PT98766B - Processo de preparacao de derivados de quinobenzoxazina quinobenzotiazina e pirido-acridina e de composicoes farmaceuticas que os contem - Google Patents

Description

MEMÓRIA DESCRITIVA

CAMPO TÉCNICO

Este invento refere-se a compostos que têm actividade antineoplásica. Mais particularmente, este invento refere-se a derivados de quinobenzoxazina, quinobenzotiazina e pirido-acridina, que são úteis no tratamento de doenças neoplásicas, a composições farmacêuticas que contêm estes compostos e a um processo para o tratamento de doenças neoplásicas com derivados de quinobenzoxazina, quinobenzotiazina e pirido-acridina.

ANTECEDENTES DO INVENTO

Sabe-se que certos compostos quinolona possuem actividades antibacterianas. Por exemplo, D. Chu, Patente u.s. N² 4 607 032, concedida em 19 de Agosto de 1986, que é aqui incorporada para referência, descreveu derivados de ácido l-substituído-amino-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]benzoxazina-5-carboxílico que possuem actividade antibacteriana. Derivados de quinobenzotiazina e de quinobenzoxazina, muito relacionados, com actividade antibacteriana, também foram descritos por Chu nas Patentes U.S. N^aS 4 528 285, concedida em 9 de Julho de 1985; 4 529 725, concedida em 16 de Julho de 1985; e 4 542 133, concedida em 17 de Setembro de 1985. Contudo, estes e outros novos derivados relacionados não foram, até agora conhecidos como agentes antineoplásicos.

SUMÁRIO DO INVENTO

Num aspecto do presente invento proporciona-se um processo para o tratamento de doenças neoplásicas que compreende a administração a um animal hospedeiro com necessidade desse tratamento de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto com a Fórmula I:

(segue fórmula)

73051

4832.PG.01

ou de um seu sal, éster, amida ou pró-droga farmaceuticamente aceitável, na qual R¹ é seleccionado de entre hidrogénio e um grupo protector de carboxilo.

R² na Fórmula I é seleccionado de entre hidrogénio, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alcoxi de 1 a 6 átomos de carbono e sulfo-hidroalquilo de 1 a 6 átomos de carbono.

R³ na Fórmula I é um ou mais grupos seleccionados, independentemente uns dos outros, de entre o grupo que consiste em hidrogénio; halogéneo; nitro; alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; carboxilo; ciano; alquilo de 1 a 6 átomos de carbono substituído com halogéneo; alquilo de 1 a 6 átomos de carbono substituído com hidroxilo; alquilsulfonilo; metilenodioxi; um grupo de fórmula -YR⁴ no qual Y é 0 ou S e R⁴ é hidrogénio ou alquilo de 1 a 6 átomos de carbono; e uma amina de fórmula -NR⁵R⁶ na qual R⁵ e R⁶ são seleccionados, independentemente um do outro, de entre hidrogénio ou alquilo de 1 a 6 átomos de carbono.

W na Fórmula I é seleccionado de entre hidrogénio, alcoxi, hidroxilo, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, amino, alquilamino, halogéneo e alquilo substituído com halogéneo.

X na Fórmula I é seleccionado de entre halogéneo, hidrogénio, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono e alquilo de 1 a 6 átomos de carbono substituído com halogéneo.

Z na Fórmula I é seleccionado de entre (a) halogéneo; (b) um

73051

4832.PG.01

grupo piridilo ou piridilo substituído; (c) um grupo amino com a fórmula -NR¹²R¹³ na qual R¹² é hidrogénio ou alquilo de 1 a 10 átomos de carbono e R¹³ é seleccionado de entre alquilo de 1 a 10 átomos de carbono, alquilo de 1 a 10 átomos de carbono, substituído com hidroxilo , um amino, grupo alquilamino de 1 a 6 átomos de carbono e dialquilamino de 1 a 6 átomos de carbono; e (d) um heterociclo contendo azoto de fórmula

ch₇ (la) na qual R⁷ é seleccionado de entre -CH2-, -CH2CH2- ^e -CH2CH₂NHCH₂- ou um grupo de fórmula -CH₂R⁹CH₂~ na qual R^ é seleccionado de entre S, 0 ou NH. R⁸ na Fórmula Ia é 1 ou 2 grupos seleccionados, independentemente um do outro, de entre hidrogénio, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono substituído com halogéneo, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono substituído com amino, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono substituído com hidroxilo, alquilaminoalquilo de 1 a 6 átomos de carbono, hidroxilo, alcanoílo de 1 a 6 átomos de carbono,um grupo espiro-cicloalquilo e uma amina de fórmula -NR¹⁰R^i:l. R¹⁰ e R¹¹, neste caso, podem ser seleccionados independentemente um do outro, de entre hidrogénio e alquilo de 1 a 6 átomos de carbono ou, alternativamente, um de R¹⁰ e R ¹¹ é hidrogénio e o outro é um grupo alcanoílo ou um grupo peptidilo de 1 a 5 α-aminoácidos ligados ao azoto com uma ligação amida.

Alternativamente, X e Z podem ser tomados conjuntamente para formarem -OCH₂O- ou -OCH₂CH₂-.

A na Fórmula I é seleccionado de entre 0, S e CH₂.

Num outro aspecto do presente invento, proporcionam-se novos compostos, e suas composições farmacêuticas, de Fórmula I na qual R¹, R², R³, A, W e X são descritos como anteriormente. Nestes

73051

4832.PG.01 compostos, Z é seleccionado de entre (a) piridilo ou piridilo substituído, com a condição de A não ser S, e (b) um heterociclo contendo azoto de fórmula

(Ib)

na qual R²⁷ é seleccionado de entre -CH2“, -CH2CH2- ^ou -CH2CH₂CH₂-. Alternativamente, X e Z tomados em conjunto podem formar -OCH₂CH₂- ou -0CH₂- com a condição de R² não poder ser hidrogénio.

R²⁸ na Fórmula Ib é seleccionado de entre hidrogénio, halogéneo, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono substituído com halogéneo e espiro-cicloalquilo de 5 a 10 átomos de carbono.

_r30 _{e r}31 _na fórmula Ib são ,cada um, seleccionados independentemente de entre o grupo gue consiste em hidrogénio, acetilo, alquilo, um grupo acilo ou um α-aminoácido ligado ao azoto com uma ligação amida, ou um grupo acilo de um resíduo de polipéptido de 1 a 5 aminoâcidos ligados ao azoto por uma ligação amida, com as condições de (a) quando A for 0, R³⁰ e R³¹ sejam cada um seleccionados independentemente de entre um grupo peptidilo de 1 a 5 aminoâcidos ligados ao azoto com uma ligação amida e (b) ambos R³⁰ e R³¹ não sejam simultaneamente hidrogénio.

Como será apreciado pelos peritos na arte, o grupo piridilo em Z, descrito anteriormente, pode estar substituído ou não substituído. Os substituintes adequados no anel piridina incluem alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, halogéneo, alcanoílo de 1 a 6 átomos de carbono e alcanoilamido de 1 a 6 átomos de carbono.

DESCRIÇÃO DETALHADA E CONCRETIZAÇÕES PREFERIDAS presente invento refere-se a compostos que têm actividade

antineoplásica e a um processo de tratamento de doenças neoplásicas. Mais particularmente, o invento refere-se a um processo de tratamento de doenças neoplásicas compreendendo a administração a um animal hospedeiro com necessidade desse tratamento, de uma quantidade de um composto de Fórmula I descrito como anteriormente. Em relação à Fórmula I, os termos abaixo são definidos como se segue:

termo α-aminoácido refere-se a um aminoácido simples. Os aminoácidos podem ser os aminoácidos que ocorrem naturalmente, tais como valina ou glicina, ou podem ser alfa-aminoácidos sintéticos tais como ciclo-hexilamina. Os aminoácidos podem estar na configuração L ou D ou ser uma mistura dos dois isómeros. Se não for especificado os substituintes aminoácidos são optieamente activos e têm a configuração L.

termo alcanoílo de 1 a 6 átomos de carbono refere-se a um substituinte de fórmula -C(O)R^⁹ na qual R·®·⁹ é hidrogénio ou um grupo alquilo de 1 a 6 átomos de carbono e inclui, por exemplo, acetilo.

termo alcoxi refere-se a um átomo de oxigénio substituído com um grupo alquilo definido como abaixo. Os exemplos incluem etoxi e propoxi.

termo alquilo refere-se a um radical monovalente derivado de um hidrocarboneto alifático de 1 a 6 átomos de carbono por remoção de um átomo de hidrogénio. Os exemplos incluem metilo, etilo e propilo.

termo alquiamino refere-se a um grupo amino que pode ter um a três substituintes, definido como anteriormente. Os exemplos incluem metilamino, etilamino, dimetilamino e semelhantes.

termo aminoalquilo refere-se a um grupo alquilo substituído com amino definido como anteriormente. Os exemplos incluem aminoetilo, aminometilo e semelhantes.

73051

4832.PG.01

O termo alquilaminoalquilo refere-se a grupos amino substituídos com um a três grupos alquilo, definidos como anteriormente, incluindo metilamino, etilamino e propilamino ligado a um substituinte alquilo definido como anteriormente, como, por exemplo, N,N-dimetilaminoetilo.

termo alquilsulfonilo refere-se a um grupo alquilo, definido como anteriormente, ligado a grupos sulfonilo, tais como etilsulfonilo ou metilsulfonilo.

termo grupo protector de carboxilo refere-se e inclui o resíduo de um grupo éster de ácido carboxílico. Estes grupos protectores de carboxilo são bem conhecidos dos peritos na arte, tendo sido usados extensivamente na protecção de grupos carboxilo nos campos da penicilina e da cefalosporina, tal como é descrito nas Patentes U.S. N^a® 3 840 556 e 3 719 667. No geral, estes grupos protectores de carboxilo podem ser clivados de forma relativamente fácil para originarem o grupo carboxilo livre. Grupos protectores representativos incluem alquilo Cj-C₈ (e.g. metilo, etilo, butilo terciário), alquilo substituído (e.g. dimetilaminoetilo), benzilo e seus derivados substituídos, tal como grupos alcoxi e nitrobenzilo; são também adequados os grupos acilo tal como os grupos pivaloiloximetilo. Ver, por exemplo, T.H. Greene, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley and Sons, New York, (1981).

O termo halogéneo refere-se a grupos cloro (Cl), bromo (Br), fluoro (F) e iodo (I).

O termo alquilo substituído com halogéneo refere-se a um grupo alquilo, definido como anteriormente, no qual pelo menos um átomo de hidrogénio está substituído por um átomo de halogéneo. Exemplos de alquilos substituídos de 1 a 6 átomos de carbono com halogéneo incluem trifluorometilo, fluoroetilo e semelhantes.

termo alquilo substituído com hidroxilo refere-se a um grupo alquilo com pelo menos um substituinte hidroxilo, como por exemplo hidroxietilo.

termo doenças neoplásicas refere-se a desordens e estados de doença caracterizados por um crescimento celular proliferativo anormal, tal como leucemias, linfornas, mielomas, melanoma, sarcomas, blastomas e tumores da cabeça, tiróide, pescoço, cérebro, esófago, pulmão, mama, estômago, pâncreas tracto genito-urinário e semelhantes. Os agentes antineoplásicos são compostos químicos que são eficazes no tratamento de quaisquer uma ou mais doenças neoplásicas. A quimioterapaia de doenças neoplásicas está descrita em Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, sétima edição, A.G. Gilman, et al.,ed..pp 1240- -1306 (1985).

termo heterociclo contendo azoto refere-se um grupo cíclico de 4 a 7 átomos contendo um, dois ou três heteroátomos seleccionados de entre S, 0 ou N sendo pelo menos um dos heteroátomo azoto. O grupo cíclico pode estar substituído ou não substituído ou num heteroátomo num átomo de carbono, com, por exemplo, alquilo, halo(alquilo), amino(alquilo), alquilo substituído com hidroxilo, hidroxilo, halogéneo, amino, um a-aminoácido de um polipétido de um a cinco aminoácidos. Os exemplos de heterociclos contendo azoto incluem azetidina, pirrolidina, piperidina, piperazina, morfolina, tiomorfolina e semelhantes.

O termo peptidilo refere-se a um grupo de um ou mais aaminoácidos, tal como descrito anteriormente, ligados por uma ligação amida.

O termo fenilo refere-se a anéis benzeno não substituídos ou a anéis benzeno com um a três substituintes que não são hidrogénio, seleccionados independentemente uns dos outros, de entre o grupo que consiste em halogéneo, hidroxilo, alcoxi, alquilo, alquilo substituído com hidroxilo, amino, (alquil)amino, aminoalquilo e heterociclo contendo azoto, como, por exemplo, aziridinilo, pirrolidinilo e semelhantes.

O termo pró-droga refere-se a compostos que são transformados rapidamente in vivo para originarem o composto

73051

4832.PG.01 progenitor da fórmula anterior, como, por exemplo, por hidrólise no sangue. T. Higuchi e V. Stella proporcionam uma discussão exaustiva do conceito de pró-droga em Pro-drugs as Novel Delivery Systems, Volume 14 de A.C.S Symposium Series.

termo espiro-ciloalguilo refere-se a hidrocarbonetos biciclicos saturados com um carbono comum a ambos os anéis, incluindo por exemplo espiro-pentano e espiro-hpetano.

termo sais, ésteres e amidas farmceuticamente aceitáveis refere-se aqueles sais carboxilato, sais de adição de aminoácidos, ésteres e amidas dos compostos de Fórmula I, bem como às sua formas zwiteriónicas, que são dentro do âmbito do julgamento médico avisado, adequados para utilização em contacto com os tecidos de humanos e de animais inferiores sem toxicidade, irritação, resposta alérgica indevidas e semelhantes; compatíveis com uma razão benefício/risco; e eficazes para o uso pretendido.

termo sais farmaceuticamente aceitáveis refere-se a sais de adição de ácidos inorgânicos e orgânicos dos compostos do presente invento, relativamente não tóxicos. Estes sais podem ser preparados in situ durante a purificação e isolamento final dos compostos ou por reacção separada do composto purificado na sua forma de base livre com um ácido orgânico ou inorgânico adequado e isolando o sal assim formado. Os sais representativos incluem os sais hidrobrometo, hidrocloreto, sulfato, fosfato, nitrato, acetato, oxalato, valerato, oleato, palmitato, estearato, laurato, borato, benzoato, lactato, fosfato, tosilato, citrato, maleato, fumarato, succinato, tartarato, naftilato, mesilato, gluco-heptonato, lactobionato e laurilsulfonato e semelhantes. (Ver, por exemplo, S.M.Berge, et al.. Pharmaceutical Salts, J. Pharm. Sei. . 66:1-19 (1977), que é aqui incorporado para referência.)

Os exemplos de ésteres farmaceuticamente aceitáveis, não tóxicos, dos compostos de Fórmula I incluem ésteres de alquilo a C₆ nos quais o grupo alquilo é de cadeia linear ou ramificada. Os ésteres aceitáveis também incluem ésteres de cicloalquilo

73051

4832.PG.01 dos compostos de Fórmula I podem ser preparados de acordo com processos convencionais.

Os exemplos de amidas farmaceuticamente aceitáveis, não tóxicas dos compostos de Fórmula I incluem amidas derivadas de amoníaco, alquilaminas a Cg primárias e dialquilaminas C-^ a Cg secundárias onde os grupos alquilo são de cadeia linear ou ramificada. No caso de aminas secundárias, a amina também pode estar na forma de um heterociclo de 5 ou 6 membros contendo um átomo de azoto. As aminas derivadas do amoníaco, as alquilamidas C^ a C₃ primárias de Fórmula I podem ser preparadas de acordo com processos convencionais. Deve ser entendido que as amidas do presente invento incluem de aminoácidos e derivados peptídicos.

Os compostos preferidos têm a estrutura:

do presente invento são aqueles que

na qual R¹, R², R³ e W são como descritos, A é 0, Z é um grupo amino ou um grupo heterociclo alifático e X é F. Os compostos particularmente preferidos são aqueles que têm a estrutura descrita como anteriormente, na qual Z é amino-pirrolidinilo, 2-metil-4-aminopirrolidinilo, norvalilaminopirrolidinilo ou alanilaminopirrlidinilo.

Os compostos seguintes são representantes dos compostos preferidos do presente invento:

ácido 1-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][l,4]benzoxazina-5-carboxílico;

73051 4832.PG.01

ácido l-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-8-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i, j ] [ 1,4 ]benzoxazina-5-carboxílico;

ácido l-(3-acetamidopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-nitro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]benzoxazina-5-carboxílico;

ácido 1-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]benzoxazina-5-carboxilico;

ácido l-(3-aminopirrolidin-l-il)-2,9-difluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]benzoxazina-5-carboxílico;

ácido 1-(3-norvalilaminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][l,4]benzoxazina-5-carboxílico;

ácido l-(3-alanilaminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][l,4]benzoxazina-5-carboxílico;

ácido l-(3-norvalilaminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][l,4]benzoxazina-5-carboxilico;

ácido l-(3-norvalilaminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-8-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][l,4]benzoxazina-5-carboxílico;

ácido l-(3-alanilaminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-8-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]benzoxazina-5-carboxilico;

ácido 1-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][l,4]benzotiazina-5-carboxílico;

ácido l-(3-Aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-8-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]benzotiazina-5-carboxílico;

ácido l-(3-alanilaminopirrolidin-l-lo)-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]benzotiazina-5-carboxilico;

ácido l-(3-acetamidopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-nitro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][l,4]benzotiazina-5-carboxílico;

ácido 1-(3-aminopirrolidin-l-il)-2,9-difluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]benzotiazina-5-carboxilico;

ácido l-(3-norvalilaminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][l,4]benzotiazina-5-carboxílico;

ácido 1-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]benzotiazina-5-carboxílico;

ácido l-(3-alanilaminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]benzotiazina-5-carboxilico;

ácido 1-(3-norvalilaminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-8-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][l,4]benzotiazina-5-carboxilico;

ácido l-(3-alanilaminopirrolidin-l-il)—2—fluoro-8-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]benzotiazina-5-carboxílico;

-aminopirrolidin-l-il)-2-carboxílico;

ácido l-(3-aminopirrolidin-l-il)-8,10-dimetil-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][l_z4]benzoxazina-5-carboxílico;

ácido l-((3S)-3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]benzoxazina-5-carboxilico;

ácido l-((3R)-3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]benzoxazina-5-carboxílico ácido l-((3S)-3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][l,4]benzoxazina-5-carboxílico;

ácido l-((3R)-3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]benzoxazina-5-carboxílico;

ácido 2-fluoro-l-(3-norvalilaminopirrolidin-l-il)-8-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]benzoxazina-5-carboxílico;

ácido 1-(3-aminopirrolidin-l-il)-8-t-butil-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]benzoxazina-5-carboxilico;

ácido l-(3-aminopirrolidin-l-il)-2,3-difluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4—i,j][1,4]benzoxazina-5-carboxílico;

ácido 2,3-difluoro-l-(3-norvalilaminopirrolidin-l-il)-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][l,4]benzoxazina-5-carboxilico;

ácido 2-fluoro-l-((3R)-3-norvalilaminopirrolidin-l-il)-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][l,4]benzoxazina-5-carboxilico;

ácido 2-fluoro-l-((3S)-3-norvalilaminopirrolidin-l-il)-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][l,4]benzoxazina-5-carboxílico;

ácido 2-fluoro-9-metil-l-((3R)-3-norvalilaminopirrolidin-l-il)-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][l,4]benzoxazina-5-carboxilico;

ácido 1—(3-aminopirrolidin-l-il)-8-etilsulfonil-2-fluoro-4-oxo-4H-quino [2,3,4-i,j][l,4] benzoxazina-5-carboxi lico ,· ácido 8-etilsulfonil-2-fluoro-l-(3-norvalilaminopirrolidin-l-il)-4-OXO-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]benzoxazina-5-carboxílico;

l-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-5-(1-morfolinocarbonil)-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][l,4]benzoxazina;

1-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]benzoxazina-5-(N-,2,4-difluorofenil)carboxamida;

ácido l-((2S,4S)-4-amino-2-metilpirrolidin-l-il)-8,10-dimetil-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]benzoxazina-5-carboxílico;

ácido 1-((2S,4S)-4-amino-2-metilpirrolidin-l-il)-2-fluoro-

73051

4832.PG.01

-8-metil-4-oxo-4H-quino [2,3,4-i, j ] [l, 4 ]benzoxazina-5-carboxílico; ácido l-((2S,4S)-4-amino-2-metilpirrolidin-l-il)-2-fluoro“

-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][l,4]benzoxazina-5-carboxílico?

ácido 1-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-8,9-metilenodioxi-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j] [ 1,4 ]benzoxazína-5-carboxilico;

l-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-8,9-metilenodioxi-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]benzoxazina-5-carboxilato de etilo; ácido 3-amino-l-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]benzoxazina-5-carboxílico;

ou um sal farmaceuticamente aceitável de qualquer um dos compostos anteriores. Estes e outros compostos do presente invento exibem potente actividade in vitro contra ambos os tipos de células de tumor humano e murino.

Os centros quirais dos compostos do presente invento podem ter a configuração R, S ou racémica. Os métodos de resolução das formas enantioméricas destes compostos são bem conhecidos para os peritos na arte. Por exemplo, J. March proporciona uma discussão completa dos métodos de resolução em Advanced Organic Chemistry, John Wiley and Sons, Inc, New York, (1985).

presente invento também proporciona composições farmacêuticas que compreendem um ou mais dos compostos do invento formulados em conjunto com um ou mais transportadores farmaceuticamente aceitáveis, não tóxicos. As composições farmacêuticas podem ser especialmente formuladas para administração oral em forma sólida ou líquida, para administração parenteral ou para administração rectal.

As composições farmacêuticas deste invento podem ser administrados a humanos e a outros animais oralmente, rectalmente, parenteralmente, intracisternalmente, intravaginalmente, intraperitonealmente, topicamente (como por pós, unguentos ou gotas), bucalmente ou como uma pulverização oral ou nasal. 0 termo administração parenteral, tal como aqui usado, refere-se a modos de administração que incluem injecção e infusão intravenosa, intramuscular, intraperitoneal,

73051

4832.PG.01 intrasternal, subcutânea e intra-articular.

As composições farmacêuticas para injecção parenteral, deste invento, compreendem soluções dispersões, suspensões ou emulsões aquosas ou não aquosas, estéreis, fãrmaceuticamente aceitáveis, bem como pós estéreis para reconstituição em soluções ou dispersões injectáveis, estéreis, imediatamente antes do uso. Os exemplos de transportadores, diluentes, solventes ou veículos aquosos e não aquosos, adequados, incluem água, etanol, polióis (tais como glicerol, propilenoglicol, polietilenoglicol e semelhantes) e suas misturas adequadas, óleos vegetais (como o azeite) e ésteres orgânicos injectáveis como oleato de oleílo. A fluidez adequada pode ser mantida, por exemplo, pelo uso de materiais de revestimento como lecitina, pela manutenção do tamanho de partícula desejado na caso de dispersões e pelo uso de surfactantes.

Estas composições podem, também, conter adjuvantes tais como conservantes, agentes molhantes, agentes emulsionantes e agentes de dispersão. A prevenção da acção de microorganismos pode ser assegurada pela inclusão de vários agentes anti-fúngicos e antibacterianos, por exemplo, parabeno, clorobutanol, fenol, ácido sórbico e semelhantes. Pode ser, também, desejável incluir agentes isotónicos tais como açúcares, cloreto de sódio e semelhantes. A absorção prolongada da forma farmacêutica injectável pode ser conseguida pela inclusão de agentes que retardem a absorção como monoestearato de alumínio e gelatina.

Em alguns casos, de modo a prolongar o efeito da droga, é desejável tornar mais lenta a absorção da droga a partir de injecção subcutânea ou intramuscular. Isto pode ser conseguido através do uso de uma suspensão líquida de material cristalino ou amorfo com fraca solubilidade em água. A taxa de absorção da droga depende, então, da sua taxa de dissolução a qual, por sua vez, pode depender do tamanho do cristal e da forma cristalina. Alternativamente, a absorção retardada de uma forma de droga administrada parenteralmente é conseguida por dissolução ou suspensão da droga num veículo oleoso.

As formas de depósito são feitas por formação microcápsulas de matrizes da droga em polímeros biodegradáveis como polilactido-poliglicólido. Dependendo da razão droga para polímero e da natureza do polímero particular empregue, pode ser controlada a taxa de libertação do droga. Exemplos de outros polímeros biodegradáveis incluem poli(ortoésteres) e poli(anidridos). As formulações injectáveis de depósito são, também, preparadas por aprisionamento da droga em lipossomas ou em microemulsões que são compatíveis com os tecidos corporais.

As formulações injectáveis podem ser esterilizadas como, por exemplo, por filtração através de um filtro retentor de bactérias ou por incorporação de agentes esterilizantes na forma de composições sólidas estéreis que podem ser dissolvidas ou dispersas em água estéril ou noutro meio injectável, imediatamente antes do uso.

As formas de dosagem sólidas para administração oral incluem cápsulas, comprimidos, pílulas, pós e grânulos. Nestas formas de dosagem sólidas, o composto activo é misturado com pelo menos um excipiente ou transportador inerte, farmaceuticamente aceitável, como citrato de sódio ou fosfato dicálcico e/ou a) cargas ou diluentes como amidos, lactose, sacarose, glucose, manitol e ácido silícico, b) ligantes como carboximetilcelulose, alginatos, gelatina, polivinilpirrolidona, sacarose e acácia, c) humectantes como glicerol, d) agentes de desintegração como ágar-ágar, carbonato de cálcio, amido de batata ou de tapioca, ácido algínico, certos silicatos e carbonato de sódio, e) agentes retardantes da solução como parafina, f) aceleradores de absorção como compostos de amónio quaternário, g) agentes molhantes como álcool cetílico e monoestearato de glicerol, h) absorvedores como caulino e argila bentonítica e i) lubrificantes como talco, estearato de cálcio, estearato de magnésio, polietilenoglicóis, laurilsulfato de sódio e suas misturas. No caso de cápsulas, comprimidos e pílulas, a forma de dosagem pode compreender também agentes tampão.

As composições sólidas de tipo um semelhante podem, também,

73051 4832.PG.01 ser empregues como enchimentos de cápsulas de gelatina dura ou mole usando excipientes como lactose ou açúcar do leite bem como polietilenoglicóis de elevada massa molecular e semelhantes.

As fórmulas de dosagem sólidas de comprimidos, drageias, cápsulas, pílulas e grânulos podem ser preparados com revestimentos e invólucros como revestimentos entéricos e outros revestimentos bem conhecidos na arte da formulação. Eles podem, opcionalmente, conter agentes opacificantes e podem, também, ser de uma composição que liberte apenas o(s) ingrediente(s) activo(s), ou preferivelmente, numa certa parte do tracto intestinal ou, opcionalmente, de uma forma retardada. Os exemplos de composições de implantação que podem ser usadas incluem substâncias poliméricas e ceras.

Os compostos activos podem, também, estar na forma micro-capsulada, se adequado, com um ou mais dos excipientes mencionados anteriormente.

As formas de dosagem líquidas para administração oral incluem emulsões, soluções, suspensões, xaropes e elixires farmaceuticamente aceitáveis. Para além dos compostos activos, as formas de dosagem líquidas podem conter diluentes inertes comuramente usados na arte como, por exemplo, água ou outros solventes, agentes de solubilização e emulsionantes como álcool etílico, álcool isopropílico, carbonato de etilo acetato de etilo, álcool benzilico, benzoato de benzilo, propilenoglicol,

1,3-butilenoglicol, dimetilformamida, óleos (em particular, óleo de semente de algodão,de amendoim, de milho, de gérmen, azeite, óleo de rícino e de girassol, glicerol, álcool tetra-hidrofurfurílico, polietilenoglicóis e ésteres de ácido gordo e sorbitano, e suas misturas.

Para além dos diluentes inertes, as composições orais podem, também, incluir adjuvantes como agentes molhantes, agentes emulsionantes e de suspensão, agentes edulcorantes, saborizantes e perfumantes.

73051

4832.PG.01

As suspensões, para além dos compostos activos, podem conter agentes de suspensão, por exemplo, álcoois isoestearílico etoxilados, ésteres de polioxietileno-sorbitol ou -sorbitano, celulose microcristalina, meta-hidróxido de alumínio, bentonite, ágar-ágar e tragacanto, e suas misturas.

As composições para administração rectal ou vaginal são preferivelmente supositórios que podem ser preparados por mistura dos componentes deste invento com excipientes ou transportadores não irritantes, adequados, como manteiga de cacau, politilenoglicol ou uma cera para supositório, que são sólidos à temperatura ambiente, mas são líquidos à temperatura do corpo e, por isso, irão fundir no recto ou na cavidade vaginal e libertar o composto activo.

Os compostos do presente invento podem, também, ser administrados na forma de lipossomas. Como é conhecido na arte, os lipossomas são, geralmente, derivados de fosfolipidos e de outras substâncias lipídicas. Os lipossomas são formados por cristais líquidos, mono ou multilamelares, hidratados, que são dispersos num meio aquoso. Pode-se usar qualquer lípido, não tóxico, fisiologicamente aceitável e metabolizável, capaz de formar lipossomas. As presentes composições na forma de lipossoma podem conter, para além do composto do presente invento, estabilizantes, conservantes, excipientes e semelhantes. Os lípidos preferidos são os fosfolipidos e as fosfatidil-colinas (lecitinas), naturais e sintéticos.

Os processos para a formação de lipossomas são bem conhecidos na arte. Ver, por exemplo, Prescott, Ed., Methods in Cell Bioloqy. Volume XIV, Academic Press, New York, N.Y. (1976), p. 33 et seq.

As formas de dosagem para administração tópica de um composto deste invento incluem pós, pulverizações, unguentos e inalantes. 0 composto activo é misturado em condições estéreis com um transportador farmaceuticamente aceitável e quaisquer conservantes, tampões ou propulsores necessários, que possam ser

73051

4832.PG.01

requeridos. As formulações oftálmicas, os unguentos para o olho, os pós e as soluções estão, também contemplados dentro do âmbito deste invento.

Os níveis de dosagem reais dos ingredientes activos nas composições farmacêuticas podem ser variados de modo a se obter uma quantidade do(s) composto(s) activo(s) gue seja eficaz para se conseguir a resposta terapêutica desejada para um paciente, composições e modo de administração particulares. Os níveis de dosagem seleccionados dependerão da actividade do composto particular, da via de administração, da gravidade da condição em tratamento e da condição e história médica anterior do paciente em tratamento. Contudo, está dentro da perícia na arte começar com doses do composto em níveis inferiores aos requeridos para se conseguir o efeito terapêutico desejado e aumentar gradualmente a dosagem até se conseguir a efeito desejado.

Os regimes de dosagem podem ser titulados para o neoplasma, a condição do paciente e resposta obtida, particulares, mas geralmente são administrados, oralmente ou intravenosamente, a um paciente mamífero, níveis de dosagem de cerca de 0,1 a cerca de 750 mg/kg de peso corporal, mais preferivelmente de cerca de 0,25 a cerca de 500 mg/kg de peso corporal e, muito preferivelmente, de cerca de 0,5 a cerca de 300 mg de composto activo por quilograma de peso corporal. Se desejado, a dose eficaz diária pode ser dividida em dose múltiplas para efeitos de administração, e.g. duas a quatro doses separadas por dia.

Em geral, os compostos do presente invento são sintetizados como descrito por D. Chu e R. Maleczka em J. Heterocvclic Chem. 24:453(1987) ou por D. Chu na patentes U.S. N^aS 4 607 032, 4 529 725 e 4 528 285 ou de acordo com os Esquemas Reaccionais I a IV, apresentados a seguir, nos quais R, R¹ e R² são alquilo inferior e R³ e definido como anteriormente relativamente à Formula I.

Para a preparação dos compostos de Fórmula I que são a-aminoácidos ou derivados peptidícos de grupos amina Z, a

73051

4832.PG.01

condensação do grupo amino com aminoácidos e péptidos pode ser realizada de acordo com processos de condensação convencionais, como o processo da azida, o processo de anidrido misto de ácido, o processo da DCC (diciclo-hexilcarbodiimida), o processo do éster activo (processo do éster p-nitrofenilíco, processo de éster-imida do ácido N-hidroxisucciníco, processo do éster cianometílico e semelhantes), o processo do reagente K de Woodward, o processo de DCC-HOBT (1-hidroxi-benzotriazolo) e semelhantes. Os processos clássicos para as reacções de condensação de aminoácidos são descritos em Peptide Synthesis Second Edition, M. BodansKy, Y.S. Klausner e M.A. Ondetti (1976). Está contemplado que a reacção de acoplamento de aminoácidos poderá ser realizada antes ou depois do grupo que contém o amino ser incorporado no composto, por deslocamento do átomo de flúor na posição 7 do intermediário adequado.

Tal como na síntese peptídica convencional, os grupos amino e carboxilo das cadeias laterais nas posições alfa e omega dos aminoácidos podem ser protegidos e desprotegidos, se necessário. Os grupos protectores para os grupos amino que podem ser utilizados envolvem, por exemplo, benziloxicarbonilo (Z), o-cloro-benziloxicarbonilo ((2-C1)Z)), p-nitrobenziloxicarbonilo (Z(NO₂)), p-metoxibenziloxicarbonilo (Z(OMe)), t-amiloxicarbonilo (Aoc), isobornealoxicarbonilo, adamantiloxicarbonilo (Adoc), 2-(4-bi-fenil)-2-propiloxicarbonilo (Bpoc), 9-fluorenilmetoxicarbonilo (Fmoc), metilsulfoniletoxicarbonilo (Msc), trifluoroacetilo, ftalilo, formilo, 2-nitrofenilsulfonilo (Nps), difenilfosfinotiol (Ppt) e dimetilfosfinotiolilo (Mpt).

Os exemplos de grupos protectores para grupos carbonilo envolvem, por exemplo, éster benzílico (OBzl), éster ciclo-hexílico, éster 4-nitrobenzílico (OBzlNO₂), éster t-butílico (OtBu), éster 4-pridilmetílico (OPic) e semelhantes.

No decurso da síntese de certos compostos do presente invento, podem ser protegidos, se necessário, com grupos protectores adequados, aminoácidos específicos tendo grupos funcionais diferentes dos grupos amino e carboxilo na cadeia

73051

4832.PG.01

lateral, como argínina, cisteína, serina e semelhantes . Preferese, por exemplo, que o grupo guanidino (NG) na arginina seja protegido com nitro, p-toluenossulfonilo (Tos), benziloxicarbonilo (Z), adamantiloxicarbonilo (Adoc), p-metoxibenzenossulfonilo, 4-metoxi-2,6-dimetil-benzenossulfonilo (Mts) e semelhantes, e o grupo tiol na cisteína pode ser protegido com benzilo, p-metoxibenzilo, trifenilbenzilo, acetamidometilo, etilcarbamilo, 4-metilbenzilo (4-MeBzl), 2,4,6-trimetilbenzilo (Tmb) e semelhantes, e o grupo hidroxilo na serina pode ser protegido com benzilo (Bzl), t-butilo, acetilo, tetrahidropiranilo (THP) e semelhantes.

Os compostos deste invento podem ser preparados pela reacção (descrita por Chu na Patente U.S. N® 4 607 032) começando com os compostos de Fórmula II, tal como se mostra abaixo, no qual X é halogéneo e R² e Z são definidos como anteriormente, ou pelas reacções mostradas nos esquemas IV ou V. A preparação dos compostos de Fórmula II é mostrada nos esquemas I, II e III, seguintes.

II

A reacção pode ser realizada por aquecimento de um composto de Fórmula II com uma amina de Fórmula III a uma temperatura de 20°C a 200 °C e, preferivelmente, de 70°C a 150“C, na presença de um solvente polar orgânico, adequado, como dimetilsulfóxido, sulfolano, dimetilformamida, dimetilacetamida, l-metil-2-pirrolidona ou água. É desejável realizar a reacção na presença de um aceitador de ácido como trietilamina, carbonato de potássio e semelhantes numa razão molar de 1,0 a 1,02 mole de receptor de ácido por mole de composto de Fórmula II. A amina III pode, também, ser usada como aceitador de ácido sendo, nesse caso, usado um excesso molar deste reagente de 2 ou mais .

73051

4832.PG.01

Esquema I

73051

4832.PG.01

Esquema II

73051

4832.PG.01

Esquema III

73051

4832.PG.01

Esquema IV

73051

4832.PG.01

Esquema V

73051

4832.PG.01

Esquema I

De acordo com o esquema reaccional anterior trata-se o ácido 2,3,4,5-tetrafluorobenzóico (1) com cloreto de tionilo para se produzir o cloreto de ácido correspondente que é deslocado com um malonato de dialquilo, preferivelmente malonato de dietilo (2) para originar o diéster (3). O diéster (3) é, a seguir, tratado com ácido p-toluenossulfónico para originar o acetato de 2,3,4,5-tetrafluorobenzoílo (4). 0 éster é, a seguir, tratado com um ortoformato de trialquilo, preferivelmente ortoformato de trietilo, (5) em anidrido acético, seguindo-se a reacção com uma O-hidroxianilina , substituída ou não substituída, (6) em cloreto de metileno para originar 3-(2-hidroxianilino)-2-(2,3,4,5-tetrafluorobenzoil)acrilato de etilo (7). Este enamino-cetoéster (7) é ciclizado na presença de uma base adequada, como bicarbonato de sódio, e um solvente aprótico como dimetilformamida (DMF) a 100°C para originar l,2-difluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][l,4]benzoxazina-5-carboxilato de etilo (8).

Esquema II

De acordo com o anterior esquema reaccional II, trata-se o b-cetoéster (4) com um ortoformato de trialquilo (5) em anidrido acético, seguindo-se a reacção com uma 2-metoximetiltioanilina, substituída ou não substituída, (10) num solvente adequado, preferivelmente cloreto de metileno ou tetra-hidrofurano, e pode ser conduzido à temperatura ambiente ou a temperatura elevada adequada, para se obter o enamino-cetoéster (11). O enaminocetoéster (11) é, a seguir, ciclizado, como por tratamento com uma base forte, preferivelmente hidreto de sódio, para se obter o éster do ácido 1,4-di-hidro-4-oxo-quinolina-3-carboxílico (12). A ciclização é conduzida na presença de um solvente aprótico, como dimetoxietano, dimetilformamida, tetra-hidrofurano ou clorobenzeno, e é, preferivelmente, conduzida a temperaturas de cerca de 20°C a cerca de 145°c e, mais preferivelmente, à temperatura de refluxo do solvente empregue.. A porção metoximetiltioéter de (11) é, seguidamente, removida por ácido inorgânico forte ou por tricloreto de boro e segue-se ciclização

73051

4832.PG.01 com uma base forte, preferivelmente, hidreto de sódio, para originar o éster (R^-=alquilo inferior, 13) o qual por hidrólise ácida ou básica origina o ácido livre (R¹⁼H).

Esquema III

De acordo com o anterior esquema reaccional III, trata-se o b-cetoéster (4) com um ortoformato de trialquilo (5) em anidrido acético, seguindo-se reacção com uma 2-metilanilina, substituída ou não substituída (14), como se descreve no esquema II, para se obter o enamino-cetoéster (15), O enamino-cetoéster (15) é, a seguir, ciclizado, como por tratamento com uma base forte, preferivelmente hidreto de sódio, para se obter o éster do ácido l,4-di-hidro-4-oxo-quinolina-3-carboxílico (16), como descrito anteriormente. A ciclização adicional do éster do ácido 1,4-dihidro-4-oxo-qinolina-3-carboxilico (16) na pirido-acridina-l-ona protegida por TMS (17) é conseguida por tratamento, primeiro, com n-butil-lítio, seguindo-se o tratamento com cloreto de trimetilsilio (TMS-C1) e sec-butil-lítio em tetra-hidrofurano ou tetra-hidrofurano na presença de tetra-metiletildiamina (TMEDA). A porção trimetilsililo é removida de (16) por tratamento com fluoreto de tetrabutilamónio ou com fluoreto de césio na presença de dimetilformamida e água para se obter a pirido-acridina-3-ona (18). A aminação de (18) pode ser realizada por reacção com uma amina de fórmula (19), na qual R¹² e R¹³ são descritos como anteriormente, com quaisquer grupos amino ou hidroxilo protegidos por um grupo protector adequado, a uma temperatura de 20°c a 200°C, na presença de um solvente orgânico polar, adequado, como dimetilsulfóxido ou sulfolano, para se obter o éster (R=alquilo inferior, 20) o qual, por hidrólise ácida ou básica de quaisquer grupos protectores e do grupo éster origina o ácido livre (21).

Esquema IV

De acordo com o anterior esquema reaccional IV, faz-se reagir cloreto de 2,3,4,5,6-pentafluorobenzoílo com um malonato de dialquilo, preferivelmente, malonato de dietilo para originar o diéster (22). O diéster (22) é, a seguir, tratado com ácido p-

73051

4832.PG.01

-toluenossulfónico para originar o acetato de 2,3,4,5,6-pentafluorobenzoilo (23). A aminação de (23) pode ser realizada por reacção com uma amina de fórmula (19), na qual R¹² e R¹³ são descritos como anteriormente, com quaisquer grupos amino ou hidroxilo protegidos por um grupo protector adequado, a uma temperatura de 20°C a 200°C na presença de um solvemte orgânico polar, como dimetilsulfóxido ou sulfolano para se obter o beta-cetoéster (R³-=alquilo inferior), (24). 0 beta-cetoéster (24) é, a seguir, tratado com um ortoformato de trialquilo, preferivelmente ortoformato de trietilo, em anidrido acético, seguindo-se a reacção com uma 0-hidroxianilina, substituída ou não substituída, ou O-hidroxianilina com o hidroxilo protegido em cloreto de metileno, para originar o 3-(2-hidroxianilino)-2-(4-amino-2,3,5,6-pentafluorobenzoilJacrilato de etilo (25). Este enamino-cetoéster (25) é ciclizado na presença de uma base adequada, como bicarbonato de sódio, e um solvente aprótico como dimetilformamida (DMF) a 100°C para originar o 2,3-difluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][l,4]benzoxazina-5-carboxilato de etilo (26), o qual por hidrólise de quaisquer grupos protectores e do grupo éster origina o ácido livre (26).

Esquema V

De acordo com o anterior esquema reaccional V, trata-se o beta-cetoéster (24) com ortoformato de trialquilo, preferivelmente ortoformato de trietilo, em anidrido acético, seguindo-se a reacção com uma 0-hidroxianilina, substituída ou não substituída,com o hidroxilo protegido (6) em cloreto de metileno para se obter um enaminocetoéster (27). 0 primeiro anel é, a seguir, ciclizado na presença de uma base adequada, como bicarbonato de sódio, e um solvente aprótico como dimetilformamida (DMF) a 100°C para se obter o composto (28). Este composto é , a seguir, feito reagir com R¹⁵H onde R¹⁵ é WH, onde W é descrito como anteriormente, ou R¹⁶-N-H onde R¹⁶ é um grupo protector de azoto, como, por exemplo, benzilo, para originar o composto (29). O grupo protector é removido, por exemplo, por hidrogenólise do grupo benzilo para se obter a amina livre. A amina livre é, seguidamente, reprotegida com um grupo protector

gue não necessite de hidrogenólise para remoção, por exemplo, acetilo ou t-butiloxicarbonilo (boc), o grupo protector é removido do grupo hidroxilo fenólico por hidrólise selectiva, por exemplo, com hidrocloreto de piridina, TFA ou tribrometo de boro e éter e o segundo anel é fechado por reacção na presença de uma base adequada, como bicarbonato de sódio e um solvente aprótico como dimetilformamida (DMF) a 100°C para originar o composto (30). Os grupos protectores são, seguidamente, removidos por hidrólise ácida ou básica para originar o composto adequadamente substituído de Fórmula I.

anterior pode ser melhor entendido a partir dos exemplos seguintes, os quais são apresentados com o propósito de ilustração e não se pretende que limitem o âmbito do conceito do invento.

Exemplo 1

2,3,4,5-tetrafluorobenzoilacetato de etilo

Passo 1: 2,3,4,5-tetrafluorobenzoildiacetato de etilo

Adicionaram-se 50 ml de etanol e 1 ml de CC1₄ a 12,16 g (0,50 mol) de pó de magnésio, seguindo-se, gota a gota, em condições anidras, uma solução de 80,09 g (0,50 mol) de éster dietílico do ácido malónico em 300 ml de etanol. Depois do fim da adição aqueceu-se a mistura em refluxo durante 4 horas, a seguir, agitou-se à temperatura ambiente durante a noite. Removeu-se, a seguir, o solvente, removeu-se o etanol residual por destilação azeotrópica com tolueno (3x), e depois o resíduo foi redissolvido em tolueno seco.

Adicionou-se ácido 2,3,4,5-tetrafluorobenzóico (100 g, 0,515 mol) a 300 ml de cloreto de tionilo. Depois de refluxo durante 3 horas, evaporou-se a mistura reaccional até à secura e dissolveu-se o cloreto de ácido resultante em tolueno.

Adicionou-se, a seguir, a solução do cloreto de ácido, gota

a gota, à solução do sal de magnésio. Adicionou-se solvente adicional e agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante a noite. Verteu-se, seguidamente, a mistura em 600 ml de solução de ácido sulfúrico a 10% e diluiu-se com 600 ml de clorofórmio. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de magnésio anidro e evaporou-se para se obterem 169,8 g do diéster.

Passo 2: 2,3,4,5-tetrafluorobenzoilacetato de etilo

Suspendeu-se em água o diéster do passo l (169,8 g, 0,505 mol) e adicionou-se ácido p-toluenossulfónico (730 mg). Agitou-se rapidamente a suspensão, manteve-se em refluxo durante 3 horas e permitiu-se que arrefecesse até à temperatura ambiente. Depois de arrefecer, extractou-se a solução com clorofórmio e lavou-se com solução de bicarbonato de sódio a 5%. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de magnésio anidro, filtrou-se e evaporou-se até à secura obtendo-se um xarope dourado, submeteuse o produto a destilação azeotrópica, várias vezes, com cloreto de metileno originando-se 132,7 g de 2,3,4,5-tetrafluorobenzoilacetato de etilo. Cristalizou-se este em pentano, originando-se 119,43 g.

Exemplo 2

3-(2-hidroxi-5-nitroanilino)-2-(2,3,4,5-tetrafluorobenzoil)acrilato de etilo

Fez-se reagir 2,3,4,5-tetrafluorobenzoilacetato de etilo, do Exemplo 1, passo 2, anterior, com 2-hidroxi-5-nitroanilina por um processo semelhante ao descrito em J. Hetercycl. Chem.. 24:453 (1987) para se obter o composto do título, p.f. 222°C; EM M/Z: 429 (M+H); IV (KBr) 1630, 1657 cm^-1; RMN (DMSO) d: 1,02 (m,3H), 4,05 (m, 2H), 7,13 (m,lH), 7,55 (m,lH), 8,02 (m, 1H), 8,50 (m,lH), 8,77 (m,lH), 11,25 (m, 1H), 12,11 (m, 1H) . Análise calculada para C, 50,47; H, 2,83; N, 6,54. Determinado C, 50, 12; H, 2,80; N, 6,47.

73051

4832.PG.01

Exemplo 3

1,2-difluoro-4-oxo-4H-quinor2,3,4-i,j 1Γ1,41benzoxazina-5-carboxilato de etilo

Dissolveu-se 3- (2-hidroxianilino)-2-(2,3,4,5-tetrafluorobenzoil ) acrilato de etilo (19,92 g, 0,052 mol) em 200 ml de dimetilformamida (DMF)) e adicionou-se pó de bicarbonato de sódio (13,1 g, 0,156 mol). Imergiu-se a suspensão num banho de óleo pré-aquecido a 100°C e aqueceu-se durante 2 horas. Permitiu-se à mistura que arrefecesse ligeiramente, diluiu-se com clorofórmio e filtrou-se. Evaporou-se o filtrado até uma solução de DMF e deixou-se repousar à temperatura ambiente durante a noite. Depois do repouso, co-destilou-se a solução com tolueno para se originar um sólido de cor amarela clara. Secou-se o sólido, dissolveu-se em clorofórmio e lavou-se com ácido clorídrico IN e solução de carbonato de potássio a 5%. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de magnésio anidro, filtrou-se e evaporou-se até um sólido de cor amarela clara. Adicionou-se éter dietílico ao sólido e deixou-se a mistura repousar durante várias horas. A seguir, removeu-se o sólido por filtração, lavou-se com éter dietílico fresco e secou-se a 70°C durante a noite para se originarem 16,00 g de 1,2-difluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]benzoxazina-5-carboxilato de etilo.

Exemplo 4

Hidrocloreto do ácido l-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-8-metil-4-oxo-4H-quino Γ 2,3,4-i,i1Γ1.41benzoxazina-5-carboxílico

Passo 1; 1,2-difluoro-8-metil-4-oxo-4H-quinoΓ2,3,4-i,j1Γ1.41 benzoxazina-5-carboxilato de etilo

Preparou-se 3-(2'-hidroxi,5'-metilanilino)-2-(2,3,4,5-tetrafluorobenzoil)acrilato de etilo por um processo semelhante ao descrito em J. Heterocvcl. Chem.. 24:453 (1987) a partir de

2,3,4,5-tetrafluorobenzoilacetato de etilo. P.f. 202-3°C; EM M/Z: 398 (M+H); IV (CDC1₃) 1630, 1670 cm^-1; RMN (CDCI3) d: 1,15 (m,

73051

4832.PG.01

3H), 2,35 (s, 3H), 4,15 (m, 2H), 5,42 (s, IH), 6,77 (m, IH), 6,90 (m, IH), 7,10 (m, IH), 7,18 (s, IH), 8,65 (d, IH), 12,7 (m, IH). Análise calculada para C, 57,43; H, 3,80; N, 3,53. Determinado: C, 57,19; H, 3,86; N, 3,53.

Ciclizou-se, a seguir, o produto da reacção anterior na presença de bicarbonato de sódio e dimetilformamida (DMF) como foi descrito no Esquema 1 originando-se l,2-difluoro-8-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][l,4]-benzoxazina-5-carboxilato de etilo. p.f. 200-l°C; EM M/Z: 358 (M+H); IV (KBr) 1690, 1730 cm^_1;RMN (DMSO) d: 1,32 (m, 3H), 2,35 (s, 3H), 4,29 (m, 2H), 7,11 (m, IH), 7,18 (m, IH), 7,56 (m, IH), 7,80 (s, IH), 9,02 (s, IH). Análise calculada para C, 63,86; H, 3,67; N, 3,92. Determinado: C,63,38; H, 3,69; N, 3,87.

Passo 2: l-(3-acetamidopirrolidin-l-il\-2-fluoro-8-metil-4-oxo-4H-quinoΓ2,3,4-i,τ1Γ1.41benzoxazina-5-carboxilato de etilo

Fez-se reagir, a seguir, l,2-difluoro-8-metil-4-oxo-4Hquino[2,3,4-i,j][l,4]-benzoxazina-5-carboxilato de etilo como foi descrito na Patente U.S. N^a 4 607 032 originando-se l-(3-acetamidopirrolidin-l-il)-2-fluoro-8-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4—i,j]benzoxazina-5-carboxilato de etilo. p.f. 207-10°c; EM (M+H) 466; IV (KBr) 1660, 1685, 1725 cm^-1; RMN (CDC1₃) d: 1,43 (m, 3H), 2,05 (m, 2H), 2,15 (s, 3H), 2,48 (s, 2H), 3,96 (m, 2H), 4,42 (m, 2H), 4,62 (m, IH), 6,83 (m, IH), 6,92 (m, IH), 7,03 (m, IH), 7,10 (m, IH), 7,42 (m, IH), 8,47 (s, IH). Análise calculada com 1/2 mol de H₂O para C, 63,28; H, 5,31;N, 8,66. Determinado: C, 63,70; H, 5,26; N, 8,84.

Passo 3: Hidrocloreto do ácido l-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-8-metil-4-oxo-4H-quinor2,3,4-i,ί1Γ1,41benzoxazina-5-carboxílico

Desprotegeu-se, a seguir, o l-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-8-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j)[1,4]benzoxazina-5-carboxilato de etilo por um processo semelhante ao descrito em J. Heterocvcl. Chem., 24:453 (1987) para se originar o composto do

73051

4832.PG.01

título.

Exemplo 5 l-(3-acetamidopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-nitro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j1Γ1.41-benzoxazina-5-carboxilato de etilo

Passo 1: 1,2-difluoro-9-nitro-4-oxo-4H-quinoΓ2,3,4-i,j][1,41benzoxazina-5-carboxilato de etilo

Preparou-se 3-(2-hidroxi-4-nitroanilino)-2-(2,3,4,5-tetrafluorobenzoil)acrilato de etilo por um processo semelhante ao descrito em J. Heterocvcl. Chem., 24:453 (1987) a partir de

2,3,4,5-tetrafluorobenzoilacetato de etilo. p.f. 225°C; EM M/Z: 429 (M+H); IV (KBr) 1640, 1660 cm¹? RMN (DMSO) d: 1,05 (m, 3H) , 4,07 (m, 2H), 7,57 (m, 1H), 7,80 (m, 2H), 7,93 (m, 1H), 8,70 (m, 1H), 11,70 (m, 1H). Análise calculada para C, 50,47? H, 2,83; N, 6,54. Determinado C, 50,46; H, 2,87; N, 6,53.

Ciclizou-se, seguidamente, o produto da reacção anterior na presença de bicarbonato de sódio e dimetilformamida (DMF) como foi descrito no Esquema 1 para se obter l,2-difluoro-9-nitro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]-benzoxazina-5-carboxilato de etilo, p.f. 255-8°C; EM M/Z: 389 (M+H); IV (KBr) 1700, 1730 cm¹; RMN (DMSO) d: 1,32 (m, 3H),4,30 (m, 2H), 7,65 (m, 1H), 8,08 (m, 1H) , 9,11 (s, 1H). Análise calculada para C, 55,68; H, 2,60; N, 7,22. Determinado: C, 55,48; H, 2,50; N, 7,32.

Passo 2: l-(3-acetamidopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-nitro-4-oxo-4H-quino-[2,3,4-i, i 1 [ 1,41-benzoxazina-5-carboxilato de etilo

A seguir fez-se reagir o l,2-difluoro-9-nitro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]benzoxazina-5-carboxilato de etilo como foi descrito na Patente U.S. 4 607 032 originando-se 1—(3— -acetamidopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-nitro-4-oxo-4H-quino[2,3,4—i,j][l,4]-benzoxazina-5-carboxilato de etilo. p.f. 256-9°C;EM M/Z: 497 (M+H); IV (KBr) 1660, 1695, 1720 cm¹; RMN (DMSO-d6) d: 1,31 (m, 3H), 1,80 (m, 1H), 1,85 (s, 3H) , 2,10 (m, 1H), 3,48 (m,

73051

4832.PG.01 ’

1H), 3,72 (Dl, 1H), 3,84 (Dl, 1H) , 3,89 (m, 1H) , 4,26 (m, 3H) , 7,35 (m, 1H), 8,00 (m, 3H) , 8,15 (di, 1H) , 8,88 (di, 1H). Análise calculada para C, 58,06; H, 4,26; N, 11,29. DeterDiinado: C, 57,81; H, 4,32? N, 11,28.

Exemplo 6

Hidrocloreto do ácido l-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-Dietil-4-oxo-4H-quino-r2,3,4-i ,ή 1 Γ1,41-benzoxazina-5-carboxílico

Passo 1; 1,2-difluoro-9-metil-4-oxo-4H-quino[2.3,4-i,ή 1Γ1,41 -benzoxazina-5-carboxilato de etilo

Preparou-se 3- (2 · -hidroxi, 4 'metilanilino )-2-(2,3,4,5-tetrafluorobenzoil) acrilato de etilo de acordo codi udi processo seDielhante ao descrito eDi J. Heterocycl. Chem. , 24:453 (1987) a partir de 2,3,4,5-tetrafluorobenzoilacetato de etilo. p.f. 182-3°C; EM M/Z: 398 (M+H); IV (KBr) 1630, 1670 cm^-1; RMN (DMSO) d:l,05 (m, 3H), 2,25 (s, 3H), 4,03 (m, 2H), 6,73 (Dl, 1H),6,8O (s, 1H), 7,50 (m, 2H), 8,67 (m, 1H), 10,53 (m, 1H), 12,7 (m, 1H). Análise calculada para C, 57,43; H, 3,80; N, 3,53. Determinado C, 57,45; H, 3,83; N 3,52.

Ciclizou-se, a seguir, o produto da reacção anterior na presença de bicarbonato de sódio e dimetilformamida (DMF) como descrito no Esquema 1 originando-se 1,2-difluoro-9-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][l,4]-benzoxazina-5-carboxilato de etilo. p.f. 183-4°C; EM M/Z: 358 (M+H); IV (KBr) 1700, 1735 cm¹; RMN (DMSO) d: 1,32 (m, 3H), 2,31 (S, 3H), 4,28 (m, 2H), 7,08 (m, 1H), 7,60 (m, 1H), 7,83 (m, 1H), 9,00 (s, 1H). Análise calculada para C, 63,66; H, 3,67; N,3,92. Determinado C, 63,39; H, 3,69; N 3,87.

Passo 2: l-f3-acetamidopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-metil-4-oxo-4H-guinor2.3,4-i~i 1Γ1.41benzoxazina-5-carboxilato de etilo

Fez-se, a seguir , reagir o l,2-difluoro-9-metil-4-oxo-4Hquino[2,3,4-i,j][l,4]-benzoxazina-5-carboxilato de etilo como descrito na Patente U.S. 4 607 032 originando-se l-(3-

73051

4832.PG.01

-acetamidopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-metil-4-oxo-4H-quino-[2,3,4-ij][1,4]benzoxazina-5-carboxilato de etilo. p.f. 230-2°C; EM

M/Z:	466 (M+H); IV (KBr) 1670, 1720 cm”1; RMN	(DMSO) d: 1,31	(m,
3H),	1,80 (m, 1H), 1,83 (s, 3H), 2,10 (m, 1H),	2,30 (s, 3H),	3,42
(m,	1H), 3,68 (m, 1H), 3,78 (m, 1H), 3,86 (m,	1H), 4,25 (m,	3H),
7,02	(m, 2H), 7,30 (m, 1H) , 7,65 (m, 1H) , 8,15 (m, 1H) , 8,80	(s,
1H) .	Análise calculada com 1/2 mol de H2O	para C, 63,28	; H,
5,31	; N, 8,86. Determinado C, 63,19; H, 5,26;	N, 8,81.

Passo 3: Hidrocloreto do ácido 1-f3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-metil-4-oxo-4H-quino-Γ 2,3,4-i.ή 1 Γ1.41-benzoxazina-5-carboxílico

Desprotegeu-se, a seguir, o l-(3-acetamidopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][1,4]benzoxazina-5-carboxilato de etilo por um processo semelhante ao descrito em

J. Heterocvcl. Chem.. 24:453 (1987) para originar o hidrocloreto do ácido l-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-metil-4-oxo-4Hquino-[2,3,4-i,j][l,4]-benzoxazina-5-carboxílico. p.f. >290°C; EM M/Z: 396 (M+H); IV (KBr) 1630, 1720 cm”¹; RMN (DMSO) d: 2,03 (m, 1H), 2,27 (m, 1H), 2,32 (s, 3H), 3,50 (m, 1H), 3,59 (m, 1H), 3,75 (m, 2H), 3,88 (m, 2H), 3,95 (m, 1H), 7,08 (m, 2H), 7,52 (m, 1H), 7,92 (m, 1H), 8,24 (m, 1H), 9,10 (m, 1H).Análise calculada com 1/3 mol de H₂O para C, 57,60; H, 4,49; N, 9,60. Determinado C, 57,82; H, 4,45; N, 9,44.

Exemplo 7

Hidrocloreto do ácido 1-(3-aminopirrolidin-l-il)-2,9-difluoro-4-oxo-4H-quino-Γ 2,3,4-i,ή 1Γ1.41-benzoxazina-5-carboxílico

Passo 1: 1,2,9-trifluoro-4-oxo-4H-quinor2,3,4-i.ή 1Γ1.4]-benzoxazina-5-carboxilato de etilo

Preparou-se 3-(2'-hidroxi,4'-fluoroanilino)-2-(2,3,4,5tetrafluorobenzoil)acrilato de etilo por um processo semelhante ao descrito em J. Heterocvcl. Chem., 24:453 (1987) a partir de θ 73051

4832.PG.01

2,3,4,5-tetrafluorobenzoilacetato de etilo. p.f. 205°C; EM M/Z: 402 (M+H); XV (KBr) 1630, 1670 cn¹; RMN (DMSO-d6) d: 1,05 (m, 3H), 4,03 (m, 2H), 6,75 (m, 2H), 7,50 (m, 1H), 7,65 (m, 1H), 8,54 (m, 1/2H), 8,68 (m, 1H), 11,25 (m, 1/2H), 12,64 (m, 1H) . Análise calculada para C, 53,87; H, 3,01; N, 3,49. Determinado C, 53,65; H, 3,08; N 3,43.

Ciclizou-se, depois, o produto da reacção anterior na presença de bicarbonato de sódio e dimetilformamida (DMF) como descrito no Esquema 1 originando-se l,2,9-trifluoro-4-oxo-4Hquino[2,3,4-i,j][1,4]-benzoxazina-5-carboxilato de etilo . p.f. 237-8°C: EM M/Z; 362 (M+H); IV (KBr) 1690, 1730 cm¹; RMN (DMSO) d: 1,32 (m, 3H), 4,28 (m, 2H), 7,15 (m, 1H), 7,39 (m, 1H),7,63 (m, 1H), 8,05 (m, 1H), 9,03 (s, 1H). Análise calculada para C, 59,84; H, 2,79; N,3,88. Determinado C, 59,65; H, 2,86; N 3,89.

Passo 2: l-(3-acetamidopirrolidin-l-il)-2.9-difluoro-4-oxo-4Hquino-[2,3.4-i,j1Γ1.41-benzoxazina-5-carboxilato de etilo

Fez-se, a seguir, reagir o l,2,9-trifluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]-benzoxazina-5-carboxilato de etilo como descrito na Patente U.S. 4 607 032 originando-se 1-(3-acetamido-pirrolidin-l-il)-2,9-difluoro-4-oxo-4H-quino-[2,3,4-ij]-[1,4]benzoxazina-5-carboxilato de etilo. p.f.248-51°C; EM M/Z; 470 (M+H); IV (KBr) 1660, 1695, 1720 cm¹; RMN (DMSO) d; 1,30 (m, 3H), 1,85 (m, 4H), 2,10 (m, 1H), 3,42 (m, 2H), 3,72 (m, 2H), 3,86 (m, 1H), 4,25 (m, 2H), 7,06 (m, 1H), 7,25 (m, 1H), 7,35 (m, 1H),

7,86 (m, 1H), 8,15 (m, 1H), 8,83 (s, 1H).Análise calculada com

1/2 mol de H₂0 para C, 60,24; H, 4,63; N, 8,78. Determinado C,

60,40; H, 4,53; N, 8,79.

Passo 3: Hidrocloreto do ácido l-f3-aminopirrolidin-i-il)-2,9-difluoro-4-oxo-4H-quino Γ 2,3,4-i,j1Γ1,41-benzoxazina-5-carboxílico

Desprotegeu-se, a seguir, o l-(3-acetamidopirrolidin-l-il) —2,9-difluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][1,4]benzoxazina-5-carboxilato de etilo por um processo semelhante ao descrito em J. Heterocvcl, Chem.. 24:453 (1987) originando-se o hidrocloreto do

73051

4832.PG.01 ácido 1-(3-aminopirrolidin-l-il)-2,9-difluoro-4-oxo-4H-quino-[2,3,4-i,j][1,4]-benzoxazina-5-carboxílico. p.f. 285°C (dec); EM M/Z: 400 (M+H); IV (KBr) 1625, 1720 cm”¹; RMN (DMSO) d; 1,85 (m,lH), 2,03 (m, 1H), 2,27 (m, 1H), 3,50 (m, 1H), 3,61 (m, 1H), 3,85 (m, 3H), 7,10 (m, 2H), 7,25 (m, 1H), 7,39 (m,lH), 7,50 (m, 1H), 8,10 (m, 2H), 8,37 (m, 2H), 9,08 (m, 1H).Análise calculada para C₂₀H₁₆ClFN₃O₄.1/2 H₂O: C, 54,00; H, 3,85; N, 9,45. Determinado C, 54,02; H, 3,63; N, 9,23.

Exemplo 8

Hidrocloreto do ácido l-(3-norvalilaminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-quinor2.3, 4-ii1Γ1.41benzoxazina-5-carboxílico

Passo 1: ácido l-(t-N-butiloxicarbonil-norvalilaminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-guinoΓ 2,3,4-ijHl,4]benzoxazina-5-carboxílico

Suspendeu-se em Ν,Ν-dimetilformamida seca (DMF) (lOOml) hidrocloreto do ácido l-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][1,4]benzoxazina-5-carboxílico (4,27 g, 0,102 mmol), preparado como descrito em J. Heterocvcl. Chem.. 24:453-456 (1987) e adicionou-se N-metilmorfolina (2,17 g, 0,0215 M) e a suspensão foi agitada durante a noite.

Depois de se agitar durante da noite, arefeceu-se a solução num banho de gelo durante 15 minutos, a seguir, adicionou-se numa porção t-butiloxicarbonil-L-norvalino-N-hidroxiftalimida (3,36 g, 0,0107 M). Arefeceu-se a solução resultante num banho de gelo durante mais uma hora, seguindo-se agitação à temperatura ambiente durante vários dias. Após o terceiro dia, adicionaram-se, com agitação, 730 mg adicionais de N-carbobenziloxi-L-norvalino-N-hidroxi-ftalimida e deixou-se a reacção prosseguir durante a noite . Adicionou-se um adicional de 1,29 g de éster de hidroxiftalimida e agitou-se a mistura reaccional à temperatura ambiente, durante mais um dia.

Verteu-se a solução resultante em 500 ml de solução aquosa

73051

4832.PG.01

de ácido clorídrico 0,5 N e extractou-se a mistura com 2 porções de 250 ml de clorofórmio. Lavaram-se os extractos combinados com solução aquosa de bicarbonato de cálcio a 5% e secou-se a fase orgânica sobre sulfato de magnésio anidro e evaporou-se obtendo-se uma solução de DMF e produto. Removeu-se a DMF residual por co-destilação com tolueno e dicloreto de etileno obtendo-se um líquido de cor amarela. Adicionou-se éter dietílico ao sólido e agitou-se a suspensão, durante a noite, à temperatura ambiente. Separou-se suspensão por filtração, lavou-se o sólido com éter fresco e secou-se durante a noite sob vácuo a 55°C originando-se 3,332 g (0.0057 M, 56% de rendimento) de ácido l-(t-N-butiloxicarbonil-norvalilaminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][l,4]benzoxazina-5-carboxílico; p.f. 209°C; EM M/Z: 581 (M+H); RMN (DMS0-d6) d: 0,84 (m, 3H), 1,45 (m, 13H), 1,88 (m, ÍH), 2,10 (m, ÍH) , 3,21 (m, 2H) , 3,74 (m, ÍH) , 3,89 (m, 2H), 4,31 (rn, ÍH), 6,78 (m, ÍH), 7,23 (m, 2H), 7,36 (m, ÍH), 7,48 (d, ÍH), 8,01 (m, ÍH), 8,12 (m, ÍH), 9,08 (s, ÍH).

Passo 2: hidrocloreto do ácido l-(3-norvalilaminopirrolidin-l-il)-2-f luoro-4-oxo-4H-cfUÍno Γ2,3, 4-ij1Γ1.4lbenzoxazina-5-carboxílico

Adicionou-se ácido l-(t-N-butiloxicarbonil-norvalilaminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i j] [ 1,4 ]benzoxazina-5-carboxílico (3,26 g, 0,00561 mM) a 100 ml de ácido clorídrico 1 M em ácido acético e agitou-se a suspensão à temperatura ambiente durante 1,5 horas. Diluiu-se, seguidamente, a suspensão com ácido acético e evaporou-se a solução sob pressão reduzida. Co-destilou-se o resíduo resultante com etanol e metanol e secou-se sob vácuo durante a noite. Adicionou-se éter ao resíduo e deixou-se a mistura repousar durante várias horas. Recolheu-se o sólido por filtração e lavou-se com éter fresco e secou-se obtendo-se 2,59 g (0,0054 mM, rendimento de 96%) do produto desejado;p.f.=178-180°C, EM M/Z: 481(M+H). RMN (CD3OD) d: 0,99 (m, 3H), 1,46 (m, 2H), 1,85 (m, 2H), 2,06 (m, ÍH), 2,25 (m, ÍH), 3,66 (m, ÍH), 3,77 (m, ÍH), 3,80 (m, ÍH), 4,07 (m, 2H), 4,48 (m, ÍH), 7,26 (m, 4H), 7,63 (m, ÍH), 9,82 (m, ÍH).

73051

4832.PG.01

Exemplo 9

Hidrocloreto do ácido 1-f3-alanilaminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-metil-4-oxo-4H-guinor2 ,3 ,4-ij 1Γ1,41benzoxazina-5-carboxílico

Passo 1: ácido l-(t-N-butiloxicarbonil-alanilaminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-metil-4-oxo-4H-quinor2,3, 4-íj 1Γ1,41benzoxazina-5-carboxílico

Preparou-se o ácido 1-(t-N-butiloxicarbonil-alanil-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij] -[l,4]benzoxazina-5-carboxílico a partir do hidrocloreto do ácido 1-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][l,4]benzoxazina-5-carboxílico como descrito no Exemplo 8. p.f. 213°C(dec); EM M/Z: 567 (M+H); IV (KBr) 1633, 1675, 1710 cm¹; RMN (DMS0-d6) d; 1,17 (m, 3H), 1,35 (m, 9H), 1,98 (m, 1H), 2,10 (m, 1H), 2,31 (s, 3H), 3,48 (m, 1H), 3,75 (m, 1H), 3,85 (m,lH), 3,95 (m, 2H), 4,30 (m, 1H), 6,82 (m, 1H), 7,05 (m, 2H), 7,45 (d, 1H), 7,85 (d, 1H), 8,06 (m, 1H), 9,03 (s,lH), 14,96 (s, 1H). Análise calculada para C₂₉H₃₁FN₄O₇: C, 61,47; H,5,52; N, 9,89. Determinado C, 61,25; H, 5,54; N, 9,78.

Passo 2: Hidrocloreto do ácido l-(3-alanilaminopirrolidin-l-il)-2-f luoro-9-metil-4-oxo-4H-quinor2,3,4-ij 1Γ1.41benzoxazina-5-carboxílico >

Desprotegeu-se o ácido l-(t-N-butiloxicarbonil-alanilaminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][1,4]benzoxazina-5-carboxílico como descrito no Exemplo 8 originandose o composto do título. RMN (DMSO) d: 1,35 (m, 3H), 1,90 (m, 1H), 2,16 (m, 1H), 2,31 (s, 3H), 3,51 (m, 1H), 3,82 (m, 3H), 4,11 (m, 1H), 4,46 (m, 1H), 7,03 (m, 1H), 7,12 (m, 1H), 7,48 (m, 1H) , 7, 85 (m, 1H), 8,82 (m, 1H), 9,02 (m, 1H).

73051

4832.PG.01

Exemplo 10

Hidrocloreto do ácido 1-f3-norvalilaminopirrolidin-l-il)-2-f luoro-9-xnetil-4-oxo-4H-quinoΓ2,3,4-i~i 1 Γ1,4lbenzoxazina-5-carboxílico

Passo 1: ácido 1-ft-N-butiloxicarbonil-norvalilaminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-metil-4-oxo-4H-quinor2,3,4-ii1Γ1,41benzoxazina-5-carboxílico

Preparou-se o ácido l-(t-N-butiloxicarbonil-norvalilaminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][l,4]-benzoxazina-5-carboxílico a partir do hidrocloreto do ácido 1-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][1,4]benzoxazina-5-carboxílico como descrito no Exemplo 8. p.f. 182-5°C; EM M/Z: 595(M+H); IV (KBr) 1630, 1670, 1715 cm¹; RMN (CDC1₃) d; 0,95 (rn, 3H), 1,41 (m, 9H), 1,54 (m, 2H) , 1,83 (m, 2H), 2,12 (m, 2H), 2,46 (s, 3H), 3,66 (m, 2H), 4,03 (m, 2H), 4,13 (m, 1H), 4,60 (m, 1H), 5,10 (m, 1H), 6,94 (m, 3H), 7,41 (m, 2H), 8,80 (m, 1H), 14,91 (s, 1H). Análise calculada com 1/2 mole de H₂O para C, 61,68; H, 6,01; N, 9,28. Determinado C, 61,80; H, 5,96; N, 9,29.

Passo 2: Hidrocloreto do ácido l-(3-norvalilaminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-meti1-4-oxo-4H-quinoΓ2,3,4-ii1Γ1,41benzoxazina-5-carboxílico

Desprotegeu-se o ácido l-(t-N-butiloxicarbonil-norvalilaminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i j][1,4]benzoxazina-5-carboxílico (3,26 g, 0,00561 mM) como descrito no Exemplo 8, originando-se o composto do título; p.f.=190-2°C; EM M/Z: 495 (M+H); IV (KBr) 1630, 1680, 1720 cm¹; RMN (DMSO) d:

1,01 (m, 3H), 1,47 (m, 2H), 1,86 (m, 2H), 2,02 (m, 1H), 2,17 (m,

1H), 2,32 (s, 3H), 3,63 (m, 1H), 3,74 (m, 1H), 3,91 (m, 2H), 4,03 (m, 1H), 4,48 (m, 1H), 6,97 (m, 3H), 7,33 (m, 1H), 7,48 (m, 1H) ,

8,83 (m, 1H).

73051

4832.PG.01

Exemplo 11

Hidrocloreto do ácido l-(3-norvalilaminopirrolidin-l-il)-2-f luoro-8-metil-4-oxo-4H-guino Γ 2,3,4-ΐ~ϊ 1 Γ1.41 benzoxazina-5-carboxílico

Utilizando processos como os descritos no Exemplo 8, passo 1, converteu-se o ácido l-(3-N-t-butoxicarbonil-norvalilaminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-metil-4-oxo-4H-quino-[2,3,4-ij][1,4]benzoxazina-5-carboxílico em hidrocloreto do ácido l-(3-norvalilaminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-metil-4-oxo-4H-quino-[2,3,4 -ij][1,4]-benzoxazina-5-carboxílico, p.f. 225°C(dec); EM M/Z: 595(M+H); IV (KBr) 1630, 1720 cm^-1; RMN (DMSO) d: 0,83 (m, 3H), 1,25 (m, 2H), 1,36 (m, 9H), 1,50 (m, 2H), 1,85 (m, 2H), 2,11 (m, 2H), 2,36 (m, 3H), 3,50 (m, 2H), 3,75 (m, 1H), 3,90 (m, 2H),

4,30 (m, 1H), 6,75 (m, 1H), 7, 16 (m, 1H), 7,48 (m, 1H), 7,88 (m,

1H), 8,10 (m, 1H), 9,13 (m, 1H), 14,95 (m, 1H). Análise calculada para C₃₁H₃₅FN₄O₇: C, 62,61; H, 5,93; N, 9,42. Determinado C, 62,35; H, 5,67; N, 8,99.

Seguindo o procedimento do Exemplo 8, passo 2, removeu-se o grupo protector boc obtendo-se o hidrocloreto do ácido l-(3-norvalilaminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-8-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][l,4]benzoxazina-5-carboxílico, p.f. 246-9°C; EM M/Z: 495 (M+H); IV (KBr) 1640, 1680, 1720 cm^-1; RMN (DMSO) d: 0,85 (m, 3H), 1,30 (m, 2H), 1,68 (m, 2H), 1,91 (m, 2H), 2,16 (m, 2H), 2,34 (m, 3H), 3,53 (m, 1H), 3,73 (m, 2H), 3,92 (m, 2H), 7,15 (m, 2H), 7,45 (m, 1H), 7,86 (m, 1H), 8,92 (m, 2H), 9,08 (m, 1H).

Exemplo 12

Utilizando os processos descritos nos Exemplos 6, 8 e 9 e nas Patentes U.S. N^a 4 528 285 e 4 529 725, ou no Esquema II, podem ser preparados os compostos seguintes, por utilização de 2-tioanilinas, de 2-tioanilinas substituídas ou de 2-tioanilinas tio-protegidas em vez de 2-hidroxianilinas:

(a) ácido l-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-

73051

4832.PG.01

quino[2,3,4-ij] [ 1,4 ]benzotiazina-5-carboxilico;

(b) ácido l-(3-norvalilaminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][1,4]benzotiazina-5-carboxílico;

(c) ácido l-(3-alanilaminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3, 4-ij] [ 1,4]benzotiazina-5-carboxílico;

(d) ácido l-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][1,4]benzotiazina-5-carboxílico;

(e) ácido 1 —(3-norvalilaminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][1,4]benzotiazina-5-carboxílico;

(f) ácido l-(3-alanilaminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][1,4]benzotiazina-5-carboxílico;

(g) ácido 1-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-8-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][1,4]benzotiazina-5-carboxilico?

(h) ácido l-(3-norvalilaminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-8-metil-4-oxo-4H-guino[2,3,4-ij][1,4]benzotiazina-5-carboxílico;e (i) ácido l-(3-alanilaminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-8-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][1,4]benzotiazina-5-carboxílico;

Exemplo 13

Utilizando o processo descrito no Esquema III preparou-se o composto seguinte:

(a) ácido lH,7H-pirido[3,2,l-de]acridina-3-ona-5-fluoro-6-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-carboxílico.

Exemplo 14

Utilizando o processo descrito no Esquema I pode ser preparado o 4-oxo-l,2,8,9,10-pentafluoro-4H-quino[2,3,4-i,j][l,4]benzoxazina-5-carboxilato de etilo, a partir da 2-hidroxi-3,4,5-trifluoroanilina.

f

Exemplo 15

73051

4832.PG.01

Hidrocloreto do ácido l,(3-aminopirrolidin-l-il)-8,10-dimetil-2-fluoro-4-oxo-4H-quinor2,3,4-ij1Γ1,41benzoxazina-5-carboxílico

Passo 1: 3-f2-hidroxi-3,5-dimetilanilino)-2-(2,3,4,5-tetrafluorobenzoiDacrilato de etilo

Aqueceu-se a 130°C, durante 4 horas, uma solução de 15,52 g (0,058 mol) de 2,3,4,5-tetrafluorobenzoilacetato de etilo (do Exemplo 1, Passo 2) em 14,6 ml (0,088 mol) de ortoformato de trietilo e 25 ml de anidrido acético (0,263 mol). Diluiu-se a solução com tolueno e o solvente foi removido por evaporação para deixar um resíduo oleoso. Submeteu-se o óleo, várias vezes, a destilação azeotrópica com tolueno para se removerem quaisquer materiais voláteis de partida remanescentes. Dissolveu-se o resíduo em 200 ml de acetonitrilo e adicionaram-se, com agitação, 8,06 g (0,0588 mol) de 6-amino-2,4-dimetilfenol. Precipitou imediatamente um sólido e deixou-se a mistura em agitação à temperatura ambiente, durante 20 horas. Removeu-se o solvente por evaporação sob vácuo e triturou-se o sólido em tolueno, o qual foi filtrado e removido obtendo-se 18,24 g do composto do título, p.f.l99°C (dec.); EM M/Z:412 (M+H); IV (KBr): 1630, 1670 cm¹; RMN (CDC1₃) δ: 1,10 (m, 3H), 2,30 (m, 6H), 4,13 (m, 4H), 6,80 (m, 1H), 7,05 (m, 1H), 7,15 (m, 1H), 8,60 (m, 1H). Análise calculada para C20H17F4NO4: C, 58,39; H, 4,16; N, 3,40. Determinado C, 57,94; H, 4,01; N, 3,40.

Passo 2: 1,2-dif luoro-8,10-dimetil-4-oxo-4H-quino Γ 2,3,4-i , ~ΐ 1Γ1.41benzoxazina-5-carboxilato de etilo

Dissolveu-se o composto do Passo 1 (18,2 g, 0,044 mol) em 200 ml de DMF e adicionaram-se 11,2 g (0,133 mol) de bicarbonato de sódio. Agitou-se esta mistura, com aquecimento a 100°C, durante 2 horas. Após arrefecimento, removeu-se o solvente sob pressão reduzida. Lavou-se o sólido com água, recolheu-se por filtração e dissolveu-se em clorofórmio, e esta solução foi lavada com soluções de HC1 0,5 N e carbonato de potássio a 5%.

73051 4832.PG.01

Secou-se o solvente e removeu-se sob vácuo. Triturou-se o resíduo em éter, filtrou-se o sólido e secou-se para se obter 14,47 g do composto do título como um sólido cor de laranja, p.f.221-2°C. EM M/Z: 372(M+H). IV (CDC1₃): 1630, 1690 cm¹; RMN (CDC13) δ: 1,45 (m, 3H), 2,26 (m, 6H), 4,45 (m, 2H), 6,94 (m, 1H) , 7,13 (itl, 1H) , 7,78 (m, 1H), 8,96 (s, 1H). Análise calculada para ^C20^H15^F2^NO4*1/4H2O^: C, 63,91; H, 4,15; N, 3,73. Determinado C, 64,04; H, 3,84; N, 3,83.

Passo 3: ácido 1,2-dif luoro-8,10-dimetil-4-oxo-4H-cruino Γ 2,3,4i,j1Γ1,41benzoxazina-5-carboxílico

Aqueceu-se a 90°C, durante 72 horas, uma suspensão de 5,66 g (0,015 mmol) do composto de Passo 2 em 500 ml de HC1 1 N e 50 ml de etanol. Após arrefecimento até à temperatura ambiente, retirou-se o sólido por filtração e secou-se obtendo-se 5,06 g do composto do título, p.f.>270°C; IV (KBr) 1630, 1720 cm¹; RMN (TFA) í: 2,53 (m, 6H), 7,42 (m, 1H) , 7,70 (m, 1H) , 8,06 (m, 1H), 9,73 (m, 1H). Análise calculada para C₁₈H₁₁F₂NO₄: C, 62,97; H, 3,23; N, 4,08. Determinado C, 63,30; H, 3,43; N, 4,04.

Passo 4; ácido l-(3-(N-t-butoxicarbonilamino)pirrolidin-l-il)-8,10-dimetil-2-fluoro-4-oxo-4H-quinor2.3,4-ij1Γ1,41benzoxazina-5-carboxílico

Dissolveram-se 2,85 g (8,30 mmol) do composto de Passo 3 em 70 ml de piridina e 2,6 ml (0,018 mol) de trietilamina e adicionaram-se 3,40 g (0,018 mol) de 3-(t-butoxicarbonilamino)pirrolidina. Aqueceu-se a solução a 85°C durante 96 horas. Removeu-se o solvente sob vácuo, dissolveu-se o resíduo em clorofórmio e lavou-se o solvente com solução de ácido cítrico a 10%. Após secagem, removeu-se o solvente obtendo-se 3,59 g do composto do título como um sólido amarelo claro, p.f. 226 °C (dec); EM M/Z: 510 (M+H); IV (KBr) 1630, 1720 cm¹; RMN (DMSO) d: 1,40 (rn, 9H), 1,85 (m, 2H), 2,05 (m, 2H) , 2,25 (m, 6H), 3,50 (m, 1H), 3,75 (m, 1H), 3,88 (m, 1H), 4,05 (m, 2H), 7,00 (m, 1H), 7,40 (m, 1H), 7,58 (m, 1H), 8,95 (m, 1H), 14,90 (m, 1H) . Análise calculada para C₂₇H₂₈FN₃O₆: C,63,64; H, 5,54; N, 8,25.

73051

4832.PG.01

Determinado C, 63,31; H, 5,40; N, 7,72.

Passo 5: hidrocloreto do ácido l-(3-aminopirrolidin-l-il)-8,10-dimetil-2-fluoro-4-oxo-4H-quinor2,3,4-ij1Γ1,41benzoxazina-5-carboxílico

Agitou-se à temperatura ambiente, durante 1,5 horas, uma suspensão de 3,57 g (7,01 mmol) do composto do Passo 4 em 150 ml de HC1 1 M em ácido acético. Removeu-se o solvente sob vácuo e suspendeu-se o sólido em álcool. Removeram-se os solventes obtendo-se 2,47 g do composto do titulo como um sólido amarelo, p.f. 255-257°C; EM M/Z: 410 (M+H); IV (KBr) 1720, 1630 cm^-1; RMN(DMSO) d: 2,46 (m, 6H), 2,63 (m, 4H), 4,13 (m, 1H), 4,39 (m, 1H), 4,55 (m, 3H), 7,32 (m, 1H), 7,52 (m, 1H), 7,91 (m, 1H), 9,48 (m, 1H). Análise calculada para ^c22^H21^cFFN3°4^: C, 59,26; H,4,75; N, 9,43. Determinado C, 59,63; H, 4,70; N, 8,77.

Exemplo 16

Hidrocloreto do ácido l-((3S)-3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-quinoΓ2,3,4-ii1Γ1,41benzoxazina-5-carboxílico

Passo l: l-f(3S)-3-(N-t-butoxicarbonilamino)pirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-quinor2,3,4-iilΓ1.41benzoxazína-5-carboxilato de etilo

Seguiu-se o procedimento do Exemplo 15, passo, 4 e substituiu-se a 3-(N-t-butoxicarbonilamino)pirrolidina por (3S)-3-(N-t-butoxicarbonilamino)pirrolidina (obtida em American Tokyo Kasei, Div. of Tokyo Kasei Kogyo, K.K.) obtendo-se o composto do título, p.f. 153-7°C; EM M/Z: 510 (M+H). IV (CDC1₃): 1620, 1690, 1720 cml. RMN (CDClg) 6: 1,45 (m, 12H), 1,92 (m,2H), 2,22 (m, 2H), 3,50 (m, 1H), 3,65 (m, 1H), 3,82 (m, 1H), 3,92 (m, 1H), 4,42 (m,2H), 7,08 (m, 1H), 7,20 (m, 2H), 7,42 (m, 1H), 7,62 (m, 1H), 8,86 (s, 1H). Análise calculada para ^C27^H28^FN3°6 ·-¹·/^{3 h}2^{0: C}' 62,90; H, 5,60; N, 8,15. Determinado C, 62,99; H, 5,42; N, 8,32.

73051

4832.PG.01

Passo 2: hidrocloreto do ácido l-((3S)-3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-quinor2.3,4-ij1Γ1.4]benzoxazina-5-carboxílico

Desprotegeu-se uma suspensão do composto do Passo 1, como no Exemplo 18, Passo 2, para se obter o composto do título, p.f.>285°c; EM M/Z: 382 (M+H); IV (KBr) 1630, 1720 cm^-1; RMN (DMSO) Si 2.03 (m, 2H), 3,78 (m, 2H) 3,88 (m, 2H), 3,95 (m, 1H) , 7,35 (m, 3H), 7,52 (m, 1H), 8,04 (m, 1H), 9,13 (s, 1H). Análise calculada para C₂₀H₁₇ClF₃O₄: C, 57,49; H, 4,10; N, 10,06. Determinado C, 57,32; H, 4,11; N, 10,00.

Exemplo 17

Hidrocloreto do ácido l-((3R)-3-aminopirrolidin-l-il)-2-flUoro-4-oxo-4H-quino Γ 2.3,4-ij1Γ1,41benzoxazina-5-carboxílico

Passo 1; l-ff3R)-3-(N-t-butoxicarbonilamino)pirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-quinor2,3,4-ij1fl,41benzoxazina-5-carboxilato de etilo

Seguiu-se o procedimento do Exemplo 15 passo 4 e substituiu-se a 3-(N-t-butoxicarbonilamino)pirrolidina por (3R)-3-(N-t-butoxicarbonilamino)pirrolidina (obtida em American Tokyo Kasei, Div. of Tokyo Kasei Kogyo, K.K.) para se obter o composto do título, p.f.l35-7°C; EM M/Z; 510 (M+H). IV (CDC1₃): 1620, 1690, 1720 cm^-1. RMN (CDC1₃) Si 1,43 (m, 12H), 1,91 (m,2H), 2,23 (m,

2H), 3,50 (m, 1H), 3,65 (m, 1H), 3,82 (m, 1H), 3,92 (m, 1H), 4,42 (m,2H), 7,08 (m, 1H), 7,19 (m, 2H), 7,41 (m, 1H), 7,62 (m, 1H), 8,86 (s, 1H). Análise calculada para C₂₇H₂₈ ^FN3O₆.1/3 H₂0: C, 62,90; H, 5,60; N, 8,15. Determinado C, 62,83; H, 5,35; N, 8,26.

Passo 2: hidrocloreto do ácido l-ff3R)-3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-guinor2,3,4-ij][1,4]benzoxazina-5-carboxílico

Desprotegeu-se uma suspensão do composto do Passo 1 como no Exemplo 18, Passo 2, para se obter o composto do título, p.f.>285°C; EM M/Z: 382 (M+H); IV (KBr) 1630, 1720 cm”¹; RMN (DMSO) Si 2.03 (m, 2H), 2,26 (m, 2H), 3,78 (m, 2H) 3,88 (m, 2H),

73051

4832.PG.01

3,95 (Itl, ÍH), 7,35 (m, 3H), 7,55 (m, ÍH) , 8,04 (m, 1H) ÍH). Análise calculada para C₂oH₁₇C1FN30₄.3/4 H₂o: C, 4,32; N, 9,74. Determinado C, 55,67; H, 4,00; N, 9,67.

, 9,13 (S, 55,68; H,

Exemplo 18

Hidrocloreto do ácido l-f (3S)-3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-metil-4-oxo-4H-quino Γ 2,3, 4-i j1Γ1,41benzoxazina-5-carboxílico

Passo 1: l-((3S)-3-N-t-butoxicarbonilaminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-me_til-4-oxo-4H-quinor2,3,4-ij 1 [1,4]benzoxazina-5-carboxilato de etilo

Seguindo o procedimento descrito na Patente U.S. N² 4 607 032, fez-se reagir o l,2-difluoro-9-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][1,4]benzoxazina-5-carboxilato de etilo (do Exemplo 6, Passo 1), com (3S)-3-(N-t-butoxicarbonilamino)pirrolidina (obtida em American Tokyo Kasei, Div. of Tokyo Kasei Kogyo, K.K.) para se obter o composto do título, p.f. 187-190°C; EM M/Z: 524 (M+H); IV (CDC13): 1630, 1690, 1710 cm^-1? RMN(CDC13) 6: 1,45, (m, 12H), 1,91 (m, 2H), 2,23 (m, 2H), 2,45 (s, 3H),3,50 (m, ÍH), 3,63 (m, ÍH), 3,82 (m, ÍH), 3,93 (m, ÍH), 4,42 (m, 2H), 6,90 (m, 1H), 6,95 (m, ÍH), 7,30 (m, ÍH), 7,63 (m, ÍH), 8,84 (s, ÍH). Análise calculada para ^c28^H30^FN3°6 · V2 H₂0: C, 63,14; H, 5,87; N, 7,89. Determinado C, 62,90; H, 5,48; N, 7,92.

Passo 2: hidrocloreto do ácido l-((3S)-3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-metil-4-oxo-4H-quino Γ 2.3,4-ij1Γ1.4Ibenzoxazina-S-carboxílico

Agitou-se a 90°C, durante 64 horas, uma suspensão de 4,50 g do composto do Passo 1 em 450 ml de HCl 1 M e 45 ml de etanol. Arrefeceu-se a mistura reaccional à temperatura do frigorífico (5’C), durante 4 horas. Removeu-se o produto por filtração, lavou-se com água e metanol e secou-se obtendo-se 3,5 g do composto do título como um sólido amarelo, p.f. >285°C. EM M/Z: 396 (M+H); IV (KBr) 1620, 1720 cm^-1; RMN (DMSO) 5: 2,02 (m, 2H) ,

73051

4832.PG.01

2,30 (m, 5H), 3,76 (m, 2H), 3,88 (m, 2H), 3,95 (m, ÍH), 7,08 (m, ÍH), 7,17 (m, ÍH), 7,53 (m, ÍH), 7,92 (m, ÍH), 9,11 (s, ÍH). Análise calculada para C₂₀H₁₉C1FN₃0₄.1/2 H₂O: C,57,20; H, 4,50; N, 9,53. Determinado C, 57,47; H, 4,32; N, 9,40.

Exemplo 19

Hidrocloreto do ácido l-((3R)-3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-metil-4-oxo-4H-quinor2,3,4-ij]Γ1.4]benzoxazina-5-carboxílico

Passo 1: 1-f(3R)-3-fN-t-butoxicarbonilaminopirrolidin-l-il)-2-f luoro-9-metil-4-oxo-4H-cfuino Γ 2.3,4-ii 1 Γ1.41 benzoxazina-5-carboxilato de etilo

Seguindo o procedimento descrito na Patente U.S. N² 4 607 032, fez-se reagir o l,2-difluoro-9-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][1,4]benzoxazina-5-carboxilato de etilo (do Exemplo 6, Passo 1) com (3R)-3-(N-t-butoxicarbonilamino)pirrolidina (obtida em American Tokyo Kasei, Div. of Tokyo Kasei Kogyo, K.K.) para se obter o composto do título, p.f. 194-5°C; EM M/Z: 524 (M+H); IV (CDC13): 1630, 1690, 1710 cm¹; RMN (CDCl3) 6: 1,45, (m, 12H), 1,91 (m, 2H), 2,23 (m, 2H), 2,35 (s, 3H),3,50 (m, ÍH), 3,64 (m, ÍH), 3,82 (m, ÍH), 3,92 (m, ÍH), 4,42 (m, 2H), 6,89 (m, ÍH), 6,95 (m, ÍH), 7,30 (m, ÍH), 7,62 (m, ÍH), 8,83 (S, ÍH). Análise calculada para C₂₈H₃₀FN₃O₆.3/4 H₂0: C, 62,62; H, 5,91; N, 7,83. Determinado C, 62,46; H, 5,92; N, 7,73.

Passo 2: hidrocloreto do ácido l-((3R)-3-aminopirrolidin-l-il)-2-f luoro-9-metil-4-oxo-4H-quino [2,3,4-i~i 1Γ1.41 benzoxazina-5-carboxilico

Seguindo o procedimento do Exemplo 18, passo 2, removeram-se o grupo protector e o grupo éster do composto do passo 1, anterior, para se obter o composto do título, p.f. >280°C. EM M/Z: 396 (M+H); IV (KBr) 1620, 1710 cm^-1; RMN (TFA) d: 2,51 (m, 3H), 2,68 (m, 2H), 4,13 (m, ÍH), 4,54 (m, 4H), 7,23 (m, ÍH), 7,30 (m, ÍH), 7,78(m, ÍH), 7,94 (m, ÍH), 9,50 (m, ÍH). Análise calculada para C₂iH₁₈FN₃O₄: C, 58,54; H, 4,21; N, 9,75.

73051

4832.PG.01

Determinado C, 58,11; H, 4,50; N, 9,62.

Exemplo 20

Hidrocloreto do ácido l-(3-alanilaminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-8-metil-4-oxo-4H-guinor2,3,4-ij1Γ1,41benzoxazina-5-carboxílico

1,36 (m, 3H), ÍH), 3,75 (m, (m, 2H), 7,42

Hidrocloreto

Utilizando os processos descritos no Exemplo 9, passo 1, o hidrocloreto do ácido l-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-8-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][l,4]benzoxazina-5-carboxílico foi convertido em ácido 1-(3-N-t-butoxicarbonilalanilamino-pirrolidin-l-il)-2-fluoro-8-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][1,4]-benzoxazina-5-carboxílico, p.f. 217°C (dec); EM M/Z: 567 (M+H); IV (CDC1₃) 1630, 1670, 1710 cm^-1; RMN (DMSO) 6: 1,40 (m, 3H), 1,42 (m, 9H), 2,05 (m, 2H), 2,20 (m, 2H), 2,38 (m, 3H), 3,64 (m, 2H), 4,03 (m, 2H), 4,20 (m, ÍH), 5,02 (m, ÍH), 7,03 (m, 2H), 7,23 (m, 2H), 7,50 (m, ÍH), 8,86 (m, ÍH), 14,86 (m, ÍH).

Seguindo o procedimento do Exemplo 8, passo 2, removeu-se o grupo protector boc para se obter hidrocloreto do ácido l-(3-alanilaminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-8-metil-4-oxo-4H-quino-[2,3,4-ij][1,4]benzoxazina-5-carboxílico, p.f. 210-212°C; EM M/Z: 467 (M+H); IV (KBr) 1630, 1680, 1720 cm^-1; RMN (DMSO) δ:

1,90 (m, 2H), 2,18 (m, 2H), 2,34 (m, 3H), 3,53 (m, 2H), 3,84 (rn, 2H), 3,96 (m, ÍH), 4,34 (m, ÍH), 7,13 (m, ÍH), 7,83 (m, ÍH), 8,86 (m, ÍH), 9,05 (m, ÍH).

Exemplo 21 do ácido l-(3-aminopirrolidin-l-il)-8-t-butil-2-fluoro-4-oxo-4H-guino-r2,3,4-ij1Γ1,4)benzoxazina-5-carboxílico

Passo 1: 3-f5—t—butil-2-h.idroxianilino)-2—f2,3,4,5-tetrafluorobenzoil)acrilato de etilo

Preparou-se o composto do título seguindo o procedimento do Exemplo 15, passo 1, e substituindo o 6-amino-2,4-dimetilfenol por 2-amino-4-t-butilfenol. RMN (DMSO) 6: (2 conjuntos de sinais)

73051 4832.PG.01

1,05 (S, 3H), 1,29 (S, 9H), 4,03 (q, 2H) , 6,91 (d, 1H) , 7,13 (m, 1H), 7,56 (d, 2H), 8,76 (d, 1H), 10,39 (s, 1H), 12,68 (d, 1H).

Passo 2: 8-t-butil-l,2-difluoro-4-oxo-4H-quinor2,3,4-ij1Γ1,41benzoxazina-5-carboxilato de etilo

Seguindo os processos do Exemplo 15, passo 2, fez-se reagir o 3-(5-t-butil-2-hidroxiamino)-2-(2,3,4,5-tetrafluorobenzoil)acrilato de etilo do passo 1 e obteve-se o produto do título. RMN (DMSO) 6:1,32 (t, 3H), 1,36 (s, 9H), 4,30 (q, 2H), 7,25 (d, 1H), 7,36 (m, 1H), 7,60 (m, 1H), 7,79 (d, 1H), 9,17 (s, 1H).

Passo 3: l-(3-N-t-butoxicarboniamino)pirrolidin-l-il)-8-t-butil-2-fluoro-4-oxo-4H-quino Γ 2,3,4-i j1Γ1,41-benzoxazina-5-carboxilato de etilo

Seguindo o procedimento do Exemplo 15, passo 4, fez-se reagir o 8-t-butil-l,2-difluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][1,4]benzoxazina-5-carboxilato de etilo, do passo 2 anterior, com 3-(t-butoxicarbonilamino)pirrolidina para se obter o composto do título, p.f. 120-124°C. EM M/Z: 566 (M+H). RMN (CDC1₃) 6: 1,37 (s, (H), 1,46 (t, 3H), 1,48 (S, 9H) , 1,92 (Itl, 1H) , 2,24 (Hl, 1H) , 3,48 (m, 1H), 3,63 (m, 1H), 3,72 (m, 1H), 3,93 (m, 1H), 4,33 (m, 1H), 4,45 (mq, 2H), 4,82 (m, 1H), 7,01 (d, 1H), 7,24 (dd, 1H),

7,37 (d, 1H), 7,63 (d, 1H), 8,90 (s, 1H). Análise calculada para ^C31^36^fn3°6^{: C/} 65,82; H, 6,42; N, 7,43. Determinado C, 65,66; H, 6,45; N, 7,38.

Passo 4: hidrocloreto do ácido l-(3-amino)pirrolidin-l-il)-8-t-butil-2-fluoro-4-oxo-4H-quino Γ 2,3,4-i,ή 1Γ1.41benzoxazina-5-car

-boxílico

Hidrolisou-se o l-(3-N-t-butoxicarbonilamino)-pirrolidin-lil)-8-t-butil-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][1,4]benzoxazina-5-carboxilato de etilo, do passo 3 anterior, pelo procedimento do Exemplo 18, passo 2, obtendo-se o composto do título, p.f.263266°C. EM M/Z: 438 (M+H). RMN (DMSO) 6: 1,36 (S, (Η), 2,04 (m, 1H), 2,27 (m, 1H), 3,77 (m, 2H), 3,88 (m, 2H), 3,96 (m, 1H), 7,27

73051

4832.PG.01

(d, 1H), 7,43 (ddm 1H), 7,53 (d, 1H), 7,87 (d, 1H), 9,28 (s, 1H). Análise calculada para C₂₀H₂₅C1FN₃0₄.H₂O: C,58,59; H, 5,53; N, 8,54. Determinado C, 58,45; H, 5,28; N, 8,39.

Exemplo 22

Hidrocloreto do ácido l-(3-aminopirrolidin-l-il)-2,3-difluoro-4-oxo-4H-quinoΓ2,3,4-ij1Γ1,41benzoxazina-5-carboxílico

Passo 1: 2.3,4,5,6-pentafluorobenzoildiacetato de etilo

Adicionaram-se 50 ml de etanol e 1 ml de CC1₄ a 10 g (o,423 mol) de pó de magnésio, seguindo-se a adição, gota a gota, sob condições anidras, de uma solução de 67,7 g (0,423 mol) de éster dietílico do ácido malónico em 210 ml de etanol. Agitou-se, depois, a mistura reaccional à temperatura ambiente, durante a noite, seguindo-se aquecimento em condições de refluxo, durante 4 horas. Após arrefecimento, removeu-se o solvente sob pressão reduzida e o etanol residual foi removido por destilação azeotrópica com tolueno (3x), redissolvendo-se, a seguir, o resíduo em 400 ml de éter seco.

Adicionou-se , gota a gota, a esta solução arrefecida a 0°C uma solução de 100 g ( 0,434 mol) de cloreto de pentafluorobenzoilo em 120 ml de éter. Depois de se agitar durante 1 hora no frio, agitou-se, a seguir, a mistura reaccional à temperatura ambiente, durante a noite. Verteu-se, depois, a mistura em 600 ml de solução de ácido sulfúrico a 10%. Removeu-se a camada orgânica e extractou-se a solução aquosa com cloreto de metileno. Secou-se o solvente orgânico combinado sobre sulfato de magnésio anidro, filtrou-se e evaporou-se, secando-se, depois, adicionalmente, o resíduo por adição e separação por destilação, de dicloreto de etileno , clorofórmio e cloreto de metileno obtendo-se 150,73 g do diéster como um líquido dourado.

Passo 2; 2,3,4,5,6-pentafluorobenzoilacetato de etilo

Adicionaram-se a 150 g (0,423 mol) do diéster do passo 1,

73051

4832.PG.01

150 ml de água e 0,680 g de ácido p-toluenossulfónico e aqueceu-se a mistura em refluxo durante 3 horas. Após arrefecimento, extractou-se a mistura com clorofórmio, que foi lavada com solução de carbonato de potássio a 5% e seca sobre sulfato de magnésio. Removeu-se o solvente e secou-se o resíduo, adicionalmente, por adição e separação por destilação, de dicloreto de etileno, clorofórmio e cloreto de metileno, seguindo-se secagem adicional sob vácuo obtendo-se 95,96 g do composto do título como um líquido dourado. EM M/Z: 300 (M+NH₄). Os outros espectros confirmaram a estrutura.

Passo 3: 4-(3-acetamidopirrolidin-l-il)-2,3,5,6-tetrafluorobenzoilacetato de etilo

Adicionaram-se a 2,62 g (20,4 mmol) de 3-acetamidopirrolidina, dissolvida em 50 ml de piridina e arrefecida a 0°c, 2,06 g (20,4 mmol) de trietilamina e 5,24 g (18,6 mmol) de 2,3,4,5,6-pentafluorobenzoilacetato de etilo, do passo 2 anterior. Agitou-se a solução a 0°C, durante l hora e depois à temperatura ambiente, durante a noite. Removeu-se o solvente por evaporação sob vácuo e dissolveu-se o resíduo em clorofórmio, que foi lavado com HC1 0,5 N e com solução de carbonato de potássio a 5%. Secou-se a camada orgânica sob sulfato de magnésio, filtrouse e evaporou-se. Secou-se o resíduo ainda mais adicionado-se, e separando-se por destilação, dicloreto de etileno, clorofórmio e cloreto de metileno, seguindo-se secagem adicional sob vácuo. Lavou-se o resíduo cristalino com hexano e secou-se obtendo-se

6,8 g do composto do título como um sólido cor de couro, p.f. 90-92°C. EM M/Z: 391 (M+H). IV (CDC1₃) 1635, 1680, 1740 cm^-1. RMN (CDC1₃) 6: 1,26 (m, 3H), 2,00 (m, 5H), 2,22 (m, 2H), 3,54 (m, 1H), 3,77 (m, 2H), 3,85 (m, 1H), 3,98 (m, 1H), 4,22 (m, 2H), 5,75 (m, 1H). Análise calculada para C₁₇H₁₈F₄N₂O₄: C, 52,31; H, 4,65; N, 7,18. Determinado C, 52,47; H, 4,67; N, 7,33.

Passo 4: 3-(2-hidroxianilino)-2-(4-(3-acetamidopirrolidin-l-il)-2,3,5,6-tetrafluorobenzoil)acrilato de etilo

Adicionaram-se, a 6,82 g (17,5 mmol) do beta-cetoéster do

73051

4832.PG.01

passo 3, 3,89 g (26,1 mmol) de ortoformato de trietilo e 8,00 g (78 mmol) de anidrido acético e agitou-se a mistura reaccional a 130°C, durante 2,5 horas. Removeram-se, depois, os materiais voláteis sob pressão reduzida e adicionou-se tolueno que foi destilado do resíduo para a remoção de quaisquer reagentes remanescentes. Dissolveu-se, a seguir, o resíduo seco em 150 ml de cloreto de metileno e adicionou-se 1,91 g (17,5 mmol) de oaminofenol. Agitou-se a mistura reaccional durante a noite. Removeu-se o solvente sob pressão reduzida e lavou-se o resíduo com éter, filtrou-se e secou-se, obtendo-se 7,59 g do composto do título como um sólido amarelo, p.f. 221°C (dec). EM M/Z: 510 (M+H). IV (KBr) 1623, 1643, 1684 cm^-1; RMN (DMSO) d: 1,10 (m, 3H), 1,82 (m, 3H), 2,05 (m, 2H), 3,64 (m, 2H), 3,80 (m, 4H), 4,04 (m, 2H), 6,95 (m, IH), 7,10 (m, IH), 7,58 (m, IH), 8,16 (m, IH), 8,65 (m, IH), 10,60 (m, IH) , 12,73 (m, IH). Análise calculada para C₂₄H₂₃F₄N₃O₅: C, 56,58; H, 4,55; N, 8,25. Determinado C, 56,30; H, 4,63; N, 8,22.

Passo 5: l-(3-(N-acetamido)pirrolidin-l-il)-2,3-difluoro-4-oxo-4H-quinoí2.3,4-ΐή1ri.41benzoxazina-5-carboxilato de etilo

Suspendeu-se uma porção de 6,76 g (48,9 mmol) de carbonato de potássio em 100 ml de DMF seca e adicionaram-se 7,55 g (14,8 mmol) do derivado acrilato do passo 4. Agitou-se a suspensão à temperatura ambiente, durante a noite, e a seguir a 100°C, durante 2 horas. Diluiu-se a suspensão com clorofórmio e removeram-se os materiais insolúveis por filtração. Removeram-se os solventes por co-destilação com tolueno e lavou-se o resíduo com água, redissolveu-se, a seguir, em clorofórmio e lavou-se com HC1 0,5 N e solução de carbonato de potássio a 5%. Secou-se a camada orgânica sobre sulfato de magnésio e removeu-se o solvente por co-destilação com cloreto de metileno sob pressão reduzida. Lavou-se o resíduo com éter e secou-se obtendo-se 5,68 g do produto do título como um sólido amarelo, p.f. 246-8°C. EM M/Z: 470 (M+H); IV (KBr) 1640, 1670, 1723 cm¹; RMN (CDCl₃) d: 1,38 (m, 3H), 2,10 (m, 3H), 2,13 (m, 3H), 3,62 (m, 2H), 4,02 (m, 2H), 4,33 (m, 2H), 4,62 (m, IH), 6,88 (m, IH) 6,95 (m, IH), 7,10 (m, IH), 7,20 (m, IH), 7,53 (m, IH), 8,20 (m, IH). Análise calculada

73051

4832.PG.01 para ^C24^H21^F2^N3°5.1/2 H₂O: 0,60,25; H, 4,63; N, 8,78. Determinado C, 60,34; H, 4,32; N, 8,72.

Passo 6: hidrocloreto do ácido l-f3-aminopirrolidin-l-il)-2,3-difluoro-4-oxo-4H-guinor2,3,4-ij1Γ1,41benzoxazina-5-carboxílico

Adicionaram-se, a uma amostra de 3,03 g (6,45 mmol) do éster protegido do passo 5, 300 ml de HCl 2 N e agitou-se a mistura a 90 °C, durante 66 horas. Após arrefecimento, diluiu-se a solução com uma pequena quantidade de água e etanol. Removeram-se, a seguir, o solventes sob vácuo, adicionaram-se e, destilaram-se etanol e metanol, ao resíduo para remoção da água e do HCl. Após secagem obtiveram-se 2,18 g do composto do título como um sólido cor de laranja, p.f. >280°C. EM M/Z: 400 (M+H); IV (KBr) 1640, 1720 cm^-1; RMN (DMSO) d: 2,05 (m, 2H), 2,26 (m, 2H), 3,32 (m, 2H), 4,0 (m, 1H), 7,27 (m, 2H), 7,38 (m, 1H), 7,92 (m, 1H), 8,38 (m, 2H), 9,03 (s, 1H). Análise calculada para C₂oH₁₆ClF₂N₃04.1/2 H₂O C, 54,00; H, 3,85; N, 9,45. Determinado C, 53,67; H, 3,60; N, 9,30.

Exemplo 23

Hidrocloreto do ácido 2,3-difluoro-l-(3-norvalilaminopirrolidin-l-il)-4-oxo-4H-quinor2,3,4-ij1[1,41benzoxazina-5-carboxílico

Passo 1: ácido l-(t-N-butíloxicarbonil-norvalilaminopirrolidin-l-il)-2,3-difluoro-4-oxo-4H-quinor2,3,4-ij1Γ1.41benzoxazina-5-carboxílico

Seguindo o procedimento do Exemplo 8, substituindo o hidrocloreto do ácido l-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-guino[2,3,4-ij][l,4]benzoxazina-5-carboxílico do Exemplo 8 pelo hidrocloreto do ácido l-(3-aminopirrolidin-l-il)-2,3-difluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][1,4]benzoxazina-5-carboxílico, preparado no Exemplo 22 anterior, preparou-se o composto protegido por boc do título, p.f. 219°C (dec). EM M/Z: 599 (M+H). IV (KBr) 1635, 1730 cm^-1; RMN (CDCI3) d: 0,95 (m, 3H), 1,42 (m, 9H), 1,82 (m, 2H), 2,13 (m, 2H), 3,75 (m, 2H), 4,10 (m, 2H), 4,60

73051

4832.PG.01

.....

(m, 1H), 5,12 (m, 1H), 7,11 (m, 2H), 7,33 (m, 2H), 8,78 (m, 1H),

14,7 (m, 1H). Análise calculada para C₃₀H₃₂F₂N₄O₇*l/2 H₂O: C, 59,30; H, 5,47; N, 9,22. Determinado C, 59,33; H, 5,25; N, 9,28.

Passo 2: hidrocloreto do ácido 2,3-difluoro-1-(3-norvalilaminopirrolidin-l-il)-4-oxo-4H-quinor2,3,4-ij 1Γ1,41benzoxazina-5-carboxílico

Hidrolisou-se e converteu-se o composto do passo 1 no sal de HC1, pelo procedimento do Exemplo 8, passo 2. p.f. 203-5°C. EM M/Z: 499 (M+H); IV (KBr) 1635, 1680, 1720 cm^-1; RMN (CD₃OD) d: 0,95 (m, 2H), 1,00 (m, 3H), 1,45 (m, 2H), 1,83 (m, 2H), 2,05 (m,lH), 2,26 (m, 1H), 3,70 (m, 1H), 3,85 (m, 2H), 4,10 (m, 2H), 4,48 (m, 2H), 7,12 (m, 1H), 7,20 (m, 1H), 7,33 (m, 1H), 7,60 (m, 1H), 8,92 (m, 1H).

Exemplo 24

Hidrocloreto do ácido 2-fluoro-l-((3R)-3-norvalilaminopirrolidin-1-il)-4-oxo-4H-quino Γ 2,3,4-ii1Γ1,41benzoxazina-5-carboxílico

Passo 1: ácido l-((3R)-t-N-butiloxicarbonil-norvalilaminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-quinor2,3,4-ιή1Γ1,41ben2oxazina-5-carboxílico

Seguindo o procedimento do Exemplo 8, substituindo o hidrocloreto do ácido l-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][1,4]benzoxazina-5-carboxílico do Exemplo 8, pelo hidrocloreto do ácido l-((3R)-3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][1,4]benzoxazina-5-carboxílico, preparado no Exemplo 17 anterior, preparou-se o composto protegido por boc, do título, p.f. 262-4°C (dec). EM M/Z: 581 (M+H). IV (KBr) 1630, 1710 cm^-1; RMN (DMSO) d: 0,85 (m, 3H) , 1,27 (m, 2H), 1,36 (m, 9H), 1,50 (m, 2H) , 1,85 (m, 2H), 2,11 (m, 2H), 3,53 (m, 1H), 3,90 (m, 3H), 4,32 (m, 1H), 6,80 (m, 1H), 7,27 (m, 1H), 7,36 (m, 1H), 7,50 (m, 1H), 8,00 (m, 1H), 8,15 (m, 1H),

9,10 (m, 1H), 14,94 (m, 1H) . Análise calculada para

73051

4832.PG.01 ^C30^H33^FN4°7·¹/^{3 H}2^{0: C}> 61,42; H, 5,78; N, C, 61,57; H, 5,72? N, 9,53.

Passo 2: hidrocloreto do ácido 2-fluoro-1-((3R)-3-norvalilaminopirrolidin-l-il)-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ii1Γ1.4lbenzoxazina-5-carboxílico

Hidrolisou-se e converteu-se o composto do passo 1 no sal de HC1, pelo procedimento do Exemplo 8, passo 2. p.f. 198-200°C. EM M/Z: 481 (M+H); IV (KBr) 1630, 1680, 1720 cm^-1; RMN (DMSO) d: 0,90 (m, 3H), 1,34 (m, 2H), 1,70 (m, 2H) , 1,90 (m, 1H), 2,18 (m, 1H), 2,18 (m, 1H), 3,70 (m, 1H), 3,60 (m, 1H) 3,75 (m, 2H), 3,92 (m, 1H), 4,03 (m, 1H), 4,36 (m, 1H), 7,33 (m, 1H), 7,48 (m, 1H) , 8,00 (m, 1H), 8,95 (m, 1H), 9,10 (m, 1H). Análise calculada para ^C25^H26^C1FN4°5·^η2^{0: c}· 56,12; H, 5,27; N, 10,47. Determinado C, 56,11; H, 5,10? N, 10,28.

Exemplo 25

Hidrocloreto do ácido 2-fluoro-l-((3S)-3-norvalilaminopirrolidin-1-ϊ1)-4-οχο-4Η-απίηοΓ2,3,4-ii1[1,4lbenzoxazina-5-carboxílico

Passo 1: ácido 1-((3S)-t-N-butiloxicarbonil-norvalilaminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-guino[2.3,4-ii1Γ1.41benzoxazina-5-carboxílico

Seguindo o procedimento do Exemplo 8, passo 1, substituindo o hidrocloreto do ácido l-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][l,4]benzoxazina-5-carboxílico do Exemplo 8 pelo hidrocloreto do ácido 1-((3S)-3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-guino[2,3,4-i j][1,4]benzoxazina-5-carboxílico, preparado no Exemplo 17 anterior, preparou-se o composto protegido por boc, do título, p.f. 235°C (dec). EM M/Z: 581 (M+H). IV (KBr) 1630, 1680, 1720 cm¹; RMN (DMSO) d: 0,81 (rn, 3H), 1,13 (m, 2H), 1,36 (m, 9H) , 1,46 (m, 2H), 1,90 (m, 2H) ,

2,10 (m, 2H), 3,50 (m, 1H), 3,74 (m, 1H), 3,90 (m, 3H), 4,30 (m, 1H), 6,80 (m, 1H), 7,25 (m, 1H), 7,35 (m, 1H), 7,47 (m, 1H), 8,00 (m, 1H), 8,13 (m, 1H), 9,08 (m, 1H), 14,92 (m, 1H). Análise

73051

4832.PG.01 calculada para C₃qH₃₃FN₄O₇.1/2 Η₂Ο: C, 61,11; H,

Determinado C, 61,07; H, 5,69; N, 9,49.

Passo 2; hidrocloreto do ácido 2-fluoro-l-f(3S)-3-norvalilaminopirrolidin-l-il)-4-oxo-4H-quinor2,3,4-ij1Γ1.41benzoxazina-5-carboxílico

Hidrolisou-se e converteu-se o composto do passo 1 no sal de HCl, pelo procedimento do Exemplo 8, passo 2. p.f. 210-2°C. EM M/Z: 481 (M+H); IV (KBr) 1630, 1680, 1720 cm^-1; RMN (DMSO) d: 0,82 (m, 3H), 1,28 (m, 2H), 1,65 (m, 2H), 1,96 (m, 1H), 2,15 (m, 1H), 3,53 (m, 1H), 3,74 (m, 2H), 3,95 (m, 1H), 4,34 (m, 1H), 7,25 (m, 2H), 7,34 (m, 1H), 7,48 (m, 1H), 8,01 (m, 1H), 8,90 (m, 1H) ,

9,10 (m, 1H). Análise calculada para C₂5H₂gClFN₄O₅.H₂0: C, 56,12; H, 5,27; N, 10,47. Determinado C, 56,11; H, 5,10; N, 10,28.

Exemplo 26

Hidrocloreto do ácido 2-fluoro-9-metil-l-((3R)-3-norvalilaminopirrolidin-l-il)-4-oxo-4H-quinor2,3,4-ij1Γ1,41benzoxazina-5-carboxílico

Passo 1: ácido l-((3R)-t-N-butiloxicarbonil-norvalilaminopirrolidin-l-il)-2-f luoro-9-metil-4-oxo-4H-quinor2,3,4-i~i 1Γ1,4]benzoxazina-5-carboxílico

Seguindo o procedimento do Exemplo 8, substituindo o hidrocloreto do ácido l-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][l,4]benzoxazina-5-carboxílico do Exemplo 8, pelo hidrocloreto do ácido l-((3R)-3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-9-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][1,4]benzoxazina-5-carboxílico, preparado no Exemplo 19 anterior, preparou-se o composto protegido por boc, do título, p.f. 220°C (dec). EM M/Z: 595 (M+H). IV (CDC1³) 1630, 1670, 1710 cm¹; RMN (CDC1₃) d: 0,96 (m, 3H), 1,43 (m, 12H), 1,85 (m, 2H), 2,13 (m, 2H), 2,35 (m, 3H), 3,70 (m, 2H), 4,03 (m, 1H), 4,18 (m, 1H), 4,60 (m, 1H), 5,13 (m, 1H), 6,83 (m, 1H), 6,93 (m, 1H), 7,16 (m, 1H), 7,39 (m, 1H), 8,83 (m, 1H), 14,93 (m, 1H). Análise calculada para C₃₁H₃₅FN₄O₇.1/3

73051

4832.PG.01 itfá:

H₂0: C, 61,98; H, 5,98; N, 9,33. Determinado C, 62,00; H, 5,89; N, 9,41.

Passo 2: hidrocloreto do ácido 2-fluoro-9-metil-l-(f3R)-3-norvalilaminopirrolidin-l-il)-4-oxo-4H-quino Γ 2,3,4-ij1Γ1,41benzoxazina-5-carboxílico

Hidrolisou-se o composto protegido por boc, do passo 1, e converteu-se no sal de HC1 pelo procedimento do Exemplo 8, passo 2.

Exemplo 27

Hidrocloreto do ácido l-(3-aminopirrolidin-l-il)-8-etilsulfonil-2-fluoro-4-oxo-4H-quinoΓ2,3,4-ij1Γ1.4lbenzoxazina-5-carboxílico

Passo l: ácido 1,2-dif luoro-8-etilsulf onil-4-oxo-4H-quino Γ.2.3,4-ii1Γ1,41benzoxazina-5-carboxílico

Preparou-se o composto do título, seguindo os procedimentos do Exemplo 2 e 3, substituindo a 2-hidroxi-5-anilina do Exemplo 2 pelo 2-amino-4-etilsulfonilfenol e substituindo o material de partida do Exemplo 3 pelo produto resultante, p.f. >290°C; EM M/Z: 436 (M+H); IV (KBr) 1630, 1710 cm^-1; RMN (DMSO) d:l,15 (m, 3H), 1,32 (m, 3H), 4,31 (m, 2H), 3,45 (m, 2H), 7,53 (m, 1H), 7,65 (m, 1H), 7,76 (m, 1H), 8,35 (m, 1H), 9,18 (s, 1H). Análise calculada para ^c20^H15^F2^°6·¹⁷³ H₂0: C, 54,42; H, 3,58; N, 3,17. Determinado C, 54,54; H, 3,44; N, 3,46.

Passo 2: l-(3-(t-butiloxicarbonilamino)pirrolidin-l-il)-8-etilsulfonil-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij1Γ1,41benzoxazina-5-carboxilato de etilo

Preparou-se o composto do título seguindo o procedimento do Exemplo 15, passo 4, substituindo a benzoxazina do Exemplo 15 pelo ácido 1,2-difluoro-8-etilsulfonil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][l,4]benzoxazina-5-carboxílico do passo 1, anterior, p.f.132-5°C; EM M/Z: 602 (M+H). IV (KBr) 1620, 1700, 1720 cm^-1; RMN (CDC1₃) d:

73051

4832.PG.01

2H), 3,51 (m, 1H), 3,68 (m, 1H), 3,85 (m, 1H), 3,95 (m, 1H) 4,45 (Itl, 2H), 7,20 (m, 1H), 7,62 (m, 1H), 7,72 (m, 1H), 7,78 (m, 1H) , 8,78 (m, 1H). Análise calculada para C₂gH₃₂FN₃O₅S. 1./2 H₂O: C, 57,03; H, 5,45; N, 6,88. Determinado C, 56,90; H, 5,28; N, 6,78.

Passo 3: hidrocloreto do ácido l-(3-aminopirrolidin-l-il)-8-etilsulfonil-2-fluoro-4-oxo-4H-quinor2,3,4-ij 1 Γ1,4'Ibenzoxazina-5-carboxílico

Hidrolisou-se e converteu-se o composto protegido por boc, do passo 2, no sal de HCl, pelo procedimento do Exemplo 18, passo 2. p.f. 222-5°C. EM M/Z: 474 (M+H). IV (KBr) 1630, 1720 cm¹; RMN (DMSO) d: 1,15 (m, 3H), 2,05 (m, 2H), 2,25 (m, 2H), 3,50 (m, 2H), 3,78 (m, 2H), 3,90 (m, 1H), 4,00 (m, 1H), 7,75 (m, 2H), 7,85 (m, 1H), 8,45 (m, 1H), 9,20 (m, 1H). Análise calculada para ^C22^H21^FN3°6^S’^H2^{O; C}' ⁵⁰'^{04? H}' ⁴'³⁹'* ^N' 7,96. Determinado C, 49,97; H, 4,20; N, 7,61.

Exemplo 28

Hidrocloreto do ácido 8-etilsulfonil-2-fluoro-l-(3-norvalilaminopirrolidin-l-il)-4-oxo-4H-quinor2,3,4-ij1Γ1,41benzoxazina-5-carboxílico

Passo 1: ácido 1-ft-N-butiloxicarbonil-norvalilaroinopirrolidin1-il)-2-fluoro-8-etilsulfonil-4-oxo-4H-quino Γ 2,3,4-ij 1Γ1.41benzoxazina-5-carboxílico

Seguindo o procedimento do Exemplo 8, passo 1, substituindo o composto de benzoxazina do Exemplo 8, pelo hidrocloreto do ácido 1-(3-aminopirrolidin-lil)-8-etilsulfonil-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][1,4]benzoxazina-5-carboxílico do Exemplo 27 preparou-se o composto protegido por boc, do título, p.f. 223°C (dec). EM M/Z: 474 (M+H). IV (KBr) 1630, 1720 cm^-1; RMN (DMSO) d: 0,83 (m, 3H), 1,15 (m, 3H), 1,27 (m, 2H), 1,35 (m, 9H), 1,47 (m, 2H), 1,87 (m, 2H), 2,10 (m, 2H), 3,46 (m, 2H), 3,51 (m, 1H) ,

73051

4832.PG.01

3,77 (m, ÍH), 3,87 (m, ÍH), 3,97 (m, ÍH), 6,78 (m, ÍH), 7,45 (m, ÍH), 7,51 (m, ÍH), 7,81 (m, ÍH) , 8,15 (m, ÍH) , 8,42 (m, ÍH) , 9,27 (m, ÍH), 14,82 (m, ÍH). Análise calculada para C₃₂H₃₇FN₄O₉.H₂O: C, 57,13; H, 5,54; N, 8,33. Determinado c, 57,02; H, 5,39;

N, 8,19.

Passo 2: hidrocloreto do ácido 8-etilsulfonil-2-fluoro-1-(3-norvalilaminopirrolidin-l-il)-4-oxo-4H-quino Γ2,3,4-ii1Γ1,41benzoxazina-5-carboxílico

Preparou-se o composto do título seguindo o procedimento de Exemplo 8, passo 2, substituindo o composto protegido por boc do Exemplo 8 pelo composto do passo 1, anterior, p.f.218-20C. EM M/Z: 573 (M+H). IV (KBr) 1630, 1680, 1720 cm¹; RMN (DMSO) d: 0,85 (m, 3H), 1,15 (m, 4H), 1,30 (m, 2H), 1,67 (m, 2H), 1,92 (m, 2H), 2,15 (m, ÍH), 3,50 (m, 2H), 3,55 (m, ÍH), 3,75 (m, 2H), 3,95 (m, ÍH), 4,04 (m, ÍH), 4,36 (m, ÍH), 7,52 (m, 2H), 8,55 (m, ÍH), 8,98 (m, ÍH), 9,30 (m, ÍH). Análise calculada para ^c27^H30^clFN4°7^{S: c}> ⁵³/²⁴' ^H' 4,96; N, 9,20. Determinado C, 53,01; H, 5,02; N, 8,76.

Exemplo 29

Sal trifluoroacetato de 1-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-5-(1-morfolinocarbonil)-4-oxo-4H-quinor2,3,4-ii1n.4]benzoxazina

Passo 1: 1,2-difluoro-5-(1-morfolinocarbonil)-4-oxo-4Hquinor2,3,4-ii1Γ1,41benzoxazina

Dissolveram-se 0,281 ml (3,2 mmol) de morfolina em 10 ml de cloreto de metileno à temperatura ambiente em azoto seco. Adicionaram-se gota a gota, a seguir, 1,6 ml (3,2 mmol) de trimetilalumínio e agitou-se a mistura durante 30 min. Dissolveuse uma amostra de 1 g (2,9 mmol) de 1,2-difluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][l,4]benzoxazina-5-carboxilato de etilo, do exemplo 3, em 25 ml de cloreto de metileno e adicionou-se à primeira solução e agitou-se à temperatura ambiente, durante a noite. Parou-se a reacção com HC1 0,1 M e a mistura foi

4832.PG.01 extractada com cloreto de metileno. Secou-se a camada orgânica e removeu-se o solvente obtendo-se o composto do título como um sólido.

Passo 2: sal trifluoroacetato de l-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-5-(l-morfolinocarbonil)-4-oxo-4H-quinor2,3,4-ii1Γ1, 41benzoxazina

Preparou-se o composto do título, como descrito em J. Heterocvcl. Chem., 24:453 (1987), substituindo o l,2-difluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][l,4]benzoxazina-5-carboxilato de etilo dessa reacção pela amina do passo 1, anterior. Dissolveu-se o composto do título em ácido trifluoroacético e removeu-se o excesso de solvente originando-se o composto do título na forma do sal, como um sólido amarelo, p.f. >270°C; EM M/Z: 451 (M+H); IV (KBr) 1630, 1710 cm^-1; RMN (DMSO) d: 2,00 (m, 1H), 2,56 (m, 1H), 3,28 (m, 2H) , 3,57 (m, 4H), 3,63 (m, 4H), 3,69 (m, 1H), 3,78 (m, 1H), 3,88 (m, 1H), 7,17 (m, 1H), 7,23 (d, 2H), 7,35 (m, 1H), 7,90 (d, 1H), 8,24 (s, 2H), 8,70 (s, 1H) .

Exemplo 30

Hidrocloreto de l-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-quinor2,3,4-ij1Γ1,41benzoxazina-5-fN-2,4.difluorofenil)carboxamida

Passo 1: 1,2-difluoro-4-oxo-4H-quino Γ 2,3,4-ii1Γ1,41benzoxazina-5(N-2,4-difluorofenil)carboxamida

Dissolveu-se 2,4-difluoroanilina (0,34 ml, 3,2 mmol) em ml de cloreto de metileno à temperatura ambiente, em azoto seco. Adicionou-se, a seguir, gota a gota, 1,6 ml (3,2 mmol) de trimetilalumínio e agitou-se a mistura durante 30 min. Dissolveuse uma amostra de lg (2,9 mmol) de l,2-difluoro-4-oxo-4Hquino[2,3,4-ij][1,4]benzoxazina-5-carboxilato de etilo, do exemplo 3, em 25 ml de cloreto de metileno e adicionou-se à primeira solução e agitou-se, à temperatura ambiente, durante 20 horas. Recolheu-se o produto precipitado, lavou-se com cloreto de metileno e etanol e secou-se obtendo-se 0,56 g do composto do

73051

4832.PG.01 título como um sólido amarelo claro.

Passo 2: hidrocloreto de l-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-quinoΓ2,3,4-ij1Γ1,41benzoxazina-5-(N-2,4-difluorofenil)carboxamida

Preparou-se o composto do título, como descrito em J. Heterocvcl. Chem.. 24:453 (1987), substituindo o l,2-difluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][1,4]benzoxazina-5-carboxilato de etilo dessa reacção, pela amina do passo 1, anterior. Dissolveu-se o produto em ácido clorídrico e removeu-se o excesso de solvente originando-se o composto do título na forma do sal, como um sólido amarelo, p.f. >270°C; EM M/Z: 493 (M+H); IV (KBr) 1520, 1620, 1680 cm·¹; RMN (DMSO) d: 2,04 (m, ÍH) , 2,26 (m, ÍH) , 3,22 (m, ÍH), 3,41 (m, ÍH), 3,72 (m, ÍH), 3,86 (m, 2H), 7,10 (m, ÍH), 7,23 (d, ÍH), 7,32 (m, ÍH), 7,37 (m, ÍH), 7,46 (d, ÍH), 7,84 (d, ÍH), 8,48 (m, ÍH), 8,57 (s, ÍH), 9,08 (s, ÍH).

Exemplo 31

Hidrocloreto do ácido l-((2S,4S)-4-amino-2-metilpirrolidin-l-il)-8,10-dimetil-2-fluoro-4-oxo-4H-cfuinoΓ2,3,4-ii 1Γ1,41benzoxazina-5-carboxílico

Passo 1: hidrocloreto de (2S,4S)-4-acetamido-2-metilpirrolidina

Dissolve-se (2S, 4S)-4-acetamido-l-(t-butoxicarbonil)-2-metilpirrolidina, preparado como descrito por Rosen, T., et al. . J. Med. Chem.. 31, 1598-1611 (1988), em 30 ml de HCl 4 N em dioxano e agitou-se à temperatura ambiente durante 24 horas para remoção do grupo boc. Remove-se o solvente por evaporação obtendo-se o sal hidrocloreto deste composto.

Passo 2: (2S.4S)-4-acetamido-l-benzil-2-metilpirrolidina

Suspendeu-se o hidrocloreto de (2S,4S)-4-acetamido-2-metilpirrolidina, do passo anterior, em cloreto de metileno, adicionam-se trietilamina e brometo de benzilo e aquece-se a

73051

4832.PG.01 mistura em refluxo. Obtém-se o produto após lavagem e evápbração do solvente.

Passo 3: hidrocloreto de f2S,4S)-4-amino-l-benzil-2-metilpirrolidina

Remove-se o grupo acetilo do (2S,4S)-4-acetamido-l-benzil-2-metilpirrolidina por aquecimento com HC1 6 N. A remoção do solvente origina o produto sólido.

Passo 4: (2S,4S)-l-benzil-4-t-butoxicarbonilamino-2-metilpirrolidina

Tratou-se o hidrocloreto de (2S,4S)-4-amino-l-benzil-2-metilpirrolidina com trietilamina e dicarbonato de di-t-butilo para proteger o grupo 4-amino.

Passo 5: (2S.4S)-4-t-butoxicarbonilamino-2-metilpirrolidina

Remove-se o grupo benzilo protector da (2S,4S)-l-benzil-4-t-butoxicarbonilamino-2-metilpirrolidina por hidrogenólise em metanol com Pd/C a 10%, obtendo-se o composto do título.

Passo 6: ácido l-((2S,4S)-4-t-butoxicarbonilamino-2-metilpirrolidin-l-il)-8.10-dimetil-2-fluoro-4-oxo-4H-quino Γ 2,3,4-ij1Γ1,41benzoxazina-5-carboxilico

Preparou-se o composto do título seguindo o procedimento do Exemplo 15, Passo 4, mas substituindo a 3-(tbutoxicarbonilamino)pirrolidina por (2S,4S)-4-t-butoxicarbonilamino-2-metilpirrolidina e fazendo-a reagir com ácido 1,2-difluoro-8,10-dimetil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][1,4]benzoxazina-5-carboxílico.

73051

4832.PG.01

Passo 7: hidrocloreto do ácido l-(f2S,4S)-4-amino-2-metil-pirrolidin-l-il)-8,10-dimetil-2-fluoro-4-oxo-4H-quinoΓ 2,3,4-ii1-Γ1.41-benzoxazina-5-carboxílico

Desprotege-se o ácido 1-((2S,4S)-4-t-butoxicarbonil-amino-2-metilpirrolidin-l-il)-8,10-dimetil-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][1,4]benzoxazina-5-carboxílico, do passo anterior, pelo procedimento do Exemplo 8, Passo 2, e isola-se o produto do título como o sal.

Exemplo 32

Hidrocloreto do ácido 1-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-8.9-metilenodioxi-4-oxo-4H-quinor2,3, 4-ii 1 Γ1,41benzoxazina-5-carboxílico

Passo 1: 1,2-dif luoro-8,9-metilenodioxi-4-oxo-4H-quino Γ2,3,4-ii 1 Γ1.41benzoxazina-5-carboxilato de etilo

Preparou-se o composto do titulo seguindo os procedimentos dos Exemplos 2 e 3, substituindo a 2-hidroxi-5-nitroanilina do Exemplo 2 pelo 2-amino-4,5-metilenodioxifenol (preparado pelo processo de D. G. Orphanos e A. Taurins Canadian J. Chem. 44. 1875-9, (1966)) e substituindo o material de partida do Exemplo 3 pelo produto resultante. EM M/Z: 388 (M+H). RMN (CDCl₃) d: 1,43 (m, 3H), 4,43 (m, 2H), 6,09 (s, 2H), 6,72 (s, 1H), 7,00 (s, 1H), 7,80 (m, 1H), 8,80 (s, 1H).

Passo 2: l-(3-(t-butiloxicarbonilamino)pirrolidin-l-il)-2-fluoro-8,9-metilenodioxi-4-oxo-4H-quinor2.3, 4-ii 1 Γ1,4 lbenzoxazina-5-carboxilato de etilo

Preparou-se o composto do titulo seguindo o procedimento do Exemplo 15, passo 4, substituindo a benzoxazina do Exemplo 15 pelo 1,2-difluoro-8,9-metilenodioxi-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][l,4]benzoxazina-5-carboxilato de etilo, do passo 1 anterior, p.f. 206-9C. EM M/Z: 555 (M+H); IV (KBr) 1620, 1720 cm¹; RMN (CDClg) d: 1,44 (m,3H), 1,48 (S, 9H), 1,92 (m, 1H), 2,22 (m, 1H),

73051 4832.PG.01

3,48 (m, 1H) , 3,62 (m, 1H), 3,78 (m, 1H), 3,87 (m, 1H), 4,32 (m, 1H), 4,43 (q, 2H), 4,93 (m, 1H), 6,05 (s, 2H), 6,6 (s, 1H), 6,91 (S, 1H), 7,63 (d, 1H, J=13 HZ), 8,67 (s, 1H).

Passo 3: hidrocloreto do ácido l-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-8,9-metilenodioxi-4-oxo-4H-guinoΓ2,3,4-ii]Γ1,4]benzoxazina-5 -carboxi lico

Hidrolisou-se o composto protegido por boc,do passo 2, e converteu-se no sal de HC1 pelo procedimento do Exemplo 8, passo 2, p.f.>270°C; EMM/Z: 426 (M+H); IV (KBr) 1620, 1720 cm¹; RMN (DMSO) d: 2,04 (m, 1H), 2,27 (m, 1H), 3,84 (m, 5H), 6,15 (s, 2H), 7,10 (s, 1H), 7,48 (d, 1H, J=13 Hz), 7,82 (s, 1H), 8,35 (br S, 3H), 9,00 (s, 1H). Análise calculada para C₂₁H₁₇C1FN₃O₆,H₂O: C, 52,56; H, 3,57; N, 8,76. Determinado C, 52,39; H, 3,29; N, 8,43.

Exemplo 33

Hidrocloreto do ácido l-((2S,4S)-4-amino-2-metilpirrolidin-l-il)-2-fluoro-8-metil-4-oxo-4H-guino Γ 2,3,4-ii 1 -Γ1.41-benzoxazina-5-carboxílico

Preparou-se o composto do titulo por repetição do Exemplo 31, substituindo o ácido l,2-difluoro-8,10-dimetil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][l,4]benzoxazina-5-carboxílico pelo ácido 1,2-difluoro-8-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][1,4]benzoxazina-5-carboxílico.

Exemplo 34

Hidrocloreto do ácido l-((2S,4S)-4-amino-2-metilpirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-guino Γ 2,3,4-ij1-Γ1.41-benzoxazina-5-carboxílico

Preparou-se o composto do titulo repetindo o Exemplo 31, substituindo o ácido l,2-difluoro-8,10-dimetil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][l,4]benzoxazina-5-carboxílico pelo ácido 1,2-

73051

4832.PG.01

-difluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij][l,4]benzoxazina-5-carboxílico.

Exemplo 35 l-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-8,9-roetilenodioxi-4-oxo-4H-guinor2,3,4-ii1ri,41benzoxazina-5-carboxilato de etilo

Preparou-se o composto do titulo hidrolisando o grupo boc protector do l-(3-(t-butiloxicarbonilamino)pirrolidin-l-il)-2-fluoro-8,9-metilenodioxi-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij] [1,4]benzoxazina-5-carboxilato de etilo do Exemplo 32, passo 2, anterior, com ácido trifluoroacético, p.f. 205°C (dec). EM M/Z: 454 (M+H); IV (KBr) 1620 , 1690, 1720 cm^-1; RMN (CDCl₃) d: 1,43 (m, 3H), 1,76 (m, 1H), 2,15 (m, 1H), 3,40 (m, 1H), 3,69 (m, 2H), 3,85 (m, 2H), 4,42 (m, 2H), 6,04 (S, 2H), 6,58 (s, 1H), 6,92 (s, 1H), 7,60 (s, 1H), 8,65 (s, 1H). Análise calculada para C₂₃H₂₀FN₃O₆: C,60,93; H, 4,45; N, 9,27; F, 4,19. Determinado C, 60,18; H, 4,43; N, 9,13; F, 4,54.

Exemplo 36

Ácido 3-amino-l-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-quinor2,3,4-ii1[1,4lbenzoxazina-5-carboxílico

Passo 1: 1,2-metoxietoximetoxianilina

Fez-se reagir 2-nitrofenol com cloreto de metoxietoxirnetilo na presença de uma base, por exemplo N,N-diisopropiletilamina, obtendo-se l-metoxietoximetoxi-2-nitrobenzeno. Hidrogena-se este composto com hidrogénio gasoso na presença de um catalisador, como níquel , paládio, platina, ou quimicamente com , por exemplo SnCl₂ β etanol, obtendo-se o composto do titulo.

Passo 2: 2-f4-f3-acetamidopirrolidin-l-il)-3-(2-metoxietoximetoxianilino)-2,3,5,6-tetrafluorobenzoil)acrilato de etilo

Faz-se reagir o 4-(3-acetamidopirrolidin-l-il)-2,3,5,6-tetrafluorobenzoilacetato de etilo com 2-metoxietoxi-

73051

4832.PG.01 metoxianilina por um procedimento semelhante ao do Exemplo 22, passo 4, para se preparar o composto do titulo

Passo 3: 7-(3-acetamidonirrolidin-l-il)-5,6-difluoro-l-(2-metoxietoximetoxifenil)-4-oxo-4H-quinolino-3-carboxilato de etilo

Preparou-se o composto do titulo por um procedimento semelhante ao do Exemplo 22, passo 5, cilcizando o 2-(4-(3acetamidopirrolidin-l-il)-3-(2-metoxietoximetoxianilino)-2,3,5,6-tetrafluorobenzoil)acrilato de etilo.

Passo 4: 7-(3-acetamidopirrolidin-l-il)-5-benzilamino-6-fluoro-l-(2-metoxietoxi:metoxifenil)-4-oxo-4H-quinolino-3-carboxilato de etilo

Preparou-se o composto do titulo, fazendo reagir, por um procedimento semelhante ao do Exemplo 22, passo 3, 7-(3-acetamidopirrolidin-l-il)-5,6-difluoro-1-(2-metoxietoximetoxifenil)-4-OXO-4H-quinolino-3-carboxilato de etilo com benzilamina.

Passo 5: 7-f3-acetamidopirrolidin-l-il)-5-acetamido-6-fluoro-l-(2-metoxietoximetoxi£enil)-4-oxo-4H-quinolino-3-carboxilato de etilo

Removeu-se por hidrogenólise o grupo benzilo protector, com hidrogénio na presença de um catalisador de paládio e grupo amino resultante é protegido com um grupo acetilo protector por reacção com anidrido acético em metanol entre 0°C e 50°C.

Passo 6; l-(3-acetamidopirrolidin-l-il)-3-acetamido-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ii1Γ1,41benzoxazina-5-carboxilato de etilo

Desprotege-se o 7-(3-acetamidopírrolidin-l-il)-5-acetamido-6-fluoro-1-(2-metoxietoximetoxifenil)-4-oxo-4H-quinolino-3-carboxilato de etilo na posição fenólica, por hidrólise selectiva com ácido trifluoroacético em cloreto de metileno para se preparar o 7-(3-acetamidopirrolidin-l-il)-5-acetamido-6-fluoro-1-

4832.PG.01

73051 (2-hidroxi-fenil)-4-oxo-4H-quinolino-3-carboxilato de etilo. Cicliza-se, a seguir, este composto por um procedimento semelhante ao do Exemplo 22, passo 5, para se preparar o composto do titulo.

Passo 7: hidrocloreto do ácido 3-amino-l-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-quinor2,3,4-ii1Γ1,41benzoxazina-5-carboxílico

Removem-se os grupos protectores do l-(3-aminopirrolidin-l-il)-3-t-N-butiloxicarbonilamino-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij]-[l,4]benzoxazina-5-carboxilato de etilo por um procedimento semelhante ao do Exemplo 18, passo 2, para se preparar o composto do titulo.

Exemplo 37

Ensaio de citotoxicidade in vitro

Mostrou-se a actividade in vitro do compostos do presente invento usando um ensaio de microtilulação de três dias, para medir a actividade metabólica de células cultivadas, expostas a uma gama de concentrações de droga citotóxica. A actividade metabólica foi medida pela capacidade das células reduzirem o corante de tetrazólio, brometo de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazólio (MTT), a um derivado de formazano corado, quantificável. As células que sobrevivem reduzem o corante MTT. Calcularam-se as concentrações inibitórias que matam 50% das células (IC₅₀). 0 teste estava de acordo com o seguinte protocolo:

dissolveram-se compostos de teste em dimetilsulfóxido (DMSO) e diluíram-se, primeiro com solução equilibrada de sal, de Earle, seguindo-se meio de cultura, até duas vezes a concentração mais elevada do composto a ser testado. A partir desta solução concentrada, prepararam-se, em placas de microtitulação de 96 alvéolos, diluições, em série, de duas vezes, contendo cada alvéolo duas vezes a concentração final desejada do composto. Cada concentração foi testada em triplicado e comparada com controlos em triplicado, isentos de droga.

73051

4832.PG.01

Fizeram-se desenvolver as células no mesmo meio usado para diluir os compostos. Colheram-se as células aderentes por tripsinação de acordo com o seguinte procedimento:

1. Remover o meio por aspiração;

2. Lavar a monocamada celular duas vezes com solução equilibrada de sal, de Earle.

3. Adicionar tripsina (0,05%)/EDTA (0,53 mM). Por cada 25 cm² utilizar aproximadamente 0,2 ml de solução, inclinar para cobrir a monocamada, a seguir, retirar a tripsina deixando apenas uma película fina de solução. Incubar à temperatura ambiente até a monocamada celular se destacar.

4. Quando as células se tiverem destacado, tal como determinado por observação visual e/ou microscópica, adicionar meio contendo soro de vitelo fetal para parar a acção da tripsina e ressuspender as células. Triturar para auxiliar a dissociação dos aglomerados de células.

5. Determinar o número de células por mililitro por contagem electrónica de células (e.g. contador Coulter) ou por mistura de uma aliquota da suspensão de células com Azul de Tripano (0,4% em solução salina normal) e contar as células viáveis usando um hemocitómetro.

Depois de se colher por tripsinação, determinaram-se as contagens de células viáveis e a densidade celular foi ajustada a 25 000 células/ml. Adicionou-se, seguidamente, inoculo (0,1 ml) a cada alvéolo para uma concentração final de 2500 células por alvéolo. A adição do inoculo foi usada para diluir o compostos de teste até a concentração desejada.

As placas de microtitulação foram incubadas durante três dias a 36°C, numa atmosfera humidificada contendo 5% de dióxido de carbono.

Após três dias, adicionaram-se a cada alvéolo das placas de microtitulação, 20 microlitros de MTT 5 mg/ml em solução tamponada por fosfato. As placas de microtitulação foram, a seguir recolocadas no incubador durante duas a quatro horas, para permitir às células sobreviventes a redução do corante. Após esta incubação, o meio e o corante não reduzido foram removidos por aspiração. Adicionou-se DMSO a cada alvéolo para dissolver o produto final ,corado, da redução do corante, insolúvel em água, para medições espectrofotométricas a 570 nm.

Os resultados obtidos mostraram claramente a citotxicidade dos compostos dos Exemplo 5, 6, 7 e 8 contra as linhas celulares de tumor murino e Humano A549, HCT-8, HT-29 e P388-D1, e estão ilustrados na Tabela 1. (A549 é uma linha celular de cancro do pulmão humano; HCT-8 é uma linha celular do cancro do cólon humano; HT-29 é uma linha celular de cancro do cólon humana; e P388-D1 é uma linha celular da leucemia da ratazana).

Tabela 1

Citotoxicidade in vitro (IC₅)contra linhas de células de tumor seleccionadas

Exemplo N®	A549	HCT-8	HT-29	P388-D1
8	0,512	0,075		<0.05
Adriamicina	0,052	0,038		0,016
5	0,13		0,078	0,011
6, passo 2	1,01		0,64	0,65
Adriamicina	0,049		0,031	0,016
6	0,13		0,049	0,067
7	4,1		0,21	0,11
Adriamicina	0,14		0,091	0,010
Os compostos	dos Exemplos	número 4,	6, 8,	9 e 10 foram

testados, adicionalmente, contra as linhas celulares de células de tumor humano e murino A549, HT-29, P388-D1, P388, P388-

73051

4832.PG.01

&

P388-ADR(0,0) P388-ADR(0,1) e B16F10. (P388 é uma linha celular de leucemia de ratazana semelhante à P388-D1, mas passada em animal (animal-passaged); P388-ADR (0,0) é uma variante de P388 resistente à adriamicina, cujo inoculo é cultivado em meio isento de droga; P388-ADR (0,1) é uma variante de P388 resistente à adriamicina, cujo inoculo é cultivado em meio com 0,1 mcg.ml de adriamicina;e B16F10 é um melanoma de ratinho). Os resultados são apresentados na Tabela 2; como se mostra na Tabela, os compostos do presente invento são agentes citotóxicos eficazes mesmo contra a linha celular resistente à adriamicina P388-ADR.

Tabela 2

Citotoxicidade in vitro (IC_5Q) contra linhas celulares de tumor, adicionais

Exemplo #	A549	HT-29	P388-D1	P388 P388-	P388-	B16F10
					-ADR	-ADR
					<0.0?	.<0,1?
ADR8	0,313	0,285	0,0285*	0,0022	2,59	* 1,9	0,005
Ab	0,26	0,10		0,019	0,12	----	0,021
4	0,122	0,0431		0,0384	0,240	—	0,0221
6	0,23	0,076	0,080	0,071	0,20	0,20	0,056
7	4,1	0,20	0,11
8	0,591	0,195		0,0395	0,394	----	0,0271
9	0,23	0,075	0,081	0,062	0,19	0,18	0,048
10	0,187	0,0875		0,108	0,447	....	0,0573
15	0,034	0,015		0,012			0,015
16	0,23	0,055		0,017	0,12		0.018
17	0,042	0,068		0,021	0,10		0,011
18	0,11	0,040		0,047	0,13		0,024
19	0,24	0,052		0,047	0,016		0,049
21	0,247	0,078		0,063			0,045
29	6,0	1.4		0,54	49,4		0,56
30	4,1	1,6		0,60			1,3
32	0,134	0,042		0,022			0,018
35	0,26	0,093		0,034			0,077

Notas a=ADR é adriamicina; os dados apresentados são médias de dois testes, com a excepção dos dados marcados com um *, que são dados de testes únicos.

b=Composto A é ácido l-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-ij ] [l,4]benzoxazina-5-carboxílico (da Pa-

73051 tente U.S. N= 4 607 032, Exemplo 5).

4832.PG.01

Exemplo 38

Actividade antitumoral in vivo

As actividades in vivo do composto do Exemplo 8 e do ácido 1-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-[2,3,4-i,j][1,4]benzoxazina-5-carboxílico ( preparado como descrito na Patente U.S. número 4 607 032) foram evidenciadas usando a linha tumoral ascítica de leucemia P388. Antes do teste, propagou-se a P388, intraperitonealmente, em ratinhos DBA/2, fêmea. Os tumores ascíticos foram injectados intraperitonealmente em ratinhos ^B6^D2^Fl' f®^{mea a 111113} concentração de 10⁶ células por ratinhos. Os ratinhos foram tratados com agentes antitumorais administrados uma vez por dia durante cinco dias consecutivos, sendo o

5-fluoro-uracilo usado como um controlo positivo.

Todas as drogas foram administradas intraperitonealmente em dextrose aquosa a 5% ou noutro diluente adequado. A eficiência da droga for determinada pelo prolongamento da sobrevivência. O tempo de sobrevivência foi calculado como %T/C, a razão percentual da média dos tempos de sobrevivência médios de teste (T) e de controlo (C). Os compostos com valores de %T/C superiores a 125 são considerados como tendo actividade significativa. A actividade antitumoral dos dois compostos no modelo da leucemia sistémica, P388 é ilustrado na Tabela 3, abaixo.

(segue Tabela 3)

73051 4832.PG.01

Tabela 3

Actividade in vivo Contra o Tumor	Sistémico P388
Exemplo NB	Dose (mq/kcr)	Tempo Médio de Vida (%T/C)
Aa	50	180
	25	170
	12,5	165
	6,25	160
5-fluoro-uracilo	20	160
8	31,25	63,6
	15,62	209,1
	7,81	200,0
	3,9	177,3
5-fluoro-uracilo	20	186,67

Nota:

a=A é ácido l-(3-aminopirrolidin-l-il)-2-fluoro-4-oxo-4H-[2,3,4-ij][l,4]benzoxazina-5-carboxílico.

composto A e o composto do Exemplo 8 foram, também, testados contra tumores sólidos, nomeadamente carcinoma de Lewis do pulmão, por um lado, e adrenocarcinoma C-26 do cólon e carcinoma M5076 do ovário, por outro. 0 carcinoma de Lewis do pulmão foi inoculado subcutaneamente nos flancos de ratinhos no dia 0. o composto em teste foi administrado intraperitonealmente (IP) do dia 1 ao dia 9 num total de nove injecções. Os tumores foram medidos no dia 14 e a inibição do peso foi expressa como a razão médio do peso dos tumores tratados (T) e de controlo(C). Os compostos com valores de T/C inferiores ou iguais a 0,4 são considerados como tendo actividade significativa.

No caso do adrenocarcinoma C-26 do cólon, o tumor foi implantado IP nos ratinhos no dia 0. 0 composto a ser testado foi

administrado IP nos dias l, 5 e 9 e o resultado é registado no dia 60. Os compostos com valores de %T/C superiores a 125 são considerados como tendo actividade significativa.

Para o sarcoma M5076 do ovário, o tumor sólido foi implantado subcutaneamente nos ratinhos no dia 0. o composto a ser testado foi administrado IP , começando no dia 1, de dois em dois dias, até ao dia 11. Os compostos com razões T/C dos pesos inferiores ou iguais a 0,40 são considerados terem actividade significativa. A actividade antitumoral do composto do Exemplo 8 e A62176 para tumores sólidos está ilustrada na Tabela 4, abaixo.

J (segue Tabela 4)

φ 73051

4832.PG.01

Ο

-Η

Ο ω

0)

Ρη

Μ ο

§

Pt

Ο

Ό

I I

U I I \ I I

Η| I I

C4	σι	04
04	ν	tO
κ	κ
Ο	Ο	Ο

ο

Η

ω ο

Ό •Η ι-1 Ό ω ω

Φ

Ρ ο

Ό	to
'Φ	Ο
2	Ο-	υ
	to
Ο	2	Η
Ρ		ο\ο
β	Φ
Φ	Ό
Η

Η	Η		σ η
κ	κ.		κ.
ω	00	V	00
ΓΟ	m	ΙΟ
	Η	Η	Η

<ti

I—( 0) Λ (0 +>

(0 μι

Ρ q

ο υ

ο >

•Η >

ω

Ει to

I υ

φ

Ό

U

Η ο\ο

	ΓΩ	σ	κο
σ			*.
	σ\		ο
η	ΚΟ	ιο
Μ·	Η	Η	Η

04	νο	ο	04
			κ
ω	Η	'ί	ιη
ίο		ω	Η
	Η	γΗ	Η

q

-Η

α)

Ό (0 ϋ

-Η >

•Η +>

Ο

Φ

Ό
0
«ti	tfl
β	•Η	υ
Η
PU	S	Η

Η sf *»	θ'	θ' to	ω ι to ι - ι	1 1 1 1 1 1
ο	ο	ο	Ο 1	1 1

I

I

I φ

ΙΩ

Ο α

ιο ιο ο ιη * ο; ΙΟ 04 04

Η ΙΟ

Ο Ο Ο ΙΟ 04 Η =8=

Ο

Η

Φ

X

Η ¢0

73051

4832.PG.01

Claims (6)

1 - Processo de preparação de um composto com a fórmula

OU de um seu sal, éster ou amida farmaceuticamente aceitável, na qual

A é seleccionado de entre o grupo que consiste em (a) O, (b) CH₂ e (c) s;

R¹ é seleccionado de entre o grupo que consiste em (a) hidrogénio e (b) um grupo protector de carboxilo;

R² é seleccionado de entre o grupo que consiste em (a) hidrogénio, (b) alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, (c) alcoxi de 1 a 6 átomos de carbono e (d) sulfo-hidroalquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

R³ é um ou mais grupos seleccionados, independentemente uns dos outros, de entre o grupo que consiste em (a) hidrogénio, (b) halogéneo, (c) nitro, (d) alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, (e) carboxilo, (f) etilenodioxi, (g) ciano, (h) alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, substituído com halogéneo, (i) alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, substituído com hidroxi, (j) um grupo de fórmula -YR⁴' no qual Y é 0 ou S e R⁴ é hidrogénio ou alquilo de 1 a 6 átomos de carbono e (k) uma amina de fórmula -NR⁵R⁶' na qual R⁵ e R⁶ são seleccionados independentemente um do outro de entre hidrogénio e alquilo de 1 a 6 átomos de carbono;

W é seleccionado do grupo que consiste em (a) hidrogénio, (b) alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, (c) amino, (d) halogéneo, (e) alcoxi, (f) hidroxilo, (g) alquilamino e (h) alquilo substituído com halogéneo;

X é seleccionado de entre o grupo que consiste em (a) hidrogénio, (b) halogéneo, (c) alquilo de 1 a 6 átomos de carbono e (d) alquilo de l a 6 átomos de carbono, substituído com

73051

4832.PG.01 r'À··'''.'Ι,.

iidiuyeneu; e

Z é seleccionado de entre o grupo que consiste em (a) piridilo opcionalmente substituído, com a condição de A não ser S, e (b) um heterociclo contendo azoto de fórmula

CH, ,28

CH, nr³⁰r³¹ na qual (i) R²⁷ é seleccionado de entre -CH2-, -CH2-CH2- e -CH2-CH2-CH2-, (ii) R²⁸ é seleccionado de entre hidrogénio, halogéneo, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono substituído com halogéneo, e espirocicloalquilo de 5 a 10 átomos de carbono e (iii) R³⁰ e R³¹ são seleccionados, independentemente um do outro, de entre o grupo que consiste em hidrogénio, acetilo, alquilo de 1 a 6 átomos de carbono e um grupo peptidilo de 1 a 5 aminoácidos ligado ao azoto com uma ligação amida, com as condições de (i) R³⁰ e R³¹ não serem ambos hidrogénio e (ii) quando A for O e R²⁷ for -CH2-CH₂- ou -CH₂-CH₂-CH₂-, R³⁰ e R³¹ serem seleccionados, independentemente um do outro, de entre um grupo peptidilo de 1 a 5 aminoácidos ligado ao azoto com uma ligação amida;

ou, tomados em conjunto com os átomos aos quais eles estão ligados, X e Z formam -OCH₂CH₂O- ou OCH₂O-, com a condição de R² não ser hidrogénio;

caracterizado por se fazer reagir um primeiro reagente de fórmula com um segundo reagente de fórmula ZH, na qual Y é um grupo que se despede halogéneo e A, R¹, R², R³, W, Xe Z são definidos como

73051

4832.PG.01 anteriormente.

2 - Processo de acordo com a reivindicação 1 caracterizado por no composto preparado A ser 0.

3 - Processo de acordo com a reivindicação 1 caracterizado por no composto preparado A ser S.

4 - Processo de acordo com a reivindicação 1 por no composto preparado A ser CH₂· caracterizado

5 - Processo de acordo com a reivindicação 1 caracterizado por se preparar um composto seleccionado de entre o grupo que consiste em:

ácido l-(3-norvalilaminopirrolidin-l-ilo)-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][l,4]benzoxazina-5-carboxílico;

ácido 1-(3-alanilaminopirrolidin-l-ilo)-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]benzoxazina-5-carboxílico;

ácido l-(3-norvalilaminopirrolidin-l-ilo)-2-fluoro-9-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]benzoxazina-5-carboxílico;

ácido l-(3-alanilaminopirrolidin-l-ilo)-2-fluoro-9-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][l,4]benzoxazina-5-carboxílico;

ácido l-(3-aminopirrolidin-l-ilo)-2-fluoro-8-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]benzoxazina-5-carboxílico;

ácido l-(3-norvalilaminopirrolidin-l-ilo)-2-fluoro-8-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]benzoxazina-5-carboxílico;

ácido 1-(3-alanilaminopirrolidin-l-ilo)-2-fluoro-8-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][l,4]benzoxazina-5-carboxílico;

ácido l-(3-aminopirrolidin-l-ilo)-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][l,4]benzotiazina-5-carboxílico;

ácido l-(3-norvalilaminopirrolidin-l-ilo)-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]benzotiazina-5-carboxílico;

ácido 1-(3-alanilaminopirrolidin-l-ilo)-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]benzotiazina-5-carboxílico;

ácido 1-(3-acetamidopirrolidin-l-ilo)-2-fluoro-9-nitro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]benzotiazina-5-carboxílico;

ácido 1—(3-aminopirrolidin-l-ilo)-2-fluoro-9-rnetil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]benzotiazina-5-carboxílico;

73051

4832.PG.01 ácido l-(3-alanilaminopirrolidin-l-ilo)-2-fluoro-9-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]benzotiazina-5-carboxílico;

ácido l-(3-norvalilaminopirrolidin-l-ilo)-2-fluoro-8-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][l,4]benzotiazina-5-carboxílico?

ácido 1-(3-alanilaminopirrolidin-l-ilo)-2-fluoro-8-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][l,4]benzotiazina-5-carboxílico;

ácido l-(3-aminopirrolidin-l-ilo)-2-fluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]benzoxazina-5-carboxílico;

ácido l-(3-acetamidopirrolidin-l-ilo)-2-fluoro-9-nitro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][l,4]benzoxazina-5-carboxílico;

ácido 1—(3-aminopirrolidin-l-ilo)-2,9-difluoro-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][l,4]benzoxazina-5-carboxílico;

ácido 1-(3-aminopirrolidin-l-ilo)-2-fluoro-9-metil-4-oxo-4H-quino[2,3,4-i,j][1,4]benzoxazina-5-carboxílico;

ácido l-(3-aminopirrolidin-l-ilo)-2-fluoro-8-metil-4“OXo-4H-quino[2,3,4-i,j][l,4]benzotiazina-5-carboxílico; e ácido 1H,7H-pirido[3,2,1-de]acridina-3-ona-5-fluoro-6-(3-aminopirrolidin-l-ilo)-2-carboxílico.

6 - Processo de preparação de uma composição farmacêutica com actividade antineoplásica caracterizado por compreender combinar um transportador farmaceuticamente aceitável e uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de acordo com a reivindicação 1.