RS61572B1 - Kombinacija koja obuhvata jedinjenje aminotiolestra ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i jedinjenje koje može da poveća nivo h2o2 u ćelijama kancera subjekta - Google Patents

Kombinacija koja obuhvata jedinjenje aminotiolestra ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i jedinjenje koje može da poveća nivo h2o2 u ćelijama kancera subjekta

Info

Publication number
RS61572B1
RS61572B1 RS20210309A RSP20210309A RS61572B1 RS 61572 B1 RS61572 B1 RS 61572B1 RS 20210309 A RS20210309 A RS 20210309A RS P20210309 A RSP20210309 A RS P20210309A RS 61572 B1 RS61572 B1 RS 61572B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
level
subject
cancer
cells
compound
Prior art date
Application number
RS20210309A
Other languages
English (en)
Inventor
Ismail Ceylan
Gerry Quash
Mileidys Perez-Alea
Guillaume Martin
Original Assignee
Advanced Biodesign
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Advanced Biodesign filed Critical Advanced Biodesign
Publication of RS61572B1 publication Critical patent/RS61572B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/131—Amines acyclic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/135—Amines having aromatic rings, e.g. ketamine, nortriptyline
    • A61K31/136—Amines having aromatic rings, e.g. ketamine, nortriptyline having the amino group directly attached to the aromatic ring, e.g. benzeneamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/135—Amines having aromatic rings, e.g. ketamine, nortriptyline
    • A61K31/137—Arylalkylamines, e.g. amphetamine, epinephrine, salbutamol, ephedrine or methadone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/145—Amines having sulfur, e.g. thiurams (>N—C(S)—S—C(S)—N< and >N—C(S)—S—S—C(S)—N<), Sulfinylamines (—N=SO), Sulfonylamines (—N=SO2)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4453—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine only substituted in position 1, e.g. propipocaine, diperodon
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/498—Pyrazines or piperazines ortho- and peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. quinoxaline, phenazine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
    • A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
    • A61K31/704—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin attached to a condensed carbocyclic ring system, e.g. sennosides, thiocolchicosides, escin, daunorubicin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
    • A61K33/36—Arsenic; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/62—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light
    • G01N21/63—Systems in which the material investigated is excited whereby it emits light or causes a change in wavelength of the incident light optically excited
    • G01N21/64—Fluorescence; Phosphorescence
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/575—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • G01N33/5758—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving compounds serving as markers for tumours, cancers or neoplasias, e.g. cellular determinants, receptors, heat shock/stress proteins, A-protein, oligosaccharides or metabolites
    • G01N33/57595—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving compounds serving as markers for tumours, cancers or neoplasias, e.g. cellular determinants, receptors, heat shock/stress proteins, A-protein, oligosaccharides or metabolites involving intracellular compounds
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/84—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving inorganic compounds or pH
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2440/00—Post-translational modifications [PTMs] in chemical analysis of biological material

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

Opis
[0001] Ovaj pronalazak se odnosi na kombinaciju koja obuhvata jedinjenje aminoetilestra kako je definisano u zahtevu 1 ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, određenije S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioat ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i još određenije S-metil estar fumarat 4-(dimetilamino)-4-metil-2-pentintiokiseline, i jedinjenje koje može da poveća nivo H2O2u ćelijama kancera subjekta, određenije za upotrebu u lečenju kancera kod subjekta, pri čemu ćelije kancera pomenutog subjekta ne proizvode prekomerno H2O2u odnosu na kontrolnu vrednost i imaju nivo GSH ispod 0,5 nmol za 25000 ćelija.
Pozadina
[0002] Redoks ravnoteža ćelija je ključna za normalnu fiziologiju ćelija. Održavaju je 3 sistema:
GSH/GSSG, NADPH/NADP; tioredoksin (red) /tioredoksin (oxd). Od ova 3 sistema, GSH/GSSG je najviše izučavan zbog svog uticaja kod bolesti i zbog razvoja racionalnih terapeutskih pristupa (Townsend, A.J., Leone-Kabler, S., Haynes, R.L., Wu, Y., Szweda, L., and Bunting, K.D. (2001). Selective protection by stably transfected human ALDH3A1 (but not human ALDH1A1) against toxicity of aliphatic aldehydes in V79 cells.130-132, 261-273). Bolesti povezane sa disbalansom kod GSH/GSSG uključuju veće patologije kao što su kanceri (Estrela, J.M., Ortega, A., i Obrador, E. (2006). Glutatione in cancer biology and therapy. Crit. Rev. Clin. Lab. Sci.43, 143-181; O'Brien, M.L., i Tew, K.D. (1996). Glutatione and related enzymes in multidrug resistance. Eur. J. Cancer Oxf. Engl.199032A, 967-978). Jedna njihova uobičajena etiologija je oksidativni stres koji uzrokuju ROS i/ili vrsta reaktivnog azota (RNS) koji prvo uzrokuje smanjenje GSH usled direktne detoksikacije ROS i RNS. Nakon ovog početnog smanjenja GSH sledi kompenzacioni porast GSH sinteze koju pokreću ćelije kako bi se nastavila detoksikacija ROS/RNS i novonastalih elektrofilnih proizvoda kao što su 4-hidroksinonenal (HNE) i malondialdehid (MDA)) koji se proizvode napadom ROS-a na celularne lipide (Esterbauer, H., Schaur, R.J., and Zollner, H. (1991).
Chemistry and biochemistry of 4-hydroxynonenal, malonaldehyde and related aldehydes.11, 81-128).
[0003] GSH paradoks u ćelijama kancera je taj što umesto nedostatka intracelularnog GSH koji je očekivan, upravo suprotno je eksperimentalno pronađeno u mnogim različitim ćelijama kancera (Estrela, J.M., Ortega, A., and Obrador, E. (2006). Glutatione in cancer biology and therapy. Crit. Rev. Clin. Lab. Sci.43, 143-181). Ali ovo povećanje GSH ima negativne terapijske posledice jer štiti ćelije kancera od hemo i radioterapija (Carretero, J., Obrador, E., Esteve, J.M., Ortega, A., Pellicer, J.A., Sempere, F.V., and Estrela, J.M. (2001). Tumoricidal activity of endothelial cells. Inhibition of endothelial nitric oxide produstion abrogates tumor cytotoxicity induced by hepatic sinusoidal endothelium in response to B16 melanom adhesion in vitro. J. Biol. Chem.276, 25775-25782).
[0004] Pored toga, ukoliko niski nivoi GSH moraju biti dobijeni u ćelijama kancera za hemoterapiju kako bi imala efekta, to nije slučaj sa normalnim ćelijama kako ne bi došlo do njihovog kolateralnog oštećenja.
[0005] Terapijski pristupi koji se trenutno koriste da se snizi celularni GSH kako bi se borili protiv hemorezistentnosti ćelija kancera, ciljaju sam GSH ili enzime uključene u GSH sintezu, GSH degradaciju I efluksiju GSH. Već postoji 10 jedinjenja za snižavanje GSH koja su u fazama I, II i III kliničkih ispitivanja kao antikancerski agensi (Tew,K. and Townsend D (2011) Redox platforms in cancer drug discovery and development. Curr.Opin. Chem.Biol.15, 156-161). Sva moraju da se daju u kombinaciji sa standardnim anti-kancerskim lekovima, npr. ciklofosfamid, taksol, vinkristin, melfalan, itd.
[0006] Dalje, enzimi koje ciljaju lekovi koji snižavaju GSH su oni koji su uključeni u sintezu GSH (gama glutamil cistein ligaza), degradaciju GSH (gama -glutamil transpeptidaza) i efluksiju GSH (GSH-S-transferaza). Ovi isti enzimi su međutim ključni za zaštitu normalnih ćelija od napada ROS. Stoga, postoji jaka mogućnost kolateralnog oštećenja normalnih ćelija jer lekovi ne mogu da se isporuče selektivno u ćelije kancera i samo ćelije kancera.
[0007] U ovom smislu, postoji potreba da se pronađu druga terapijska rešenja koja konkretno I selektivno ciljaju GSH u ćelijama kancera.
[0008] Pronalazači ovog pronalaska su neočekivano došli do zaključka da kombinacija koja obuhvata jedinjenje aminoetilestra ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, određenije S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioat ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i još određenije S-metil estar fumarat 4-(dimetilamino)-4-metil-2-pentintiokiseline, i jedinjenje koje može da poveća nivo H2O2u ćelijama kancera subjekta, je korisno kao lek I može da leči kancer kod subjekta, pri čemu ćelije kancera pomenutog subjekta ne proizvode prekomerno H2O2. Određenije, došli su do zaključka da kombinacija koja obuhvata jedinjenje aminoetilestra ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, određenije S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioat ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i još određenije S-metil estar fumarat 4-(dimetilamino)-4-metil-2-pentintiokiseline, i jedinjenje koje može da poveća nivo H2O2u ćelijama kancera subjekta, je korisno kao lek i može da leči kancer kod subjekta, pri čemu ćelije kancera pomenutog subjekta ne proizvode prekomerno H2O2i imaju nivo GSH ispod 0,5 nmol za 25000 ćelija.
[0009] Bez vezivanja za bilo koju teoriju, kada bi jedinjenje koje može da poveća nivo H2O2u ćelijama kancera subjekta izazvalo porast nivoa H2O2u ćelijama kancera, onda bi to jedinjenje aminoetilestra ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, povećali nivoe intracelularnih metabolita koje proizvodi napad H2O2, i, u isto vreme, GSH bi se utrošio u detoksikaciji ovih elektrofilnih metabolita. Kao rezultat, nedovoljan GSH bi bio dostupan u ćelijama kancera da dejstvuje kao čistač H2O2. Stoga, bi nivoi H2O2trebalo da se povećaju i trebalo bi da pokrenu H2O2-zavisne mehanizme u mitohondrijalnom (unutrašnjem) putu apoptoze.
[0010] U normalnim ćelijama koje nisu bile inicijalno napadnute od strane H2O2, intracelularni GSH nivoi su već visoki (usled odsustva H2O2) tako da su nivoi bilo kojih H2O2-izazvanih elektrofila ispod onih u njihovim kancerskim parovima. Međutim, nivoi H2O2u normalnim ćelijama mogu istovremeno da rastu kada se koristi jedinjenje koje može da poveća nivo H2O2u ćelijama kancera subjekta, ukoliko ovo jedinjenje može da poveća nivo H2O2i u normalnim i u ćelijama kancera. U ovom drugom slučaju, nivoi H2O2u normalnim ćelijama će međutim i dalje biti niži od onih u ćelijama kancera i samim tim će ostati ispod njihove apoptotske granične vrednosti nakon lečenja jedinjenjem aminoetilestra prema ovom pronalasku ili njegovom farmaceutski prihvatljivom solju. US20070032476 i Zhou at al, Krv, vol 101, pp.4098-4104 mogu biti relevantni za razumevanje ovog pronalaska.
Opis ovog pronalaska
[0011] Kako je prethodno opisano, pronalazači ovog pronalaska su neočekivano došli do zaključka da jedinjenje aminoetilestra ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, određenije S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioat ili njegova farmaceutski prihvatljiva so u kombinaciji sa jedinjenjem koje može da poveća nivo H2O2u ćelijama kancera subjekta, je korisno kao lek i da može da leči kancer kod subjekta, pri čemu ćelije kancera pomenutog subjekta ne proizvode prekomerno H2O2. Određenije, došli su do zaključka da kombinacija koja obuhvata jedinjenje aminoetilestra ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, određenije S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioat ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i još određenije S-metil estar fumarat 4-(dimetilamino)-4-metil-2-pentintiokiseline, a jedinjenje koje može da poveća nivo H2O2u ćelijama kancera subjekta, je korisno kao lek i može da leči kancer kod subjekta, pri čemu ćelije kancera pomenutog subjekta ne proizvode prekomerno H2O2i imaju nivo GSH ispod 0,5 nmol za 25000 ćelija.
[0012] Ova nova terapija predstavlja prednost u smislu da su normalne ćelije manja kolateralna šteta jer su njihovi inicijalni elektrofilni metaboiti toliko niski (usled odsustvaH2O2) da će svejedno ostati ispod njihove apoptotske granične vrednosti po lečenju jedinjenjem aminoetilestra prema ovom pronalasku ili njegovom farmaceutski prihvatljivom solju.
[0013] Ovaj pronalazak se samim tim odnosi na kombinaciju koja obuhvata jedinjenje formule (I):
u kojoj X1 i X2, identične ili različite, izabrane iz grupe koju čine C1-C7alkilna grupa, fenil, benzil, ili X1 i X2 zajedno sa atomom azota za koji su vezane obrazuju heterocikl, određenije piperidin ili morfolin; ili njegovu farmaceutski prihvatljiva so; i jedinjenje koje može da poveća nivo H2O2u ćelijama kancera subjekta, za upotrebu u lečenju kancera kod subjekta.
[0014] Još određenije, odnosi se na kombinaciju koja obuhvata jedinjenje formule (I):
u kojoj X1 i X2, identične ili različite, izabrane iz grupe koju čine C1-C7alkilna grupa, fenil, benzil, ili X1 i X2 zajedno sa atomom azota za koji su vezane obrazuju heterocikl, određenije piperidin ili morfolin; ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so; i jedinjenje koje može da poveća nivo H2O2u ćelijama kancera subjekta, za upotrebu u lečenju kancera kod subjekta, pri čemu ćelije kancera pomenutog subjekta:
- ne proizvode prekomerno H2O2u odnosu na kontrolnu vrednost, i
- imaju nivo GSH ispod 0,5 nmol za 25000 ćelija.
[0015] Određenije, ćelije kancera pomenutog subjekta imaju takođe nivo MDA-adukata iznad 75 ng po µg ukupnih proteina i/ili nivo HNE-adukata iznad 1 µg po µg ukupnih proteina, nakon in vitro lečenja jedinjenjem formule (I) ili njegovom farmaceutski prihvatljivom solju.
[0016] Ovaj pronalazak se takođe odnosi na proizvode koji obuhvataju jedinjenje formule (I):
u kojoj X1 i X2, identične ili različite, izabrane iz grupe koju čine C1-C7alkilna grupa, fenil, benzil, ili X1 i X2 zajedno sa atomom azota za koji su vezane obrazuju heterocikl, određenije piperidin ili morfolin; ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so; i jedinjenje koje može da poveća nivo H2O2u ćelijama kancera subjekta u obliku kombinovanog preparata za upotrebu koji se vremenom širi za lečenje kancera kod subjekta, pri čemu ćelije kancera pomenutog subjekta:
- ne proizvode prekomerno H2O2u odnosu na kontrolnu vrednost, i
- imaju nivo GSH ispod 0,5 nmol za 25000 ćelija.
[0017] Određenije, ćelije kancera pomenutog subjekta imaju takođe nivo MDA-adukata iznad 75 ng po µg ukupnih proteina i/ili nivo HNE-adukata iznad 1 µg po µg ukupnih proteina, nakon in vitro lečenja jedinjenjem formule (I) ili njegovom farmaceutski prihvatljivom solju.
[0018] Određenije, pomenuti subjekat se identifikuje merenjem nivoa H2O2i nivoa GSH u ćelijama kancera pomenutog subjekta.
[0019] Još određenije, pomenuti nivo H2O2se određuje kvantifikovanjem nivoa intenziteta fluorescencije.
[0020] Ovaj pronalazak se takođe odnosi na farmaceutsku kompoziciju koja obuhvata jedinjenje formule (I):
u kojoj X1 i X2, identične ili različite, izabrane iz grupe koju čine C1-C7alkilna grupa, fenil, benzil, ili X1 i X2 zajedno sa atomom azota za koji su vezane obrazuju heterocikl, određenije piperidin ili morfolin;
ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so; i jedinjenje koje može da poveća nivo H2O2u ćelijama kancera subjekta.
[0021] Ovaj pronalazak se dalje odnosi na postupak za izbor subjekta koji ima kancer i koji će najverovatnije imati koristi od lečenja kombinacijom koja obuhvata jedinjenje formule (I):
u kojoj X1 i X2, identične ili različite, izabrane iz grupe koju čine C1-C7alkilna grupa, fenil, benzil, ili X1 i X2 zajedno sa atomom azota za koji su vezane obrazuju heterocikl, određenije piperidin ili morfolin;
ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so; i jedinjenje koje može da poveća nivo H2O2u ćelijama kancera subjekta pri čemu pomenuti postupak obuhvata:
a) merenje nivoa H2O2u uzorku ćelija kancera pomenutog subjekta;
b) poređenje dobijenog nivoa iz faze a. sa kontrolnom vrednošću; i
c) merenje nivoa GSH u uzorku ćelija kancera pomenutog subjekta;
pri čemu:
- nivo H2O2pomenutog uzorka ćelija kancera pomenutog subjekta ne viši od kontrolne vrednosti, i - nivo GSH pomenutog uzorka ćelija kancera pomenutog subjekta ispod 0,5 nmol za 25000 ćelija, ukazuje da će subjekat verovatno imati koristi od lečenja kombinacijom koja obuhvata jedinjenje formule (I), ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i jedinjenje koje može da poveća nivo H2O2u ćelijama kancera subjekta.
[0022] U jednom načinu ostvarivanja, pomenuti postupak obuhvata:
a) merenje nivoa H2O2u uzorku ćelija kancera pomenutog subjekta;
b) poređenje dobijenog nivoa iz faze a. sa kontrolnom vrednošću;
c) merenje nivoa GSH u uzorku ćelija kancera pomenutog subjekta; i/ili
d) merenje nivoa MDA-adukata i/ili HNE-adukata nakon in vitro lečenja jedinjenjem formule (I) ili njegovom farmaceutski prihvatljivom solju prema ovom pronalasku u uzorku ćelija kancera pomenutog subjekta;
pri čemu:
- nivo H2O2pomenutog uzorka ćelija kancera pomenutog subjekta ne viši od kontrolne vrednosti, - nivo GSH pomenutog uzorka ćelija kancera pomenutog subjekta ispod 0,5 nmol na 25000 ćelija, i/ili
- nivo MDA-adukata iznad 75 ng po µg ukupnih proteina i/ili nivo HNE-adukata iznad 1µg po µg proteina,
ukazuje da će subjekat verovatno imati koristi od lečenja kombinacijom prema ovom pronalasku.
[0023] Kao što je ovde opisano, "H2O2" označava "vodonikperoksid" i dobro je poznat stručnjaku iz oblasti. Predstavlja hemijski reaktivne molekule koji sadrže kiseonik. Obrazovan je kao prirodni sporedni proizvod normalnog metabolizma kiseonika i ima važne uloge u signaliziranju ćelija i homeostazi.
Međutim, tokom vremena stresova iz spoljašnje sredine (npr., UV ili izlaganje toploti), njegovi nivoi mogu dramatično da porastu. Ovo može da dovede do značajnog oštećenja ćelijskih struktura.
Kumulativno, ovo je poznato kao oksidativni stres. Vodonikperoksid se takođe stvara i usled spoljašnjih uticaja kao što je jonizirajuća radijacija.
[0024] Određenije, nivo H2O2ne viši od vrednosti koja obuhvata relativni intenzitet fluorescencije između 2000 i 400000, na primer relativni intenzitet fluorescencije između 10000 i 100000 ili relativni intenzitet fluorescencije između 15000 i 100000, i još određenije nivo H2O2ne viši od relativnog intenziteta fluorescencije od 20000, čak još određenije ne viši od relativnog intenziteta fluorescencije od 21598, ukazuje da će subjekat verovatno imati koristi od lečenja kombinacijom prema ovom pronalasku.
[0025] Određenije, nivo ne viši od vrednosti koja obuhvata relativni intenzitet fluorescencije između 2 000 i 400000, na primer relativni intenzitet fluorescencije između 10000 i 100000 ili relativni intenzitet fluorescencije od 15000 i 100000, i još određenije nivo H2O2ne viši od relativnog intenziteta fluorescencije od 20000, čak još određenije relativni intenzitet fluorescencije ne viši od 21598, se meri pomoću kompleta za detekciju ukupnog ROS/superoksida (Enzo life science), još određenije kako se meri na Appliskan čitaču mikroploča za merenje fluorescencije (Thermo Scientific) (Ex/ Em= 488/520 nm i Ex/ Em= 550/610 nm).
[0026] Ako je granični presek H2O2dat ovde i bilo gde drugo u opisu merenjem intenziteta fluorescencije, ovaj postupak nije ekskluzivan, a granični presek H2O2može da se odredi bilo kojim drugim postupkom koji je dostupan stručnjaku, pri čemu taj parametar određuje gde da se stavi taj granični presek koji je u korelaciji između IC50proizvoda prema ovom pronalasku i nivoa H2O2.
IC50predstavlja meru koja je dobro poznata stručnjaku iz oblasti.
[0027] Kao što je ovde opisano, "GSH" označava "glutation"i dobro je poznat stručnjaku iz oblasti. To je tripeptid sa gama peptidnom vezom između karboksilne grupe bočnog lanca glutamata i aminske grupe cisteina, a karboksilna grupa cisteina je pričvršćena normalnom peptidnom vezom za glicin.
[0028] Određenije, u obimu ovog pronalaska, nivo GSH is ispod 0,5 nmol za 25000 ćelija, određenije ispod 0,45 nmol za 25000 ćelija još određenije ispod 0,4 nmol za 25000 ćelija.
[0029] Nivo GSH se određuje bilo kojim postupkom koji je dostupan stručnjaku iz oblasti. Na primer, nivo GSH se određuje luminiscencijom, na primer pomoću kompleta Promega GSH-Glo (Promega).
[0030] Ukoliko je granični presek GSH dat ovde ili na bilo kom drugom mestu u opisu luminiscencijom, ovaj postupak nije ekskluzivan, a granični presek GSH može da se odredi bilo kojim drugim postupkom koji je dostupan stručnjaku
[0031] Kao što je ovde opisano, "MDA" se koristi za "malondialdehid", organsko jedinjenje formule CH2(CHO)2. Ova reaktivna vrsta je stručnjaku iz oblasti dobro poznata, a javlja se prirodno i predstavlja marker peroksidacije u ćelijama. Pored toga, "MDA-adukt" prema ovom pronalasku predstavlja adukt nastao između MDA i proteina ćelija kancera kao i sa DNK ćelija kancera.
[0032] Određenije, u obimu ovog pronalaska, nivo MDA-adukata nakon in vitro lečenja jedinjenjem formule (I) prema ovom pronalasku njegove farmaceutski prihvatljive soli je iznad 75 ng po µg ukupnih proteina, određenije iznad 90 ng po µg ukupnih proteina i još određenije iznad 100 ng po µg ukupnih proteina. Nivo MDA-adukata se određuje bilo kojim postupkom koji je dostupan stručnjaku iz oblasti. Na primer, nivo MDA-adukata se određuje imunološkim praćenjem, na primer pomoću kompleta za kompetetivni ELISA postupak za detekciju MDA-adukta OxiSelect™ (CELL BIOLABS).
[0033] Kao što je ovde opisano, "HNE" se upotrebljava za "4-hidroksi-2-nonenal", organsko jedinjenje formule C9H16O2. Ova reaktivna vrsta je dobro poznata stručnjaku iz oblasti, a javlja se prirodno i predstavlja marker peroksidacije lipida u ćelijama.
[0034] Pored toga, "HNE-adukt" prema ovom pronalasku predstavlja adukt nastao između HNE i proteina ćelija kancera kao i adukta obrazovanog sa GSH ćelijama kancera.
[0035] Određenije, u obimu ovog pronalaska, nivo HNE-adukata nakon in vitro lečenja jedinjenjem formule (I) prema ovom pronalasku ili njegovom farmaceutski prihvatljivo solju je iznad 750ng po µg ukupnih proteina, određenije iznad 900 ng po µg ukupnih proteina i još određenije iznad 1µg po µg ukupnih proteina.
[0036] Nivo HNE-adukata se određuje bilo kojim postupkom koji je dostupan stručnjaku. Na primer, nivo HNE-adukata se određuje imunološkim praćenjem, na primer pomoću kompleta za kompetetivni ELISA postupak za detekciju HNE-adukta OxiSelect™ (CELL BIOLABS).
[0037] "Ukupni proteini" označava sadržaj ukupnih proteina ćelije kancera.
[0038] "In vitro lečenje jedinjenjem formule (I) prema ovom pronalasku ili njegovom farmaceutski prihvatljivom solju" znači da se nivo MDA-adukata i/ili HNE-adukata meri nakon faze lečenja, in vitro, na uzorku ćelija kancera subjekta, na primer u uslovima opisanim u odeljku sa eksperimentima, uzimajući u obzir da su doze jedinjenja formule (I) prema ovom pronalasku njegove farmaceutski prihvatljive soli koje mogu da se daju do 60µM.
[0039] "C1-C7alkilna grupa" označava alifatičku-ugljovodoničnu grupu koja može biti ravna ili razgranata sa 1 do 7 atoma ugljenika u lancu osim ako nije drugačije naznačeno. Određenije, alkilne grupe imaju 1 do 3 atoma ugljenika u lancu (C1-C3alkil). Razgranati znači da su jedna ili više alkilnih grupa kao što su metil, etil ili propil pričvršćene za ravni alkilni lanac. Primeri alkilnih grupa uključuju metil, etil, n-propil, ipropil, n-butil, t-butil, 2,2-dimetilbutil, n-pentil, n-heksil, oktil, određenije metil.
[0040] Određenije, jedinjenje formule (I) predstavlja jedinjenje kako je prethodno pomenuto u kojoj X1 i X2, identične ili različite, izabrane iz grupe koju čine metil, fenil, benzil, pri čemu najmanje jedna od X1 ili X2 predstavlja metil, ili pri čemu X1 i X2 zajedno sa atomom azota za koji su vezane obrazuju piperidin ili morfolin.
[0041] Još određenije, pomenuto jedinjenje je izabrano iz grupe koju čine:
- S-metil 4-metil-4-(piperidin-1-il)pent-2-inetioat;
- S-metil 4-[benzil(metil)amino]-4-metilpent-2-inetioat;
- S-metil 4-metil-4-[metil(fenil)amino]pent-2-inetioat;
- S-metil 4-metil-4-(morfolin-4-il)pent-2-inetioat; i
- S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioat.
[0042] Ova jedinjenja su dalje opisana u tabeli 1 u nastavku.
Tabela 1
[0043] U poželjnom načinu ostvarivanja, pomenuto jedinjenje predstavlja S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioat.
[0044] Ova jedinjenja mogu da se pripreme prema postupcima dobro poznatim stručnjaku iz oblasti. Određenije, ova jedinjenja mogu da se pripreme od odgovarajućeg acetilenskog amina tretiranog redom BuLi, COS i Mel. Detaljan postupak pripreme može da se nađe na primer u G.Quash et al., European Journal of Medicinal Chemistry 43 (2008) 906-916, određenije u 2. delu odeljka o materijalima i postupcima.
[0045] S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioat (CAS broj 350229-29-7, masa formule: 185.29 g.mol<-1>, formula: C9H15NOS), takođe poznat pod nazivom DIMATE je jedinjenje formule (II):
[0046] Ovo jedinjenje i postupak njegove pripreme su opisani u patentu EP1296946 (određenije u primeru 1), iz kojeg je sadržaj uključen po referenci.
[0047] "Farmaceutski prihvatljiva so" jedinjenja formule (I), znači da je to jedinjenje modifikovano pravljenjem njegove kiseline ili soli. Farmaceutski prihvatljive soli uključuju konvencionalne netoksične soli tog jedinjenja ili kvaternarne amonijum soli tog jedinjenja, na primer, od netoksičnih neorganskih ili organskih kiselina. Na primer, takve konvencionalne ne-toksične soli uključuju soli kao što su fumarat, fosfat, citrat, hloridat, i njima slične. Farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja formule (I) može da sintetiše matično jedinjenje konvencionalnim hemijskim postupcima. Generalno, takve soli mogu da se pripreme reagovanjem oblika slobodne kiseline ili baze ovih jedinjenja sa stehiometrijskom količinom odgovarajuće baze ili kiseline u vodi ili u organskom rastvaraču, ili u mešavini ta dva. Generalno, nevodene podloge kao što su etar, etilacetat, etanol, izopropanol, ili acetonitril su poželjni. Spiskovi pogodnih soli su pronađeni u Remington's Pharmaceutical Sciences, 17th ed., Mack Publishing Company, Easton, PA, 1985, p.1418.
[0048] Određenije, jedinjenje formule (I) predstavlja S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioat, a njegova farmaceutski prihvatljiva so je njegova fumaratna so tj. S-metil estar fumarat 4-(dimetilamino)-4-metil-2-pentintiokiseline (masa formule: 301.4 g.mol<-1>, formula: C13H19NO5S). Takva so fumarata može da se pripremi od S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioata u bezvodnom etru uz dodatak rastvora fumarinske kiseline u bezvodnom etanolu. So monofumarata se sakuplja filtracijom, pere etrom i suši.
[0049] U obimu ovog pronalaska, jedinjenje aminoetilestra, jedinjenje formule (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioat ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, određenije S-metil estar fumarat 4-(dimetilamino)-4-metil-2-pentintiokiseline, će se upotrebljavati naizmenično sa izrazom "jedinjenje prema ovom pronalasku".
[0050] Jedinjenja koja mogu da povećaju nivo H2O2u ćelijama kancera subjekta su poznata stručnjaku iz oblasti. Određenije, u obimu ovog pronalaska, ova jedinjenja mogu selektivno da povećaju nivo H2O2u ćelijama kancera subjekta tj. to su jedinjenja koja mogu da povećaju nivo H2O2u ćelijama kancera subjekta ali koja, u isto vreme, ne povećavaju nivo H2O2nekancerskih ćelija (tj. normalnih ćelija) tog subjekta. Upotreba ovih jedinjenja koja pokazuje selektivno dejstvo na ćelije kancera omogućava da se izbegnu neželjeni efekti kao što je citostatički efekat na normalne ćelije. Jedinjenja koja mogu da povećaju nivo H2O2mogu biti izabrana iz grupe koju čine piocijanin, 2-metoksiestradiol, rotenon, As2O3(arsentrioksid), doksorubicin, daunorubicin, AZT, diklofenak, paracetamol, cisplatin, hlorpromazin, piperlongumin, etopozid, mitoksantron i partenolid (Deavall et al., (2012), Drug-Induced Oxidative Stress and Toxicity., Journal of Toxicology, 2012, e645460; Pelicanoet al., (2003), Inhibition of Mitochondrial Respiration A NOVEL STRATEGY TO ENHANCE DRUG-INDUCED APOPTOSIS IN HUMAN LEUKEMIA CELLS BY A REACTIVE OXYGEN SPECIES-MEDIATED MECHANISM., J. Biol. Chem., 278, 37832-37839). Još određenije, pomenuto jedinjenje je izabrano iz grupe koju čine piocijanin, 2-metoksiestradiol, rotenon, As2O3, doksorubicin, daunorubicin, AZT, diklofenak, paracetamol, hlorpromazin, piperlongumin, etopozid, mitoksantron_i partenolid. Poželjno pomenuto jedinjenje je As2O3(arsentrioksid) ili daunorubicin. Ova jedinjenja su komercijalno dostupna ili mogu da se pripreme pomoću dobro poznatih postupaka pripreme.
[0051] Pojmovi "lečiti", "koji se leči", "lečen" ili "lečenje", kako se ovde koriste, se odnose na terapijsko lečenje pri čemu je cilj da se eliminišu ili oslabe simptomi. Korisni ili željeni klinički rezultati uključuju, ali bez ograničenja na, eliminaciju simptoma, ublažavanje simptoma, smanjenje opsega stanja, stabilno (odnosno ono koje se ne pogoršava) stanje, odlaganje ili usporavanje napredovanja stanja, na sprečavanje nastanaka, recidiva ili širenja bolesti ili poremećaja, ili jednog ili više njegovih simptoma. U određenim načinima ostvarivanja, ti pojmovi se odnose na lečenje ili davanje ovde obezbeđenih jedinjenja pre pojave simptoma. Ti pojmovi obuhvataju inhibiciju ili smanjenje simptoma određene bolesti. Subjekti sa porodičnom anamnezom bolesti su naročito kandidati za lečenje u određenim načinima ostvarivanja. Takođe, za subjekte kod kojih postoji određena predispozicijom za određenu bolest se pokazalo da su kandidati za režime lečenja u određenim načinima ostvarivanja. Pored toga, subjekti koji imaju istoriju simptoma koji se vraćaju su takođe potencijalni kandidati za lečenje. S tim u vezi, pojam "lečenje" može naizmenično da se koristi sa pojmom "profilaktičko lečenje."
[0052] Kako se ovde upotrebljava i ukoliko nije drugačije definisano, "kancer" se odnosi na rast, deobu ili proliferaciju abnormalnih ćelija u telu. Kanceri prema ovom pronalasku su kanceri u kojima prekomerna proizvodnja H2O2nije praćena u odnosu na kontrolnu vrednost, određenije kanceri u kojima nema ni prekomerne proizvodnje H2O2primećene u odnosu na kontrolnu vrednost i nivo GSH ispod 0,5 nmol za 25000 ćelija. Takvi kanceri uključuju, ali bez ograničenja na, leukemiju, limfome, kancer krvi, kancer dojke (određenije TNBC), kancer pluća (određenije EGFR mutirani), melanome, kancer debelog creva, kancer pankreasa, kancer jajnika, osteosarkom, kancer mozga, kancer bešike i kancer želuca.
[0053] Kao takav, ovaj pronalazak se takođe odnosi na kombinaciju koja obuhvata jedinjenje formule (I) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, određenije S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioat ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i još određenije S-metil estar fumarat 4-(dimetilamino)-4-metil-2-pentintiokiseline, i jedinjenje koje može da poveća nivo H2O2u ćelijama kancera subjekta, za upotrebu prema ovom pronalasku, na proizvode za upotrebu prema ovom pronalasku ili na postupke prema ovom pronalasku, pri čemu kancer koji se leči je odabran iz grupe koju čine leukemija, limfomi, kancer krvi, kancer dojke (određenije TNBC), kancer pluća (određenije EGFR mutirani), melanomi, kancer debelog creva, kancer pankreasa, kancer jajnika, osteosarkom, kancer mozga, kancer bešike i kancer želuca.
[0054] Ipak, pomenuti kancer je hemorezistentan i/ili radiorezistentan kancer.
[0055] "Hemorezistentan" označava, kancer kao što je ovde opisano protiv kog hemoterapija nema efekta ili je prestala da ima efekta.
[0056] "Radiorezistentan" znači, kancer kao što je ovde opisano protiv kog radioterapija nema efekta ili je prestala da ima efekta.
[0057] Određenije, pomenuti kancer predstavlja kancer u kojem je primećen nivo MDA-adukata iznad 75 ng po µg ukupnih proteina i/ili nivo HNE-adukata iznad 1 µg po µg ukupnih proteina, nakon in vitro lečenja jedinjenjem formule (I) njegove farmaceutski prihvatljive soli.
[0058] Kako se ovde upotrebljava, pojam "subjekat" se odnosi na toplokrvnu životinju kao što je sisar, životinja ili čovek, određenije čovek, koji ima, ili koji ima potencijal da ima jednu ili više ovde opisanih bolesti I stanja, i još određenije, kod kog ćelije kancera ne proizvode prekomerno H2O2u odnosu na kontrolnu vrednost, i čak još određenije kod kojih ćelije kancera ne proizvode prekomerno H2O2u odnosu na kontrolnu vrednost i imaju nivo GSH ispod 0,5 nmol za 25000 ćelija. Opet određenije, ćelije kancera pomenutog subjekta koje ne proizvode prekomerno H2O2u odnosu na kontrolnu vrednost i imaju nivo GSH ispod 0,5 nmol za 25000 ćelija su hemorezistentne i/ili radiorezistentne ćelije kancera. Čak još određenije, ćelije kancera pomenutog subjekta koje ne proizvode prekomerno H2O2u odnosu na kontrolnu vrednost, još određenije koje ni ne proizvode prekomerno H2O2u odnosu na kontrolnu vrednost imaju nivo GSH ispod 0,5 nmol za 25000 ćelija, imaju takođe nivo MDA-adukata iznad 75 ng po µg ukupnih proteina i/ili nivo HNE-adukata iznad 1 µg po µg ukupnih proteina nakon in vitro lečenja jedinjenjem formule (I) ili njegovom farmaceutski prihvatljivom solju.
[0059] Ti pojmovi "ne proizvodi prekomerno", "bez prekomerne proizvodnje", kako se ovde upotrebljavaju, opisuju situaciju, u kojoj kod bolesne ćelije ili tkiva, jedinjenje se ne proizvodi prekomerno u poređenju sa odgovarajućom kontrolnom ćelijom ili tkivom koje je imenovano kao kontrolna vrednost. Odnosi se na proizvodnju H2O2u ćelijama kancera koja nije viša od tj. niža od ili jednaka proizvodnji H2O2u odgovarajućoj kontrolnoj ćeliji ili tkivu koje je imenovano kao kontrolna vrednost.
[0060] Određenije, ovaj pronalazak se samim tim odnosi na kombinaciju za upotrebu prema ovom pronalasku ili na proizvode za upotrebu prema ovom pronalasku, pri čemu se pomenuti subjekat identifikuje merenjem nivoa H2O2u ćelijama kancera pomenutog subjekta.
[0061] Nivo H2O2može da bude, na primer, izmeren bilo kojim postupkom poznatim stručnjaku iz oblasti, kao što je, na primer, određivanjem nivoa relativnog intenziteta fluorescencije, koji može da se uradi zahvaljujući kompletu za detekciju ukupnog ROS/superoksida (Enzo life science), određenije kako je izmereno na Appliskan čitaču mikroploča za merenje fluorescencije (Thermo Scientific) (Ex/ Em= 488/520 nm i Ex/ Em= 550/610 nm).
[0062] Određenije, ovaj pronalazak se samim tim odnosi na kombinaciju za upotrebu prema ovom pronalasku ili na proizvode za upotrebu prema ovom pronalasku, u kojoj se nivo H2O2određuje kvantifikovanjem nivoa intenziteta fluorescencije.
[0063] Još određenije, odnosi se na kombinaciju za upotrebu prema ovom pronalasku ili na proizvode za upotrebu prema ovom pronalasku, pri čemu pomenuti nivo H2O2nije viši od vrednosti relativnog intenziteta fluorescencije između 2000 i 400000, na primer relativnog intenziteta fluorescencije između 10 000 i 100000 ili relativnog intenziteta fluorescencije od 15000 i 100000, i još određenije nivo H2O2nije viši od relativnog intenziteta fluorescencije od 20000, čak još određenije nije viši od relativnog intenziteta fluorescencije od 21598.
[0064] Stručnjak iz oblasti će brzo shvatiti da bilo koji drugi parametar pogodan za određivanje nivoa H2O2ćelija može da se koristi u vezi sa ovim pronalaskom.
[0065] Shodno tome, bilo koji drugi postupci poznati stručnjaku iz oblasti za detektovanje nivoa H2O2mogu da se koriste bez odstupanja od obima ovog pronalaska.
[0066] Određenije, ovaj pronalazak se samim tim odnosi na kombinaciju za upotrebu prema ovom pronalasku ili na proizvode za upotrebu prema ovom pronalasku, u kojoj se nivo H2O2određuje kvantifikovanjem nivoa intenziteta fluorescencije zahvaljujući kompletu za detekciju ukupnog ROS/superoksida (Enzo life science), još određenije kako je izmereno na Appliskan čitaču mikroploča za merenje fluorescencije (Thermo Scientific) (Ex/ Em= 488/520 nm i Ex/ Em= 550/610 nm).
[0067] Ukoliko postupak koji se koristi u delu sa eksperimentima predstavlja određivanje nivoa H2O2srednjim intenzitetom fluorescencije, ponovo se navodi da ovaj postupak nije ekskluzivan i da nivo H2O2može biti određen drugim postupkom koji je dostupan stručnjaku iz oblasti.
[0068] Nivo GSH se određuje bilo kojim postupkom koji je dostupan stručnjaku. Na primer, nivo GSH se određuje luminiscencijom, na primer pomoću kompleta Promega GSH-Glo (Promega).
[0069] Stručnjak će brzo shvatiti da bilo koji drugi parametar pogodan za određivanje nivoa GSH ćelija može da se koristi u vezi sa ovim pronalaskom.
[0070] Shodno tome, bilo koji drugi postupci poznati stručnjaku za detektovanje nivoa GSH mogu da se koriste bez odstupanja od obima ovog pronalaska.
[0071] Određenije, ovaj pronalazak se samim tim odnosi na jedinjenje za upotrebu prema ovom pronalasku, pri čemu se pomenuti nivo GSH određuje luminiscencijom, još određenije kompletom Promega GSH-Glo (Promega).
[0072] Nivo MDA-adukata se određuje bilo kojim postupkom koji je dostupan stručnjaku iz oblasti. Na primer, nivo MDA-adukata se određuje imunološkim praćenjem, na primer pomoću kompleta za kompetetivni ELISA postupak za detekciju MDA-adukta OxiSelect™ (CELL BIOLABS).
[0073] Stručnjak će brzo shvatiti da bilo koji drugi parametar pogodan za određivanje nivoa MDA-adukata ćelija može da se koristi u vezi sa ovim pronalaskom.
[0074] Shodno tome, bilo koji drugi postupci poznati stručnjaku iz oblasti za detektovanje nivoa MDA-adukata mogu da se koriste bez odstupanja od obima ovog pronalaska.
[0075] U jednom načinu ostvarivanja, nivo MDA-adukata je samim tim izmeren nakon in vitro lečenja jedinjenjem formule (I) prema ovom pronalasku ili njegovom farmaceutski prihvatljivom solju.
[0076] Nivo HNE-adukata se određuje bilo kojim postupkom koji je dostupan stručnjaku. Na primer, nivo HNE-adukata se određuje imunološkim praćenjem, na primer pomoću kompleta za kompetetivni ELISA postupak za detekciju HNE-adukta OxiSelect™ (CELL BIOLABS).
[0077] Stručnjak će brzo shvatiti da bilo koji drugi parametar pogodan za određivanje nivoa HNE-adukata ćelija može da se koristi u vezi sa ovim pronalaskom.
[0078] Shodno tome, bilo koji drugi postupci poznati stručnjaku iz oblasti za detektovanje nivoa HNE-adukata mogu da se koriste bez odstupanja od obima ovog pronalaska.
[0079] U jednom načinu ostvarivanja, nivo HNE-adukata je samim tim meren nakon in vitro lečenja jedinjenjem formule (I) prema ovom pronalasku ili njegovom farmaceutski prihvatljivom solju.
[0080] Kako se ovde upotrebljava, pojam "uzorak" označava supstancu biološkog porekla. Primeri bioloških uzoraka uključuju, ali bez ograničenja na uzorke telesne tečnosti i biopsiju. Telesne tečnosti uključuju krv, urin, pljuvačku ili bilo koju drugu telesnu tečnost ili njen derivat. Kako se ovde upotrebljava "krv" uključuje celu krv, plazmu, serum, cirkulišuće epitelijalne ćelije, konstituente, ili bilo koje njihove derivate. Biološki uzorak prema ovom pronalasku može da se dobije od subjekta bilo kojim odgovarajućim sredstvima uzorkovanja poznatim stručnjaku iz oblasti.
[0081] Za određivanje nivoa H2O2, nivoa GSH i/ili nivoa MDA-adukata i/ili HNE adukata u ćelijama kancera, uzorak je određenije biopsija tumora, npr. tumora leukemije, tumora limfoma, tumora krvi, tumora dojke (određenije TNBC), tumora pluća (određenije EGFR mutiranog), tumora melanoma, tumora debelog creva, tumora pankreasa, tumora jajnika, tumora osteosarkoma, tumora mozga, tumora bešike i tumora želuca.
[0082] Vezano za poređenje nivoa H2O2, poželjno kontrolna vrednost se meri u uzorku istog porekla tkiva ćelija kancera ili uzorka kancera, i poželjnije u uzorku istog porekla tkiva kao uzorak ćelija kancera ili uzorak kancera istog subjekta.
[0083] Poželjno,"kontrolna vrednost" odgovara normalnom nivou H2O2.
[0084] Kako je ovde predviđeno"normalan nivo" H2O2znači da je nivo H2O2u uzorku unutar normativnih graničnih vrednosti za H2O2. Normativ zavisi od vrste uzorka i od postupka koji se koristi za merenje nivoa H2O2u uzorku. Određenije, referentna vrednost H2O2može samim tim da odgovara odsustvu, ili bazalnom nivou H2O2u normalnim ćelijama, poželjno istog tkiva, a poželjnije istog tkiva istog subjekta ili vrednosti H2O2u ćelijama kancera inkubiranim sa NAC poželjno istog tkiva, i poželjnije istog tkiva istog subjekta.
[0085] NAC je aktivni čistač hidroksi radikala (konstanta brzine: 1,36X10<10>M<-1>,s<-1>) ali koji reaguje polako sa vodonikperoksidom (konstanta brzine:0.38XM<-1>, s<-1>) i ne prikazuje reakciju sa anjonom superoksida (Aruoma et al ;Free Radic Biol Med , (1989) The antioxidant activity of N-acetyl cysteine: its reaction with hydrogen peroxide, hydroxy radical, superoxide anion, and hypochlorous acid:, 6, 593-597).
[0086] Smatra se da je nivo statistički niži ili jednak ukoliko je nivo H2O2u uzorku kancera subjekta snižen ispod normalnog nivoa H2O2ili je jednak normalnom nivou H2O2. Određenije, smatra se da je nivo H2O2statistički niži ukoliko je nivo H2O2u uzorku kancera pacijenta snižen redom najmanje 5 ili 10 ili 15 ili 20 ili 25 ili 30 ili 35 ili 40 ili 45 ili 50 ili 60 ili 70 ili 80 ili 90 ili 100 ili 200 ili 300 ili 400 ili 500 ili 600% u poređenju sa kontrolnom vrednošću H2O2nivoa.
[0087] Na isti načni, smatra se da nivo nije prekomerno proizveden ako je nivo H2O2u uzorku kancera subjekta jednak normalnom nivou H2O2ili sniženom ispod normalnog nivoa H2O2, još određenije sniženom redom najmanje 5 ili 10 ili 15 ili 20 ili 25 ili 30 ili 35 ili 40 ili 50 ili 60 ili 70 ili 80 ili 90 ili 100 ili 200 ili 300 ili 400 ili 500 ili 600% u poređenju sa kontrolnom vrednošću nivoa H2O2.
[0088] Smatra se da je nivo statistički niži ili jednak ako je nivo H2O2u uzorku kancera subjekta jednak nivou H2O2u ćelijama kancera inkubiranim sa NAC ili sniženim do ispod nivoa H2O2u ćelijama kancera inkubiranim sa NAC. Određenije, smatra se da je nivo H2O2statistički niži ukoliko je nivo H2O2u uzorku kancera pacijenta snižen redom najmanje 5 ili 10 ili 15 ili 20 ili 25 ili 30 ili 35 ili 40 ili 50 ili 60 ili 70 ili 80 ili 90 ili 100 ili 200 ili 300 ili 400 ili 500 ili 600% u odnosu na vrednost nivoa H2O2uzorka kancera inkubiranog sa NAC, poželjno istog tkiva, i poželjnije istog tkiva of the same subjekat.
[0089] Na isti načni, smatra se da nivo nije prekomerno proizveden ukoliko je nivo H2O2u uzorku kancera subjekta jednak normalnom nivou H2O2ili je snižen ispod nivoa H2O2u ćelijama kancera inubiranim sa NAC, još određenije snižen redom najmanje 5 ili 10 ili 15 ili 20 ili 25 ili 30 ili 35 ili 40 ili 45 ili 50 ili 60 ili 70 ili 80 ili 90 ili 100 ili 200 ili 300 ili 400 ili 500 ili 600% u odnosu na kontrolnu vrednost nivoa H2O2.
[0090] Kontrolna vrednost(i) može biti određena kao pojedinačna vrednost ili opseg vrednosti koji se određuje na osnovu nivoa H2O2izmerenog u populaciji kontrolnih ćelija tj. normalnih ćelija, određenije u populaciji normalnih ćelija istog porekla tkiva kao ćelije kancera, i još određenije od istog subjekta, ili tj. ćelija kancera inkubiranih sa NAC, određenije u populaciji ćelija kancera inkubiranih sa NAC, istog porekla tkiva, i još određenije od istog subjekta.
[0091] Kontrolna vrednost tamo može da predstavlja prethodno određenu vrednost ili vrednost koja se određuje zajedno sa vrednošću mere.
[0092] Obično, analizirana populacija može biti podeljena na kvantile na osnovu izmerenog nivoa H2O2. Kontrolna vrednost može biti definisana kao prosečna, ili drugi tertil, ili drugi ili treći kvartil, ili treći ili četvrti kvantil itd.
[0093] Kontrolna vrednost H2O2može da varira u zavisnosti od postupka koji se koristi za merenje.
[0094] U jednom načinu ostvarivanja, kada je kancer koji se leči leukemija, referentna vrednost se određuje upotrebom nivoa H2O2u HL60 ćelijama. HL60 ćelijska linija predstavlja utvrđenu ćelijsku liniju humane promijelocitične leukemije koja je stručnjaku iz oblasti dobro poznata.
[0095] Određenije, u pomenutom načinu ostvarivanja, smatra se da je nivo H2O2statistički jednak ili niži od ili se prekomerno ne proizvodi ako "y" nije više od 2x/3, pri čemu je "x" nivo H2O2u ćelijama HL60, a "y" je nivo H2O2u uzorku kancera subjekta.
[0096] Kontrolna vrednost(i) može biti određena kao pojedinačna vrednost ili opseg vrednosti koja se određuje na osnovu nivoa H2O2izmerenog u populaciji kontrolnih ćelija tj. HL60 ćelija.
[0097] Obično, analizirana populacija može da bude podeljena na kvantile na osnovu izmerenog nivoa H2O2. Kontrolna vrednost bi mogla biti definisana kao prosečna, ili druga tertila, ili druga ili treća kvartila, ili treća ili četvrta kvartila itd. Kontrolna vrednost H2O2može da varira u zavisnosti od postupka koji se koristi za merenje.
[0098] Isti postupak poređenja kao onaj koji je opisan za HL60 ćelije kada je kancer koji se leči leukemija se odnosi na vrste kancera pomenute u tabeli 2 u nastavku sa odgovarajućim ćelijskim linijama kao referentnim vrednostima.
Tabela 2
[0099] Ovaj pronalazak se dalje odnosi na postupak lečenja kancera kod subjekta, određenije pri čemu ćelije kancera pomenutog subjekta ne proizvode prekomerno H2O2u odnosu na kontrolnu vrednost, i određenije ne proizvode prekomerno H2O2u odnosu na kontrolnu vrednost i imaju nivo GSH ispod 0,5 nmol za 25000 ćelija, pri čemu pomenuti postupak obuhvata davanje terapijski efikasne količine kombinacije koja obuhvata jedinjenje formule (I) ili njegovu farmaceutski prihvatljiva so, određenije S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioat ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i još određenije S-metil estar fumarat 4-(dimetilamino)-4-metil-2-pentintiokiseline, i jedinjenje koje može da poveća nivo H2O2u ćelijama kancera subjekta.
[0100] U jednom načinu ostvarivanja, pomenute ćelije kancera pomenutog subjekta takođe imaju nivo MDA-adukata iznad 75 ng po µg ukupnih proteina i/ili nivo HNE-adukata iznad 1 µg po µg ukupnih proteina, nakon in vitro lečenja jedinjenjem formule (I) ili njegovom farmaceutski prihvatljivom solju.
[0101] U jednom načinu ostvarivanja, ovaj pronalazak se takođe odnosi na farmaceutsku kompoziciju koja obuhvata jedinjenje formule (I) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, određenije S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioat ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i još određenije S-metil estar fumarat 4-(dimetilamino)-4-metil-2-pentintiokiseline, i jedinjenje koje može da poveća nivo H2O2u ćelijama kancera subjekta.
[0102] U jednom načinu ostvarivanja, ovaj pronalazak se takođe odnosi na postupak za izbor subjekta koji ima kancer i koji će najverovatnije imati koristi od lečenja jedinjenjem formule (I) ili njegovom farmaceutski prihvatljivom solju, određenije S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioatom, ili njegovom farmaceutski prihvatljivom solju, pri čemu pomenuti postupak obuhvata:
a. merenje nivoa H2O2u uzorku ćelija kancera pomenutog subjekta;
b. poređenje dobijenog nivoa iz faze a. sa kontrolnom vrednošću; i
c. merenje nivoa GSH u uzorku ćelija kancera pomenutog subjekta;
pri čemu ako:
- nivo H2O2uzorka ćelija kancera pomenutog subjekta nije viši od kontrolne vrednosti, i
- nivo GSH pomenutog uzorka ćelija kancera pomenutog subjekta je ispod 0,5 nmol za 25000 ćelija,
pomenuti postupak dalje obuhvata:
d. lečenje pomenutog subjekta jedinjenjem koji može da izazove nivo H2O2viši od kontrolne vrednosti;
e. proveravanje da li je dobijeni nivo H2O2pomenutog subjekta viši od kontrolne vrednosti; i f. lečenje pomenutog subjekta jedinjenjem formule (I) ili njegovom farmaceutski prihvatljivom solju, određenije S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioatom, ili njegovom farmaceutski prihvatljivom solju.
[0103] U jednom načinu ostvarivanja, pomenuti postupak obuhvata:
a. merenje nivoa H2O2u uzorku ćelija kancera pomenutog subjekta;
b. poređenje dobijenog nivoa iz faze a. sa kontrolnom vrednošću;
c. merenje nivoa GSH u uzorku ćelija kancera pomenutog subjekta; i/ili
c'. merenje MDA-adukata i/ili nivoa HNE-adukata nakon in vitro lečenja jedinjenjem formule (I) prema ovom pronalasku ili njegovom farmaceutski prihvatljivom solju u uzorku ćelija kancera pomenutog subjekta;
pri čemu ako:
- nivo H2O2uzorka ćelija kancera pomenutog subjekta nije viši od kontrolne vrednosti,
- nivo GSH pomenutog uzorka ćelija kancera pomenutog subjekta je ispod 0,5 nmol za 25000 ćelija, i/ili
- nivo MDA-adukata je iznad 75 ng po µg ukupnih proteina i/ili nivo HNE-adukata je iznad 1µg per µg proteina,
pomenuti postupak dalje obuhvata:
d. lečenje pomenutog subjekta jedinjenjem koji može da izazove viši nivo H2O2od kontrolne vrednosti;
e. proveravanje da li je dobijeni nivo H2O2pomenutog subjekta viši od kontrolne vrednosti; i f. lečenje pomenutog subjekta jedinjenjem formule (I) ili njegovom farmaceutski prihvatljivom solju, određenije S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioatom, ili njegovom farmaceutski prihvatljivom solju.
[0104] Proveravanje da li je dobijeni nivo H2O2pomenutog subjekta viši od kontrolne vrednosti može da se izvede prethodno navedenim postupcima.
[0105] Određenije, jedinjenja kombinacije ili proizvodi prema ovom pronalasku se daju odvojeno, sekvencijalno ili istovremeno.
[0106] Još određenije, jedinjenja kombinacije ili proizvodi prema ovom pronalasku se daju sekvencijalno, pri čemu to jedinjenje može da poveća nivo H2O2u ćelijama kancera subjekta, pri čemu se daje pre davanja jedinjenja formule (I) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, određenije S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioata, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, i još određenije S-metil estar fumarata 4-(dimetilamino)-4-metil-2-pentintiokiseline.
[0107] U jednom načinu ostvarivanja, kombinacija za upotrebu prema ovom pronalasku ili proizvodi za upotrebu prema ovom pronalasku se sastoji od jedinjenja formule (I) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, određenije S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioat, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, i još određenije S-metil estar fumarata 4-(dimetilamino)-4-metil-2-pentintiokiseline, i jedinjenje koje može da poveća nivo H2O2u ćelijama kancera subjekta.
[0108] Jedinjenja kombinacija, proizvodi i postupci ovog pronalaska mogu biti pripremljeni na različite sintetičke načine. Reagensi i sirovine su komercijalno dostupni, ili ih stručnjak brzo sintetiše dobro poznatim tehnikama.
[0109] Identifikacija subjekata kojima je potrebno lečenje ovde opisanih bolesti i stanja je izvedena kako je prethodno pomenuto i stručnjak može i ima znanje da je izvede. Kliničar brzo može da identifikuje, gore pomenutim tehnikama, one subjekte kojima je potrebno takvo lečenje.
[0110] Terapijski efikasnu količinu brzo može da odredi izabrani dijagnostičar, kao stručnjak iz oblasti, upotrebom konvencionalnih tehnika i praćenjem rezultata dobijenih u odgovarajućim okolnostima. Prilikom određivanja terapijski efikasne količine, više faktora se uzima u razmatranje od strane izabranog dijagnostičara, uključujući, ali bez ograničenja na: vrstu subjekta; njegovu masu, uzrast i opšte stanje; konkretnu bolest; stepen zahvaćenosti ili ozbiljnost bolesti; odgovor pojedinačnog subjekta; određeno jedinjenje koje se daje; režim davanja; bioraspoloživost koja je karakteristična za preparat koji se daje; izabrani dozni režim; upotrebu istovremenog leka; i druge relevantne okolnosti.
[0111] Kako se ovde upotrebljava,"terapijski efikasna količina" se odnosi na količinu koja je efikasna kod smanjenja, eliminisanja, lečenja ili kontrolisanja simptoma ovde opisanih bolesti i stanja. Pojam "kontrolisanje" je predviđeno da se odnosi na sve postupke pri čemu se mogu javiti usporavanje, prekidanje, zadržavanje, ili zaustavljanje napredovanja ovde opisanih bolesti i stanja, ali ne ukazuje nužno na ukupnu eliminaciju svih simptoma bolesti i stanja, i predviđeno je da obuhvati profilaktičko lečenje i hroničnu upotrebu.
[0112] Količina jedinjenja kombinacije, proizvodi ili postupci prema ovom pronalasku, koji su potrebni da bi se postigao željeni biološki efekat, će varirati u zavisnosti od brojnih faktora, uključujući doziranje leka koji se daje, hemijske karakteristike (npr. hidrofobnost) jedinjenja koje se koristi, potentnost jedinjenja, vrstu bolesti, stanje bolesti kod pacijenta, i način davanja.
[0113] Ovde obezbeđena jedinjenja mogu biti formulisana u farmaceutske kompozicije, kako je prethodno pomenuto, mešavinom sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih ekscipijenasa.
[0114] Kako se ovde upotrebljava, "farmaceutski prihvatljiv ekscipijens" se odnosi na molekulske entitete i kompozicije koje ne stvaraju neželjene, alergijske ili druge neželjene reakcije kada se daju sisaru, posebno čoveku, prema potrebi. Farmaceutski prihvatljiv ekscipijens se odnosi na netoksičnu čvrstu materiju, polučvrstu materiju ili tečni punilac, razblaživač, materijal za kapsuliranje ili pomoćnu formulaciju bilo koje vrste.
[0115] Takve kompozicije mogu biti pripremljene za oralnu davanje, određenije u obliku tableta ili kapsula, određenije orodisperzibilnih (lyoc) tableta; ili parenteralno davanje, određenije u obliku tečnih rastvora, suspenzija ili emulzija.
[0116] Može biti pripremljena bilo kojim postupcima dobro poznatim u farmaciji, na primer, kako je opisano u Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 20th ed.; Gennaro, A. R., Ed.; Lippincott Williams & Wilkins: Philadelphia, PA, 2000. Farmaceutski kompatibilni agensi za vezivanje i/ili adjuvantski materijali mogu biti uključeni kao deo kompozicije. Oralne kompozicije će generalno uključivati inertni nosač razblaživača ili jestivi nosač. Mogu da se daju u jediničnim doznim oblicima, pri čemu pojam "jedinična doza" označava pojedinačnu dozu koja može da se daje pacijentu, i koja je laka za rukovanje i pakovanje, pri čemu ostaje fizički i hemijski stabilna jedinična doza koja obuhvata ili samo aktivno jedinjenje, ili farmaceutski prihvatljivu kompoziciju, kao što je opisano ovde u nastavku.
[0117] Tablete, pilule, praškovi, kapsule, pastile i njima slične mogu da sadrže jedan ili više od bilo kojih sledećih sastojaka, ili jedinjenja slične prirode: sredstvo za vezivanje kao što je mikrokristalna celuloza, ili tragakant guma; razblaživač kao što je skrob ili laktoza; sredstvo za raspadanje kao što su derivati skroba ili celuloze; lubrikans kao što je magnezijumstearat; sredstvo za klizanje kao što je koloidalni silicijumdioksid; zaslađivač kao što je saharoza ili saharin; ili aroma kao što je pepermint, ili metilsalicilat. Kapsule mogu da budu u obliku tvrdih kapsula ili mekih kapsula, koje se generalno prave od mešavina želatina opciono izmešane su sa omekšivačima, kao i skrobne kapsule. Pored toga, dozni jedinični oblici mogu da sadrže razne druge materijale koji modifikuju fizički oblik dozne jedinice, na primer, omotače od šećera, šelaka, ili enetičnih sredstava. Drugi oralni dotni oblici sirup ili eliksir mogu da sadrže zaslađivače, konzervanse, boje, sredstva za bojenje i arome. Pored toga, aktivna jedinjenja mogu biti inkorporirana u preparate i formulacije koje se brzo rastvaraju, sa modifikovanim otpuštanjem ili odloženim otpuštanjem, a pri čemu su formulacije sa odloženim otpuštanjem poželjno bi-modalne.
[0118] Tečni preparati za davanje uključuju sterilne vodene ili nevodene rastvore, suspenzije, i emulzije. Tečne kompozicije takođe mogu da uključuju sredstva za vezivanje, pufere, konzervanse, helatna sredstva, zaslađivače, arome i sredstva za bojenje, i njima slične. Nevodeni rastvarači uključuju alkohole, propilenglikol, polietilenglikol, akrilatne kopolimere, biljna ulja kao što su maslinovo ulje, i organske estre kao što je etiloleat. Vodeni nosači uključuju mešavine alkohola i vode, hidrogelove, puferisane podloge, i slani rastvor. Određenije, biokompatiblni, biodegradabilni laktidni polimer, laktid/glikolidni kopolimer, ili kopolimeri polioksetilen-polioksipropilena mogu biti korisni ekscipijensi kako bi se kontrolisalo otpuštanje aktivnih jedinjenja. Intravenski nosioci mogu da uključuju sredstva za nadoknadu tečnosti i hranjivih sastojaka, sredstva za nadoknadu elektrolita, kao što su ona bazirana na Ringerovoj dekstrozi, i njima slične.
[0119] Primeri načina davanja uključuju parenteralni npr. supkutani, intramuskularni, intravenski, intradermalni, kao i oralni način davanja. Uključuje određenije formulaciju u obliku tablete za oralno davanje ili u obliku praška za rastvor za injekciju za intravensko davanje.
[0120] U obimu ovog pronalaska, trebalo bi shvatiti da "kombinacija koja obuhvata jedinjenje formule (I) i jedinjenje koje može da poveća nivo H2O2u ćelijama kancera subjekta, za upotrebu" je ekvivalentna "upotrebi kombinacije koja obuhvata jedinjenje formule (I) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i jedinjenje koje može da poveća nivo H2O2u ćelijama kancera subjekta" i određenije da "kombinacija koja obuhvata jedinjenje formule (I) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i jedinjenje koje može da poveća nivo H2O2u ćelijama kancera subjekta, za upotrebu lečenju " je ekvivalentna "upotrebi kombinacije koja obuhvata jedinjenje formule (I) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli i jedinjenja koje može da poveća nivo H2O2u ćelijama kancera subjekta, za lečenje " i "upotrebi kombinacije koja obuhvata jedinjenje formule (I) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i jedinjenje koje može da poveća nivo H2O2u ćelijama kancera subjekta, za proizvodnju leka koji je predviđen za lečenje". Isto se odnosi i na proizvode za upotrebu prema ovom pronalasku.
[0121] Ovaj pronalazak će u nastavku biti ilustrovan crtežima i primerima.
Crteži
[0122]
Fig.1: H2O2/S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioat IC50korelacija: veza između IC50of S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioata u µM i endogenih nivoa dejstva H2O2u ćelijama kancera
Fig.2: H2O2/S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioat IC50korelacija: određivanje graničnog preseka
Fig.3: H2O2/S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioat IC50korelacija: ispitivanja po poreklu tkiva
Fig.4 do 6: H2O2/S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioat IC50korelacija: indukcija osetljivosti na S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioat povećavanjem H2O2dejstva (PCN=piocijanin) na tri ćelijske linije kancera : THP-1, HCC827 i Hop62
Fig.7: H2O2/S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioat IC50korelacija: sinergijsko dejstvo S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioata i lekova koji indukuju H2O2: arsentrioksid (As2O3) (ATO) 1µM i doksorubicin (doks) 200nM
Fig.8: Lečenje kombinacijom S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioata i H2O2uključujući agens, cisplatin (CPPD) ili doksorubicin (doks), u kontekstu pri čemu ćelije kancera Colo357 imaju nivo GSH veći od 5 nmol za 25000 ćelija
Fig.9: Ukupni nivo GSH u nmol na 25000 ćelija primećen kod osetljivih i otpornih ćelija
Fig.10: Kvantifikacija MDA i HNE adukata u osetljivim ćelijama S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioata (HL-60, NT2/D1) (A) i otpornim ćelijama S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioata (MSC) lečenih S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioatom 5 ili 10 µmol.L<-1>tokom 24 sata (B)
[0123] Napomena: na svim gore pomenutim crtežima: DIMATE je dat za S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioat.
Primeri
Materijal i postupci
Ćelijske linije
[0124] Panel 52 humane tumorske ćelije koje predstavljaju 10 vrsta tkiva je izabran da pokrije širok spektar različitih onkogena i prema njihovom odgovoru na različite standardne hemoterapeutike. Ćelije su dobijene od američke kolekcije uzoraka kultura (ATCC), evropske kolekcije ćelijskih kultura (ECACC) i od primarne kulture ćelija kancera dobijenih od tumora pacijenata (Research Institute of Vall d’Hebron (VHIR), Barselona, Španija; Vall d’Hebron Institute of Oncology (VHIO), Barselona, Španija; Oncotest, Frajburg, Nemačka; Oncodesign, Dižon, Francuska; Universitá Degli Studi di Palermo, Oncology and Surgical Sciences, Palermo, Italija; i Institute of Predictive and Personalized Medicine of Cancer (IMPPC), Barselona, Španija (videti tabelu 3 radi opisa panela tumorskih ćelija). Sve ćelije su kultivisane u odgovarajućim podlogama u skladu sa preporukama dobavljača.
Tabela 3
[0125] Pojačavanje osetljivosti ćelijske linije na S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioat je izvedeno pomoću izabranih ćelijskih linija zbog njihove otpornosti na S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioat. Ćelijske linije kancera pluća (HCC827, Hop62) i ćelijske linije leukemije (THP-1) su dobijene iz američke kolekcije uzoraka kultura (ATCC), evropske kolekcije ćelijskih kultura (ECACC). Ćelije su kultivisane u odgovarajućim podlogama u skladu sa preporukama dobavljača.
Ispitivanje vijabilnosti ćelija, format 96 bunarčića
[0126] Ćelije su posejane u ploče sa 96 bunarčića sa ćelijskim kulturama u koncentracijama koje su potrebne da se osigura približno 80% konfluencije u kontrolnim (netretiranim ćelijama) na kraju eksperimenta (0,5x 10<4>- 5x 10<4>ćelija/bunarčić). Osetljivost prema S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioatu je određena upotrebom različitih koncentracija leka (od 0,01 do 100 µM). Nakon 48 sati, efekat inhibicije rasta leka je analiziran pomoću rezasurin testa, prema uputstvu proizvođača. Da bi se osigurao dobar kvalitet podataka i kako bi se sveo na minimum uticaj grešaka prilikom pipetiranja, svaka određena koncentracija leka je ocenjena na osnovu srednjeg intenziteta fluorescencije od 8 odvojenih bunarčića. Odgovor na lek je kvantifikovan polovinom maksimalne inhibitorne koncentracije (IC50) za svaku određenu ćelijsku liniju, i određen je nelinearnom regresionim analizom kriva odnosa doze i odgovora. Vrednost graničnog preseka za otpornost na S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioat je statistički određena (> 2 S.D. iznad IC50geometrijske sredine). In-vitro granična vrednost za preosetljivost na lek je definisana kao < IC50geometrijska sredina.
Pojačavanje osetljivosti ćelija na S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-vnetioat povećavanjem nivoa H2O2
[0127] U različitom eksperimentu, ćelije koje pokazuju otpornost na S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioat (THP-1, HCC827, i Hop62) su izazvane H2O2induktorom. Ćelije su posejane kako je prethodno opisano sa i inkubirane sa S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioatom (od 0.01 do 100 µM) same ili sa S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioatom u kombinaciji sa H2O2induktorom pijocijaninom (40 µM). Nakon 48h inkubacije, vijabilnost ćelija je izmerena pomoću rezasurin testa kako je prethodno opisano.
[0128] Hemoterapijski agensi koji su poznati da izazivaju H2O2u ćelijama su izazvani zajedno sa S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioatom kako bi tretirali ćelije otporne na S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioat (THP-1). Ćelije su posejane kako je prethodno opisano i inkubiraju S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioat (5, 10, 15, 30 µM) sam ili sa drugim lekovima koji se koriste u hemoterapiji i koji su poznati kao H2O2induktor kao 2-metoksiestradiol (2-ME 100 µM), arsentrioksid (ATO 1 µM), daunorubicin (40nM), doksorubicin (20 nM), etopozid (500 nM), mitoksantron (50 nM), parthenolid (100 nM) i piperlongumin (2 µM). Nakon 48 sati inkubacije, vijabilnost ćelija je izmerena pomoću rezasurin testa kako je prethodno opisano.
Merenje proizvodnje H2O2
[0129] Intracelularna proizvodnja H2O2u živim ćelijama je izmerena pomoću kompleta za detekciju ukupnog ROS/superoksida (Enzo life science), u skladu sa uputstvima proizvođača. Test koristi konkretna H2O2/RNS ispitivanja koja nakon reakcije sa H2O2i RNS vrstom oksidiraju brzo do izuzetno fluorescentnih jedinjenja. Intenzitet fluorescencije je proporcionalan ukupnim nivoima H2O2/RNS u uzorku.
Eksperimentalna ispitivanja su izvedena upotrebom netretiranih ćelija, ili ćelija tretiranih S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioatom (1-5uM), nosačem HEPES, H2O2induktorom piocijaninom (PCN, 500 uM) ili inhibitorom H2O2N-acetil-L-cisteinom (NAC) [10mM]. Dan pre analize, ćelije su posejane u ploče crnog/čistog dna sa 96 bunarčića pri gustini od 2x 10<4>u podlogama za kulture u skladu sa uputstvima dobavljača, koje su snabdevene sa FBS (10 mas.%), 10 jedinica penicilina/ml i 100 mg streptomicina. Ćelije su čuvane na 37°C u vlažnoj atmosferi od 95% vazduh: 5% CO2tokom noći. Na dan analize, podloge za ćelije su zamenjene sa 100 µL podloga koja ne sadrže fenol koje su dopunjene na prethodno opisan način, bez bilo kakve obrade,sa S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioatom tokom 6 sati, nosačem HEPES tokom 6 sati, ili različitim kontrolnim agensima PCN i NAC tokom 20 min. Nakon inkubacionog perioda, bunarčići su napunjeni sa 100 µL H2O2rastvora za detekciju, koji sadrži odgovarajući agens za obradu ili kontrole i inkubirani tokom 60 min na 37°C u mraku. Nekoliko bunarčića je ostavljeno bez ćelija radi kontrolnog merenja pozadinske fluorescencije. Ploče su očitane pomoću čitača mikroploča za merenje fluorescencije Appliskan (Thermo Scientific) (ex= 560 nm, Em=600). Podaci su izraženi kao promena u arbitrarnim jedinicama fluorescencije proizvedenim od jednake količine ćelija i normalizovanim do ukupnog proteinskog unosa.
Statistička analiza
[0130] Vrednosti su izražene kao srednja vrednost ± SD ili učestalosti i proporcije. Razlike između grupa su određene t testom neuparenih uzoraka, hi-kvadratnim testom, Fišerovim testom ili ANOVA-om, tamo gde to odgovara. P <0.05 se smatra statistički značajnim. Analiza je izvedena pomoću GraphPad prism verzija 5.0 (GraphPad software, San Diego Kalifornija SAD) i JMP softvera verzija 12.01 (SAS Institute Inc. Severena Karolina SAD).
Merenje GSH proizvodnje
[0131] Ćelije su posejane u ploču sa crnim zidovima sa 96 bunarčića (5 × 10<4>ćelija/mL) i inkubirane tokom noći zbog vezivanja. Ćelije su lečene ili nosačem, DMSO, BCNU 100µM, S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioatom 20µM, tokom 24 sata. Ukupan glutation je izmeren u skladu sa uputstvima koja idu uz komplet (GSH-Glo™, Promega) i rezultati su dobijeni za 25000 ćelija.
Kvantitativno određivanje HNE-proteinskih i MDA/proteinskih adukata ELISA-om
[0132] Stvaranje HNE-adukata i MDA-adukata je kvantifikovano Oxiselect kompletom za Elisa postupak za detekciju HNE adukta (Cell Biolabs, San Diego, CA) i Oxiselect kompletom za ELISA postupak za detekciju MDA adukta (Cell Biolabs), redom. Ukratko, nakon tretiranja S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioatom tokom 24 sata, ćelije su lizirane sonikacijom prilikom snižavanja SDS pufera uzorka. Homogenati su razblaženi do 10 µg protein/mL i apsorbovani u pločama za vezivanje proteina sa 96 bunarčića inkubacijom na 37°C tokom najmanje 2 sata. Bunarčići su oprani dva puta sa PBS i inkubirani tokom dodatna 2 sata na sobnoj temperaturi na rotacionoj mešalici. Nakon tri pranja u PBS, 100 µL anti-HNE antitela ili anti-MDA antitela su dodata u bunarčiće i inkubirana tokom 1 sata na sobnoj temperaturi. Posle toga, sekundarno kozje anti-zečje antitelo konjugovano HRP-om (razblažen 1/1000 sa razblaživačem za ispitivanje) je dodat a inkubacija je nastavljena tokom 1 sata. Bunarčići su oprani pet puta u PBS i dodat je HRP-supstrat. Reakcija je zaustavljena kiselim rastvorom, a absorbanca očitana na čitaču mikroploča na 450nm. Nivo HNE-adukata i MDA-adukata je određen poređenjem sa standardnom krivom pripremljenom od HNE-BSA i MDA-BSA standarda koje obezbeđuje proizvođač.
Rezultati
[0133] Dobijeni rezultati su prikazani na Fig.1 do 10.
[0134] Fig.1 prikazuje da je korelacija primećena između dejstva H2O2i IC50(praćena kompletom za detekciju ukupnog ROS/superoksida kako je prethodno pomenuto).
[0135] Pored toga, Fig.2 prikazuje da je deljenjem ćelija na dva dela graničnim presekom (relativni intenzitet fluorescencije od 20000), otkrivena razlika osetljivosti S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioata visokog H2O2i niskog H2O2(Pvrednost < 0,05).
[0136] Na Fig.3, korelacija između dejstva H2O2i IC50je ilustrovana prema poreklu tkiva.
[0137] Dalje, Fig.4 do 6 i tabela 4 u nastavku pokazuju indukciju osetljivosti na S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioat upotrebom pijocijanina u kontekstu pri čemu ćelije kancera imaju nivo GSH ispod 5 nmol za 25000 ćelija.
Tabela 4:
[0138] Indukcija osetljivosti na S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioat je pokazana pomoću prethodnog tretiranja pijocijaninom 40 µM. Izloženost ćelija pijocijaninu uzrokuje dvostruko povećanje nivoa H2O2bez uticaja na vijabilnost ćelija.
[0139] Fig.7 prikazuje sinergijski efekat sa S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioatom i jedinjenjem koje može da poveća nivo H2O2u ćelijama kancera čak i u ćelijama otpornim na ta jedinjenja odvojeno.
[0140] Dalje, sinergijski rezultati su takođe prikazani sa kombinovanim lečenjem S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioatom i hemoterapijskim agensima poznatim da indukuju H2O2na ćelijama koje su otporne na S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioat THP-1, kako je pokazano u tabeli 5 u nastavku.
Tabela 5:
[0141] Fig.8 se odnosi na lečenje kombinacijom pomoću S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioata i H2O2uključujući agens, cisplatin (CPPD) ili doksorubicin (doks), u kontekstu kada ćelije kancera Colo357 imaju nivo GSH viši od 5 nmol za 25000 ćelija (nasuprot onoga što je pre pokazano).
[0142] Na Fig.8(A) je prikazano da lečenje pomoću CPPD na 20µmol.L-1 i doksa na 25µmol.L-1 povećava značajno nivo H2O2u Colo357 ćelijskoj liniji (redom 200% i 10000%) ali da, kako je prikazano na Fig.8 (B) nema efekta na vijabilnost.
[0143] Fig.9 i 10 ilustruju kako su određene granične vrednosti vezano za GSH, MDA-adukte i HNE-adukte.
[0144] Na Fig.9, ukupni nivo GSH u nmol na 25000 ćelija je primećen kod senzitivnih i otpornih ćelija. Značajna razlika (*, p-vrednost<0.001) je primećena. Upotrebom granične vrednosti od 0,5 nmol na 25000 ćelija radi razlikovanja ćelija visokog GSH od ćelija niskog GSH, 100% senzitivnih ćelija su GSH niske a 100% otpornih ćelija su GSH visoke. ;[0145] Fig.10 prikazuje kvantifikaciju MDA i HNE adukta u osetljivim ćelijama S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioata (HL-60, NT2/D1) (A) i otpornim ćelijama (MSC) S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioata tretiranih S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioatom 5 ili 10 µmol.L<-1>tokom 24 sata (B). Za MDA-adukte, u osetljivim ćelijama S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioata, granična vrednost je više od 100 ng po µg ukupnih proteina, a u otpornim ćelijama, granična *

Claims (13)

  1. vrednost je ispod ove granične vrednosti. Za HNE-adukte, ista primedba može da se navede vezano za graničnu vrednost od 1 µg po µg ukupnih proteina. Patentni zahtevi 1. Kombinacija koja obuhvata jedinjenje formule (I):
    u kojoj X1 i X2, identične ili različite, izabrane iz grupe koju čine C1-C7alkilna grupa, fenil, benzil ili X1 i X2 zajedno sa atomom azota za koji su vezane, obrazuju heterocikl, određenije piperidin ili morfolin; ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so; i jedinjenje koje može da poveća nivo H2O2u ćelijama kancera subjekta, za upotrebu u lečenju kancera kod subjekta, pri čemu ćelije kancera pomenutog subjekta: - imaju nivo H2O2niži ili jednak nivou H2O2u normalnim ćelijama koje potiču od istog tkiva istog subjekta kao ćelije kancera, i - imaju nivo GSH ispod 0,5 nmol za 25000 ćelija.
  2. 2. Kombinacija za upotrebu prema zahtevu 1, pri čemu se pomenuti subjekat identifikuje merenjem nivoa H2O2i nivoa GSH u ćelijama kancera pomenutog subjekta.
  3. 3. Kombinacija za upotrebu prema zahtevu 2, u kojoj se nivo H2O2određuje kvantifikovanjem nivoa intenziteta fluorescencije.
  4. 4. Kombinacija za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1 do 3, pri čemu ćelije kancera pomenutog subjekta imaju takođe nivo MDA-adukata iznad 75 ng po µg ukupnih proteina i/ili nivo HNE-adukata iznad 1 µg po µg ukupnih proteina, nakon in vitro lečenja jedinjenjem formule (I) ili njegovom farmaceutski prihvatljivom solju.
  5. 5. Postupak za izbor subjekta koji ima kancer i koji će najverovatnije imati koristi od lečenja kombinacijom koja obuhvata jedinjenje formule (I):
    u kojoj X1 i X2, identične ili različite, izabrane iz grupe koju čine C1-C7alkilna grupa, fenil, benzil ili X1 i X2 zajedno sa atomom azota za koji su vezane obrazuju heterocikl, određenije piperidin ili morfolin; ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so; i jedinjenje koje može da poveća nivo H2O2u ćelijama kancera subjekta, pri čemu pomenuti postupak obuhvata: a. merenje nivoa H2O2u biopsiji ćelija kancera pomenutog subjekta; b. poređenje dobijenog nivoa iz faze a. sa nivoom H2O2u normalnim ćelijama koje potiču od istog tkiva istog subjekta kao ćelije kancera; i c. merenje nivoa GSH u biopsiji ćelija kancera pomenutog subjekta; pri čemu: - nivo H2O2pomenute biopsije ćelija kancera pomenutog subjekta ne viši od nivoa H2O2u normalnim ćelijama koje potiču od istog tkiva istog subjekta kao ćelije kancera, i - nivo GSH pomenute biopsije ćelija kancera pomenutog subjekta ispod 5 nmol za 25000 ćelija, ukazuje da će subjekat verovatno imati koristi od lečenja kombinacijom koja obuhvata jedinjenje formule (I), ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i jedinjenje koje može da poveća nivo H2O2u ćelijama kancera subjekta.
  6. 6. Postupak prema zahtevu 5, pri čemu pomenuti postupak obuhvata: a. merenje nivoa H2O2u biopsiji ćelija kancera pomenutog subjekta; b. poređenje dobijenog nivoa iz faze a. sa nivoom H2O2u normalnim ćelijama koje potiču od istog tkiva istog subjekta kao ćelije kancera; c. merenje nivoa GSH u biopsiji ćelija kancera pomenutog subjekta; i d. merenje MDA-adukata i/ili nivoa HNE-adukata nakon in vitro lečenja jedinjenjem formule (I) u biopsiji ćelija kancera pomenutog subjekta; pri čemu: - nivo H2O2pomenute biopsije ćelija kancera pomenutog subjekta ne viši od nivoa H2O2u normalnim ćelijama koje potiču od istog tkiva istog subjekta kao ćelije kancera, - nivo GSH pomenute biopsije ćelija kancera pomenutog subjekta ispod 5 nmol za 25000 ćelija, i - nivo MDA-adukata iznad 75 ng po µg ukupnih proteina i/ili nivo HNE-adukata iznad 1µg po µg proteina, ukazuje da će subjekat verovatno imati koristi od lečenja kombinacijom koja obuhvata jedinjenje formule (I), njegovu farmaceutski prihvatljivu so i jedinjenje koje može da poveća nivo H2O2u ćelijama kancera subjekta.
  7. 7. Postupak prema zahtevu 5 ili 6, pri čemu nivo H2O2ne viši od relativnog intenziteta fluorescencije od 20000, ukazuje da će subjekat verovatno imati koristi od lečenja kombinacijom koja obuhvata jedinjenje formule (I), ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i jedinjenje koje može da poveća nivo H2O2u ćelijama kancera subjekta.
  8. 8. Kombinacija za upotrebu prema bilo kom od zahteva 2 do 4 ili postupak prema bilo kom od zahteva 5 do 7, pri čemu se nivo GSH određuje luminiscencijom.
  9. 9. Kombinacija za upotrebu prema zahtevu 4 ili postupak prema bilo kom od zahteva 5 do 7, pri čemu se nivo MDA-adukata i/ili nivo HNE MDA-adukata određuje imunološkim praćenjem.
  10. 10. Kombinacija za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1, 2, 3, 4, 8 ili 9 ili postupak prema bilo kom od zahteva 7 do 9, pri čemu je kancer odabran iz grupe koju čine leukemija, limfomi, kancer krvi, kancer dojke (određenije TNBC), kancer pluća (određenije EGFR mutirani), melanomi, kancer debelog creva, kancer pankreasa, kancer jajnika, osteosarkom, kancer mozga, kancer bešike i kancer želuca.
  11. 11. Kombinacija za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1, 2, 3, 4, 8, 9 ili 10 ili postupak prema bilo kom od zahteva 5 do 10, pri čemu u pomenutom jedinjenju formule (I), X1 i X2, identične ili različite, izabrane iz grupe koju čine metil, fenil, benzil, od kojih najmanje jedna od X1 ili X2 predstavlja metil, ili X1 i X2 zajedno sa atomom azota za koji su vezane obrazuju piperidin ili morfolin.
  12. 12. Kombinacija za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1, 2, 3, 4 i 8 do 11 ili postupak prema bilo kom od zahteva 5 do 11, pri čemu jedinjenje formule (I) predstavlja S-metil 4-(dimetilamino)-4-metilpent-2-inetioat ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so.
  13. 13. Kombinacija za upotrebu prema zahtevu 12 ili postupak prema zahtevu 12, pri čemu pomenuta farmaceutski prihvatljiva so predstavlja S-metil estar fumarat 4-(dimetilamino)-4-metil-2-pentintiokiseline.
RS20210309A 2015-10-15 2016-10-14 Kombinacija koja obuhvata jedinjenje aminotiolestra ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i jedinjenje koje može da poveća nivo h2o2 u ćelijama kancera subjekta RS61572B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP15306650 2015-10-15
EP16784442.2A EP3362094B1 (en) 2015-10-15 2016-10-14 Combination comprising an aminothiolester compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof and a compound able to increase the h2o2 level in cancer cells of a subject
PCT/EP2016/074682 WO2017064241A1 (en) 2015-10-15 2016-10-14 Combination comprising an aminothiolester compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof and a compound able to increase the h2o2 level in cancer cells of a subject

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS61572B1 true RS61572B1 (sr) 2021-04-29

Family

ID=54360386

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20210309A RS61572B1 (sr) 2015-10-15 2016-10-14 Kombinacija koja obuhvata jedinjenje aminotiolestra ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i jedinjenje koje može da poveća nivo h2o2 u ćelijama kancera subjekta

Country Status (21)

Country Link
US (1) US10406125B2 (sr)
EP (1) EP3362094B1 (sr)
JP (1) JP7062592B2 (sr)
CN (1) CN108348612A (sr)
AR (1) AR106351A1 (sr)
CA (1) CA3001201C (sr)
CY (1) CY1123916T1 (sr)
DK (1) DK3362094T3 (sr)
ES (1) ES2870508T3 (sr)
HR (1) HRP20210358T1 (sr)
HU (1) HUE054247T2 (sr)
IL (1) IL258658B (sr)
LT (1) LT3362094T (sr)
MX (1) MX377725B (sr)
PL (1) PL3362094T3 (sr)
PT (1) PT3362094T (sr)
RS (1) RS61572B1 (sr)
SI (1) SI3362094T1 (sr)
SM (1) SMT202100270T1 (sr)
WO (1) WO2017064241A1 (sr)
ZA (1) ZA201802400B (sr)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MA57224B1 (fr) * 2019-07-31 2022-10-31 Advanced Biodesign Aminothiolesters et leurs utilisations
FR3119314B1 (fr) * 2021-01-29 2025-01-10 Advanced Biodesign Nanocapsule lipidique comprenant au moins un composé aminothiolester ou un de ses dérivés pharmaceutiquement acceptable
EP4035666A1 (en) * 2021-01-29 2022-08-03 Advanced Biodesign Aminothiolester compound or derivative thereof for use as an immunomodulatory agent
WO2025229179A1 (en) * 2024-05-03 2025-11-06 Advanced Biodesign Use of aminothiolester compounds in combination with hypomethylating agents (hma) for the prevention and treatment of cancer

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2777001B1 (fr) * 1998-04-01 2000-06-09 Cird Galderma Derives de l'acide 6,8-dimercaptooctanoique substitues en 6-s et/ou en 8-s par le radical (3-methylthiopropanoyl) et compositions pharmaceutiques destinees au traitement des tumeurs cancereuses
FR2809727B1 (fr) 2000-05-31 2002-07-26 Galderma Res & Dev Nouveaux composes aminothiolesters, compositions pharmaceutiques et cosmetiques les contenant et utilisations

Also Published As

Publication number Publication date
EP3362094A1 (en) 2018-08-22
US20180303773A1 (en) 2018-10-25
WO2017064241A1 (en) 2017-04-20
AR106351A1 (es) 2018-01-03
MX2018004381A (es) 2018-05-11
HUE054247T2 (hu) 2021-08-30
SI3362094T1 (sl) 2021-04-30
BR112018007480A2 (en) 2018-10-23
DK3362094T3 (da) 2021-03-01
CY1123916T1 (el) 2022-05-27
ES2870508T3 (es) 2021-10-27
MX377725B (es) 2025-03-11
IL258658A (en) 2018-06-28
SMT202100270T1 (it) 2021-07-12
JP2018531995A (ja) 2018-11-01
ZA201802400B (en) 2020-01-29
CA3001201A1 (en) 2017-04-20
HK1251477A1 (en) 2019-02-01
HRP20210358T1 (hr) 2021-04-16
JP7062592B2 (ja) 2022-05-06
CN108348612A (zh) 2018-07-31
CA3001201C (en) 2023-07-11
LT3362094T (lt) 2021-05-10
IL258658B (en) 2021-04-29
PT3362094T (pt) 2021-04-15
US10406125B2 (en) 2019-09-10
EP3362094B1 (en) 2021-02-17
PL3362094T3 (pl) 2021-10-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Sun et al. Activation of the p62‐Keap1‐NRF2 pathway protects against ferroptosis in hepatocellular carcinoma cells
ES2863996T3 (es) Terapia de combinación para el tratamiento del cáncer
Buondonno et al. Endoplasmic reticulum-targeting doxorubicin: a new tool effective against doxorubicin-resistant osteosarcoma
Shan et al. The crosstalk between autophagy and Nrf2 signaling in cancer: from biology to clinical applications
US20230149378A1 (en) Aminothiolester compounds or pharmaceutically acceptable salts thereof, for use for the treatment of cancer
Chelsky et al. A Resveratrol analogue promotes ERKMAPK–dependent Stat3 serine and tyrosine phosphorylation alterations and antitumor effects in vitro against human tumor cells
RS61572B1 (sr) Kombinacija koja obuhvata jedinjenje aminotiolestra ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i jedinjenje koje može da poveća nivo h2o2 u ćelijama kancera subjekta
El Gaafary et al. Arglabin, an EGFR receptor tyrosine kinase inhibitor, suppresses proliferation and induces apoptosis in prostate cancer cells
Liu et al. The heat shock protein 90 inhibitor SNX-2112 inhibits B16 melanoma cell growth in vitro and in vivo
Mao et al. Hydrogen sulfide as a potent scavenger of toxicant acrolein
Rocha-Brito et al. Calix [6] arene diminishes receptor tyrosine kinase lifespan in pancreatic cancer cells and inhibits their migration and invasion efficiency
Durrant et al. Targeted inhibition of phosphoinositide 3-kinase/mammalian target of rapamycin sensitizes pancreatic cancer cells to doxorubicin without exacerbating cardiac toxicity
US20230130791A1 (en) A Combined Inhibition of EGFR and NRF2 in The Treatment of Malignant Glioma
Miura et al. Discovery of structurally diverse diazatricyclododecenes as lysosomotropic autophagy inhibitors
HK1251477B (en) Combination comprising an aminothiolester compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof and a compound able to increase the h2o2 level in cancer cells of a subject
BR112018007480B1 (pt) Composição farmacêutica, uso de uma combinação e método para a seleção de um indivíduo
Wang et al. Ethyl Acetylsalicylate (E-ASA) Protects Against Myocardial Ischemia-Reperfusion Injury
HK1251476B (en) Aminothiolester compounds or pharmaceutically acceptable salts thereof, for use in the treatment of cancer
Li Targeting Heat Shock 27 Kda Protein Induces Androgen Receptor Degradation
WO2023014296A2 (en) Molecular glue and sall4 degrader