RU1092946C

RU1092946C - Strain pseudomonas acruginosa sepotype 6 n 40 used for obtaining pseudomonous antigen

Info

Publication number: RU1092946C
Authority: RU
Inventors: Н.К. Седов; А.В. Селиванов
Original assignee: Всесоюзный государственный научно-контрольный институт ветеринарных препаратов
Priority date: 1982-07-23
Filing date: 1982-07-23
Publication date: 1995-10-27

Description

Изобретение относится к области ветеринарной микробиологии, в частности к получению штаммов, используемых при изготовлении препаратов для профилактики и лечения псевдомоноза животных. The invention relates to the field of veterinary microbiology, in particular to the production of strains used in the manufacture of preparations for the prevention and treatment of animal pseudomoniasis.

Псевдомоноз пушных зверей, в том числе норок, острое инфекционное заболевание проявляется энзоотически, сопровождается геморрагическим воспалением, отеком легких, что чаще всего ведет к гибели животных. В настоящее время это заболевание зарегистрировано в странах, занимающихся клеточным разведением пушных зверей. Pseudomonosis of fur animals, including mink, an acute infectious disease manifests itself enzootically, accompanied by hemorrhagic inflammation, pulmonary edema, which most often leads to the death of animals. Currently, this disease is registered in countries involved in cell breeding of fur animals.

Возбудитель псевдомоноза обладает серотиповой вариабильностью. Данные эпизоотологических наблюдений и результаты типирования культур возбудителя псевдомоноза, выделенных от норок в разных регионах страны, показывают, что зарегистрированы преимущественно четыре серотипа возбудителя псевдомоноза, а именно 5, 6, 8 и 11 (по схеме Навs). The causative agent of pseudomonosis has serotypic variability. Epizootological observations and the results of typing of cultures of the pseudomonosis pathogen isolated from minks in different regions of the country show that mainly four serotypes of the pseudomonosis pathogen were recorded, namely 5, 6, 8 and 11 (according to the Navs scheme).

В настоящее время известны штаммы Pseudomonas aeruginosa используемые для изготовления иммунных препаратов для профилактики и лечения псевдомоноза человека. Currently known strains of Pseudomonas aeruginosa used for the manufacture of immune preparations for the prevention and treatment of human pseudomonosis.

Известен также штамм Pseudomonаs aeruginosa N 202 серотипа 6, используемый для изготовления моновалентной вакцины против псевдомоноза норок. Also known is the strain Pseudomonas aeruginosa N 202 serotype 6, used for the manufacture of a monovalent vaccine against pseudomonosis of minks.

Однако производственный штамм возбудителя псевдомоноза N 202 серотипа 6 имеет нестабильные вирулентные свойства. However, the production strain of the causative agent of pseudomonosis N 202 serotype 6 has unstable virulent properties.

Целью изобретения является получение штамма Pseudomonas aeruginosa серотипа 6 N 40, обладающего стабильными свойствами вида, используемого для изготовления псевдомонозного антигена при получении гипериммунной сыворотки и вакцины. The aim of the invention is to obtain a strain of Pseudomonas aeruginosa serotype 6 N 40 with stable properties of the species used for the manufacture of pseudomonas antigen in the preparation of hyperimmune serum and vaccines.

Штамм Pseudomonas aeruginosa N 40 (лабораторный N 381-n) получен путем целенаправленной селекции из исходного полевого штамма 381. Штамм хранится в коллекции микроорганизмов лаборатории контроля и стандартизации препаратов, применяемых в аэрозольном состоянии, Всесоюзного государственного научно-контрольного института ветеринарных препаратов. The strain Pseudomonas aeruginosa N 40 (laboratory N 381-n) was obtained by targeted selection from the original field strain 381. The strain is stored in the microorganism collection of the laboratory for monitoring and standardization of drugs used in the aerosol state of the All-Union State Scientific and Control Institute of Veterinary Preparations.

Штамм Pseudomonas aeruginosa серотип 6 N 40 характеризуется следующими свойствами. The strain Pseudomonas aeruginosa serotype 6 N 40 is characterized by the following properties.

Морфологические свойства. Грамотрицательные палочки со слегка закругленными концами 0,6-0,8 ммк длины и 0,5-0,6 ммк ширины расположены в хранившихся культурах поодиночке, в свежепассированных встречаются в виде коротких цепочек, подвижные, спор и капсул не образуют. Morphological properties. Gram-negative rods with slightly rounded ends of 0.6-0.8 mmk length and 0.5-0.6 mmk width are located individually in the stored cultures, in freshly-passaged ones they are found in the form of short chains, mobile, spores and capsules do not form.

Культурально-биохимические свойства. Хорошо растет на обычных (МПБ и МПА) и специальных (бульон и агар Хоттингера и Мартена) питательных средах. На плотных питательных средах растет в виде круглых с сероватым оттенком колоний, вокруг которых образуется желто-зеленая зона за счет выхода в питательную среду пигмента пиоцианина. Культура штамма растет при 4-41^оС. Температура 37-38^оС является оптимальной.Cultural and biochemical properties. It grows well on ordinary (MPB and MPA) and special (broth and agar Hottinger and Marten) culture media. On dense nutrient media, it grows in the form of colonies round with a grayish tint, around which a yellow-green zone forms due to the release of the pyocyanin pigment into the nutrient medium. The culture of the strain grows at 4-41 ^about C. The temperature of 37-38 ^about With is optimal.

При культивировании на жидких питательных средах культура вызывает образование поверхностной пленки серо-белого цвета, продуцирует пигмент пиоцианин, за счет которого среда через 24-36 ч культивирования приобретает культивирования приобретает желто-зеленую окраску. When cultivated on liquid nutrient media, the culture causes the formation of a surface film of gray-white color, produces the pigment pyocyanin, due to which the medium acquires cultivation, acquires a yellow-green color after 24-36 hours of cultivation.

Культура штамма обладает гемолитической, желатиназной, каталазной, лецитиназной активностью, ферментирует без образования газа глюкозу, пептонизирует молоко. The strain culture has hemolytic, gelatinase, catalase, lecithinase activity, ferments glucose without gas formation, peptones milk.

Потребность в кислороде. Строгий аэроб. The need for oxygen. Strict aerob.

Антигенные и серологические свойства. Культура штамма имеет жгутиковые Н и соматические О антигены. При идентификации с сыворотками по классификации Хабс относится к серотипу 6. Иммунологическим фактором, определяющим серотип, является термостабильный антиген микробной клетки. Antigenic and serological properties. The strain culture has flagella N and somatic O antigens. When identifying with serums according to the classification, Hubs refers to serotype 6. The immunological factor determining the serotype is the thermostable microbial cell antigen.

Вирулентные свойства. Культура штамма Pseudomonas aeruginosa серотипа 6 N 40 обладает стабильными вирулентными свойствами. 50%-ная летательная доза (ЛД₅₀) суточной суспензии агаровой культуры составляет: для нелинейных белых мышей массой 14-16 г 100-125 млн. микробных клеток; для морских свинок массой 220-250 г 500-800 млн. микробных клеток, для тхорзофреток и норок 3-9 месячного возраста 1,25-1,75 млрд. микробных клеток.Virulent properties. The culture of the strain Pseudomonas aeruginosa serotype 6 N 40 has stable virulent properties. The 50% flying dose (LD ₅₀ ) of the daily suspension of agar culture is: for non-linear white mice weighing 14-16 g, 100-125 million microbial cells; for guinea pigs weighing 220-250 g, 500-800 million microbial cells, for thorzofret and minks 3-9 months of age 1.25-1.75 billion microbial cells.

Иммуногенные свойства. При внутримышечном способе введения инактивированная 0,3% -ным раствором формалина суточная суспензия агаровой культуры предохраняет от контрольного заражения 50% подопытных животных: морских свинок массой 300-350 г. иммунизированных в дозе 63 млн. микробных клеток; тхорзофреток и норок 3-9 месячного возраста, иммунизированных в дозах 0,125-0,250 млрд. микробных клеток. Immunogenic properties. With the intramuscular route of administration, the daily agar culture suspension inactivated by a 0.3% formalin solution protects 50% of experimental animals from control infection: guinea pigs weighing 300-350 g immunized at a dose of 63 million microbial cells; thorzofretok and minks 3-9 months of age immunized in doses of 0.125-0.250 billion microbial cells.

Превентивные свойства гипериммунных сывороток, полученных к штамму Pseudomonas aeruginosa серотип 6 N 40. Гипериммунные сыворотки крови волов-продуцентов, полученные как к моновалентному антигену штамма Ps. aeruginosa серотип 6 N 40, так и при использовании его в ассоциации с другими серотипами штаммов возбудителя псевдомоноза достигают титра 1:3200-6400. Защитный титр при контрольном заражении составляет 1:400. Preventive properties of hyperimmune sera obtained for the strain Pseudomonas aeruginosa serotype 6 N 40. Hyperimmune blood serum of oxen-producers obtained as a monovalent antigen of the strain Ps. aeruginosa serotype 6 N 40, and when used in association with other serotypes of the pseudomonosis pathogen strains reach a titer of 1: 3200-6400. The protective titer at control infection is 1: 400.

По сравнению с исходным штаммом Ps. aeruginosa N 381 предлагаемый штамм Pseudomonas aеruginosa N 40 имеет следующие отличия (см. таблицу). Compared to the original strain Ps. aeruginosa N 381 the proposed strain of Pseudomonas aeruginosa N 40 has the following differences (see table).

Штамм Pseudomonas aeruginosa серотип 6 N 40 может быть использован в ветеринарной практике для изготовления моновалентной и поливалентной сыворотки против псевдомоноза сельскохозяйственных животных и пушных зверей, в том числе и норок, а также моновалентной и поливалентной вакцины для профилактики псевдомоноза норок и других сельскохозяйст- венных животных. The strain Pseudomonas aeruginosa serotype 6 N 40 can be used in veterinary practice for the manufacture of monovalent and polyvalent serums against pseudomonosis of farm animals and fur animals, as well as monovalent and multivalent vaccines for the prevention of pseudomonosis of minks and other agricultural animals.

Штамм апробирован в лаборатории контроля и стандартизации препаратов, применяемых в аэрозольном состоянии, Всесоюзного государственного научно-контрольного института ветпрепаратов при получении моновалентной и поливалентной гипериммунной сыворотки, моновалентной и поливалентной вакцины. The strain was tested in the laboratory for control and standardization of drugs used in the aerosol state of the All-Union State Scientific and Control Institute of Veterinary Drugs upon receipt of monovalent and polyvalent hyperimmune serum, monovalent and multivalent vaccines.

Claims

The strain Pseudomonas acruginosa serotype 6 N 40 (collection of the All-Union State Research Institute of Veterinary Medicines) used for the manufacture of pseudomonas antigen.