermented cultures at 37-38 ° C for 10-12 hours. The acidity of the starter culture should be in the range of 80-100 ° T.

Известно, что микробные полисахариды , введенные в организм человека, поло- жительно вли ют на имунную систему способствуют выведению вредных веществ Японские исследователи установили, что такими свойствами обладают микробные полисахариды , содержащиес в кефирных грибках в количестве около 30% от сухой биомассы кефирных грибковIt is known that microbial polysaccharides introduced into the human body have a positive effect on the immune system and contribute to the elimination of harmful substances. Japanese researchers have found that microbial polysaccharides contained in kefir fungi in the amount of about 30% of the dry biomass of kefir fungi have such properties.

Исход из рекомендаций по применению дрожжевого полисахарида Зимозан при лечении онкологических заболевании ежедневное применение этого полисахарида per as должно составл ть 3 5 мгBased on the recommendations on the use of Zimozan yeast polysaccharide in the treatment of cancer, the daily use of this polysaccharide per as should be 3 5 mg

Целесообразно обогащать сухие биопрепараты микробным полисахаридом кефирных грибков Причем необходимо использовать биомассу кефирных грибков предварительно разведенную молочной сывороткой в соотношении 1.1 и прогретую при 74-82°С в течение 20 30 мин Количество вносимой биомассы должно составл ть 100-200 мл на 1 лIt is advisable to enrich dry biologics with the microbial polysaccharide of kefir fungi. Moreover, it is necessary to use the biomass of kefir fungi previously diluted with whey in a ratio of 1.1 and heated at 74-82 ° C for 20-30 minutes. The amount of biomass applied should be 100-200 ml per 1 liter

Использование биомассы кефирных грибков, приготовленной указанным выше способом, обеспечивает высокую сохранность и невыживаемость живых культур Lacidophilus при сублимационном высушивании , т.к. позвол ет одновременно расценить ее использование как защитную среду и фактор, повышающий иммунитет организма и способствующий выведению из него вредных веществThe use of biomass of kefir fungi, prepared in the above way, provides high preservation and non-survival of live Lacidophilus cultures during freeze-drying, because allows us to simultaneously consider its use as a protective environment and a factor that increases the body's immunity and helps to remove harmful substances from it

Кроме этого, изобретение предусматривает оптимизацию состава сухих веществ обезжиренного молока в накопительной питательной среде в сравнении с прототипом , выдержку обезжиренного молока с лимоннокислым натрием в течение 2-3 ч дл набухани белков что обеспечивает оптимальный режим сквашивани молокаIn addition, the invention provides for the optimization of the dry matter composition of skim milk in a storage medium in comparison with the prototype, the exposure of skim milk with sodium citrate for 2-3 hours to swell the proteins, which ensures optimal milk fermentation

Пример) В обезжиренное молоко внос т сухое обезжиренное молоко в количестве 80 г на 1 л устанавливают содержание сухих веществ 16 мае % и внос т 0.7 % лимоннокислого натра, тщательно перемешивают фильтруют и оставл ют дл набухани на 3 ч, затем подготовленную смесь стерилизуют при температуре 112°С (0.5 эти) в течение 7 мин. Смесь охлаждают до 37°С и внос т в нее 2% закваски, приготовленной на консорциуме АС-1. и сквашивают при температуре 37°С в течение 5 ч до образовани сгустка кислотностью 70°Т.Example) Fat-free skim milk is added to skim milk in an amount of 80 g per 1 liter; the solids content is determined on May 16% and 0.7% sodium citrate is added; the mixture is thoroughly filtered and allowed to swell for 3 hours, then the prepared mixture is sterilized at a temperature 112 ° C (0.5 eti) for 7 min. The mixture is cooled to 37 ° C and 2% of the starter culture prepared in the AC-1 consortium is introduced into it. and macerate at 37 ° C for 5 hours until a clot forms with an acidity of 70 ° T.

После этого биомассу L.acfdophllus с температурой 37°С смешивают с биомассой кефирных грибков, прогретой при температуре 79°С с выдержкой 20 мин и охлажденной до температуры 37°С. в соотношении 100 мл биомассы кефирных грибков на 1 л биомассы L acidophilus. тщательно перемешивают и разливают в стерильные лотки. Лотки помещают в сублиматор, предварительно охлажденный до -35°С. замораживают до и выдерживают при этой температуре 3 ч. а затем сушат при температуре 35°С в течение 17 ч. сухую биомассу Фасуют в стерильные пакетики. Хран т биопрепарат при 6±2иС в течение 8-12 мес. В биопрепарате содержитс 10 /см живых клеток L acidophilus и 3 мг сухого микробного потисахэридэAfter that, the biomass of L. acfdophllus with a temperature of 37 ° C is mixed with the biomass of kefir fungi, heated at a temperature of 79 ° C for 20 min and cooled to a temperature of 37 ° C. in the ratio of 100 ml of kefir fungus biomass per 1 liter of L acidophilus biomass. mix thoroughly and pour into sterile trays. The trays are placed in a sublimator, pre-cooled to -35 ° C. they are frozen before and kept at this temperature for 3 hours and then dried at a temperature of 35 ° C for 17 hours. Dry biomass is Packed in sterile bags. The biological product was stored at 6 ± 2 ° C for 8-12 months. The biological product contains 10 / cm living cells of L acidophilus and 3 mg of dry microbial potisaccharide

Пример2 В обезжиренное молоко внос т сухое обезжиренное молоко в количестве 80 г на 1 л. содержание сухих веществ довод т до 18 мас.% и внос т 0.7% лимоннокислого натра тщательно перемешивают фильтруют и оставл ют дл набухани на 3 ч затем подготовленную смесь стерилизуют при температуре 112°С (0.5 ати) в течение 7 мин Смесь охлаждают до 37°С и снос т в нее 1% закваски, приготовленной на консорциуме АС-1. тщательно перемешивают и сквашивают при температуре 37°С в течение б ч до образовани сгустка кислотностью 65°Т. После этого биомассу L acidophilus смешивают с биомассой кефирных грибков, прогретой при температуре 82°С с выдержкой 15 мин и охлажденной до температуры 37°С. в соотношении 200 мл биомассы кефирных грибков на 1 л биомассы I acidophilus. тщательно перемешивают и разливают в стерильные лотки. Лотки помещают в сублиматор, предварительно охлажденный до -35°С. замораживают до -25°С и выдерживают при этой температуре 3 ч а затем сушат при температуре 35°С в течение 17 ч Сухую биомассу в асептических услови х измельчают на вальцах и таб- летируют Хран т биопрепарат при 6±2°С в течение 8-12 мес В биопрепарате содерft1Example 2 Into skim milk was added skim milk powder in an amount of 80 g per 1 liter. the solids content was adjusted to 18 wt.% and 0.7% of sodium citrate was added, the mixture was thoroughly filtered and left to swell for 3 hours, then the prepared mixture was sterilized at a temperature of 112 ° C (0.5 ati) for 7 minutes. The mixture was cooled to 37 ° C and demolished therein 1% sourdough prepared at the AC-1 consortium. mix thoroughly and ferment at a temperature of 37 ° C for one hour until a clot forms with an acidity of 65 ° T. After that, the L acidophilus biomass is mixed with the kefir fungus biomass, heated at 82 ° C for 15 minutes and cooled to 37 ° C. in the ratio of 200 ml of biomass of kefir fungi per 1 liter of biomass I acidophilus. mix thoroughly and pour into sterile trays. The trays are placed in a sublimator, pre-cooled to -35 ° C. they are frozen to -25 ° С and kept at this temperature for 3 hours and then dried at 35 ° С for 17 hours. Dry biomass is ground under aseptic conditions on rollers and tabletted. The biological product is stored at 6 ± 2 ° С for 8 -12 months in a biological product content1

житс 10 /см живых клеток L.acldophtlus и 6 мг сухого микробного полисахарида.10 / cm of living L. acldophtlus cells and 6 mg of dry microbial polysaccharide live.

Пример 3. В обезжиренное молоко внос т сухое обезжиренное мопоко в количестве 80 г на 1 л, довед содержание сухих веществ до 18мас.%, и 0.7% лимоннокислого натра, тщательно перемешивают, фильтруют и оставл ют дл набухани на 3 ч, затем подготовленную смесь стерилизуют при температуре 112°С (0,5 эти) в течение 10 мин. Смесь охлаждают до 37°С и внос т в нее 3% закваски, приготовленной на консорциуме Lacidophllus AC-1. тщательно перемешивают , сквашивают при температуре 37°С в течение 5 ч до образовани сгустка кислотностью 70°Т. После этого биомассу L.acidophllus смешивают с биомассой кефирных грибков, подогретой при температуре 78°С с выдержкой 20 мин, и охлаждают до температуры 37°С в соотношении 200 мл биомассы кефирных грибков на 1 л биомассы L.acidophllus. тщательно перемешивают и разливают в стерильные флаконы. Флаконы помещают в сублиматор предварительно охлажденный до . замораживают до -25ПС и выдерживают при этой температуре 3 ч. а затем сушат при температуре 35ПС в течение 17 ч Флаконы укупоривают стерильными резиновыми пробками и алюминиевыми колпачками. Хран т биопрепарат при в течение 812 мес. В биопрепарате содержитс 10 /см живых клеток L.acidophilus и 6 мг сухого микробного полисахарида .Example 3. In skim milk, make dry skim mopoco in the amount of 80 g per 1 l, bringing the solids content to 18 wt.%, And 0.7% sodium citrate, mix thoroughly, filter and allow to swell for 3 hours, then the prepared mixture sterilized at a temperature of 112 ° C (0.5 of these) for 10 minutes The mixture was cooled to 37 ° C and 3% starter culture prepared in the Lacidophllus AC-1 Consortium was added thereto. mix thoroughly, ferment at a temperature of 37 ° C for 5 hours until a clot with an acidity of 70 ° T. After that, the biomass of L. acidophllus is mixed with the biomass of kefir fungi, heated at a temperature of 78 ° C for 20 minutes, and cooled to a temperature of 37 ° C in the ratio of 200 ml of biomass of kefir fungi per 1 liter of biomass of L. acidophllus. mix thoroughly and pour into sterile vials. Vials are placed in a sublimator pre-chilled to. frozen to -25PS and kept at this temperature for 3 hours and then dried at a temperature of 35PS for 17 hours. Vials are sealed with sterile rubber stoppers and aluminum caps. The biological product was stored for 812 months. The biological product contains 10 / cm living L. acidophilus cells and 6 mg dry microbial polysaccharide.

(56) Банникова Л.А.. Королева Н С.. Семени- хина В.Ф. Микробиологические основы молочного производства. М.: Агропромиздат 1987. С.146-147.(56) Bannikova L.A. Koroleva N.S. Semenikhina V.F. Microbiological basis of dairy production. M .: Agropromizdat 1987. S.146-147.

ТУ 10-02-02-789-83-92 на биопрепарат Бифацид. Госстандарт N. 2862. 19.02.92.TU 10-02-02-789-83-92 for the biological product Bifacid. Gosstandart N. 2862. 02.19.92.

Авторское свидетельство СССР NT 731946. кл. А 23 С 9/12. 1980. Авторское свидетельство СССРUSSR copyright certificate NT 731946. cl. A 23 C 9/12. 1980. USSR Copyright Certificate

№. 734277. кл. А 23 С 9/12. 1980.No. 734277.cl. A 23 C 9/12. 1980.

Murofushl M.. Mizuguchi I.. Aibara К., Maxukasi T 1986 Immtmopharmacology(12) p.29-36Murofushl M .. Mizuguchi I .. Aibara K., Maxukasi T 1986 Immtmopharmacology (12) p.29-36

Claims

1. A METHOD FOR PRODUCING A PRODUCT OF LACTIC ACID CROPS, which involves preparing a storage medium based on skim milk, sterilizing the medium, cooling to a fermentation temperature, fermenting, fermenting, mixing with a protective medium and freeze-drying, characterized in that. that skim milk with a solids content of 16-18 wt.% and citric acid sodium in an amount of 0.6 - 0.8 are used as an accumulating nutrient medium

wt.%, the resulting mixture was incubated for 2 to 3 hours to swell the proteins, fermentation was carried out by fermentation prepared by the Lactobaclllus acidophllus VKPM B-6007 lactic acid culture consortium. Fermentation was carried out until the acidity reached 60 - 80T. and as a protective medium, kefir fungus biomass is used, heated at 74 - 82 C for 15-20 minutes and cooled to 37 - 38 C in the amount of 100 - 200 ml per 1 liter of biomass.

2. The method according to claim 1, characterized in that. that the ripening is carried out at 37 - 38 C.