RS59000B1 - Intervencije zasnovane na angiopoietinu za lečenje cerebralne malarije - Google Patents

Intervencije zasnovane na angiopoietinu za lečenje cerebralne malarije

Info

Publication number
RS59000B1
RS59000B1 RS20190841A RSP20190841A RS59000B1 RS 59000 B1 RS59000 B1 RS 59000B1 RS 20190841 A RS20190841 A RS 20190841A RS P20190841 A RSP20190841 A RS P20190841A RS 59000 B1 RS59000 B1 RS 59000B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
angiopoietin
composition
mice
subject
modified
Prior art date
Application number
RS20190841A
Other languages
English (en)
Inventor
Ngambo Lisa Arleen Purcell
Sarah J Higgins
Kevin C Kain
Original Assignee
Regeneron Pharma
Univ Health Network Uhn
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Regeneron Pharma, Univ Health Network Uhn filed Critical Regeneron Pharma
Publication of RS59000B1 publication Critical patent/RS59000B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/357—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having two or more oxygen atoms in the same ring, e.g. crown ethers, guanadrel
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/365—Lactones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/49—Cinchonan derivatives, e.g. quinine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
    • A61K38/1858—Platelet-derived growth factor [PDGF]
    • A61K38/1866—Vascular endothelial growth factor [VEGF]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/18—Growth factors; Growth regulators
    • A61K38/1891—Angiogenesic factors; Angiogenin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • A61P33/06—Antimalarials
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/475—Growth factors; Growth regulators
    • C07K14/515—Angiogenesic factors; Angiogenin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/22—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against growth factors ; against growth regulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/30—Non-immunoglobulin-derived peptide or protein having an immunoglobulin constant or Fc region, or a fragment thereof, attached thereto
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

Opis pronalaska
Oblast tehnike na koju se pronalazak odnosi
POZNATO STANJE TEHNIKE
[0001] Cerebralna malarija je glavni uzrok morbiditeta i mortaliteta na globalnom nivou i obično se karakteriše gubitkom integriteta krvno-moždane barijere i neurološkim poremećajem, nakon čega, u 15-30% slučajeva i uprkos lečenju, sledi smrt. Cerebralnu malariju kod lјudi prouzrokuje Plasmodium falciparum. Uobičajeni simptomi cerebralne malarije uklјučuju groznicu, glavobolјu i mijalgiju koje prati pospanost, konfuzija, poremećena ravnoteža ili koordinacija, motorni poremećaj, koma i smrt. Mogućnosti lečenja su trenutno ograničene na derivate hinina ili artemizinina koji kontrolišu parazitemiju ali nisu tako efikasni u smanjenju mortaliteta. Shodno navedenom, u stanju tehnike postoji nezadovolјena potreba za efektivnim terapijskim i preventivnim pristupima koji sprečavaju ili leče cerebralnu malariju bez neželјenih sporednih efekata.
KRATKO IZLAGANJE SUŠTINE PRONALASKA
[0002] Prema predmetnom pronalasku, obezbeđene su farmaceutske kompozicije koje su strogo u skladu sa priloženim patentnim zahtevima, za upotrebu u lečenju, prevenciji ili ublažavanju najmanje jednog simptoma, indikacije ili komplikacije cerebralne malarije (uklјučujući, npr. eksperimentalnu cerebralnu malarija, falciparum malariju itd.) kod subjekta.
[0003] U određenim primerima izvođenja, najmanje jedan simptom, indikacija ili komplikacija je izabrana iz grupe koja se sastoji od groznice, glavobolјe i mijalgije koje prate pospanost, konfuzija, vaskularni izliv, gubitak integriteta krvno-moždane barijere, povišen nivo endotelnog markera u krvi, sekvestracija eritrocita sa parazitima u mozgu, poremećena ravnoteža ili koordinacija, motorni poremećaj, splenomegalija, gubitak refleksa i nagona samoodržanja, nedostatak ponašanja vezanog za higijenu, akutna povreda pluća, konvulzija, nervni napad, koma i smrt. U određenim primerima izvođenja, endotelni marker je izabran iz grupe koju čine angiopoietin-1 (Ang1), angiopoietin-2 (Ang2), angiopoietinski receptor Tie2, fon Vilebrandov faktor (vWF), međućelijski adhezioni molekul-1 (ICAM-1), IP-10, E-selektin i molekul adhezije vaskularnih ćelija tipa 1 (VCAM-1).
[0004] Prema drugom aspektu, obezbeđeni su postupci za pobolјšanje ili povećanje preživlјavanja subjekta nakon infekcije sa Plasmodium-om. Postupci obuhvataju primenu terapijski efektivne količine farmaceutske kompozicije koja sadrži angiopoietin ili modifikovani angiopoietinski protein ili njegov fragment, subjektu kome je to potrebno. U srodnom aspektu, pronalazak obezbeđuje postupke za prevenciju vaskularnog izliva ili zaštitu integriteta krvno-moždane barijere, postupke koji uključuju primenu farmaceutske kompozicije koja sadrži terapijski efektivnu količinu modifikovanog angiopoietinskog proteina ili njegovog fragmenta subjektu kome je to potrebno.
[0005] Prema sledećem aspektu, pronalazak obezbeđuje postupke za prevenciju teške cerebralne malarije kod subjekta inficiranog sa Plasmodium spp., postupak koji se sastoji od selekcije subjekta sa parazitemijom većom od 0,1%; i primene farmaceutske kompozicije koja sadrži terapijski efektivnu količinu modifikovanog angiopoietinskog proteina ili njegovog fragmenta subjektu kome je to potrebno.
[0006] U određenim primerima izvođenja, primena modifikovanog angiopoietina subjektu kome je to potrebno, sprečava najmanje jednu indikaciju neurološkog poremećaja izabranog iz grupe koja se sastoji od poremećaja ravnoteže ili koordinacije, motornog poremećaja, gubitka refleksa i nagona samoodržanja, dugotrajne neurokognitivne povrede i poremećaja koji uključuju deficite u pamćenju i afektivne poremećaje, nedostatka ponašanja u vezi sa higijenom, konvulzije i nervnog ili epileptičnog napada.
[0007] U određenim primerima izvođenja, modifikovani angiopoietin se primenjuje u kombinaciji sa drugim terapijskim agensom ili terapijom. U određenim primerima izvođenja, modifikovani angiopoietin se primenjuje kao dodatna terapija, zajedno sa drugim terapijskim agensom, kao što je npr. artesunat.
[0008] Primeri molekula angiopoietina koji mogu biti upotrebljeni u kontekstu postupaka uklјučuju, npr. angiopoietin-1, rekombinantni angiopoietin (npr. angiopoietin-1 eksprimiran u adenovirusnom vektoru) i modifikovani angiopoietin (npr. fuzioni protein koji sadrži angiopoietin ili njegov fragment). Prema određenim primerima izvođenja, modifikovani angiopoietin čini fuzioni protein koji se sastoji od angiopoietinskog domena sličnog fibrinogenu koji je fuzionisan sa Fc fragmentom humanog IgG1 i zatim primoran da obrazuje tetramer (Davis i saradnici, Nat. Struct. Biol.10: 38-44). U određenim primerima izvođenja, modifikovani angiopoietin čini fuzioni protein koji sadrži prvi domen angiopoietina sličan fibrinogenu koji je na svom C-terminalnom kraju fuzionisan sa N-terminalnim krajem Fc fragmenta, dok je Fc fragment na svom C-terminalnom kraju fuzionisan sa N-terminalnim krajem drugog angiopoietinskog domena koji je sličan fibrinogenu.
[0009] Jedan takav tip modifikovanog angiopoietina koji može biti upotrebljen u kontekstu postupaka predmetnog pronalaska je AngF1-Fc-F1 (SEQ ID NO: 2).
[0010] Prema sledećem aspektu, predmetni pronalazak uklјučuje postupke za lečenje, prevenciju ili ublažavanje najmanje jednog simptoma, indikacije ili komplikacija cerebralne malarije (uklјučujući, npr. eksperimentalnu cerebralnu malariju, falciparum malariju itd.) kod subjekta. Postupci prema ovom aspektu pronalaska sadrže primenu terapijski efektivne količine farmaceutske kompozicije koja sadrži anti-Tie2 antitelo ili njegov fragment koji vezuje antigen, subjektu kome je to potrebno. U određenim primerima izvođenja, anti-Tie2 antitelo je aktivirajuće ili agonističko antitelo.
KRATAK OPIS SLIKA
[0011]
Slika 1 prikazuje krive preživlјavanja C57BI/6 (osetljivih na eksperimentalnu cerebralnu malariju; ECM-S) i BALB/c (rezistentnih na eksperimentalnu cerebralnu malariju; ECM-R) miševa inficiranih sa Plasmodium berghei ANKA (PbA).
Slika 2 prikazuje procentualnu stopu promene u sistemu brze procene kome miševa i ponašanja (RMCBS od engl. Rapid Murine Coma and Behavioral Score) kod ECM-S i ECM-R miševa inficiranih sa PbA.
Slika 3 prikazuje nivoe poređenja Evans plave boje ekstrahovane iz mozgova ECM-R i ECM-S miševa inficiranih sa PbA.
Slika 4 prikazuje procenat parazitemije kod ECM-S i ECM-R miševa inficiranih sa PbA.
Slika 5 prikazuje serumske nivoe Ang-1 u toku PbA infekcije. ***p<0,0001 (vreme), *p<0,05 (soj) i **p<0,001 (dvofaktorska ANOVA sa Bonferroni post-testom za naznačeno poređenje).
Slika 6(a) RMCBS (%) i nivoi Ang-1 (ng/ml) u serumu - *p<0,05 u odnosu na neinficirane (naivne) životinje, jednofaktorska ANOVA. Slika 6(b) prikazuje dijagrame rasipanja koji pokazuju linearnu regresionu analizu između serumskog nivoa Ang1 (ng/ml) i vremena do smrti (sati) (Spearman-ova korelacija, r vrednost, p<0,0001).
Slika 7 prikazuje relativne nivoe Ang2 proteina kod ECM-R i ECM-S miševa nakon PbA infekcije. Figura 8 pokazuje nivoe vWF proteina kod ECM-R i ECM-S miševa 6. dana nakon infekcije sa PbA. Slika 9 prikazuje relativne nivoe iRNK za Tie2 kod ECM-R i ECM-S miševa nakon PbA infekcije.
Slika 10 prikazuje krive preživlјavanja C57BI/6 miševa inficiranih sa PbA i tretiranih sa anti-Ang2 antitelom (mAb 'B'), izotipskom kontrolom (mAb 'A') ili fiziološkim rastvorom.
Slika 11 prikazuje procentualnu stopu promene u RMCBS kod C57BI/6 miševa inficiranih sa PbA i tretiranih sa anti-Ang2 antitelom (mAb 'B'), izotipskom kontrolom (mAb 'A') ili fiziološkim rastvorom.
Slika 12 prikazuje procenat parazitemije 7. dana nakon PbA infekcije kod C57BI/6 miševa tretiranih sa anti-Ang2 antitelom (mAb 'B'), izotipskom kontrolom (mAb 'A') ili fiziološkim rastvorom.
Slika 13 prikazuje nivoe proteina u plazmi za (a) vWF i (b) E-selektin, ICAM i VCAM kod neinficiranih C57BI/6 miševa (šrafirani stubići) ili miševa inficiranih sa PbA i tretiranih sa anti-Ang2 antitelom (mAb 'B') (sivi stubići) ili izotipskom kontrolom (mAb 'A') (crni stubići).
Slika 14 prikazuje krive preživlјavanja C57BI/6 miševa inficiranih sa PbA i tretiranih sa AngF1-Fc-F1, Fc kontrolom, anti-Ang2 antitelom, dvostrukim Anti-Ang1/Ang2 antitelom ("komparator" antitelom) ili fiziološkim rastvorom.
Slika 15 prikazuje procenat parazitemije kod C57BI/6 miševa inficiranih sa PbA i tretiranih sa AngF1-Fc-F1, Fc kontrolom, anti-Ang2 antitelom, dvostrukim Anti-Ang1/Ang2 antitelom ("komparator" antitelom) ili fiziološkim rastvorom.
Slika 16(a) prikazuje nivoe Evansove plave boje ekstrahovane iz mozgova C57BI/6 miševa inficiranih sa PbA i tretiranih sa Fc kontrolom (A), anti-Ang2 antitelom (B), AngF1-Fc-F1 (C) ili anti-Ang1/Ang2 "komparator" antitelom (D).
Slika 16(b) prikazuje procenat parazitemije kod C57BI/6 miševa inficiranih sa PbA i tretiranih sa Fc kontrolom (A), anti-Ang2 antitelom (B), AngFl-Fc-F1 (C) ili anti-Ang1/Ang2 "komparator" antitelom (D).
Slika 17(a) prikazuje procenat promene u RMCBS 6. dana nakon PbA infekcije kod C57BI/6 miševa tretiranih sa AngFl-Fc-F1 ili izotipskom kontrolom. Slika 17(b) prikazuje procentualnu promenu u RMCBS, tokom 7 dana, kod C57BI/6 miševa inficiranih sa PbA i tretiranih sa AngF1-Fc-F1 ili izotipskom kontrolom.
Slika 18(a) prikazuje procenat parazitemije kod C57BI/6 miševa inficiranih sa PbA i tretiranih sa AngF1-Fc-F1 ili izotipskom kontrolom. Slika 18(b) pokazuje procentualnu stopu promene težine C57BI/6 miševa inficiranih sa PbA i tretiranih sa AngF1-Fc-F1 ili izotipskom kontrolom.
Slika 19 prikazuje nivoe proteina u plazmi za citokine TNFα i IFNγ (a), vWF (b), E-selektin, sICAM i VCAM-1 (c) kod kontrolnih, neinficiranih C57BI/6 miševa i miševa inficiranih sa PbA i tretiranih sa AngFl-Fc-F1 ili Fc kontrolom.
Slika 20 prikazuje krive preživlјavanja C57BI/6 miševa inficiranih sa PbA i tretiranih artesunatom AngF1-Fc-F1, artesunatom fiziološkim rastvorom ili fiziološkim rastvorom.
Slika 21(a) prikazuje procenat parazitemije kod C57BI/6 miševa inficiranih sa PbA i tretiranih artesunatom AngFl-Fc-F1 ili artesunatom fiziološkim rastvorom. Slika 21(b) pokazuje procentualnu stopu promene težine C57BI/6 miševa inficiranih sa PbA i tretiranih artesunatom AngFl-Fc-F1 ili artesunatom fiziološkim rastvorom.
DETALJAN OPIS PRONALASKA
[0012] Pre opisa predmetnog pronalaska, potrebno je napomenuti da predmetni pronalazak nije ograničen na određene postupke i eksperimentalne uslove koji su opisani, pošto takvi postupci i uslovi mogu varirati. Podrazumeva se takođe da terminologija koja je ovde korišćena služi samo za opisivanje određenih primera izvođenja i da nije predviđena da bude ograničavajuća pošto će područje predmetnog pronalaska biti ograničeno samo priloženim patentnim zahtevima.
[0013] Osim ukoliko nije drugačije definisano, svi tehnički i naučni termini koji se ovde koriste su sa istim značenjem kao što se to uobičajeno podrazumeva od strane prosečno iskusnih stručnjaka iz oblasti kojoj predmetni pronalazak pripada. Kako se ovde upotrebljava, termin "oko", kada se koristi u odnosu na određenu navedenu numeričku vrednost, označava da vrednost može varirati u odnosu na navedenu vrednost za ne više od 1%. Na primer, kao što je ovde upotrebljavano, izraz "oko 100" uklјučuje 99 i 101 i sve vrednosti između (npr.99,1; 99,2; 99,3; 99,4 itd.).
[0014] Iako se bilo koji postupci i materijali koji su slični ili ekvivalentni onima koji su ovde opisani mogu koristiti u praksi predmetnog pronalaska, poželјni postupci i materijali su opisani u nastavku teksta.
Postupci za lečenje, prevenciju ili ublažavanje cerebralne malarije
[0015] Patogeneza cerebralne malarije je povezana sa aktivacijom endotela i gubitkom integriteta krvno-moždane barijere. Signalni put angiopoietin-Tie2 je klјučni regulator endotelne funkcije. Promene u angiogenoj ravnoteži, posebno povećan angiopoietin-2 (Ang2) u odnosu na Ang1, povezane su sa lošim kliničkim ishodom kod cerebralne malarije (Yeo i saradnici, 2008 PNAS; Lovegrove i saradnici, PLoS ONE 2009; Erdman i saradnici, PLoS ONE 2011; Conroy i saradnici, PLoS ONE 2011). Ipak, nije jasno da li je put Ang-Tie2 u kauzalnoj vezi sa patogenezom cerebralne malarije u mozgu. Pronalazači su postavili hipotezu da poremećena regulacija angiopoietina doprinosi patogenezi cerebralne malarije i da, stoga, intervencije u cilju zadržavanja aktivacije Tie2 mogu pospešiti stabilnost endotela, sprečiti štetne efekte na krvno-moždanoj barijeri i pobolјšati klinički ishod nakon infekcije sa Plasmodium-om. U skladu sa navedenim, ovde je pokazano da modifikovani angiopoietini, kada se primenjuju subjektu koji je zaražen, štite integritet krvno-moždane barijere i sprečavaju neurološki poremećaj i smrt. Kao što je ovde opisano na drugom mestu u tekstu, pronalazači su koristili dobro poznat mišiji model infekcije sa Plasmodium berghei ANKA (PbA), odnosno indukovanu eksperimentalnu cerebralnu malariju (ECM) da bi se ispitale promene u angiopoietinima koje su povezane sa težinom kliničke slike bolesti i smrtnošću, kao i da bi se pokazalo da je disregulacija Ang/Tie2 ose povezana sa težinom kliničke slike bolesti i smrtnošću. Kao što je ovde prikazano, nivoi Ang1 su u inverznoj korelaciji sa morbiditetom i mortalitetom u mišijem modelu cerebralne malarije. Na osnovu studija koje su ovde prikazane, ustanovlјeno je da je Ang1 neophodan za održavanje integriteta krvno-moždane barijere do čijeg remećenja dolazi u odgovoru na letalne efekte malarije, kao i da Ang1 može pobolјšati preživlјavanje iznad onog koje se postiže samostalno sa konvencionalnim tretmanom (npr. artesunatom). Dalјe, primena modifikovanog angiopoietina je poboljšala integritet krvno-moždane barijere i pospešila održavanje stanja mirovanja endotelijuma, negativnom regulacijom pro-adhezivnih molekula za koje se pretpostavlja da učestvuju u sekvestraciji parazita i patogenezi cerebralne malarije.
[0016] U skladu sa navedenim, predmetni pronalazak uklјučuje postupke za lečenje, prevenciju ili ublažavanje najmanje jednog simptoma, indikacije ili komplikacije cerebralne malarije (uklјučujući, npr. eksperimentalnu cerebralnu malariju, falciparum malariju itd.) kod subjekta. Postupci prema ovom aspektu obuhvataju primenu terapijski efektivne količine farmaceutske kompozicije koja sadrži modifikovani angiopoietinski protein, ili njegov fragment, subjektu kome je to potrebno.
[0017] "Cerebralna malarija" (CM), kako se ovde upotrebljava, označava infektivnu bolest izazvanu vrstama roda Plasmodium koju karakterišu gubitak integriteta krvno-moždane barijere i neurološki poremećaj. Simptomi CM uklјučuju, ali nisu ograničeni samo na, groznicu, glavobolјu i mijalgiju koje prate pospanost, konfuzija, vaskularni izliv, gubitak integriteta krvno-moždane barijere, povišen nivo endotelnog markera u krvi, sekvestracija eritrocita sa parazitima u mozgu, poremećena ravnoteža ili koordinacija, motorni poremećaj, splenomegalija, gubitak refleksa i nagona samoodržanja, nedostatak ponašanja vezanog za higijenu, akutna povreda pluća, konvulzija, nervni napad, koma i smrt. Klinički patološki nalaz CM karakteriše sekvestracija inficiranih crvenih krvnih zrnaca u venulama i kapilarama mozga koju prati aktivacija endotela. Termin "cerebralna malarija" uklјučuje, ali nije ograničen na, tešku cerebralnu malariju kod lјudi koju prouzrokuje Plasmodium falciparum, kao i eksperimentalnu cerebralnu malariju (ECM) izazvanu kod miševa sa Plasmodium berghei ANKA.
[0018] Kao što se ovde upotrebljava, termini "tretirati", "lečiti" ili slični, označavaju ublažavanje simptoma ili komplikacije, eliminisanje uzroka simptoma ili komplikacije, bilo privremeno ili trajno, ili sprečavanje ili usporavanje pojave simptoma ili komplikacije cerebralne malarije kod subjekta. U kontekstu predmetnog pronalaska, termini "tretirati", "lečiti" ili slični, se odnose na smanjenje ili opadanje smrtnosti kod subjekta inficiranog sa vrstom Plasmodium. Termini se takođe odnose na sprečavanje gubitka integriteta krvno-moždane barijere i neurološkog poremećaja kod subjekta sa cerebralnom malarijom. U određenim primerima izvođenja, predmetni postupci su korisni za lečenje ili ublažavanje najmanje jednog simptoma, indikacije ili komplikacije cerebralne malarije uklјučujući, ali ne ograničavajući se na, groznicu, glavobolјu i mijalgiju praćene pospanošću, konfuzijom, vaskularnim izlivom, gubitkom integriteta krvno-moždane barijere, povišenim nivo endotelnog markera u krvi, sekvestracijom eritrocita sa parazitima u mozgu, poremećenom ravnotežom ili koordinacijom, motornim poremećajem, splenomegalijom, gubitkom refleksa i nagona samoodržanja, nedostatkom ponašanja u vezi sa higijenom, akutnom povredom pluća, konvulzijom, epileptičnim napadom, komom i smrću.
[0019] Pod izrazom "terapijski efektivna količina" se podrazumeva količina koja proizvodi želјeni efekat zbog koga se primena i sprovodi. Tačna količina će zavisiti od svrhe tretmana, a može biti utvrđena od strane stručnjaka upotrebom poznatih tehnika (pogledati, npr. Lloyd (1999) The Art, Science and Technology of Pharmaceutical Compounding).
[0020] Kako se ovde upotrebljava, termin "subjekat" se odnosi na životinju, poželјno na sisara, koji ispoljava jedan ili više simptoma, indikacija ili komplikacija cerebralne malarije i/ili kome je postavljena dijagnoza cerebralne malarije (CM) i/ili kome je potrebno ublažavanje, prevencija i/ili lečenje cerebralne malarije. Termin "subjekat kome je to potrebno" može takođe uklјučivati, npr. subjekte koji, pre tretmana, ispoljavaju (ili su ispoljavali) jedan ili više simptoma ili indikacija cerebralne malarije kao što su, npr. groznica, glavobolјa i mijalgija koje prate pospanost, konfuzija, vaskularni izliv, gubitak integriteta krvno-moždane barijere, povišen nivo endotelnog markera u krvi, sekvestracija eritrocita sa parazitima u mozgu, poremećena ravnoteža ili koordinacija, motorni poremećaj, splenomegalija, gubitak refleksa i nagona samoodržanja, nedostatak ponašanja vezanog za higijenu, akutna povreda pluća, konvulzija, nervni napad, koma i smrt.
[0021] U kontekstu predmetnog pronalaska, "subjekat kome je to potrebno" može uklјučivati podskup populacije u kojoj je prisutan povišen nivo endotelnog markera. Kod takve populacije subjekata može biti povišen nivo endotelnog markera kao što je, npr. Ang1, Ang2, Tie2, vWF, ICAM-1, E-selektin i VCAM-1.
[0022] Postupci predmetnog pronalaska mogu biti upotrebljeni za lečenje cerebralne malarije kod odraslih, uklјučujući i starije osobe. U pojedinim primerima izvođanja, postupci predmetnog pronalaska se koriste za lečenje odraslih sa više od 50 godina, više od 55 godina, više od 60 godina, više od 65 godina ili više od 70 godina.
[0023] U pojedinim primerima izvođanja, postupci koji su ovde opisani mogu biti upotrebljeni za lečenje cerebralne malarije kod dece starosti ≤ 3 godine. Na primer, postupci pronalaska mogu biti upotrebljeni za lečenje beba starih manje od 1 meseca, 2 meseca, 3 meseca, 4 meseca, 5 meseci, 6 meseci, 7 meseci, 8 meseci, 9 meseci, 10 meseci, 11 meseci ili manje od 12 meseci. U drugim primerima izvođanja, postupci predmetnog pronalaska mogu biti upotrebljeni za lečenje dece koja su starija od 3 godine, starija od 4 godine, 5 godina, 6 godina, 7 godina, 8 godina, 9 godina, 10 godina, 11 godina, 12 godina, 13 godina, 14 godina ili starija od 15 godina.
[0024] Predmetni pronalazak takođe uklјučuje postupke za povećanje preživlјavanja kod subjekta sa cerebralnom malarijom. Postupci prema ovom aspektu sadrže primenu subjektu jedne ili više doza farmaceutske kompozicije koja sadrži modifikovani angiopoietin, da bi se povećalo preživlјavanje kod subjekta.
[0025] Predmetni pronalazak takođe uklјučuje postupke za prevenciju ozbiljne cerebralne malarije kod subjekta inficiranog sa vrstom Plasmodium-a, postupke koji uključuju primenu terapijski efektivne količine farmaceutske kompozicije koja sadrži modifikovani angiopoietin subjektu kome je to potrebno. U određenim primerima izvođenja, modifikovani angiopoietin se primenjuje kao egzogeni protein.
[0026] Termin "prevencija", kako se ovde upotrebljava, se odnosi na sprečavanje razvoja bolesti. Termin, kako se ovde upotrebljava, takođe uklјučuje prevenciju vaskularnog izliva, zaštitu integriteta krvno-moždane barijere i pojave neuroloških simptoma kao što su epileptični napadi i paraliza nakon infekcije patogenom. U pojedinim primerima izvođanja, termin se odnosi na prevenciju disfunkcije endotela koja je klјučna patološka karakteristika cerebralne malarije (uklјučujući eksperimentalnu cerebralnu malariju).
[0027] Predmetni pronalazak uključuje i postupke za lečenje, prevenciju ili smanjenje ozbilјnosti cerebralne malarije, postupke se sastoje od primene terapijski efektivne količine farmaceutske kompozicije koja sadrži modifikovani angiopoietin subjektu kome je to potrebno, pri čemu se farmaceutska kompozicija primenjuje subjektu u višestrukim dozama, npr. kao deo specifičnog terapijskog doznog režima. Na primer, terapijski dozni režim se može sastojati od primene višestrukih doza farmaceutske kompozicije subjektu sa učestalošću od otprilike jednom dnevno, jednom na svaka dva dana, jednom na svaka tri dana, jednom na svaka četiri dana, jednom na svakih pet dana, jednom na svakih šest dana, jednom nedelјno, jednom na svake dve nedelјe, jednom na svaka tri nedelјe, jednom na svaka četiri nedelјe, jednom mesečno, jednom na svaka dva meseca, jednom na svaka tri meseca, jednom na svaka četiri meseca ili ređe. U pojedinim primerima izvođanja, terapijski dozni režim se sastoji od primene višestrukih doza farmaceutske kompozicije subjektu sa učestalošću od oko jednom dnevno, oko 2 puta dnevno, oko 3 puta dnevno ili više od 4 puta dnevno.
[0028] U određenim primerima izvođenja, modifikovani angiopoietin se primenjuje subkutano, intravenski, intrakranijalno, intraventrikularno ili se sistematski isporučuje u adenovirusnom vektoru, subjektu kome je to potrebno.
[0029] Postupci prema određenim primerima izvođanja sadrže primenu subjektu terapijski efektivne količine farmaceutske kompozicije koja sadrži modifikovani angiopoietin u kombinaciji sa drugim terapijskim agensom. Drugi terapijski agens može biti agens izabran iz grupe koja se sastoji od artemizinina, hinina ili njihovih varijanti ili derivata (npr. artesunat), antagonista faktora rasta vaskularnog endotela (VEGF) [npr. "VEGF-hvatač" (engl. VEGF-trap) kao što je aflibercept ili drugi fuzioni protein koji inhibira VEGF poput onog navedenog u US 7,087,411 ili anti-VEGF antitelo ili njegov fragment koji vezuje antigen (npr. bevacizumab ili ranibizumab)], aktivirajućeg anti-Tie2 antitela, antagoniste Ang2, antihistamina i nesteroidnih anti-inflamatornih lekova (NSAID). Kako se ovde upotrebljava, izraz "u kombinaciji sa" označava da se farmaceutska kompozicija koja sadrži modifikovani angiopoietin primenjuje subjektu u isto vreme kao drugi terapijski agens ili neposredno pre ili neposredno nakon primene drugog terapijskog agensa. U određenim primerima izvođenja, drugi terapijski agens se primenjuje u vidu koformulacije sa modifikovanim angiopoietinom.
[0030] Predmetni pronalazak takođe razmatra postupke za lečenje, prevenciju ili ublažavanje najmanje jednog simptoma, indikacije ili komplikacije cerebralne malarije kod subjekta, pri čemu postupci obuhvataju primenu terapijski efektivne količine farmaceutske kompozicije koja sadrži anti-Tie2 antitelo ili njegov fragment koji vezuje antigen, subjektu kome je to potrebno. U određenim primerima izvođenja, anti-Tie2 antitelo je aktivirajuće ili agonističko antitelo, npr. antitelo nakon vezivanja za Tie2 povećava aktivnost Tie2 ili na drugi način stimuliše Tie2 signalni put. U određenim primerima izvođenja, anti-Tie2 antitelo je antitelo kao što je ono navedeno u US20130209492. Anti-Tie2 antitelo može biti primenjeno subkutano, intravenski ili intrakranijalno, u dozi od oko 0,1 mg/kg do oko 100 mg/kg telesne težine subjekta. U određenim primerima izvođenja, aktivirajuće anti-Tie2 antitelo se primenjuje subjektu kome je to potrebno u kombinaciji sa drugim aktivirajućim anti-Tie2 antitelom.
[0031] Prema sledećem aspektu, predmetni pronalazak uklјučuje postupke za lečenje, prevenciju ili ublažavanje najmanje jednog simptoma, indikacije ili komplikacije bolesti ili poremećaja koji su povezani sa disfunkcijom Ang-Tie2 signalnog puta kod subjekta. Postupci podrazumevaju primenu terapijski efektivne količine farmaceutske kompozicije koja sadrži modifikovani angiopoietinski protein, ili njegov fragment, subjektu kome je to potrebno. U određenim primerima izvođenja, angiopoietin ili njegove varijante mogu biti upotrebljeni za lečenje, prevenciju ili ublažavanje najmanje jednog simptoma ili indikacije bolesti ili poremećaja uklјučujući cerebralnu malariju, sepsu, antraks, denga ili hemoragičnu groznicu (uklјučujući virusnu hemoragičnu groznicu, npr. lasa groznicu, žutu groznicu i ebolu), sindrom toksičnog šoka, HUS, hemoragični šok (model masivnog gubitka krvi usled traumatske povrede, npr. IED), ishemijsku reperfuziju, hemolitički uremički sindrom, infarkt miokarda i moždani udar.
Modifikovani angiopoietini
[0032] Postupci predmetnog pronalaska obuhvataju primenu terapijske kompozicije koja sadrži angiopoietin ili njegovu varijantu subjektu kome je to potrebno. Kako se ovde upotrebljava, "angiopoietin" uklјučuje angiopoietin-1 (Ang1) ili angiopoietin-2 (Ang2).
[0033] Neograničavajući primeri kategorija modifikovanih angiopoietina uklјučuju rekombinantne angiopoietine (npr. angiopoietin eksprimiran u adenovirusnom vektoru; Thurston i saradnici, 2000, Nat. Med.), mutantne i himerne oblike angiopoietina i fuzione proteine koji sadrže angiopoietin ili njegov fragment i specifično se vezuju za Tie1 i/ili Tie2 receptore.
[0034] Prema određenim pokaznim primerima izvođenja predmetnog pronalaska, modifikovani angiopoietin je fuzioni protein koji sadrži jedan ili više domena molekula angiopoietina koji su fuzionisani sa multimerizujućim domenom. U opštim terminima, multimerizujući domen(i) predmetnog pronalaska funkcionišu tako što povezuju razne komponente molekula angiopoietina (npr. domene slične fibrinogenu) jedne s drugima. Kako se ovde upotrebljava, "multimerizujući domen" je bilo koji makromolekul koja ima sposobnost da asocira (kovalentno ili nekovalentno) sa drugim makromolekulom iste ili slične strukture ili sastava. Na primer, multimerizujući domen može biti polipeptid koji sadrži imunoglobulinski CH3 domen. Neograničavajući primer multimerizujućeg domena je Fc deo imunoglobulina, npr. Fc domen IgG-a izabranog od izotipova IgG1, IgG2, IgG3 i IgG4, kao i bilo koji alotip unutar svake izotipske grupe. U određenim primerima izvođenja, multimerizujući domen je Fc fragment ili aminokiselinska sekvenca dužine od 1 do oko 200 amino kiselina koja sadrži najmanje jedan ostatak cisteina. U ostalim primerima izvođanja, multimerizujući domen je ostatak cisteina ili kratki peptid koji sadrži cistein. Ostali domeni multimerizacije obuhvataju peptide ili polipeptide koji sadrže ili se sastoje od leucinskog rajsfešlusa, motiva tipa heliks-petlјa ili motiva sa namotanim zavojnicama.
[0035] U određenim primerima izvođenja, modifikovani angiopoietin je fuzioni protein koji sadrži jedan ili više domena sličnih fibrinogenu iz molekula angiopoietina-1 koji su fuzionisani sa Fc fragmentom imunoglobulina koji sadrži bilo koju aminokiselnsku sekvencu, kao što je navedeno u US Patent No.
7,008,781. U određenim primerima izvođenja, fuzioni protein koji može biti upotrebljen u kontekstu postupaka predmetnog pronalaska sadrži prvi domen angiopoietina sličan fibrinogenu koji je svojim C-terminalnim krajem fuzionisan sa N-terminalnim krajem Fc fragmenta IgG-a, dok je C-terminalni deo Fc fragmenta fuzionisan sa N-terminalnim krajem drugog angiopoietinskog domena sličnog fibrinogenu (Davis i saradnici, Nat. Struct. Biol.2003), pri čemu je angiopoietin Ang1. Prema određenim primerima izvođenja, postupci predmetnog pronalaska obuhvataju upotrebu modifikovanog angiopoietina koji je označen i poznat u struci kao AngFl-Fc-F1. U određenim primerima izvođenja, modifikovani angiopoietin je dimer koji sadrži dva AngFl-Fc-F1 koji su povezani preko međumolekulske veze tipa Fc fragmenata (takođe označenih kao BowAng1, kao što je opisano u Davis i saradnici, Nat. Struct. Biol.2003). Prema određenim primerima izvođenja, fuzioni protein sadrži aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NO: 2. U pojedinim primerima izvođanja, fuzioni protein sadrži sekvencu aminokiselina SEQ ID NO: 4.
[0036] Drugi modifikovani angiopoietini koji mogu biti upotrebljeni u kontekstu postupaka predmetnog pronalaska uklјučuju bilo koji od modifikovanih molekula angiopoietina navedenih u US Patent No.
6265564, 6441137 i 6825008.
[0037] U određenim primerima izvođenja, angiopoietin ili njegove varijante mogu biti upotrebljeni za lečenje, prevenciju ili ublažavanje najmanje jednog simptoma ili indikacije bolesti ili poremećaja uklјučujući sepsu, denga ili hemoragičnu groznicu (uklјučujući virusnu hemoragičnu groznicu, npr. lasa groznicu, žuta groznicu i ebolu), sindrom toksičnog šoka, HUS, hemoragični šok (model masivnog gubitka krvi usled traumatske povrede, npr. IED), ishemijsku repurfuziju, hemolitički uremički sindrom, infarkt miokarda i moždani udar.
Farmaceutske kompozicije
[0038] Predmetni pronalazak uključuje postupke koji podrazumevaju primenu modifikovanog angiopoietina subjektu, pri čemu je modifikovani angiopoietin sadržan unutar farmaceutske kompozicije. Farmaceutske kompozicije pronalaska mogu biti formulisane sa pogodnim nosačima, ekscipijentima i drugim agensima koji obezbeđuju pogodan transfer, isporuku, toleranciju i slično. U formulaciji se može naći mnoštvo odgovarajućih agenasa za formulisanje koji su poznati svim farmaceutskim hemičarima: Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, PA. Ovakve formulacije uključuju, npr. praškove, paste, masti, želee, voskove, ulјa, lipide, vezikule koje sadrže lipide (kationske ili anionske) (kao što je LIPOFECTIN™), DNK konjugate, anhidrovane apsorpcione paste, emulzije ulјa u vodi i emulzije vode u ulјu, makrogolne emulzije (polietilen glikoli raznih molekulskih težina), polučvrste gelove i polučvrste smeše koje sadrže makrogol (engl. carbowax). Pogledati takođe Powell i saradnici, "Compendium of excipients for parenteral formulations" PDA (1998) J Pharm Sci Technol 52:238-311.
[0039] Razni sistemi isporuke su poznati i mogu biti upotrebljeni za primenu farmaceutske kompozicije pronalaska, npr. enkapsulacija u lipozome, mikročestice, mikrokapsule, rekombinantne ćelije sposobne da eksprimiraju mutantne viruse, kao i endocitoza koja je posredovana receptorom (pogledati, na primer, Wu i saradnici, 1987, J. Biol. Chem. 262: 4429-4432). Postupci primene uklјučuju, ali nisu ograničeni na, intradermalne, intramuskularne, intraperitonealne, intravenske, subkutane, intranazalne, epiduralne i oralne načine primene. Kompozicija može biti primenjena bilo kojim konvencionalnim načinom primene, na primer, infuzijom ili bolusnom injekcijom, apsorpcijom sa epitelnih ili obloga za sluzokožu (npr. oralnu sluzokožu, rektalnu i sluzokožu creva itd.), a mogu biti primenjene i zajedno sa drugim biološki aktivnim agensima.
[0040] Farmaceutska kompozicija predmetnog pronalaska može biti isporučena subkutano ili intravenski, standardnom upotrebom igle i šprica. Dodatno, u kontekstu subkutane primene, za isporuku farmaceutske kompozicije predmetnog pronalaska je posebno pogodan uređaj za isporuku tipa olovke (pen). Ovakav uređaj za isporuku tipa olovke može biti za višekratnu ili jednokratnu upotrebu. Uređaj za isporuku tipa olovke za višekratnu upotrebu generalno koristi uložak koji se može menjati i koji sadrži farmaceutsku kompoziciju. Kada se primeni sav farmaceutski preparat unutar uložka i kada je uložak prazan, prazan uložak može biti lako odbačen i zamenjen novim uložkom koji sadrži farmaceutsku kompoziciju. Uređaj za isporuku tipa olovke se zatim može ponovo koristiti. U uređaju za isporuku tipa olovke koji je za jednokratnu upotrebu ne postoji zamena uloška. Umesto toga, uređaj za isporuku tipa olovke za jednokratnu upotrebu je napunjen farmaceutskom kompozicijom koja je sadržana u rezervoaru unutar uređaja. Kada se farmaceutska kompozicija iz rezervoara isprazni, čitav uređaj se odbacuje.
[0041] U određenim situacijama, farmaceutska kompozicija može biti isporučena putem sistema sa kontrolisanim oslobađanjem. U jednom primeru izvođenja, može biti upotrebljena pumpa. U drugom primeru izvođenja, mogu biti upotrebljeni polimerni materijali; pogledati “Medical Applications of Controlled Release”, Langer i Wise (ur.), 1974, CRC Pres., Boca Raton, Florida. U još jednom primeru izvođenja, sistem za kontrolisano oslobađanje može biti postavljen u blizinu ciljnog mesta dejstva kompozicije, tako da je potreban samo deo sistemske doze (pogledati npr. Goodson, 1984, u Medical Applications of Controlled Release, naveden prethodno, vol. 2, str. 115-138). Drugi sistemi kontrolisanog oslobađanja su razmatrani u publikaciji Langer-a, 1990, Science 249:1527-1533.
[0042] Preparati za injeciranje mogu uključivati dozne oblike za intravenske, subkutane, intrakutane i intramuskularne injekcije, infuzije u kapima itd. Ovakvi preparati za injeciranje mogu biti pripremlјeni poznatim postupcima. Na primer, preparati za injeciranje mogu biti pripremlјeni, na primer, rastvaranjem, resuspendovanjem ili emulgovanjem antitela ili njegove soli koja je prethodno opisana, u sterilnom vodenom medijumu ili u uljanom medijumu koji se konvencionalno upotrebljavaju za injekcije. Kao vodeni medijumi za injekcije postoje, npr. fiziološki rastvor, izotonični rastvor koji sadrži glukozu i druge pomoćne agense itd., koji mogu biti upotrebljavani u kombinaciji sa odgovarajućim agensom za rastvaranje kao što su alkohol (npr. etanol), polialkohol (npr. propilen glikol, polietilen glikol), nejonski surfaktant [npr. polisorbat 80, HCO-50 (polioksietilenski (50 mol) adukt hidrogenizovanog ricinusovog ulјa)] itd. Kao uljani medijumu mogu biti upotrebljeni, na primer, ulјe susama, sojino ulјe itd., koji mogu biti upotrebljavani u kombinaciji sa agensom za rastvaranje kao što je benzil benzoat, benzil alkohol itd. Poželjno je da injekcija pripremljena na ovaj način ispunjava odgovarajuću ampulu.
[0043] Prednost je da se farmaceutske kompozicije za oralnu ili parenteralnu upotrebu koje su prethodno opisane, pripremaju u jediničnim doznim oblicima koji su pogodni za podešavanje doze aktivnih sastojaka. Ovakvi dozni oblici u jediničnoj dozi uklјučuju, na primer, tablete, pilule, kapsule, injekcije (ampule), supozitorije itd.
Doziranje
[0044] Količina modifikovanog angiopoietina (npr. AngF1-Fc-F1) koja se primenjuje subjektu u skladu sa postupcima predmetnog pronalaska u principu je terapijski efektivna količina. Kako se ovde upotrebljava, izraz "terapijski efektivna količina" označava količinu modifikovanog angiopoietina koja rezultuje u jednom ili više od sledećeg: (a) smanjenju ozbiljnosti ili trajanja simptoma, indikacije ili komplikacije teške cerebralne malarije; (b) povećanju preživlјavanja; (c) zaštiti integriteta krvnomoždane barijere; i (d) prevenciji neuroloških poremećaja kod subjekta.
[0045] U slučaju modifikovanog angiopoietina, terapijski efektivna količina može biti od oko 0,05 mg do oko 600 mg, npr. oko 0,05 mg, oko 0,1 mg, oko 1,0 mg, oko 1,5 mg, oko 2,0 mg, oko 10 mg, oko 20 mg, oko 30 mg, oko 40 mg, oko 50 mg, oko 60 mg, oko 70 mg, oko 80 mg, oko 90 mg, oko 100 mg, oko 110 mg, oko 120 mg, oko 130 mg, oko 140 mg, oko 150 mg, oko 160 mg, oko 170 mg, oko 180 mg, oko 190 mg, oko 200 mg, oko 210 mg, oko 220 mg, oko 230 mg, oko 240 mg, oko 250 mg, oko 260 mg, oko 270 mg, oko 280 mg, oko 290 mg, oko 300 mg, oko 310 mg, oko 320 mg, oko 330 mg, oko 340 mg, oko 350 mg, oko 360 mg, oko 370 mg, oko 380 mg, oko 390 mg, oko 400 mg, oko 410 mg, oko 420 mg, oko 430 mg, oko 440 mg, oko 450 mg, oko 460 mg, oko 470 mg, oko 480 mg, oko 490 mg, oko 500 mg, oko 510 mg, oko 520 mg, oko 530 mg, oko 540 mg, oko 550 mg, oko 560 mg, oko 570 mg, oko 580 mg, oko 590 mg ili oko 600 mg modifikovanog angiopoietina.
[0046] Količina modifikovanog angiopoietina koja je sadržana u pojedinačnim dozama može biti izražena u miligramima proteina po kilogramu telesne težine subjekta (tj. mg/kg). Na primer, modifikovani angiopoietin može biti primenjen subjektu u dozi od oko 0,0001 do oko 100 mg/kg telesne težine pacijenta. U određenim primerima izvođenja, modifikovani angiopoietin se primenjuje subjektu kome je to potrebno u dozi od oko 5 - 25 mg/kg telesne težine subjekta.
PRIMERI
[0047] Primeri koji slede su izloženi tako da se stručnjaku obezbedi potpuni opis pronalaska i kako da se prave i upotrebljavaju kompozicije i postupci pronalaska, odnosno nisu predviđeni da ograniče područje onoga što pronalazači smatraju svojim pronalaskom. Učinjeni su napori da se osigura tačnost u pogledu upotrebljenih brojeva (npr. količina, temperature itd.), ali treba uzeti u obzir pojedine eksperimentalne greške i odstupanja. Ukoliko nije drugačije naznačeno, delovi su težinski delovi, molekulska težina je prosečna molekulska težina, temperatura je u stepenima Celzijusa i pritisak je na ili blizu atmosferskog.
Primer 1: Promene endotelnih regulatora u mišijem modelu eksperimentalne cerebralne malarije (ECM) indukovane sa Plasmodium berghei ANKA (Pba)
[0048] U ovom Primeru su ispitivane promene u endotelnim regulatorima u mišijem modelu eksperimentalne cerebralne malarije (ECM) indukovane sa Plasmodium berghei ANKA (Pba). Ovaj model se zasniva na zapažanju da su C57BI/6 miševi podložni mišijem parazitu P. berghei ANKA koja proizvodi tešku i konačno fatalnu bolest sa neurološkim simptomima koji predstavljaju paralelu simptoma i razvoju cerebralne malarije kod lјudi inficiranih sa Plasmodium falciparum. Nasuprot C57BI/6 miševima, BALB/c miševi su rezistentni na PbA, tako da oni ne razvijaju encefalopatiju iako postaju inficirani i dostižu slične ili ponekada veće nivoe gustine parazita. Ova studija je pokazala da je disregulacija Ang/Tie2 ose povezana sa težinom kliničke slike bolesti i smrtnošću. Dalјe, nivoi Ang1 su bili u inverznoj korelaciji sa morbiditetom i mortalitetom u mišijem modelu cerebralne malarije.
Materijali i metode
ECM model indukovan sa PbA: Infekcija
[0049] Krioprezerviran Plasmodium berghei ANKA (PbA; MR4, Manassas, VA) je pasažiran upotrebom neinficiranih C57BI/6 miševa. Za eksperiment, infekcija je inicirana u C57BI/6 i BALB/c miševima intraperitonealnom (ip) injekcijom 1 x 10<6>sveže izolovanih eritrocita sa parazitima (PE) koji su dobijeni iz donorskih miševa za pasaž. Parazitemija je praćena postupkom tankog krvnog razmaza obojenog modifikovanom Gimza bojom (protokol Hema3 Stain kompeta, Sigma, Oakville, ON) i brojanjem najmanje 1500 eritrocita. Kod inficiranih miševa su praćeni preživljavanje, neurološki poremećaji, vaskularni izliv, opterećenje parazitima i nivoi angiogenih faktora i markera aktivacije endotela.
Preživljavanje i procena zdravstvenog statusa
[0050] Preživlјavanje miševa nakon infekcije je prikazano Kaplan-Meier-ovom krivom, upotrebom log rank testa za poređenje. Kvantitativna procena neurološkog poremećaja povezanog sa ECM (poremećaja koordinacije i motornih performansi) je rađena svakodnevno, upotrebom 10 parametara iz sistema za brzu procenu kome i ponašanja miševa (RMCBS), kao što je prethodno opisano od strane Carroll RV i saradnika, 2010 u PLoS ONE 5:e13124. Znaci ECM uklјučuju poremećaj ravnoteže/koordinacije, motorni poremećaj (ataksiju, hemiplegiju/paraplegiju), gubitak refleksa i nagona samoodržanja, nedostatak ponašanja vezanog za higijenu (umivanje) i/ili epileptične napade. Za svaki parameter je dodeljivan bodovni rezultat od 0 do 2, pri čemu 0 ukazuje na najnižu funkciju, a rezultat 2 je najviši. Ukupni bodovi za svakog miša su izračunati i prikazani kao procenat ukupnog mogućeg bodovnog rezultata. Miševi sa ocenom od 35% ili manje su razmatrani kao oni sa teškim oblikom ECM.
Test permeabilnosti sa Evansovom plavom bojom
[0051] Propusnost krvnih sudova u mozgu je procenjena upotrebom Evansove plave (EB od engl. Evans blue) boje. Miševi su intravenski injecirani, u repnu venu, sa 0,1 mL 1% rastvora Evansove plave boje (prah Evansove plave boje; Sigma-Aldrich u PBS-u, sterilisano upotrebom filtera) kada su primećeni klinički znaci ECM. Miševi su nakon 1 sata eutanazirani izofluranom (99,9% inhalacionog anestetika), nakon čega su perfundovani sa 50 mL PBS-a (1x). Mozgovi su zatim aseptično disecirani, izmereni, fotografisani i prebačeni u 1 mL N, N-dimetilformamida u kome su držani 48 sati na sobnoj temperaturi da bi se ekstrahovala boja iz tkiva. Apsorbancija je merena na 620 nm. Koncentracija je izračunata upotrebom standardne krive za EB boju i izražena je u vidu ng boje po gramu tkiva mozga.
Detekcija citokinskih markera aktivacije endotela
[0052] Periferna puna krv je prikuplјena punkcijom femoralne vene na Dan 0 (d0; pre infekcije sa PbA), kao i 6.dana nakon infekcije (d6 p.i.), u heparinizovane ependorfice (Starstedt). Plazma je izolovana iz uzoraka pune krvi centrifugiranjem od 15 min na 1000 x g. Uzorci plazme su zatim alikvotirani i čuvani na -80°C do analize. Nivoi mišijeg međućelijskog adhezionog molekula tipa 1 (sICAM-1/CD54), E-selektina (sE-Sel/CD62E) i molekula adhezije vaskularnih ćelija tipa 1 (sVCAM-1/CD106), u njihovim solubilnim oblicima, određeni su u plazmi upotrebom komercijalno raspoloživih ELISA kompleta za miševe (R&D Systems, Minneapolis, USA) po uputstvu proizvođača. Nivoi antigena fon Villebrandovog faktora (vWF:Ag) su izmereni u serumu ELISA analizom na sledeći način: MaxiSorp ploče sa 96 bunarića (Nunc) su prevučene, inkubacijom preko noći na 4°C, sa poliklonskim anti-humanim vWF antitelom (1:600, Dako, Glostrup, Danska) u 0,01 M PBS-u. Dalje je nanet serum miševa u 1% BSA-PBS-u i vezani vWF:Ag je detektovan anti-humanim vWF poliklonskim antitelom konjugovanim sa peroksidazom rena (HRP) (1:8000, Dako). Ploče su razvijene upotrebom rastvora 3,3',5,5'-tetrametilbenzidinskog (TMB) supstrata - apsorbancija je očitana na 450 nm nakon što je kolorimetrijska reakcija zaustavlјena sa H2SO4. Koncentracija vWF:Ag je interpolirana sa standardne krive urađene za humani vWF poznate koncentracije iz sveže zamrznute plazme (1:500, American Diagnostica, Stamford, CT) koja je bila uklјučena na svakoj ploči. IFN-gama i TNF-alfa u plazmi su određivani upotrebom komercijalno dostupnih ELISA kompleta za miševe (eBioscience), u skladu sa protokolom proizvođača.
Statistička analiza
[0053] Statistička analiza je urađena upotrebom GraphPad Prism kompjuterskog programa, verzije 4,00 (San Diego, CA). Preživlјavanje miševa nakon infekcije je prikazano u vidu Kaplan-Meier-ove krive i procenjeno je upotrebom log-rank testa. Studije preživlјavanja su rađene u triplikatu i podaci su objedinjavani, osim ukoliko nije drugačije naznačeno. Shapiro-Wilk-ov test je korišćen da bi se odredila normalnost distribucije podataka, a poređenje između grupa je urađeno upotrebom neparametarskog Mann-Whitney testa ili Kruskal-Wallis testa praćenog Dunn-ovim post-hoc testom. Dvofaktorska ANOVA je upotrebljena za poređenje između grupa u više vremenskih tačaka. Za analizu biomarkera u plazmi, upotrebljen je Friedman-ov test sa Dunn-ovom analizom za višestruka poređenja, da bi se uporedili nivoi između uzoraka prikupljenih od pacijenata u različitim vremenskim tačkama (npr. po prijemu i nakon oporavka). Svi podaci su predstavlјeni u vidu medijane i interkvartilnog opsega (neparametarska analiza), osim ukoliko nije drugačije naznačeno. Normalno distribuirani podaci su prikazani kao srednja vrednost i SEM; p<0,05 se smatra statistički značajnim. Podaci iz više eksperimenata su normalizovani u odnosu na geometrijsku sredinu dobijenu za inficiranu, ali netretiranu grupu u svakom eksperimentu radi daljih poređenja.
Rezultati
[0054] Kao što je prikazano na Slici 1, kod rezistentnih BALB/c miševa (takođe označenih kao "ECM-R") je uočeno značajno duže preživlјavanje (p=0,0007, log rank test) nakon infekcije sa PbA u odnosu na osetljive C57BI/6 miševe (označene takođe kao "ECM-S"). Rezistentni BALB/c miševi su bili sa preživlјavanjem od 100% 7 dana nakon infekcije, kao i sa padom u preživlјavanju na više od 10% od 10. do 14. dana (kada su miševi žrtvovani). Nasuprot tome, kod osetlјivih C57BI/6 miševa preživlјavanje je već 6. dana iznosilo samo oko 50%, dok je 8. dana nakon infekcije iznosilo 0%.
[0055] ECM-S miševi su pokazali neurološki poremećaj, odnosno oko 6. dana bodovanje je već iznosilo manje od 35% u poređenju sa rezistentnim ECM-R miševima kod kojih su neurološki poremećaji bili odsutni (Slika 2). Izlivanje Evansove plave boje (EB) je upotrebljeno za procenu vaskularne permeabilnosti i disfunkcije krvno-moždane barijere. Nakon perfuzije, da bi se uklonila boja iz cirkulacije, nivo iscurelog EB u moždanom parenhimu kod ECM-S miševa inficiranih sa PbA je bio 2 puta veći od nivoa kod ECM-R miševa sa uporedivim opterećenjima parazita [srednja vrednost (SD) EB boje/g tkiva: 10,7 (7,9) za ECM-R miševe u odnosu na 22,9 (7,2) kod ECM-S miševa; p=0,005], što je u skladu sa povećanim vaskularnim curenjem i gubitkom integriteta krvno-moždane barijere (Slika 3). Navedeno je bilo nezavisno od parazitemije koja je zapažena, što je dokazano većim opterećenjem parazitima kod rezistentnih miševa u poređenju sa osetlјivim miševima (Slika 4).
[0056] ECM-R miševi su se razlikovali od ECM-S miševa u nivoima angiogenih faktora Ang1, Ang2 i vWF nakon PbA infekcije. Longitudinalna procena za vreme toka infekcije je pokazala da su nivoi Ang1 opadali tokom vremena (p<0,0001, dvofaktorska ANOVA; Slika 5). Kinetika smanjenja Ang1 nakon infekcije je bila značajno različita kod ECM-R u odnosu na ECM-S miševe (p=0,02, 2-faktorska ANOVA). Tokom akutne faze bolesti, ECM-R miševi su zadržali značajno više nivoe Ang1 u poređenju sa ECM-S miševima (p<0,001). Za oba soja, gubitak Ang1 u cirkulaciji je bio povezan sa pojavom neuroloških poremećaja i ECM, što je utvrđeno na osnovu značajnog pada u RMCBS. Serumski nivoi Ang1 (ng/ml) su bili u značajnoj korelaciji sa rezultatima RMCBS (%) (p<0,05; Slika 6a) i sa vremenom do smrti (sati) (p<0,0001; Slika 6b). U celini, kada je ispitivan efekat 6.dana nakon infekcije, miševi sa najnižim nivoima Ang1 u cirkulaciji su bili sa značajno većom verovatnoćom da će doći do fatalnog ishoda, što je podržalo hipotezu da Ang1 može biti kritičan parameter preživlјavanja.
[0057] ECM-R miševe su karakterisali značajno niži nivoi Ang2 i vWF (Slike 7 - 9).
Primer 2: Blokiranje Ang2 ne obezbeđuje bolјi protektivni efekat na razvoj eksperimentalnog CM
[0058] U ovom Primeru, ispitan je efekat blokiranja Ang2 u mišijem modelu ECM indukovane sa PbA. Dvadeset C57BI/6 miševa je zaraženo sa Plasmodium berghei ANKA (PbA), intraperitonealnom injekcijom sa 1 x 10<6>sveže izolovanih eritrocita sa parazitima (PE) koji su dobijeni iz donorskih miševa za pasaž na Dan 0. Inficirani miševi su tretirani sa 15 mg/kg anti-Ang2 antitela, H1H685, kao što je opisano u US patentnoj prijavi br. US20110027286, subkutanom injekcijom na Dane -1, 1, 4 i 7 nakon infekcije. Kod miševa su praćeni preživlјavanje, neurološki poremećaji, opterećenje parazitima i nivoi proteina u plazmi, kao što je detalјno opisano u Primeru 1.
[0059] Slika 10 prikazuje Kaplan-Meier-ovu krivu preživljavanja miševa inficiranih sa PbA koji su tretirani sa anti-Ang2 antitelom (označenim na Slici 10 kao "mAb 'B") ili izotipskom kontrolom (mAb 'A') ili fiziološkim rastvorom. Blokiranje Ang2 sa anti-Ang2 antitelom nije dovelo do povećanog preživlјavanja inficiranih miševa u poređenju sa tretmanom izotipskom kontrolom. Tretman sa anti-Ang2 antitelima takođe nije sprečio neurološke poremećaje kod inficiranih miševa (Slika 11), mada nije bilo značajne razlike ni u opterećenosti parazitima između inficiranih miševa tretiranih sa anti-Ang2 antitelom, izotipskom kontrolom ili fiziološkim rastvorom (Slika 12). Nivoi proteina vWF, ICAM, VCAM i E-selektina u plazmi se nisu značajno razlikovali kod miševa tretiranih sa anti-Ang2 antitelom ili izotipskom kontrolom (Slika 13).
Primer 3: Terapijska primena Ang1 značajno pobolјšava preživlјavanje miševa inficiranih sa PbA
[0060] U ovom primeru, proučavan je efekat primene Ang1 u mišijem modelu ECM indukovane sa PbA. Osamdeset C57BI/6 miševa je zaraženo sa Plasmodium berghei ANKA (PbA), intraperitonealnom injekcijom sa 1 x 10<6>sveže izolovanih eritrocita sa parazitima (PE) koji su dobijeni iz donorskih miševa za pasaž na Dan 0. Inficirani miševi su podelјeni u četiri grupe i tretirani su ili sa 15 mg/kg anti-Ang2 antitela (pogledati Primer 2), dvostrukog "komparator" antitela koje blokira i Ang1 i Ang2 ili sa izotipskom kontrolom ili sa 25 mg/kg AngFl-Fc-F1 (SEQ ID NO: 2), subkutanom injekcijom 4. dana i 6.
dana nakon infekcije. Dvostruko "komparator" Ang1/Ang2 blokirajuće antitelo je predstavljalo peptiantitelo 2xCon4C (AMG386) koj je navedeno u US Patent No. 7205275 (Amgen). Kod miševa su praćeni preživlјavanje, neurološki poremećaji, opterećenje parazitima i nivoi proteina u plazmi, kao što je detalјno opisano u Primeru 1.
[0061] Kao što je prikazano na Slici 14, terapijska primena AngFl-Fc-F1 je kod miševa inficiranih sa PbA značajno pobolјšala preživlјavanje (p<0,05, log rank test) u poređenju sa miševima tretiranim sa izotipskom kontrolom, anti-Ang2 antitelom ili dvostruko blokirajućim antitelom. Miševi tretirani sa AngFl-Fc-F1 su pokazali preživlјavanje veće od 35% u vremenu do najmanje 15 dana p.i. u poređenju sa miševima tretiranim sa druga tri tretmana kod kojih je preživljavanje iznosilo 0% preživlјavanja do 8. dana nakon infekcije iako je procenat parazitemije kod svih tretmana bio sličan (Slika 15). Tretman sa AngF1-Fc-F1 je takođe bio protektivan po pitanju integriteta krvno-moždane barijere, što je pokazano preuzimanjem Evansove plave boje (Slika 16). Miševi tretirani sa AngFl-Fc-F1 su ispoljili značajno nižu količinu unosa boje (panel C na Slici 16a), u skladu sa održavanjem intaktnosti krvno-moždane barijere i smanjenjem vaskularne permeabilnosti (p<0,05, Kruskal-Wallis), iako je procenat parazitemije bio sličan (Slika 16b). Navedeno je potvrdilo da je egzogeni Ang1 dovolјan da održi integritet krvno-moždane barijere nakon indukcije smrtonosne malarije.
[0062] Terapijska primena AngF1-Fc-F1 je takođe sprečila morbiditet i neurološki poremećaj povezan sa ECM (Slika 17), nezavisno od promena u perifernoj parazitemiji (Slika 18). Do 6. dana nakon infekcije, većina kontrolnih miševa je napredovala do ECM, dok je napredovanje bolesti bilo ublaženo kod tretiranih miševa. Inficirani miševi tretirani sa AngF1-Fc-F1 su ispoljili sličan gubitak težine kao kontrolni tretirani miševi.
[0063] Da bi se utvrdilo da li se vaskularna zaštita sa AngF1-Fc-F1 javila sekundarno u odnosu na smanjenje inflamatornih citokina ili da li je protektivni efekat bio posledica direktnog poboljšanja stabilnosti vaskulature prilikom sistemskog inflamatornog odgovora, uzorci plazme iz tretiranih i netretiranih miševa koji su bili inficirani sa PbA su analizirani na klјučne proinflamatorne citokine. Miševi inficirani sa PbA su 6. dana nakon infekcije imali značajno povećane nivoe TNF i IFNγ (3-struko povećanje TNF-a i 60-struko povećanje IFNγ u odnosu na bazalne vrednosti, p<0,01 za oba, jednofaktorska ANOVA) uprkos tretmanu. Tretman sa AngFl-Fc-F1 nije uticao na nivoe TNF-α ili IFNγ, pri čemu se i kod kontrolnih i tretiranih miševa moglo zapaziti slično povećanje u odgovoru na infekciju (Slika 19a).
[0064] Proinflamatorna stimulacija citokina i/ili direktna interakcija endotela sa eritrocitima sa parazitima može doprinositi brojnim patološkim događajima koji su uklјučeni u CM, uklјučujući i regulaciju receptora endotelnih ćelija koji posreduju u citoadheziji parazita. Poremećaj sekvestracije parazita posredovane receptorima domaćina preko negativne regulacije molekula ćelijske adhezije (CAM), kao što su ICAM-1 i/ili molekul adhezije vaskularnih ćelija tipa 1 (VCAM-1), može umanjiti opstrukciju mikrovaskulature i disfunkciju endotela. Ispitan je stoga efekat tretmana sa Ang1 na smanjenje cirkulišućih nivoa solubilnih oblika CAM, za koje se smatra da ukazuju na aktivaciju endotela i vaskularni fenotip podložan adheziji. Analiza uzoraka plazme koji su prikuplјeni 6. dana nakon infekcije je pokazala 4-struko povećanje nivoa sICAM-1 u cirkulaciji sa PbA infekcijom u odnosu na bazalne vrednosti (p<0,001, jednofaktorska ANOVA sa Bonferroni testom za višestruka poređenja; Slika 19c). Ovi nivoi su bili značajno smanjeni prilikom tretmana sa Ang1 u poređenju sa kontrolama koje su zaražene sa PbA (p<0,05; Slika 19c). Slično tome, nivoi sVCAM-1 su značajno porasli 6. dana nakon infekcije sa PbA (5-struko povećanje, p<0,001; Slika 19c), dok je tretman sa Ang1 značajno smanjio nivoe sVCAM-1 u cirkulaciji u poređenju sa kontrolama koj su bile inficirane sa PbA (p<0,05, Slika 19c). Navedeni podaci ukazuju da interakcije Ang-1-Tie-2 pomažu u održanju stanja mirovanja endotela prilikom sistemskog inflamatornog odgovora, delom putem očuvanja anti-adhezivnog vaskularnog fenotipa i negativne regulacije adhezionih molekula.
[0065] Ova studija je pokazala da terapijska primena Ang1 (AngFl-Fc-F1), ali ne i inhibicija Ang2, pobolјšava integritet i opstanak krvno-moždane barijere. Navedeno podržava ispitivanja pro-Ang1, ali ne i inhibicije Ang2, kao dopunske terapije za cerebralnu malariju. Dodatno je od interesa da je tretman zasnovan na Ang1 efikasan i da je očuvao integritet krvno-moždane barijere uprkos snažnom sistemskom proinflamatornom odgovoru na infekciju. Podaci sugerišu da antiinflamatorne strategije ne moraju biti neophodne da bi se sačuvao integritet vaskulature i pobolјšao ishod kod infekcija opasnih po život koje su udružene sa sistemskom inflamacijom.
[0066] U još jednom eksperimentu, AngFl-Fc-F1 će biti primenjen u kombinaciji sa anti-Tie2 antitelom (kao što je antitelo navedeno u US20130209492) kod C57BI/6 miševa koji su osetljivi na infekciju, da bi se ispitala uloga Tie2 u blokadi protektivnog efekta AngF1-Fc-F1. Anti-Tie2 antitelo može biti aktivirajuće (ili agonističko) antitelo, npr. može povećati vezivanje angiopoietina i/ili aktivnost Tie2. Očekuje se da će AngF1-Fc-F1 primenjen u kombinaciji sa anti-Tie2 antitelom dovesti do smanjenja preživlјavanja inficiranih miševa u odnosu na samostalan tretman sa AngFl-Fc-F1.
[0067] U sledećem eksperimentu, AngF1-Fc-F1 će biti upotrebljen za lečenje rezistentnih BALB/c miševa koji su inficirani sa PbA da bi se ispitao efekat na preživlјavanje, integritet krvno-moždane barijere, neurološka oštećenja i proteinske markere plazme. Očekuje se da će primena AngFl-Fc-F1 dovesti do pobolјšanog protektivnog efekta na integritet krvno-moždane barijere i preživlјavanja inficiranih BALB/c miševa.
[0068] U trećem eksperimentu, AngF1-Fc-F1 će biti primenjen u kombinaciji sa anti-Tie2 antitelom kod inficiranih rezistentnih BALB/c miševa, da bi se ispitalo da li su rezistentni miševi postali osetlјivi na ECM. Očekuje se da će AngFl-Fc-F1 primenjen u kombinaciji sa anti-Tie2 antitelom dovesti do smanjenja preživlјavanja inficiranih BALB/c miševa u poređenju sa samostalnim tretmanom sa AngFl-Fc-F1.
Primer 4: Terapijska primena AngF1-Fc-F1 kao dopunske terapije u kombinaciji sa artesunatom
[0069] U ovom primeru, ispitan je efekat primene Ang-F1-Fc-F1 u kombinaciji sa artesunatom, u mišijem modelu ECM indukovane sa PbA. Dvadeset C57BI/6 miševa je zaraženo sa Plasmodium berghei ANKA (PbA), intraperitonealnom injekcijom sa 1 x 10<6>sveže izolovanih eritrocita sa parazitima (PE) koji su dobijeni iz donorskih miševa za pasaž na Dan 0. Inficirani miševi su tretirani sa 15 mg/kg AngFl-Fc-F1 (SEQ ID NO: 2), 4. i 6. dana nakon infekcije, i sa 10 mg/kg artesunata 5. dana nakon infekcije, subkutanim injeciranjem. Kod miševa su praćeni preživlјavanje, neurološki poremećaji, opterećenje parazitima i nivoi proteina u plazmi, kao što je detalјno opisano u Primeru 1.
[0070] Dodatno tretiranje sa AngF1-Fc-F1 je značajno pobolјšalo preživlјavanje inficiranih miševa u odnosu na miševe koji su tretitani samo artesunatom (Slika 20). Kod inficiranih miševa tretiranih sa AngFl-Fc-F1 u kombinaciji sa artesunatom preživlјavanje je iznosilo 100%, najmanje do 15. dana nakon infekcije. Nasuprot tome, preživljavanje inficiranih miševa tretiranih samo artesunatom je bilo manje od 60% do 8. dana nakon infekcije. Uprkos značajno smanjenom opterećenju parazitima do nivoa pre ECM (tj. parazitemija od <2%), 41,7% miševa tretiranih artesunatom je umrlo od ECM. Ovaj efekat je bio nezavisan od procenta parazitemije (Slika 21).
[0071] U dalјem eksperimentu, efekat pomoćnog AngF1-Fc-F1 u kombinaciji sa artesunatom će biti proučavan u pogledu neuroloških poremećaja kod inficiranih miševa. Očekuje se da će primena AngF1-Fc-F1 u kombinaciji sa artesunatom sprečiti neurološke poremećaje kod inficiranih miševa u poređenju sa samostalnim tretmanom artesunata.
[0072] U još jednom eksperimentu, AngFl-Fc-F1 će biti primenjen u kombinaciji sa anti-Ang2 antitelom (kao što je opisano u Primeru 2) da bi se ispitalo preživlјavanje inficiranih miševa. Očekuje se da će AngF1-Fc-F1 primenjen u kombinaciji sa anti-Ang2 antitelom dovesti do pobolјšanog preživlјavanja inficiranih miševa u odnosu na efekat samostalne primene AngFl-Fc-F1.
Primer 5: Zaštita od akutne povrede pluća koja se javlja kod malarije
[0073] U ovom primeru, biće praćen efekat primene AngFl-Fc-F1 na vaskularnu permeabilnost u plućima kod inficiranih miševa, prilikom povrede pluća koja se javlja kod malarije. Dvadeset C57BI/6 miševa će biti zaraženo sa Plasmodium berghei ANKA (PbA), intraperitonealnom injekcijom sa 1 x 10<6>sveže izolovanih eritrocita sa parazitima (PE) koji su dobijeni iz donorskih miševa za pasaž na Dan 0. Inficirani miševi će biti tretirani sa 15 mg/kg AngF1-Fc-F1 (SEQ ID NO: 2) 4. i 6. dana nakon infekcije, subkutanom injekcijom. Kod miševa će biti praćeni preživlјavanje i vaskularna permeabilnost u plućima upotrebom bojenja Evansovom plavom bojom.
[0074] Očekuje se da će miševi tretirani sa AngFl-Fc-F1 pokazati odsustvo preuzimanja Evansove plave boje u plućima, ukazujući na odsustvo vaskularne permeabilnosti i zaštitu od akutne povrede pluća koja se javlja kod malarije.
[0075] Područje predmetnog pronalaska ne bi trebalo da bude ograničeno specifičnim primerima izvođenja koji su ovde opisani. Zaista, razne modifikacije pronalaska, pored onih koje su ovde opisane, biće očigledne stručnjacima na osnovu prethodnog opisa i priloženih slika. Predviđano je da i ovakve modifikacije predstavljaju područje pronalaska koje je definisano priloženim patentnim zahtevima.

Claims (14)

Patentni zahtevi
1. Farmaceutska kompozicija koja sadrži terapijski efektivnu količinu modifikovanog angiopoietinskog proteina za upotrebu u postupku lečenja, prevencije ili ublažavanja najmanje jednog simptoma, indikacije ili komplikacije cerebralne malarije, pri čemu se navedeni postupak sastoji od primene kompozicije subjektu kome je to potrebno i gde modifikovani angiopoietin sadrži fuzioni protein koji sadrži najmanje jedan domen angiopoietina-1 sličan fibrinogenu koji je fuzionisan sa Fc fragmentom imunoglobulina.
2. Kompozicija za upotrebu u postupku prema patentnom zahtevu 1, pri čemu je najmanje jedan simptom, indikacija ili komplikacija izabrana iz grupe koja se sastoji od groznice, glavobolјe i mijalgije koje prate pospanost, konfuzija, vaskularni izliv, gubitak integriteta krvno-moždane barijere, povišen nivo endotelnog markera u krvi, po izboru izabranog iz grupe koja se sastoji od Ang1, Ang2, Tie2, vWF, ICAM-1, E-selektina i VCAM-1, i dalje, sekvestracija eritrocita sa parazitima u mozgu, poremećena ravnoteža ili koordinacija, motorni poremećaj, splenomegalija, gubitak refleksa i nagona samoodržanja, nedostatak ponašanja vezanog za higijenu, akutna povreda pluća, konvulzija, nervni napad, koma i smrt.
3. Kompozicija za upotrebu u postupku prema patentnom zahtevu 1 ili 2, gde:
(a) modifikovani angiopoietin se primenjuje u dozi od 5 - 50 mg/kg telesne težine subjekta, po izboru gde se modifikovani angiopoietin primenjuje u dozi od 15 mg/kg telesne težine subjekta; i/ili
(b) modifikovani angiopoietin se primenjuje subkutano; i/ili
(c) modifikovani angiopoietin se primenjuje u kombinaciji sa drugim terapijskim agensom; i/ili (d) modifikovani angiopoietin se primenjuje u kombinaciji sa drugim terapijskim agensom, pri čemu je drugi terapijski agens izabran iz grupe koja se sastoji od artemizinina, hinina i njihove varijante ili derivata, po izboru gde je drugi terapijski agens artesunat.
4. Kompozicija za upotrebu u postupku prema bilo kom od patentnih zahteva 1-3, pri čemu primena modifikovanog angiopoietina povećava preživlјavanje.
5. Kompozicija za upotrebu u postupku prema bilo kom od patentnih zahteva 1-3, pri čemu primena modifikovanog angiopoietina štiti integritet krvno-moždane barijere.
6. Farmaceutska kompozicija koja sadrži terapijski efektivnu količinu modifikovanog angiopoietinskog proteina za upotrebu u postupku prevencije teške cerebralne malarije kod subjekta inficiranog sa Plasmodium spp., postupak koji obuhvata: (a) izbor subjekta sa parazitemijom većom od 0,1%; i (b) primenu farmaceutske kompozicije subjektu kome je to potrebno, gde modifikovani angiopoietin sadrži fuzioni protein koji sadrži najmanje jedan domen angiopoietina-1 sličan fibrinogenu koji je fuzionisan sa Fc fragmentom imunoglobulina.
7. Kompozicija za upotrebu u postupku prema patentnom zahtevu 6, pri čemu primena modifikovanog angiopoietina sprečava najmanje jednu indikaciju izabranu iz grupe koja se sastoji od neurološkog poremećaja i vaskularnog izliva, po izboru gde je najmanje jedna indikacija neurološkog poremećaja izabrana iz grupe koja se sastoji od poremećaja ravnoteže ili koordinacije, motorog poremećaja, gubitka refleksa i nagona samoodržanja, dugoročne neurokognitivne povrede i oštećenja, deficita pamćenja, afektivnih poremećaja, nedostatka ponašanja u vezi sa higijenom, konvulzije i nervnih napada.
8. Kompozicija za upotrebu u postupku prema patentnom zahtevu 6 ili 7, pri čemu primena modifikovanog angiopoietina sprečava gubitak integriteta krvno-moždane barijere.
9. Kompozicija za upotrebu u postupku prema bilo kom od patentnih zahteva 6-8, gde:
(a) modifikovani angiopoietin se primenjuje u dozi od 15 mg/kg telesne težine subjekta; i/ili (b) modifikovani angiopoietin se primenjuje subkutano; i/ili
(c) modifikovani angiopoietin se primenjuje u kombinaciji sa drugim terapijskim agensom, po izboru gde je drugi terapijski agens artesunat.
10. Kompozicija za upotrebu u postupku prema bilo kom od patentnih zahteva 1-9, gde
fuzioni protein sadrži prvi domen angiopoietina-1 sličan fibrinogenu koji je fuzionisan svojim C-terminalnim krajem sa N-terminalnim krajem Fc fragmenta, dok je Fc fragment svojim C-terminalnim krajem fuzionisan sa N-terminalnim krajem drugog domena angiopoietina-1 koji je sličan fibrinogenu.
11. Kompozicija za upotrebu u postupku prema bilo kom od patentnih zahteva 1-10, gde je modifikovani angiopoietin-1 AngF1-Fc-F1.
12. Kompozicija za upotrebu u postupku prema bilo kom od patentnih zahteva 1-11, gde Fc fragment sadrži Fc domen IgG-a.
13. Kompozicija za upotrebu u postupku prema patentnom zahtevu 12, gde je Fc domen IgG-a humani Fc domen IgG1.
14. Kompozicija za upotrebu u postupku prema bilo kom od patentnih zahteva 1-13, gde se modifikovani angiopoietin-1 sastoji od aminokiselinske sekvence SEQ ID NO: 2.
RS20190841A 2013-11-01 2014-10-31 Intervencije zasnovane na angiopoietinu za lečenje cerebralne malarije RS59000B1 (sr)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201361898539P 2013-11-01 2013-11-01
US201462040514P 2014-08-22 2014-08-22
EP14800207.4A EP3062811B1 (en) 2013-11-01 2014-10-31 Angiopoietin-based interventions for treating cerebral malaria
PCT/US2014/063347 WO2015066426A2 (en) 2013-11-01 2014-10-31 Angiopoietin-based interventions for treating cerebral malaria

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS59000B1 true RS59000B1 (sr) 2019-08-30

Family

ID=51932597

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20190841A RS59000B1 (sr) 2013-11-01 2014-10-31 Intervencije zasnovane na angiopoietinu za lečenje cerebralne malarije

Country Status (20)

Country Link
US (4) US9592271B2 (sr)
EP (1) EP3062811B1 (sr)
JP (1) JP2016537416A (sr)
KR (1) KR20160099085A (sr)
CN (1) CN105873599A (sr)
AU (1) AU2014342162B2 (sr)
CA (1) CA2928852A1 (sr)
CY (1) CY1121710T1 (sr)
DK (1) DK3062811T3 (sr)
ES (1) ES2727532T3 (sr)
HR (1) HRP20191070T1 (sr)
HU (1) HUE044660T2 (sr)
LT (1) LT3062811T (sr)
MX (1) MX377089B (sr)
PL (1) PL3062811T3 (sr)
PT (1) PT3062811T (sr)
RS (1) RS59000B1 (sr)
SI (1) SI3062811T1 (sr)
SM (1) SMT201900295T1 (sr)
WO (1) WO2015066426A2 (sr)

Families Citing this family (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3252079B8 (en) 2006-04-07 2020-09-09 Aerpio Therapeutics LLC Antibodies that bind human protein tyrosine phosphatase beta (hptp-beta) and uses thereof
US7622593B2 (en) 2006-06-27 2009-11-24 The Procter & Gamble Company Human protein tyrosine phosphatase inhibitors and methods of use
SG10201505672TA (en) 2009-07-06 2015-09-29 Aerpio Therapeutics Inc Compounds, compositions, and methods for preventing metastasis of cancer cells
CN104039351A (zh) 2011-10-13 2014-09-10 阿尔皮奥治疗学股份有限公司 用于治疗血管渗漏综合征和癌症的方法
US20150050277A1 (en) 2013-03-15 2015-02-19 Aerpio Therapeutics Inc. Compositions and methods for treating ocular diseases
RS59000B1 (sr) 2013-11-01 2019-08-30 Regeneron Pharma Intervencije zasnovane na angiopoietinu za lečenje cerebralne malarije
EP3116503A4 (en) 2014-03-14 2017-08-23 Aerpio Therapeutics, Inc. Hptp-beta inhibitors
EP3352856B1 (en) 2015-09-23 2021-08-18 Aerpio Pharmaceuticals, Inc. Activators of tie-2 for use in treating intraocular pressure
US10588940B2 (en) 2015-11-06 2020-03-17 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Use of angiopoietins in promoting blood coagulation and in the treatment of blood coagulation disorders
EP3874029B1 (en) * 2018-10-29 2023-08-30 Ottawa Hospital Research Institute Genetically-engineered mesenchymal stem cells overexpressing aoah and uses thereof
US12109253B2 (en) 2019-01-30 2024-10-08 Agency For Science, Technology And Research Use of IGFBP7 for treating malaria
US11253502B2 (en) 2019-04-29 2022-02-22 EyePoint Pharmaceuticals, Inc. Tie-2 activators targeting the Schlemm's canal
CN110687289B (zh) * 2019-10-17 2023-04-18 中国人民解放军陆军军医大学 Fgl2蛋白作为疟疾感染标志物的应用
EP4110367A4 (en) * 2020-02-28 2024-05-01 Northwestern University METHOD FOR INCREASING THE CHAMBER OF WATER OUTFLOW AND REDUCE THE EXTERNAL PRESSURE

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US1025193A (en) 1911-03-01 1912-05-07 Oliver Jefferson Kennedy Foldable holder for writing-pads.
CA2354846A1 (en) 1998-12-23 2000-06-29 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Method of enhancing the biological activity of ligands
US7691365B2 (en) * 2004-09-28 2010-04-06 Aprogen, Inc. Methods of using chimeric coiled coil molecule to treat ischemic disease
WO2007033216A2 (en) 2005-09-12 2007-03-22 Beth Israel Deaconess Medical Center Methods and compositions for the treatment and diagnosis of diseases characterized by vascular leak, hypotension, or a procoagulant state
JO3182B1 (ar) 2009-07-29 2018-03-08 Regeneron Pharma مضادات حيوية بشرية عالية الالفة مع تولد الاوعية البشرية - 2
US20120189635A1 (en) 2009-07-29 2012-07-26 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods for Treating or Preventing Malaria by Administering an Antibody that Specifically Binds Angiopoietin-2 (Ang-2)
WO2011093851A1 (en) * 2010-01-26 2011-08-04 Scott And White Memorial Hospital And Scott, Sherwood, And Brindley Foundation Method for treatment of vascular hyperpermeability
AU2012299195B9 (en) 2011-08-19 2018-05-10 Regeneron Pharmaceuticals, Inc Anti-Tie2 antibodies uses thereof
RS59000B1 (sr) 2013-11-01 2019-08-30 Regeneron Pharma Intervencije zasnovane na angiopoietinu za lečenje cerebralne malarije

Also Published As

Publication number Publication date
KR20160099085A (ko) 2016-08-19
CN105873599A (zh) 2016-08-17
EP3062811B1 (en) 2019-04-03
SI3062811T1 (sl) 2020-07-31
CA2928852A1 (en) 2015-05-07
HRP20191070T1 (hr) 2019-09-20
ES2727532T3 (es) 2019-10-16
WO2015066426A2 (en) 2015-05-07
AU2014342162A1 (en) 2016-05-26
US9968653B2 (en) 2018-05-15
US10251938B2 (en) 2019-04-09
US9592271B2 (en) 2017-03-14
US20160045566A1 (en) 2016-02-18
AU2014342162B2 (en) 2020-01-02
HUE044660T2 (hu) 2019-11-28
EP3062811A2 (en) 2016-09-07
PL3062811T3 (pl) 2019-10-31
SMT201900295T1 (it) 2019-07-11
MX377089B (es) 2025-03-07
US10525106B2 (en) 2020-01-07
DK3062811T3 (da) 2019-05-13
JP2016537416A (ja) 2016-12-01
MX2016005446A (es) 2017-01-05
PT3062811T (pt) 2019-06-11
US20190175699A1 (en) 2019-06-13
CY1121710T1 (el) 2020-07-31
US20180228870A1 (en) 2018-08-16
WO2015066426A3 (en) 2015-07-23
US20170136090A1 (en) 2017-05-18
LT3062811T (lt) 2019-05-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10525106B2 (en) Angiopoietin-based interventions for treating cerebral malaria
CN106062000B (zh) 通过施用il-4r拮抗剂治疗皮肤感染的方法
US9387231B2 (en) Compositions comprising a Brd4 antagonist and methods for the treatment of HIV
EP3068803B1 (en) Dosing regimens for use with pcsk9 inhibitors
TR201906843T4 (tr) Hızlı etkili insülin bileşimleri.
WO2013148350A2 (en) Anti-light antibody therapy for inflammatory bowel disease
KR20230006049A (ko) Il-4r 저해제 투여에 의한 중증 아토피 피부염의 치료 방법
US20230183329A1 (en) Combination therapy for ttr amyloidosis
TWI859192B (zh) 包含抗il-6受體抗體之bbb功能低下之抑制劑
KR20160133479A (ko) 자가면역 질환의 치료를 위한 조합 요법
Furrer et al. Intranasal delivery of ESBA105, a TNF-alpha-inhibitory scFv antibody fragment to the brain
WO2023122355A2 (en) Methods of treating or preventing infusion-related reactions
EP2196211B1 (en) Apolactoferrin compositions for use in treating viral hepatitis c
HK1228301B (en) Angiopoietin-based interventions for treating cerebral malaria
HK1228301A1 (en) Angiopoietin-based interventions for treating cerebral malaria
KR20230035524A (ko) Covid-19 치료제로서 e 단백질 채널 차단제 및 orf3 억제제
Wen et al. Specific treatment for acute pancreatitis
HK40102414A (en) Methods for treating skin infection by administering an il-4r antagonist
WO2024259323A2 (en) Pharmaceutical compositions for targeted delivery of bioactive agents with improved bioavailability and methods of use
Martins et al. Glyceryl trinitrate for cerebral malaria
HK1228934B (en) Methods for treating skin infection by administering an il-4r antagonist
HK1228934A1 (en) Methods for treating skin infection by administering an il-4r antagonist