RO128587A2 - Mulberry tree vitroplantules inoculated with endomycorrhizae of the vesicular-arbuscular type intended for cultivating lead-contaminated soils and process for obtaining the same - Google Patents
Mulberry tree vitroplantules inoculated with endomycorrhizae of the vesicular-arbuscular type intended for cultivating lead-contaminated soils and process for obtaining the same Download PDFInfo
- Publication number
- RO128587A2 RO128587A2 ROA201100916A RO201100916A RO128587A2 RO 128587 A2 RO128587 A2 RO 128587A2 RO A201100916 A ROA201100916 A RO A201100916A RO 201100916 A RO201100916 A RO 201100916A RO 128587 A2 RO128587 A2 RO 128587A2
- Authority
- RO
- Romania
- Prior art keywords
- mulberry
- vesicular
- arbuscular
- vitroplantules
- dose
- Prior art date
Links
Abstract
Description
VITROPLANTULE DE DUD INOCULATE CU ENDOMICORIZE DE TIP VEZICULAR-ARBUSCULAR DESTINATE CULTIVĂRII SOLURILOR CONTAMINATE CU PLUMB ȘI PROCEDEU DE OBȚINEREDUD VITROPLANTS INOCULATED WITH VESICULAR-ARBUSCULAR ENDOMYCORIZES FOR THE CULTIVATION OF LEAD-CONTAMINATED SOILS AND PROCESS FOR OBTAINING
AUTORI: Diaconescu Cristiana, Tanase Doina, Ichim Maria, Urdes Laura, Dinita Georgeta, Popa Razvan, Visan Adriana, Ichim Liviu-Ionel, Enache RamonaAUTHORS: Diaconescu Cristiana, Tanase Doina, Ichim Maria, Urdes Laura, Dinita Georgeta, Popa Razvan, Visan Adriana, Ichim Liviu-Ionel, Enache Ramona
Domeniul tehnic la care se refera invenția: AgriculturaTechnical field to which the invention relates: Agriculture
Invenția se referă la obținerea unui nou material săditor de dud prin metode biotehnologice, acesta urmând a fi utilizat pentru cultivare pe solurilor contaminate cu plumb și pentru practicarea sericiculturii, respectiv pentru obținere gogoșilor de mătase de la specia Bombyx mori L. destinate industriei textile.The invention relates to obtaining a new mulberry planting material by biotechnological methods, which will be used for cultivation on lead-contaminated soils and for practicing sericulture, respectively for obtaining silk donuts from Bombyx mori L. for the textile industry.
Stadiul actual al tehnicii:Current state of the art:
Plantele de dud aparținând genului Morus sunt considerate plante cu importanță economică pentru sericicultură, frunza de dud constituind unica sursă de hrană a viermilor de mătase din specia Bombyx mori. Din punct de vedere botanic plantele de dud aparțin diferitelor specii din genul Morus, fiind plante unisexuat dioice, înmulțite pe cale vegetativă sau sexuată.Mulberry plants belonging to the genus Morus are considered plants of economic importance for sericulture, the mulberry leaf being the only source of food for silkworms of the species Bombyx mori. From a botanical point of view, mulberry plants belong to different species of the genus Morus, being unisexual dioecious plants, propagated vegetatively or sexually.
Valorificând totipotența celulelor și țesuturilor meristematice ale plantelor de dud în scopul clonării in vitro s-au obținut rezultate pozitive men ionate zn lucrări internaționale și naționale.By capitalizing on the totipotency of the meristematic cells and tissues of mulberry plants for the purpose of in vitro cloning, positive results mentioned in international and national works were obtained.
Pentru îmbunătățirea parametrilor bioproductivi ai vitroplantulelor de dud s-a luat in considerare biofertilizarea acestora cu endomicorize de tip vezicular arbuscular, rezultatele experimentale fiind extrem de încurajatoare pentru cultura dudului in România și care permit utilizarea pentru prima dată in țara noastră a acestui tip de material săditor.In order to improve the bioproductive parameters of mulberry vitroplants, their biofertilization with arbuscular vesicular endomycorrhizae was considered, the experimental results being extremely encouraging for mulberry culture in Romania and allowing the use of this type of planting material for the first time in our country.
Asociațiile de tip vezicular arbuscular sunt cele mai răspândite tipuri de micorize prezente in sistemele agricole, ceea ce explică interesul crescut in manipularea lor pentru a fi incorporate în practicile de producție.Arbuscular vesicular associations are the most common types of mycorrhizae present in agricultural systems, which explains the increased interest in their handling to be incorporated into production practices.
Inocularea cu endomicorize vezicular-arbusculare constituie o metodă de cultivare cu efecte benefice in scopul reducerii aplicării de fertilizând chimici și de pesticide, caInoculation with vesicular-arbuscular endomycorrhizae is a method of cultivation with beneficial effects in order to reduce the application of chemical fertilizers and pesticides, as
O 1 1 - O O 9 1 6 - t 9 -09' 2011 element cheie in abordările durabile din agricultură și horticultură;se știe că micorizele sunt capabile să colonizeze diferite habitate, succesul lor ecologic reflectând un grad ridicat de diversitate a capacităților genetice și fiziologice ale fungilor endofiti. Aproape 6.000 de specii de fungi dintre Zygo-, Asco- si Basidiomicete au fost identificate ca micorizale, iar odată cu dezvoltarea tehnicilor moleculare noi specii micorizale și noi tipuri de asociații sunt descrise pe baza amprentării ADN.O 1 1 - OO 9 1 6 - t 9 -09 '2011 key element in sustainable approaches in agriculture and horticulture, it is known that mycorrhizae are able to colonize different habitats, their ecological success reflecting a high degree of diversity of genetic and physiological capabilities of endophytic fungi. Almost 6,000 species of fungi between Zygo-, Asco- and Basidiomycetes have been identified as mycorrhizal, and with the development of molecular techniques new mycorrhizal species and new types of associations are described based on DNA fingerprinting.
Efectul major al simbiozelor micorizale asupra plantelor gazdă constă în creșterea aportului de elemente minerale, în special al celor care în stare ionică prezintă o mobilitate redusă sau care sunt prezente in concentrații suboptimale (fosfor, amoniu, zinc,cupru, inclusiv contaminanti precum plumbul). Micorizele ajută plantele gazdă să reziste la stresul abiotic prin ameliorarea deficienței nutrienților, contribuie la creșterea toleranței la secetă, salinitate și la poluare, inclusiv cu metale grele precum plumbul.The major effect of mycorrhizal symbiosis on host plants is to increase the intake of minerals, especially those in ionic state with reduced mobility or which are present in suboptimal concentrations (phosphorus, ammonium, zinc, copper, including contaminants such as lead). Mycorrhizae help host plants withstand abiotic stress by ameliorating nutrient deficiencies, helping to increase tolerance to drought, salinity and pollution, including heavy metals such as lead.
Importanța cercetărilor care fac obiectul invenției:Importance of the research which is the subject of the invention:
Potențialul biosintetic al rădăcinilor de la dud este puțin studiat pe plan mondial, fapt ce evidențiază importanța cercetărilor inițiate pe plan național privind stabilirea de clone in condiții “in vitro” și experimentarea biofertilizarii cu endorize vezicii lararbuseulare a vitroplantulelor și a plantulelor de dud.The biosynthetic potential of mulberry roots is little studied worldwide, which highlights the importance of research initiated nationally on the establishment of clones in "in vitro" conditions and experimenting with biofertilization with endorheic bladder of vitroplants and mulberry seedlings.
Combinarea efectului fungilor de micorize privind ecosistemul plantă sol. la vitroplantele de dud creează premiza utilizării cu succes a acestora in fitoremediere, adică în procesul de detoxifierea a mediului poluat cu ajutorul acestor plante, abordare biotehnologică de mare perspectivă.Combining the effect of mycorrhizal fungi on the soil plant ecosystem. in mulberry vitroplants it creates the premise of their successful use in phytoremediation, ie in the process of detoxification of the environment polluted with the help of these plants, a biotechnological approach of great perspective.
Obiectivele invenției:Objectives of the invention:
Principalul obiectiv al invenției a constat în obținerea unui nou material săditor de dud. printr-un procedeu biotehnologic, sub formă de vitroplantule de dud inoculate cu endomicorize de tip vezicular arbuscular destinate solurilor contaminate cu plumb.The main object of the invention was to obtain a new mulberry planting material. by a biotechnological process, in the form of mulberry seedlings inoculated with arbuscular vesicular endomycorrhizae for lead-contaminated soils.
Avantajele invenției:Advantages of the invention:
-Noul tip de material săditor de dud prezintă o rezistență sporită la agenții patogeni specifici;-The new type of mulberry planting material has an increased resistance to specific pathogens;
-Sistemul radicular al acestui material săditor permite o mobilizare și o absorbție mai bună a macro și micro elementelor din sol, inclusiv a unor metale grele imobilizate in particulelor de sol, realizând astfel și decontaminarea solurilor la nivele optime de (λ’2 0 1 1 - 0 0 9 1 6 -1 9 -D9- 2011 conținut.-The root system of this planting material allows a better mobilization and absorption of macro and micro elements in the soil, including heavy metals immobilized in soil particles, thus achieving soil decontamination at optimal levels of (λ'2 0 1 1 - 0 0 9 1 6 -1 9 -D9- 2011 content.
-Noul tip de material săditor de dud permite valorificarea terenurilor contaminate cu metale grele(zinc, cupru, plumb) necesare agriculturii, respectiv sericiculturii.-The new type of mulberry planting material allows the capitalization of lands contaminated with heavy metals (zinc, copper, lead) necessary for agriculture, respectively sericulture.
-Cercetările recente au abordat aspecte privind înființarea unor plantații de dud cu destinație sericicola pe terenurile contaminate cu plumb, ce permit valorificarea economica a acestora prin includerea in circuitul agricol;-Recent researches have addressed aspects regarding the establishment of mulberry plantations for sericulture on lead-contaminated lands, which allow their economic capitalization by inclusion in the agricultural circuit;
-Cercetările efectuate de către autorii invenției au condus la obținerea unui material săditor de dud cu toleranță fiziologică totală pe solurile contaminate cu plumb.- The researches carried out by the authors of the invention led to the obtaining of a mulberry planting material with total physiological tolerance on lead contaminated soils.
Etapele invenției:STEPS OF THE INVENTION:
Realizarea invenției consta în parcurgerea următoarelor etape de execuție:The realization of the invention consists in completing the following execution steps:
Λ Realizarea vitroplantulelor de dud ; Λ Making mulberry seedlings;
Λ Obținerea inocului endomicorizal de tip vezicular arbuscular sub formă de inocul brut provenit din biomasa radiculara a plantelor de Zea mays sau Alluium cepa. sau sub forma de inocul comercial; Λ Obtaining the arbuscular vesicular endomycorrhizal inoculum in the form of crude inoculum from the root biomass of Zea mays or Alluium cepa plants. or in the form of a commercial inoculum;
Λ Realizarea de vitroplantule de dud inoculate cu endomicorize de tip vezicular arbuscular si repicarea acestora; Λ Making mulberry vitroplants inoculated with arbuscular vesicular endomycorrhizae and their transplantation;
Λ Controlul colonizării prin metoda de colorare cu Tryphan blue , selecția vitroplantulelor de dud inoculate cu endomicirize vezicular arbusculare din cîmpul de repicare și suprainocularea materialului săditor de dud necolonizat,. Λ Control of colonization by staining method with Tryphan blue, selection of mulberry vitroplants inoculated with arbuscular vesicular endomyciruses from the transplantation field and overraining of non-colonized mulberry seedlings.
Prezentarea detaliată a modului de realizare a invenției:Detailed presentation of the embodiment of the invention:
Realizare vitroplantulelor de dud cuprinde parcurgerea unui procedeu de lucru laborios.The production of mulberry seedlings involves a laborious work process.
Biotehnologiile de multiplicare a plantelor de dud fac referire la obținerea de vitroplantule prin culturi de țesuturi, meristeme și in ultima perioadă de timp prin culturi de celule.Formule nutritive pentru mediile de cultură au fost standardizate ,fiind stabilite pe baza unor testări privind tipul și concentrațiile diferitelor substanțe constitutive în funcție de procesul morfogenetic ce urmează să fie indus.Biotechnologies for the multiplication of mulberry plants refer to the obtaining of in vitro seedlings through tissue cultures, meristems and lately through cell cultures. Nutritional formulas for culture media have been standardized, being established based on tests on the type and concentrations different constituent substances depending on the morphogenetic process to be induced.
Pentru multiplicare in vitro a plantelor de dud este utilizat mediul bazai Murashige Skoog (1962), bogat in azot, care s-a dovedit a asigura la nivel optim elementele nutritive pentru dezvoltarea explantelor cultivate. Acest mediu bazai constituie formula nutritivă (χ-2 0 1 1 - 0 0 9 1 θ-1 9 -09- 2011 optimă pentru inițierea culturilor de meristeme și de apexuri.For in vitro multiplication of mulberry plants, the nitrogen-rich Murashige Skoog base (1962) is used, which has been shown to provide optimal nutrients for the development of cultivated explants. This basic environment is the optimal nutrient formula (χ-2 0 1 1 - 0 0 9 1 θ-1 9 -09- 2011 for the initiation of meristem and apex cultures.
Multiplicare in vitro a plantelor de dud se face având drept sursă de explante lăstari vegetativi obținuți din muguri dorminzi de iarnă , stimulați să intre in vegetație.In vitro multiplication of mulberry plants is done having as a source of explants vegetative shoots obtained from dormant winter buds, stimulated to enter the vegetation.
Procedeul de lucru parcurge următoarele etape:The work process goes through the following steps:
-Obținerea sursei de explante se realizează prin forțarea lăstarilor lignificați recoltați în perioada noiembrie-decembrie din colecția sau plantația de dud, perioadă de repaos vegetativ. Forțarea se realizează prin simularea condițiilor de dezmugurire, prin amplasarea acestor lăstari în vase cu apă de robinet si asigurarea unei temperaturi ambientale de 24-25°C. După 60 de zile din mugurii dorminzi se vor dezvolta apical lăstarii erbacei care vor constitui sursa de explante ;-Obtaining the source of explants is done by forcing the lignified shoots harvested in November-December from the mulberry collection or plantation, a period of vegetative rest. The forcing is performed by simulating the budding conditions, by placing these shoots in vessels with tap water and ensuring an ambient temperature of 24-25 ° C. After 60 days from the dormant buds will grow apically the weed shoots that will be the source of explants;
-Sterilizarea materialului vegetal constă într-o operație de spălare cu apă normală de robinet (presterilizare) a lăstarilor ,necesară pentru eliminarea mecanică a unor contaminanți; Lăstarii erbacei sunt tăiați în bucăți de cea. l,5-2,0cm fiecare conținând un mugure axilar care va deveni un explant nodal,rezultînd totdodată și explante apicale. Sterilizarea efectivă se realizează cu HgCL2 in concentrație de 0,03 % timp de 30 de minute , explantele nodale fiind amestecate în continuu în această soluție , după care sunt spălate cu apă distilată timp de 10 min a câte 3 reprize. Sterilizarea poate fi realizată și prin utilizarea unei soluții de 3-5 % de hipoclorit de potasiu (produsul comercial Domestos).-Sterilization of the vegetal material consists in a washing operation with normal tap water (presterilization) of the shoots, necessary for the mechanical elimination of some contaminants; The shoots of the weed are cut into pieces by the. 1.5-2.0 cm each containing an axillary bud that will become a nodal explant, resulting in apical explants. The effective sterilization is performed with HgCL 2 in a concentration of 0.03% for 30 minutes, the nodal explants being continuously mixed in this solution, after which they are washed with distilled water for 10 minutes in 3 rounds. Sterilization can also be done by using a 3-5% solution of potassium hypochlorite (commercial product Domestos).
-Inițierea culturii primare (inocularea) are loc în condiții aseptice la hota de flux laminat. Mediul de cultură utilizat este de tip Murashige - Skoog cu 0,8 % agar, distrubuit în vase de cultură tip “baby food mediul de cultură fiind suplimentat cu hormoni de multiplicare ( benzinaminopurina BAP si kinetina KIN) în următoarea combinație de dozaj:-Initiation of the primary culture (inoculation) takes place in aseptic conditions at the laminated flow hood. The culture medium used is of the Murashige - Skoog type with 0.8% agar, distributed in baby food culture media, the culture medium being supplemented with multiplication hormones (benzinaminopurine BAP and kinetin KIN) in the following dosage combination:
lmg/1 BAP + 1 mg/1 KIN pentru soiurile de dud ce emit ușor rădăcini advemtive mg/l BAP + 2 mg/1 KIN pentru soiurile de dud reticente Vasele de cultură precum și mediul de cultură sunt sterilizate prin autoclavare realizată la 121 °C și la o presiune de 1,1-1,2 atm ^2011-0091^-1 9 -09- 2011 înainte de autoclavare mediului bazai trebuie să i se corecteze pH-ul la valori de 5.65,8.lmg / 1 BAP + 1 mg / 1 KIN for mulberry varieties that easily emit advemtive roots mg / l BAP + 2 mg / 1 KIN for reluctant mulberry varieties The culture vessels as well as the culture medium are sterilized by autoclaving performed at 121 ° C and at a pressure of 1.1-1.2 atm ^ 2011-0091 ^ -1 9 -09- 2011 before autoclaving the base medium, its pH must be corrected to values of 5.65.8.
După inoculare (așezarea explantelor nodale in vasele de cultură sterilizate pe mediul de cultură cu respectarea polarității normale) vasele de cultură sunt sterilizate prin flacără și opturate cu rola parafilm, fiind trecute în camera de creștere.After inoculation (placement of nodal explants in sterilized culture vessels on the culture medium with respect to normal polarity) the culture vessels are sterilized by flame and sealed with parafilm roll, being passed into the growth chamber.
-Incubația culturii inițiale-multiplicarea constă în transferarea în camera de incubare (de creștere) a vaselor de cultură pentru o perioadă de 15 zile la o temperatură de 2528°C, iluminată arificial, cu o fotoperioadă de 16 : 8, la o intensitate de 3000 lux, utilizînd un temporizator; incubația culturii durează 15-21 zile.-Incubation of the initial culture-multiplication consists in the transfer to the incubation (growth) chamber of the culture vessels for a period of 15 days at a temperature of 2528 ° C, artificially illuminated, with a photoperiod of 16: 8, at an intensity of 3000 lux, using a timer; culture incubation lasts 15-21 days.
-Subcultivarea : este necesară pentru obținerea clonelor de la același apex in condițiile utilizării apexurilor caulinare și constă în transferarea de la cultura inițială a unor explante în vase de cultură cu mediu proaspăt.-Subcultivation: it is necessary to obtain clones from the same apex under the conditions of using cauline apexes and consists in transferring from the initial culture some explants in culture vessels with fresh medium.
-înrădăcinarea și regenerarea plantelor autonome se realizează atunci când lăstarii dezvoltați în vasele de cultură ating lungimea de 2,5-3,0 cm și are drept scop obținerea radicelelor prin schimbarea mediului de cultură la care formula rămâne neschimbată (cu excepția agarului care nu se mai adaugă),mediul de cultura fiind lichid. Menținerea vitroplantulelor în mediul de cultură lichid se realizează prin utilizarea unor punți mici de hîrtie de filtru. înrădăcinarea fiind asigurată prin suplimentarea mediului de cultură cu hormonul IBA (acidul indolilbutiric) în concentrație de 1 mg /1. Condițiile de mediu, de temperatură și lumină se păstrează la aceeași parametri. Primele proimordii radiculare apar la un interval de 10-15 zile de la trecerea pe mediul de cultură lichid.-rooting and regeneration of autonomous plants is achieved when the shoots developed in the culture vessels reach a length of 2.5-3.0 cm and aims to obtain the roots by changing the culture medium in which the formula remains unchanged (except for the agar which is not he adds), the culture medium being liquid. The maintenance of in vitro seedlings in the liquid culture medium is achieved by using small filter paper bridges. rooting is ensured by supplementing the culture medium with the hormone IBA (indolylbutyric acid) in a concentration of 1 mg / l. The environmental, temperature and light conditions are kept at the same parameters. The first root proimordia appear at an interval of 10-15 days after the transition to the liquid culture medium.
-Aclimatizarea este stadiul in care plantele sunt transferate în vase de cultură cu apă de robinet după ce în prealabil au fost bine spălate de resturile mediului de cultură; Acest stadiu ex situ este necesar pentru fortificarea sistemului radicular și adaptarea sistemului foliar al plantulelor la un conținut de umiditate scăzut al mediului ambiant, pentru depășirea așa numitului ”șoc de aclimatizare ‘. După o perioadă de 15 zile plantulele sunt transferate în ghivece care conțin un substrat de cultură solid format din pământ de țelină, mraniță și nisip în proporție de 1:1:1 cu un pH de 5,8; Substratul solid folosit pentru transferul vitroplantulelor trebuie autoclavat (tratament profilactic). în condiții de microclimat optim vitroplantulele de dud se vor lignifica ,în vederea repicării. după o-Acclimatization is the stage in which the plants are transferred to culture vessels with tap water after they have been thoroughly washed by the remains of the culture medium; This ex situ stage is necessary to strengthen the root system and adapt the foliar system of the seedlings to a low moisture content of the environment, to overcome the so-called 'acclimatization shock'. After a period of 15 days the seedlings are transferred to pots containing a solid culture substrate consisting of celery, manure and sand in a ratio of 1: 1: 1 with a pH of 5.8; The solid substrate used for in vitro seedling transfer must be autoclaved (prophylactic treatment). under optimal microclimate conditions, the mulberry seedlings will lignify in order to transplant. after a
-“2 0 1 1 - 0 0 9 1 6 -1 9 -09- 2011 /- “2 0 1 1 - 0 0 9 1 6 -1 9 -09- 2011 /
perioadă minimă de 90 de zile.minimum period of 90 days.
Obținerea inoculilor endomicorizali de tip vezicular-arbuscular se realizează procedînd astfel pentru inoculul brut:Obtaining vesicular-arbuscular endomycorrhizal inocula is performed by proceeding as follows for the raw inoculum:
Din parcelele cultivate cu porumb sau ceapă, se recoltează biomasa radiculară a plantelor, pe o adîncime a solului de 20 - 30 cm. urmînd a fi condiționată prin mărunțirea materialului vegetal, cu ajutorul unei mori cu ciocănele, inclusiv a particulelor de sol aderente , urmată de omogenizarea cu ajutorul unui melc transportor. Perioada optimă pentru recoltarea biomasei radiculare este în fenofaza de postrecoltare a producției principale. Inoculul brut astfel obținut se păstrează în condiții de depozitare cu umiditate relativă a aerului de maximum 60% , fără pericol de mucegai sau de rozătoare. Forma de prezentare poate fi vrac sau în saci de 50 kg.From the plots cultivated with corn or onions, the root biomass of the plants is harvested, on a soil depth of 20-30 cm. to be conditioned by crushing the plant material, with the help of a hammer mill, including adherent soil particles, followed by homogenization with the help of a conveyor auger. The optimal period for root biomass harvesting is in the post-harvest phenophase of the main production. The raw inoculum thus obtained shall be stored under conditions of storage with a relative humidity of not more than 60%, without danger of mold or rodents. The presentation can be in bulk or in 50 kg bags.
Utilizarea biomasei radiculare de porumb sau ceapă asigură un inocul brut de endomicorize de tip vezicular- arbuscular sigur , dar pentru siguranță , înainte de utilizare, se procedează la controlul acestuia , prin metoda de colorare Trypan blue.The use of corn or onion root biomass ensures a safe inoculation of vesicular-arbuscular endomycorrhizae safe, but for safety, before use, it is controlled by the Trypan blue staining method.
Biofertilizarea vitroplantulelor de dud cu endomicorize se poate realiza și prin folosirea unor biofertilizanți comerciali,specializați pentru tipul vezicular-arbuscular.The biofertilization of mulberry vitroplants with endomycorrhizae can also be achieved by using commercial biofertilizers, specialized for the vesicular-arbuscular type.
Realizarea vitroplantulelor de dud inoculate cu endomicorize de tip vezicular - arbuscular și repicarea acestora cuprinde lucrările de obținere a substratului de repicare format din pămînt de țelină , mraniță și nisip, în proporții egale, ce se sterilizează prin autoclavare la temperatura de 110°C , timp de 60 de minute. După răcire substratul de repicare este amestecat cu inoculul brut în doză de 50 grame/ 1000 grame amestec de substrat sau în doză de 30 mg inocul comercial/ 1000 grame de substrat. Biofertilizanții comerciali conțin flora activă și linii selectate ale fungiilor de Glomus mosseae, G. fasciculatum si Sclerocystis sp.The production of mulberry seedlings inoculated with vesicular-arbuscular endomycorrhizae and their transplantation includes the works of obtaining the transplanting substrate consisting of celery, manure and sand, in equal proportions, which is sterilized by autoclaving at a temperature of 110 ° C, time for 60 minutes. After cooling the filler substrate is mixed with the crude inoculum at a dose of 50 grams / 1000 grams of substrate mixture or at a dose of 30 mg the commercial inoculum / 1000 grams of substrate. Commercial biofertilizers contain the active flora and selected fungal lines of Glomus mosseae, G. fasciculatum and Sclerocystis sp.
Substratul de repicare inoculat se pune în cutii de repicare sau se modelează în brazde de repicare,cu o înălțime mimimă de 40 cm. Plantulele de dud se repică în substratul biofertilizat, asigurînd o densitate de 100 plantule / mp., perioada de inoculare fiind de 45 -50 zile,. Lucrările de îngrijire executate în această perioadă sunt plivitul, respectiv prășitul și udarea sau irigarea. Perioada de repicare poate fi prelungită pentru întreaga perioada de vegetație, dacă se utilizează inaculul comercial.The inoculated transplant substrate is placed in transplant boxes or modeled in transplant furrows, with a minimum height of 40 cm. Mulberry seedlings are transplanted into the biofertilized substrate, ensuring a density of 100 seedlings / sqm, the inoculation period being 45-50 days. The care works performed during this period are weeding, hoeing and watering or irrigation, respectively. The pruning period can be extended for the entire vegetation period, if the commercial inaculum is used.
Controlul colonizării și selecția vitroplantulelor de dud inoculate se realizează /-2011-00916-1 9 -09- 2011 prin aplicarea metodei de colorare cu Trypan blue.The control of the colonization and the selection of the inoculated mulberry vitroplants are performed / -2011-00916-1 9 -09- 2011 by applying the staining method with Trypan blue.
Controlul și selecția vitroplantulelor de dud inoculate prin această metodă se aplică prin control randomizat pe diagonala cîmpului de repicare la un număr minim de plante/ 1000 vitroplantule.The control and selection of mulberry seedlings inoculated by this method is applied by randomized control on the diagonal of the transplanting field to a minimum number of plants / 1000 seedlings.
Vitroplantulele de dud necolonizate se vor suprainocula prin administrarea inocului brut sau comercial în dozele menționate, în zona radiculară a fiecărei plantule,toate plantele urmînd a fi udate zilnic, timp de 7 zile, apoi udările următoare devenind săptămînale . Suprainocularea se poate repeta de cel mult 3 ori,.la sfirșitui perioadei de vegetație, existența unui număr de 10% de plante de dud necolonizate fiind în limite normale.The non-colonized mulberry seedlings will be superoculated by administering the raw or commercial inoculum in the mentioned doses, in the root zone of each seedling, all the plants being watered daily for 7 days, then the next waterings becoming weekly. The superoculation can be repeated no more than 3 times, at the end of the vegetation period, the existence of a number of 10% of uncolonized mulberry plants being within normal limits.
Caracteristicile genetice ale plantulelor de dud colonizate sunt identice cu formele parentale, iar conținutul de proteină a crescut, fiind de peste 28,5% comparativ cu o medie de 26,5%} la vitroplantulele fără endomicorize. Vitroplantulele de dud colonizate cu endomicorize au prezentat o rată de supraviețuire de 100°% pe substrat contaminat cu plumb, manifestînd o toleranță fiziologică totală.The genetic characteristics of colonized mulberry seedlings are identical to the parental forms, and the protein content increased, being over 28.5% compared to an average of 26.5%} in vitroplants without endomycorrhizae. Mulberry seedlings colonized with endomycorrhizae showed a survival rate of 100 °% on lead-contaminated substrate, showing a total physiological tolerance.
Modul de aplicare industrială a invenției:Industrial application of the invention:
Biotehnologiile utilizate pot fi aplicate în toate laboratoarele și centrele de biotehnologii la scară industrială. Rezultatele cercetărilor care au permis obținerea noului tip de material săditor de dud s-au testat în condiții de producție industrială obtinîndu-se un număr de peste 10.000 vitroplantule de dud inoculate cu endomicorize de tip vezicular arbuscular, pe durata unei luni normale de lucru. Toate terenurile contaminate cu plumb pot fi cultivate cu noul tip de material săditor de dud pentru practicarea sericiculturii, activitate agricolă nealimentară.The biotechnologies used can be applied in all laboratories and biotechnology centers on an industrial scale. The results of the researches that allowed the obtaining of the new type of mulberry planting material were tested in industrial production conditions, obtaining a number of over 10,000 mulberry seedlings inoculated with arbuscular vesicular endomycorrhizae, during a normal working month. All land contaminated with lead can be cultivated with the new type of mulberry planting material for the practice of sericulture, non-food agricultural activity.
(ξ- 2 Ο 1 1 - 0 0 9 1 6 -1 9 -09- 2011(ξ- 2 Ο 1 1 - 0 0 9 1 6 -1 9 -09- 2011
QJQJ
VITROPLANTULE DE DUD INOCULATE CU ENDOMICORIZE DE TIP VEZICULAR-ARBUSCULAR DESTINATE CULTIVĂRII SOLURILOR CONTAMINATE CU PLUMB ȘI PROCEDEU DE OBȚINEREDUD VITROPLANTS INOCULATED WITH VESICULAR-ARBUSCULAR ENDOMYCORIZES FOR THE CULTIVATION OF LEAD-CONTAMINATED SOILS AND PROCESS FOR OBTAINING
AUTORI: Diaconescu Cristiana, Tanase Doina, Ichim Maria, Urdes Laura, DinitaAUTHORS: Diaconescu Cristiana, Tanase Doina, Ichim Maria, Urdes Laura, Dinita
Georgeta, Popa Razvan, Visan Adriana, Ichim Liviu-Ionel, Enache RamonaGeorgeta, Popa Razvan, Visan Adriana, Ichim Liviu-Ionel, Enache Ramona
Claims (1)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ROA201100916A RO128587B1 (en) | 2011-09-19 | 2011-09-19 | Mulberry tree - morus spp. vitroplantules inoculated with endomycorrhizae of the vesicular-arbuscular type intended for cultivating lead-contaminated soils and process for obtaining the same |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ROA201100916A RO128587B1 (en) | 2011-09-19 | 2011-09-19 | Mulberry tree - morus spp. vitroplantules inoculated with endomycorrhizae of the vesicular-arbuscular type intended for cultivating lead-contaminated soils and process for obtaining the same |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RO128587A2 true RO128587A2 (en) | 2013-07-30 |
| RO128587B1 RO128587B1 (en) | 2016-02-26 |
Family
ID=48868826
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ROA201100916A RO128587B1 (en) | 2011-09-19 | 2011-09-19 | Mulberry tree - morus spp. vitroplantules inoculated with endomycorrhizae of the vesicular-arbuscular type intended for cultivating lead-contaminated soils and process for obtaining the same |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RO (1) | RO128587B1 (en) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104255249A (en) * | 2014-09-17 | 2015-01-07 | 酒泉下河清生态农业有限公司 | Planting method of protein mulberry |
-
2011
- 2011-09-19 RO ROA201100916A patent/RO128587B1/en unknown
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN104255249A (en) * | 2014-09-17 | 2015-01-07 | 酒泉下河清生态农业有限公司 | Planting method of protein mulberry |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RO128587B1 (en) | 2016-02-26 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN107711290B (en) | Culture medium for mycorrhizal edible fungus symbiotic seedling and synchronous culture method thereof | |
| Wen et al. | Efficient protocols for the micropropagation of tree peony (Paeonia suffruticosa ‘Jin Pao Hong’, P. suffruticosa ‘Wu Long Peng Sheng’, and P.× lemoinei ‘High Noon’) and application of arbuscular mycorrhizal fungi to improve plantlet establishment | |
| CN102204473A (en) | Method for cultivating edible fungi by using medium containing ingredients of kiwi branches/trunks | |
| CN103858771B (en) | A kind of transplanting method of corn gene plantlet in vitro | |
| CN105104076A (en) | Method for accelerating growth of industrial tea seedlings | |
| ES2364684B1 (en) | PROCEDURE FOR OBTAINING A MICORRIZOGEN AGENT. | |
| Yadav et al. | A reliable protocol for micropropagation of Gloriosa superba L.(Colchicaceae) | |
| CN110771425A (en) | Factory three-dimensional cultivation method for morchella | |
| RO128587A2 (en) | Mulberry tree vitroplantules inoculated with endomycorrhizae of the vesicular-arbuscular type intended for cultivating lead-contaminated soils and process for obtaining the same | |
| CN102613075A (en) | Method for breeding floating ferns of endangered ferns | |
| ES2706099B2 (en) | New strain of Trichoderma aggressivum fsp europaeum, compositions and applications thereof | |
| Emara et al. | Role of mycorrhiza as biofertilization of banana grand naine on nursery stage | |
| Ridgway et al. | Optimising the medium for producing arbuscular mycorrhizal spores and the effect of inoculation on grapevine growth | |
| Hossain | Ex vitro seedling development from in vitro rhizome-like bodies in eulophia promensis lindl.: a new technique for orchid propagation | |
| Khalil et al. | Effects of different nutrient solution formulations supplemented with willow bark or juvenile branches decoction on growth of Coleus plants | |
| Parya | Effect of integrated plant nutrient system for gerbera flower production under protected cultivation | |
| RU2206976C2 (en) | Method for multiplying of normalized potato plants | |
| CN108464207A (en) | A kind of cultural method improving rice tissue-cultured seedling transplanting survival rate | |
| JP6384087B2 (en) | Plant cultivation method | |
| CN108371101A (en) | A kind of the induction propagating culture medium and application process of potato son potato | |
| Zaprianova et al. | Micropropagation of Angelonia angustifolia from stem explants | |
| Machado et al. | Mycorrhizal synthesis between Lactarius deliciosus and Arbutus unedo under nursery conditions | |
| Manuel et al. | Preliminary Evaluation of the Potential of Macromycetes as Mediators in Bio-Hardening of Orchid Plantlets | |
| JP2011168532A (en) | Composition for cultivating plant comprising plant sprout-fermented liquid and bacillus subtilis, and method for cultivating plant | |
| Yang et al. | Effects of intercropping with post-grafting generation of Impatiens balsamina on potassium uptake of grape seedlings under cadmium stress |