RU2043407C1

RU2043407C1 - Strain of bacterium listeria monocytogenes used for listerious diagnostica preparing

Info

Publication number: RU2043407C1
Authority: RU
Inventors: Дмитрий Аркадьевич Васильев; Александр Андреевич Маничев; Ирина Васильевна Ельникова; Борис Игоревич Шморгун
Original assignee: Дмитрий Аркадьевич Васильев; Александр Андреевич Маничев; Ирина Васильевна Ельникова; Борис Игоревич Шморгун
Priority date: 1992-05-21
Filing date: 1992-05-21
Publication date: 1995-09-10

Abstract

FIELD: veterinary and medicinal microbiology. SUBSTANCE: strain Listeria monocytogenes ВГНКИ N УСХИ-6 N20 is used for disease diagnosis caused by listeria. Strain Listeria monocytogenes УСХИ-6 N20 is selected by cultural-morphological, tinctorial, biological and serological properties and deposited in ВГНКИ Museum of veterinary preparations. Strain is used for listerious diagnostica preparing. EFFECT: detection of strain indicated above. 1 tbl

Description

Изобретение относится к ветеринарной и медицинской микробиологии. Преимущественная область использования создание листериозных диагнстикумов. The invention relates to veterinary and medical microbiology. The predominant area of use is the creation of listeriosis diagnostics.

Аналогом изобретения является публикация И.А. Бакулова, где указано: "В результате многочисленных исследований выявлено отсутствие какой-либо связи между объектом, откуда выделен возбудитель листериоза, и его серологической характеристикой. В связи с этим утратило значение разделение серологических типов листерий на "грызущий", "жвачный" и "лошадиный". Не подтвердились также наблюдения о том, что листерии в организме животного могут изменить свою серологическую принадлежность". An analogue of the invention is the publication of I.A. Bakulova, where it is stated: “As a result of numerous studies, the absence of any connection between the object from which the causative agent of listeriosis was isolated and its serological characteristics was revealed. In this regard, the separation of serological types of listeria into“ gnawing, “ruminant” and “equine ". Observations have also not been confirmed that listeria in the body of an animal can change its serological affiliation."

Прототипом изобретения являются штаммы, используемые в настоящее время для производства листериозных диагностикумов (Ф.С. Шуляк "Листериоз". Сб. "Ветеринарные препараты", М. 1981). The prototype of the invention are the strains currently used for the production of listeriotic diagnosticums (FS Shulyak "Listeriosis". Sat. "Veterinary preparations", M. 1981).

В частности, для создания диагностических препаратов, способствующих прижизненной постановке диагноза на листериоз методом РСК, используется антиген, получаемый при наработке четырех штаммов из коллекции ВГНКИ ветпрепаратов: "Бурынь", "Тернополь" N 17, N 1. Данные листериозные штаммы выделены из патологического материала от овцы, коровы, кролика, свиньи, изучены и предложены для создания диагностикумов в конце 50-х годов. In particular, to create diagnostic drugs that contribute to the intravital diagnosis of listeriosis using the CSC method, the antigen obtained from four strains from the VGNKI collection of veterinary preparations is used: Buryn, Ternopol N 17, N 1. These listeriose strains were isolated from pathological material from sheep, cow, rabbit, pig, studied and proposed to create diagnosticums in the late 50s.

Основной недостаток прототипа заключается в том, что подбор данных штаммов для листериозного антигена осуществлялся в первую очередь в соответствии с существующей в тот период времени ложной теорией о делении всех листериозных штаммов на звериные типы. Серологические особенности штаммов учитывались во вторую очередь. Поэтому применяемые в настоящее время эти 4 листериозных штамма серологически типированы только в пределах серогрупп I и II. Ориентация на "звериные" типы не требовала необходимости в использовании для листериозного антигена подбора штаммов по более специфическим параметрам серовариантам с учетом комбинации антигенных детерминант, характерных для каждого серовара. Этим, в первую очередь, и обусловлено наличие ложноспецифических результатов при использовании метода РСК для диагностики листериоза. The main disadvantage of the prototype is that the selection of these strains for listeriosis antigen was carried out primarily in accordance with the false theory existing at that time about the division of all listeriosis strains into animal types. Serological characteristics of the strains were taken into account secondarily. Therefore, currently used these 4 listeriosis strains are serologically typified only within serogroups I and II. Orientation to “animal” types did not require the use of strain selection for more specific parameters for listeriosis antigen, taking into account the combination of antigenic determinants characteristic of each serovar. This, in the first place, is due to the presence of false-specific results when using the DSC method for the diagnosis of listeriosis.

Второй существенный недостаток листериозных штаммов описываемого прототипа состоит в том, что они являются вирулентными штаммами. Это значительно усложняет работу по производству листериозного антигена, так как бактериальная культура данных штаммов представляет угрозу для здоровья людей, что требует дополнительных мер по соблюдению правил безопасности в работе с ними. The second significant disadvantage of the listeriosis strains of the described prototype is that they are virulent strains. This greatly complicates the work on the production of listeriosis antigen, since the bacterial culture of these strains poses a threat to human health, which requires additional measures to comply with safety rules in working with them.

Целью изобретения является штамм L. monocytogenes УСХИ-6 N 20 относящийся к сероварианту 3с, способствующий улучшению диагностики заболевания, вызываемого листериями. The aim of the invention is a strain of L. monocytogenes USHI-6 N 20 related to the serovariant 3C, contributing to an improved diagnosis of the disease caused by listeria.

Сущность изобретения заключается в том, что полученный штамм L. mono- cytogenes УСХИ-6 N 20 имеет следующие морфологические и биологические характеристики. The essence of the invention lies in the fact that the obtained strain of L. monocytogenes USHI-6 N 20 has the following morphological and biological characteristics.

Культуральные свойства. Бактериальная культура указанного штамма хорошо растет в мясо-пептонном бульоне (МПБ) при 30^оС. МПБ в первые сутки слегка мутнеет, помутнение равномерное, при встряхивании пробирки наблюдаются так называемые муаровые волны. Через 2-4 сут бульон в пробирке светлеет, а на дне ее образуется слизистый осадок, который при встряхивании поднимается косичкой. На мясо-пептонном желатине (МПЖ) при посеве уколом культуры листерий дают через двое суток рост в виде штыка только по ходу укола, разжижение желатины не наблюдается. В бульоне Китт-Тароцци рост листерий характеризуется очень слабым помутнением среды. На мясо-пептонном агаре (МПА) в первые сутки роста обнаруживают мелкие (0,2-0,5 мм в диаметре), прозрачные в проходящем свете, слегка выпуклые колонии. Через 2-3 сут колонии увеличиваются в размере (до 1-3 мм в диаметре), становятся более плоскими и приобретают сероватый оттенок при падающем свете.Cultural properties. Bacterial culture of said strain grows well in a meat-peptone broth (BCH) at 30 ^° C on the first day BCH slightly turbid, uniform turbidity, while shaking the tubes are observed so-called moire wave. After 2-4 days, the broth in the test tube brightens, and a mucous precipitate forms at the bottom of it, which, when shaken, rises with a pigtail. On meat-peptone gelatin (MJ) when sowing with an injection of Listeria culture, after two days they grow in the form of a bayonet only along the injection, gelatin liquefaction is not observed. In Kitt-Tarozzi broth, the growth of listeria is characterized by a very slight turbidity of the medium. On meat-peptone agar (MPA) in the first day of growth, small (0.2-0.5 mm in diameter), transparent in transmitted light, slightly convex colonies are found. After 2-3 days, the colonies increase in size (up to 1-3 mm in diameter), become flatter and acquire a grayish tint under incident light.

Морфология. В мазках культур листериозного штамма, приготовленных с МПА и МПБ, окрашенных по Граму, наблюдали грамположительные палочки, расположенные одиночно и парами. Morphology. Gram-positive bacilli, located singly and in pairs, were observed in smears of cultures of the listeriosis strain prepared with MPA and MPB stained by Gram.

Подвижность. Суточные бульонные культуры, культивируемые при 22^оС подвижны.Mobility. Daily broth cultures, cultured at ²² ° C Mobile.

Биохимические свойства. Бактериальная культура данного штамма ферментирует с образованием кислоты без газа: глюкозу, мальтозу, рамнозу, салицин, фруктозу. Не ферментирует: дульцит, инулин, маннит, обесцвечивает лакмусовое молоко, индол не образует. На кровяном агаре через 3 сут вызывает гемолиз. Biochemical properties. The bacterial culture of this strain ferments to form an acid without gas: glucose, maltose, ramnose, salicin, fructose. Does not ferment: dulcite, inulin, mannitol, discolor litmus milk, indole does not form. On blood agar, after 3 days it causes hemolysis.

По результатам постановки пробы роста штамм УСХИ-6 N 20 отнесен к I серогруппе. According to the results of staging a growth sample, strain USHI-6 N 20 is assigned to serogroup I.

Вирулентные свойства. Культура штамм УСХИ-6 N 20 не вызывает гибель кроликов при внутрибрюшинном введении в дозах, соответственно 5 и 10 млрд. микробных клеток. Из 5 зараженных морских свинок пало 2, из 5 зараженных белых мышей пала 1. Virulent properties. The culture strain USHI-6 N 20 does not cause death of rabbits when administered intraperitoneally at doses of 5 and 10 billion microbial cells, respectively. 2 out of 5 infected guinea pigs, 1 out of 5 infected white mice.

Предлагаемый листериозный штамм обладает следующей антигенной структурой (см. таблицу). The proposed listeriosis strain has the following antigenic structure (see table).

Использование данного штамма при производстве листериозных диагностикумов (в сочетании с другими штаммами листерий) позволяет охватить максимально возможный диапазон антигенных детерминант, характерных для данного вида микроорганизма, что, в свою очередь, повышает специфичность диагностических препаратов. The use of this strain in the production of listeriosis diagnosticums (in combination with other strains of listeria) allows you to cover the maximum possible range of antigenic determinants characteristic of this type of microorganism, which, in turn, increases the specificity of diagnostic drugs.

Claims

The bacterial strain Listeria monocytogenes VGNKI N USHI-6 N 20 used for the manufacture of listeriosis diagnosticums.