RO116451B1

RO116451B1 - Procedeu pentru prelungirea longevitatii semintelor conditionate

Info

Publication number: RO116451B1
Application number: RO95-00453A
Authority: RO
Inventors: Job Schipper; Der Toorn Peter Van; Tonko Bruggink
Original assignee: Sandoz Ag
Priority date: 1994-03-01
Filing date: 1995-03-01
Publication date: 2001-02-28
Also published as: RU2150188C1; PL307464A1; IL112804A0; CZ288602B6; HUT75577A; AU703910B2; GR3036461T3; HU9500615D0; CZ53595A3; SK283839B6; DE69521072T2; GB9403941D0; DE69521072D1; MA23467A1; JPH07255218A; ES2159309T3; PL180417B1; ATE201551T1; KR950030764A; US6313377B1

Abstract

Inventia se refera la un procedeu pentru prelungirea longevitatii semintelor conditionate, in scopul depozitarii acestora. Procedeul se aplica semintelor conditionate din anumite specii, de legume si flori, avand acelasi continut in apa (MC), in care respectivele seminte sunt supuse stresului hidric, tratamentului termic sau combinatiei acestora, dupa care acestea sunt reuscate pana la un continut, in apa, tipic semintelor netratate, in vederea depozitarii.

Description

Invenția se referă la un procedeu pentru prelungirea longevității semințelor condiționate, cu un conținut în apă cuprins între 2% și 15% din greutatea inițială, care își mențin rata de germinație, utilizat în agricultură, în scopul depozitării îndelungate a acestora.

Se cunoaște un procedeu care se referă la tratamentul semințelor cu apă într-o matrice solidă (EP 309551 B1).

Se mai cunoaște un procedeu de tratare a semințelor germinate, care se aplică speciilor de legume cu semințe mici.

Procedeul constă în îmbibarea cu apă a semințelor într-o proporție considerabilă până la emergența radicelei, după care are loc reuscarea semințelor până la un anumit conținut în apă,astfel încât este suspendată dezvoltarea ulterioară a radicelei (EP 202879 publicat în anul 1986]

Este cunoscut de asemenea un procedeu de pregerminare a semințelor, care se referă la inducerea toleranței la desicare în radicela emisă și la plantele obținute din astfel de semințe (WO 94/05145 publicat în anul 1994).

Procedeele de tratare și de pregerminare a semințelor cunoscute prezintă dezavantajul că, o parte semnificativă din aceste semințe pregerminate sunt deteriorate imediat după germinație, chiar dacă acestea sunt depozitate în condiții corespunzătoare de temperatură și umiditate.

Problema tehnică ce trebuie rezolvată prin invenție constă în prelungirea longevității semințelor condiționate, în timpul perioadei de depozitare.

Procedeul, conform invenției rezolvă această problemă și se deosebește de soluțiile cunoscute prin faptul că, înaintea reuscării până la un conținut în apă sub 15% raportat la greutatea inițială, semințele condiționate sunt supuse unui stress hidric, unui tratament termic sau combinării acestora, și prin aceea că stressul hidric este obținut printr-o reducere inițială, rapidă, a conținutului în apă, cu 3% până la 20% din greutatea inițială a semințelor condiționate, urmată de reducerea conținutului în apă prin incubare sau prin uscarea lentă a semințelor parțial deshidratate, obținute.

Prin aplicarea invenției se obțin următoarele avantaje:

- toleranță mai mare a embrionilor la deshidratare;

- rată de germinație substanțial mai scurtă;

- continuarea proceselor metabolice, altele decât cele germinative;

- semințele tratate obținute pot fi uscate și umede, cele umede putând fi reuscate.

Se prezintă în continuare mai multe exemple de realizare a invenției și în legătură cu tabelele de la 1 la 14.

într-un prim exemplu de realizare, procedeul constă în inducerea stressului hidric prin uscarea ușoară a semințelor condiționate. Stressul hidric induce reducerea conținutului în apă cu 5% până la 20% sau mai puțin, dacă semințele condiționate convențional au un conținut inițial în apă de 25%, sau până la 50%, sau mai puțin dacă semințele condiționate convențional au un conținut inițial în apă de 55%.

Mai precis, stressul hidric va fi în general realizat în orice mod prin reducerea conținutului în apă cu 5%, până la 20%, fiind în general avantajos ca acesta să nu se reducă la o valoare sub 15%.

RO 116451 Bl

Stressul hidric va fi menținut pentru o perioadă mai lungă de timp, în general 1-7 zile, depinzând de temperatură, așa cum condițiile optime depind de speciile de semințe și pot fi determinate prin testele standard. Stressul se va realiza prin menținerea conținutului în apă al semințelor condiționate convențional la un nivel constant și redus (spre exemplu cu 5% până la 20% mai scăzut față de conținutul în 5 o apă al semințelor condiționate convențional] sau prin uscarea destul de lentă a semințelor condiționate convențional, pentru ca ele să rămână suficient de lung timp sub stressul hidric.

Prin termenul de sămânță condiționată se înțelege acea sămânță care a fost expusă unor tehnici convenționale de condiționare, cu un conținut în apă care variază 55 între 20 și 55% (în funcție de specie) și cu o toleranță la deshidratare, tipică semințelor condiționate convențional.

Comparativ cu sămânța condiționată, sămânța necondiționată este tolerantă la deshidratare sau poate supraviețui la uscare, extinderea toleranței la deshidratare fiind dependentă de specie. 60

Sămânța negerminată este definită aici ca sămânță în care radicela și/sau hipocotilul nu au străpuns învelișul seminal sau pericarpul. Radicela și/sau hipocotilul pot cauza despicarea sau crăparea învelișului seminal, cu toate acestea nu pot ieși în afară prin această despicătură, dar prin care endospermul care înconjoară embrionul poate fi vizibil. Semințele condiționate convențional, negerminate, la care procedeul 65 prezentei invenții a fost aplicat și la care se va face referire în continuare, vor fi numite semințe tratate. Semințele condiționate convențional, negerminate, la care procedeul prezentei invenții nu a fost aplicat, vor fi în continuare denumite semințe condiționate convențional. Semințele acceptate ca fiind comerciale și care nu au fost condiționate vor fi numite semințe netratate. 70

Determinarea stadiului procesului de germinație este posibilă prin parametrii fizici, ca spre exemplu, mărimea, volumul sau densitatea. în acest fel poate fi făcută o selecție a semințelor pentru a fi tratate conform invenției. Astfel, se va demonstra mai jos că semințele tratate au o longevitate mai mare în timpul depozitării decât semințele condiționate convențional din aceleași specii și cu același conținut în apă. 75

Există mai multe metode de condiționare a semințelor cunoscute în stadiul tehnicii.

Astfel, semințele necondiționate, numite și semințe netratate, în funcție de specie pot fi înmuiate până la câteva ore într-o soluție apoasă, spre exemplu în coloană de apă, aceasta fiind un tratament de precondiționare. 0 astfel de pre-condi- 80 ționare cunoscută în stadiul tehnicii ajută la prevenirea lipirii semințelor în timpul condiționării și/sau pregătirii semințelor pentru condiționare.

Semințe necondiționate sau semințele care urmează tratamentul de pre-condiționare menționat sunt plasate un anumit timp și în anumite condiții de temperatură, absorbția apei de către sămânță având loc până la nivelul la care procesele metabolice 85 pregerminative încep și se continuă, dar la care geminația nu este posibilă.

Imbibiția poate să aibă loc ca orice proces de imbibiție cunoscut. Astfel, spre exemplu, semințele negerminate, pentru a fi îmbibate, pot fi plasate într-un butoi sau într-o coloană de apă, cu sau fără aer, la un potențial hidric de 0 MPa (dacă semințele sunt plasate în apă), sau între aproximativ 0 MPa până la -4,0 MPa dacă semințele 90 sunt plasate într-o soluție osmotică.

RO 116451 Bl

Depinzând de alegerea tehnicii de condiționare, cantitatea de apă îmbibată este definită prin potențialul osmotic al soluției de condiționare (tehnici de condiționare în apă, cum sunt coloanele cu apă) și cantitatea de apă adăugată la sistem (spre exemplu tehnicile de condiționare în butoi). Semințele îmbibă apa adăugată până la un MC tipic lor, între aproximativ 25 până la 50%, favorabil fiind între 30 și 50% în funcție de tipul de sămânță.

Conținutul în apă al seminței este sinonim cu termenul MC, este folosit alternativ și este exprimat în procente din greutatea proaspătă a seminței. Conținutul în apă al semințelor este calculat folosind formula:

^Wi - x 100

Wi unde l/Vi = greutatea inițială;

Wa = greutatea după uscarea semințelor la etuvă la 103°C timp de 16 h sau la 13O°C timp de peste 2 h.

Imbibiția are loc la orice temperatură care favorizează preluarea apei, în general fiind cuprinsă între aproximativ 5 și 3O°C, depinzând de specie. Când imbibiția are loc în coloană de apă, gradul de aerare trebuie să fie suficient pentru a ține semințele la suprafață sau în suspensie.

Imbibiția se poate desfășura de-a lungul unei perioade de până la 24h, favorabilă fiind între aproximativ 4 până la 10 h, în funcție de specie. Aceasta poate fi o etapă separată, înainte de condiționare, sau poate fi parte integrată condiționării.

Pentru o condiționare adecvată,conținutul în apă al semințelor este menținut la un nivel relativ constant, fiind cu ± 1 până la 3% din MC dorit. Tipic, acesta este între aproximativ 20 până la aproximativ 55%, favorabil fiind între 30 și 50% din MC al semințelor. Este de preferat ca, condiționarea să aibă loc într-un butoi, timp de 1 până la 21 de zile, preferabil fiind între aproximativ 2 până la 15 zile, la temperatura care variază între 5 până la aproximativ 30°C, preferabil între 15 până la aproximativ 25°C, depinzând de specie.

Conținutul optim în apă al seminței și lungimea fazei de condiționare depind de tipul particular de sămânță folosit. Aceste valori optime pot fi găsite folosind tehnici convenționale, spre exemplu, prin fixarea diferită a MC al semințelor, expunând semințele la diferite perioade de incubare în anumite condiții controlate, ca: temperatura, umiditatea relativă a aerului și aerație.

Uneori se pot adăuga seminței factori biologici utilizând tehnici cunoscute în stadiul tehnicii. Astfel, spre exemplu, factorii biologici pot fi adăugați în orice formă adecvată, spre exemplu un inocul care poate/sau nu să fie constituit din microorganisme în suspensie într-un mediu adecvat, spori de fungi uscați sau congelați sau bacterii liofilizate. Factorii biologici pot fi adăugați în orice stadiu potrivit al procedeului invenției. Este de preferat să se adauge în formă de inocul la sau aproape de începutul condiționării sau alternativ în procesele care implică un tratament înainte de condiționare, la sau aproape de începutul unui asemenea pretratament.

Factorii biologici adecvați pot fi selectați din grupul ce cuprinde microorganismele benefice, cum sunt Bacillus, Pseudomonas, Trichoderma și Rhizobia.

RO 116451 Bl

140

Ca exemple particulare de microorganisme benefic, se pot enumera, Pseudomonas fluorescence, Pseudomonas putida, Xanthomonas maltophilia, Bacillus cereus, Trichoderma viride, Trichoderma harzarium, Trichoderma koningii, Gliocladium virens, Fusarium oxysporum (izolate nepatogene) și altele. Factorul biologic poate fi ales în mod specific în scopul tratării unei semințe pentru a deveni rezistentă la un anumit agent patogen. Spre exemplu, Pseudomonas poate fi adăugat seminței care se va semăna într-un sol cunoscut ca fiind puternic infestat cu Pythium sau Bacillus spp. Spre exemplu, poate fi adăugat seminței, spre exemplu de morcov, care va fi însămânțată și care este predispusă la atacul Alternariei spp.

în general, prezența factorilor biologici poate varia între 1O³ colonii formate pe unitatea (cfu) de sămânță, în funcție de specia de sămânță și de factorul biologic. Spre exemplu, la leguminoase ca lucerna, coloniile formate pe unitate (cfu) de Rhizobia vor fi aproximativ de 10³ pe sămânță'¹. Pentru cele mai multe microorganisme, cfu pe sămânță variază între 10⁴ până la aproximativ 10⁷.

Referitor la învelișul seminal protector, acesta poate fi aplicat înainte, după sau în timpul perioadei de incubare și înainte sau după orice etapă de uscare ulterioară, învelișul poate fi constituit din orice material comun folosit la învelirea semințelor și poate fi adăugat seminței folosind tehnici de învelire convențională sau de formare a peliculei.

Pe lângă microorganismele menționate anterior, ca Pseudomonas sau Trichoderma, învelișul poate cuprinde substanțe regulatoare de creștere a plantelor, ca giberelinele și auxinele. Regulatorii de creștere pot varia cantitativ între 0,0001 până la 0,1% din greutatea materialului ce constituie învelișul seminal.

învelișul seminal poate conține orice material convențional comun pentru protecția sau formarea peliculei seminței și cunoscut în stadiul tehnicii.

Materialele adecvate includ argila, subbentonita, bentonita, vermiculit, utilizat singur sau cu aditivi, ca, perlit, piatra ponce, stearați metalici, polietilene, polistirene, poliuretani, pudră de talc, polipropen, clorură de polivinil, amidon, lut, zahăr, gumă arabică, polimeri organici, celuloze, făină de lemn, pudră de cuarț și altele.

într-un prim exemplu de realizare, are loc reducerea MC al semințelor condiționate printr-o rată slabă de pierdere a apei (uscarea înceată).

Astfel, semințele condiționate sunt expuse unei faze de incubare în care rata apei pierdute variază între 0.1 și 1,0% /h din greutatea seminței uscate, preferabil fiind intervalul între 0,2 și 0,4% /. Uscarea ușoară poate fi efectuată în butoi (butoi de grunduire), oxigenat (primind oxigen suplimentar) sau aerul poate intra simplu în sistem (condiții pasive), prin amestecare. Rata de pierdere a apei este determinată prin cântărirea semințelor după diferite perioade de incubare și recântărirea semințelor după un timp. Se va aprecia că rata apei pierdute determină inducerea longevității, care poate varia de la specie la specie.

Semințele ținute în astfel de condiții vor avea în final un conținut de apă mai scăzut decât cel al semințelor condiționate cu 5 până la 20%, în general cu 5 până la 15%.

în condiții de uscare lentă, semințele pot fi incubate la orice temperatură cuprinsă între 3 și 40°C. Este preferabil ca semințele să fie incubate la o temperatură cuprinsă între 20 și 35°C. Perioada de incubare este cuprinsă între 24h și o săptămână sau mai mult, aceasta fiind dependentă de valoarea temperaturii de incubare.

145

150

155

160

165

170

175

180

RO 116451 Bl

Astfel, spre exemplu, perioada de incubare poate fi de la aproximativ 24h până la aproximativ 3 zile sau mai mult, la o temperatură de 2O°C, depinzând de tipul de sămânță, sau această incubare poate dura până la o săptămână sau mai mult la o temperatură mai joasă, cum ar fi 8°C. Pot fi folosite temperaturi mai joase, spre exemplu, pentru a scădea riscul infestării cu patogeni.

La genul Viola se iau 60 g semințe condiționate uscate care sunt puse într-un butoi de 6 I care se rotește pe o latură cu o viteză de 3 rot/min timp de 3 zile într-o cameră în care temperatura este menținută la 2O°C, iar umiditatea relativă este de 70%. Butoiul are un diametru de 7,5 cm, deschis cu un capac, peste care este pusă o pânză de in (cu ochiuri de aproximativ 0,1 mm), cu scopul de a se aerisi sămânța. Conținutul în apă al seminței în perioada de imprimare este menținut la 35% din greutatea umedă a semințelor. Conținutul inițial în apă al semințelor uscate este determinat prin cântărirea unui eșantion înainte și după uscare, timp de 2 h la 13O°C. Greutatea seminței uscate este determinată prin metode gravimetrice de laborator. în butoi este adăugată o cantitate de apă care va aduce cantitatea de umiditate a semințelor la nivelul dorit, în acest caz 35% din greutatea umedă. Evaporarea (1-2% pe zi calculat la greutatea inițială proaspătă) este evaluată prin cântărirea butoiului împreună cu conținutul și reumplerea cu apă pentru a completa diferența de greutate dintre cântăriri, ceea ce constituie punctul de plecare zilnic.

g (greutatea umedă) semințe condiționate martor sunt scoase din cilindru după 3 zile și uscate la un flux de aer (2 m/s) la o temperatură de 2O°C și umiditatea relativă a aerului de 40%, timp de 16 h. Procentul de uscare este de 5...10% apă pierdută pe oră, calculată la greutatea inițială a seminței uscate. Conținutul în apă după uscare este de 6%.

g din sămânța condiționată din eșantion (MC 35%) a fost supusă la încă o incubare în același butoi, timp de 3 zile, într-o cameră cu uscare lentă, în următoarele condiții de temperatură, umiditate relativă și rată de pierdere a apei: temperatura 2O°C, RH 90%, iar procentul de apă pierdută fiind de 0,1 ...0,3% din conținutul în apă (MC), pe oră, determinat prin cântărire, așa cum a fost descris anterior.

Butoiul este deschis la un capăt și acoperit cu un nylon având ochiuri de 0,6 mm, pentru a ușura evaporarea. Semințele sunt scoase din butoi și uscate în aceleași condiții ca și martorul descris anterior, până la un conținut de umiditate de 6%.

Semințele sunt puse pe hârtie de filtru umezită la suprasaturație și incubate la 2O°C în condiții de lumină. Procentul de semințe germinate este cuantificat zilnic, timpul de germinare t_5O fiind calculat după metoda Orchard T.G. (1977).

Procentul de plante normale este determinat prin însămânțarea semințelor în tăvi cu pământ, la adâncimea de 3 cm, furnizat de EGO, Olanda (EGO 1 Peatsoil pH 5,5, conductivitate electrică 0,9 mS, azot total 5,1 mmol/l). Tăvile sunt acoperite cu material transparent și supuse la lumină (1OOOO lux), la temperatura de 2O°C. După 21 de zile, plăntuțele sunt evaluate vizualizând cotiledonul și hipocotilul, după metodele ISTA, descrise în Handbook for Seedling Evaluation Supra, la pagina 64.

Longevitatea semințelor este determinată folosind testul CD descris în referințele citate de Tarquis și colab. 1991. Pentru testul CD, conținutul în umiditate al semințelor a fost crescut uniform până la 10% prin incubare la umiditate relativă de 75%, timp de 3 zile la 2O°C. Eșantioanele de semințe ținute în echilibru la un RH

RO 116451 Bl de 75% au fost închise într-un recipient care a fost incubat la 48°C timp de 24h. La sfârșitul perioadei de deteriorare, semințele sunt germinate pe hârtie la 20°C . Plăntuțele normale sunt numărate după 14 zile, rezultatele CD fiind exprimate în procente de plante normale germinate.

Semințele sunt păstrate la 18°C, într-o umiditate relativă de 30% timp de 9,14 și 23 luni. După păstrare semințele sunt germinate în sol. Rezultatele sunt expuse în tabelul 1.

230

235

Tabelul 1

Soiul	tso, direct după tratament	Testul CD (după 24 ore)	Testul în sol, direct după tratament (% germinație)
Martor	Inv.	Martor	Inv.	Martor	Inv.
Roc yellow	1.7	1.7	1	73	74	78
Roc Golden	2.0	1.8	7	68	65	69
Roc Blue	2.3	2.0	0	65	66	67
Roc White	1.5	1.3	0	52	88	84
	Testul în sol după 9 luni de păstrare (% germinație)	Testul în sol după 14 luni de păstrare (% germinație)	Testul în sol după 23 luni de păstrare (% geminație)
Martor	Inv.	Martor	Inv.	Martor	Inv.
Roc Yellow	75	89	16	79	30	84
Roc Golden	76	83	36	86	26	75
Roc Blue	55	72	8	74	5	70
Roc White	61	89	3	85	2	79

Martor semințele condiționate uscate;

Inv. =semințele din invenție.

240

245

250

Rezultatele prezentate în tabel arată că pierderea viabilității în perioada de păstrare la 18°C a semințelor condiționate convențional este mult mai rapidă față de semințele din invenție. Astfel, viabilitatea semințelor condiționate convențional dispare după 9 și 14 luni, pe când semințele invenției rămân viabile o perioadă mai lungă de 23 luni, deci de două ori mai lungă perioada decât la semințele pregătite convențional.

La genul Capsicum se iau 60 g semințe uscate pretratate, care sunt puse întrun butoi pentru imprimare (grunduire) ca în exemplul 1, cu excepția faptului că în timpul condiționării, conținutul în umiditate este menținut la 37% din greutatea umedă a semințelor. Astfel, este adăugată o cantitate suficientă de apă pentru a aduce conținutul de apă al seminței până la 37%.

g (greutate umedă) semințele martor sunt scoase din butoi după 3 zile și uscate ca semințele martor din exemplul 1, până la un conținut în apă al seminței de 7%.

255

260

RO 116451 Bl g sămânță din eșantionul test de semințe condiționate (MC 37%) a fost supusă incubației ca în exemplul 1, la care procentul de apă pierdut este de 0,4% din conținutul de apă (MC)/oră. Semințele apoi sunt uscate la un conținut în umiditate de 7%, în aceleași condiții ca în cazul semințelor martor de la exemplul 1. Longevitatea este determinată prin testul CD ca în exemplul 1 exceptând semințele care au fost incubate la 49°C timp de 24 și 48 h. Rezultatele sunt ilustrate în tabelul 2, prezentat mai jos.

Tabelul 3

	% plante normale după anumite perioade de la testul CD (h)
O	24	48
Condiționare	lot 1	86	63	4
standard	lot 2	96	70	2
Uscare lentă	lot 1	84	82	57
	iot 2	94	92	72

Media t_soînainte de condiționare este 4, 6 zile, după ambele tratamente, adică t_5O pentru condiționarea standard și uscarea lentă este de 1, 3 zile.

Tot la genul Capsicum cele 60 g de semințe uscate sunt expuse etapelor descrise în exemplul 2, cu o mică diferență privind cantitatea de apă pierdută. Aceasta este de 0,3% MC/h. Semințele apoi sunt scoase din butoi și uscate la un conținut în apă de 7% în aceleași condiții ca semințele martor.

Semințele martor (semințe condiționate convențional) și semințele din invenție sunt păstrate în folie de aluminiu ermetic închise, la 2O°C timp de 8 luni.

Semințele sunt puse pe hârtie de filtru suprasaturată și incubate la 2O°C în condiții de lumină. Procentul de semințe germinate este evaluat zilnic, și apoi calculat timpul de germinație ca în exemplul 1.

Longevitatea este determinată folosind testul CD ca în exemplul 1, cu excepția semințelor care au fost incubate la 5O°C.

Procentul de plante normale a fost determinat în sol ca și în exemplul 1.

Datele tabelului 3 demonstrează faptul că semințele din invenție supraviețuiesc atât în condițiile testului CD, cât și în condiții normale de păstrare, cu o extindere mai mare decât semințele martor.

Tabelul 3

	% plante normale după o perioada (h) de la testul CD	% plante normale după testul în sol, în urma perioadei de păstrare (luni)
0	24	0	8
Condiționare standard	99	4	81	15
Uscare lentă	98	94	84	88

RO 116451 Bl

La genul Lycopersicon (tomate) se iau 60 g semințe uscate care sunt puse într-un butoi pentru condiționare ca în exemplul 1, cu excepția faptului că durata condiționării este de 7 zile și conținutul în apă al seminței în timpul incubației este menținut la 38% din greutatea umedă a semințelor. Astfel, o cantitate suficientă de apă se adaugă pentru a aduce conținutului în apă al seminței la 38%.

g (greutate umedă) semințe martor sunt luate din butoi după 7 zile și uscate ca semințele martor din exemplul 1 până la un conținut în umiditate de 6%.

g semințe astfel condiționate din eșantionul test (MC 38%) sunt supuse incubației ca în exemplul 1, în care cantitatea de apă pierdută este de 0,1...0,3% MC/oră. Semințele sunt apoi uscate până la conținutul în umiditate de 6%, în aceleași condiții ca pentru semințele martor din exemplul 1.

Semințele s-au pus pe hârtie de filtru saturată în apă și s-au incubat la 20°C în condiții de lumină. Procentul de semințe germinate este evaluat zilnic, timpul de germinare fiind calculat ca în exemplul 1.

Longevitatea este determinată făcând testul CD ca și în exemplul 1, cu deosebirea ca semințele au fost incubate la 50°C timp de 24h, 48 h și 72 h. Rezultatele sunt demonstrate în tabelul 4.

305

310

315

Tabelul 4

Testul CD, perioada (ore)	% plante normale pe hârtie de filtru

	Condiționarea standard	Uscare lentă
	lot 1	lot 2	lot 1	lot 2
0	87	92	93	92
24	84	90	92	90
48	7	36	69	86
72	2	7	37	69

320

325

Media t_5O înainte de condiționare este de 4,0 zile, după ambele tratamente este de 1,5 zile.

La conopidă, soiul Serrano, se iau 1200 g sămânță uscată care sunt puse întrun butoi la condiționat ca în exemplul 1, cu deosebirea că pe durata condiționării, temperatura camerei s-a menținut la 15°C, iar conținutul în apă este menținut la 35%.

g (greutatea umedă) martor sunt scoase din butoi după 7 zile și uscate ca semințele martor din exemplul 1, la un conținut în apă de 6%.

100 g semințe din eșantionul test (MC 35%) sunt expuse incubării într-un butoi de 6I timp de 5 zile, temperatura camerei fiind menținută la 20°C, iar RH este de 75%. Deschiderea butoiului este acoperită cu un material de nylon care are ochiul de aproximativ 0,6 mm pentru a ușura evaporarea. Rata apei pierdute în timpul primei zile (0,62% MC/h) este determinată prin cântărire ca în descrierea anterioară. Semințele sunt scoase din butoi și uscate în aceleași condiții ca semințele martor.

Longevitatea este determinată folosind testul CD ca în exemplul 1, cu deosebirea că incubarea semințelor s-a făcut la 48°C timp de 48h.

Tabelul 5 arată că perioada de incubație care permite reducerea conținutului în apă al seminței până la nivelul corespunzător semințelor necondiționate, deci netratate, îmbunătățește considerabil longevitatea semințelor condiționate.

330

335

340

345

RO 116451 Bl

Tabelul 5

Testul CD, perioada (ore)	% plante normele pe hârtie de filtru (raportate la martor la începutul testului CD)
Martor necondiționat	Martor condiționat	Uscare lentă
0	100	94	94
48	60	27	60

Pentru soiul de morcov, numit Autumn King Trophy, se introduc 1200 g semințe uscate într-un butoi pentru condiționare timp de 6 zile, în condițiile de condiționare ca la exemplul 5, conținutul în apă al seminței în timpul condiționării fiind menținut la 38% din greutatea umedă. Rata de pierdere a apei (1-2% pe zi] calculată la greutatea proaspătă inițială este monitorizată zilnic prin cântărirea butoiului și a conținutului său în fiecare zi și adăugarea de apă zilnic, pentru a completa până la greutatea inițială, observând diferențele dintre cântăriri.

g (greutate umedă] semințe martor sunt scoase din butoi după 7 zile și uscate ca și semințele martor din exemplul 1, până la un conținut în umiditate de 6%.

10O g semințe din eșantionul test sunt incubate timp de 5 zile în condiții asemănătoare cu cele din exemplul 5. Rata apei pierdute în timpul primei zile (0,67% Mc h'¹) fiind determinată ca în descrierea de mai sus.

Semințele sunt scoase din butoi și uscate ca semințele martor.

Longevitatea este determinată folosind testul CD ca în exemplul 1, cu excepția faptului ca semințele au fost incubate la 48°C timp de 24 și 48 h.

Tabelul 6 arată că perioada de incubație care permite reducerea lentă a conținutului în apă al semințelor ameliorează substanțial longevitatea semințelor de morcov condiționate.

Tabelul 6

Testul CD, perioada (ore)	% plante normale obținute pe hârtie de filtru (raportate la martor la începutul testului CD)
Martor necondiționat	Martor condiționat	Uscare lentă
0	100	94	94
24	85	71	97
48	71	13	64

Pentru soiul de cicoare Liberty, se iau 1200 g semințe uscate care sunt introduse într-un butoi pentru condiționare ca în exemplul 1, cu excepția faptului că umiditatea semințelor este menținută la 38% din greutatea umedă.

g (greutate umedă) semințe martor s-au scos din butoi după 7 zile și s-au uscat ca semințele martor din exemplul 1 până la MC de 6%.

450 g semințe din eșantionul test au fost puse la incubat într-un butoi de 24 litri timp de 5 zile, într-o cameră în care temperatura camerei este menținută la 20°C, iar umiditatea atmosferică a camerei este menținută la 75%.

RO 116451 Bl

Butoiul este acoperit pe suprafața deschisă cu un material din in cu ochiuri de

0,1 mm pentru a facilita evaporarea. Rata apei pierdute în timpul primei zile (0,29% MC/h) este determinată prin cântărire, cum a fost descris anterior. Semințele au fost apoi scoase din butoi și uscate în aceleași condiții cu semințele martor.

Longevitatea este determinată folosind testul CD ca în exemplul 1, cu excepția 390 faptului că semințele au fost incubate la 50°C timp de 24 h.

Tabelul 7 reprezintă perioada de incubație care permite reducerea lentă a conținutului în apă (MC) al semințelor condiționate de cicoare, cărora le-a ameliorat puternic longevitatea față de semințele necondiționate.

395

Tabelul 7

Testul CD perioada (ore)	% plante normale pe hârtie de filtru (raportat la martor la începutul testului CD)
Martor necondiționat	Martor condiționat	Uscare lentă
0	100	88	95
24	56	3	54

Pentru soiul de praz Latina, se iau 1200 g semințe uscate care au fost condiționate timp de 4 zile în condițiile de condiționare din exemplul 5. Au fost adăugate 0,01 g/kg sămânță de Aatopam. Conținutul în apă al seminței în perioada condiționării a fost menținut la 38% din greutatea umedă a semințelor. 405 g (greutate umedă) semințe martor au fost scoase din butoi după 7 zile și uscate ca semințele martor din exemplul 1, până la conținutul de apă de 6%.

200 g semințe din eșantionul test au fost puse la incubat într-un butoi de 24 I timp de 5 zile, într-o cameră unde temperatura este menținută la 2O°C și umiditatea relativă la 40%. Butoiul deschis la un capăt este acoperit cu un material de nylon cu 410 ochiuri de aproximativ 0,6 mm pentru a facilita evaporarea. Rata apei pierdute în timpul primei zile (1,04% MC/oră) este determinată prin cântărire, cum a fost descris mai sus. Semințele sunt apoi scoase din butoi și uscate în condiții asemănătoare cu semințele martor.

Longevitatea este determinată folosind testul CD din exemplul 1, exceptând 415 faptul că semințele au fost incubate la 48°C timp de 24, 48 și 72 h.

Tabelul 8 reprezintă perioada de incubație când este permisă o reducere lentă a conținutului în apă al semințelor, fiind puternic ameliorată longevitatea semințelor condiționate de praz față de semințele necondiționate.

420

RO 116451 Bl

Tabelul 8

Testul CD, perioada (ore)	% plante normale la testul pe hârtie (raportat la martor la începutul testului CD)
Martor necondiționat	Martor condiționat	Uscare lentă
0	100	96	92
24	-	90	91
48	-	65	91
72	-	9	54

într-un alt exemplu de realizare a invenției, stressul hidric este obținut prin tratamentul cu PEG sau alte soluții adecvate, care determină reducerea conținutului în apă al semințelor condiționate, prin incubarea în soluție, al căror potențial hidric este mai mic de OMPa. în timpul incubării, conținutul în apă al semințelor este redus încet, cu 3 până la 20%, prin menținerea potențialului osmotic al soluției la valoare specifică, care variază între - 0,5 până la - 4,0 MPa. în acest mod de experimentare, se realizează un stress hidric blând datorită pierderii apei disponibile.

Incubarea, în acest mod, este realizată într-un osmotic cu un potențial hidric care este suficient de scăzut pentru a extrage apa din semințele condiționate. Pentru a nu dăuna semințelor, se poate folosi orice osmotic adecvat, ca PEG 8000, Manitol sau o soluție a unei sări, ca NaCI. Tipic, semințele sunt puse în contact cu una din soluțiile amintite. Potențialul osmotic trebuie să fie menținut la un nivel suficient de scăzut încât să aibă loc inducerea toleranței la deshidratare. La soluția osmotică pot fi adăugați hormoni de creștere în concentrații cuprinse între 1O²M și 1O^aM la prima incubare.

Regulatorii de creștere cei mai utilizați sunt giberelinele, acidul abscisic (ABA), iar dintre auxine, acidul indolil butiric (IBA).

Este de preferat ca incubarea să aibă loc în coloană de apă (lichid de incubare] și în condiții de aerație. în acest caz, cantitatea de sămânță pe unitatea de volum a soluției poate fi cuprinsă între 1 până la 200 g sămânță Γ¹. Cantitatea cea mai adecvată este de aproximativ 25 g sămânță I¹. în general, incubarea poate avea loc timp de mai multe zile, extinzându-se la săptămâni sau mai mult. După terminarea incubării, semințele sunt spălate în apă.

Incubarea poate de asemenea avea loc prin punerea semințelor condiționate pe hârtie de filtru saturată într-o soluție osmotică a uneia dintre substanțele prezentate anterior. în general, semințele îmbibate și condiționate la un conținut de apă cuprins între 25 și 55% pot fi așezate pe hârtie de filtru, suprasaturată, într-un sistem închis, la o umiditate relativă (RH) înaltă, chiar și de 100%, temperatura și timpul de contact fiind prezentate anterior. în anumite cazuri, conținutul în apă al semințelor condiționate poate fi redus în condiții de uscare rapidă cu aproximativ 10% înainte de incubare într-un osmotic, etapă care nu este esențială.

Acest exemplu de realizare a stressului hidric este prezentat în cadrul genului Capsicum (ardei), soiul Abdera, la care se iau 10 g semințe care au fost incubate pe hârtie de filtru suprasaturată cu apă, în vase de plastic transparente la 25°C, în condiții de lumină.

RO 116451 Bl

Eșantioane de sămânță de câte un gram au fost scoase zilnic până în ziua a 4-a. în ziua a 4-a, 40% din semințe au fost germinate, în timp ce în ziua a 3-a nu au fost observate semințe germinate.

Eșantioanele de semințe martor au fost uscate conform exemplului 1.

Eșantioanele test au fost transferate pe hârtie de filtru saturată cu soluție de polietilen glicol (PEG) cu un potențial osmotic de -1,5 MPa și incubate timp de 3 zile la temperatura de 25°C. După tratament, semințele au fost spălate și uscate ca și semințele martor. Longevitatea este determinată folosind testul CD ca în exemplul 1. Tabelul 9 demonstrează că semințele incubate o zi în apă manifestă o oarecare sporire a longevității, dar incubarea timp de 2-3 zile arată o scădere progresivă a longevității în timp ce, prin comparație, semințele din invenție care au fost incubate în soluție PEG demonstrează o prelungire a longevității.

465

470

475

Tabelul 9

Durata incubației (zile)	Rezultatele testului CD (24 ore) semințe martor	Reazultatele testului CD (24 ore) semințele invenției
0	84	82
1	92	87
2	71	91
3	7	57

480

485 într-un al doilea exemplu de realizare a procedeului conform invenției, semințele condiționate sunt incubate la un conținut în apă mai scăzut față de conținutul normal al acestora. Astfel, MC al semințelor condiționate este redus (prin uscare în condiții de uscare convențională cum sunt condițiile de uscare rapidă) cu 3 până la 20%, preferabil cu 5 până la 15% sub 24 h, cum ar fi 8 h sau chiar mai puțin. Valoarea minimă a MC până la care semințele sunt uscate este aproximativ de 15%. Ulterior, semințele astfel uscate sunt expuse la un stress hidric prin incubarea într-un container cu minimum de aer și schimb de umiditate, temperatura și lungimea incubării fiind cea de la uscarea lentă.

Termenul de condiții de uscare convențională este folosit în conecție cu acest procedeu și se referă la condiții de uscare convențională ca, spre exemplu, reuscarea prin curenți de aer cu viteză mare, la temperatura ambientală cunoscută în stadiul tehnicii și în general aplicate pentru uscarea semințelor condiționate convențional.

Aceste condiții de uscare convențională cuprind o temperatură variind între 10 și 50°C, în general de la 20°C la aproximativ 35°C, o umiditate relativă care variază între 30 și 90%, în general de la 30 la aproximativ 50%, în curenți de aer, cu o viteză tipică pentru reuscarea semințelor. Spre exemplu, viteza aerului poate fi oricare până la 2 m/s sau chiar mai repede. Perioada de timp poate fi orice interval de timp până la 24 h, depinzând de condițiile de uscare folosite. Condițiile de uscare convențională mai adecvate includ, spre exemplu, temperatura de 20°C, umiditatea relativă a aerului de 40% și o viteză a aerului de 2 m/s, timp de peste 16 h.

490

495

500

505

RO 116451 Bl în acest exemplu, semințele de pansea au fost pretratate și condiționate ca în descrierea de la exemplul 1, g semințe martor au fost scoase din butoi după 3 zile și uscate ca martorul prezentat în exemplul 1, până la 6% conținut de apă.

g semințe din eșantionul test (MC 34%) au fost uscate asemănător cu semințele martor, dar până la conținutul în apă de 25%.

Semințele au fost apoi transferate într-un container de plastic etanș privind umiditatea, dar neermetic închis privind aerul și incubat la 2O°C timp de 3 zile. După această incubație, semințele au fost uscate în plus, similar cu semințele martor.

Longevitatea semințelor martor (condiționate convențional) semințelor invenției (depozitare umedă) și semințelor netratate (necondiționate) a fost determinată conform descrierii din exemplul 1.

Tabelul 10 prezintă supraviețuirea semințelor condiționate convențional și a celor din invenție, după 24 h de la testul CD, exprimate ca valoare relativă comparativ cu semințele netratate. Tabelul arată că prin incubare la un conținut în apă al semințelor redus, dar constant (comparativ cu conținutul în apă al semințelor după condiționare), se reinstalează longevitatea în semințele condiționate.

Tabelul 10

Valoarea testului CD (24 h)
Netratat	100
Martor condiționat convențional	20
Semințele invenției (depozitare umedă)	62

La genul Capsicum, soiul Abdera, se iau 100 g semințe uscate care au fost condiționate în butoi ca în exemplul 3.

Conținutul în apă al semințelor după condiționare a fost 35,3%. Ulterior semințele au fost uscate în 165 min până la un conținut în apă de 4,8%, la o temperatură de 25°C, cu RH 40% și viteza curenților de aer de 2m/s. Au fost luate două repetiții din eșantioanele de sămânță cu un conținut în apă de 35,5% (valoarea inițială a MC), 30,6%, 25,5%, 20,0%, 14,8% și 9,6%. Aceste eșantioane au fost incubate într-un container închis (0,15 dl), un eșantion la 8°C și celălalt la 2O°C, pentru o perioadă de 7 zile.

După incubație, toate eșantioanele au fost uscate, până la un conținut final în apă de 4,8%, în condiții similare cu prima etapă de uscare.

Longevitatea martorului (semințele condiționate convențional), a semințelor invenției (depozitare umedă) și a semințelor netratate (necondiționate) este determinată conform descrierii din exemplul 1.

Tabelul 11 arată că semințele condiționate, reuscate imediat după condiționare până la un conținut în apă de 4,8%, au o mai mică viabilitate după testul CD, în timp ce semințele incubate la un conținut în apă care a fost redus cu 5 până la 15%, comparativ cu conținutul în apă după condiționare, au o longevitate aproape similară cu cea a semințelor netratate din martor.

Temperatura în timpul acestei etape de inducție nu este critică procesului.

RO 116451 Bl

555

Tabelul 11

Rezultatele testului CD (24 h) în % plante normale
Martor (netratat]	75	75
Martor (condiționare convențională	12	4
Incubație la 35,3% MC	30	34
Incubație la 30,6% MC	64	60
Incubație la 25,5% MC	54	84
Incubație la 20,0% MC	22	52
Incubație la 14,8,% MC	9	26
Incubație la 9,6% MC	14	4

560

La genul Lycopersicon (tomate), semințele au fost condiționate ca în exemplul 4, pentru 6 zile conținutul în apă al seminței fiind menținut la 37,1%.

g semințe martor sunt scoase din butoi după 6 zile și uscate ca semințele martor din exemplul 1 până la 6%.

g semințe din eșantionul test (MC 37,1 %) sunt uscate ca semințele martor, dar până la un conținut în apă de 25%.

Semințele sunt apoi transferate într-un container de plastic ermetic privind conținutul în apă, dar neetanș privind aerul și incubat la 2O°C timp de 3 zile. După această incubație, semințele sunt uscate în plus ca și semințele din martor.

Rata germinației și longevitatea sunt determinate după descrierea făcută la exemplul 4.

Semințele martor au t_5D de 4,4 zile, semințele tratate conform invenției au t_5Ode 1,5 zile.

Tabelul 12 reprezintă supraviețuirea conform testului ca în exemplul 1, cu excepția faptului că semințele au fost incubate la 5O°C timp de 48 h, exprimată ca valoare relativă, comparativ cu semințele martorului netratat. Tabelul demonstrează că incubația la un conținut în apă al semințelor redus, dar constant, adică depozitarea în stare umedă (comparativ cu conținutul în apă al semințelor după condiționare] a reinstalat longevitatea semințelor de tomate condiționate convențional.

565

570

575

580

Tabelul 12

Valoarea testului CD (48 ore)
Martor (netratat)	100
Martor (condiționat convențional)	6
Semințe conform invenției (depozitare umedă)	64

585 într-un alt exemplu de realizare a procedeului, semințele condiționate sunt expuse unui tratament termic. Astfel, semințele condiționate sunt expuse la un șoc termic, între 25 și 45°C, preferabil între 35 și 40°C, pentru perioade de timp de la

590

RO 116451 Bl până la 5 h. Conținutul în apă al semințelor expuse la șoc termic este de preferat să fie cu O până la 20% mai mic decât cel al semințelor după condiționare. în general, este avantajos ca MC al semințelor care sunt expuse la un șoc termic să nu fie mai scăzut de 15%. Șocul termic poate fi aplicat asociat cu oricare din modurile de realizare a stressului hidric. în acest scop, semințele se introduc într-un container care apoi este amplasat într-un incubator.

Pentru aceasta, se iau 1OO g semințe uscate de Capsicum soiul Abdera care au fost condiționate ca în exemplul 3. Conținutul în apă al semințelor după condiționare a fost de 35,3%. Semințele au fost uscate timp de 165 min până la un conținut în apă de 4,8% la temperatura de 25°C, 40% RH și viteza de deplasare a aerului de 2m/s. Eșantinane de sămânță au fost recoltate la un conținut de apă de 35,3% (MC inițial), 30,6%, 20,0%, 14,8% și 9,6%. Aceste eșantioane au fost incubate într-o pungă tapetată cu aluminiu, într-o baie de apă la temperatură de 40°C pentru o perioadă de 3 h.

După incubație, toate eșantioanele au fost uscate și aduse în final la un conținut în apă de 4,8%, în condiții asemănătoare primei etape de uscare.

Longevitatea martorului (condiționate convențional], a semințelor invenției (depozitare umedă) și a semințelor netratate (deci necondiționate) este determinată conform descrierii din exemplul 1.

Tabelul 13 arată că semințele condiționate reuscate imediat după tratament până la un conținut în apă de 4,8% posedă o supraviețuire scăzută după testul CD, în timp ce semințele care au suferit un șoc termic supraviețuiesc mult mai bine conform testului CD. șocul termic a scăzut efectiv conținutul în apă la 15%.

Tabelul 13

Rezultatele testului CD în % plante normale
Martor (netratat)	75
Martor (condiționat convențional)	14
Incubate la 35,3% MC	62
Incubate la 30,6% MC	46
Incubate la 20,0% MC	44
Incubate la 14,8% MC	46
Incubate la 9,6% MC	24

într-un alt exemplu de realizare, are loc combinarea stressului hidric cu stressul termic.

Astfel, se iau 50 g sămânță uscată de Viola (Roc Yellow] care a fost condiționată după descrierea din exemplul 1. După 3 zile de condiționare, semințele au fost transferate în apă aerată la o temperatură de 20°C. După 24h în apă aerată, majoritatea semințelor aveau crăpături în tegumentul seminal, dar radicela nu a străpuns încă anvelopa constituită din endosperm. Semințele au fost apoi scoase din apă și centrifugate. Conținutul în apă al semințelor este de 48,5%.

RO 116451 Bl

635

5g (greutatea umedă) din aceste semințe sunt uscate prin expunere la 2O°C, aerul totuși având RH de 40%. După 24 h de uscare, conținutul în apă al semințelor este de 6%. Restul semințelor a fost împărțit în 3 porțiuni, fiecare din acestea fiind expuse mișcărilor aerului la o viteză de 2m/s, la temperatura de 20°C și un RH de 40%. Semințele au fost expuse curenților de aer câteva minute până când cele 3 porțiuni au ajuns la conținutul de umiditate (MC) de 40, 35 și respectiv 30%. Două eșantioane de câte 10 g din fiecare porțiune au fost luate și puse într-un container de plastic cu minimum de umiditate și schimb de aer (container de 180 ml) și apoi incubate la una din temperaturi, și anume, 20°C sau 32°C. După 1 și 7 zile de incubare la una din temperaturile indicate, 2 g din fiecare eșantion este uscat în aceleași condiții ca și semințele care nu au fost incubate înainte de uscare, cum a fost descris anterior.

Longevitatea semințelor tratate și uscate este determinată prin testele CD similar cu cele descrise în exemplul 1; semințele au fost menținute în echilibru la un RH de 40%, incubate la 50°C timp de 96 h și germinate pe hârtie de filtru la 20°C, cum a fost descris în exemplul 1.

Procentul germinației finale este calculat după 14 zile; rezultatele de mai jos arată procentul germinației fără testul CD (martor) și după testul CD (96 ore).

640

645

650

Tabelul 14

Incubare	Tratament	Germinație %	Test CD
Timp (zile)	Temperatură	Umiditate	Fără test CD	Germinație %
□	-	48,5	87	34
1	20	40	86	49
1	20	35	86	69
1	20	30	82	75
1	32	40	81	68
1	32	35	84	87
1	32	30	82	69
7	20	40	85	64
7	20	35	88	76
7	20	30	82	78
7	32	40	82	92
7	32	35	89	79
7	32	30	89	83

655

660

665

Semințele produse în conformitate cu procedeul invenției au o toleranță mai mare privind deshidratarea embrionilor față de semințele condiționate convențial. în această formă tratată și în condiții de mediu specifice depozitării, acestea supraviețuiesc perioade mai lungi.

Prin sămânță care include toleranță embrionului la deshidratare se înțelege o sămânță la care reducerea conținutului în apă are loc până la o valoare specifică semințelor deshidratate, cuprinsă între 5 și 7% și care nu afectează esențial

670

675

RO 116451 Bl viabilitatea semințelor. Viabilitatea este măsurată prin abilitatea semințelor de a germina când sunt plasate în condiții favorabile de creștere sau după un test standard specific, spre exemplu testul privind controlul deteriorării seminței, atât înainte, cât și după o perioadă prelungită de depozitare în condiții specifice.

Embrionul seminței este alcătuit din structuri importante și necesare pentru dezvoltarea seminței, cum ar fi cotiledonul, axisul și un vârf radicular nepornit. Aceste structuri fie împreună, fie individual, sunt capabile să dobândească o toleranță la deshidratare.

Semințele condiționate pot fi depozitate pentru un număr de săptămâni la aproximativ 5°C, dar nu sunt potrivite pentru stocarea pe perioade extinse de timp în condiții ambientale de stocare.

Noțiunea de condiții ambientale de depozitare se referă la depozitarea la temperatura ambientului și umiditatea relativă respectivă (RH).

Termenul de temperatură ambientală, utilizat în acest caz, se referă la temperatura cuprinsă între 3 și 25°C. Prin termenul RH ambiental se înțelege umiditatea relativă a aerului, care variază de la 20 până la aproximativ 90%.

Longevitatea poate fi demonstrată prin măsurarea germinației în % în condiții similare, spre exemplu, condiții de creștere standard, atât după testul de control al deteriorării, cât și după depozitarea în condiții ambientale. Semințele tratate germinează în procent mai ridicat și generează plante normale, comparativ cu semințele condiționate convențional care au fost expuse aceluiași test de control al deteriorării sau au fost păstrate în aceleași condiții de depozitare.

în urma aplicării acestei invenții, se obțin semințe condiționate tratate în formă umedă sau uscată, având o viață mai lungă în condiții ambientale de depozitare, care este substanțial mai lungă decât cea a semințelor condiționate convențional, din aceleași specii, având același MC și al căror conținut în apă a fost redus în mod opțional în condiții de uscare convențională.

Semințele invenției au un MC care variază în limite specifice semințelor netratate, adică până la un MC la care procesele metabolice, altele decât procesele metabolice germinative, continuă.

Formele de semințe, tipic comerciale, din invenție, includ semințe având un MC între 15% până la 55% (se referă la semințele umede ale invenției) și semințe care au fost reuscate până la un MC al semințelor uscate, brute, neprelucrate, având un MC ce variază de la 2% la 15% și care se referă la semințele uscate ale invenției.

Semințele uscate ale invenției sunt obținute prin reuscarea semințelor conform cu oricare dintre exemplele de realizare a procedeului sau combinației fiecăruia cu șocul termic.

Semințele uscate din invenție au un MC care variază între 5 până la 8%.

Condițiile adecvate privind depozitarea semințelor uscate din invenție sunt aceleași condiții de mediu pentru stocarea semințelor netratate, cum ar fi umiditatea relativă a aerului, care variază între 20 până la 90%, preferabil de la 30 până la 60%, și o temperatură de la 3 până la 25°C, depinzând de tipul de sămânță.

Semințele uscate ale invenției sunt utile, prin aceea că rata lor de germinație este substanțial mai scurtă decât a semințelor netratate din aceleași specii. Rata de germinație este tipic exprimată în termeni t_5O i.e., timpul în care 50% din semințele unei mostre au germinat.

RO 116451 Bl

Semințele umede ale invenției sunt utile prin aceea că pot fi reuscate prin metode convenționale, devenind semințele uscate din invenție.

Condițiile proprii de stocare în depozit, pentru semințele umede din invenție, includ depozitarea într-un container cu minimum de aer și schimb de umiditate, la o temperatură de la 3 la 10°C, depinzând de tipul de sămânță. în astfel de condiții de depozitare, semințele au o longevitate de aproximativ 4 până la 6 săptămâni.

Semințele uscate și umede ale invenției au în plus avantajul de a avea o durată de păstrare mai lungă decât a semințelor condiționate convențional din aceleași specii și având esențial același MC.

în consecință, prin aplicarea invenției se obțin semințe germinate având un conținut în apă (MC) care variază de la 2 până la 55%, caracterizate prin aceea că semințele având un MC al semințelor netratate sau după ce au fost reuscate până la acest MC, în condiții de uscare convențională, au o rată de germinație (t₅₀) care este substanțial mai scurtă decât cea a semințelor netratate din aceleași specii. Rata de germinație corespunzătoare este cu 60% sau mai mică decât a semințelor netratate din aceleași specii. Este preferabil ca t_5Osă fie cu 50% sau mai mică și chiar mai mică de 40%. Conținutul în apă al semințelor netratate este în general între 2 și 15%.

Rata de germinație poate fi determinată prin metode convenționale, spre exemplu, utilizând metoda propusă de Orchard T.G. (1977) Seed Sci. & Technol. Vol.5, pp.61-69. în general, o astfel de determinare este realizată la o temperatură care variază între 15 și 20°C, pe hârtie de filtru saturată în apă.

Condițiile de creștere standard se referă la variația temperaturii între 15 și 20°C, în prezența aerului și a apei.

Termenul de longevitate este folosit aici pentru a exprima viabilitatea (idem cu termenul privind abilitatea de a germina și de a da plante normale după depozitare în condiții de mediu ambiental, după expunerea la testul de control al deteriorării (CD) (Tarquis A, M, & Bradford K.J.J. Exptal. Bot. Voi 43, 1982, No 248, pp.307-317). Viabilitatea semințelor expuse testului CD poate fi determinată prin teste de laborator în conformitate cu Regulile Internaționale (ISTA, 1976).Diferențele între rezultatele testului CD în general sunt corelate cu diferențele privind longevitatea după depozitare în condiții de mediu specifice.

Longevitatea se referă la perioada de timp în care semințele pot fi păstrate în condiții de mediu, fără a pierde esențial abilitatea de germinare.

Abilitatea semințelor invenției de a germina este în consecință neafectată esențial după depozitare o perioadă de timp și în condiții care altfel afectează în mod advers abilitatea de germinație (exprimată în % plante germinate normal) a semințelor condiționate.

Se consideră că semințele nu au pierdut substanțial capacitatea de a germina după depozitare, dacă procentul de plante germinate după depozitare nu a fost redus cu mai mult de 20%, preferabil este sub 15% și mai preferabil cu 10%.

Prin expresia semințele invenției au o longevitate mai mare cu cel puțin 35% față de semințele condiționate convențional se înțelege că, depozitarea, ca timp, este cu 35% mai lungă pentru semințele invenției, pentru a pierde substanțial capacitatea de germinație (% plante normal germinate), față de semințele condiționate convențional din aceleași specii și condiționate în aceleași condiții.

725

730

735

740

745

750

755

760

765

RO 116451 Bl

Semințele uscate ale invenției au o longevitate care este substanțial mai lungă decât cea a semințelor condiționate convențional, din aceleași specii, având esențial același MC. Uneori longevitatea este cu cel puțin 35% mai lungă și chiar cu cca 50% decât cea a semințelor condiționate convențional din aceleași specii, în cazul când semințele condiționate convențional, sunt reuscate până la un MC specific semințelor netratate, în condiții de uscare rapidă, tipic folosită pentru uscarea semințelor condiționate convențional.

în condiții optime de incubare/condiții de tratament cu căldură, longevitatea poate ajunge până la 150% și mai mult. Tipic, longevitatea va fi extinsă cu 50 până la 120% și chiar după incubare/tratament termic, iar în condiții mai puțin optime de la 50 până la 100%. în termeni absoluți, longevitatea semințelor uscate din invenție va fi ușor prelungită la 8 luni, chiar 12 luni, când sunt depozitate în condiții tipice pentru semințele netratate, putând ajunge până la 24 luni sau chiar mai mult.

Revendicări

Claims

1. Procedeu pentru prelungirea longevității semințelor condiționate, cu un conținut în apă cuprins între 2 până la 15% din greutatea inițială, care își mențin rata de germinație, caracterizat prin aceea că, înaintea reuscării până la un conținut în apă sub 15% raportat la greutatea inițială, semințele condiționate sunt:

- expuse la un stress hidric timp de 1 până la 7 zile; sau

- expuse la un tratament de încălzire de la 25 la 45°C, timp de 1 la 5h; sau

- expuse la o combinare a fazelor de mai sus.

2. Procedeu conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că, stressul hidric este obținut printr-o reducere inițială, rapidă, a conținutului în apă, cu 3 până la 20% din greutatea inițială a semințelor condiționate, urmată de reducerea conținutului în apă prin incubare sau prin uscarea lentă a semințelor parțial deshidratate, obținute.

3. Procedeu conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că, stressul hidric este obținut prin reducerea conținutului în apă al semințelor condiționate la o rată de pierdere a apei care variază între 0,1 până la 1,04% din greutatea seminței uscate, pe oră.

4. Procedeu conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că, stressul hidric este obținut prin incubarea semințelor condiționate prin osmoză la un potențial al apei între - 0,5 până la - 4,0 MPa.

5. Procedeu conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că, semințele sunt selectate dintr-un grup de specii reprezentate de tomate, ardei, pepene galben, pepene verde, castraveți, praz, morcov, ceapă, castraveciori, andive, Brassica, Impatiens, Verbena, Primula, Pelargonium, Viola, Chicorium și Cyclamen.