RU2001102261A

RU2001102261A - Способ определения антибиотиков, содержащих бета-лактамный цикл, в жидкости биологического происхождения и аналитический набор для его осуществления

Info

Publication number: RU2001102261A
Application number: RU2001102261/13A
Authority: RU
Inventors: Жак ДЕЖЕЛАЕН; Бенуа Гранье; Жан-Мари ФРЕР; Бернар ЖОРИС
Original assignee: ЮСиБи С.А.
Priority date: 1998-06-25
Filing date: 1999-03-30
Publication date: 2003-03-10

Claims

1. Способ обнаружение антибиотиков, содержащих β-лактамный цикл, в жидкости биологического происхождения, включающий следующие стадии: а) приведение определенного объема указанной жидкости биологического происхождения в контакт с некоторым количеством распознающего агента и термостатирование полученной при этом смеси в условиях, в которых возможно комплексообразование антибиотиков, которые могут присутствовать в указанной биологической жидкости, с распознающим агентом, б) приведение смеси, полученной на стадии (а), в контакт с, по меньшей мере, одним эталонным антибиотиком, иммобилизованным на подложке, в условиях, которые делают возможным образование комплекса эталонного антибиотика с тем количеством распознающего агента, которое не прореагировало на стадии (а), и в) определение количества распознающего агента, связанного с подложкой, отличающийся тем, что распознающий агент представляет собой рецептор, чувствительный к антибиотикам, содержащим β-лактамное кольцо, полученный из Bacillus licheniformis.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что рецептор, чувствительный к антибиотикам, содержащим β-лактамный цикл, представляет собой BlaR или рецептор BlaR-CTD.

3. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что рецептор, чувствительный к антибиотикам, содержащим β-лактамный цикл, связывается меткой, выбранной из металлических коллоидных частиц, коллоидных частиц селена, углерода, серы или теллура и коллоидных частиц окрашенных синтетических латексов.

4. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что рецептор, чувствительный к антибиотикам, содержащим β-лактамный цикл, связывается меткой, выбранной из флуоресцирующих веществ.

5. Способ по п. 1 или 2, отличающийся тем, что рецептор, чувствительный к антибиотикам, содержащим β-лактамный цикл, связывается меткой, выбранной из ферментов, таких как щелочная фосфатаза, пероксидазы или β-лактамазы.

6. Способ по п. 5, отличающийся тем, что рецептор, чувствительный к антибиотикам, связывается меткой-ферментом химически или генетически.

7. Способ по любому из пп. 3-6, отличающийся тем, что рецептор, чувствительный к антибиотикам, содержащим β-лактамный цикл, связывается меткой перед стадией (а).

8. Способ по любому из пп. 3-6, отличающийся тем, что рецептор, чувствительный к антибиотикам, содержащим β-лактамный цикл, связывается меткой во время или после стадии (а).

9. Способ по любому из пп. 1-8, отличающийся тем, что стадии (а) и (б) проводят одновременно.

10. Способ по любому из пп. 1-9, отличающийся тем, что подложку, применяемую на стадии (б), выбирают из пробирок, планшетов или стержней с нанесенным на их поверхность эталонным антибиотиком.

11. Способ по любому из пп. 1-9, отличающийся тем, что подложка, применяемая на стадии (б), представляет собой аналитическое устройство, состоящее из твердой панели (1), имеющей первый и второй конец, к которой прикреплены, последовательно, начиная с первого конца, мембрана (2) для очистки анализируемой жидкости, мембрана (3), на которой иммобилизовано одно или более улавливающих веществ, и поглощающая мембрана (4).

12. Способ по любому из пп. 1-9, отличающийся тем, что подложка, применяемая на стадии (б), состоит из множества магнитных или немагнитных гранул (шариков).

13. Аналитический набор для обнаружения антибиотиков в жидкости биологического происхождения способом по любому из пп. 1-12, содержащий, по меньшей мере, один распознающий агент, чувствительный к антибиотикам, содержащим β-лактамный цикл, полученный из Bacillus licheniformis, и, по меньшей мере, один эталонный антибиотик, иммобилизованный на подложке.