RS65741B1 - Konjugat ha-paklitaksel za lečenje mezotelioma - Google Patents
Konjugat ha-paklitaksel za lečenje mezoteliomaInfo
- Publication number
- RS65741B1 RS65741B1 RS20240778A RSP20240778A RS65741B1 RS 65741 B1 RS65741 B1 RS 65741B1 RS 20240778 A RS20240778 A RS 20240778A RS P20240778 A RSP20240778 A RS P20240778A RS 65741 B1 RS65741 B1 RS 65741B1
- Authority
- RS
- Serbia
- Prior art keywords
- paclitaxel
- mesothelioma
- conjugate
- paclitaxel conjugate
- use according
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
- A61K31/337—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having four-membered rings, e.g. taxol
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/56—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule
- A61K47/61—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic macromolecular compound, e.g. an oligomeric, polymeric or dendrimeric molecule the organic macromolecular compound being a polysaccharide or a derivative thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
- C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
- C08B37/0072—Hyaluronic acid, i.e. HA or hyaluronan; Derivatives thereof, e.g. crosslinked hyaluronic acid (hylan) or hyaluronates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08L—COMPOSITIONS OF MACROMOLECULAR COMPOUNDS
- C08L5/00—Compositions of polysaccharides or of their derivatives not provided for in groups C08L1/00 or C08L3/00
- C08L5/08—Chitin; Chondroitin sulfate; Hyaluronic acid; Derivatives thereof
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Description
Opis
PREDMET PRONALASKA
[0001] Predmetni pronalazak opisuje konjugat hijaluronske kiseline sa paklitakselom i kompoziciju koja sadrži ili se sastoji od takvog konjugata povezanog sa farmakološki prihvatljivim razblaživačima/ekscipijensima, za primenu u loko-regionalnom lečenje mezotelioma, posebno malignog pleuralnog.
STANJE TEHNIKE PRONALASKA
[0002] Izraz serozna membrana ili tunika označava određeno tkivo formirano od jednostavnog pločastog epitela poznatog kao mezotel koji je podržan od vezivnog, vaskularizovanog i inerviranog tkiva. Funkcija seroze je da pokriva organe grudnog koša i abdomena, stoga se razlikuje u visceralnom, sloju ili omotaču koji pokriva organ, i parijetalnom, spoljašnjem sloju ili omotaču koji je okrenut i oblaže zid; između dva sloja identifikuje se virtuelna šupljina poznata kao serozna šupljina koja sadrži umerene količine serozne tečnosti koju proizvodi mezotel, dok vezivno tkivo koje se nalazi ispod obezbeđuje snabdevanje krvlju i nervima budući da je mezotel potpuno bez krvnih sudova i nerava.
[0003] Na osnovu organa ili prekrivenog zida, seroza se razlikuje u
• pokrivanju srca i medijastinuma, poznata kao perikard;
• pokrivanju pluća i zida grudnog koša, poznata kao pleura;
• pokrivanju trbušnog zida i organa koji se u njemu nalaze, poznata kao peritoneum;
• pokrivanju testisa, poznata kao svaginalna tunika;
• na kraju pokrivanju materice, poznata kao perimetrium.
[0004] Pleura je stoga dvozidna serozna membrana koja pokriva unutrašnji zid grudnog koša svojim parijetalnim omotačem, i distalni zid svakog pluća svojim visceralnim omotačem.
[0005] Neoplazma koja nastaje iz ćelija mezotela naziva se mezoteliom i stoga može nastati iz grudnog koša, abdomena, i, veoma retko, iz šupljine oko srca i iz membrane koja pokriva testise.
[0006] Mezoteliom je redak tumor koji predstavlja manje od 1% svih onkoloških bolesti čak i ako njegova incidencija stalno raste sa 2.2 slučaja na milion ljudi; to je veoma agresivna neoplazma i najčešći oblik je onaj koji zahvata pleuru: u ovom slučaju se definiše kao maligni pleuralni mezoteliom (MPM) koji predstavlja oko 80% svih mezotelioma, ređi su peritonealni, perikardijalni i mezoteliomi testisa; češće kod muškaraca, incidencija mezotelioma raste sa godinama kod 75% pacijenata starijih od 65 godina.
[0007] Najvažniji faktor rizika za pleuralni mezoteliom (ali generalno za sve tipove mezotelioma) predstavlja izloženost azbestu: zaista, većina ovih tumora pogađa ljude koji su bili u kontaktu sa ovom supstancom uglavnom na radnom mestu, ili žive sa ljudima koji su radili sa njim. Azbest je prirodni mineral sa vlaknastom strukturom koji pripada hemijskoj klasi silikata, i, zbog svoje posebne otpornosti na toplotu, u prošlosti se široko koristio za zaptivanje i izolaciju krovova (u materijalu poznatom kao Eternit), brodovima i vozovima, u građevinarstvu (crepovi, podovi, farbe...), u vatrogasnim odelima, u automobilima (mehaničke komponente i boje) i u drugim sektorima.
[0008] Kada se ovaj mineral fragmentira, na primer tokom vađenja i obrade minerala ili zbog habanja materijala koji ga sadrži, stvara se veoma fini prah koji ostaje suspendovan u vazduhu čak i duže vreme, i lako se udiše. Ovaj prah može oštetiti mezotelne ćelije uzrokujući (u nekim slučajevima) kancer čak i decenijama nakon izlaganja. Ostali faktori rizika za mezoteliom su:
● similijan virus SV40, korišćen u polio vakcinama između 1955 i 1963;
● torijum dioksid korišćen između 1920-ih i 1950-ih;
● zračenje grudnog koša i abdomena.
(Sekido Y. i sarad., Carcinogenesis, 2013, 34(7):1413-9; Remon J. i sarad., Cancer Treat Rev, 2013, 39(6):584-91).
[0009] Lečenje mezotelioma generalno zavisi od mesta tumora, stadijuma bolesti, starosti pacijenta i opšteg zdravstvenog stanja. Standardne opcije lečenja uključuju operaciju, radioterapiju i hemoterapiju.
[0010] Generalno, u fazi I MPM, tumor je ograničen na parijetalnu pleuru i nije prisutan u limfnim čvorovima; u stadijumu II, takođe utiče na visceralnu pleuru, pluća ili dijafragmu; u III stadijumu, tumor je zahvatio prvi sloj zida grudnog koša, deo medijastinuma ili tačku na zidu grudnog koša; takođe može uticati na spoljašnju površinu perikarda i limfne čvorove na jednoj od dve strane grudnog koša; u stadijumu IV, tumor je dostigao druge organe (metastaze) kao što su jetra, mozak, kosti ili limfni čvorovi sa obe strane grudnog koša.
[0011] Prema najnovijim kliničkim studijama, hemoterapija se može smatrati jedinim lekom koji može da produži (bar delimično) život pacijenta, poboljšajući iako ograničeno, njegov kvalitet. Lekovi odobreni za takvu primenu, koji se obično koriste sami (ili češće u kombinaciji), su pemetreksed (Alimta®), cisplatin i raltitreksed (Tomudex®); mitomicin, vinorelbin i gemcitabin su još uvek u eksperimentalnoj fazi, međutim, maligni pleuralni mezoteliom MPM (kao i svi drugi oblici mezotelioma) je generalno refraktoran na takva lečenja i dobijeni rezultati su skromni (Stahel RA. i sarad, Ann Oncol., 2015. , 26(8):1649-60). Hemoterapijski agensi takođe imaju veoma iscrpljujuće nuspojave i, stoga, postoje mnoge neizvesnosti, pa čak i kontraindikacije za mogućnost da se hemoterapija započne pri postavljanju dijagnoze ili na početku ranih simptoma MPM.
[0012] U Sasai Masao i sarad., ANTICANCER RESEARCH, tom 36, br. 3, strane 907-912, konjugat hijaluronske kiseline i jedinjenja bora je korišćen za lečenje mezotelioma.
[0013] Do danas ne postoji terapija koja bi mogla da leči ili značajno uspori maligni pleuralni mezoteliom, moguće je samo smanjiti njegovu tumorsku masu, i samim tim, produžiti preživljavanje pacijenta za nekoliko meseci. Najuspešnije procedure uključuju rane stadijume bolesti i kombinuju preoperativnu hemoterapiju sa hirurškom procedurom i naknadnom postoperativnom radioterapijom. Međutim, takav pristup se može predložiti samo vrlo mladim pacijentima bez pratećih bolesti. U svakom slučaju, odgovarajuće studije koje pokazuju efektivnu korist u smislu produženja života još nisu dostupne. Nažalost, prosečno vreme preživljavanja nakon dijagnoze je i dalje 6-9 meseci bez hemoterapije, 12 meseci sa takvom terapijom.
[0014] S obzirom na gore navedene razloge, testiraju se novi farmaceutski pristupi kao što su, na primer, imunoterapija ili lečenje direktno usmereno na lečenje neoplazme korišćenjem sistema za isporuku lekova. Zaista, takvi sistemi mogu transportovati lekove direktno do mesta tumora omogućavajući lečenje neoplazme pri nižim dozama hemoterapijskog agensa nego sistemsko lečenje, dakle sa manjom toksičnošću i rezultirajući boljim kvalitetom života pacijenata, ali posebno, takvi sistemi, kada su zaista efikasni, sposobni su da značajno produže očekivani životni vek pacijenata sa kancerom.
[0015] Hijaluronska kiselina je jedan od polimera (i polisaharida) korišćen u formiranju takvog sistema za isporuku lekova i kao povezani polimer i kao polimer hemijski vezan za brojne kategorije antineoplastičnih lekova (Liao YH. i sarad., Drug Deliv., 2005, 12 (6):327-42). HA je hetero-polisaharid sastavljen od naizmeničnih ostataka D-glukuronske kiseline i N-acetil-D-glukozamina, to je polimer linearnog lanca sa molekulskom težinom između 50,000 i 13 x 10<6>Da, u zavisnosti od izvora iz kojeg se dobija i postupaka pripreme koji se koriste. Prirodno je prisutan u pericelularnim gelovima, u esencijalnoj materiji vezivnog tkiva kičmenjaka, u zglobnoj sinovijalnoj tečnosti, u staklastom telu i u pupčanoj vrpci. HA igra važnu ulogu u biološkom organizmu, na primer kao mehanička podrška ćelijama mnogih tkiva kao što su koža, tetive, mišići i hrskavica, budući da je glavna komponenta ekstracelularnog matriksa, ali takođe ima i dalje funkcije kao što su hidratacija tkiva, podmazivanje ćelija, migracija i diferencijacija (Weigel P. i sarad., J Theoretical Biol, 1986:219-234). Među sistemima za isporuku lekova koji koriste HA, konjugat paklitaksela sa hijaluronskom kiselinom (HA) derivatizovan sa molekulima hidrazida vezanim za karboksilnu grupu HA kroz amidnu vezu (Luo I. i sarad., Biomacromolecules, 2000, 1(2):208-218) je poznat: međutim, do danas ne postoje pretklinička ili klinička ispitivanja koja su pokazala efikasnost takvog derivata.
[0016] Sistem koji čini HA konjugovan sa paklitakselom pomoću spejsera (EP2045270) je takođe poznat: takav konjugat je testiran i u in vitro (a posebno kod kancera bešike, kacera dojke i kancera ćelija jajnika) studijama koja su pokazale da je najmanje aktivna kao i referentni lek, i in vivo kliničkim protokolima (trenutno u toku) o lečenju neinvazivnog kancera bešike (IT 102018000009731).
[0017] Konjugacija sa HA čini paklitaksel rastvoriljivim i administriranje paklitaksela se stoga može desiti bez višestrukih fenomena preosetljivosti koji se obično javljaju tokom primene leka zbog prisustva Cremophor EL, rastvarača za solubilizaciju koji se trenutno koristi u standardnim kliničkim protokolima, čije je prisustvo neophodno upravo jer je aktivnog sastojak liposolubilan (Taxol®). Paklitaksel je agens protiv kancera (Huizing MT i sarad., Cancer Inv., 1995, 13: 381-404) koje vrši svoje antiproliferativno dejstvo delujući na organizaciju mikrotubula ćelijskog citoskeletnog sistema sprečavajući ga u normalnoj reorganizaciji tokom mitotičke deobe (Manfredi JJ i sarad., J Cell Biol, 1982, 94:688-696); njegove glavne terapijske indikacije su lečenje kancera dojke, kancera pluća, kancera jajnika, kancera bešike, prostate i endometrijuma, a ne obuhvata lečenje mezotelioma.
[0018] U konjugatu HA-paklitaksel, veza između paklitaksela i HA omogućava leku da direktno dođe do površine membrane tumorske ćelije koju karakteriše prekomerna ekspresija HA receptora, CD44 (Isacke CM. i sarad., Int J Biochem Cell Biol, 2002. , 34:718-21). Prema tome, paklitaksel konjugovan sa HA je sposoban da se specifično vezuje za CD44 tumorske ćelije čime je sposoban da uđe u ćelijsku citoplazmu pri čemu se, kroz hidrolizu vezanog leka/HA, aktivira. Ovaj mehanizam selektivnog transporta leka je definisan kao "ciljanje" na ciljnu ćeliju.
DETALJAN OPIS PRONALASKA
[0019] Predmet predmetnog pronalaska je konjugat HA-paklitaksel za primenu u lokoregionalnom lečenju mezotelioma, dakle malignog pleuralnog mezotelioma, perikardijalnog mezotelioma i peritonealnog mezotelioma, posebno za primenu u lečenju MPM, pri čemu takav konjugat HA-paklitaksel ima estarsku vezu između karboksila hijaluronske kiseline (HA) i spejsera, zauzvrat vezan estarskom vezom preko svog karboksila za hidroksilnu grupu za ugljenik C2' paklitaksela, pri čemu je uvedeni spejser 4-bromobuterna kiselina, i pri čemu je stepen derivatizacije paklitaksela u konjugatu HA-paklitaksel u opsegu koji varira od 15% do 21% masa/masa (m/m), a poželjno od 16% do 20% m/m.
[0020] U nastavku u predmetnom opisu, stepen derivatizacije (ili esterifikacije) gore navedenog konjugata označava maseni procenat paklitaksela u odnosu na masu konjugata HA-paklitaksel.
[0021] Prema tome, 100mg konjugata sa stepenom derivatizacije između 15% i 21% m/m, sadržaće 15mg, 16mg, 17mg, 18mg, 19mg, ili 20mg, ili 21mg hemoterapijskog paklitaksela u zavisnosti od naznačenog stepena derivatizacije (da se ovo dodatno ilustruje, stepen derivatizacije na 20% m/m sadrži 20mg paklitaksela na 100mg konjugata); međutim stručnjaku je očigledno da, na kraju ovakvih procesa industrijske sinteze, može doći do male varijacije u masenim odnosima između molekula, stoga u daljem tekstu podnosilac, opisujući i zahtevajući zaštitu za opseg derivatizacije između 15% i 21% m/m gore navedenog konjugata, namerava da zahteva zaštitu za sve navedene procentualne vrednosti koje sadrže ±1%: primer radi, stepen od 20% m/m treba imati na umu da je 20% ± 1%.
[0022] Konjugat HA-paklitaksel za primenu za koju se iznad zahteva zaštita je pripremljen prema procesu sinteze poznatom u stanju tehnike kao što je opisano u EP2045270 i, za stepen derivatizacije od 20%, poboljšanim u IT 102018000009731.
[0023] U širem smislu, u takvom procesu sinteze gore navedenog konjugata, spejser/veznik 4-bromobuterna kiselina se uvodi između hijaluronske kiseline i paklitaksela kroz formiranje estarske veze između karboksila hijaluronske kiseline i spejsera, pri čemu je navedeni spejser zauzvrat vezan (uvek estarskom vezom) preko svoje karboksilne grupe za hidroksilnu grupu za ugljenik C2' paklitaksela, tačnije za karboksilnu grupu 4-bromobuterne kiseline, kroz aktivaciju sa sredstvom za aktiviranje i u prisustvu katalizatora, formiranje estarske veze sa hidroksilnom funkcijom za C2' ugljenik paklitaksela; zatim tako dobijeni intermedijer reaguje sa solju HA, pod pogodnim uslovima, što dovodi do nukleofilne supstitucije COO- HA za ugljenik vezan za brom spejser-linkera. Na ovaj način, estarska veza se formira između HA i spejser-linkera koji je prethodno vezan za paklitaksel.
[0024] HA korišćena za sintezu takvog konjugata HA-paklitaksel može se dobiti iz bilo kog izvora, na primer ekstrakcijom iz petlove kreste (EP0138572, WO2018020458), fermentativnim putem (EP0716688), ili biotehnološkim putem (EP2614088, EP2614087) i imaju prosečnu molekulsku masu (MM) u rasponu od 400 do 3×106Da, posebno od 400 do 1× 106Da, još preciznije od 140.000 do 250.000 Da (prosečna molekulska masa označava onu izračunatu metodom "intrinzičnog viskoziteta" (Terbojevich i sarad., Carbohydr Res, 1986, 363-377).
[0025] Poželjno, HA korišćena za sintezu konjugata HA-paklitaksel za primenu u skladu sa predmetnim pronalaskom je fermentativna HA sa prosečnom molekulskom masom MM između 140.000 i 250.000 Da.
[0026] Poželjno, konjugat HA-paklitaksel za primenu u skladu sa predmetnim ima prosečan stepen derivatizacije od 20% m/m.
[0027] Dalji predmet predmetnog pronalaska je takođe farmaceutska kompozicija koja se u suštini sastoji od gore opisanog konjugata HA-paklitaksel, povezanog sa farmakološki prihvatljivim razblaživačima/ekscipijensima, poželjno farmaceutska kompozicija formulisana u sterilnoj, izotoničnoj vodi, koja sadrži 5% m/v glukoze za primenu u loko-regionalnom lečenju mezotelioma, dakle malignog pleuralnog mezotelioma, perikardijalnog mezotelioma i peritonealnog mezotelioma, poželjno za primenu u lečenju malignog pleuralnog mezotelioma.
[0028] Takva farmaceutska kompozicija je stoga formulisan kao, sterilan i izotoničan, vodeni rastvor, koji se u suštini sastoji od samog konjugata
[0029] Podnosilac opisuje i zahteva zaštitu za konjugat za primenu navedenu iznad u locoregionalnom lečenju svih poznatih i gore citiranih oblika mezotelioma i poželjno za primenu u loko-regionalnom lečenju MPM, pošto je sinergistički efekat HA i paklitaksela hemijski vezanih u konjugovanom objektu pronalaska, u testovima sprovedenim in vitro i in vivo naspram nekonjugovanog paklitaksela, je prikazan u nastavku.
[0030] Dobijeni rezultati, u smislu IC50za in vitro studije, i izraženi kao vrednosti bioluminiscencije kao indeks veličine tumorske mase kod tretiranih životinja, iznenađujuće pokazuju farmakološku potentnost konjugata HA-paklitaksel i sinergistički efekat konjugata hijaluronske kiseline sa hemoterapijskim agensom naspram nekonjugovanog paklitaksela u lečenju mezotelioma, posebno pleuralnog mezotelioma.
[0031] Takav rezultat je još važniji imajući u vidu loko-regionalno lečenje za koje se zahteva zaštita za takav konjugat: ovaj put administriranja, tj., intrapleuralni, ili intraperitonealni i intraperikardijalni, u stvari omogućava administriranje konjugata direktno na tumorsku masu pri nižim/analognim dozama ili čak većim od referentnog hemoterapijskog agensa, kako bi se dobila terapijska efikasnost veća od referentnog leka uz održavanje visokog bezbednosnog profila.
[0032] Konjugat HA-paklitaksel ostaje zaista kao depo u šupljini za administriranje direktno u kontaktu sa tumorskom masom duže vreme, omogućavajući tako njegovu koncentraciju uglavnom na mestu delovanja (a ne na sistemskom nivou), maksimizirajući na taj način interakciju sa tumorom bez oštećenja okolnog tkiva, smanjujući neželjene efekte. Takođe se koristi mehanizam selektivnog transporta leka do tumorske ćelije za visoku ekspresiju CD44 na površini takvih ćelija, kroz "ciljano" dejstvo hijaluronske kiseline.
[0033] Dole opisana ispitivanja na životinjama posebno pokazuju efikasnost in vivo takvog konjugata HA-paklitaksel, pri čemu će takva efikasnost dovesti kod ljudi do ne samo povećanja preživljavanje bolesnih osoba, već i poboljšanja kvaliteta života za kategoriju pacijenata koji, kao što je ranije objavljeno, imaju izuzetno ograničen očekivani životni vek čak i nakon lečenja hemoterapijom.
Primer 1
Citotoksičnost konjugata HA-paklitaksel u ćelijama mezotelioma naspram paklitaksela
[0034] Eksperimentalni postupak: citotoksična aktivnost predmeta pronalaska konjugata HA-paklitaksel je procenjena in vitro izvođenjem MTT ispitivanja na ćelijskim linijama humanog mezotelioma koji su komercijalno dostupni H2052, H28 i H2452, gde sve takve ćelijske linije eksprimiraju CD44 receptor za hijaluronsku kiselinu. Konjugat korišćen za takvu studiju pripremljen je prema IT 102018000009731, dakle sa prosečnim stepenom derivatizacije od 20% m/m počevši od fermentativnog HA sa prosečnom masom MM između 140.000 i 250.000 Da.
[0035] Ćelije su postavljene (dan 0) u ploču sa više bunarića sa 96 bunarića sa ravnim dnom (3000 ćelija po bunariću) u medijumu za kulturu EMEM (SIGMA, Sent Luis, Misuri, USAD) i zatim su inkubirane tokom 24 sata na 37°C u prisustvu 5% CO2. Sledećeg dana (dan 1) medijum je promenjen obezbeđujući ćelijama svež EMEM medijum koji alternativno sadrži paklitaksel, kao kontrolu, ili konjugat HA-paklitaksel u odgovarajućim razblaženjima. Posle dva dana inkubacije (dan 3), svaki bunarić koji sadrže ćelije tretiran je sa 100 µl reagensa 3-2,5-difeniltetrazolijum bromida (5 mg/ml u DMEM) tokom 90 minuta. Nakon toga, pri uklanjanju reagensa iz svakog bunarića i odgovarajućem dodavanju 100 µl DMSO, merena je apsorpcija soli formazana (plava, nastala reakcijom razbijanja MTT tetrazolijumovog prstena, koju izvodi mitohondrijski enzim "sukcinat dehidrogenaza" prisutan samo u živim ćelijama) na talasnoj dužini od 570 nm pomoću čitača sa više ploča. Takvo MTT ispitivanje, široko poznato stručnjaku, omogućava da se proceni održivost ćelija tretiranih konjugatom u odnosu na one tretirane samo paklitakselom i stoga da se odredi osetljivost gore navedenih ćelija na testirane uzorke. Podaci su zatim normalizovani za kontrolu i IC50vrednost je izračunata u µg/ml konjugata (izraženog u smislu paklitakselekvivalenati) u poređenju sa nekonjugovanim paklitakselom.
[0036] Rezultati su sumirani u tabeli ispod gde je jasno evidentno da konjugat HA-paklitaksel pokazuje aktivnost (dakle antitumornu efikasnost) do 65-70 puta veću od one nekonjugovanog paklitaksela.
Normalizovan IC50, µg/ml
[0037]
Primer 2
In vivo trial ispitivanje na imunodeficijentnim NSG miševima
[0038] Ćelijske linije humanog mezotelioma H2052 transducirane su lentivirusnim vektorom (metod kojim se geni mogu ubaciti u ćelije pomoću lentivirusa) koji sadrži dvosmerni promoter koji omogućava visoku i koordiniranu ekspresiju dva reporterska gena za sintezu luciferaze i eGFP (poboljšani zeleni fluorescent protein), kao što je opisano u Amendola i sarad., Nat Biotechnol 2005, 23:108-16: luciferaza je enzim koji katalizuje oksidaciju luciferina koji oksidacijom emituje energiju (elektrone) u obliku svetlosnog zračenja i takva reakcija ima ultra-visoku osetljivost; eGFP potiče od meduze Aequorea victoria, i sposoban je da emituje jarko zeleno svetlo kada je izložen određenim talasnim dužinama; oba ova proteina se koriste u nastavku kao "markerski sistem" za ćelije humanog mezotelioma H2052 transdukovane kao gore, da bi se identifikovala tumorska masa koja se formira kod životinja kojima su takve ćelije ubrizgane i da bi se odredile njene dimenzije i rast tokom vremena kroz odgovarajući senzor bioluminiscencije.
[0039] Ćelije su inkubirane 6 sati u smeši kompletnog medijuma (RPMI 10% FBS, 1% HEPES, L-glutamin i penicilin/streptomicin) koja sadrži gore navedeni vektor i protamin sulfat. Na kraju 6 sati inkubacije, supernatanti su ponovo integrisani u kompletan medijum. Posle 5 dana, efekat transdukcije je procenjen protočnom citometrijom.
[0040] Ćelije su zatim proširene i podeljene kako bi se izolovala populacija sa većom ekspresijom reporterskih gena. Takve ćelije, transducirane i odabrane, su zatim ubrizgane u peritoneum NSG miševa, (tj., imunodeficijentnih koji stoga omogućavaju usađivanje širokog spektra ljudskih ćelija kancera), 10 miševa/uzorku, koji su zatim podvrgnuti sledećem tretmanu:
1° uzorak tretiran sa 40 mg/kg HA-paklitaksela, intraperitonealnim (ip) loko-regionalnim administriranjem;
2° uzorak tretiran sa 10 mg/kg paklitaksela, intravenskom primenom (iv) tokom 3 tretmana, zatim se prelazi na ip administriranje zbog veoma loše podnošljivosti iv tretmana paklitakselom kod NSG miševa;
3° uzorak tretiran sa 10 mg/kg paklitaksela, intraperitonealnim (ip) loko-regionalnim administriranjem;
4° netretiran uzorak;
nedeljnom administracijom tokom 10 nedelja.
[0041] Sve tretirane životinje su praćene detekcijom bioluminiscencije koju emituje njihova tumorska zona tretirana konjugatom HA-paklitaksel, kako bi se vremenom procenila dimenzija (a samim tim i rast) tumora u odnosu na životinje koje nisu tretirane bilo kojim hemoterapijskim agensom i one koje su tretirane nekonjugovanim paklitakselom.
[0042] Rezultati su prikazani na slici 1 gde je jasno vidljivo da luminiscencija (izražena u fotonima/sek, ph/sec) netretiranih životinja dostiže prosečne vrednosti reda veličine 1×10<12>na 100° dana preživljavanja, ukazujući na dimenziju/rast postignut kod tumora koji nisu tretirani; 2° i 3° uzorak, oba tretirana nekonjugovanim paklitakselom sa različitim načinima administriranja, upoređeni su u odnosu na takav kontrolni uzorak: ovo poređenje ukazuje na važan rezultat za oba, pošto postignute prosečne vrednosti luminiscencije rezultati pokazuju da su reda veličine 1×10<11>, dakle niže od netretiranih, što ukazuje na smanjenu masu tumora u poređenju sa kontrolom.
[0043] Međutim, rezultat konjugata HA-paklitaksel je potpuno iznenađujući jer od 14° do 125° dana preživljavanja, luminiscencija dramatično opada i ostaje zanemarljiva tokom vremena. Ovi potpuno neočekivani podaci pokazuju značajno smanjenje tumora i u odnosu na netretiranu kontrolu i u odnosu na životinje tretirane nekonjugovanim hemoterapijskim agensom administriranim iv i ip, što demonstrira ukupnu efikasnost samog konjugata. Na slici 1 podatak o luminiscenciji koji se odnosi na konjugat HA-paklitaksel predstavljen je u trećoj od četiri kolone koje odgovaraju danima preživljavanja prijavljenih u apscisi.
[0044] Umesto toga, na slici 2 prikazani su podaci dobijeni nakon 139 dana posmatranja, gde je jasno vidljivo da detekcija bioluminiscencije u ph/sec koju emituje njihova tretirana tumorska zona i stoga reprezentativna za tumorsku masu, ostaje oko 1-2×10<11>kod miševa tretiranih ne konjugovanim paklitakselom, dok kod miševa tretirnih konjugatom takva vrednost je izuzetno niža i blizu 0, što ukazuje na skoro potpuno smanjenje tumorske mase.
[0045] Kroz rezultate o kojima je gore diskutovano, podnosilac je pokazao farmakološku potentnost i stoga efikasnost konjugata HA-paklitaksel u loko-regionalnom lečenju mezotelioma, posebno MPM, peritonealnog i perikardijalnog mezotelioma, jer je sposoban da utvrdi značajno smanjenje tumorske mase, shodno tome povećavajući preživljavanje pacijenata i kvalitet njegovog života.
Claims (8)
1. Konjugat HA-paklitaksel za primenu u loko-regionalnom lečenju mezotelioma, pri čemu navedeni konjugat hijaluronska kiselina-paklitaksel ima estarsku vezu između karboksila hijaluronske kiseline (HA) i spejsera, zauzvrat vezan estarskom vezom preko svog karboksila za hidroksilnu grupu za ugljenik C2' paklitaksela, pri čemu je uvedeni spejser 4-bromobuterna kiselina, pri čemu je stepen derivatizacije paklitaksela u konjugatu HA-paklitaksel u opsegu koji varira od 15% do 21% masa/masa (m/m) i
pri čemu HA korišćena za sintezu konjugata HA-paklitaksel je fermentativna HA sa prosečnom masom MM u opsegu od 140,000 do 250,000 Da.
2. Konjugat HA-paklitaksel za primenu u skladu sa patentnim zahtevom 1, pri čemu mezoteliom je maligni pleuralni mezoteliom, perikardijalni mezoteliom i peritonealni mezoteliom,
3. Konjugat HA-paklitaksel za primenu u skladu sa patentnim zahtevom 1, pri čemu mezoteliom je maligni pleuralni mezoteliom.
4. Konjugat HA-paklitaksel za primenu u skladu sa jednim ili više prethodnih patentnih zahteva, pri čemu je put administracije intrapleuralni, ili intraperitonealni, i intraperikardijalni.
5. Konjugat HA-paklitaksel za primenu u skladu sa jednim ili više prethodnih patentnih zahteva, pri čemu stepen derivatizacije paklitaksela u konugatu HA-paklitaksel varira od 16% do 20% m/m.
6. Konjugat HA-paklitaksel za primenu u skladu sa jednim ili više prethodnih patentnih zahteva, pri čemu je stepen derivatizacije paklitaksela u konugatu HA-paklitaksel jednak 20% m/m.
7. Farmaceutska kompozicija, koja se u suštini sastoji od konjugata HA-paklitaksel za primenu u skladu sa bilo kojim od zahteva od 1 do 6, povezana sa farmakološki prihvatljivim razblaživačima/ekscipijensima.
8. Farmaceutska kompozicija za primenu u skladu sa patentnim zahtevom 7, pri čemu je navedena farmaceutska kompozicija formulisana u sterilnoj, izotoničnoj vodi, koja sadrži 5% m/v glukoze.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT102020000007747A IT202000007747A1 (it) | 2020-04-10 | 2020-04-10 | Coniugato acido ialuronico-paclitaxel nel trattamento del mesotelioma |
| PCT/IB2021/052870 WO2021205350A1 (en) | 2020-04-10 | 2021-04-07 | Ha-paclitaxel conjugate for treatment of mesothelioma |
| EP21717556.1A EP4132587B1 (en) | 2020-04-10 | 2021-04-07 | Ha-paclitaxel conjugate for treatment of mesothelioma |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RS65741B1 true RS65741B1 (sr) | 2024-08-30 |
Family
ID=71784380
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| RS20240778A RS65741B1 (sr) | 2020-04-10 | 2021-04-07 | Konjugat ha-paklitaksel za lečenje mezotelioma |
Country Status (18)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US12605355B2 (sr) |
| EP (1) | EP4132587B1 (sr) |
| CN (1) | CN115515640B (sr) |
| DK (1) | DK4132587T3 (sr) |
| ES (1) | ES2987550T3 (sr) |
| FI (1) | FI4132587T3 (sr) |
| HR (1) | HRP20240968T1 (sr) |
| HU (1) | HUE068019T2 (sr) |
| IT (1) | IT202000007747A1 (sr) |
| LT (1) | LT4132587T (sr) |
| MA (1) | MA66607B1 (sr) |
| MD (1) | MD4132587T2 (sr) |
| PL (1) | PL4132587T3 (sr) |
| PT (1) | PT4132587T (sr) |
| RS (1) | RS65741B1 (sr) |
| SI (1) | SI4132587T1 (sr) |
| SM (1) | SMT202400294T1 (sr) |
| WO (1) | WO2021205350A1 (sr) |
Family Cites Families (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IN163192B (sr) | 1983-10-11 | 1988-08-20 | Fidia Spa | |
| IT1263393B (it) | 1993-07-30 | 1996-08-05 | Fidia Advanced Biopolymers Srl | Processo per la preparazione e purificazione di acido ialuronico ad alto peso molecolare |
| ITPD20020271A1 (it) * | 2002-10-18 | 2004-04-19 | Fidia Farmaceutici | Composti chimico-farmaceutici costituiti da derivati dei taxani legati covalentemente all'acido ialuronico o ai suoi derivati. |
| WO2008134528A1 (en) * | 2007-04-25 | 2008-11-06 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Anti-cancer agent-hyaluronic acid conjugate compositions and methods |
| CA2722376C (en) * | 2008-04-22 | 2017-05-30 | Fidia Farmaceutici S.P.A. | Therapeutic use of new pharmaceutical preparations containing antitumoral drugs bound to hyaluronic acid in the treatment of neoplasias |
| IT1402385B1 (it) | 2010-09-09 | 2013-09-04 | Fidia Farmaceutici | Processo per la produzione di acido ialuronico in escherichia coli o bacillus subtilis |
| IT1402384B1 (it) | 2010-09-09 | 2013-09-04 | Fidia Farmaceutici | Processo per la produzione di acido ialuronico in escherichia coli o bacillus megaterium |
| IT201600079633A1 (it) | 2016-07-28 | 2018-01-28 | Fidia Farm Spa | Procedimento di preparazione e purificazione del sale sodico dell’acido ialuronico |
| IT201800009731A1 (it) * | 2018-10-25 | 2020-04-25 | Fidia Farm Spa | Coniugato paclitaxel - acido ialuronico nel trattamento del carcinoma vescicale non infiltrante |
| IT202000008209A1 (it) * | 2020-04-17 | 2021-10-17 | Fidia Farm Spa | Procedimento di sintesi di un coniugato acido ialuronico-paclitaxel |
-
2020
- 2020-04-10 IT IT102020000007747A patent/IT202000007747A1/it unknown
-
2021
- 2021-04-07 SM SM20240294T patent/SMT202400294T1/it unknown
- 2021-04-07 WO PCT/IB2021/052870 patent/WO2021205350A1/en not_active Ceased
- 2021-04-07 CN CN202180025681.5A patent/CN115515640B/zh active Active
- 2021-04-07 MD MDE20230180T patent/MD4132587T2/ro unknown
- 2021-04-07 US US17/916,645 patent/US12605355B2/en active Active
- 2021-04-07 PT PT217175561T patent/PT4132587T/pt unknown
- 2021-04-07 FI FIEP21717556.1T patent/FI4132587T3/fi active
- 2021-04-07 ES ES21717556T patent/ES2987550T3/es active Active
- 2021-04-07 PL PL21717556.1T patent/PL4132587T3/pl unknown
- 2021-04-07 RS RS20240778A patent/RS65741B1/sr unknown
- 2021-04-07 MA MA66607A patent/MA66607B1/fr unknown
- 2021-04-07 LT LTEPPCT/IB2021/052870T patent/LT4132587T/lt unknown
- 2021-04-07 HR HRP20240968TT patent/HRP20240968T1/hr unknown
- 2021-04-07 SI SI202130166T patent/SI4132587T1/sl unknown
- 2021-04-07 HU HUE21717556A patent/HUE068019T2/hu unknown
- 2021-04-07 EP EP21717556.1A patent/EP4132587B1/en active Active
- 2021-04-07 DK DK21717556.1T patent/DK4132587T3/da active
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN115515640B (zh) | 2025-12-05 |
| MA66607B1 (fr) | 2025-04-30 |
| PL4132587T3 (pl) | 2024-08-19 |
| HUE068019T2 (hu) | 2024-12-28 |
| US20230138984A1 (en) | 2023-05-04 |
| MD4132587T2 (ro) | 2024-09-30 |
| EP4132587A1 (en) | 2023-02-15 |
| US12605355B2 (en) | 2026-04-21 |
| PT4132587T (pt) | 2024-07-30 |
| SI4132587T1 (sl) | 2024-09-30 |
| IT202000007747A1 (it) | 2021-10-10 |
| CA3172312A1 (en) | 2021-10-14 |
| ES2987550T3 (es) | 2024-11-15 |
| CN115515640A (zh) | 2022-12-23 |
| FI4132587T3 (fi) | 2024-07-22 |
| HRP20240968T1 (hr) | 2024-10-25 |
| DK4132587T3 (da) | 2024-07-22 |
| SMT202400294T1 (it) | 2024-09-16 |
| EP4132587B1 (en) | 2024-05-01 |
| LT4132587T (lt) | 2024-07-25 |
| WO2021205350A1 (en) | 2021-10-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Rong et al. | Iron chelated melanin-like nanoparticles for tumor-associated macrophage repolarization and cancer therapy | |
| Fu et al. | Glucose oxidase‐instructed biomineralization of calcium‐based biomaterials for biomedical applications | |
| Weng et al. | Saponins modulate the intracellular trafficking of protein toxins | |
| Su et al. | Biodegradable oxygen-evolving metalloantibiotics for spatiotemporal sono-metalloimmunotherapy against orthopaedic biofilm infections | |
| Xiao et al. | Engineering cannabidiol synergistic carbon monoxide nanocomplexes to enhance cancer therapy via excessive autophagy | |
| Chen et al. | NIR-PTT/ROS-scavenging/oxygen-enriched synergetic therapy for rheumatoid arthritis by a pH-responsive hybrid CeO2-ZIF-8 coated with polydopamine | |
| Qiao et al. | Folated pH-degradable nanogels for the simultaneous delivery of docetaxel and an IDO1-inhibitor in enhancing cancer chemo-immunotherapy | |
| JP2017523184A (ja) | フラジェリン組成物および使用 | |
| KR102224965B1 (ko) | 세포 투과성 펩티드 및 이를 포함하는 컨쥬게이트 | |
| TWI313609B (en) | Pharmaceutical composition for inhibiting the metastasis or preventing the recurrence of malignant tumor | |
| Zhang et al. | Targeted modulation and enhancement of macrophages via sonodynamic therapy-driven cupferroptosis-like stress for implant-associated biofilm infections | |
| Liu et al. | Metal-organic frameworks as protective matrices for peptide therapeutics | |
| Kiaris et al. | Targeted cytotoxic analogue of bombesin/gastrin-releasing peptide inhibits the growth of H-69 human small-cell lung carcinoma in nude mice | |
| US20240277610A1 (en) | Biomaterials coating for on-demand bacteria delivery and method to treat colitis and irritable bowel syndrome | |
| Wang et al. | MMP-responsive transformation nanomaterials with IAP antagonist to boost immune checkpoint therapy | |
| Kefayat et al. | Spirulina extract enriched for Braun‐type lipoprotein (Immulina®) for inhibition of 4T1 breast tumors' growth and metastasis | |
| EP2970399B1 (en) | Protein particles comprising disulfide crosslinkers and uses related thereto | |
| Xue et al. | Zn2+ enhanced the anti-breast cancer activity of fucoidan based nanoparticles by activating the cGAS-STING pathway | |
| Zhang et al. | The novel strategy to overcome the drug-resistant lung cancer: dual targeting delivery of PROTAC to inhibit cancer-associated fibroblasts and lung cancer cells | |
| US20250281625A1 (en) | Folic acid-conjugated aminoclay based nanocomposites for the site-specific drug delivery, method for their preparation and their use | |
| EP4132587B1 (en) | Ha-paclitaxel conjugate for treatment of mesothelioma | |
| CN114632078B (zh) | 一种热休克蛋白抑制剂及其制备方法与应用 | |
| Franco-Molina et al. | Evaluation of the cytotoxic and immunogenic potential of temozolamide, panobinostat, and Lophophora williamsii extract against C6 glioma cells | |
| CA3172312C (en) | Hyaluronic acid-paclitaxel conjugate for treating mesothelioma | |
| EA047324B1 (ru) | Конъюгат ha-паклитаксел для лечения мезотелиомы |