PT99226A - Processo para a preparacao de novas azetidinonas substituidas que sao agentes anti-inflamatorios e anti-degenerativos - Google Patents

Description

Este pedido de patemte é uma continuação em parte do nosso Caso No. 18229CA, apresentado em Julho 25, 1991 (pendente) e de USSN 719.653, apresentado em Junho 21, 1991 (pendente). O nosso Caso No. 18229CA é uma continuação em parte de USSN 597.617, apresentado em Outubro 15, 1990 agora abandonado. USSN 719.653 é uma continuação em parte de ID USSN 388.771, apresentado em Agosto 21, 1989, agora abandonado; que é uma CIP de USSN 179.688, apresentado em Abril 11, 1988, agora abandonado; que é uma comtinuação em parte de USSN 842.834, apresentado em Março 27, 1986, agora abandonado; que é um CIP de USSN 721.811, apresentado em Abril 10, 1985, que foi publicado como 4.680.391; que é uma CIP de USSN 557.030, apresentada em Dezembro 11, 1983, agora abandonado.

ANTECEDENTES DO INVENTO

Descobriu-se que um grupo de novas azetidinonas substi- O t tuídas são inibidores potentes da elastase e por conseguinte são agentes anti-inflamatórios e anti-degenerativos úteis.

Proteases de granulócitos e de macrôfagos têm sido descritos como responsáveis para os mecanismos de destruição crónica de tecidos associados com a inflamação, que incluem artrites reumatóides e enfisema. De acordo, inibidores específicos e selectivos dessas proteases são candidatos a agentes potentes anti-inflamatórios, úteis no tratamento de condições inflamatórias que resultam da destruição de tecidos conectivos, e.g. artrites reumatóides, enfisema, inflamação bronquial, nefrise glomercular, osteoartrites de lesões de infecção/reperfusão do miocárdio, espondilites, lupus, psoriases, atereosclero-ses, sépsia, septicemia, choque, periodontites, fibrose cística, infarte do miocárdio, lesões de reperfusão, menigites, glomerulo-nefrites e síndroma de perturbação respiratória aguda. \ Ο papel da protease dos granulócitos, leucócitos ou dos macrôfagos está relacionado com uma série rápida de eventos que ocorrem durante a progressão de uma condição inflamatória: (1) Existe uma rápida produção de prostaglandinas (PG) e compostos relacionados são sintetizados a partir do ácido raqui-dónico. Esta síntese de PG tem-se mostrado inibida por agentes anti-inflamatõrios não esteroidais relacionados com a aspirina, que incluem indometacina e fenilbutazona. Existe alguma evidência que os inibidores da protease evitam a produção de PG; (2) Existe também uma variação na permeabilidade vascular, que causa uma ligação de fluído em sítios inflamados e o edema resultante é geralmente usado como uma marcação para a medição do grau de inflamação. Este processo foi encontrado como sendo induzido pela actividade proteolítica ou de clivagem peptídica da protease, especialmente por aqueles que estão contidos no granu-lôcito, e por conseguinte o processo pode ser inibido através de vários inibidores de protease sintéticos, por exemplo, benziso-tiazolonas de N-acilo e os 1,1-dióxidos respectivos. Morris Zimmerman et al., J. Biol. Chem.. 225. 9848 (1980); e (3) Existe um aparecimento e/ou presença de células linfói-des, especialmente macrôfagas e de leucócitos polimorfonucleares (PMN). Ê sabido que uma série de proteases são libertadas pelos macrôfagos e PMN, indicando ainda que as proteases jogam um papel importante na inflamação.

Em geral, as proteases são uma familia importante de enzimas, englobadas nos enzimas de clivagem da ligação peptídica cujos membros são essenciais para uma série de actividades biológicas normais, como’ a digestão, formação e dissolução de coágulos de sangue, a formação de formas activas de hormonas, a :!f 'β

-5- reacção imune para células e organismos estranhos, condições patológicas como a degradação de proteínas na junção de cartilagem articular/pano nas artrites etc. i etc., e em estruturais reumatõides A elastase é uma das proteases. É um enzima capaz de hidrolização do componente de tecido conectivo da elastina, uma propriedade não contida pela massa das proteases presentes em mamíferos. Actua nas ligações não terminais da protéina, que são adjacentes a um amino ácido alifático. A elastase neutrofílica é de interesse particular devido ao espectro alargado de actividade contra substractos de tecido conectivo natural. Em particular, a elastase do granulócito é importante porque, como descrito acima, os granulócitos participam na inflamação aguda e na irritação aguda de formas crónicas de inflamação, que caracterizam muitas doenças inflamatórias importantes clinicamente.

As proteases podem ser inactivadas por inibidores que bloqueiam um sítio activo do enzima, através da sua ligação forte. Inibidores da protease, que ocorrem naturalmente, formam parte de mecanismos de defesa ou de controle que são cruciais ao bem estar de um organismo. Sem estes mecanismos de controle, as φ proteases destruirão qualquer proteína que alcançam. Os inibidores de enzimas, que ocorrem naturalmente, têm-se mostrado como tendo configurações apropriadas para se deixarem ligar fortemente ao enzima. Esta configuração é parte da razão que os inibidores têm pasa se ligarem tão fortemente ao enzima (ver Stroud, MA Family of Protein-Cutting Proteins*· Sei. Am. julho 1974, pp. 74 - 78). Por exemplo, um dos inibidores naturais, a a^-Antitripsi-na, é uma glicoprotéina contida no soro humano que tem um cobri-mento espetral inibitório largo, de entre outros enzimas, da elastase de ambos o pâncrèas e o PMN. Este inibidor é hidrolizado pela protease para a formação de um enzima de acilo estável, em

que ο sítio activo já não está disponível. Á'redução marcada em α^-antitripsina do soro genético ou devido a oxidantes, tem sido associada com enfisema pulmunar, que é uma doença caracterizada por uma perda progressiva da elastecidade do pulmão e resulta na dificuldade respiratória. Foi descrito que esta perda de elastecidade é causada por proteólises não controladas, progressivas ou pela destruição da estrutura do tecido do pulmão pelas proteases, como pela elastase libertada por leucócitos. J. C. Powers TIBS. 211 (1976). A artrite reumatóide é caracterizada por destruição progressiva de cartilagem articular em ambas na superfície livre de fronteira do espaço de junção e na erosão frontal construída por tecidos sinoviais em direcção â cartilagem. Este processo de destruição, por sua vez, é atribuído a enzimas cortadoras de proteínas, as elastases, que é uma protease neutral presente nos granulócitos humanos. Esta conclusão tem sido suportada pelas observações seguintes: (1) Investigações histoquímicas recentes mostraram a acumulação de granulócitos na junção de cartilagem/pano em artrites reumatóides; e (2) iima investigação recente do comportamento mecânico da cartilagem em resposta ao ataque de elastase purificada demonstrou a participação directa de enzimas de granulócitos, especialmente a elastase, na destruição de cartilagem reumatóide. H. Menninger et al., Biolocical Functions of Proteinases. H. Holzer e H. Tschesche, eds. Spinger-Verlag, Berlin, Heidelberg, New York, pp. 196 - 206, 1979.

Cs N

BREVE DESCRIÇÃO DO INVENTO O invento imediatamente reivindicado é dirigido a azetidinonas especialmente substituídas em que o substituinte de N é um grupo fenilalquilaminocarbonilo. Este invento é também dirigido a composições farmacêuticas e aos métodos de utilização destas azetidinonas especialmente substituídas.

DESCRIÇãO DETALHADA DO INVENTO

Este invento relaciona-se com inibidores da elastase potentes de Fórmula (I), de Fórmula (A) e de Fórmula (A') que são úteis na prevenção, controle e tratamento de condições inflamatórias e degenerativas especialmente de artrites e de enfisema.

Um grande número de derivados de azetidinona de Fórmula (I) , Fórmula (A) e de Fórmula (A') são antibióticos conhecidos que têm sido descritos em patentes e em várias publicações. Uma fórmula de azetidinonas substituídas que são encontradas como exibindo actividades anti-inflamatórias e anti-degenerativas pelo presente invento são representadas da forma seguinte:

R

Ci) em que:

R pode estar na configuração estereoquímica α ou β e é hidrogénio, alquilo inferior linear ou ramificado, especialmente alquilo C^g, como metilo, etilo, n- ou i-propilo, butilo, pentilo, ou hexilo; ou alquilo inferior substituído com um radical como definidos abaixo; ou halo como fluoro, cloro ou bromo; R pode estar na configuração estereoquímica a ou & e é

(a) OB ou -S(0)nB em que B é como definido abaixo e n é 0, 1, ou 2; (b) alcenilo inferior linear ou ramificado especialmente alcenilo C2_8 como vinilo, alilo, -CH2CH=C(CH3)2, e ... -CH2CH2CH=CH2 ; (c) alquilo inferior como definido acima;

Η Η H

III (d) acilammo e.g. HCON-; CF^CON-; CH3CON-; / V^yCONH- > CgHg/\C0NH -; ou 3 (e) amino; (f) grupo alcinilo inferior linear ou ramificado especialmente alcinilo C3_g como -C=CH, -CH2-CsCH e -CH2CH2-C=CCH3;

-JV (g) um grupo arilo que tem 6 - 14 átomos de carbono como descrito a seguir, como fenilo de fórmula

em que X5 e Xg independentemente são: 1) Q, em que Q é H, alquilo inferior, halo-alquilo inferior, fenilo ou fenilo ou naftilo substituídos; 2) halo; 3) alcenilo inferior; 4) alcinilo inferior; 5) -SQ; 6) -0Q; 11 1 7) -CHQCOQ , em que Q é definido como Q e Q pode ser o mesmo ou diferente de Q; 8) -CHQCOOQ1 como ch2cooh; 9) -CH2SQ; 10) -CHQSQ1; 11) -CH2oq ou -CHQQQ1 especialmente -CH2OH e -CH2OCH3; 12) -COQ por exemplo, -COCH3 e -(CO)H; 13) -C00Q especialmente -COOH e COOt-Bu; 14) -OCOQ como -OCOCH3; 15) -NQQ1; 16) NQCOQ1 especialmente -NHCOCH3; -10-

\' + 17) -CH2NH2 ou -CH2N(CH3)3l"; 18) -CH2OCOCH3; 19) -NQSC^Q1; 20) -SO^QQ1; 21) -SOQ; 22) -S02Q; 23) -S03Q; 24) -CN; 25) -N02; 26) -CONQQ1; 27) -NO; 28) -CSQ; 29) -CSNQQ1; 30) -cf2sq; 31) -CF2OQ; 32) -NQCONHQ1 ou NQCOÇ^Q2 em que Q2 é definido como Q1 e Q2 pode ser o mesmo ou diferente de Q1; 33) -CH2Y em que Y representa + -CH(NHAC)COO”, CH(NH3)COO“ , CH2COOH, COOH, -N(CH3)2, OH, CH2N(CH3)2, ou CH20H; 34) -CH2(alquilo 0χ_6); 35) -NH(CO)CH2CH2COOH; 36) -11-

Ο

-CO-N

COOH

QU

-CO-NH-SC>2fenilo ou fenilo substituído como p-clorofenilo; (h) heteroarilo como furilo, tienilo, tiazolilo, pirrilo, pirimidinilo, piridilo, oxazolilo, tetrazolilo ou imidazolilo insubstituídos ou substituídos, em que os substituintes são os descritos para os fenilos substituídos ; (i) aralquilo especialmente fenil-alguilo C. _ como um l—o benzilo de fórmula

ou fenetilo; (j) halo como F, Cl, Br, ou I;

''0

(k) N3; (l) hidrogénio; (m) R e R1 podem-se ligar em conjunto e formarem iam ciclo-alquilo como um cicloalquilo C^g, e.g., ciclopentano, =C(B)(B1) ou =0 (oxo) em que B e B1 independentemente são como definidos a seguir;

(n) -CH20alquilo especialmente -CH2OCH3 e -CH20C2H5; (o) -CH2CH20alquilo ¢^.-6 esPecialmente -CH2CH20C2H5; 2 3 R e R podem estar na posição a ou B e independentemente são (a) B como definido a seguir; (b) -CONBB^ em que B e B^ independentemente representam (1) H; (2) alquilo linear ou ramificado que tem desde 1 a 20 átomos de carbono, preferencialmente alquilo como metilo, etilo, isopropilo, t-butilo, pentilo ou hexilo; (3) arilo que tem desde 6 a 14 átomos de carbono como fenilo ou fenilo substituído de fórmula -13-

V

•χ 5 X, naftilo ou naftilo substituído de fórmula

ou antracilo ou antracilo substituído de fórmula

ou (4) cicloalquilo que tem desde 3 a 8 átomos de carbono especialmente ciclopropilo, ciclopentilo ou ciclo-he-xilo; (5) alcenilo linear ou ramificado que tem desde 2 a 20 átomos de carbono, por exemplo, alilo; (6) alcinilo linear ou ramificado que tem desde 2 a 20 átomos de carbono, por exemplo, -C=CH; (7) aralquilo, alquilarilo, aralcenilo, aralcinilo, alce- nilarilo ou alcinilarilo em que alquilo, arilo, alcenilo e alcinilo são como previamente definidos por exemplo, alquil C^g-fenilo de fórmula

em que r é 1 a 6, alquil C^g-naftilo de fórmula fc»

(8) hetroarilo que compreende mono-heteroarilo, di- ou poli-heteroarilo, ou heteroarilo fundido, que contém desde 1 a 3 de qualquer um ou mais dos heteroátomos N, S ou 0 em cada um dos seus anéis de heteroarilo, por exemplo, piridilo, pirrilo,

R-N como

COOH tienilo, isotiazolilo, imidazolilo

como

R-N^N x5 tetrazolilo como N-N-R5 Ν’

-N

/Nn Λ .N N-N CH2OGâHg isoquinolilo, pirazinilo, pirimidilo, quinolilo, tetra-hidro-isoquinolilo como

R R

OJ x5 benzotienilo, benzofurilo como ou '0' •«A»- 0' -17-

pirazolilo, indolilo, purinilo, carbazolilo, isoxazoli-lo e semelhante; (9) heteroaralquilo como 2-piridilmetilo, 2-tienilmetilo e 3-isotiazoliletilo; ou (10) heterocicloalquilo e.g., 1,3-dioxaciclo-hex-4-ilo, piperidino, w

morfolino, oxaciclopropilo, pirrolidino, benzotiazoli-no, imidazolidino, pirazolidino, e piperazino; (11) heterociclo-alcenilo como pirrolino, 2-imidazolino, 3-pirazolino ou iso-indolino; (12) B e B1 são ligados em conjunto e formam um anel hetero-cíclico que contém pelo menos um átomo de N e opcionalmente 1 a 3 dos heteroátomos, N, S, ou O, e.g., -18-

COOH

COOH

-N^N os grupos anteriores (1) - (12) podem ser insubstituidos ou podem estar substituídos por um ou mais radicais R· seleccionados a partir do grupo que consiste em alquilo inferior, hidroxi, ariloxi (OAr), alcoxi, halo, nitro, alquiltio inferior, ariltio, mercapto, amino, amino substituído por mono-alquilo ou di-alqui-lo, ciano, carboxi, alcanoilo inferior, Ar(C=0), aminosulfonilo, aminosulfenilo, aminosulfinilo, carbamoilo, carbamoiloxi, -S(0)nR5, S03R5, -P(0)gR5 (em que q é 1 ou 2 e R5 é H, alquilo C^g, aralquilo ou arilo como previamente definido), azido, carboxamido ou carboxamido N-substituído; (c) -S(0)nB; (d) -S(0)nNBBi; (e) -N(B)S(0)nBi; . (f) -P(0)qBBi; (g) -C(0)B especialmente acetilo, benzoilo, e.g., p-cloro-benzoilo, p-metilbenzoilo e p-aminosulfonilbenzoilo; (h) -0B especialmente -Oalquilo fenoxi, ou fenoxi substituído de fórmula -19- -19-

(i) -COOB, -OC (O) OB ou OCÍOJNBB^^; (j) -O-C(O)-B especialmente alcanoiloxi como acetilo- xi; (k) ciano; (l) -S-C(0)-B especialmente alcanoiltio como acetil- tio; ou (m) R e R podem ser ligados e formarem =C(B1)(B)/ um cicloalquilo C1_g por exemplo, ciclopentilo, e =0(0X0); A é (a) -0-C(0)-B; (b) -S(0)nB; (c) -S(0)nNBBi; (d) -C(0)B; (e) S03~M+ em que M representa · “I" }* (a) um amão alcalino como Na , K ; ou + 5 (b) um grupo de amónio quaternário de fórmula N (R ) ., por exemplo, (n-Bu)4N ; (f) fosforilo ou fòsfonilo substituído ou insubstituído como -P(0)3(R5)2 ou -p(0)4R5? tr // -20- í*

(g) -C(0)NBB1 especialmente -CON(R5)2fenilo/ -C0N(C2H5)B1 e -CONHB^, em que B^ é (1) -(cai2)rPh, ou CH(alquil C1-g) e.g., -CH(C2H5)-Ph, -CH(C3H7)-Ph# -CH-(alil)-Ph, -CH(C2H5)CH2Ph, ou -CH(CH3)-Ph em que Ph representa fenilo ou fenilo substituído como previamente definido, por exempo, 4-metil-fenilo, 4-metoxifenilo, 4-etoxife-nilo, 4-N,N-dimetilamino-fenilo, 4-benziloxi-fenilo, 4-fenil-fenilo, e 3,4-dimetil-fenilo; (2) -(CH2) (Naph) especialmente -CH2(Naph) ou -CH(C2H5)(Naph) em que (Naph) é um a- ou β-naftilo ou naftilo substituído como previamente definido; (3) -(CH2)r(Ar) ou CH(alquilo C^g), (CH2)r_i(Ar) em que Ar é como definido acima especialmente -CH2CH2Ar ou -CH2Ar, em que Ar representa heteroarilo especialmente tienilo, furilo, piridilo substituído, tienilo, 2-ben-zofuranilo, ou benzofuranilo assim como piridilo substituído, benzamidazole e outros tienilos e furilos; (4) -(CH2)r0Ph especialmente -CH2CH2CH2OPh; (5) -(CH2)rCH(0H)Ph; (6) -(CH2)r(C0)Ph; € -21-

o

(9) - CH3- Ph( p- CO- NH- S03-Ph( P- C1)); ζ10) -CH,—

(12) -CH(CH3)-Ph(p-cloro-gexilo); (h) —C (O) OB especialmente alcoxicarbonilo c^g, e.g., metoxicarbonilo, e etoxicarbonilo ou COOCH2-Ph(p--COOC2H5); (i) halo-alquilo 01-6 como trifluorometilo;

(j) -dB especialmente -0-CH2-(fenilo ou fenilo substituído como previamente definido), por exemplo, -OCH2cgH5; -OCH2-C6H4-OCH3; ou 0CH2C6H4N02; (k) sililo como -Si(CH3)2(t-Bu); (l) B especialmente H, alquilo c1_6/ CH2OH, -CH20(C0)CH3, fenilo ou fenilo substituído, -CHR^L, em que R5 é como previamente definido e L é um bom grupo rapidamente 5 rejeitável que .compreende OAc, SAc, halogéneo, OR , SR5, SOR5, OTs, Ts é tosilo; ou OTs, OCOCF^f e mesilo em que Ac é acetilo; e

(m) -CCO)NHS02 —h— CH3.

Num modo de realização preferido o presente invento é dirigido a compostos de fórmula (A')

e a seus sais farmaceuticamente aceitáveis em que: R é alquilo 0^_6; M é (1) hidrogénio, (2) alquilo C^g, (3) hidroxi-alquilo C^_g, (4) halo-alquilo C^_6, (5) alcenilo C2_6, ou £ -23-

hidrogénio, alquilo C^, halo-alquilo C^g, alcenilo C_ -, alcinilo CL c, ώ~Ό carboxi,

(1) (2) (3) (4) (5) (6) (7) (8) (9) carboxi-alquilo C^g, carboxi-alquilcarbonilo C^g, carboxi-alquilcarbonilamino C^_g, (10) carboxi-alcenilo C2_6, (11) hidroxi-alquilo C^_g, (12) alquilcarbonilo C^g, (13) alquilcarbonilamino C^g, ou (14) hidroximetilcarbonil-alquilo c-^_g/ © e X^ são cada um independentemente (1) hidrogénio, (2) alquilo C^g, (3) halo,

(4) carboxi, (5) alcoxi C;L_6, (6) fenilo, (7) alquilcarbonilo C^g, (8) di-(alquil C^gjamino, (9) fenoxi, ou X6 e X7 são juntos para a formação um anel seleccionado a partir de furano, tiofeno, e dioxaciclopentano; e X8 6 \ (a) hidrogénio, (b) alquilo C1-6, (c) halo, (d) alcoxi C^g, ou (e) hidroxi.

Numa classe deste modo de realização, o presente invento relaciona-se com compostos de Fórmula (A') em que

M ê hidroxi-alquilo C. ou halo-alquilo CL x—o X~o

Uma sub-classe deste modo de realização relaciona-se com compostos de Fórmula (A') em que Xg é hidrogénio, alquilo C^_g, fluoro ou cloro.

Uma sub-classe limitada deste modo de realização relaciona-se com compostos de Fórmula (A') em que M é 1-hidroxi--n-propilo, 2-hidroxi-n-propilo, 1-fluoro-n-propilo ou 2-fluoro--n-propilo.

Um segundo modo de realização do presente invento é dirigido a compostos de fórmula (A')

•7 -25-

e a seus sais farmaceuticamente aceitáveis èm que: R é alquilo C1_6;

é alquilo C^_g ou alcoxi C^_g-alquilo C (1) hidrogénio, (2) alquilo C^g, (3) alcenilo C2_g, ou (4) alcoxi C^g-alquilo C1_g;

Xr (1) hidrogénio, (2) alquilo C^g, (3) halo-alquilo C1_6, (4) alcenilo C2_g, (5) alcinilo C2_g, (6) carboxi, (7) carboxi-alquilo C^g, (8) carboxi-alquilcarbonilo C1_6, (9) carboxi-alquilcarbonilamino C^g, (10) carboxi-alcenilo C2_g, (11) hidroxi-alquilo C^g,

(12) alquilcarbonilo C^_g, ou (13) alquilcarbonilamino C1_6;

Xg é hidrogénio, halo ou alquilo C^g; e X6 é (1) hidrogénio, (2) alquilo C^g, (3) halo, (4) carboxi, (5) alcoxi>C1_g, (6) fenilo, (7) alquilcarbonilo C^g, (8) di-(alquil C^gíamino, (9) fenoxi, ou X7 é hidrogénio, ou

Xg e X^ são ligados em conjunto para a formação de um anel seleccionado a partir de dioxaciclopentano e furano.

Uma classe deste modo de realização é uma classe de compostos de fórmula (A') em que

X5 é carboxi ou carboxi-alquilo C^g/ X„ é hidrogénio, F, Cl, CH_ ou CH_CH_;

O O 4 J M é alquilo C.^ ou alilo; e X, é hidrogénio, alquilo C, alcoxi C- , e ο 1—o l-o X7 é hidrogénio ou X6 e X7 são juntos para a formação de um anel de furano ou dioxaciclopentano.

Exemplos desta classe do invento são os compostos seguites:

Um composto que é (4S)-3,3-dietil-l-([(R)-1-(benzofu-ran-5-il) butil-amino] carbonil] -4- [ (4-carboximetil) f enoxi] azeti-din-2-ona.

Um composto que é (4S)-3,3-dietil-l-[(R)-a-n-propil-(4--metil) benzilaminocarbonil] -4-[ (4-carboxi-3-cloro) fenoxi] azetidin--2-ona.

Um composto que é (4S)-3,3-dietil-l-[(R)-a-n-propil-(4--metil)benzilaminocarbonil]-4-[ (4-carboxi-3-fluoro) fenoxi]azeti-din-2-ona.

Um composto que é (4S)-3,3-dietil-l-[(R)-a-n-propil-(4--metil) benzilaminocarbonil]-4-[ (4-carboxi-3-metil) fenoxi]azeti-din-2-ona.

Um composto que é (4S)-3,3-dietil-l-[(R)-a-n-propil-- (4-etoxi) benzilaminocarbonil]-4-[ (4-carboximetil) fenoxi]azeti-din-2-ona.

Um composto que é (4S)-3,3-dietil-l-[(R)-a-n-propil--(4-metil)benzilaminocarbonil]-4-[(4-carboximetil-3-cloro)fenoxi ]azetidin-2-ona.

Um composto que é (4S)-3,3-dietil-l-[(R)-a-n-propil--(4-metil)benzilaminocarbonil]-4-[(4-carboximetil-3-fluoro)feno-xi]azetidin-2-ona.

Também no âmbito deste invento são os compostos de Fórmula (A') , em que existe mais do que um grupo X . Exemplo é o

O composto (4S)-3, 3-dietil-l-[(R)-a-n-propil-(l-(4-metilfenil))me-tilaminocarbonil]-4-[(3,5-dimetil-4-carboxi)fenoxi]azetidin-2--ona.

Uma segunda classe neste modo de ' realização é um composto de Fórmula (A)

em que: R é alquilo R1 é alquilo C^g ou alcoxi C^g-alquilo C1_g; M é (1) hidrogénio, (2) alquilo C^g, (3) alcenilo C2_6, ou (4) alcoxi C1_g-alquilo C1_g; (1) (2) (3) (4) (5) (6) hidrogénio, alquilo C1_6, halo-alquilo C^_g, alcenilo C„ c, alcinilo C2_g, carboxi, -29- /:

(7) carboxi-alquilo C- cf (8) carboxi-alguilcarbonilo C1_g/ (9) carboxi-alquilcarbonilamino C, ,, 1—6 (10) carboxi-alcenilo C. (11) hidroxi-alquilo C^g, (12) alquilcarbonilo C1-6, ou (13) alquilcarbonilamino C 6; e ê (1) hidrogénio, (2) alquilo C^g, (3) halo, (4) carboxi, (5) alcoxi C*L_g, (6) fenilo, (7) alquilcarbonilo C^_g, (8) di-(alquil c1_6)amino, (9) fenoxi, ou (10) metilenodioxi; ou um seu sal farmaceuticamente aceitável.

Uma classe deste modo de realização é a classe de compostos de fórmula (A), em que X5 é carboxi ou carboxi-alquilo C1_g. Uma sub-classe destes compostos são aqueles compostos da classe em que M é alquilo c^_3 ou alilo e Xg é hidrogénio, alquilo C1_g, ou 3,4-metilenodioxi ou fenilo. Para ilustração desta sub-classe os compostos são aqueles em que R é etilo; e R1 é metilo ou etilo. Para exemplificação deste invento os compostos são os seguintes: (1) (4S)-3,3-Dietil-l-[ (R)-a-etil-benzil-aminocarbonil]-4--[(4-carboximetil)fenoxi]azetidin-2-ona; (2) (4S) -3,3-Dietil-l-[ (R) -a-n-propil-benzilamino-car-bonil]-4-[(4-carboxi-metil)fenoxi]azetidin-2-ona; (3) (4S)-3,3-Dietil-l-[(R)-a-alil-(4-metil)benzil-ami-nocarbonil] -4- [ (4-carboxi-metil) fenoxi]azetidin-2-ona; (4) (4S) —3,3-Dietil-l-[ (R) -a-alil- (3,4-metilenodioxi) --benzilaminocarbonil] -4-[ (4-carboximetil) fenoxi] azetidin-2-ona; (5) (4S)-3,3-Dietil-l-[ (R)-a-n-propil-(3,4-metilenodioxi) -benzilaminocarbonil]-4-[(4-carboximetil)fenoxi]azetidin-2--ona; (6) (4S) -3,3-Dietil-l-[ (R) -α-η-propil-(4-metil)benzil-aminocarbonil]-4-[(4-carboxi)fenoxi]azetidin-2-ona; e (7) (4S)-3,3-Dietil—1—[(R)-a-n-propil-(4-metil)-benzil-aminocarbonil]4-[ (4-carboximetil) fenoxi]azetidin-2-ona.

Os compostos do invento são preparados através de métodos conhecidos ou são preparados, de entre outros métodos, pelos esquemas representativos seguintes.

Esquema (a) como ilustrado pelos Exemplos 16

Ag. CH20 Baae CHjOZ CA) oxidaçao

oxidação

R

CHjOZ

eia que Y é -N02, -CH3, -OCH3/ -Cl, -F, C02H, etc; X é halo, e.g., Cl, Br, ou I; Z é BCO ou BS02.

Esquema (b) como ilustrado pelos Exemplos 1-4

R- ή NH fíu z20 (|m que Z = glcanoilo ) O R1 R2

“R /r

JN \ em que X é halo; Z é como previamente definido, e.g., -S02~(p-N02-Ph), -COCH3, -CH2OTs, C02Et, etc. em que Ph representa fenilo ou fenilo substituído. * e·

Esquema (c) como ilustrado pelos Exemplos 5-15

em que R6 é H, CF , CH , etc.; 5 1 . J . . . R e R são como previamente definido; e CAN é um nitrato de amónio cérrico. -34-

Escruema (d) como ilustrado pelos Exemplos 2 - 3.

R

R R OCOCHq + C1S0,N=C=0

Jh-NH

O COCHq

Escruema (e) como ensinado por Μ. A. Krook e M. J. Miller (J. Org. Chem., 1985, 50, 1126 - 1128), os tipos seguintes de compostos podem ser preparados

*r fí

Esquema (f) como ensinado por Hart, D. J. et al.. (j. org. Chem., 48/ PP· 289 - 294, 1983); a classe seguinte de compostos pode ser preparada. R2 CHO+ LÍN([ TMS) ' •I^CH = NCTMS) a\ s\ pLi. CHCOOR5- -- C = C Rz/ OR5 γ

/y—NH em que R5 é como previamente definido; e TMS é trimetilsililo. -36- $ * β

Escmema fq) como ensinado por P. J. Reider e E. J. J. Grabowski (Tet. Lett.. 23., p. 2293, 1982); os grupos seguintes de compostos podem ser preparados.

COQH CH2CHNH2 COOH 1) PhCH2OH/H* 2) TM5C1 3) tBuMÇCl

O

JCOOH <

N. _ sSÍ(CH3)2CBU

* COOH /-NH CC)

em que R 1 é como previamente definido.

Os compostos do presente invento reivindicado são convenientemente preparados de acordo com Esquema (h) como ilustrado pelos Exemplos 20 e 21. 3

-37- UγΛ

2 ea. 1) LDR 2) Η X

2) E'X SXCCHjJjCtBu)

OH o' Si(CH3)2CCBu)

C C=) Cd))

SiCCH3)2CtBu)

CD)

0=C=NB CD)-- CEt)3N

,, -N O NB -¾

Este invento também se relaciona com um método de tratamento da inflamação em pacientes usando um composto de Fórmula (I), Fórmula (A) ou Fórmula (A7), particularmente um composto preferido como o constituinte activo. Déscobrui-se que os compostos de Fórmula (I), Fórmula (A) ou Fórmula (A7) são inibidores eficazes dá função proteolíti-ca da elastase do granulócito humado, como indicado a seguir: ' i

QUADRO I

E1 H

0-N\ Ο A R R1 R2 A ID50 (mg/ml) Ki (mM) H H S0CH3 C0CH3 10.00 H H OCOCH3 COCH3 3.00 H c2h5 0C0CH3 H 15.00 H c2h5 OCOCH3 COCH3 0.10 0.36 15100 H n-propyl OCOCH3 C0CH3 0.01 H CgHg Hrans) C00C2H5 H 10.00 H H cooch2c6h5 so2(p-c6h4-no2) 3.00 ch3 ch3 ococh3 COCH3 0.50 H c6H5 (trans) cooc2h5 so2(p-c6h4-no2) 4.00 H C6H5 (cis) cooc2h5 S02(p-C6H4-N02) 3.00 H CH30 C00CH2C6H5 coch3 2.00 H n-propyl OCOCH3 S03"(Bu)4N+ 8.00 H C2H3 (cis) C00C2H5 so2(p-c6h4-no2) 0.02 H C2H5 (cis) cooc2h5 so2(p-c6h4-no2) 0.05 3925 H C2Hg (trans) cooc2h5 so2(p-c6h4-no2) 0.05 39300 H C2H5 (trans) cooc2h5 S02(p-C6H4-cH3) 0.01 H n-propyl (trans) COOC2H5 so2(p-c6h4-no2) 0.06 H CH3CHCH (cis) C00C2H5 so2(p-c6h4-no2) 0.05 H ch2ch p-(c6h4-no2) H 1.50 H c2h5 ococh2ch2cooh COCH3 2.00 4514 H C2H5 (trans) OCOPh coch3 0.19 81000 QUADRO I (Cont.i R R1 RZ a IO50 (mg/ml) Ki (mM) (M "obs71 "W1 A C2H5 (cis) OCOPh COCH3 0.21 28500 WH C2H5 ococh3 C0CH2CH2C00H 1.43 2250 H C2Hg (CIS) ococh3 COPh 0.14 H *"2^5 (trans) coch3 COPh 0.34 76600 H C2Hçj (trans) OPh coch3 4.30 5270 H C2Hj (trans) 0C2H5 coch3 11.90 1670 H C2H5 (trans) OPh-p-COOH COCH3 3.40 8727 H C2Hg (trans) OPh-p-COOH cooc2h5 2.10 8680 H C2H5 (trans) OPh-p-COOH conhch3 16.50 H C2H5 (cis) C0N(CH2)4 so2(p-c6h4-ch3) 27.70 541 H C2H5 (cis) C00CH2C6H4-p-C00H so2(p-c6h4-ch3) 4.20 299 H C2H5 {Cls) CON(CH3)CH2COOH S02('p-C6H4-CH3) 22.00 165 H C2Hg (trans) och2cooh COOCjH^ 512 £ C2H5 (cis) och2cooh C00C2H5 796 π-propyl (trans) och2cooh cooc2h5 1504 H C2Hg (trans) 0CH2C0NHCH2C00H COOC2H5 1000 H C2Hj (trans) 0CH(CH3)C00H cooc2h5 - 346 H C2H5 (cis) cooch2cooh so2(p-c6h4-ch3) 1554

ID5q ê uma dosagem eficaz em microgramas por mililitro (mg/ml) para 50 % de inibição da actividade do enzima, dois minutos depois de tempo zero. Ki é a concentração do inibidor (micromolar, mM) que origina 50 % da actividade do enzima de -1 “1 controle . Kobs/I (M seg ) é a constante de velocidade de segunda ordem de inactivação do enzima.

QUADRO II

R1 R

R

/)—N O CO-NH-B-, r r1 r2 Bl Kobs/i C3H7 ch3 0-(4-C00H-Ph) CHzPh 1900 c2h5 ch3 0—(4—COOH—Ph) CH{CH3)Ph 15,000 C3H7 H 0-(4-C00H-Ph) CH2Ph 5,000 C2H5 C2H5 0-(4-C0(CH2)2C00H-Ph) CH2(4-Ph-Ph) 107,045 C2H5 C2H5 0-(4-C00H-Ph) CH2(4-Ph-Ph) 37,000 C2H5 ch2och3 0-(4-C00H-Ph) CH2(4-Ph-Ph) 44,533 c2h5 C2H5 0-(4-N02-Ph) CH2Ph 6,847 c2h5 C2H5 0-(4-C00H-Ph) CH2 (2- Antracene ) 36,177 C2H5 C2H5 O-(2-CH20H-Ph) CH2Ph 2961 c2h5 C2H5 0-(4-CH2C00H-Ph) CH2Ph 3175 c2h5 C2H5 + 0-(4-CH2CH-NH3-Ph) cn2ph 2540 co2_ C2H5 C2H5 0-(4-NHC0CH3-Ph) CH2Ph 3503 C2H5 C2H5 0-(4-NHCOCH2CH2COOH-Ph) CH2Ph 2568 C2H5 C2H5 0-(4-CH3C0-Ph) CH2~(4-COOH-Ph) 2807 C2H5 C2H5 0-(4-CH3C0-Ph) CH2(4-CH3C0-Ph) 5916 C2H5 c2h5 0-(4-C00H-Ph) CH2-(2-furÍL 5223 C2H5 C2H5 0—(4—COOH—Ph) CH2-(2-tienilo 4925 C2H5 C2H5 0-(4-C00H-Ph) Π—CgH-j g 8300 c2h5 c2h5 0-(4-C00H-Ph) (CH2)3Ph 4537 C2H5 CZH5 ,0-(4-C00H-Ph) CH2Naph 21,269

QUADRO II (COUt.) R rI C2H5 C2h5 C2H5 C2H5 C2H5 C2H5 C2H5 H C2H5 ch3 ch2ch=ch2 H C3H7 C2H5 cicloDentano Λ - (R s R' combinados e formam o anal ciclopenfe.no 0-(4-CQ0H-Ph) (CH2)4Ph 10,894 O-Ph CHz-(4-C00H-Ph) 1501 0-(4-C00H-Ph) CH2-· cicloVxil) 1424 0—{4—COOH—Ph) CH2Ph 4000 0-(4-COOH-Ph) CH2Ph 2000 0-(4-C00H-Ph) CH2Ph 5400 0-(4-C00H-Ph) CH2Ph . 3280 0-(4-C00H-Ph) CH2Ph 1900

C2H5 ch2och. C2H5 ch3* C2H5 C3H7 c2h5 c2H5 C2H5 C2H5 C2H5 c2H5 C2H5 c2h5 c2h5 C2H5 C2H5 c2h5 C2H5 C2H5 c2H5 ch2och3 C2H5 G2H5 C2H5 c2h5 C2H5 C2H5 0—14—C00H—Ph) CH2Ph 1900 0-{4-CQQH-Ph) . CH2CH(CH3)Ph 2553 0-(4-C00H-Ph) CH2-(2-Naph) 51,000 Q-(4-C00H~Ph) CH(CH3)-(1-Naph) 14,128 0-(4-C00H-Ph) CH2-(4-Cl-Ph) 3419 0-(4-C0QH-Ph) CH2(4-CH3~Ph) 3965 0-(4-C00H-Ph) CH2(4-F-Ph) 2337 Q-(4-C0OH~Ph) CH2(4-0CH3-Ph) 5162 0-(4-C00H-Ph) CH2(4-N02-Ph) 5075 0-(4-C00H-Ph) CH(CHo)-(3-Cl -4-CÍclo- hexil^h) 20,776 0-(4-C00H-Ph) CH2- (3,4-me tileno- dioxi»Ph) 16,984 0—(4—C00H—Ph) CH2-(2-benzofurano) 13,151 0-(2-(6-CQ0H-Naph)) CH2Ph 5561 0-(4-C00H-Ph) CH2(4-(4-Cl-Ph)- S02NHCO-Ph) 1730

\ QUADRO II (Cont.) E E1 R3 B, ^ob··^ C2H, C2H, O- C 3 - CO- NHCH2- Ph) CH2Ph 3047 c2b, CjHj 0-(3-COOH-Ph) CHjPh 1763 Cat* C2H, O-Ç4-C0OH-Ph) CH2-Ç4-PhO-Ph) 12.036 C2H, c2h, 0-(4-C00H-Ph) CH2-( 4- ΗΝζ CH3) 2- Ph) " CF3COO' 9983 CjH, c2h, 0- ( 4-COOH-Ph) (CH3)4OPh 3447 C2H, c2h, 0-C4-C00H-Eh) ζ CH2) 4CHÇ OH) Ph 4200 CjH, CjH, 0-C4-NCCH3)3rPh CHjPh 1700 C2H, c2h, -1-irridazolyl CH2Ph 200 CjH, CjR, CHjPh- 2000 0 CSH| C2Hs XX o"1 CONHSOj CH2Ph 6300 CjH, CjH, v—y nhcoch3 CHjPh 2422 -44-

QUADRO II (Cont.) R R1 RZ B, k„. /1 C2H5 H 0-(4-COOH-Ph) | — - -Ph-4-C00H obs*— 13,563 C3H7 C3H7 0-(4-C00H-Ph) CHzPh 2,500 allyl C2H5 0—{4—COOH—Ph) CH2Ph 1974 CHzPh C2H5 0-(4-C00H-Ph) CHzPh 87 C2H5 ch2och3 0—(4—COOH—Ph) CH2-2-Naph 50,000 C2H5 H Ph-4-C00H CHzPh 900 H OMe Ph-4-C00H CHz-2-Naph 1340 C2H5 C3H7 0—(4—COOH—Ph) CH2Ph-3-CF3 55,000 C2H5 ch3 0-(4-C0QH-Ph) CH(Et)-5-benzofuril 750,000 c2h5 ch3 0-(4-C00H-Ph) CH(Et)-3-ti.enil 78,800 C2H5 CHz0CH3 0-(4-C00H-Ph) CH(nPr)Ph 75,000 C2H5 C3H7 0-(4- CH(Et)Ph 87,000 C2H5 C3H7 C0(CH2)2C00H-Ph) 0-(4-CHzC00H-Ph) CH(Et)Ph 54,000 C2H5 CH3 0-(4-C00H-Ph) CyclopentiJ. — C2H5 ch3 0-(4-C00H-Ph) ch(ch3)ch2chzch3 — c2h5 ch3 0_(4-C0NHzPh) CH2Ph 12,500 C2H5 ch3 0—(4—COOH—Ph) CHz(3,5-diHe- C2H5 ch3 0-(4-C0NHzPh) 4-C00H-Ph) CHz(3,5-diMe- 5,500 C2H5 ch3 0—(4—COOH—Ph) 4-C00H-Ph) CH2(3,4-diMeO-Ph) 30,000 11,300

Me representa CH^ ph renrqsenta fenil Pr.reiirapsnta propíl Bu representa butil

QUADRO III

r2 β1 Kobs'1 0CH2C00H CHzPh-4-Ph 2901 0-(4-C00H-Ph) CHz_CO 4157 0—(al il) CHzPh-4-Ph 12,545 -l-imidezcl il CHzPh-4-Ph 461 1-triazol i'l CHzPh-4-Ph 2144 (1 -me til- tetxazol-5-il ’tic CH2Ph 3658 (i-H-triazol-3- il)tio CH2Ph 116 1-tetrazol ll CH2Ph 948 [2H-1-pyridon i 1 CH2Ph 357 0_Ph-4-C0NHz CH2-2-Naph(6-COOH) 40,650 1-benzimidazol il CHzPh 69 >> CH2Ph 351 0-gl i c e r 11 CH2Ph 818 0CH2C0NH2 CH2-Ph-4-Ph 51,802 NH-C00Me CHzPh 496 och2-cooh CH-(Et)-Ph 5711 och2-conh2 CH—(Et)—Ph 102,974 0—(4—C00H—Ph} nBu — 0-(4-C00H-Ph) ciclonsntil — 0-CH2C0N(Et)2 CH(Et)Ph — QUADRO III (Cont.)

Rz B1 ' knh-/I 0-(4-C00H-Ph) J. CH2Ph(2-0H) -00 s 1461 0-(4-COOH-Ph) CH2Ph(4-tBu) 21,774 0-(4-CQ0H-Ph) CH2Ph(4-(3-C00H)Ph) 14,727 0-(4-C00H-Ph) CH2Ph(4-C0-NO)) 2036 0-(4-CO0H-Ph) CH2Ph(4-CH2Ph) 8032 0-(4-C00H-Ph) CH2Ph(3-CH3) 6932 0-(4-C00H-Ph) CH2Ph(3,4-(CH2)4) 62,883 0-(4-C00H-Ph) CH2Ph(3,4-DiMe) 20,600 0-(4-CO0H-Ph) CH2Ph(4-i-Pr) 18,846 0-(4-C00H-Ph CH2Ph(4-S(0)2Me) 3350 0-(4-C00H-Ph) CH2Ph(4-C0Me) 5916 0-(4-C00H-Ph) CH2Ph(4-0Me-3-Me) 13,126 0-(4-C00H-Ph) CH2-Ph(4-0CH2Ph) 12,036 0-(4-CH(C00H)NHAc-Ph) CH2Ph 1676 0-(4-CH(OH)COOH-Ph) CH2Ph(3,4-DiMe) 17,626 0-(3-0H-4-C00H-Ph) CH2Ph(4-Me) 9252 0-(2-(CH2)3Me2-Ph) CH2Ph 629 0-(4-CH 2C00H-Ph) CH2Ph(4-Ph) 28,870

QUADRO IV

R R1 R2 B W1 C2H5 -ch3 0-(4-C00H-Ph) 4376 C2H5 -H 0-(4-COOH-Ph) 10,066 C3H7 C3H7 0-(4-C00H-Ph) H CH, 1 ✓ á -NH-C 1 Ph ^445 (isóriero de Rf mais 4§P°(isóiEro de Rf mais alto C2H5 H 0-(4-C00H-Ph) -N(CH2Ph)2 5977 C2H5 H 0-(4-C00H-Ph) -0CH2-(4-C00C2H5-Ph) 227,460 C2H5 C2H5 0-(4-C00H-Ph) -0CH2-(4-C00C2H5-Ph) 14,331 C2H5 H 0—(4—COOH—Ph) -N(C2H5)(CH2Ph) 82,956 (R) C2H5 c2h5 0-(4-CH2C00H-Ph)

847,000

QUADRO V X, Μ

Kobs /1 4-C00H Et 4-C00H CH20Me 4-CH2C00H Et 4-C00H Me 4-C00H Et 4-C00H PhCH2 4-ch2cooh nPr 4-C00H nPr 4-C00H nPr 4-C00H Et 4-CH2C00H nBu 4-COOH allyl

H 92,000 H 6,094 H 140,000 4-Me 47,000 4-Me — H 25,000 H 227,000 ch3 — H 120,000 3,4-(0CH20) — H — H -49-

OUADRO VI m*******~~*· · --------

W1

4-C00H Me H 4016 4-C00H Me 4-Ph 74,000 4-CH2C00H Me H 8,373 4-C00H Me(s) 4-Ph 49246 4-C00H Ph 4-Ph 67754 4-C00H Me 4-(2'-Cl-Ph) 245130 4-C00H Et 4-Ph 26382 4-C00H Et H 76204 4-C0-(CH2)2-C00H Me H 37084 4-C0-(CH2)2C00H Et H 272190 3,5-Me2-4-C00H Et H 24,994 4-CH2C00H Et H 126,000 3-OH-4-COOH Et H 124560 3-CH2C00H Me H 5885 4-CH=CH-C00H Me ' H 9101 4-C00H CH20Me(S) H 6981 4-CH2C00H CH20Me(S) H 4-C00H Me 4-Me 10680 4-COOH iPr(S) H 4743 4-C00H iPr H 177075 4-CH2C00H nPr H 188,000 4-CH2C00H CH20Me(R) H 11004 3,5-Me2-4-COOH nPr H 50 50

(QUADRO VI (COllt.) x5 M 3-CH2C00H Et 4-Me OD5- 4-(ch2)2cooh Me H 9481 3-CH2COOH Et H 81018 4-COOH CH20Me(R) H 6981 4-C00H Et 3-Me 4-CH2C00H Et 3-Me 4-C0(CH2)2C00H allyl 4-Me 4-COOH Me 4-Me 4-CH2COOH Et 3-C1 4-COOH Et 3-C1 4-COOH ·. alil 3-Me 4-COOH nPr 3-Me 4-CH2C00H alil 4-Me 664,000 3-CH2C00H alil 4-Me 4-CH2C00H alil 3-Me 4-CH2C00H nPr 3-Me 4-CO(CH 2)2COOH nPr 4-Me 3-CH2C00H alil H 3-CH2COOH CH20Me(S) H 4-COOH alil H 4-CH2C00H a 1 i 1 H 4-COOH Et 4-Me 4-COOH Et(S) 4-Me 4-COOH alil 4-Me 4-COOH nPr 4-Me 389,000 3-CH2C00H nPr 4-Me 4-CH2C00H nPr 4-Me 557,000 -51- (QUADRO VI (Cont.)

Xr M xf kobs/I J 3-CH2C00H Et 0 4-C1 DD5 4-C00H Et 4-C1 4-CH2C00H Et 4-Me 3-CH2C00H Et 3-Cl 4-C00H alil metilenodioxi 4-C00H nPr 3,4-metilenodioxi 4-CH2C00H alil 3,4-metilenodioxi 605,000 4-CH2C00H nPr 3,4- metilenodioxi 867,000 3-CH2C00H ch2cooh 4-Me 3-CH2C00H nPr H 4-C00H Et 3,4-metilenodioxi 4-CH2C00H Et 3,4-metilenodioxi 4-C00H Et 3,4-Me2 4-C00H ch2c=cch3 H 4-CH2C00H ch2c=cch3 H 4-C00H nBu H 2-N02-4-CH2C00H Et H 4-C00H Et 4-F 4-C00H Et 3-Me-4-0Me 3-F,4-C00H nPr 4-Me 464,500 3-C1,4-C00H nPr 4-14e 621,000 3-Me,4-C00H nPr 4-Me 186,500 3-F,4-CH2C00H nPr 4-Me 637,000 3-Cl,4-CH2C00H nPr 4-Me 589,000 3-Me,4-CH2C00H nPr 4-Me 998,000 4-Ch2-(00H) nPr 3,4(-CH=CH-0-) 848,000

Ensaio enzimático para a inibição da elastase de leucócito polimorfonuclear humano por via de hidrólise do reagente de N-t-Boc-alanil-alanil-prolilalanina-p-nitroanilida (Boc-ΑΑΡΆΝ) qu de N-t-Boc-alanil-prolilvalina-p-nitroanilida (Boc-AAPVN)

Tampão TES 0,05 M (ácido N-tris[hidroximetil]metil-2--amino-etanosulfónico), pH 7,5. Boc-AAPAN ou Boc-AAPVN 0,2 mM.

Para a preparação do substrato, o sólido foi em primeiro lugar dissolvido em 10,0 ml de DMSO. Tampão a pH 7,5 foi depois adicionado a um volume final de 100 ml. O extracto em bruto de leucócitos polimorfonucleares humanos (PMN) continha actividade de elastase.

Inibidores (azetidinonas) para serem testados, foram dissolvidos em DMSO mesmo antes de serem utilizados. A 1,0 ml de Boc-AAPAN 0,2 mM numa couvete, 0,01 - 0,1 ml de DMSO com ou sem inibidor foi adicionado. Depois de mistura, uma medição foi feita a 410 ιημ para a detecção de qualquer hidrólise espontânea, devido à presença do composto teste. 0,05 Mililitros de extracto de PMN foi depois adicionado e o J\OD/min aos 410 κιμ foi medido e registado. O espectrofotómetro modelo 35 Beckman foi usado.

Os resultados no Quadro I foram registados como ID^, dosagem eficaz em microgramas por mililitro (^g/ml) para 50 % de inibição da actividade do enzima, 2 minutos depois do tempo zero.

Os resultados foram também expressos como Ki, a concentração micromolar de inibidor (μΜ) originando 50 % de actividade de enzima controle; ou como que é a constante de -53- velocidade de segunda ordem por mole e por segundo para a inacti-vagão do enzima. A actividade da elastase no extracto de PMN em bruto pode variar de tuna preparação para outra. Um controle de cada novo lote é realizado, e o volume adicionado no procedimento do ensaio é ajustado para a actividade.

De acordo, os compostos de Fórmula (I), Fórmula (A) e Fórmula (A') podem ser usados para a redução da inflamação e/ou libertação da dor em doenças como enfisema, artrite reumatóide, osteoartrite, gota, inflamação bronquial, bronquite aguda ou crónica, fibrose cística, síndroma da perturbação respiratória em adultos, artereosclerose, sépsia, septicemia, choque, periodonti-tes, nefrites ou nefoses glomerular, infarte do miocárdio, lesão de reperfusão, artrite infecciosa, febre reumática e semelhante, e pode reduzir hemorragias em leucemia promielocítica aguda e semelhante. É de apreciar por aqueles que são peritos no ramo, que a terapia que compreende a administração de compostos de fórmula (I) pode actualmente incluir co-administração de um ou mais agentes activos adicionais. Classes de agentes activos incluem, mas não estão limitadas a, agonistas 62~adrenérgicos; agentes anti-colinérgicos; esteróides; agentes anti-inflamatórios não esteroidais (NSAID's); agentes mucolíticos; a maior parte esta-belizadores; e anti-bactericidas.

Para fins desta especificação, agonistas B2~adrenérgi-cos são entendidos como incluírem, mas não estão limitados a, metaproterenol, terbutalina, isoetarina, albuterol, e ritodrina, carbuterol, fenoterol, quinterenol, rimiterol, salmefamol, soterenol, e tretoquinol.

Para fins desta especificação, agentes anti-colinérgi-cos são entendidos como incluírem, mas não estão limitados a, atropina, e brometo de iptratrópio.

Para fins desta especificação, agentes mucolíticos são entendidos como incluírem, mas não estão limitados a, acetilcis-téina e guatenesina.

Para fins desta especificação, esteróides são entendidos como incluírem, mas não estão limitados a, prednisone, beclometasone, budesonide, solumedrol, triancinolona, e metil--prednisolone.

Para fins desta especificação a grande parte dos estabelizadores de células são entendidos como incluírem, mas não estão limitados a, cromolina e cetotofina.

Para fins desta especificação, agentes anti-inflamató-rios não esteroidais são entendidos como incluírem, mas não estão limitados a, aspirina, diflunisal, naftilsalicilato, fenilbutazo-lona, oxifenbutazolona, indometacina, sulindaco, ácido mefenâmi-co, meclofenamato de sódio, tolmetina, ibuprofeno, naproxeno, fenoprofeno e piroxicamo.

Para fins desta aplicação, agentes antibactericidas são entendidos como incluírem uma classe ampla de penicilinas, cefalosporinas e outros beta-lactamos, aminoglicósidos, quinolo-nas, macrolidos, tetraciclinas, sulfonamidas, lincosamidas e polimixinas. As penicilinas, por sua vez, são entendidas como incluírem, mas não estão limitados a, penicilina G, penicilina V, meticilina, nafcilina, oxacilina, cloxacilina, floxacilina, ampicilina, ampicilina/sulbactamo, amoxicilina, amoxicilina/cla-vulanato, hetacilina, ciclacilina, bacampicilina, carbenicilina, -55- -55-

indanilo de carbenicilina, ticarcilina, ticarcilina/clavulanato, azlocilina, mezlocilina, peperacilina, e mecilinamo. As cefalos-porinas e outros beta-lactamos são entendidos como incluírem, mas não estão limitados a, cefalotina, cefapirina, cefalexina, cefradina, defazolina, sefadroxilo, cefacloro, cefamandole, cefotetano, cefaxitina, ceruroxima, cefonicida, ceforadina, cefixima, cefotaxima, moxalactamo, ceftizoxima, cetriaxoma, ceftizoxima, cetriaxona, cefoperazona, ceftazidima, imipenemo e aztreonamo. Os aminoglicosídeos são entendidos como incluírem, mas não estão limitados a, estreptomicina, gentamicina, tobrami-cina, amicacina, netilmicina, canamicina e neomicina. As quinoli-nas são entendidas como incluírem, mas não estão limitadas a, ácido nalidíxico, norfloxacina, enoxacina, ciprofloxacina, ofloxacina, e temafloxacina. Os macrolidos são entendidos como incluírem, mas não estão limitados a, eritomicina, espiramicina e azitromicina. As tetraciclinas são entendidas como incluírem, mas não estão limitados a, doxiciclina, minociclina, e tetraciclina. As sulfonamidas são entendidas como incluírem, mas não estão limitados a, sulfanilamida, sulfametoxazole, sulfacetamida, sulfadiazina, sulfisoxazole, e co-trimoxazole (trimetoprimo/sulfametoxazole) . As lincosamidas são entendidas como incluirem, mas não estão limitadas a clindamicina e lincomicina. As polimixinas (polipeptídeos) são entendidos como incluirem, mas não estão limitados a, polimixina B e colistina.

Para o tratamento de inflamação, febre ou dor, os compostos de Fórmula (I), Fórmula (A) ou Fórmula (A') podem ser administrados oralmente, topicalmente, parenteralmente, por pulverizador de inalação ou rectalmente em formulações de dosagens unitárias que contêm suportes, adjuvantes e veículos farmaceuticamente aceitáveis não tóxicos convencionais, o termo parenteral como usado aqui inclui injecções subcutâneas, técnicas de infusão ou injecção intravenosas, intramusculares, intraesternas. Em adição ao tratamento de animais de sangue quente como ratos, ratazanas, cavalos, cães, gatos, etc., os compostos do invento são eficazes no tratamento de humanos.

As composições farmacêuticas que contêm o ingediente activo podem estar numa forma adequada para utilização oral, por exemplo, como comprimidos, trociscos, pastilhas, suspensões aquosas ou oleosas, pós dispersáveis ou grânulas, emulsões, cápsulas duras ou macias, ou xaropes ou elixires. Composições entendidas para utilização oral podem ser preparadas de acordo com qualquer método conhecido no ramo, para a manufactura de composições farmacêuticas e estas composições podem conter um ou mais agentes seleccionados a partir do grupo que consiste em agentes adoçantes, agentes de gosto e agentes de conservação de modo a originar uma preparação gostosa e farmaceuticamente fina. Comprimidos contêm o ingrediente activo em mistura com excipien-tes farmaceuticamente aceitáveis não tóxicos que são adequados para a manufactura de comprimidos. Estes excipientes podem ser por exemplo, diluentes inertes, como carbonato de cálcio, carbonato de sódio, lactose, fosfato de cálcio ou fosfato de sódio; agentes de desintegração e de granulação, por exemplo amido de milho, ou ácido algínico; agentes de ligação, por exemplo amido, gelatina ou acácia, e agentes de lubrificação, por exemplo estearato de magnésio, ácido esteárico ou talco. Os comprimidos podem ser não revestidos ou eles podem ser revestidos através de técnicas conhecidas para retardar a desintegração e a absorção no tubo gastrointestinal e por conseguinte fornecer uma acção retardada durante um período mais longo. Por exemplo, um material de tempo retardado, como monoestearato de glicerilo ou diestea-rato de glicerilo, pode ser empregue.

Formulações para utilização oral podem também estar presentes, como cápsulas de gelatina dura, em que o ingrediente activo é misturado com um diluente sólido inerte, por exemplo, carbonato de cálcio, fosfato de cálcio ou caolino, ou como cápsulas de gelatina macias em que o ingrediente activo é misturado com água ou num meio de óleo, por exemplo óleo de amendoim, parafina líquida, ou óleo de azeitona.

Suspensões aquosas contêm os materiais activos em mistura com excipiente adequados para a manufactura de suspensões aquosas. Estes excipiente são agentes de supensão, por exemplo carboximetilcelulose de sódio, metilcelulose, hidroxi-propilme-tilcelulose, alginato de sódio, polivinilpirrolidona, goma de tragacanta e goma de acácia; agentes de dispersão ou de humidifi-cação podem ser um fosfatídeo que ocorre naturalmente, por exemplo lecitina, ou produtos de condensação de um óxido de alcileno com ácidos gordos, por exemplo estearato de polioxieti-leno, ou produtos de condensação de óxido de etileno com álcoois alifáticos de cadeia longa, por exemplo heptadecaetileno-oxieta-nol, ou produtos de condensação de óxido de etileno com ésteres parciais derivados de ácidos gordos e um hexitol como monooleato de sorbitol de polioxietileno, ou produtos de condensação de óxido de etileno com ésteres parciais derivados dos ácidos gordos e anidridos de hexitol, por exemplo monooleato de sorbitano de polioxietileno. As referidas suspensões aquosas podem também conter um ou mais agentes de conservação, por exemplo etilo, ou n-propilo, p-hidroxibenzoato, um ou mais agentes de coloração, um ou mais agentes de gosto, e um ou mais agentes adoçantes, como sacarose ou sacarina.

Suspensões oleosas podem ser formuladas para a suspensão do ingrediente activo num óleo vegetal, por exemplo óleo de arachis, óleo de azeitona, óleo de sésamo, ou óleo de coco, ou num óleo mineral como parafina líquida. As suspensões oleosas podem conter um agente de espessamento, por exemplo cera de -58- -58-

abelhas, parafina dura ou álcool de cetilo. Agentes adoçantes como aqueles indicados acima, e agentes de gosto podem ser adicionados para originar uma preparação oral gostosa. Estas composições podem ser conservadas por adição de um anti-oxidante como ácido ascórbico. Põs dispersáveis e grânulos adequados para a preparação de uma suspensão aquosa pela adição de água origina o ingrediente activo em mistura com um agente de dispersão ou de humidificação, agente de suspensão e um ou mais conservantes. Agentes de humidif icação ou de dispersão e agentes de suspensão são exemplificados pelos compostos já mencionados acima. Excipientes adicionais, por exemplo agentes adoçantes, de gosto e de cor, podem também estar presentes.

As composições farmacêuticas do invento podem também estar na forma de emulsões de óleo em água. A fase oleosa pode ser um óleo vegetal, por exemplo óleo de azeitona ou óleo de arachis, ou um óleo mineral, por exemplo parafina líquida ou suas misturas. Agentes de emulsão adequados podem ser gomas que ocorrem naturalmente, por exemplo goma de acácia ou goma de tragacanta, fosfatídeos que ocorrem naturalmente, por exemplo feijão de soja, lecitina, e ésteres ou ésteres parciais derivados de ácidos gordos e anidridos de hexitol, por exemplo mono-oleato de sorbitano, e produtos de condensação dos referidos ésteres parciais com óxido de etileno, por exemplo mono-oleato de sorbitano de polioxietileno. As emulsões podem também conter agentes adoçantes e de gosto.

Xaropes e elixires podem ser formulados com agentes adoçantes, por exemplo glicerol, propileno-glicol, sorbitol ou sacarose. Estas formulações podem também conter um demulcente, um agente conservante e agentes de gosto e de cor. As composições

farmacêuticas podem estar na forma de suspensões oleagenosas ou aquosas injectáveis esterelizadas. Estas suspensões podem ser formuladas de acordo com técnicas conhecidas no ramo usando aqueles agentes de humidificação ou de dispersão adequados e agentes de "suspensão, que foram acima mencionados. A preparação injectável esterelizada podem também conter uma solução ou suspensão injectável esterelizada num solvente ou diluente não tóxico parenteralmente injectável, por exemplo como uma solução em 1,3-butáno-diol. De entre os veículos e solventes aceitáveis, que podem ser empregues, são água, solução de Ringer de glucose em água e solução de cloreto de sódio isotónica. Em adição, óleos fixos, esterelizados são convencionalmente empregues como um solvente ou um meio de suspensão. Para este fim qualquer óleo fixo fraco pode ser empregue, que inclui mono- ou diglicerídeos sintéticos. Em adição, ácidos gordos como ácido oléico encontra utilização na preparação de injectáveis.

Os compostos de Fórmula (I) , Fórmula (A) e de Fórmula (A') podem também ser administrados na forma de supositórios para administração rectal da droga. Estas composições podem ser preparadas por mistura da droga com um excipiente não irritante adequado, que é sólido à temperatura ambiente mas líquido à temperatura rectal e por conseguinte fundir no recto para a libertação da droga. Estes materiais são manteiga de coco e polietileno-glicois.

Para uso tópico, cremes, unguenteos, geleias, soluções e suspensões, etc., que contêm agentes anti-inflamatórios são empregues. A quantidade de ingrediente activo que pode ser combinada com materiais de suporte para a produção de uma forma de dosagem simples variará dependendo do hospedeiro a ser tratado e modo particular de administração. Por exemplo, uma formulação entendida para administração oral em humanos pode conter desde 5 mg a 2000 mg ou a 5000 mg de ingrediente activo composto com uma quantidade conveniente e apropriada de material de suporte, que pode variar desde cerca de 5 a cerca de 95 por cento da composição total. Para os fins desta especificação, esta larga gama de dosagem é especificamente entendida como incluir, mas não limitada a, gama de 5 mg a 2000 mg; 25 mg a 2000 mg; 5 mg a 1000 mg; 25 mg a 1000 mg; 5 mg a 500 mg; e 25 mg a 500 mg. As formas de dosagem unitária geralmente conterão entre desde cerca de 25 mg a cerca de 500 mg de ingrediente activo.

Deve ser entendido, contudo, que o nível de dosagem específica para qualquer paciente depende de uma série de facto-res de actividade do composto específico empregue, da idade, do peso corporal, de saúde em geral, do sexo, da dieta, do tempo de administração, da via de administração, da velocidade de excreção, da combinação da droga e da gravidade da doença particular que provocou a terapia.

Os compostos seguintes ilustram a preparação dos compostos úteis no método de tratamento do presente invento, mas não limitam o âmbito do invento. EXEMPLO 1 l-p-Nitrofenilsulfonil-4-benziloxicarbonil-azetidin-2-ona

Diazabicilo-undecano (152 g; 1 mM) foi adicionado a uma mistura de 205 mg (lmM) de 4-benziloxicarbonil-azetidin-2-ona e 181 mg (lmM) de cloreto de p-nitrobenzenosulfonilo em 10 ml de cloreto de metileno, à temperaturam ambiente. Depois de agitação 2 - 1/2 horas, a solução laranja foi lavada com água, seca sobre MgS04, e concentrada in vacuo. O resíduo foi cromatografado em sílica gel em hexano/acetato de etilo para originar 64 mg (17 %) de 2-p-nitrofenilsulfoni1-4-benziloxocarbonil-azetidin-2-ona. RMN (CDC13): í 3,3 (2H, dubleto-quarteto); 4,8 (qt., 1H); 5,2 (s, 2H); 7,2 (s, 5H); 8,2 (mlt., 4H). EXEMPLO 2 l-Acetil-3.3-dimetil-4-acetoxiazetidin-2-ona Passo A; Preparação de 2-metil-prop-l-enilacetato

Uma mistura de 72 g (1 M) de isobutiraldeído, de 153 g (1,5 M) de anidrido acético e de 12 g (0,125 M) de acetato de potássio foi refluxada durante sete horas. A mistura reaccional arrefecida foi lavada com água e agitada com 300 ml de NaHC03 satirado aos 0°C, durante 45 minutos. A fase orgânica foi seca durante I^CC^ Para originar um óleo amarelo que foi destilado à pressão atmosférica, para originar 35,41 g (31 %) de 2-metil- -prop-l-enilacetato, p.f. 122-126°. RMN (CDC13): S 1,6 (S, 6H); 2,1 (s, 3H); 6,9 (mlt, 1H).

Passo B: Preparação de 3.3-dimetil-4-acetoxi-azetldin-2-ona

Isocianato de clorosulfonilo (16 ml) foi adicionado a uma solução de 22,8 g (0,2 M) de acetato de 2-metil-prop-l-enilo em 50 ml de cloreto de metileno aos 0o, sob azoto. Depois de agitação aos 0o durante 20 horas, a mistura reaccional foi adicionada à mistura de 20 ml de água, 90 g de gelo, 48 g de NaHCO^ e de 16,6 g de Na2S03 e agitada aos 0o, durante 30 minutos. Isto foi depois extractodo com 300 ml de CH2C12 e a fase orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre MgSC>4 e concentrada in vacuo para originar 27,75 g que foi cromatografado em sílica gel em hexano/acetato de etilo, para originar 2,17 g (8,5 %) de 3,3-dimetil-4-acetoxi-azetidin-2-ona. RMN (CDC13): S 1,2 (s, 3H); 1,3 (s, 3H); 2,2 (s, 3H); 5,6 (s, 1H) .

Passo Ci Preparação de l-acetil-3,3-dimetil-4-acetoxiazeditin-2--ona

Uma mistura de 283,3 mg (1,8 mM) de 3,3-dimetil-4-ace-toxiazetidin-2-ona, 2 ml de piridina e de 2 ml de anidrido acético foi aquecida aos 100° num tubo selado, durante 36 horas. A mistura reaccional foi concentrada in vacuo e o resíduo cromatografado em sílica gel em hexano/acetato de etilo para originar 295 mg (82 %) de l-acetil-3,3-dimetil-4-acetoxiazetidin-2-ona. RMN (CDC13): 5 1,2 (s, 3H); 22 (s, 3H); 2,5 (s, 3H); 6,1 (s, 1H). -63- EXEMPLO 3 l-Acetil-4-acetoxi-3-n-proDÍlazetidin-2-ona Passo A: Preparação de Acetato de Pent-l-enilo

Uma mistura de 86 g (1 M) de valeraldeído, 153 g (1,5 M) de anidrido acético, e de 12 g (0,125 M) de acetato de potássio, foi refluxado durante 8 horas. A mistura arrefecida foi depois agitada com 100 ml de NaHC03 aquosa saturada durante uma hora. A fase orgânica é separada, seca sobre K2C03, e destilada aos 40 mm para originar 46,15 g (45 %) de acetato de pent-l-enilo, p.f. 89°C. RMN (CDC13)í S 1,0 (tr, 3H); 1,2 - 2,0 (mlt., 4H) ; 2,1 (s, 3H) ,· 4,7 - 5,6 (mlt., 1H); 7,0 - 7,3 (mlt., 1H).

Passo Bi Preparação de 4-acetoxi-3-n-propilazetidin-2-ona

Oitocentos microlitros de isocianato de clorosulfonilo foi adicionado a uma solução de 1,28 g (10 mM) de acetato de pent-l-enilo em 5 ml de cloreto de metileno aos 0o, sob azoto. Depois de agitação aos 0o durante 5 dias, a mistura reaccional foi adicionada gota a gota a uma mistura de 5 g de gelo, 1,15 ml de água, 2,82 g de NaHC03 e 1,0 g de Na2S03 e agitada aos 0o durante 30 minutos. A mistura foi extractada com 2 x 25 ml de cloreto de metileno e as fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre MgSC>4, e concentradas in vacuo. O resíduo foi cromatografado em sílica gel em hexano/acetato de etilo, para originar 60 mg de 4-acetoxi-3-n-propilazetidin-2-ona trans (3,4 %). RMN (CDC13): S 1,0 (mlt., 3H); 1,7 (mlt., 4H); 2,2 (s, 3H); 3,2 (tr, 1H); 5,6 (s, 1H); 6,7 (ls, 1H).

Passo Ct Preparação de l-acetil-4-acetoxí-3-n-propilazetidin-2--ona

Uma mistura de 56 mg (0,33 mM) de 4-acetoxi-3-propila-zetidin-2-ona, 1 ml de anidrido acético e de 1 ml de piridina foi agitada aos 100° num tubo selado, durante 24 horas. Depois de concentração in vacuo o resíduo foi cromatografado em sílica gel em hexano/acetato de etilo, para originar 16 mg (23 %) de l-ace-til-4-acetoxi-3-n-propil-azetidin-2-ona. RMN (CDC13)í 5 1,0 (tr largo, 3H); 1,7 (mlt., 4H); 2,2 (s, 3H); 2,4 (s, 3H); 3,2 (tr, 1H); 6,1 (d, 1H). EXEMPLO 4 l-Acetil-4-metilsulfonilazetidin-2-ona

Passo A: Preparação de l-acetil-4-metiltioazetidin-2-ona

Uma mistura de 300 mg (2,6 mM) de 4-metiltioazetidin--2-ona, 10 ml de acido acético e de 10 ml de piridina foi agitada aos 100° num tubo selado, durante 24 horas. Depois de concentração in vacuo, o resíduo foi cromatografado em sílica gel em hexano/acetato de etilo para originar 324 mg (78 %) de 1-acetil--4-metiltioazetidin-2-ona. RMN (cdci3)í δ 2,4 (s, 3H); 2,41 (s, 3H); 3,2 (dubleto -quarteto, 2H); 5,1 (dubleto - dubleto, 1H).

Passo Βϊ Preparação de N-acetil-4-metilsulfinilazetidin-2-ona

Uma mistura de 130 mg (0,82 mM) de N-acetil-4-metil-tioazetidinona e de 200 mg (0,93 nM) de ácido m-cloroperbenzóico a 80 % em 5 ml de cloreto de metileno foi agitada à temperatura ambiente, durante 5 minutos. Depois de remoção do solvente in vacuo. O resíduo foi cromatografado em pratos de sílica gel de 2-2000 μ em hexano/acetato de etilo para originar 57 mg (40 %) de l-acetil-4-metilsulfinilazetidin-2-ona. RMN (CDC13): S 2,4 (s, 3H); 2,6 (s, 3H); 3,5 (mlt., 2H); 4,9 (mlt., 1H). EXEMPLO 5 3-Azido-4-carboetoxi-l-(p-metoxifenil)-azetidin-2-ona A uma solução de 3,06 g de cloreto de azidoacetilo em 50 ml de CH2C12 foi adicionado gota a gota uma solução de 3,57 ml de trietilamina e de 5,3 g de imina formada a partir de etilglio-xalato e de p-anisidina em 50 ml de CH2C12, com arrefecimento de tal modo que a temperatura reaccional permaneceu abaixo dos 5o. A reacção foi depois agitada à temperatura ambiente durante três horas e depois foi lavada sequencialmente com HC1 IN, bicarbonato de sódio aquoso saturado, e cloreto de sódio aquoso saturado. A fase orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio, filtrada, e evaporada, e o resíduo em bruto foi recristalizado a partir de tetracloreto de carbono/hexano para originar 3,7 g de 3-azido-4--carboetoxi-l-(p-metoxifenil)azetidino-2-ona; p.f. 80 - 85°. RMN (CDC13): δ 7,2 (d, J = 9, 2H); 6,75 (d, J = 9, 2H); 4,9 (d, J = 6, 1H); 4,6 (d, J = 6, 1H); 4,25 (q, J = 8, 2H); 3,7 (s, 3H); 1,25 (t, J = 8, 3H). EXEMPLO 6 4-Carboetoxi-3-cloro-l-(p-metoxifenil)-azetidino-2-ona 4-Carboetoxi-3-cloro-l- (p-metoxif enil) azetidino-2-ona foi preparada seguindo o mesmo procedimento como descrito no Exemplo 5, mas usando cloreto de cloroacetilo e a imina formada a partir de etilglioxalato e de p-anisidina como material de partida. O produto em bruto foi recristalizado a partir de éter (hexano) para originar 3,1 g de 4-carboetoxi-3-cloro-l-(p-meto-xifenil)azetidin-2-ona, p.f. 99 - 100°. RMN <CDC13): δ 7,2 (d, J = 9, 2H); 6,8 (d, J = 9, 2H); 5,1 (d, J = 6, 1H); 4,7 (d, J = 6, 1H); 4,25 (q, J = 7, 2H); 3,7 (S, 3H); 1,25 (t, J = 7, 3H). EXEMPLO 7 4-Carboetoxi-3-metoxi-l-(p-metoxifenil)-azetidino-2-ona 4-Carboetoxi-3-metoxi-l- (p-metoxif enil) azetidino-2-ona foi preparado seguindo o mesmo procedimento como descrito no Exemplo 5, mas usando cloreto de metoxiacetilo como material de partida. Depois de cromatografia o composto cristalizou na forma de um sólido branco; p.f. 116 - 118°. RMN (CDC13): S 7,2 (d, J = 9, 2H); 6,75 (d, J = 9, 2H); 4,7 (d, J = 5, 1H) ; 4,6 (d, J = 5, 1H) ; 4,2 (q, J = 5, 2H) ; 3,7 (S, 3H); 3,5 (S, 3H); 1,2 (t, J = 5, 3H). EXEMPLO 8 4-Carboetoxi-l-(p-metoxifenili-3-fenil-azetidin-2-ona A uma solução de 17 ml de trietilamina e de 5,0 g de imina formada a partir de glioxalato de etilo e de p-anisidina em 100 ml de 1,2-dicloroetano ao refluxo foi adicionado gota a gota durante 2 horas, uma solução de 16 ml de cloreto de fenilacetilo destilado fresco em 50 ml de dicloroetano. Depois de refluxo durante três horas, a reacção foi trabalhada como para a 3-azi-doazetidinona. 0 residuo em bruto foi cromatografado para originar os isómeros cis e trans de 4-carboetoxi-l-(p-metoxifenil)-3-fenilazetidin-2-ona na forma de óleos; cis: RMN (CDClg): S 7,2 (m. 7H); 6,7 (D; J = 9, 2H); 4,7 (S, 2H); 3,6 (S, 3H); 3,6 (q, J = 7, 2H); 0,7 (t, J = 7, 3H); trans: RMN (CDC13) S 7,3 (m, 7H); 6,8 (d, J = 9, 2H); 4,5 (d, J S 2, 1H); 4,45 (d, J = 2, 1H); 4,1 (q, J = 7, 2H); 3,6 (s, 3H) ; 1,2 (t, J = 7, 3H). EXEMPLO 9 4-Carboetoxi-l-(p-metoxifenil)-3-vinilazetidin-2-ona 4-Carboetoxi-l-(p-metoxifenil) -3-vinilazetidino-2-ona foi preparado seguindo o mesmo procedimento como descrito no Exemplo 8, mas usando cloreto de crotonilo como o reagente. Depois de cromatografia os isómeros cis e trans do composto foram obtidos ; cis (p.f. 70 - 72°), -68-

RMN (CDC13): δ 7,2 (d, J = 9, 2H) ; 6,8 (d, J = 9, 2H); 5,2 - 5,8 (m, 3H); 4,6 (d, J = 6, 1H); 4,2 (m, 3H); 3,7 (s, 3H); 1,2 (t, J = 7, 3H); trans (óleo), RMN (CDC13): δ 7,25 (d, J = 9, 2H); 6,8 (d, J = 9, 2H); 5,7 - 6,2 (m, 1H); 5,2 - 5,5 (m, 2H); 4,25 (s largo, 1H); 4,2 (q, J = 7, 2H); 3,9 (dd, J = 1, Jz = 6, 1H); 3,75 (S, 1H); 1,25 (t, J = 7, 3H). EXEMPLO 10 4-Carboetoxi-3-etil-l-(p-metoxifenil)azetidin-2-ona

Os isómeros cis e trans de 4-carboetoxi-3-vinil-l-(p--metoxifenil)azetidino-2-ona são cada um hidrogenados com paládio em carvão, em etanol para originarem os isómeros cis e trans correspondentes de 4-carboetoxi-3-etil-l-(p-metoxi-fenil)azetidi-no-2-ona. EXEMPLO 11 4-Carboetoxi-l-(p-metoxifenil)-3-(N-metil-trifluoroacetamido)aze-tidin-2-ona

Uma solução de 2,16 g de 3-azido-4-carboetoxi-l-(p-me-toxifenil)azetidino-2-ona em etanol foi hidrogenada com paládio para originar 4-carboetoxi-l-(p-metoxifenil)-3-aminoazetidin-2--ona. Esta amina foi acilada com 1,1 ml de anidrido trifluoro--acético em 10 ml de CH2C12 que contém 1,5 ml de piridina, seguido por metilação usando 1 ml de sulfato de dimetilo em 30 ml de acetona, que contém 3 g de carbonato de potássio. Depois de isolamento, o produto em bruto foi cristalizado para originar 2,2 g de 4-carboetoxi-l-(p-metoxifenil)-3-(N-metil-trifluoroacetami-do)-azetidino-2-ona, p.f. 102 - 104°, RMN (CDC13)í S 7,2 (d, J = 9, 2H); 6,75 (d, J = 9, 2H); 5,5 (d, J = 6, 1H); 4,7 (d, J = 6, 1H); 4,2 (q, J = 7, 2H); 3,7 (s, 3H); 3,2 (s largo, 3H); 1,2 (t, J = 7, 3H). EXEMPLO 12 4-Carboetoxi-3-metoxiazetidin-2-ona A uma solução de 1,4 g de 4-carboetoxi-3-metoxi-l-(p--metoxifenil)azetidino-2-ona em 50 ml acetonitrilo aos 0o foi adicionado uma solução de 8,23 g de nitrato de amónio cérrico em 50 ml de I^O, durante 3 minutos. Depois de agitação aos 0° durante 1 hora, a solução foi vazada em 200 ml de sulfureto de sódio a 10 % e extractada com 3 x 75 ml de acetato de etilo. Os extractos orgânicos combinados foram lavados com sulfureto de sódio a 10 % e com soluções de cloreto de sódio saturadas e secos sobre sulfato de sódio. Filtração e evaporação originaram um óleo ambar que foi recristalizado a partir de cloreto de metileno/he-xano para originar 700 mg de 4-carboetoxi-3-metoxiazetidin-2-ona; p.f. 91 - 92°. RMN (CDC13): δ 7,1 (s largo, 1H); 4,7 (dd, σχ = 2, = 5, 1H); 4,3 (d, J = 5, 1H); 4,15 (q, J = 7, 2H); 3,4 (s, 3H); 1,25 (t, J = 7, 3H).

Seguindo substancialmente o mesmo procedimento como o descrito no Exemplo 12, mas usando uma azetidinona 3-substituída apropriada, os compostos (a) - (f) foram preparados: -70-

(a) 4-Carboetoxi-3-cloroazetidin-2-ona RMN (CDCl3)i 5 7,3 (s largo, 1H); 5,0 (dd, J4 = 2, J2 = 6, 1H) ; 4,4 (d, J = 6, 1H); 4,2 (q, J = 7, 2H); 1,3 (t, J = 7, 3H). (b) 4-carboetoxi-3-fenilazetidin-2-ona (eis e trans) RMN (CPC13):cis δ 7,2 (S, 5H); 6,4 (s largo, 1H); 4,7 (d, J = 6, 1H); 4, 4 (d, J = 6, 1H); 3,7 (q, J = 7, 2H); o, 75 (t, J II Ό 3H) : trans: δ 7.2 (s, 5H)? 6,9 (S largo, 1H); - í/3 (d largo, J = 2, 1H); 4t rl (q c> II 2H); 4,0 (d, J = 2, 1H); 1,2 (t, r J = 7, 3H) . (c) 4-Carboetoxi-3-(N-metiltrifluoroacetamido)azetidin-2-ona RMN (CDC13): S 7,2 (s largo, 1H); 5,4 (d, J = 6, 1H); 4,5 (d, J = 6, 1H); 4,15 (q, J = 7, 2H); 3,2 (s, 3H); 1,2 (t, J =7, 3H). (d) 4-Carboetoxi-3-vinilazetidin-2-ona (cis e trans) RMN (CDC13) çis: δ 7,1 (s largo, 1H); 5,2 - 5,8 (m, 3H); 4,0 - 4,4 (m, 4H); 1,25 (t, J = 7, 3H); trans: δ 7,25 (s largo, 1H); 5,0 - 6,2 (m, 3H); 4,1 (q, J = 7, 2H); 3,9 (d, J = 2, 1H); 3,7 (dd, J± = 2, = 7, 1H) ; 1,2 (t, J = 7, 3H) . (e) 4-Carboetoxi-3-etilaaetidin-2-ona cis: RMN (CDC1 ): 5 6,9 (s largo, 1H); 4,2 (m, 3H); 3,4 (dd, J, = v 1 6, J2 = 8, 1H); 1,51 (q, J s 8, 2H) ,* 1,2 (t, J = 7, 3H); 1,0 (t, J = 8, 3H).

Trans: rmn (CDClg)s S 6,8 (s largo, 1H); 4,2 (q, J = 7, 2H); 3,8 (d, J = 2, 1H); 3,2 (dd, = 2, J2 = 7, 1H); 1,8 (dq., J1 = 2, J2 = 8, 2H); 1,2 (t, J = 7, 3H); 1,0 (t, J = 8 3H). (f) 3-Azido-4-carboetoxiazetidin-2-ona EXEMPLO 13

Sal de tetrabutilamônio do Ácido 4-Carboetoxi-3-(N-metiltrifluo» roacetamido)azetidino-2~ona-l-sulfônico A uma solução de 140 mg de 4-carboetoxi-3-(N-itietiltri-fluoroacetamido)azetidino-2-ona em 5 ml de piridina aos 80° foi adicionado a 250 mg de complexo de piridina e trióxido de enxofre, e a mistura reaccional foi agitada durante 30 minutos aos 80°. A solução foi vazada em 100 ml de KH2P04 0,5 N e extractada com 2 x 25 ml de cloreto de metileno. As soluções de lavagem orgânicas combinadas foram novamente extractadas com 25 ml de solução KH2PC>4. As fases aquosas combinadas foram depois tratadas com 680 mg de hidrogeno-sulfato de tetrabutilamônio e extractada com 3 x 50 ml de cloreto de metileno. Depois de secagem (sulfato de sódio) e evaporação da fase orgânica, o sal de tetrabutilamó-nio do ácido 4-carboetoxi-3-(N-metiltrifluoroacetamido)azetidi-no-2-ona-l-sulfónico foi cromatografado para originar um óleo.

RMN (CDC13)í 5 5,3 (d, J = 6, 1H); 4,7 (d, J = 6, 1H); 4,15 (q, J = 7, 2H); 3,2 (m, 11H); 0,8 - 1,8 (m, 31H).

Aplicando o mesmo procedimento como descrito acima, os sais de tetrabutilamónio de outros derivados de azetidina seguintes foram preparados: (a) Sal de Tetrabutilamónio do Ácido 4-Carboetoxi-3-meto-xiazetidin-2-ona-l-sulfónico RMN (CDC13): δ 4,55 (d, J = 6, 1H); 4,5 (d, J = 6, 1H); 4,1 <q, J = 7, 2H); 3,4 (s, 3H); 3,2 (m, 8H); 0,8 - 1,8 (m, 31H) . (b) Sal de tetrabutilamónio do Ácido 4-Carboetoxi-3-vinil-azetidin-2-ona-l-sulfónico EXEMPLO 14 4-Carboetoxi-l-(p-nitrobenzenosulfonil)-3-fenilazetidin-2-ona A uma solução de 720 mg de 4-carboetoxi-3-trans-fenil-azetidin-2-ona em 20 ml de cloreto de metileno aos 0o foram adicionados sequencialmente 595 mg de cloreto de p-nitro-benzeno-sulfonilo e 0,48 ml de DBU. A solução foi agitada durante várias horas, diluída com 50 ml de cloreto de metileno, lavada uma vez com água e seca sobre sulfato de sódio. Filtração e evaporação originou um resíduo em bruto que foi cromatografado para originar o 4-carboetoxi-l-(p-nitrobenzenosulfonil)-3-fenil-azetidin-2-ona puro.

RMN (CDC13)S δ 8,3 (d, J = 9 , 2H); 8,2 (d, J = 9, 2H); 7,2 (S largo, 5H); 4,0 (q, J = 7, 2H); 3,7 (m, 2H); 1,2 (t, J = 7, 3H). Identicamente preparado foi o composto cis-3-fenilo correspondente. RMN (CDC1-)z

Seguindo o mesmo procedimento que o descrito anteriormente mas utilizando reagentes apropriados, foram preparados os seguintes compostos: 58,4 (d, J=9, 2H), 8,25 (d, J=9, 2H), 7,2 (s, 5H); 5,0 (S, 1H); 3,7 (m, 3H); 0,85 (t, 5=7, 3H).

Seguindo o mesmo procedimento que o descrito anteriormente mas utilizando reagentes apropriados, foram preparados os seguintes compostos: (a) 4-carboetoxi-l- (p-nitrobenzenosulfonil) -3-vinilazetidin--2-ona RMN (CDC13): Çis; δ 8,3 (d, J=9, 2H), 8,2 (d, J=9, 2H), 5,2-6,0 (m, 3H), 4,0-4,6 <m, 4H), 1,2 (t, J=7, 3H); trans: 8,2 (d, J=9, 2H), 8,15 (d, J=9, 2H), 5,2-6,0 (m, 3H), 3,9-4,4 (m, 4H), 1,25 (t, J=7, 3H). (b) 4-Carboetoxi-3-etil-l-(p-nitrobenzenosulfonil)azetidin- 2-ona (c) 3-Azido-4-carboetoxi-l-(p-nitrobenzenosulfonil)azetidin- - 2-ona (d) 4-Carboetoxi-3-cloro-l-(p-nitrobenzenosulfonil)azetidin- - 2-ona EXEMPLO 15 4-Carboetoxi-3-fenil-l-trifluorometanosulfonilazetidin-2-ona A uma mistura de 1,2 g de 4-carboetoxi-3-fenilazetidin-2-ona e 1,2 ml de trietilamina em 25 ml de cloreto de metileno a 0o foram adicionados, gota a gota, durante 10 minutos, 11,25 ml de uma solução a 10% de cloreto de trifluorometanossulfonilo em éter. Depois de se agitar durante várias horas a solução foi lavado com água, seca sobre sulfato de sódio, filtrada e evaporada. O resíduo bruto foi cromatografado de modo a obter-se a 4-carboetoxi-3-fenil-l-trifluorometanossul-fonilazetidin-2-ona sob a forma de óleo. RMN (CDC13): S 7,2 (S, 5H), 4,6 (d, J=3, 1H), 4,3 (m, 3H), 1,3 (t, J=7, 3H). EXEMPLO 16 l-Tosiloximetil-3-n-propil-4-p-nitrofeniltioazetidin-2-ona Passo A: Preparação de 3-propil-4-p-nitrofeniltioazetidin-2-ona A 3-propil-4-acetoxi-azetidinona, 171 mg, é submetida a refluxo com 200 mg de p-nitrofenol-tio, em 10 ml de benzeno durante 6 horas. A solução é lavada 3x com Na2CC>3, aquosa, seca com MgS04, filtrada e evaporada. 0 resíduo é cromatografado sobre sílica gel, eluindo com 10:1 CHCl^-TeOAc, de modo a produzir 3-propil-4-p-nitrofeniltioazetidin-2-ona.

Passo B: Preparação de l-Tosiloximetil-3-n-propil-4-p-nitrofenil·» tio-azetidin-2-ona 3-Propil-4-p-nitrofeniltioazetidino-2-ona, 266 mg, é agitado durante a noite à temperatura ambiente com 0,25 ml de formalina aquosa (37 %) e 17 mg de K2C03. Água e formaldéido são removidos in vacuo. e fluxado rapidamente com 2 ml de piridina. 0 resíduo é retirado em 4 ml de piridina e tratado durante 1 hora à

temperatura ambiente com 200 mg de cloreto de p-toluenosulfonilo. A piridina é evaporada e substituída com 5 ml de benzeno. A solução é lavada com H3PC>4 aquoso e depois com K2HP04 aquoso, seco com MgSC>4, filtrado e evaporado. O resíduo é cromatografado em sílica gel, eluição com CHC13 - EtOAc 25:1, originando 1-tosi-loximetil-3-n-propil-4-p-nitrofeniltioazetidin-2-ona. EXEMPLO 17 l-Tosiloximetil-3-n-propil-4-p-nitrofenilsulfinilazetidin-2-ona l-Tosiloximetil-3-n-propil-4-p-nitrofenilsulfinilazeti-din-2-ona, 450 mg, é tratado durante 1/2 hora em 10 ml de CHgClg com 172 mg de ácido m-cloroperbenzóico. A solução é lavada com K2HP04, seca com MgS04, filtrada e evaporada, dando origem à l-tosiloximetil-3-n-propil-4-p-nitrofeniltioazetidin-2-ona. EXEMPLO 18 l-Acetoximetil-4-p-nitrofenilsulfinil-3-n-propilazetidin-2-ona

Passo A: Preparação de 3-n-propil-4-p-nitrofeniltioazetidin-2-ona 3-n-Propil-4-acetoxiazetidinona (1,164 g; 6,58 mmole) e 1,02 g (6,58 mmole) de p-nitrotiofenol foram aquecidos num tubo num banho de vapor, durante 3,5 horas. A mistura reaccional foi arrefecida, dicluida com 100 ml de acetato de etilo, e a fase orgânica foi lavada com 100 ml de água, 70 ml de H3P04 e 3 x 100 ml de K2<X>3 saturado. A fase orgânica foi seca sobre sulfato de magnésio, filtrada, e o solvente removido in vacuo para originar 1,53 g de cristais amarelos que foram cromatografados numa coluna de sílica gel em clorofórmio - acetato de etilo (4:1) para \ -76-

originar 359 mg (19 %) de 3-n-propil-4-p-nitrofeniltioazetidin--2-ona. RMN (CDC13): S 0,92 (tr, 3H); 1,2 - 1,6 (m largo, 4H); 3,10 (tr, 1H); 4,91 (d, 1H); 7,0 (s largo, 1H); 7,50 (d, 2H); 8,20 (d, 2H).

Passo B: Praparacão de l«Acetoximetil-4-p-nitrofeniltio-3-n-pro-pilazetidin-2-ona

Uma mistura de 273 mg (0,94 mmole) de azetidinona do Passo A, 26,3 mg de paraformaldéido e 178 mg (0,56 mmole) de carbonato de césio foi agitada em 20 ml de tetra-hidrofurano seco à temperaturam ambiente durante 16,5 horas, sob azoto. Uma mistura de 430 jul de piridina e de 2,56 ml de anidrido acético foi adicionada à mistura reaccional e a agitação foi continuada durante 5 horas mais. Os solventes foram removidos in vacuo para originar 604 mg de produto em bruto, que foi cromatografado numa coluna "flash" de sílica gel em hexano - acetato de etilo 3/1. Isto originou 102 mg (30 %) de l-acetoximetil-4-p-nitrofeniltio--3-n-propiloazetidin-2-ona. RMN (CDClg)! δ 1,0 (tr, 3H); 1,2 - 1,85 (m largo, 4H); 2,1 (padrão ΑΒΒΑ, = 30 H3, J2 = 5 H3, 2H); 7,65 (d, 2H) ; 8,22 (d, 2H).

Passo C; Preparação de l-Acetoximetil-4-p-nitrofenilsulfinil-3-n--propilazetidin-2-ona A uma solução de 46 mg (0,127 mmole) de azetidinona do Passo B em 4 ml de CE^Cl^ e 4 ml de NaHC03 aquoso saturado foi adicionado a 27 mg (0,127 mM) de ácido m-cloroperbenzóico a 80 % e a mistura reaccional foi agitada vigorosamente durante 15 minutos. As fases foram separadas e a fase orgânica foi seca sobre MgS04, filtrada e evaporada para originar 57 mg de produto em bruto que foi cromatografado num prato de CCF prep. 1000 μ de sílica gel em clorofórmio - acetato de etilo 4:1 para originar 15 mg de l-acetoximetil-4-p-nitrofenilsulfinil-3-n-propilazetidin--2-ona. RMN (CDClg): δ 0,93 (tr, 3H); 1,2 - 1,8 (m largo, 4H); 2,1 (s, 3H); 3,55 (tr, 1H); 4,66 (d, 1H); 5,04 (padrão AB, Jx = 3,4 HZ, J2 = 6 HZ, 2H); 8,2 (d, 2H); 8,52 (d, 2H) . EXEMPLO 19

Sal de tetrabutilamónio do Ácido 4-Acetoxi-3-n-propilazetidin-2--ona-1-sulfónico

Uma solução de 82 mg (0,463 mmole) de 3-propil-4-aceto-xi-azetidin-2-ona em 5 ml de piridina foi aquecida aos 80°. 221 Mg (1,39 mmole) de complexo de trióxido de enxofre - piridina foi adicionado e a mistura reaccional foi agitada aos 80° durante uma hora. Isto foi depois vazada em 100 ml de KH2PC>4 0,5 M (aquoso) e lavado com 2 x 25 ml de CH2C12. Os líquidos de lavagem orgânicos combinados foram novamente lavados com 25 ml de KH^PO. 0,5 M. 157 Mg (0,463 mmole) de Bu4NHS04 foi adicionado às fases aquosas combinadas. Isto foi extractado com 2 x 25 ml de CH2C12 e os extractos combinados foram secos sobre MgS04, filtrados, e evaporados in vacuo para originar 12,4 mg de um resíduo oleoso que foi cromatografado numa pequena coluna de sílica gel, eluída em primeiro lugar com 75 ml de hexano/acetato de etilo (3:1) para a remoção do material de partida, depois com 100 ml de acetato de etilo/metanol (4:1) oara originar 13 mg (5,7 %) de sal de tetrabutilamónio do ácido 4-acetoxi-3-n-propilazetidin-2-ona-l--sulfónico. RMN (CDC13) δ 1,0 (m, 16H); 1,75 (m largo, 20H); 2,16 (s, 3H); 2,90 (s largo, H); 3,1 (tr, 1H); 3,3 (tr, 8H); 4,08 (tr largo, 1H); 6,18 (s, 1H). EXEMPLO 20 (3R.4S) -l-(Benzilaminocarbonil) -3-etil-3-metil-4-(4-acetoxi) feno-xiazetidin-2-ona

Passo A? Preparação do Ácido (3R.4S) -l-t-butildimetilsilil-3-me-tilazetidin-2-ona-4-carboxilico A uma solução de 27,5 ml de di-isopropilamina em 150 ml de THF aos -20°C foi adicionado 73,5 ml de n-butil-lítio 2,4 N em hexano. Depois de 15 minutos, a solução foi arrefecida aos -70°C e uma solução de 20 gm de ácido (4S)-1-t-butildimetilsililazeti-din-2-ona-4-carboxílico em 75 ml de THF foi adicionado. A solução foi aquecida aos -20°C durante 15 minutos antes de uma solução de 13,5 ml de iodeto de metilo em 20 ml de THF ser adicionada. Depois de 30 minutos aos -20°C, a reacção foi diluída com 300 ml de éter e depois vazada numa mistura de gelo e de 400 ml de HC1 IN. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extractada com éter. As camadas de éter foram lavadas com salmoura, secas sobre sulfato de sódio e foram evaporadas. O resíduo foi cristalizado a partir de hexano para originar 12 - 15 gms de ácido (3R,4S)-i-t“butildimetilsilil-3-metilazetidin-2-ona-4-carboxílic-o. RMN (CDC13): δ 0,14 (2, 3H); 0,32 (s, 3H); 0,91 (d, 3H); 0,98 (S, 9H); 3,34 (dq, 1H); 3,71 (d, 1H).

Passo B: Preparação do Ãciflo (3R,4S)-l-t-butildimetilsilil-3 -etil-3-metilazetidin-2-ona-4-carboxílico A uma solução de 13 ml de di-isopropilamina em 75 ml de THF aos -20°c, foi adicionado 35 ml de n-butil-lítio 2,4 M em hexano. Depois de 15 minutos a solução foi arrefecida aos -70°C e uma solução de 10 gms de ácido (3R,4S)-l-t-butildimetilsilil-3--metilazetidin-2-ona-4-carboxílico em 50 ml de THF foi adicionado. A solução foi aquecida aos -20°C durante 15 minutos e tuna solução de 6,7 ml de iodeto de etilo em 10 ml de THF foi adicionado. Depois de 30 minutos aos -20eC a 0°C a reacção foi diluída com éter e vazada numa mistura de gelo e HC1 IN. As camadas foram separadas e a camada aquosa extractada com éter. As camadas de éter foram cada uma lavada com salmoura, secas sobre sulfato de sódio e evaporadas. 0 resíduo foi cristalizado a partir de uma quantidade mínima de hexano para originar 8,8 gms de ácido (3R,4S)-l-t-butildimetilsilil-3-etil-3-metilazetidin-2-ona-4-car-boxílico. RMN (CDC13): δ 0,15 (S, 3H) ; 0,31 (S, 3H) ,* 0,98 (S, 9H) ,* 1,04 (t, 3H); 1,22 (S, 3H); 1,78 (q, 2H); 3,94 (s, 1H).

Passo C: Preparação de (3R.4S)-3-etil-3-metil-4-(4-carbo-t-buto-xi)fenoxiazetidin-2-ona

A uma solução de 13,0 gms de ácido (3R,4S)-1-t-butildi-metilsilil-3-etil-3-metilazetidin-2-ona-4-carboxílico em 75 ml de DMF e de 15 ml de ácido acético, sob N2, foi adicionado 23 gms de tetra-acetato de chumbo. A reacção foi aquecida aos 45 - 50°C durante 18 horas e depois foi vazada em água gelada e extractada em 2 porções de éter. As camadas de éter foram lavadas com água, solução de bicarbonato de sódio diluída e salmoura, secas sobre sulfato de sódio e evaporadas para originar 13 gm de óleo em bruto que contém uma mistura de (3R,4S) e de (3R,4R)-4-acetoxi--3-etil-3-metilazetidin-2-ona. A esta mistura em 50 ml de acetona foi lentamente adicionado uma solução de 14 gms de 4-hidroxiben-zoato de t-butilo em 50 ml de acetona, 5 ml de água e 29 ml de hidróxido de sódio 2 N. A reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 64 horas e depois diluída com água e extractada com 2 porções de éter. As camadas de éter foram lavadas com salmoura, secas sobre sulfato de sódio e evaporadas. 0 resíduo foi cromatografado em CL prep. com 15 - 25 % de acetato de etilo/hexanos para originar 6,3 gms de éter de (4R) de Rf superior e 1,5 gms do (3R,4S)-3-etil-3-metil-4-(4-carbo-t-butoxi)fe-noxi-azetidin-2-ona desejado. RMN (CDClg)! S 1,0 (t, 3H); 1,38 (s, 3H) ; 1,54 (s, 9H); 1,6 - 2,0 (m, 2H); 5,30 (s, 1H); 6,7 (s largo, 1H); 6,78 (d, 2H); 7,90 (d, 2H).

Passo D: Preparação de (3R.4S)-1-(benzilaminocarbonil)-3-etil-3--metil-4-(4-carbo-t-butoxi)fenoxiazetidin-2-ona A uma solução de 1,5 gm de (3R, 4S)-3-etil-3-metil-4-(4--carbo-t-butoxi) fenoxiazetidin-2-ona em 25 ml de cloreto de metileno foi adicionado 1,2 ml de benzilisocianato, 1,4 ml de trietilamina e 10 mg de 4-dimetilaminopiridina. A reacção foi agitada à temperatura ambiente durante 16 horas e depois foi evaporada. O resíduo sofreu cromatografia "flash” com EtOAc a 10 a 25 %/hexano para originar 2,3 gm de (3R,4S)-1-(benzilaminocarbonil) -3-etil-3-metil-4-(4-carbo-t-butoxi) fenoxi-azetidin-2-ona. RMN (CDC13): δ 0,98 (t, 3H); 1,36 (S, 3H); 1,50 (S, 9H); 1,62 (m, 1H); 1,84 (m, 1H); 4,42 (d, 2H); 5,64 (S, 1H) ; 6,80 (t largo, 1H); 7,06 (d, 2H); 7,24 (s largo, 5H); 7,90 (d, 2H).

Passo E: Preparação de t3R.4S)-l-tbenzilamino-carbonil)-3-etil--3-metil-4-(4-carboxi)-fenoxiazetidin-2-ona A 2,3 gm de (3R,4S)-l-(benzilamino-carbonil)-3-etil-3--metil-4-(4-carbo-t-butoxi)fenoxiazetidin-2-ona num banho de gelo, sob foi adicionado 5 ml de anisole e depois 25 ml de ácido trifluoroacético pré-arrefecido. Depois de 1,5 horas aos 0°C, os voláteis foram removidos in vacuo sem aquecimento e o resíduo sofreu cromatografia "flash" usando hexano, depois EtOAc a 15 %/hexano, depois HOAc a 1 % em ETOAc a 15 %/hexanos para originar depois de trituração, 1,8 gm de (3R,4S)-l-(benzilamino-carbonil) -3-etil-3-metil-4-(4-carboxi) fenoxiazetidin-2-ona. RMN (CDC13): δ 1,03 (t, 3H); 1,46 (s, 3H); 1,66 (m, 1H); 1,94 (m, 1H); 4,50 (d, 2H); 5,76 (s, 1H) ; 6,9 (t largo, 1H); 7,05 (d, 2H); 7,25 (s largo, 5H); 7,98 (d, 2H). EXEMPLO 21 4-Hidroxi-fenilaoetato de t-Butilo

Uma solução de í^SO^ (5 ml) em dioxano (80 ml) foi adicionado a ácido 4-hidroxifenilacético (20 gm, 0,13 mol) numa garrafa de pressão. Isobutileno (250 ml) foi adicionado e a garrafa foi selada e a mistura foi agitada durante 24 horas. A mistura reaccional foi vazada em solução de NaHC03 saturada e extractada com EtOAc. Os extractos orgânicos combinados foram lavados sucessivamente com NaHC03, H20 (duas vezes) e salmoura antes de ser seco sobre Na2SO^ e evaporados até à secura. Os cristais formaram-se depois de serem deixados ficar durante a noite e foram filtrados, lavados com benzeno frio e secos para originarem 20,99 gm do composto em epígrafe. P.f. 95 - 96°C. RMN: δ 1,45 (s, 9H); 3,45 (s, 2H); 4,60 (s largo, 1H); 6,72 (d, 2H); 7,10 (d, 2H). EXEMPLO 22 (R.S)-3.3-Dietil-4-r(4-t“butoxicarbonilmetillfenoxilazetidin-2-o-na

Passo Ai Preparação de l-Acetoxi-2-etil-l-buteno

Uma solução de 2-etilbutiraldeído (600 gm, 5,99 mol), anidrido acético (900 ml, 8,15 mol) e acetato de sódio (61,5 gm) foi aquecida ao refluxo, sob atmosfera de N2· Depois de 2 dias a reacção foi vazada numa mistura de CH0C1 (1 litro), Ho0 (1 6 A Ct litro) e gelo (500 gm). A solução foi neutralizada por adição de Na2C03 sólido e as camadas foram separadas. A camada aquosa foi ainda extractada com CH2C12 e as camadas orgânicas juntas foram lavadas com NaCl saturado, secas sobre Na2S04 e evaporadas até à secura. Destilação do resíduo in vacuo originou 464,5 gm do composto em epígrafe.

Passo B: Preparação de 4-acetiloxi-3,3-dietilazetidin-2-ona

Uma solução do material preparado no Passo A (169 gm; 1,19 mol) em CH2C12 (300 ml) foi arrefecida num banho de gelo -etanol sob N2 e isocianato de clorosulfonilo (200 gm; 1,41 mol) foi adicionado através de um funil de adição. A solução foi deixada aumentar a temperatura até à ambiente e agitada durante a noite. A mistura reaccional foi depois diluída com Et20 e adicionada a gelo - solução de NaHC03 fria que contém Na2S03, mantendo a solução abaixo dos 5°C, durante a adição. Depois da libertação do gás ter cessado, as camadas orgânicas foram separadas e a camada aquosa foi extractada com Et20. Os extractos de éter 9 *

combinados foram lavados com H^O, salmoura e depois secos sobre Na2S0^ antes de serem evaporados até à secura. Isto originou um óleo preto que foi diluído com hexano (100 ml) e arrefecido num congelador, durante 2 dias. 0 sólido branco de ponto de fusão baixo, que foi formado, foi filtrado e lavado com hexano frio para originar 79,2 gm do composto em epígrafe. RMN: S 0,99 (t, 3H); 1,02 (t, 3H); 1,72 (m, 4H); 2,13 (s, 3H); 5,58 (s, 1H); 6,40 (s largo, 1H).

Passo C: Preparação de (R.S)-3.3-dietil-4-r(4-t-butoxicarbonil-metil)-fenoxilazetidin-2-ona

Ao material preparado no Exemplo 21 (20,8 gm; 0,1 mol) foi dissolvido em NaOH 2 N (100 ml) com agitação durante 15 min. e uma solução do material preparado no Passo B anterior (18,5 gm; 0,1 mol) em tolueno (100 ml) e hexano (100 ml) foi adicionado. A mistura reaccional foi vigorosamente agitada durante 1 hora e depois as camadas foram separadas e a camada aquosa foi extrac-trada com EtOAc. A camada orgânica foi lavada com água, salmoura e seca sobre Na2S0^ antes de ser evaporada até à secura. 0 resíduo assim obtido foi purificado por CL preparativa usando EtOAc a 20 % - hexano para originar 17,5 gm do composto em epígrafe. RMN: S 1,00 (t, 3H); 1,05 (t, 3H) ; 1,43 (S, 9H); 1,71 - 2,00 (m, 4H) ; 3,46 (s, 2H); 5,32 (s, 1H); 6,74 (s largo, 1H); 6,82 (d, 2H); 7,20 (d, 2H). EXEMPLO 23

Acetato de 4-Hidroxi-fenilo de Benzilo A uma solução de ácido 4-hidroxifenilacético (3,969 Kg; 26,09 mol) em DMF (15,9 L) foi adicionado a carbonato de lítio (2,12 Kg; 28,7 mol) e a mistura reaccional resultante foi agitada à temperatura ambiente, durante 10 minutoos. Brometo de benzilo (3,723 L; 31,3 mol) foi adicionado e a mistura foi aquecida aos 100°C (temperatura interna), durante 3 horas. A reacção foi arrefecida aos 60°C, HC1 2 N (20 L) foi adicionado e a solução foi extractada com EtOAc (2 x 10 L). Os extractos orgânicos combinados foram lavados sucessivamente com NaHCO^ saturado (16 L) e H20 (3 x 16 L) . Qualquer emulsão formada durante estas extrações foram quebradas pela adição de tolueno (20 L no total). O EtOAc foi removido por destilação até que o nível de EtOAc foi de < 0,3 % (tolueno adicional (5 L) foi adicionado durante a destilação) . O volume da mistura foi reduzida a 16 L e deixada arrefecer à temperatura ambiente, quando a cristalização ocorreu. A lama foi diluída com hexano (20 L) e envelhecida â temperatura ambiente durante a noite, antes de ser arrefecida aos 0°C. 0 sólido foi filtrado, lavado com uma mistura de tolueno/hexano (1:1, 4 L) e seco em vácuo para originar 5,283 Kg do produto pretendido. EXEMPLO 24 (R,S)-3,3-Dietil-4-r(4-benziloxicarbonilmetil)fenoxilazetidin-2— ona Método A:

Passo A: Preparação de l-propioniloxi-2-etil-l-buteno

Um vaso reaccional foi carregado sequencialmente com Et^N (12,8 L), anidrido propiónico (14,48 L), dimetilaminopiridi-na (94 gm) e 2-etilbutaraldeído (7,5 L). A mistura foi agitada e aquecida sob refluxo suave (120 - 135°C) durante 5 horas, numa atmosfera de azoto. A reacção foi depois arrefecida aos 70°C e H20 (13,5 L) foi adicionado lentamente. Completada a adição, a mistura foi aquecida ao refluxo durante 45 minutos e depois arrefecida à temperatura ambiente antes de hexano (7,5 L) ser adicionado. A camada aquosa foi separada e re-extractada com hexano (5 L) e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com NaHCO^ saturado (2 x 7,5 L) antes de serem evaporadas ao vácuo, aos 40°C. O resíduo (10 Kg) assim obtido foi fraccionadamente destilado (p.f. 75 - 80°C, 30 - 40 mm Hg) para originar o produto pretendido (7,712 kg) na forma de um líquido volátil.

Passo B: Preparação de 4-propioniloxi-3.3-dietilazetidin-2-ona O produto (2,5 Kg) preparado como descrito acima no Exemplo 24, Método A, Passo A, foi dissolvido em nitrometano (1,25 L) e a solução foi deixada arrefecer aos -2°C durante a noite. Isocianato de clorosulfonilo (2,1 L) foi adicionado durante 30 minutos, mantendo a temperatura abaixo dos 6°C. Completada a adição, a solução amarela foi arrefecida aos 0o e armazenada sob uma atmosfera de azoto durante 30 horas. A mistura 86- 86-

reaccional foi depois diluída com Et^O (4 L) e depois adicionada durante 30 minutos a uma mistura de H,0 (70 L), Na_S0 (7,5 Kg) e NaHCO^ (12,5 Kg) aos 5eC, mantendo a temperatura abaixo dos 5°C durante toda adição. Uns 2,5 L adicionais de Et20 foram usados para lavegem. A reacção foi depois deixada aumentar a temperatura aos 15°C durante 1 hora, depois o qual a libertação de gás cesou. A mistura reaccional foi depois filtrada e lavada com H20 (10 L) e éter de t-butilmetilo (15 L). A camada inferior foi separada e outra vez extractada com éter de t-butilmetilo (15 L). Os extrac-tos orgânicos combinados foram lavados com salmoura (20 L), secos sobre Na2S04, filtrados e evaporados até à secura (temperatura abaixo dos 35°C) para originar o produto (2,64 Kg) na forma de um óleo amarelo, adequado para ser usado no passo seguinte.

Passo C; Preparação de (R.S)-3.3-dietil-4-f(4-(benziloxicarbonil-metil)fenoxilazetidin-2-ona

Uma solução de acetato de 4-hidroxi-fenilo de benzilo (2,68 Kg; 11,07 mol, preparado como descrito acima no Exemplo 23) em tolueno (65 L) foi aquecido aos 40°C até que uma solução foi obtida e Ba(0H)2.8H20 (4,20 Kg; 13,31 mol) foi depois adicionado. Esta lama foi agitada aos 40°C durante 10 minutos e depois uma solução de 4-propiliniloxi-3,3-dietilazetidin-2-ona (2,57 Kg; 11,73 mol, preparado como descrito acima no Exemplo 24, Passo B) em tolueno (10 L) foi adicionado durante 15 minutos. Depois de 1,5 horas, uma segunda porção de 4-propioniloxi-3,3-dietilazeti-din-2-ona (70 gm) foi adicionado. Depois de uns 30 minutos adicionais a mistura foi arrefecida aos 15°C e HC1 2 N (30 L) foi adicionado. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com NaHCC>3 saturado (2 x 3 0 L) e salmoura (20 L), e depois foi concentrada ao vácuo, para originar 3,805 Kg do produto na forma de um óleo viscoso.

Método B

Passo A: Preparação de l-(2-etilpropioniloxi) -2-etil-buteno

Anidrido 2-etilbutírico (4,34 L), 2-etilburaraldéido (2,28 L), trietilamina (2,62 L), e 4-dimetilaminopiridina (210 g) foram misturados e agitados, sob uma cobertura de N2 e a temperatura foi sucessivamente aumentada aos 120°C durante 1,5 hr, depois aos 140°C durante 8 hr, seguidamente mantida aos 140°C durante 10 hr. A mistura foi depois arrefecida aos 90eC, H20 (2 L) foi adicionada 1 hr antes de ser deixada arrefecer aos 25°C. A este material foi depois adicionado H20 (2 L) e hexanos: EtOAc (3:1; 3 L) e, depois de mistura, as camadas foram separadas e a camada orgânica foi lavada sucessivamente com HC1 2N frio (3 L) e NaHC03 sat. (3 x 2L) antes de ser concentrada ao vácuo e depois fluxada rapidamente com EtOAc (500 ml). Isto originou 3,7 Kg de produto que foi purificado por destilação (p.e. 80°C/1 mm Hg) para originar 3,3 Kg do composto em epígrafe na forma de um óleo incolor límpido.

Passo Βϊ Preparação de 3.3-dietil-4-(2-etilproDÍoniloxi)-azeti-din-2-ona 0 material preparado acima no Exemplo 24, Método B, Passo A (3,3 Kg) foi arrefecido aos 5°C, sob uma cobertura de N_ e isocianato de clorosulfonilo (2,1 L) foi adicionado com agitação durante 1 hr. A mistura foi depois agitada aos 8°C durante 45 hrs, depois arrefecida aos 0°C, diluída com tolueno (5 L), e depois adicionada a uma mistura de H20 (60 L), gelo (20 L), NaHC03 (13 Kg) e de Na2S03(7,5 Kg). Este material foi agitado aos 20°C durante 13 hr antes de ser filtrado através de Celite. A placa foi lavada com EtOAc (7 L) e as duas camadas do filtrado foram separadas. A camada aquosa foi ainda extractada com EtOAc (12 L) e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (8 L) antes de serem concentradas ao vácuo. Tolueno (2 L) foi depois adicionado ao resíduo e a solução foi re-concentra-da até â secura para originar 4,57 Kg de um óleo amarelo claro que tinha a pureza suficiente para ser usado no passo seguinte.

Passo C: Preparação de (R.S)-3-dietil-4-r(4-benziloxicarbonilme-til)fenoxil-azetidin-2-ona 4-Hidroxifenilacetato de benzilo (2,6 Kg) foi dissolvido em DMF (20 L) e H20 (2,8 L) e K2C°3 moíd° (4,5 Kg) foram adicionados. A esta mistura (aos 35°C) foi adicionado o material anterior do Exemplo 24, Método B, Passo B (3,15 Kg de B-lactamo). A mistura resultante foi arrefecida e agitada aos 30 - 31°C durante 1 hora, seguido por agitação aos 18°c durante uma hora adicional antes de ser extinta por adição de HCl 2 N (15 L) e de EtOAc (15 L). As camadas foram separadas e a fase aquosa (pH 8,2) foi ainda extractada com EtOAc (18 L). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas sucessivamente com NaHC03 sat. (13 L), H20 (10 L), e salmoura (10 L) antes de serem concentradas ao vácuo para originarem o composto em epígrefe na forma de um óleo amarelo alaranjado (5,4 Kg), que tinha a pureza suficiente para ser usado no passo seguinte. Método C:

Uma solução do material preparado no Exemplo 24, Método A, Passo B (2,2 gm; 11,9 mmol), 4-hidroxifenilacetato de benzilo (2,93 gm; 12,2 mmol), cinconina (0,35 gm; 1,2 mmol) e de Na2C03 anidro em pó (1,28 gm; 12,2 mmol) em tolueno (25 ml) foi aquecido aos 60°C, durante 72 horas. Depois de arrefecimento, EtOAc (100 ml) foi adicionado e a solução foi lavada sucessivamente com HC1 1 N (3 x 25 ml), solução de NaHC03 sat. (25 ml), H20 (25 ml), e salmoura (25 ml). A solução foi depois seca sobre Na2S04, filtrada e evaporada até à secura para originar um óleo amarelo claro que foi purificado por cromatografia •'flash" (sílica gel; EtOAc a 25 % em Hexanos) para originar o composto em epígrafe na forma de um óleo ligeiramente amarelado (3,05 gm). [a]Q - 23,70. RMN (CDCl3)í S 1,08 (t, 3H); 1,12 (t, 3H); 1,64 - 2,14 (m, 4H); 3,48 (S, 2H); 5,18 (S, 2H) ; 5,38 (s, 1H) ,* 6,90 (d, 2H); 7,28 (d, 2H); 7,40 (s, 5H). EXEMPLO 25 (R,S)-3»3-Dietil-4-Γ(4-carboximetil)fenoxilazetidin-2-ona (R,S)-3,3-Dietil-4-[(4-benziloxicarbonilmetil)fenoxi]-azetidin-2-ona (5,24 Kg; 14,26 mol) preparado como descrito acima no Exemplo 24, Método A, foi dissolvido em álcool (34,5 L) e ciclo-hexano (10,5 L) que contém Pd a 10 % em C (524 gm). A mistura foi agitada e aquecida ao refluxo durante 3 horas e depois foi deixada arrefecer à temperatura ambiente antes de ser filtrada através de papel Whatman GFA, para a remoção do catali-zador. A placa foi lavada com EtOAc e os filtrados foram evaporados até à secura para originar um óleo viscoso. Este foi dividido entre K2C03 aq. a 10 % (6 L) e EtOAc (7 L) e a camada inferior foi re-extractada com EtOAc (7 L). A camada aquosa foi acidificada com HC1 5 N (N4, 8 L) e extractada com EtOAc (10 L) . A camada aquosa inferior foi separada e re-extractada com EtOAc (7 L). As camadas orgânicas juntas foram lavadas com H20 (5 L), secas sobre Na2S04, filtradas e evaporadas em vácuo para originarem um óleo viscoso que solidificou depois de armazenagem na sala fria originando 3,55 Kg do produto pretendido. EXEMPLO 26

Sal de (S)--a-metilbenzilamina de (SI -3,3-Dietil-4-r(4-carbo-ximetil)fenoxilazetidin-2-ona O racemato (253,3 gm; 0,91 mol) preparado como descrito acima no Exemplo 25 foi dissolvido em EtOAc (1,27 L) e (R)-(+)--a-metilbenzilamina (117,7 ml; 0,91 mol) foi adicionado seguido por uma semente de cristal de sal de (R).(+)-a-metilbenzilamina de (R) -3,3-dietil-4-[ (4- (carboximetil) fenoxi]azetidin-2-ona. Esta mistura foi agitada à temperatura ambiente, durante a noite e depois arrefecida aos 0 - 5°C durante 1 hora, foi filtrada, lavada com um pouco de EtOAc e seca ao ar. Este material foi agitado em EtOAc (1,2 L) aos 60°C, durante 1 hora e depois arrefecido aos 0 - 5°C, durante 1,5 horas, filtrado e lavado com um pouco de solvente fresco. Todos os filtrados e os agitados foram combinados e lavados sucessivamente com HC1 2N (3 x 350 ml) e salmoura (1 x 350 ml) . A camada orgânica foi seca (Na2S04), filtrada e evaporada para originar um óleo viscoso (187 gm) . Este óleo foi dissolvido em EtOAc (935 ml) e tratados com (S)-(-)-a--metilbenzilamina como descrito acima para a cristalização do isómero não querido com (R)-(+)-α-metilbenzilamina. Isto originou 119,84 gm do sal de (S)-(-)-a-metilbenzilamino de (S)-3,3-dietil--4-[(4-carboximetil)-fenoxi]azetidin-2-ona com uma pureza enan-teomérica de 98 %. A re-trabalhar dos licores mães originou 18,8 gm adicionais (i.e. rendiemento total de 138,64 gm) . EXEMPLO 27 (S)-3,3-Dietil-4-r(4-benziloxicarbonilmetil) fenoxi1azetidin-2-ona O material resolvido preparado como descrito acima no Exemplo 26, (3,35 Kg; 8,41 mol) foi dividido entre EtOAc (21 L) e HC1 2N (4,2 L), com agitação durante 15 min. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com HC1 2N (2 x 4,2 L) e H20 (2x5 L) e depois seca sobre Na2S04, filtrada e evaporada até à secura para originar 2,36 Kg de ácido resolvido. Este óleo foi dissolvido em DMF (11,8 L) e agitado durante a noite, com K2C03 m°ido (698 gm; 5,05 mol) e brometo de benzilo (1,02 L; 8,57 mol), à temperatura ambiente. Água (26 L) foi depois adicionada e a mistura foi extractada com éter de t-butilmetilo (14 L) . A camada inferior foi re-extractada com éter de t-butilmetilo (14 L) e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com I^O (2 x 10 L), secas (Na2S04), filtradas e evaporadas até à secura para originarem o produto (2,87 Kg) na forma de um óleo viscoso. [a]p = - 60,8° (c = 1,0; 1,1,1-tricloroetano). EXEMPLO 28

Isocianato de (R)-a-Alil-4-metilbenzilo Método Ai

Passo A: Preparação do Sal do Ácido L-piroqlutâmico de (Rl-a--alil-4-metilfenil-benzilamina

Uma solução de bistrimetilsililamida de lítio foi preparada da seguinte forma. A hexametildisilazano (4,04 Kg; 5,28 L; 25 mol) foi adicionada a THF anidro (4 L). A solução foi arrefecida aos -5°C e n-BuLi (2,4 M em hexanos; 9,7 L) foi adicionada durante um período de 1,5 hr, enquanto a temperatura reaccional foi mantida entre -5 a 0°C. A mistura foi depois envelhecida durante 10 - 15 min, deixada aumentar até à temperatura ambiente e armazenada sob N2 durante a noite.

Uma solução de p-tolualdéido (2,91 Kg; 24,27 mol) em THF (10 L) foi arrefecida sob N2 aos -8 °C e a soluçção de bistrimetilsililamida de lítio preparada acima foi adicionada por via de um funil de adição, enquanto se manteve a temperatura reaccional entre os -8 e 0°C. A mistura foi depois aquecida aos 10°C e cloreto de alilmagnésio (2 M, 12,5 L; 25 mol) foi adicionado, enquanto se manteve a temperatura entre 15 - 20°C. Depois de envelhecimento durante 15 min, a mistura reaccional foi arrefecida aos 10°C e transferida para um vaso maior que contém H20 (85 L) e NH4C1 (12 Kg) aos 10°C. Uns 5 L adicionais de THF foi usado para completar a transferência e a mistura extinta foi mantida à temperatura de 25°C, durante a transferência. Depois de agitação durante 30 min, a camada aquosa inferior foi separada e removida. A camada orgânica foi lavada com salmoura (20 L) e depois a massa de solvente foi removido in vacuo aos 30 - 35°C e -93- -93-

a solução restante (8-10 L) foi seca sobre Na SO , filtrada e » * evaporada até à secura, para originar o produto racémico de amina num rendimento quantitativo.

Este racemato (3,95 Kg; 23,8 mol) foi dissolvido em EtOAc (40 L) e esta solução foi adicionada a uma solução (aquecimento aos 50°c foi necessário para efectuar dissolução completa) de ácido L-piroglutâmico (1/84 Kg; 14,26 mol) em metanol (8 L). A mistura foi aquecida ao refluxto e o solvente (20 L) foi destilado do vaso. EtOAc (30 L) foi adicionado e mais solvente (30 L) foi destilado. Uma outra carga de EtOAc (40 L) foi adicionado e a mistura reaccional foi concentrada aos 39 L. A mistura foi deixada arrefecer aos 65°C e semeada antes de ser deixada arrefecer ainda mais (aos 50°C durante 30 min), para a formação de uma lama espessa. A lama foi depois re-aquecida ao refluxo e envelhecida durante 30 min. Depois de arrefecimento à temperatura ambiente durante 1 hr, e mais envelhecimento aos 15 °C durante 1 hr, o sal de amina foi filtrado, lavado com EtOAc (3L) e seco in vacuo aos 50°C. Este material foi recristalizado a partir de EtOAc (23 L), filtrado, lavado sucessivamente com EtOAc (2 x 2L) e Et20 (1 L) e depois seco in vacuo durante a noite aos 50°C, para originar o sal de amina em epígrafe com uma razão de R:S (GC de derivados de carbamato de mentilo) de 95:5.

Passo B: Isocianato de (R)-g-Alil-4-metilbenzilo 0 sal de amina preparado acima no Exemplo 28, Método A, Passo A (2,655 Kg) foi dissolvido numa mistura de éter de t-bu-tilmetilo (7,38 L) e de H20 (7,38 L) e de NaOH 5M (3 L) foi adicionado. Esta mistura foi agitada durante 15 minutos e a camada aquosa foi separada e re-extractada com éter de t-butil-metilo (7,38 L). Os extractos orgânicos juntos foram lavados com salmoura (2 x 4L), secos (Na^SO^), filtrados e evaporados até à -94- secura para originar a amina livre (1,5 Kg) como um líquido volátil. Este material foi dissolvido em EtOAc (8,86 L) e arrefecido aos 0 - 5°c e a isto foi adicionado uma solução de EtOAc/HCl (preparado separadamente por adição de EtOH absoluto (1,062 L) gota a gota durante 50 min, a uma solução gelada de cloreto de acetilo (1,298 L) em EtOAc (3,54 L); enquanto se manteve a temperatura abaixo dos 10°C durante a adição), gota a gota durante 50 min, manteve-se a temperatura abaixo dos 20°C. A lama de hidrocloreto de amina resultante foi aquecida aos 70°C e uma solução de fosgeno 1,93 M em tolueno (11 L; 21,1 mol) foi adicio nado durante 1,75 hr, a esta temperatura. A solução resultante foi aquecida aos 70°C durante uns 1,75 hr e depois arrefecida à temperatura ambiente. A mistura de salmoura (6 L) e de (6 L) foi adicionada e a mistura foi deixada separar-se. A fase orgânica foi lavada sucessivamente com solução de NaHCC>3 saturada (2 x 10 L) e salmoura (10 L) antes de ser seca sobre Na2S04, filtrada e evaporada até à secura, para originar o composto em epígrafe na forma de um líquido voláctil. Método B:

Passo A: Preparação de (IO -a-alil-4-metilbenzalamina

Uma solução de bistrimetilsililamida de lítio foi preparada por adição de 208 ml de n-BuLi 2,5 M a uma solução de bistrimetilsililamina (110 ml; 0,52 mol) em THF (140 ml) aos 0°C. Depois de agitação durante 15 min, esta solução foi adicionada por via de uma cânula a uma solução de p-tolualdeído (59 ml; 0,5 mol) em THF (100 ml), enquanto se manteve a temperatura entre -40 e -50°C. A mistura reaccional foi depois deixada aquecer até os io°c, durante 30 min. Uma solução de 2 M de cloreto de magnésio de alilo (260 ml) em THF foi adicionado, mantendo a temperatura da reacção entre 10 e 15°C. Depois de agitação durante 30 -95-

min a reacção foi vazada numa solução preparada por dissolução de NH4C1 (150 gm) em H20 (1 litro). As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extractada com Et^O - hexano. A camada orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre Na2S04 e evaparada até à secura. O óleo residual foi adicionado a uma solução de ácido (IR)-(-)-10-canforsulfónico (62,5 gm) em EtOAc (l Litro) com arrefecimento. Ao ser deixado ficar durante a noite à temperatura ambiente, cristais formaram-se e estes foram filtrados e lavados com EtOAc. O sólido foi agitado com refluxo de EtOAc (300 ml), filtrado e lavado novamente com EtOAc. O produto puro assim formado pesava 60,7 gm (59 %). [a]D -27,16 (c = 0,5, EtOH).

Passo Bi Isocianato de (R)-a-alil-(4-metilfenil)metilo

Uma lama de 50 gm (0122 mol) do material preparado descrito acima, no Passo A, foi adicionado a NaOH 2N (75 ml) e a Et20 (150 ml). Depois de agitação durante 5 min, as camadas foram separadas e a camada aquosa foi extractada com Et20. As camadas orgânicas juntas foram lavadas com salmoura, secas sobre Na2S04, filtradas e evaporadas até à secura.

Um frasco de 3 bocas equipado com um tubo de introdução de gás, um condensador, e um funil de adição sem braço lateral foi carregado com EtOAc (100 ml) e este foi aquecido num banho aos 60°C enquanto gás de fosgeno foi borbulhado através da solução. Uma solução de amina obtida acima em 20 ml de EtOAc foi adicionada gota a gota a uma velocidade tal que o sólido branco não foi construído na mistura reaccional. Fosgeno foi continuado durante 5 minutos adicionais, depois toda a amina foi adicionada e a solução ficou límpida. 0 banho foi depois aquecido aos 110°C e EtOAc foi removido por destilação. 0 composto em epígrafe foi assim obtido na forma de um resíduo amarelo (24,99 gm) e foi usado sem outra purifiação. EXEMPLO 29 (4S)-3,3-Dietil-l-Γ(R)-tt-n-propil-(4-metil)benzilaminocarbonill— 4-Γ4- (carboximetil) fenoxilazetidin-2-ona

Passo As Preparação de (4S)-3.3-Dietil-l-r m-o;-alil-(4-metili-benzilaminocarbonill -4- Γ 4- (benziloxicarbonilmetil) fenoxilazeti-din-2-ona A um vaso carregado com DMF (14,23 L) foi adicionado o material preparado acima no Exemplo 27 (2,845 Kg; 7,74 mol) e o material preparado acima no Exemplo 28, Método A (8,17 mol). K2C03 anidro, moído (108 gm; 0,78 mol) foi adicionado e a mistura resultante foi agitada à temperatura ambiente, sob N^, durante 2,5 hr. A mistura reaccional foi depois diluída com EtOAC (25 L) e agitada com H20 (25 L) durante 5 min. As camadas foram separadas e a camada orgânica foi lavada com H20 (25 L). Uma emulsão formada que foi quebrada por adição de salmoura saturada (5 L) e a camda orgânica foi ainda lavada com I^O (2 x 20 L) . Novamente, emulsões foram formadas e a esta altura elas foram quebradas por adição de éter de t-butilmetilo (10 L). A camada orgânica foi finalmente lavada com salmoura (10 L) e depois concentrada in vacuo aos 12 L, seca sobre Na2S0^, filtrada e evaporada até à secura para originar o compostos em epígrafe na forma de um óleo laranja viscoso que foi adequado para ser utilizado no próximo passo.

Passo B: Sal de Isobutanolamina de (4S)-3.3-Dietil-l-r (R)-oí-n--propil-(4-metil)benzilaminocarbonilT-4-Γ4-tcarboximetil)fenoxil-azetidin-2-ona O material preparado acima no Exemplo 29, Passo A (1,547 Kg), foi dissolvido numa mistura de t-butanol (7,347 Kg) e Η^Ο (387 ml) que contém Pd a 10 %/C (150 gm) e hidrogenado a 50 psi durante 1 hr, aos 20°C. A mistura foi depois filtrada através de Hyflo e a placa foi lavada com EtOAc. O filtrado foi evaporado até à secura para originar o composto em epígrafe (ácido livre) na forma de um õleo viscoso num rendimento essencialmente quantitativo. Duas realizações mais originaram um total de 4,2 Kg de ácido livre em bruto (estimado 3,5 Kg do material desejado por análise de RMN e CL) que foi dissolvido em éter de t-butilmetilo (50 L) à temperatura ambiente. Uma solução de 2-amino-2-metil-l--propanol (670 gm) em éter de t-butilmetilo (13 L) foi adicionado durante 20 minutos, à temperatura ambiente. A solução foi semeada e a lama resultante foi agitada à temperatura ambiente, durante a noite. A mistura foi depois arrefecida aos 0eC durante 1 hr, filtrada, lavada com éter de t-butilmetilo (12 L) e seca in vacuo à temperatura ambiente. Este produto foi cristalizado duas vezes a partir de EtOAc, para originar o composto em epígrafe (3,159 Kg) na forma de um pó branco cristalino. P.f. 138,5 - 140°C. EXEMPLO 30 (S)-3»3-Dietil-4-Γ(4-aliloxicarbonilmetil)fenoxilazetidin-2-ona Método Ai O material resolvido preparado acima no Exemplo 26, (19,9 gm; 0,05 mol) foi adicionado a uma mistura de gelo - H_0 Λ» (300 ml), HC1 conc. (5 ml), e de Et20 e misturado totalmente até que a dissolução ocorreu. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extractada com Et20. As camadas de Et20 juntas foram lavadas sucessivamente com H20 e NaCl sat. antes de serem secas sobre Na2S04, filtradas e evaporadas até à secura. Este óleo residual foi dissolvido em DMF (100 ml) e K2C03 em pó (7,1 gm; 0,051 mol) foi adicionado, seguido por brometo de alilo (4,6 mL; 0,053 mol). Esta mistura foi agitada durante a noite, à temperatura ambiente e foi depois dividida entre H_0 e Eto0. As camadas Λ 6 foram separadas e a camada aquosa foi extractada com Et-O. As camadas de Et20 juntas foram lavadas com H20 (2 x) e NaCl sat. antes de serem secas sobre Na2SC>2, filtradas e evaporadas até à secura para originar 17,0 gm (0,05 mol; rendimento quantitativo) do composto, em epígrafe adequado para ser usado no próximo passo. RMN (CDC13, δ a partir de TMS): 1,03 (t, 3H, J = 7 Hz); 1,06 (t, 3H, J = 7 Hz); 1,65 - 2,05 (m, 4H); 3,60 (S, 2H); 4,59 (d de t, 2H, J = 6 Hz, J = 1 Hz); 5,2 - 5,4 (m, 2H); 5,34 (s, 1H); 6,57 (s largo, 1H); 6,82 (m, 2H); 7,27 (m, 2H). EXEMPLO 31 (R) -5-Γ (l-lsocianatolbutan-l-illbenzofurano

Passo A: Preparação de Ácido M-Bromo-2-formil)fenoxiacético mono-hidratado A uma solução de 5-bromosalicilaldéido (5 Kg) em THF (12,1 L) aos 40°C, sob cobertura de N2, foi adicionado uma solução de ácido bromoacético (3,8 Kg) em H20 (50 L) . Esta mistura foi agitada aos 40°C e uma solução de NaOH (2,09 Kg) em H20 (8,1 L) foi adicionado, durante 20 min. A solução vermelha escura assim formada foi aquecida ao refluxo suave, durante 18 hr. THF (aprox. 7 L) foi depois destilado da mistura reaccional à pressão atmosférica e a solução amarela resultante foi arrefecida à temperatura ambiente. 0 pH foi depois ajustado a 8 ± 0,2 por adição de NaHCO^ e a mistura resultante foi extractada com isopropilacetato (2 x 15 L). A camada aquosa foi acidificada pH 3 ± 0,2 com HC1 conc. (2,4 L) e a lama resultante foi envelhecida aos 20°C, durante 1 hr e o produto foi depois filtrado, lavada a placa com H20 (7 L) para originar o composto em epígrafe na forma de um sólido amarelo claro (3,77 Kg).

Passo B: Preparação de 5-bromobenzofurano

Uma lama do material preparado acima no Exemplo 31, Passo A (3,70 Kg) e de acetato de sódio (7,40 Kg) em ácido acético (18,5 L) foi aquecido ao refluxo suave, sob uma cobertura de N2 e anidrido acético (7,4 L) foi depois adicionado gota a gota, durante 6 horas. Esta mistura foi depois aquecida ao refluxo até que CLAR indicou que nenhum material de partida permanecia. A reacção foi depois arrefecida aos 80°C e H20 (11/1 L) foi adicionado gota a gota, durante 1 hr. A mistura foi depois re-aquecida ao refluxo suave durante 1 hr, arrefecida aos 25°C, e transferida para um funil de separação. H20 (15 L) e hexano (15 L) foram adicionados e as fases foram separadas. A camada inferior foi re-extractada com hexano (15 L) e os extractos orgânicos combinados foram lavados sucessivamente com H20 (2 x 10 L) e

NaHC03 sat. (15 L) antes de serem secos sobre Na2SC>4, filtrados e evaporados até à secura, para originar o composto em epígrafe, 2,40 Kg.

Passo C: Preparação de 5-formilbenzofurano

Uma lama de magnésio em pó (11,44 g) e de iodo (0,12 g) em THP (120 ml) foi aquecida aos 50°C, sob uma cabertura de N0, durante 0,5 hr. Uma porção de 30 ml do material preparado acima no Exemplo 31, Passo B (90 g) em THF (225 ml) foi depois adicionada aos 50eC, sem agitação. Esta mistura foi envelhecida durante 0,5 hre depois os 195 ml restantes de solução de THF foi adicionado durante 1,5 hr (com agitação) enquanto se mateve um refluxo suave. Quando a adição estava completa, a mistura foi envelhecida aos 50°C durante 1 hr e depois foi arrefecida aos 5°C antes do DMF (45 ml) ser adicionado gota a gota, durante 30 minutos, enquanto se manteve a temperatura reaccional entre 5 - 10°C. A mistura foi depois envelhecida aos 10°C durante 1 hr e depois arrefecida aos 5°C antes de uma mistura de HC1 3 N (300 ml) e de uma solução de salmoura a 50 % sat. (225 ml) serem adicionadas, enquanto se manteve a temperatura reaccional abaixo dos 15°C. o pH foi também monotorizado e quando o pH da camada aquosa caiu até 6, EtOAc (200 ml) foi adicionado e a mistura de HCL 3N/sal-moura restante foi adicionada (pH final de aprox. 1,2). Esta mistura foi agitada durante 1 hr e a camada aquosa foi removida e extractada com EtOAc (150 ml). As camadas orgâncias combinadas foram lavadas sucessivamente com HCl 2N (100 ml) e salmoura (3 x 80 ml), secas sobre Na2S04, filtradas e evaporadas até à secura, para originar 63,6 g do composto em epígrafe na forma de um óleo laranja, que foi de pureza suficiente para ser utilizado no próximo passo.

Passo D; Preparação de (S)-l-(benzofuran-5-il)-l-butanol A uma solução de (R,R)-di-(trifluorometilsulfonil)-l,2--diaminociclo-hexano (1,92 g) em tolueno seco (80 ml) aos 23°C, sob uma cabertura de N2, foi adicionado tetra-isopropóxido de titânio (15 ml) e a lama foi aquecida aos 40°C durante 20 min, e depois foi arrefecida aos 0°C. Num vaso separado di-n-propilo de zinco (52 ml) foi misturado com hexano seco (400 ml) e a solução homogénea resultante foi adicionada a uma solução preparada acima enquanto se manteve a temperatura entre -5 - 0°C. Esta mistura, aos 0°C, foi depois adicionado uma solução do material preparado anteriormente no Exemplo 31, Passo C (40 g) em tolueno (150 ml) durante 30 min. A mistura amarela resultante foi depois agitada aos 0°C, durante 18 hr e depois foi arrefecida aos -5°C e extinta por adição de HCl 2N (500 ml) durante 1,5 hr, enquanto se manteve -101- -101-

a temperatura reaccional entre os -5 - 0eC. A mistura das duas fases resultantes foi agitada aos 0°C durante 1,2 hr e EtOAc (100 ml) foi adicionado. A camda aquosa foi removida e extractada com EtOAc (150 ml). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas sequencialmente com HC1 2N (100 ml) e salmoura (2 x 150 ml) e depois foram secas sobre Na2S04, filtradas e evaporadas até à secura para originar 50 g de um óleo amarelo que solidificou por espera. A pureza ôptica deste material é de 95,5 % ee.

Passo E: Preparação de tR)-l-Amino-l-(benzofuran-5-il)-butano

Uma solução de trifenilfosfina (132,3 g) em THF (960 mL) aos 0eC foi adicionada a azodicarboxilato de etilo (79,2 mL). A solução resultante foi agitada aos 0°C até que uma lama espessa foi obtida e depois azida de difenilfosforilo (54,2 mL) foi adicionado. A esta mistura foi adicionado uma solução do material preparado acima no Exemplo 31, Passo D (47,7 g) em THF (125 ml) durante um período de tempo de 1,5 hr, enquanto se manteve a temperatura reacacional entre os -3 - -2°C, e a solução homogénea resultante foi agitada aos 0°C, durante 0,5 hr. A esta mistura foi adicionado trifenilfosfina (96,2 g) e a solução foi deixada aquecer aos 23 °C, durante 1 hr e depois foi aquecida aos 50°C durante 2,5 hr. NaOH aquoso a 20 % (580 ml) foi depois adicionado à mistura, que foi agitada aos 50°C durante uma hora adicional. A mistura das duas fases foi arrefecida aso 23°C e a camada aquosa inferior foi separada e extractada com THF (300 ml) . As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (2 x 500 ml) e depois foram concentradas ao vácuo para originarem 460 g de um óleo laranja que foi dissolvido em éter de t-butilmetilo (1 L) e deixado ficar durante 18 hr. 0 sólido que se formou foi filtrado e lavado com éter de t-butilmetilo (100 ml) e o filtrado foi concentrado até à secura para originar 302 g de um óleo laranja que foi purificado por cromatografia em sílica gel (coluna de 1,5

Kg desenvolvida sucessivamente com hexano:EtOAc (1:1, 8 L), EtOAc (4 L) e depois EtOAc que continha ET3N a 1 %) . As fracções que continham o produto pretendido (e óxido de trifenilfosfina) foram juntas e evaporadas até à secura. O resíduo oleoso assim obtido foi agitado com hexano:EtOAc (5:1, 200 ml) e filtrado. O filtrado foi concentrado ao vácuo para originar 35,3 g de um óleo que foi dissolvido em EtOAc (80 ml) e lavado com HC1 2N (2 x 45 ml). As camadas aquosas juntas foram arrefecidas aos 5°C e tratadas com NaOH a 50 % (20 mL) antes de serem extractadas com Et20 (2 x 50 ml). As camadas orgânicas combinadas foram secas sobre Na2S04, filtradas e evaporadas até à secura para originarem 20,3 g do composto em epígrafe na forma de um óleo laranja com uma pureza óptica de 88 % ee.

Passo F: Preparação de (Rl-5-Γ(l-isocianatolbutan-l-inbenzofura-no A uma solução do material preparado acima no Exemplo 31, Passo E (19,2 g) em tolueno (192 ml) foi adicionado HC1 conc. (12,7 ml) gota a gota, enquanto se manteve a temperatura reaccio-nal entre os 20 - 25°C. A lama viscosa branca foi agitada durante 30 min, aos 20°C e depois tolueno (200 ml) foi adicionado e a lama foi aquecida, ao refluxo, com a remoção azeotrópica de água. A lama seca foi depois arrefecida aos 100°C e uma solução de fosgeno em tolueno (1,93 M; 150 ml) foi adicionada lentamente durante 1 hr. A solução completa foi obtida depois de 1 hr adicional. Esta solução foi arrefecida aos 0°c e NaHC03 sat. (200 ml) foi adicionada seguido por EtOAc (300 ml). A camada orgânica foi separada e lavada sucessivamente com NaHC03 sat. (200 ml) e salmoura (200 ml) e depois seca sobre Na2S04, filtrada e evaporada até à secura para originar o composto em epígrafe (21,5 Kg) na forma de um óleo adequado para ser utilizado no passo seguinte. EXEMPLO 32 (451 -3.3-Ρΐβ·ίχ1-1-Γ Γ (R)-1-(benzofuran-5-illbutilaminolcarbonin — 4-r4-(carboximetil)fenoxilazetidin-2-ona Método A:

Passo Ai Preparação de 4-Γ(2,2-dietoxiletoxilfenilacetato de etilo A uma solução de ácido 4-hidroxifenilacético (50,0 gm; 0,33 mol) em DMSO (300 ml) foi adicionado NaOH aquoso a 50 % (57,0 gm; 0,71 mol), com agitação. Depois de agitação durante 10 min à temperatura ambiente, dietil-acetal de bromoacetaldeído (66,0 gm; 0,33 mol) foi adicionado. A solução foi aquecida aos 100 - 110eC durante 2 hr, quando umas 2 gm adicionais de NaOH a 50 % foram adicionados. Depois de aquecimento durante outra hora a mistura reaccional foi arrefecida e vazada numa mistura de HC1 aquoso (30 ml de HC1 conc. em 400 ml de gelo - H20) e de Et^O. As camadas foram separadas e hexano foi adicionado à camada de Et20. A camada orgânica foi lavada sucessivamente (duas vezes) e com NaCl saturado antes de ser seca sobre Na2S04, filtrada e evaporada até à secura para originar 83,7 gm (0,31 mol) de ácido 4--[(2,2-dietoxi)etoxi]fenilacético, que foi adequado para ser utilizado no próximo passo. RMN (CDCl3): 6 a partir de DMS: 1,25 (t, 6H, J = 7 Hz); 3,56 - 3,90 (m, 4H); 3,61 (s, 2H); 4,03 (d, 2H; J = 7 Hz); 4,86 (t, 1H, J s 7 Hz); 6,91 (d, 2H, J = 8 Hz); 7,21 ' (d, 2H; J = 8 Hz). 0 resíduo preparado acima foi dissolvido em EtOH (500 ml) que contém H2SC>4 conc. (1 ml) e a solução foi aquecida ao refluxo, durante 6 hr. A mistura reaccional foi depois arrefecida, concentrada aos 300 ml e esta solução foi dividida entre H20 e Et20. A camada aquosa foi extractada com Et20 e as camadas orgânicas juntas foram lavadas sucessivamente com H20, NaHCC>3 sat. antes de serem secas sobre Na2SO^, filtradas e evaporadas até à secura para originarem 86,0 gm (0,29 mol), do composto em epígrafe. RMN (CDC13), δ a partir de TMS: 1,25 (t, 9H, J = 7 Hz); 3,55 - 3,90 (m, 4H); 3,56 (s, 2H); 4,02 (d, 2H, J = 7 Hz) ; 4,16 (q, 2H, J = 7 Hz); 4,86 (t, 1H, J = 7 Hz); 6,89 (d, 2H, J = 8 Hz); 7,20 (d, 2H, J = 8 Hz).

Passo Bi Preparação de benzofuran-5-ilacetato de etilo

Num frasco de 3 bocas de 1 L equipado com um agitador mecânico e um condensador foi adicionado ácido polifosfórico (80 gm) e benzeno (450 ml) . Esta mistura foi aquecida ao refluxo durante 15 min e depois 4-[(2,2-dietoxi)etoxi]fenil]fenilacetato de etilo (86 gm; 0,29 mol) em benzeno (50 ml) foi adicionado e o refluxo foi continuado, durante 40 min. A mistura reaccional foi arrefecida e a fase volátil foi decantada. Esta solução de benzeno foi lavada sucessivamente com H20, NaHC03 sat., e NaCl sat. antes de ser seca sobre Na2S04, filtrada e evaporada até à secura. Este resíduo foi dissolvido em EtOAc 10 - 15 % em hexano e passado através de uma pequena coluna de sílica gel (5 cm x 10 cm dia.) no mesmo solvente. 0 eluente foi evaporado até à secura para originar um líquido amarelo que foi ainda purificado por CL preparativa usando EtOAc a 10 % em hexano como eluente para originar 17,4 gm de benzofuran-5-ilacetato de etilo. RMN (CDC13), S a partir de TMSí 1,26 (t, 3H, J = 7 Hz); 3,70 (s, 2H); 4,19 (q, 2H, J = 7 Hz); 6,75 (m, 1H); 7,2 - 7,7 (m, 4H).

Passo C: Preparação do Ácido (R.S) -a-Alilbenzofuran-S-ilacético

Benzofuran-5-ilacetato de etilo (17,42 gm; 0,085 mol) foi dissolvido em THF seco (120 ml) e a solução foi arrefecida sob cobertura de azoto num banho de gelo seco. Depois de 10 min, uma solução de bis (trimetilsilil) amida de lítio 1 M em THF (90 ml) foi adicionado por via de um funil de adição durante um per ido de tempo de 15 min. Depois de agitação durante 15 minutos, brometo de alilo (7,9 ml; 11,04 gm; 0,091 mol) foi adicionado e a solução agitada foi deixada aumentar a temperatura até â temperatura ambiente, durante 1 hora. A solução foi vazada em gelo -H20 que contém 20 ml de HC1 1,2 N e foi extractada com Et20. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com HC1 1,2 N e NaCl sat. antes de ser seca sobre Na2S04, filtrada e evaporada até à secura para originar 21,6 gm de (R,S)-a-alilbenzofuran-5-ilace-tato de etilo. (R,S)-a-alilbenzofuran-5-ilacetato de etilo obtido acima foi dissolvido em EtOH (200 ml) e tratado com H20 (30 ml) e NaOH 5 N (30 ml) . Esta solução foi aquecida aos 60°C durante 1,5 hr, agitada durante a noite à temperatura ambiente e depois aquecida aos 60°C durante uma hora adicional, antes de ser trabalhada. A mistura reaccional foi arrefecida e vazada em gelo - H2o (400 ml) que contém HC1 conc. (14 ml) e Et20. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi ainda extractada com Et20. As camadas de Et2 juntas foram lavadas sucessivamente com H20 e NaCl sat., secas sobre Na2S04, filtradas e evaporadas até à secura para originarem 16,88 gm de ácido (R,S)-a-alilbenzofuran--5-ilacético que solidificou por espera. -106- rmn (CDC13), S a partir de TMS: 2,58 (m, 1H); 2,84 (m, ih); 3,72 (m, 1H); 5,00 - 5,20 (m, 2H); 5,64 - 5,84 (m, 1H); 6,74 (m, 1H); 7,20 - 7,70 (m, 4H).

Passo D; Preparação de Sal de (Ri-(+)-α-metilbenzilamina do Acido (R)-a-alilbenzofuran-5-ilacético A uma solução de racemato preparado acima no Exemplo 32, Método A, Passo c (39,43 gm; 0,18 mol) em iPrOH (285 ml) foi adicionado (R)-a-metilbenzilamina (14,4 gm; 0,12 mol). Um sólido foi formado imediatamente e a mistura foi deixada ficar à temperatura ambiente durante 1 hr. 0 sólido foi filtrado, lavado com iPrOH frio e seco. Este sólido (aD = -4,55) foi recristalizado a partir de iPrOH (750 ml) para originar 26,9 gm de material com αβ = -14,1. Uma recristalização adicional a partir de iPrOH (800 ml) originou 20,3 gm (0,06 mol) de produto com = -22,61 que foi adequado para ser utilizado no próximo passo. É de notar que os licores mãe desta cristalização podem ser racemizadas (via conversão através de um ácido livre e esterificação, seguido por tratamentos sucessivos com bis(trime-tilsililjamida de lítio, ácido acético e depois desesterificação com NaOH em MeOH) e depois resolução deste material pode ser realizado como descrito acima. Desta forma a massa de racemato pode ser conventida no enantiómero pretendido.

Passo Es Preparação de Isocianato de (R)-g-alilbenzofuran-s-il-metilo O material preparado acima no Exemplo 32, Método A, Passo D (20,3 gm; 0,06 mol) foi adicionado a HC1 2N (35 ml) numa mistura de gelo - H20 (150 ml) e Et2 (150 ml) . Esta mistura foi agitada durante uns poucos minutos até que o sólido foi

dissolvido e as camadas foram depois separadas e a camada aquosa foi extractada com Et20. A camada foi lavada com NaCl sat., seca sobre Na2S04/ filtrada e evaporada até à secura. 0 resíduo assim obtido foi dissolvido em CH2C12 (200 ml) e 25 gotas de DMF foram adicionadas. A solução foi arrefecida num banho de gelo e uma solução de cloreto de oxalilo (5,5 mL; 0,063 mol) em CH2C12 (20 ml) foi adicionada durante um período de 10 min. A mistura reaccional foi agitada durante 1 hr (libertação de gás parou depois de aproximadamente 45 min) e depois evaporada até à secura. O resíduo assim obtido foi dissolvido em acetona (120 mL) e a solução foi adicionada a uma solução arrefecida (banho de gelo) de NãN^ (4,11 gm; 0,063 mol) em H20 (809 ml) enquanto se manteve a temperatura entre 2 - 5°C. Depois da adição estar completa, a reacção foi agitada durante 30 min e depois vazada numa mistura de gelo - H20/CHC13. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extractada com CHCl^. As camadas orgânicas juntas foram lavadas com H20 frio e NaCl sat. antes de serem secas sobre Na„S0., filtradas e concentradas aos 250 ml. Esta solução foi aquecida num banho de gelo aos 60°C, durante 30 min (libertação do gás parou) e depois foi evaporada até à secura. 0 resíduo assim obtido foi seco por concentração azeotrópica a partir de solução de benzeno (150 ml) e depois foi armazenado num congelador durante a noite, na forma de uma solução de benzeno antes de ser usado no próximo passo. Depois de evaporação até à secura, esta solução continha 12,8 gm (0,06 mol) de produto.

Passo F: Preparação de C4S)-3.3-Dietil-l-r(R)-1-(benzofuran-5--ili-but-3-enilaminocarbonin-4-f4-(aliloxicarbonilmetil)fenoxi)-azetidin-2-ona

Isocianato de (R)-a-alilbenzofuran-5-ilmetilo (8,52 gm; 0,04 mol), preparado como descrito acima no Passo E, foi i i

adicionado a uma solução de (S)-3,3-dietil-4-[(4-aliloxi-carbo-nilmetil)fenoxi]azetidin-2-ona (11,33 gm; 0,035 mol, preparado como descrito no Exemplo 30 em DMF (70 ml) e K_C0, em pó (0,97 gm) foi adicionado. Esta mistura foi agitada vigorosamente durante 1,5 hr e foi depois vazada em H20/Et20. As camadas foram separadas e a camada de Et20 foi lavada com H20 (duas vezes) e com NaCl sat. antes de ser seca sobre Na2SC>4, filtrada e evaporada até à secura. O resíduo assim obtido foi purificado por CL preparativa usando hexano/EtOAc/CH2Cl2 (82;15:3) como o eluente, para originar 13,9 gm (0,026 mol) do produto pretendido. rmn (CDC13), δ a partir de TMS; 0,95 (t, 3H, J = 7, Hz); 1,07 (t, 3H, J = 7 Hz); 1,7 - 2,1 (m, 4H) ; 2,63 (t, 3H, J = 7 HZ); 3,59 (S, 2H); 4,58 (d de t, 2H, J = 6 Hz, J = 1 Hz); 5,04 - 5,32 (m, 5H); 5,57 (s, 2H); 5,57 - 6,06 (m, 2H); 6,74 (d de d, 1H, J = 2 Hz, J = 1 Hz); 7,1 - 7,56 (m, 8H); 7,61 (d, 1H, J = 2 Hz).

Passo G: Preparação de (4S)-3.3HDietil-l-r(R)-1-(benzofuran-5--il) -but-3-enilaminocarbonin -4-Γ4- (carboximetil) f enoxilazetidin--2-ona A uma solução de (4S)-3,3-dietil-l-[(R)-l-(benzofuran--5-il)-but-3-enilaminocarbonil]-4-[4-(aliloxicarbonilmetil)feno-xi]azetidin-2-ona (15,04 gm; 0,028 mol) em EtOAc (250 ml) foi adicionado trifenilfosfina (0,5 gm; 0,002 mol) e ácido acético (10 ml) . A solução foi desgasefiçada e mantida sob uma atmosfera de azoto. Tetracis(trifenilfosfina)paládio (0) (0,5 gm; 0,00043 mol) foi depois adicionado e a mistura reaccional foi agitada durante 3 hr e depois uns 10 ml adicionais de ácido acético foram adicionados. Depois de agitação durante um total de 6,5 hr, a reacção foi diluída com Et20 e a mistura foi extractada com H20 (duas vezes) e com NaCl sat. A fase orgânica foi seca sobre -109-

Na2S04, filtrada e evaporada até â secura para originar 17,9 gm de produto em bruto na forma de um óleo, que foi adequado para ser utilizado no passo seguite. RMN (CDC13); δ a partir de TMSí 0,95 (t, 3H, J = 7 Hz); 1,07 (t, 3H, J = 7 Hz); 1,7 - 2,1 (m, 4H); 2,63 (t, 2H, J s 7 Hz); 3,59 (S, 2H); 5,04 - 5,30 (m, 3H); 5,58 (s, 1H); 5,58 - 5,90 (m, 1H); 6,74 (d de d, 1H, J = 2 Hz, J = 1 Hz); 7,10 - 7,56 (m, 8H); 7,60 (d, 1H, J = 2 HZ) .

Passo H: Preparação de (4S)-3,3-dietil-l-rnR)-l-tbenzofuran-5--il)butilamino1carbonin-4-f4-(carboximetil)fenoxilazetidin-2-ona 0 (4S)-3,3-dietil-l-[(R)-l-(benzofuran-5-il)-but-3- -enilaminocarbonil]-4-[4-(carboximetil)fenoxi]azetidin-2-ona em bruto foi preparado pela forma descrita acima no Exemplo 32, Método A, Passo G (17,9 gm) foi dissolvido em EtOAc (60 ml) e diluído com EtOH abs. (110 ml). Esta solução foi hidrogenada durante 30 min num agitador de Parr em três porções usando Pd a 5 % em C como catalizador (0,5 g em cada porção) . A tiragem de hidrogénio foi lenta, e depois dé 5 min, 0,15 gm de Pd a 10 % em C foi adicionado a cada porção. Depois de 25 min adicionais, as φ reacções foram juntas, filtradas, e o filtrado foi evaporado até à secura. O resíduo foi dissolvido em EtOAc (20 mL) - EtOH (80 ml), dividido em duas porções iguais, Pd a 10 % em C (0,15 gm) foi adicionado a cada um, e a hidrogenação foi continuada durante 15 min. A mistura reaccional foi depois filtrada, lavada com EtOAc e evaporada até â secura. Este resíduo foi depois purificado por CL preparativa para originar 11,03 gm (0,022 mol) do produto pretendido na forma de espuma clara firme. 9 110- RMN (CDC13), S a partir de TMS; 0,92 (t, 3H, J = 7 Hz); 0,93 (t, 3H, J = 7 HZ); 1,07 (t, 3H, J = 7 Hz); 1,33 (a, 2H); 1,7 - 2,1 (m, 6H); 3,59 (s, 2H); 4,95 (q, 1H, J = 8

Hz); 5,58 (S, 1H); 6,74 (d de d, 1H, J = 1 Hz, J s 2

Hz); 7,0 - 7,54 (m, 8H); 7,61 (d, 1H, J = 2 Hz).

Passo I: Preparação de sal de Potássio de (4B1-3.3-Dietil-l--ΓΓ (R) -l-(benzofuran-5-il)butilamino1carbonin-4-r4-tcarboxime-til)fenoxilazetidin-2-ona

Uma solução de ácido livre (7,01 gm; 0,014 mol), preparado como descrito acima no Exemplo 32, Método A, Passo H em H20 (100 ml) foi tratada com uma solução de KHC03 (1,424 gm; 0,014 mol) em H20 (100 ml). Aquecimento da mistura e a adição de MeOH (20 ml) foi necessário para a obtenção de uma solução leitosa homogénea. Esta foi filtrada e o filtrado foi concentrado aos 150 ml, diluído com H20 (100 ml) e depois liofilizado para originar o produto pretendido na forma de um sólido higroscópico que foi analizado como um hidrato.

Rotação Óptica aD (c = 0,49, MeOH) = + 55,31;

Análise Cale. C. Encontrada: C.

Para C28H31N20 6K2- 75 V <580'21> '* 57,96; H. 6,34; N. 4,83, 57,94; H. 6,10; N. 4,68. Método B:

Passo A: Preparação de Brometo de p-metoxibenzilo Álcool de p-metoxibenzilo (13,8 g; 0,1 mol) foi adicionado gota a gota a uma solução de HBr a 48 % (50 gm; 0,3 mol de HBr) durante um período de 15 min e a solução foi depois agitada durante uns 15 min adicionais antes de ser vazada numa mistura de -111-

gelo - H20 e Et20. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extractada com EtgO. Os extractos de Et20 combinados foram lavados com NaCl sat. , secos sobre Na2S04 e evaporados até à secura para originarem 23,4 gm de brometo de p-metoxibenzilo adequado para ser usado no próximo passo. RMN (CDC13), δ a partir de TMS: 3,80 (s, 3H); 4,49 (s, 2H); 6,86 (d, 2H, J = 8 Hz); 7,32 (d, 2H, J = 8 Hz).

Passo B: Preparação de (S)-3.3-dietil-4-r4-(p-metoxibenziloxicar-bonilmetil)fenoxii-azetidin-2-ona

Sal de (S)-(-)-α-metilbenzilamina de (S)-3,3-dietil-4--[4-(carboximetil)fenoxi]azetidin-2-ona (31,8 gm; 0,08 mol) foi adicionado a uma mistura de H20, HC1 2 N, e de Et20 e foi misturado totalmente até que a dissolução ocorreu. As camadas foram separadas sucessivamente com H20 e NaCl sat, antes de serem secas sobre Na2S0^, filtradas e evaporadas até à secura. Este resíduo foi dissolvido em DMF (100 ml) e K2CC>3 em pó (11,81 gm; 0,085 mol) foi adicionado. Depois de 5 min, brometo de p-metoxibenzilo (23,4 gm; 0,08 mol) em DMF (20 ml) foi adicionado e a solução foi agitada â temperatura ambiente durante a noite e depois foi vazada numa mistura de H20 e Et20. As camadas foram separadas e a camada orgânica foi lavada sucessivamente com H20 (duas vezes), e com NaCl sat. antes de ser seca sobre Na2SC>4, filtrada e evaporada até à secura para originar 32,82 gm de (S)-3,3-dietil-4-[4-(p--metoxibenziloxicarbonilmetil)fenoxi]azetidin-2-ona na forma de um óleo amarelo adequado para ser usado sem outra purificação. 112- 112-

RMN (CDC13), δ a partir de TMSs 1,03 (t, 3H, J = 7 Hz) ; 1,06 (t, 3H, J = 7 Hz); 1,65 - 2,05 (m, 4H); 3,59 (S, 2H); 3,80 (S, 3H); 5,05 (S, 2H); 5,53 (s, 1H); 6,65 (s largo, 1H); 6,80 - 7,40 (m, 8H).

Passo Ct Preparação de (48)-3.3-Dietil-l-r(R)-1-(benzofuran-s--il) but-3-enilaminocarbonin -4- Γ4- (p-metoxibenzoloxicarbonilme-til)fenoxilazetidin-2-ona

Isocianato de (R)-a-alilbenzofuran-5-ilmetilo (12,8 gm; 0,06 mol), preparado como descrito no Exemplo 32, Método A, Passo E foi dissolvido em DMF (50 ml) e uma solução de (4S)-3,3-dietil--4- [ 4- (p-metoxibenziloxicarbonilmetil) f enoxi ] f enoxi] azetidin-2--ona, preparado como descrito acima no Exemplo 32, Método B, Passo B (19,85 gm; 0,05 mol) em DMF (50 ml) foi adicionado. K2C03 em pó (1,39 gm) foi adicionado e a mistura foi vigorosamente agitada durante 2 hr, à temperatura ambiente. A mistura reaccio-nal foi depois dividida entre Et20 e H20 e a camada aquosa foi ainda extractada com Et20. As camadas juntas foram lavadas sucessivamente com H20 (duas vezes) e com NaCl sat. antes de serem secas sobre Na2S04, filtradas e evaporadas até à secura. Este resíduo assim obtido foi purificado em dois lotes por CL preparativa, usando 25 - 50 % de EtOAc em hexano como eluente, para originar 20,3 gm (0,033 mol) do produto desejado. rmn (cdci3), δ a partir de TMS: o,95 (t, 3H, J = 7 Hz); 1,08 (t, 3H, J = 7 HZ); 1,65 - 2,05 (m, 4H); 2,63 (t, 2H, J = 7 Hz); 3,58 (S, 2H); 3,81 (S, 3H); 5,00 - 5,22 (m, 3H); 5,05 (S, 2H); 5,58 (S, 1H); 5,60 - 5,80 (m, 1H); 6,70 - 7,70 (m, 14H).

Passo D: Preparação de f4S)-3.3-dietil-l-r(R)-l-(benzofuran-5- -il)butilaminocarbonin-4-r4-(p-metoxibenziloxicarbonilmetilife- noxilazetidin-2-ona 0 (4S)-3,3-dietil-l-[(R)-1-(benzofuran-5-il)-but-3- -enilaminocarbonil]-4-[4-(p-metoxibenziloxicarbonilmetil) fenoxi]-azetidin-2-ona preparado como descrito acima no Exemplo 32, Método B, Passo C (20,3 gm; 0,033 mol) foi dissolvido em EtOAc (50 ml) e EtOH (150 ml) . Esta solução foi dividida em quatro porções iguais e cada uma foi hidrogenada a < 35 psi, usando Pd a 5 %/C (0,5 gm) num despositivo de Parr. A hidrogenação foi parada depois de absorção de hidrogénio inicial ter parado (3,5 - 4 min) e o catalizador foi removido por filtração e lavado com EtOAc. Os filtrados das quatro porções foram juntas e evaporadas até à secura para originar 19,0 gm (0,031 mol) do produto pretendido que foi adequado para ser utilizado no passo seguinte sem outra purificação. -114- -114-

RMN (CDC13), S a partir de TMS: 0,92 (t, 3H, J = 7 Hz); 0,94 (t, 3H, J = 7 HZ); 1,08 (t, 3H, J s 7 Hz); 1,30 <m, 2H) ,* 1,65 - 2,10 (m, 6H); 3,59 (S, 2H) ,· 3,81 (S, 3H) ; 4,97 (q, 1H, J = 7 Hz); 5,06 (s, 2H); 5,58 <S, 1H) ; 6,70 - 7,70 (m, 14H).

Passo Ei Preparação de (4Si-3.3-Dietil-l-rrtRl-l~fbenzofuran-5--il)butilaminolcarbonill-4-Γ4-(carboximetil)fenoxilazetidin-2-ona O (4S)-3,3-dietil-l-[[(R)-l-(benzofuran-5-il)butilami-nocarbonil]-4-[4-(p-metoxibenziloxicarbonilmetil)fenoxi]azetidin--2-ona preparado como descrito acima no Exemplo 32, Método B, Passo D (13,53 gm; 0,022 mol) foi dissolvido em anisole (15 ml) e a solução foi arrefecida num banho de gelo, durante 15 minutos. Esta solução arrefecida foi depois dividida em três porções e cada uma foi adicionada a CF3CC>2H gelado (2 0 ml). Depois de 10 minutos â temperatura do banho de gelo, dicloroetano (50 ml) foi adicionado a cada porção e as soluções foram rapidamente evaporadas até à secura (temperatura do banho <30 °C) e os resíduos foram diluídos com Et20 e vazada em H20 - gelo. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extractada com Et20. As camadas de Et20 das três reacções foram juntas e lavadas sucessivamente com H„0 fria e NaCl sat. antes de serem secas sobre Na_SO., filtradas e evaporadas até à secura. Este resíduo foi purificado por CL preparativa para originar 6,68 gm (0,014 mol) do produto pretendido na forma de um ôleo tijolo. Este material era idêntico em todos os aspectos ao preparado por via do Método A. -115- -115-

Método C

Passo A: Preparação de benzofuran-5-ilacetato de metilo Ãcido 4-hidroxifenilacético (20 gm; 0,13 mol) foi dissolvido em DMF (50 ml) e depois lentamente adicionado a NaH lavado (0,26 mol), em DMF (100 ml). Acetal de dietilo de bromo-acetaldéido (29 ml; 0,195 mol) foi depois adicionado e a mistura foi arrefecida aos 160°C (banho de óleo), durante 3 hr. A mistura foi arrefecida, ãgua adicionada e a mistura foi tornada básica por adição de NaOH 2 N. A solução foi aquecida aos 80eC durante 1 hr e depois foi arrefecida e extractada duas vezes com Et20, acidificada a pH 3 e depois extractada duas vezes mais com Et20. Os segundos extractos de Et20 foram juntos, secos e evaporados até à secura. Este resíduo foi purificado por CL preparativa para originar 8 gm de um óleo puro que foi dissolvido em Et20 e 120 ml de uma solução de CH2N2 foi adicionada (ligeiro excesso molar). Depois de completa a esterificação, o excesso de CH2N2 foi destruído por adição de ácido acético e a mistura foi evaporada a um óleo. Este foi dissolvido em benzeno (100 ml) e ácido polofos-fórico (5 gm) foi adicionado e a mistura foi aquecida aos 90 -100°C com boa agitação mecânica, durante 3 hr. A mistura foi decantada e evaporada até à secura e o resíduo foi purificado por cromatografia "flash" para originar 1,3 gm do composto em epígrafe na forma de um óleo. RMN (CDC13): δ 3,58 - 3,83 (m, 5H); 6,74 (d de d, 1H); 7,18 7,54 (m,s, 5H); 7,62 (d, 1H) .

Passo B; Preparação de Ácido benzofuran-5-ilacético

1,20 gm (6,3 mmol) de material preparado como descrito no Passo A anterior foi tratado com NaOH 2 N (6,5 ml) e com MeOH (10 ml) à temperatura ambiente, durante 3 hr. A mistura reaccio-nal foi depois diluída com H20 e a solução resultante foi lavada com Et2o. A camada aquosa foi acidificada e extractada duas vezes com EtOAc. As camadas de EtOAc combinadas foram secas sobre Na2S04, filtradas e evaporadas até â secura para originar 1,1 gm (6,25 mmol) do composto em epígrafe adequado para utilização directa no próximo passo.

Passo C: Preparação de Sal de (Ri-f-H-tt-rnetilbenzilamlna do ácido (R)-g-alil—benzofuran-5-ilacético (via alternativa à descrita no Exemplo 32 Método A. Passo D 10,0 gm (56,76 mmol) de material preparado como descrito no Passo B anterior, foi dissolvido em THF (300 ml) e adicionado gota a gota durante 15 min, a uma solução fria (-5 a -10°C) de di-isopropilamina de lítio [preparado a partir de di-isopro-pilamina (20,45 ml; 141,88 mmol) e de n-BuLi 2,5 M (48 ml; 120 mmol) ] em THF. A mistura reaccional foi agitada aos -10°C durante 30 min e depois uma solução de brometo de alilo (10,81 ml; 113,52 mmol) em THF (20 ml) foi adicionado rapidamente. Esta mistura foi agitada aos -10°C, durante 30 minutos e depois arrefecida e adicionada a uma mistura de gelo - H20 (900 ml), HCl 2N (300 ml) e Et20 (500 ml) . Depois de agitação durante 5 min, as camadas foram separadas e a camada aquosa foi lavada com Et20 (100 ml) e as camadas orgânicas juntas foram lavadas sucessivamente com NaHSC>3 aquoso e salmoura e depois secas sobre Na2S04, filtradas e evaporadas até à secura. O óleo laranja amarelado assim obtido foi dissolvido em isopropanol (255 ml) e (R)-(+)-a-metilbenzil-amina (5,43 ml; 42,57 mmol) foi adicionado, com agitação. Qualquer sólido que foi formado foi redissolvido por aquecimento e a solução foi deixada arrefecer num congelador durante a noite. Várias recristalizações a partir de isopropanol originaram o composto em epígrafe (7,19 gm) na forma de um sólido branco que -117- era idêntico ao material preparado no Exemplo 32, Método A, Passo D.

Passo D: Preparação de Isocianato de (R)-Oi-alil-benzofuran-5-il-metilo

Este composto foi preparado como descrito no Exemplo 32, Método A; Passo E.

Passo E: Preparação de (4S)-3,3-dietil-l-rΓ(R)-l-(5-benzofuran-5--il)-but-3-enilaminolcarbonill-4-Γ(4-t-butoxicarbonilmetil)feno-xilazetidin-2-ona

Uma solução do material preparado no Passo D acima (470 mg; 2,2 mmol) e do material preparado no Exemplo 22 (600 mg; 1,8 mmol) em Et3N (0,38 ml; 2,7 ml), DMAP (5 mg) e de CH2C12 (5 ml) foi agitada durante a noite à temperatura ambiente e depois foi aquecida aos 40 - 50°C. A mistura reaccional foi evaporada até à secura e o resíduo foi purificado por cromatografia repetida para originar 350 mg do composto em epígrafe (isômero com Rf mais elevado). RMN (CDC13): δ 0,92 (2ts, 6H); 1,08 (t, 3H); 1,34 (m, 2H); 1,43 (S, 9H) ; 1,68 - 2,1 (rn, 6H); 3,46 (S, 2H); 4,95 <q, 1H); 5,55 (s, 1H); 6,74 (m, 1H) ; 6,96 - 7,56 (ms, 8H); 7,61 (d, 1H). 0 isómero com Rf mais pequeno, (4R)-3,3-dietil-l-[(R)--a-alil-(5-benzofuranil)fenoxi]azetidin-2-ona, foi também obtido, 400 mg. passo F: Preparação de (4S)-3.3-dietil-l-rr(R)-l-(benzoduran-5--il)butilaminolcarbonill-4r(4-carboxinetiH fenoxilazetidin-2-ona 0 isómero cora Rf mais elevado (350 mg) preparado como descrito acima, no Passo D, foi dissolvido em EtOAc (10 ml) e Pd a 5 %/C (50 mg) foi adicionado. Esta mistura foi hidrogenada aos 20 p.s.i. durante 8 min, quando CCL e RMN indicaram redução completa do grupo de alilo. A reacção foi filtrada e o filtrado foi evaporado até à secura. O resíduo assim obtido foi dissolvido numa mistura de CF^CC^H fria (5 ml) e de anisole (1 ml) e a reacção foi armazenada aos 0°c durante 20 min antes de ser evaporada até à secura. Este produto em bruto foi purificado por cromatografia de camada fina em pratos de sílica gel desenvolvida com EtOAc/hexano/HOAc (35:64:1) para originar 200 mg do composto em epígrafe. RMN (CDC13): S 0,92 <t, 3H); 0,94 (t, 3H); 1,04 (t, 3H); 1,34 <m, 2H); 1,68 - 2,10 (m, 6H); 3,58 (s, 2H); 4,95 (q, 1H); 5,57 (s, 1H); 6,74 (d de d, 1H); 6,98 - 7,54 (m, 8H); 7,61 (d, 1H). Método D:

Passo A: Preparação de (4S)-3,3-Dietil-l-f f (R)-l-(5-»benzofuran-5--il)-butil-l-aminolcarbonin-4-Γ(4-aliloxicarbonilmetil)fenoxil--azetidin-2-ona A uma solução do material preparado acima no Exemplo 31, Passo F (19,0 g) em DMF (50 ml) â temperatura ambiente, foi adicionado uma solução do material preparado no Exemplo 30, Método B (26,5 g) também em DMF (100 ml). K2C03 C1'22 Çf) foi adicionado e a lama assim obtida foi agitada, durante 1 hr. A mistura reaccional foi depois dividida entre EtOAc (250 ml) e HCl 2 Ν (100 ml) e a camada orgânica foi lavada sucessivamente com HC1 2 N (100 ml), HC1 0,1 N (2 x 100 ml) e com salmoura (2 x 100 ml) antes de ser evaporada até à secura, para originar 52,8 g do composto em epígrafe (de = 85 %).

Passo B: Preparação de Sal de tristhiaroximetil)aminometano de (4S)-3.3-dietil-l-r Γ(R)-l"(5-benzofuran-5-il)-butil-l-aminolcarb-οηί1·}-4-Γ (4-carboximetil) fenoxil-azetidin-2-ona A uma solução de material preparado acima no Exemplo 32, Método D, Passo A (10,0 g) em DMF (150 ml) aos 20°C, sob uma cobertura de N2, foi adicionado Pd a 10 % em carvão (2,0 g), seguido por uma solução a 55 % de formato de amónio em 1^0 (15,0 ml). Esta mistura foi aquecida aos 45°C, durante 30 min e depois foi arrefecida aos 20°C e filtrada (lavagem da placa com 30 ml de DMF). 0 filtrado foi dividido entre HC1 1 N (100 ml) e EtOAc (200 ml) e a camada orgânica foi lavada sucessivamente com HC1 0,1 N (2 x 100 ml) e salmoura (2 x 100 ml) antes de serem evaporadas até à secura para originarem o composto em epígrafe (ácido livre) na foram de uma goma viscosa amarela claro (9,25 g).

Uma lama do ácido livre preparado como descrito acima (39,0 g) e de tris-(hidroximetil)aminometano (9,6 g) em isopropa-nol (500 ml) foi aquecida aos 60°C para assegurar a dissolução. Hexanos (1,3 L) foram depois adicionados gota a gota até que uma mistura ligeiramente nubelosa foi obtida. Esta mistura foi semeada (200 gm) e deixada arrefecer aos 20°C, durante a noite. Hexanos (700 ml) foram depois adicionados e a lama foi envelhecida aos 5°C, durante 2 hr e o sólido assim formado foi filtrado, lavado com isopropanol/hexanos (1:4; 80 ml) e depois foi seco ao vácuo, aos 20°C, para originar o composto em epígrafe (29,9 g). EXEMPLO 33 (4S)-3,3-Dietil-l-r(R-a-n-propil-t4-metil)-benzilaminocarbonill— 4-ΓU-carboxi-3-metil)fenoxilazetidin-2-ona

Passo A: Preparação de Ácido 4-hidroxi-2-metilbenzóico 4'-Hidroxi-2'-metilacetofenona (15 gm; 0,1 mol) foi dissolvido em piridina e iodo (25,4 gm) foi adicionado. Esta mistura foi aquecida aos 100°C, durante 1 hr e depois foi deixada ficar à temperatura ambiente, durante a noite. Um precipitado espesso foi obtido e a mistura foi diluída com Et20 antes de filtração. 0 sólido assim obtido foi adicionado a NaOH 5 N (200 ml) e aquecido num banho de vapor, durante 1 hr antes de ser arrefecido e acidificado com HC1. Esta mistura foi extractada duas vezes com Et20 e as camadas orgânicas juntas foram lavadas com salmoura, secas sobre Na2S04, filtradas e evaporadas até à secura. O resídfuo foi cristalizado a partir de Et20 - bexano para originar 9,8 gm do composto em epígrafe na forma de um sólido.

Passo B: Preparação de 4-Hidroxi-2-metilbenzoato de benzilo 9,5 gm (63 mmol) de material preparado como descrito no Passo A anterior, foi dissolvido em DMF (100 ml) e brometo de benzilo (8,4 ml; 69,3 mmol) foi adicionado seguido por K2C03 em pó (13 gm; 94 mmol). Esta mistura foi agitada aos 60°C durante 2 hr e depois foi arrefecida, diluída com Et20 e vazada em HCl aq. frio com gelo. As camadas foram separadas e a camada aquosa foi extractada duas vezes mais, com Et20. As camadas orgânicas juntas foram lavadas com salmoura, secas sobre Na2S04, filtradas e evaporadas até à secura. Este produto em bruto foi purificado por cromatografia "flash" (sílica gel, usando EtOAc a 10 % - 30 % em hexano como eluente) para originar o composto em epígrafe na forma de um óleo que depois de trituração com hexano e arrefecimento originou 8,5 gm de um sólido branco.

Passo C; Preparação de (R.S)-3.3-Dietil-4-r(3-metil-4-benziloxi-carbonil)-fenoxilazetidin-2-ona 4-Propioniloxi-3,3-dietilazetidin-2-ona (6,2 gm; 31 mmol; prepado de um modo análogo como descrito no Exemplo 22, Passo B, foi dissolvido em tolueno (100 ml) e o material preparado como descrito no Passo B anterior (5,0 gm; 21 mmol) foi adicionado seguido por Ba(OH)2· 8H20 em pó (6,7 gm; 31 mmol). Esta mistura foi aquecida aos 50 - 60°C, durante 3 hr e depois foi vazada em HCL 2N frio - gelo. A mistura foi extractada duas vezes com Et20 e as camadas orgânicas juntas foram lavadas com salmoura, secas sobre Na2SC>4, filtradas e evaporadas até à secura. Este resíduo foi purifiacado por cromatografia "flash" (sílica gel, usando EtOAc a 20 - 40 % em hexano como eluente) para originar 5,3 gm do composto em epígrafe na forma de um sólido.

Passo D: Preparação de (4S)-3.3-Dietil-l-r(R)-α-η-propil-(4-m-etillbenzilaminocarbonill-4-ΓU-carboxi-3-metil) fenoxilazetidin--2-ona

Uma solução do material preparado no Passo C anterior (2,5 gm; 6,8 mmol) e do material preparado como no Exemplo 28, Método B, Passo B (2,0 gm; 10,2 mmol) em Et3N (1,5 ml; 10,2 mmol) e CH2C12 (5 ml) foi agitada aos 50 - 60 eC, durante 20 hr e depois durante a noite, à temperatura ambiente. A mistura reac-cional foi depois arrefecida e adicionada a HCl diluído. A mistura foi extractada duas vezes com Et20 e as camadas orgânicas juntas foram lavadas com salmoura, secas sobre Na2S04, filtradas

e evaporadas até à secura. O resíduo foi purificado por cromato-grafia "flash" (sílica gel, usando EtOAc a 10 % - 20 % em hexanos como eluente) para originar 150 mg de (4S)-3,3-dietil-l-[(R)-a--alil-(4-metil)benzil-aminocarbonil]-4-[(4-benziloxicarbonil-3--metil)fenoxi]azetidin-2-ona. Material puro adicional foi obtido por cromatografias repetidas de fracções sobrepostas. 650 mg deste material puro foi dissolvido em EtOH (10 ml) e foi hidroge-nado durante 2 hr aos 40 p.s.i., usando 100 mg de Pd a 10 %/C como catalizador. A reacção foi filtrada e evaporada até à secura para originar 500 mg do composto em epígrafe na forma de uma espuma pura. RMN (CDC13): δ 0,91 (t, 3H); 0,96 (t, 3H); 1,06 (t, 3H); 1,30 (m, 2H); 1,6 - 2,1 (m, 6H); 2,31 (s, 3H); 2,60 (s, 3H); 4,83 (q, 2H); 5,70 (S, 1H); 6,92 (d, 1H) ; 6,98 -7,22 (rn, 6H); 7,99 (d, 1H). EXEMPLO 34 (4S1 -3.3-Dietil-l-r (R)-ct-n-propil-(4-metil)benzilaminocarbonill--4-Γ(4-carboxi-3-cloro)fenoxil-azetidin-2-ona

Partindo com 4-propioniloxi-3,3-dietilazetidin-2-ona (preparado de um modo análogo como o descrito no Exemplo 22, Passo B, e como indicado no Esquema (d)), seguido por substituição com 2-cloro-4-hidroxibenzoato de benzilo (preparado a partir de ácido 2-cloro-4-hidroxibenzóico de um modo análogo ao descrito no Exemplo 23, para o 4-hidroxi-fenilacetato de benzilo) como descrito no Exemplo 24, Método A, Passo C e acilação do azoto com o isocianato preparado como descrito no Exemplo 28, seguido por redução catalítica e desbloqueamento originou o composto em epígrafe. RMN (CDC13); δ 0,9 (tt, 3H); 0,97 (t, 3H); 1,05 (t, 3H); 1,31 (m, 2H); 1,7 - 2,1 (m, 6H); 2,33 (3, 3H); 4,82 (q, 1H); 5,68 (s, 1H); 6,90 (d, 1H); 7,1 - 7,4 (m, 6H); 7,98 (d/ 1H). EXEMPLO 35 l4S)-3,3-Dietil-l-Γ(R)-α-η-propil-(4-metil)benzilaminocarbonill--4-Γ (4-carboxi-3-f luoroi fenoxil-azetidin-2-ona

Isto foi preparado como descrito acima no Exemplo 33 à excepção de 2-fluoro-4-hidroxibenzoato de benzilo (preparado a partir de 2-fluoro-4-nitrotolueno por oxidação com KMnO^ para originar ácido 2-fluoro-4-nitrobenzóico, seguido por redução catalítica para originar ácido 4-amino-2-fluorobenzóico, seguido por diazotização/hidrôlise para originar o ácido 4-hidroxi-2--f luor obenzóico que foi convertido a 2-f luoro-4-h.idroxibenzoato de benzilo de um modo análogo ao descrito no Exemplo 23) foi usado como material de partida no lugar de 2-cloro-4-hidroxiben-zoato de benzilo. RMN (CDC13) δ 0,91 (t, 3H); 0,97 (t, 3H); 1,02 (t, 3H); 1,30 (m, 2H); 1,7 - 2,1 (m, 6H); 2,32 (s, 3H); 4,83 (q, 1H); 5,70 (s, 1H); 6,9 - 7,3 (m, 6H); 7,94 (t, 1H). EXEMPLO 36 (4S)-3,3-Dietil-l-r(R)-a-n-propil-M-etoxilbenzilaminocarbonin--4-Γ(4-carboximetil)fenoxilazetidin-2-ona

Passo A: Preparação de Sal de (Ri-t-H-g-metilbenzilamina do Ãcido de (R)-α-alil-(4-etoxifenil)metil-aeético

Uma solução do ácido 4-etoxifenilacético (9,4 gm) em THF (50 ml) foi arrefecida num banho de gelo seco, sob uma atmosfera de azoto e 110 ml de uma solução de bis(trimetilsilil)-amida de lítio 1 M em THF foi adicionado gota a gota. Depois de 10 min o banho de arrefecimento foi removido e a solução foi deixada aquecer. Depois de uns 30 minutos adicionais o frasco foi arrefecido num banho de gelo e brometo de alilo (5,1 ml) foi adicionado. Foi deixado aumentar a temperatura da mistura reac-cional durante 1 hr e depois foi vazada em HCl aq./gelo. Esta foi extractata com Et20 e a camada orgânica foi lavada com salmoura, seca sobre Na2S0^, filtrada e evaporada até à secura. O resíduo assim obtido foi diluído com isopropanol (40 ml) e (RT)-(+)-a-me-tilbenzilamina (3,5 gm) foi adicionado. Um sólido formado que foi filtrado, e lavado com isopropanol frio para originar 4,08 gm de produto em bruto. Este sólido foi cristalizado duas vezes a partir de isopropanol para originar 2,23 gm do composto em epígrafe na forma de um sólido branco. [ct]D -20,42.

Passo B: Preparação de Isocianato de (R)-g-alil-(4-etoxi)benzilo 2,2 gm do material preparado num Passo A anterior foi acidificado com HCl 1,2 N na presença de EtOAc. A camada orgânca foi separada, lavada com salmoura, seca sobre Na2S04, filtrada e evaporada até à secura. 0 resíduo assim obtido foi dissolvido em acetona (12 ml) e adicionado a uma solução de NaN^ (0,5 gm) em Η20 (9 ml), enquanto se manteve a temperatura abaixo dos 5 °C.

Depois de agitação durante 0,5 hr, a solução foi dividida entre H20 e CHCl3 e a camada orgânica foi lavada sucessivamente com H20 e salmoura, e depois foi seca sobre Na2S04, filtrada e concentrada a aproximadamente 20 ml. Esta solução foi aquecida num banho de óleo aos 60°C, durante 1 hr e depois foi evaporada até à secura para originar 1,4 gm do composto em epígrafe que estava sufucientemente puro para o próximo passo.

Passo C; Preparação de (4Si-3.3-dietil-l-r(R)-a-alil-(4-etoxil-benzilaminocarbonin-4-Γ(4-benziloxicarbonilmetil)fenoxil-azeti-din-2-ona A uma solução do material preparado no Exemplo 27 (0,5 gm) em CH2C12 (1 ml), 0,25 ml de Et3N foi adicionado seguido por 0,35 gm do material preparado no Passo B anterior e de um vestígio de 4-dimetilaminopiridina. Esta solução foi aquecida aos 40°C durante 3 dias e a mistura foi depois diluída com CH2C12, lavada sucessivamente com HCl 1,2 Ne salmoura, e depois seca sobre Na2S04, filtrada e evaporada até à secura. 0 resíduo assim obtido foi purificado por cromatagrafia "flash" (sílica gel, EtOAc a 10 % a 30 % em hexano) para originar 0,395 gm do composto em epígrafe.

Passo D: Preparação de (4S)-3.3-Dietil-l-f(RI-a-n-propil-(4-eto-xi)benzilaminocarbonin-4-Γ(4-carboximetil)-fenoxilazetidin-2-ona A uma solução de 0,395 gm do material preparado no Passo C anterior em EtOH (4 ml) foi adicionado Pd a 5%/Ce a mistura foi hidrogenada num despositivo de Parr, durante 5 hr. 0 catalizador foi filtrado e lavado com EtOAc. O filtrado foi evaporado até à secura e o resíduo foi purificado por cromatografia "flash" (sílica gel, EtOAc a 30 % a 40 % em hexano que contém HOAc a 0,5 %) para originar 0,298 gm de composto em epígrafe. RMN (CDC13): 6 0,91 (t, 3H); 0,95 (t, 3H); 1,08 (t, 3H); 1,30 <m, 2H); 1,41 (t, 3H); 1,7 - 2,1 (m, 6H); 3,61 (s, 2H); 4,04 (q, 2H); 4,82 (q, 1H); 5,58 (s, 1H); 6,8 - 7,3 (m, 9H). EXEMPLO 37 (4S)-3.3-Dietil-l-Γ(R)-a-n-propil-(4-metil)benzilaminocarbonill-4-Γ(4-carboximetil-3-cloro)fenoxilazetidin-2-ona 0,2 gm do material preparado no Exemplo 34 foi dissolvido em CH2C12 (2 ml) e DMF (3 gotas) e cloreto de oxalilo (0,06 ml) foram adicionados. A libertação de gás ocorreu e depois de 30 min a solução foi concentrada até à secura e o resíduo foi diluído com Et20 (3 ml). A esta solução foi adicionado uma solução éterea de CH2N2. Depois de 1 hr a reacção foi adicionada a uma mistura de AgN03 (50 mg) e de AgO (25 mg) em H20 (5 ml)/THF (5 ml) aos 70°C. Depois de uma hora adicional, a mistura foi filtrada através de Celite e o filtrado foi extractado com EtOAc. A camada orgânica foi lavada sucessivamente com H20 e salmoura e depois foi seca sobre Na2S04, filtrada e evaporada até à secura. O resíduo assim obtido foi purificado por cromatografia "flash" (sílica gel, usando EtOAc 30 - 40 % e ácido acético a 1 % em hexano como eluente) para originar 0,122 gm do composto em epígrafe.

RMN (CDC13)s S 0,90 (t, 3H); 0,94 (t, 3H); 1,06 (t, 3H); 1,32 (m, 2H); 1,6 - 2,1 <m, 6H); 2,32 (s, 3H); 3,76 (s, 2H); 4,85 (q, 1H); 5,55 (s, 1H); 6,93 (d, 1H); 7,1 - 7,4 (m, 6H); 7,98 (m, 1H). EXEMPLO 38 (4S)-3,3-Dietil-l-Γ(R)-a-n-propil-(4-metil) benzilaminocarbonill-4-Γf4-carboximetil-3-fluoro)fenoxilazetidin-2-ona O composto em epígrafe foi preparado essencialmente como descrito acima para o Exemplo 37, à excepção de o material preparado no Exemplo 35 foi usado como material de partida. RMN (CDC13): S 0,91 (t, 3H); 0,94 (t, 3H); 1,06 (t, 3H); 1,30 (m, 2H) ; 1,6 - 2,1 (rn, 6H) ; 2,31 (S, 3H) ; 3,63 (s, 2H) ,* 4,82 (q, 1H); 5,55 (s, 1H); 6,8 - 7,3 (m, 8H). EXEMPLO 39

Partindo com 3,3-dietil-4-acetoxi-azetidin-2-ona como preparado no Exemplo 22, Passo B (Esquema (d)) seguido por substituição do acetato com o fenol apropriado e acilação do azoto com o isocianato quiral correspondente, como indicado no Esquema (h) e no Exemplo 20, Passos C - E, os compostos seguintes foram preparados. Os diasterioisómeros obtidos na acilação foram separados por cromatografia em sílica gel usando misturas de solventes de acetato de etilo a 10 - 30 %/hexano. (4S) -3,3-dietil-l-[ (R) -α-etilbenzilaminocarbonil] -4-[ (4-carboxim-etil)fenoxi]azetidin-2-ona. RMN (CDClg): 5 0,9 (t, 3H, J = 7 Hz); 0,94 (t, 3H, J = 7 Hz); 1.07 (t, 3H, J = 7 HZ),* 1,65 - 2,05 (m, 6H); 3,58 (s, 2H); 4,8 (q, 1H, J = 8 Hz); 5,58 (s, 1H); 7,0 (d, 1H, J = 8 Hz); 7,1 - 7,45 (m, 9H). (4S)-3,3-dietil-l-[(R)-a-n-propilaminocarbonil]-4-[(4-carboximet-il)fenoxi]azetidin-2-ona. RMN (CDC13): S 0,91 (t, 3H, J = 7 Hz); 0,94 (t, 3H, J = 7 Hz) ; 1.07 (t, 3H, J = 7 HZ); 1,34 (m, 2H); 1,65 - 2,05 (m, 6H); 3,57 (s, 2H); 4,88 (q, 1H, J = 7 Hz); 5,58 (S, 1H); 7,0 (d, 1H, J = 7 HZ); 7,1 - 7,5 (m, 9H). (4 S)-3,3-dietil-l-[(R)-a-alil-(4-metil)benzilaminocarbonil]-4-[(-4-carboximetil)fenoxi]azetidin-2-ona RMN (CDC13)S S 0,96 (t, 3H, J’= 7 Hz); 1,07 {t, 3H, J = 7 Hz); 1,70 - 2,1 (m, 4H); 2,32 (s, 3H); 2,57 (t, 2H, J = 7

Hz); 3,58 (s, 2H); 4,95 <q# 1H, J = 7 Hz); 5,14 (m, 2H); 5,58 (s, 1H); 5,66 (m, 1H); 7,03 (d, 1H, J = 7 Hz); 7,16 (s, 4H); 7,19 (s, 4H) . (4S)-3,3-dietil-l-[(R)-a-alil(3,4-metilenodioxi)benzilaminocarbo-nil]-4-[(4-carboximetil)fenoxi]azetidin-2-ona RMN (CDC13)! δ 0,96 (t, 3H, J = 7 Hz); 1,05 (t, 3H, J = 7 Hz); 1,65 - 2,05 (m, 4H); 2,54 (t, 2H, J s 6 Hz); 4,87 ((q, 1H, J = 7 Hz); 5,05 - 5,2 (m, 2H); 5,58 (s, 1H); 5,66 (m, 1H); 5,94 (s, 2H); 6,76 (s, 3H); 6,98 41, 1H, J = 7 Hz); 7,2 (m, 4H)). (4S)-3,3-dietil-l-[(R)-α-η-propil(3,4-metilenodioxi)-benzilamino-carbonil]-4-[(4-carboximetil)fenoxi]azetidin-2-ona -129- -129-

RMN (CDC13): δ 0,9 (t, 3H, J s 7 Hz) ; 0,94 (t, 3H, J = 7 HZ); 1,06 (t, 3H, J = 7 HZ); 1,3 (m, 2H); 1,65 - 2,1 (m, 6H); 3,58 (s, 2H); 4,76 (q, 1H, J = 7 Hz); 5,58 (s, 1H); 5,92 (S, 2H); 6,15 (s, 3H) ,* 6,88 (d, 1H, J = 7

Hz); 7,2 (m, 4H). (4S)-3,3-dietil-l-[(R)-α-η-propil(4-metil)benzilaminocarbonil]-4--[(4-carboxi)fenoxi]azetidin-2-ona RMN (CDC13)í S 0,91 (t, 3H, J = 7 Hz); 0,98 (t, 3H, J = 7 Hz); 1.07 (t, 3H, J = 7 Hz); 1,32 (m, 2H); 1,65 - 2,1 (m, 6H); 2,33 (s, 3H); 4,83 (q, 1H, J = 7 Hz); 5,71 (s, 1H); 6,93 (d, 1H, J = 7 Hz); 7,16 (s, 4H); 7,25 (d, 2H, J = 8 HZ); 8,04 (d, 2H, J = 8 Hz). (4S)-3,3-dietil-l-[(R)-α-η-propil(4-metil)-benzilaminocarbonil]— 4-[(4-carboximetil)fenoxi]azetidin-2-ona. RMN (CDC13); S 0,9 (t, 3H, J = 7 Hz); 0,93 (t, 3H, J = 7 Hz); 1.07 (t, 3H, J = 7 Hz); 1,28 (m, 2H); 1,7 - 2,1 (m, 6H); 2,33 (s, 2H); 3,6 (s, 2H); 4,81 (q, 1H, J = 7

Hz); 5,56 (s, 1H); 6,93 (d, 1H, J as 7 Hz); 7,15 (s, 4H); 7,2 (s, 4H). (4S)-3,3-dietil-l-[(R)-a-n-propil(4-metoxi-3-metil)benzilaminocarbonil ]-4-[(4-carboximetil)fenoxi]azetidin-2-ona. RMN (CDC13):

Claims (5)

1. REIVINDICAÇÕES lâ. - Processo para a preparação de um composto de Fórmula (A'):

   ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável em que: R ê alquilo C^_g/

   M é (1) hidrogénio, (2) alquilo C1_g, (3) hidroxi-alquilo (4) halo-alquilo C^g, (5) alcenilo C2_g, ou (6) alcoxi C^g-alquilo C^g,· X5 é (1) hidrogénio, (2) alquilo C^g, (3) halo-alquilo 01-6, (4) alcenilo C2_g, (5) alcinilo C2_6, (6) carboxi, -131- (7) carboxi-alquilo C1-6, (8) carboxi-alquil C^g-carbonilo, (9) carboxi-alquil C^g-carbonilamino, (10) carboxi-alcenilo C„ ^ ”6 (11) hidroxi-alquilo C. , 1-6 (12) alquil C1_6-carbonilo/ (13) alquil C^g-carbonilamino, ou (14) hidroximetilcarbonil-alquilo C. e 1—6 X- e X_ são cada um independentemente (1) hidrogénio, (2) alquilo C^g, (3) halo, (4) carboxi, (5) alcoxi C^_6, (6) fenilo, (7) alquil C^_g-carbonilo, (8) di-(alquil C1_6)amino, (9) fenoxi, ou X_ e X„ são considerados em conjunto de modo a formarem 6 / um anel seleccionado a partir de furano, tiofeno, e dioxaciclopentano; e Xg é (a) hidrogénio, (b) alquilo C^g, (c) halo, (d) alcoxi C1_6, ou (e) hidroxi. caracterizado por compreender: 1) a reacção de um composto com a fórmula (B) segue: que se -133- *

   R 1 Ac R- CB) ^-NH O com um composto de fórmula (C):

   em que

   (1) hidrogénio, (2) alquilo C1-6, (3) halo-alquilo C^g, (4) alcenilo C2_6, (5) alcinilo C_ (6) alcoxi C^g-carbonilo, (7) alcoxi C1_g-carbonil-alquilo c1_g/ (8) alcoxi C1_6-carbonil-alquil C^g-carbonilo, (9) alcoxi C1_6-carbonil-alquil C1_g-carbonilami-no, (10) alcoxi C1_g-carbonil-alcenilo C2_6, (11) hidroxi-alquilo C^g, (12) alquil C^g-carbonilo, (13) alquil C^g-carbonilamino, ou (14) di-(alquil C^g) amino-alquilo C^g,· sob condições básicas, de modo a obter-se um composto da fórmula (D):

   S CD) e 2) a reacção do composto (D) com um composto de fórmula (E): M 0=C=N—CH·

   CE) ' sob condições básicas e, facultativamente, a conversão de X5’ em Xg, de modo a obter-se o composto da fórmula (A):

   (A) -135-

   2®. - Processo de acordo com a reivindicação 1, carácter izado por se preparar um composto em que: M é hidroxi-alquilo C. ou 1-0 halo-alquilo CL l—o
2. 38. - Processo de acordo com a reivindicação 1, carac-terizado por se preparar um composto em que: Xg é hidrogénio, alquilo C.^, fluoro, ou cloro. terizado por: o Passo (1) se efectuar na presença de um hidróxido de metal alcalino ou alcalino-terroso; e o Passo (2) se efectuar na presença de uma tri(alquil C, ,) amina ou de um carbonato de metal 1-6 alcalino; e

   a conversão de Xg' em Xg ser levada a cabo por meio de ácido, redução catalítica, hidrogenação ou catálise com Pd(0), conforma apropriado.
3. 58. - Processo de acordo com a reivindicação 1, carac-terizado por se preparar um composto em que: R é alquilo CL 1 R é alquilo ou alcoxi C^^-alquilo M é (1) hidrogénio, (2) alquilo C^_g, (3) alcenilo CL c, ou Z~ D (4) alcoxi C^g-alquilo # é (1) hidrogénio, (2) alquilo 0χ_6, (3) halo-alquilo C^_g, (4) alcenilo C2_g, (5) alcinilo CL (6) carboxi, (7) carboxi-alquilo C1_g, (8) carboxi-alquil C^_g-carbonilo, (9) carboxi-alquil C1_g-carbonilamino, (10) carboxi-alcenilo C2_g, (11) hidroxi-alquilo C1_g, (12) alquil C1_g-carbonilo, ou (13) alquil C1_g-carbonilamino; é hidrogénio, halo ou alquilo C^_g; e é (1) hidrogénio, (2) alquilo 0±_6, (3) halo, (4) carboxi, (5) alcoxi C1_6, (6) fenilo, (7) alquil C1_g-carbonilo, (8) di-(alquil C1_g)amino, (9) fenoxi, e é hidrogénio, ou -137-

   Xg e X? são considerados em conjunto de modo a formarem um anel seleccionado a partir de dioxapentano e furano.
4. 68. - Processo de acordo com a reivindicação 5, carácter izado por se preparar um composto em que: Xg é carboxi ou carboxi-alquilo c1-6; ) Xg é hidrogénio, F# Cl# CHg ou CI^CH^; M é alquilo C1_3 ou alilo; e Xg é hidrogénio, alquilo 01-6, alcoxi C^g e X7 é hidrogénio ou Xg e X7 são considerados em conjunto de modo a formarem um anel de furano ou dioxaciclopentano. 7a. - Processo de acordo com a reivindicação 6, carac-terizado por se preparar um composto seleccionado a partir do grupo que consiste em: (a) (4S)-3,3-Dietil-l-[(R)-α-η-propil-(4-metil)benzilamino-carbonil]-4-[(4-carboxi-3-cloro)fenoxi]azetidin-2-ona; (b) (4S)-3,3-Dietil-l-[(R)-α-η-propil-(4-metil)benzilamino-carbonil]-4-[(4-carboxi-3-fluoro)fenoxi]azetidin-2-ona; (c) (4S)-3,3-Dietil-l-[(R)-α-η-propil-(4-metil)benzilamino-carbonil]-4-[(4-carboxi-3-metil)fenoxi]azetidin-2-ona; (d) (4S)-3,3-Dietil-l-[(R)-α-η-propil-(4-metil)benzilamino-carbonil]-4-[(4-carboximetil)fenoxi]azetidin-2-ona; (e) (4S)-3,3-Dietil-l-[ (R)-α-η-propil-(4-metil)benzilamino-carbonil]-4-[(4-carboximetil-3-cloro)fenoxi]azetidin-2--ona; e -138- (f) (4S) -3,3-Dietil-l-[ (R) -α-η-propil- (4-metil) benzilamino-carbonil]-4-[(4-carboximetil-3-f luoro)fenoxi]azetidin--2-ona. ga. - processo de acordo com a reivindicação 1 ou 4, caracterizado por se preparar um composto que é (4S) -3,3-dietil-l-[ [ (R) -1- (benzofuran-5-il) butil-ami-no]carboni1]-4-[(4-carboximeti1) fenoxi]azetidin-2-ona.
5. 98. - Processo para a preparação de uma composição farmacêutica para a inibição da elastase de leucócitos humanos, caracterizado por se incluir na referida composição uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de acordo com as reivindicações l, 4, 6, ou 8 e um suporte farmaceuticamente aceitável. loa. - Método de tratamento para a inibição da elastase de leucócitos humanos, caracterizado por compreender a administração a um indivíduo comm necessidade de tal inibição, de uma quantidade terapeuticamente eficaz não tóxica de um composto de acordo com as reivindicações 1, 4, 6 ou 8, sendo a gama de dosagem de composto activo de 5 mg a 5000 mg. Lisboa, 14 de Outubro de 1991

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