RU2035918C1 - Method for producing duck virus hepatitis vaccine - Google Patents
Method for producing duck virus hepatitis vaccine Download PDFInfo
- Publication number
- RU2035918C1 RU2035918C1 SU5006797A RU2035918C1 RU 2035918 C1 RU2035918 C1 RU 2035918C1 SU 5006797 A SU5006797 A SU 5006797A RU 2035918 C1 RU2035918 C1 RU 2035918C1
- Authority
- RU
- Russia
- Prior art keywords
- virus
- ducklings
- vaccine
- strain
- hepatitis
- Prior art date
Links
Images
Abstract
Description
Изобретение относится к ветеринарной вирусологии, в частности к способам изготовления вакцины против вирусного гепатита утят. The invention relates to veterinary virology, in particular to methods for the manufacture of a vaccine against viral hepatitis ducklings.
Вирусный гепатит высококонтагиозная остропротекающая болезнь молодняка до 30-дневного возраста со смертностью, достигающей 100% Взрослые утки переболевают бессимптомно, но пожизненно остаются вирусоносителями. Viral hepatitis is a highly contagious acute disease of young animals up to 30 days of age with mortality rates as high as 100%. Adult ducks are asymptomatic, but remain virus carriers for life.
Медикаментозного лечения вирусного гепатита нет, поэтому ведущее место в борьбе с этой болезнью отводится средствам специфической профилактики. There is no drug treatment for viral hepatitis, therefore, specific prevention is given the leading place in the fight against this disease.
Известен способ изготовления вакцины против вирусного гепатита утят, включающий получение вируссодержащего материала из штамма вируса гепатита утят "К-УНИИП" на куриных эмбрионах, добавление антибиотиков, расфасовку готового препарата [1]
Известен также способ изготовления вакцины против вирусного гепатита утят, включающий получение вируссодержащего материала из штамма вируса гепатита утят "ЗМ" на утиных эмбрионах, добавление антибиотиков, проверку и расфасовку готового препарата [2]
Недостатком известных способов является то, что в процессе получения вакцины часто происходит контаминация вируссодержащего материала грибковой и бактериальной флорой, что сказывается на ее качестве и сроках сохранности биологической активности. Кроме того, на их производство требуются значительные материальные средства.A known method of manufacturing a vaccine against viral hepatitis ducklings, including obtaining virus-containing material from a strain of hepatitis virus ducklings "K-UNIIP" on chicken embryos, adding antibiotics, packaging the finished product [1]
There is also known a method of manufacturing a vaccine against viral hepatitis ducklings, including obtaining virus-containing material from a strain of hepatitis virus ducklings "ZM" on duck embryos, adding antibiotics, checking and packaging of the finished product [2]
A disadvantage of the known methods is that in the process of obtaining a vaccine, contamination of the virus-containing material with fungal and bacterial flora often occurs, which affects its quality and the shelf life of biological activity. In addition, their production requires significant material resources.
Целью изобретения является повышение выхода вируссодержащего материала, удешевление целевого продукта с повышением его качества. The aim of the invention is to increase the yield of virus-containing material, cheapening the target product with increasing its quality.
Для этого, в качестве вакцинного штамма используют штамм "ВГНКИ-К" вируса гепатита утят, который выращивают в суспензии тканевых эксплантатов утиного эмбриона 11-12-дневного возраста в течение 72 ч на роллерной или спиннерной установке при скорости вращения 10-12 об/мин. Полученный вируссодержащий материал перед расфасовкой смешивают с сорбит-желатозным стабилизатором в соотношении 1:3, а затем лиофильно высушивают. For this, the ducklings hepatitis virus strain “VGNKI-K” is used as a vaccine strain, which is grown in suspension of tissue explants of duck embryo 11-12 days old for 72 hours on a roller or spinner installation at a rotation speed of 10-12 rpm . The resulting virus-containing material before packaging is mixed with a sorbitol-gelatin stabilizer in a ratio of 1: 3, and then freeze-dried.
Вакционный штамм вируса гепатита утят "ВГНКИ-К" получен в результате адаптации эмбрионального штамма вируса гепатита утят "ВГНКИ Эм-У" к монослойной культуре и суспензии тканевых эксплантатов утиного эмбриона. The vaccine strain of ducklings hepatitis virus “VGNKI-K” was obtained as a result of the adaptation of the embryonic strain of hepatitis virus ducklings “VGNKI Em-U” to a monolayer culture and suspension of tissue explants of duck embryo.
Штамм вирусного гепатита утят депонирован в коллекции вирусов Всесоюзного научно-исследовательского института ветеринарных препаратов, имеет регистрационный номер "ВГНКИ-К-ДЕП". The ducklings viral hepatitis strain has been deposited in the virus collection of the All-Union Scientific Research Institute of Veterinary Medicines and has the registration number VGNKI-K-DEP.
Штамму вируса гепатита утят "ВГНКИ-К" присущи следующие признаки и свойства:
Морфологические признаки. Вирусные частицы округлой формы величиной 20-40 нм.The strain of hepatitis virus ducklings "VGNKI-K" inherent in the following signs and properties:
Morphological signs. Round shaped viral particles of 20-40 nm.
Культуральный свойства. Штамм вируса гепатита утят "ВГНКИ-К" размножается в суспензии эксплантатов и монослойной культуре фибробластов утиного эмбриона, накопление вируса составляет не менее 105,0 ЭЛД 50/0,2 см3. В монослойной культуре клеток вирус на 2-3 сут после заражения вызывает слабые цитопатические изменения в виде очаговых округлений клеток, дегенерацию и отслоение от поверхности стекла не менее 10% клеток.Cultural properties. The ducklings hepatitis virus strain “VGNKI-K” propagates in the suspension of explants and in a monolayer culture of duck embryo fibroblasts, the virus accumulation is not less than 10 5.0
Антигенные свойства. Штамм вируса гепатита утят "ВГНКИ-К" родственен штаммам вируса гепатита, выделенным от уток. На введение штамма в организме образуются вируснейтрализующие антитела в титрах 1:4-1:128. Antigenic properties. The ducklings hepatitis virus strain "VGNKI-K" is related to the hepatitis virus strains isolated from ducks. At the introduction of the strain in the body, virus-neutralizing antibodies are formed in titers of 1: 4-1: 128.
Безвредность. Штамм "ВГНКИ-К" безвреден для утят и взрослых уток и при внутримышечном введении в дозе 1 ˙ 105 ЭЛД 50/0,2 см3 не вызывает изменений в клиническом состоянии птицы.Harmlessness. The strain "VGNKI-K" is harmless to ducklings and adult ducks and when administered intramuscularly at a dose of 1 ˙ 10 5
Патогенность. При заражении 11-12-дневных эмбрионов уток штамм "ВГНКИ-К" вызывает их гибель через 48-72 ч. Pathogenicity. When infected with 11-12-day-old duck embryos, the strain "VGNKI-K" causes their death after 48-72 hours
Стабильность биологических свойств прослежена до 25 пассажа. The stability of biological properties is traced to
Иммуногенные свойства. Введение вакцины из штамма "ВГНКИ-К" против вирусного гепатита утят суточным утятам в разведении 1:10 и взрослым уткам в нативном состоянии индуцирует у 100% поголовья образование стойкого и напряженного иммунитета. Immunogenic properties. The introduction of the vaccine from the strain "VGNKI-K" against viral hepatitis ducklings daily ducklings at a dilution of 1:10 and adult ducks in their native state induces the formation of stable and intense immunity in 100% of the livestock.
П р и м е р 1. Получают 10, 11, 12, 14, 19 дневные утиные эмбрионы. После дезинфекции скорлупы эмбрионов асептически извлекают тушки (удаляют глаза, клюв, лапки) и механически измельчают до получения суспензии, которую переносят в стерильные емкости с культуральной средой (0,5% раствор ГЛА + среда Игла + среда 199 + сыворотка крови крупного рогатого скота). Суспензию эксплантатов заражают вакцинным штаммом вируса гепатита утят "ВГНКИ-К" в дозе 1-5 лог. ЭЛД50/0,2 см3. После адсорбции вируса в течение 1 ч при комнатной температуре добавляют поддерживающую питательную среду. Получение вируссодержащего материала проводят на роллейной или спиннерной установке со скоростью вращения 5, 10, 12 и 15 об/мин в течение 24, 48, 72 и 96 ч. Накопление вируса в эксплантатах определяют титрованием на утиных эмбрионах 11-12-дневного возраста путем заражения на ХАО. Данные по накоплению титра вакцинного штамма вируса гепатита в зависимости от возраста утиных эмбрионов, использованных для получения эксплантатов, представлены в табл.1.PRI me
Из табл. 1 видно, что максимальное накопление вируса в титрах 5,99-5,50 логарифмов ЭЛД 50/02, см3 происходит при использовании для получения эксплантатов 11-12-дневных утиных эмбрионов.From the table. Figure 1 shows that the maximum virus accumulation in titers of 5.99-5.50 of the logarithms of
В табл.2 представлены сведения по влиянию дозы, используемой для заражения эксплантатов, на накопление в них вируса гепатита. Table 2 provides information on the effect of the dose used to infect the explants on the accumulation of hepatitis virus in them.
Наибольшее накопление вируса, как следует из табл.2, обеспечивает заражающая доза 4 лог. ЭЛД 50/02, см3.The greatest accumulation of the virus, as follows from table 2, provides an infectious dose of 4 log. ELD 50/02, cm 3 .
В табл.3 представлены сведения по влиянию частоты вращения роллейной установки на накопление вируса гепатита утят. Table 3 presents information on the influence of the rotation frequency of the roll-on installation on the accumulation of the ducklings hepatitis virus.
Как следует из табл.3, при режиме вращения 10-12 об/мин вирус накапливается до уровня 5,75-5,99 лог. ЭЛД 50/0,2 см3.As follows from Table 3, with a rotation mode of 10-12 rpm, the virus accumulates to a level of 5.75-5.99 log. ELD 50 / 0.2 cm 3 .
Результаты по накоплению вируса гепатита в зависимости от времени культивирования представлены в табл.4. The results of the accumulation of hepatitis virus depending on the time of cultivation are presented in table 4.
Данные табл.4 показывают, что наиболее высокое содержание вируса достигается при культивировании инфицированных эксплантатов в течение 72 ч. The data in Table 4 show that the highest virus content is achieved by culturing infected explants for 72 hours.
П р и м е р 2. Полученный по примеру 1 вируссодержащий материал вакцинного штамма с титром 6,25 лог. ЭЛД 50/0,2 см3 смешивают перед расфасовкой со стабилизаторами, в качестве которых используют обезжиренное молоко; медицинский сорбит; смесь 50%-ного раствора сорбита и 25%-ного раствора желатозы, взятые в соотношении 1:2; и пептон. Полученный биопрепарат, расфасованный в пенициллиновые флаконы в объеме 2 см3, лиофильно высушивают. Данные по влиянию протективного действия стабилизаторов на титр вируса гепатита после высушивания представлены в табл.5.PRI me
Из табл.5 следует, что лучшим для изготовления сухого биопрепарата является сорбит-желатозный стабилизатор. Активность вируса после сушки при этом стабилизаторе снижается не более чем на 0,6 лог. в то время как другие приводят к снижению его на 1,5-3,2 лог. ЭЛД 50/0,2 см3.From table 5 it follows that the best for the manufacture of a dry biological product is a sorbitol-gelatin stabilizer. The activity of the virus after drying with this stabilizer is reduced by no more than 0.6 log. while others lead to a decrease of 1.5-3.2 log. ELD 50 / 0.2 cm 3 .
Готовая вакцина представляет собой сухую мелкопористую массу светло-серого цвета в виде таблетки, не рассыпающейся при встряхивании. Биологическая активность не ниже 105,0 ЭЛД 50/0,2 см3.The finished vaccine is a dry finely porous mass of light gray in the form of a tablet that does not crumble when shaken. The biological activity is not lower than 10 5.0
П р и м е р 3. Изучают влияние срока хранения вакцины на сохранность ее биологической активности. Вакцину хранят в течение 18 мес в условиях бытового холодильника при 6-10оС.PRI me
Титр вируса определяют титрованием на утиных эмбрионах через каждые 3 мес. The virus titer is determined by titration on duck embryos every 3 months.
Данные по влиянию срока хранения вакцины на ее биологические свойства представлены в табл.6. Data on the effect of the shelf life of the vaccine on its biological properties are presented in table.6.
Из табл. 6 видно, что вакцина против вирусного гепатита утят сохраняет без изменения биологическую активность в течение 12 мес. From the table. 6 shows that the vaccine against viral hepatitis ducklings remains unchanged biological activity for 12 months.
П р и м е р 4. Изучают иммуногенные свойства сухой вакцины против вирусного гепатита утят из штамма "ВГНКИ-К" на 1-10-дневных утятах. PRI me
Для определения иммуногенности лиофилизированный препарат разводят 1:10 растворителем (физраствором рН 6-6,5) и вводят внутримышечно 1-10-дневным утятам в область бедра в объеме 0,5 см3. Через 7 сут после прививки всех вакцинированных и 10 невакционированных (контрольных) утят заражают внутримышечно вирулентным штаммом "Орех" вируса гепатита утят в дозе 1000 утиных ЛД50.To determine the immunogenicity, the lyophilized preparation is diluted 1:10 with a solvent (saline pH 6-6.5) and intramuscularly administered to 1-10-day-old ducklings in the thigh area in a volume of 0.5 cm 3 . 7 days after vaccination, all vaccinated and 10 non-vaccinated (control) ducklings are infected intramuscularly with the virulent Hepatitis Virus strain “Walnut” at a dose of 1000 duck LD50.
Иммуногенные свойства вирусвакцины против гепатита утят из штамма "ВГНКИ-К" проверяют в сравнении с вакцинами биофабричного производства из штаммов "ЗМ(УНИИП)" и "К-УНИИП". Указанные вакцины применяют согласно "Наставлению по применению". Данные по сравнительной проверке иммуногенных свойств вакцин против вирусного гепатита утят представлены в табл.7. The immunogenic properties of ducklings virus vaccines against ducklings from the strain VGNKI-K are checked in comparison with vaccines of the biofactory production from the strains ZM (UNIIP) and K-UNIIP. These vaccines are used according to the "Instructions for use". Data on a comparative test of the immunogenic properties of vaccines against viral hepatitis ducklings are presented in table.7.
Из табл. 7 видно, что культуральная вакцина против вирусного гепатита утят из штамма "ВГНКИ-К" обладает высокой иммуногеностью и по сравнению с известными вакцинами сохраняет высокую иммуногенность в течение рекомендуемого срока хранения 12 мес. From the table. 7 shows that the cultural vaccine against viral hepatitis of ducklings from the strain "VGNKI-K" has a high immunogenicity and, compared with known vaccines, retains high immunogenicity for a recommended shelf life of 12 months.
Способ приготовления культуральной вакцины более современен и технологичен в сравнении с эмбриональной вакциной. The method of preparation of the culture vaccine is more modern and technologically advanced in comparison with the embryonic vaccine.
Использование в биологической промышленности данного способа изготовления вакцины против гепатита утят из штамма "ВГНКИ-К" позволит увеличить выход вируссодержащего материала более чем в 20 раз, что полностью оправдывает материальные затраты на ее производство. The use in the biological industry of this method of manufacturing a vaccine against hepatitis ducklings from the strain "VGNKI-K" will increase the yield of virus-containing material by more than 20 times, which fully justifies the material costs of its production.
Использование культуральной вакцины против вирусного гепатита утят из штамма "ВГНКИ-К" в ветеринарной практике позволит повысить эффективность ветеринарных мероприятий с указанным заболеванием. The use of a culture vaccine against viral hepatitis of ducklings from the strain "VGNKI-K" in veterinary practice will improve the effectiveness of veterinary measures with this disease.
Claims (1)
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU5006797 RU2035918C1 (en) | 1991-10-23 | 1991-10-23 | Method for producing duck virus hepatitis vaccine |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
SU5006797 RU2035918C1 (en) | 1991-10-23 | 1991-10-23 | Method for producing duck virus hepatitis vaccine |
Publications (1)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
RU2035918C1 true RU2035918C1 (en) | 1995-05-27 |
Family
ID=21587582
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
SU5006797 RU2035918C1 (en) | 1991-10-23 | 1991-10-23 | Method for producing duck virus hepatitis vaccine |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
RU (1) | RU2035918C1 (en) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1072508C (en) * | 1995-10-30 | 2001-10-10 | 鹿忠孝 | Preparation of heterogenic animal high immune serum against duck pest and viral hepatitis |
RU2712948C1 (en) * | 2019-06-27 | 2020-02-03 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение Федеральный научный центр "Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт птицеводства" Российской академии наук | Vaccine against viral hepatitis type i ducklings |
-
1991
- 1991-10-23 RU SU5006797 patent/RU2035918C1/en active
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
1. Авторское свидетельство СССР N 1459239, кл. C 12N 7/00, 1986. * |
2. ТУ - 10. 1961-87. * |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1072508C (en) * | 1995-10-30 | 2001-10-10 | 鹿忠孝 | Preparation of heterogenic animal high immune serum against duck pest and viral hepatitis |
RU2712948C1 (en) * | 2019-06-27 | 2020-02-03 | Федеральное государственное бюджетное научное учреждение Федеральный научный центр "Всероссийский научно-исследовательский и технологический институт птицеводства" Российской академии наук | Vaccine against viral hepatitis type i ducklings |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US4224412A (en) | Living virus culture vaccine against canine distemper and method of preparing same | |
US4556556A (en) | Vaccine for the prevention of vesicular stomatitis virus infection | |
US4320115A (en) | Rabies virus vaccine | |
HU183765B (en) | Process for producing lyophilized vaccine against duck hepatitis | |
RU2035918C1 (en) | Method for producing duck virus hepatitis vaccine | |
US4279893A (en) | Vaccine against Newcastle fowl disease, method for preparing and use thereof | |
SU1459239A1 (en) | Dtrain of duck hepatite virus for vaccine production | |
RU2283136C2 (en) | Inactivated sorbed vaccine against bird infectious bursal disease | |
RU2279473C1 (en) | Strain of bovine parainfluenza virus for production of vaccine and diagnostic preparations | |
US3629396A (en) | Avian encephalomyelitis vaccine | |
RU2129442C1 (en) | Method of preparing vaccine against carnivores plague | |
RU2304447C1 (en) | Culture vaccine against poultry pox out of hen's virus (ospovac) (variants) | |
RU2283137C2 (en) | Inactivated emulsified vaccine against bird infectious bursal disease | |
RU2158304C2 (en) | Strain "vnivip-dep" for preparing vaccine against reoviral tendinous synovitis in chickens | |
Pini et al. | The adverse effect of some calf sera on the isolation and propagation of bluetongue virus in tissue culture | |
RU2207372C1 (en) | Strain "o" of virus of poultry infectious laryngotracheitis for preparing diagnostic and vaccine preparations | |
RU2134590C1 (en) | Method of preparing inactivated vaccine against rabies in animals | |
RU2147609C1 (en) | Strain of virus canine parvovirus "riel" for preparing vaccine against parvoviral infection in carnivores and vaccine "vladivak" against viral diseases in carnivores based on said | |
RU2644339C2 (en) | Sorbed inactive dry vaccine against infectious rhinotracheitis of cattle | |
SU770196A1 (en) | Method for preparing inactivated vaccine against rabies of animals | |
RU2439150C1 (en) | Strain "lt-21/07" of aujeszky virus for manufacturing vaccines and diagnostic preparations | |
RU2054038C1 (en) | Virus strain of infectious bursal disease in poultry | |
RU2144376C1 (en) | Dry virus-vaccine against mareck's disease and method of its preparing | |
RU2154496C2 (en) | Vaccine against plague, infectious hepatitis and parvoviral enteritis in carnivores | |
RU1405148C (en) | Poultry pox vaccine production method |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
REG | Reference to a code of a succession state |
Ref country code: RU Ref legal event code: MM4A Effective date: 20091024 |