RU1808875C

RU1808875C - Способ ферментативного получени целлобиозы

Info

Publication number: RU1808875C
Authority: RU
Inventors: Мирзаатхам Мирзахакимович Рахимов; Шамси Камил оглы Новрузов; Нигора Абдуазизовна Абдурашидова; Бахтияр Темирович Юлдашев; Владимир Иванович Артемьев; Александр Валентинович Емельянов
Original assignee: Ташкентский Государственный Университет Им.В.И.Ленина; Многопрофильная Производственная Фирма "Папирус"
Priority date: 1990-03-29
Filing date: 1990-03-29
Publication date: 1993-04-15

Abstract

Изобретение относитс к биотехнологии и может быть использовано дл получени целлобиозы ферментативным путем. Сущность способа заключаетс в том, что измельченное целлюлозосодержащее сырье помещают в емкость, содержащую буферный раствор - Ма-ацетат-цитратный раствор с рН 3,5-5,5, ввод т фермент и провод т гидролиз в течение 12-24 ч. Отделение целлобиозы осуществл ют путем добавлени этилового спирта в количестве, обеспечивающем его концентрацию в смеси 55-65%.

Description

Изобретение относитс к области биотехнологии и может быть использовано дл получени целлобиозьг ферментативным путем .

Целью изобретени вл етс повышение выхода целлобиозы.

Сущность способа заключаетс в том, что целлюлозосодержащее сырье измельчают , помещают в термостатированную емкость с мешалкой, содержащую буферный раствор - Na-ацетат-цитратный раствор с рН 3,5-5,5, добавл ют фермент и провод т гидролиз в течение 12-24 ч.

Отделение целлобиозы осуществл ют путем добавлени этилового спирта в количестве , обеспечивающем его концентрацию в смеси 55-65%.

Способ осуществл ют следующим образом .

1 мас.ч. (в.ч.) картона или ленты, или бумажных отходов МС-10 измельчают на шаровой или гидромельнице. Измельченный продукт помещают в термостатируе- мую емкость с мешалкой, содержащую 20 в.ч. 0,05-0,15 М Na-ацетат-цитратного буферного раствора, рН 3,5-5,5. Затем в смесь ввод т 1 в.ч. фермента, в качестве которого используют технический препарат целлоЁИ- ридин ГЗх. Ферментативный гидролиз провод т при перемешивании в течение 12-24 ч, 50-55°С. Отдел ют негидролизованный субстрат от гидролизата фильтрованием под вакуумом. В гидролизат ввод т новую порцию субстрата дл адсорбции ферментов , наход щихс в растворе. Гидролизат отдел ют от субстрата также фильтрованием под вакуумом. Обесцвечивают при помощи катионита КУ-1 или бентонита, после чего концентрируют при помощи ротацион00

о

00 00 VI

ел

ного испарител до 55-80% содержани сухих веществ. В концентрированный гидро- лизат постепенно при перемешивании добавл ют 96%-ный этиловый спирт до конечной его концентрации 55-65%. Получен- ную смесь оставл ют на 5-6 ч до полного осаждени целлобиозы, которую центрифугированием (2-3 тыс.об/мин) отдел ют от супернатанта. Полученные кристаллы промывают 55-65% спиртовым раствором и вы- сушивают при комнатной температуре.

Анализ готового продукта: выход целлобиозы 34-40%; степень конверсии 40-45%; температура плавлени 225°С: примеси глюкозы отсутствуют; примеси солей отсут- ствуют; примеси фермента отсутствуют.

Пример 1. В качестве субстрата используют 1 в.ч. картона. Получение целлобиозы провод т по вышеизложенному описанию . Гидролиз ведут в 0,1 М Na-ацетат-цитратном буфере. Дл осаждени целлобиозы используют этиловый спирт с конечной концентрацией 60%. Выход целлобиозы40% Степень конверсии 43%. Пример 2.В качестве субстрата используют ленту. Технологические услови аналогичны примеру 1.

Выход целлобиозы34% Степень конверсии 40% Пример З.В качестве субстрата используют бумажные отходы МС-10. Дл получени целлобиозы используют вышеизложенное описание.

Выход целлобиозы35% Степень конверсии 42% Пример 4. В качестве субстрата используют картон. Гидролиз провод т по вышеизложенному описанию, использу 0,05 М Na-ацетат-цитратного буфера. рН 5,5.

Выход целлобиозы30% Степень конверсии 40% Пример 5. Ферментативный гидролиз провод т как описано в примере 4, ис- пользу 0,10 М Na-ацетат-цитратный буфер, рН5,5.

Выход целлобиозы40% Степень конверсии 45% Пример 6. Ферментативный гидро- лиз провод т аналогично примеру 4. Используют 0,20 М Na-ацетат-цитратный буфер, рН 5,5.

Выход целлобиозы28%

Степень конверсии32% Пример 7. Ферментативный гидролиз провод т как описано в примере 5. Используют 0.10 М Na ацетат-цитратный буфер. рН 3,0.

Выход целлобиозы22% Степень конверсии 25% Пример 8. Ферментативный гидролиз провод т по примеру 5. Используют 0,10 М Na-ацетат-цитратный буфер. рН 3,5.

Выход целлобиозы30% Степень конверсии 34% Пример 9. Аналогично примеру 5. рН буферной системы 5,5.

Выход целлобиозы40% Степень конверсии 45% Пример 10. Аналогично примеру 5. рН буферной системы 3,5.

Выход целлобиозы35% Степень конверсии 38% П ример 11. АН алогично примеру 5, рН буферной системы 6,0.

Выход целлобиозы ,28% Степень конверсии 32% Пример 12. Аналогично примеру 5. Осаждение целлобиозы из гидролизата проводили 50% этиловым спиртом.

Выход целлобиозы35% Степень конверсии 45% Пример 13. Аналогично примеру 5. Осаждение целлобиозы провод т 60% раствором этилового спирта.

Выход целлобиозы40% Степень конверсии 45% Пример 14. Аналогично примеру 5. Осаждение гидролизата проводили 70% раствором этилового спирта.

Выход целлобиозы40% Степень конверсии 45%

Claims

Формула изобретени Способ ферментативного получени целлобиозы, включающий ферментативный гидролиз целлюлозосодержащего сырь в буферной среде, упаривание полученного гидролизата и выделение целлобиозы, отличающийс тем, что, с целью повышени выхода целлобиозы, в качестве буферной среды используют Na-ацетат-цитратный раствор с рН 3,5-5,5, а выделение целлобиозы осуществл ют путем добавлени этилового спирта в количестве, обеспечивающем его концентрацию в смеси 55-65%.