Claims (21)
1. Продуцирующие L-лизин коринебактерии, которые имеют усиленный ген lysE и в которых дополнительно усиливают, прежде всего сверхэкспрессируют, по отдельности или вместе гены, выбранные из группы, включающей ген dapA, ген lysC, ген рус и ген dapB.1. L-lysine-producing corynebacteria that have an enhanced lysE gene and which additionally are enhanced, especially by overexpressing, individually or together, genes selected from the group comprising the dapA gene, lysC gene, rus gene and dapB gene.
2. Коринебактерии по п. 1, в которых усиливают, прежде всего сверхэкспрессируют, ген dapB. 2. Corynebacterium according to claim 1, in which the dapB gene is enhanced, primarily overexpressed.
3. Коринебактерии по п. 1, в которых усиливают, прежде всего сверхэкспрессируют, ген dapB, который дополнительно содержит 5'-область, расположенную перед сайтом начала трансляции этого гена и представленную в SEQ ID NO: l. 3. Corynebacteria according to claim 1, in which the dapB gene, which further comprises a 5'-region located in front of the translation start site of this gene and presented in SEQ ID NO: l, is enhanced, first of all, overexpressed.
4. Коринебактерии по п. 1, которые имеют мутации МС20 или МА16 в промоторе гена dapA, приведенные в SEQ ID NO: 5 и SEQ ID NO: 6. 4. Corynebacterium according to claim 1, which have mutations MC20 or MA16 in the promoter of the dapA gene shown in SEQ ID NO: 5 and SEQ ID NO: 6.
5. Реплицируемая в коринебактериях предпочтительно рекомбинантная ДНК из коринебактерий, которая имеет по крайней мере нуклеотидную последовательность, которая дополнительно кодирует 5'-область, расположенную перед транслируемой областью гена dapB и представленную в SEQ ID NO: l. 5. Corynebacterial replicated preferably recombinant corynebacterial DNA that has at least a nucleotide sequence that further encodes the 5 ′ region located in front of the translated region of the dapB gene and shown in SEQ ID NO: l.
6. Реплицируемая ДНК по п. 5, содержащая нуклеотидную последовательность, представленную в SEQ ID NO: l. 6. The replicated DNA according to claim 5, containing the nucleotide sequence shown in SEQ ID NO: l.
7. Коринебактерии по п. 1, в которых усиливают, прежде всего сверхэкспрессируют, ген dapB и ген lysC. 7. Corynebacterium according to claim 1, in which the dapB gene and the lysC gene are enhanced, primarily overexpressed.
8. Способ получения L-лизина путем ферментации с использованием коринебактерии, имеющих усиленный ген lysE, отличающийся тем, что используют бактерии, в которых по отдельности или вместе усиливают, прежде всего сверхэкспрессируют, кодирующие нуклеотидные последовательности генов, выбранных из группы, включающей ген dapA, ген lysC, ген рус и ген dapB. 8. A method for producing L-lysine by fermentation using a corynebacterium having an enhanced lysE gene, characterized in that bacteria are used that individually or together enhance, primarily overexpress, encoding the nucleotide sequences of genes selected from the group comprising the dapA gene, lysC gene, rus gene and dapB gene.
9. Способ по п. 8, отличающийся тем, что используют бактерии, в которых одновременно усиливают, прежде всего сверхэкспрессируют, ген dapA и ген lysC. 9. The method according to p. 8, characterized in that the use of bacteria in which at the same time amplify, especially overexpress, the dapA gene and lysC gene.
10. Способ по п. 8, отличающийся тем, что используют бактерии, в которых одновременно усиливают, прежде всего сверхэкспрессируют, ген dapA и ген dapB. 10. The method according to p. 8, characterized in that the use of bacteria in which at the same time amplify, especially overexpress, the dapA gene and dapB gene.
11. Способ по п. 8, отличающийся тем, что используют штамм, трансформированный одной или несколькими векторной(-ыми) плазмидой(-ами), где векторная(-ые) плазмида(-ы) несет(-ут) нуклеотидные последовательности одного или нескольких предназначенных для усиления генов. 11. The method according to p. 8, characterized in that they use a strain transformed with one or more vector (s) plasmid (s), where the vector (s) plasmid (s) carries (s) the nucleotide sequence of one or several designed to enhance genes.
12. Способ по п. 9, отличающийся тем, что используют штамм, трансформированный векторной плазмидой, где векторная плазмида несет кодирующие нуклеотидные последовательности гена dapA, гена lysC и гена lysE. 12. The method according to p. 9, characterized in that they use a strain transformed with a vector plasmid, where the vector plasmid carries the coding nucleotide sequences of the dapA gene, lysC gene and lysE gene.
13. Способ по п. 1, отличающийся тем, что используют штамм, трансформированный одной или несколькими векторной(-ыми) плазмидой(-ами), где векторная(-ые) плазмида(-ы) несет(-ут) по отдельности или в сочетании кодирующую(-ие) нуклеотидную(-ые) последовательность (-и) генов dapA, lysC, рус и lysE. 13. The method according to p. 1, characterized in that the strain is used, transformed by one or more vector (s) plasmid (s), where the vector (s) plasmid (s) carries (s) individually or in a combination of the coding (s) nucleotide (s) sequence (s) of the dapA, lysC, rus and lysE genes.
14. Способ по любому из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что используют бактерии, относящиеся к виду Corynebacterium glutamicum. 14. The method according to any one of the preceding paragraphs, characterized in that the bacteria belonging to the species Corynebacterium glutamicum are used.
15. Способ ферментативного получения L-лизина по любому из предыдущих пунктов, отличающийся тем, что осуществляют следующие стадии: ферментацию с использованием продуцирующих L-лизин бактерий, в которых усиливают описанные гены, накопление L-лизина в среде или в клетках бактерий и выделение L-лизина. 15. The method of enzymatic production of L-lysine according to any one of the preceding paragraphs, characterized in that the following stages are carried out: fermentation using L-lysine producing bacteria in which the described genes are enhanced, the accumulation of L-lysine in the medium or in bacterial cells and the isolation of L lysine.
16. Штамм Escherichia coli K-12 DH5α/pEC71ysE, депонированный под регистрационным номером DSM 12871. 16. The strain Escherichia coli K-12 DH5α / pEC71ysE, deposited under registration number DSM 12871.
17. Штамм Escherichia coli K-12 DH5α/pEC7dapBlysE, депонированный под регистрационным номером DSM 12875. 17. The strain Escherichia coli K-12 DH5α / pEC7dapBlysE, deposited under registration number DSM 12875.
18. Штамм Corynebacterium glutamicum DSM5715/pJC23, депонированный под регистрационным номером DSM 12869. 18. The strain Corynebacterium glutamicum DSM5715 / pJC23, deposited under the registration number DSM 12869.
19. Штамм Corynebacterium glutamicum DSM5715aecD: : dapA(MA16), депонированный под регистрационным номером DSM 12867. 19. The strain Corynebacterium glutamicum DSM5715aecD:: dapA (MA16), deposited under registration number DSM 12867.
20. Штамм Corynebacterium glutamicum DSM5715aecD: : dapA(MC20), депонированный под регистрационным номером DSM 12868. 20. The strain Corynebacterium glutamicum DSM5715aecD:: dapA (MC20), deposited under registration number DSM 12868.
21. Штамм Corynebacterium glutamicum DM678, депонированный под регистрационным номером DSM 12866. 21. The strain Corynebacterium glutamicum DM678, deposited under registration number DSM 12866.